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毒蕈中毒的机制与治疗进展 被引量:2
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作者 邢茜 陆晓晔 +2 位作者 乔允 黄源 朱长清 《中国急救医学》 CSCD 北大核心 2017年第9期846-850,共5页
毒蕈中毒是威胁人类健康的全球性问题。鹅膏毒肽是引起毒蕈中毒最常见的毒素,致死率极高。鹅膏毒肽的中毒机制主要是其对核糖核酸(RNA)聚合酶Ⅱ活性的抑制。毒蕈中毒的治疗包括支持治疗、毒物清除、药物治疗、肝移植等。毒蕈中毒缺... 毒蕈中毒是威胁人类健康的全球性问题。鹅膏毒肽是引起毒蕈中毒最常见的毒素,致死率极高。鹅膏毒肽的中毒机制主要是其对核糖核酸(RNA)聚合酶Ⅱ活性的抑制。毒蕈中毒的治疗包括支持治疗、毒物清除、药物治疗、肝移植等。毒蕈中毒缺乏高效的解毒药物和治疗手段,仍需要更多的研究与探索。 展开更多
关键词 鹅膏毒肽 RNA聚合酶 青霉素 N-乙酰半胱氨酸 水飞蓟宾
聚合酶Ⅱ转录的sRNA与RNA沉默抑制子对TMV病毒载体表达系统作用的比较
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作者 马婷 张西倩 +2 位作者 丁向真 李志英 王盛 《农业生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期1-9,共9页
聚合酶Ⅱ介导合成的外源短链RNA(short RNA,s RNA)可以竞争性地抑制内源m RNA的核质转运,推测共表达s RNA可以间接地提高病毒载体表达系统的表达效率。为了验证这一假说和评价其应用潜能,本研究采用基因体外合成技术和亚克隆技术,分... 聚合酶Ⅱ介导合成的外源短链RNA(short RNA,s RNA)可以竞争性地抑制内源m RNA的核质转运,推测共表达s RNA可以间接地提高病毒载体表达系统的表达效率。为了验证这一假说和评价其应用潜能,本研究采用基因体外合成技术和亚克隆技术,分别构建了聚合酶Ⅱ转录的拟南芥U6-1 RNA和黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)编码的RNA沉默抑制子(RNA silencing suppressors,RSSs)2b的植物表达载体。以农杆菌渗滤技术,与烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)表达载体共接种寄主植物本氏烟(Nicotiana benthamiana),通过对报告基因绿色荧光蛋白(green fluorescence protein,GFP)的荧光观察,并以Western blot和酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbnent assay,ELISA)测定GFP在烟草中的表达情况,分析s RNA对植物病毒载体表达系统的作用和可能的作用机制。同时通过与RSSs比较,评价s RNA在植物生物反应器中的应用潜能。实验结果表明,聚合酶Ⅱ转录的s RNA能有效地提高TMV病毒载体介导的外源基因在植物中的表达(GFP表达量比对照组高约2.5倍),而且能够显著地降低TMV诱导的病程相关蛋白2(Pathogenesis-related protein 2,PR2)在细胞内的积累水平(PR2表达量比对照组下降约8倍)。推测Ⅱ型启动子转录的s RNA通过竞争性地抑制宿主抵御病毒入侵相关蛋白合成的m RNA核质运转促进病毒RNA介导的外源基因在植物中的表达。此外,Ⅱ型启动子转录的s RNA的作用效果与CMV病毒编码的RNA沉默抑制子2b相当。研究结果为提高病毒载体介导的外源基因在植物中的表达提供了一条可供借鉴的思路。 展开更多
关键词 RNA聚合酶 烟草花叶病毒(TMV) 表达载体 U6核内小RNA RNA转运
整合因子复合体研究进展
3
作者 思兰兰 张红星 周钢桥 《军事医学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期398-402,共5页
整合因子复合体( integrator complex )是一个新近发现的多功能蛋白质复合物,由至少12个进化上保守的亚基( integrator complex subunits , INTS1~INTS12)组成。该复合体能与RNA聚合酶Ⅱ( RNAPⅡ)大亚基的具有重复氨基酸序列的... 整合因子复合体( integrator complex )是一个新近发现的多功能蛋白质复合物,由至少12个进化上保守的亚基( integrator complex subunits , INTS1~INTS12)组成。该复合体能与RNA聚合酶Ⅱ( RNAPⅡ)大亚基的具有重复氨基酸序列的C端相互作用,进而介导小核RNA(small nuclear RNA, snRNA)U1/U2的3′端加工。整合因子复合体还能通过与RNAPⅡ、延伸负调控因子NELF和转录延伸因子Spt5发生相互作用,调控NELF介导的RNAPⅡ的暂停-释放,进而调控mRNA的合成。近年来,有研究陆续报道整合因子复合体还在DNA损伤应答、核周动力蛋白的募集、细胞核内卡哈尔体( Cajal body )的完整性、脂肪细胞的分化成熟、造血、初级纤毛的形成、肿瘤的发生发展和病毒微小RNA( microRNA,miRNA)形成等方面发挥重要作用。该文综述了整合因子复合体的研究进展。 展开更多
关键词 整合因子复合体 RNA聚合酶 小核RNA MRNA转录
利用Ⅱ型启动子转录的U6 RNA提高植物病毒表达载体在植物中表达外源基因的水平 被引量:1
4
作者 高丁梅 马婷 +2 位作者 丁向真 李志英 王盛 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期883-890,共8页
Ⅱ型启动子转录的外源短链RNA可以竞争性抑制细胞内源mRNA的核质转运,因而可能会提高植物RNA病毒载体表达的外源基因在植物中的积累.为了验证这一假说,利用OE-PCR技术合成拟南芥U6-1核内小RNA序列,并构建其Ⅱ型启动子转录的植物表达载体... Ⅱ型启动子转录的外源短链RNA可以竞争性抑制细胞内源mRNA的核质转运,因而可能会提高植物RNA病毒载体表达的外源基因在植物中的积累.为了验证这一假说,利用OE-PCR技术合成拟南芥U6-1核内小RNA序列,并构建其Ⅱ型启动子转录的植物表达载体.以农杆菌渗滤技术,与烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)表达载体共接种寄主植物本氏烟,通过对报告基因绿色荧光蛋白(green fluorescence protein,GFP)的荧光观察,并以Western印迹和ELISA测定GFP在烟草中的表达情况,分析共表达Ⅱ型启动子转录的U6 RNA对外源基因在植物中表达的作用效果.结果表明,共接种Ⅱ型启动子转录的U6 RNA对TMV病毒表达载体表达外源基因的水平有明显的增效作用,推测RNA核质转运干扰是提高外源基因表达的可能机制. 展开更多
关键词 烟草花叶病毒 表达载体 U6核内小RNA RNA核质转运 RNA聚合酶
染色质相互作用研究进展 预览 被引量:1
5
作者 潘有福 《遵义医学院学报》 2014年第5期470-478,共9页
真核生物的染色体如何发生复杂构象变化并组织成复杂的高级结构,仍是一个研究热点。染色体的这些结构特征和构象变化可通过了解染色质位点间的相互作用,即利用染色体(质)构象捕获(3C)及其衍生技术,如4C、5C、Hi-C和ChIA-PET等技术... 真核生物的染色体如何发生复杂构象变化并组织成复杂的高级结构,仍是一个研究热点。染色体的这些结构特征和构象变化可通过了解染色质位点间的相互作用,即利用染色体(质)构象捕获(3C)及其衍生技术,如4C、5C、Hi-C和ChIA-PET等技术来研究。利用这些技术,已得到一些有关染色质相互作用与基因表达调控和细胞核内染色体组织结构的重要信息。如利用ChIA-PET技术,发现雌激素受体、RNA聚合酶Ⅱ、CTCF等一些转录因子都参与了染色质的长程相互作用,并同时在基因组水平鉴定了特定细胞中的一些相应的有调控潜能的DNA元件及其可能的调控基因。利用Hi-C及其他3C衍生技术,不但表明染色体在细胞核内占据着不同的染色体领域,而且发现染色体上有次级结构域如染色体区隔和染色体拓扑联合域。随着相关技术的完善和更多数据的获得,分析和整合这些数据将对生物信息学家提出更高的要求,同时也可以帮助我们更进一步了解染色体三维构象变化在不同环境下的变化规律,以及在基因转录调控、DNA复制和修复等重要过程中的作用。 展开更多
关键词 染色质相互作用 染色体构象捕获 ChIA-PET Hi-C 雌激素受体 RNA聚合酶 CTCF
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表观遗传调控pre—mRNA的选择性剪接 预览 被引量:4
6
作者 赵金璇 王芳 +1 位作者 徐峥嵘 范怡梅 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期248-255,共8页
选择性剪接是真核生物基因表达过程中的关键环节,是蛋白质多样性的主要来源,在生物的分化、发育及疾病的发生中扮演重要角色。传统的选择性剪接调控机制的研究多集中于RNA序列元件及与之相关的一些剪接因子,但近期的突破性研究指出... 选择性剪接是真核生物基因表达过程中的关键环节,是蛋白质多样性的主要来源,在生物的分化、发育及疾病的发生中扮演重要角色。传统的选择性剪接调控机制的研究多集中于RNA序列元件及与之相关的一些剪接因子,但近期的突破性研究指出表观遗传因素在选择性剪接的调控中发挥重要作用。DNA甲基化、染色质结构、组蛋白修饰相互影响并作用于pre-mRNA的选择性剪接,构成一个庞大、复杂的调控网络,表明表观遗传因素不仅决定着基因转录的起始,还影响其转录本剪接的结果。文章综述了近年来pre—mRNA选择性剪接的表观遗传调控的研究进展,探讨了DNA甲基化、染色质结构、组蛋白修饰在pre—mRNA选择性剪接中的可能作用,并展望了其对人类疾病研究所带来的深远影响。 展开更多
关键词 选择性剪接 RNA型聚合酶 DNA甲基化 组蛋白修饰 染色质结构
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调控HIV-1转录和潜伏激活的机制及相关因子
7
作者 Rong-diao LIU Jun WU +1 位作者 Rui SHAO Yu-hua XUE 《浙江大学学报:B卷英文版》 SCIE CAS CSCD 2014年第5期455-465,共11页
(1)反式激活蛋白(Tat)是病毒复制的重要因子,正性转录延伸因子b(P-TEFb)是Tat反式激活HIV-1转录所必需的特异性宿主细胞因子,其活性与HIV-1的转录密切相关。(2)在细胞内,无活性7SK snRNP复合体是功能性有活性P-TEFb的贮存和... (1)反式激活蛋白(Tat)是病毒复制的重要因子,正性转录延伸因子b(P-TEFb)是Tat反式激活HIV-1转录所必需的特异性宿主细胞因子,其活性与HIV-1的转录密切相关。(2)在细胞内,无活性7SK snRNP复合体是功能性有活性P-TEFb的贮存和来源。在特定条件下,7SKsnRNP复合体发生解离并释放出P-TEFb,从而刺激转录延伸。可以说,P-TEFb的活性受到严格的调控,维持着一种动态的平衡。(3)同时,P—TEFb还存在于一个具有超高转录活性的超级延伸复合体(SEC)中。Tat能将含有两个延伸因子P-TEFb和ELL2的SEC复合体募集至HIV-1长末端结构域(LTR),然后众多因子协同作用有效地增强HIV-1的转录作用。(4)溴区包含蛋白4(Brd4)像Tat一样,将P—TEFb募集至众多细胞基因的启动子区域,促进转录。Brd4也可激活基础水平的HIV-1转录,却对依赖Tat的HIV-1转录具有抑制作用,因为Brd4和Tat竞争性地与P-TEFb结合。(5)鉴于Brd4对Tat依赖性H1V-1转录的抑制作用,寻找能够抑制Brd4的小分子药物,激活HIV-1潜伏,结合高效抗逆转录病毒治疗(HAART),使得彻底根除HW-1变成可能。Brd4的抑制剂JQ1就是这样的一种小分子,并且已被证明可以在多种细胞模型中激活HIV-1潜伏。 展开更多
关键词 人类免疫缺陷病毒(HIV-1) 转录延伸 RNA聚合酶 TAT P—TEFb
鹅膏毒肽与RNA聚合酶Ⅱ相互作用的研究进展 预览 被引量:5
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作者 张蕊 图力古尔 《食用菌学报》 北大核心 2012年第2期111-116,F0003共7页
RNA聚合酶Ⅱ是真核生物中最活跃最复杂的RNA聚合酶之一,具有非常重要的生物学功能,而鹅膏(Amanita)毒肽对其活性具有专一的高抑制性,这使鹅膏毒肽与RNA聚合酶Ⅱ相互作用的研究尤为重要。鉴于国内对鹅膏毒肽与RNA聚合酶Ⅱ相互作用的研... RNA聚合酶Ⅱ是真核生物中最活跃最复杂的RNA聚合酶之一,具有非常重要的生物学功能,而鹅膏(Amanita)毒肽对其活性具有专一的高抑制性,这使鹅膏毒肽与RNA聚合酶Ⅱ相互作用的研究尤为重要。鉴于国内对鹅膏毒肽与RNA聚合酶Ⅱ相互作用的研究薄弱,笔者从鹅膏毒肽活性位点的确定、两者相互作用方式、抑制机理及抑制能力等方面进行总结,以期为两者的深入研究提供参考。 展开更多
关键词 鹅膏毒肽 RNA聚合酶 晶体结构 抑制性
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蛋白激酶抑制剂Flavopiridol对流感病毒复制的体外抑制作用 被引量:1
9
作者 汪世雄 张军杰 叶昕 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期1137-1142,共6页
【目的】在细胞水平上研究黄酮类化合物flavopiridol的抗流感病毒效果,初步探索了其抗流感病毒的机制。【方法】首先用Western blot初步检测了在蛋白激酶抑制剂flavopiridol处理下流感病毒NP和M1蛋白的水平,然后通过免疫荧光实验观察了... 【目的】在细胞水平上研究黄酮类化合物flavopiridol的抗流感病毒效果,初步探索了其抗流感病毒的机制。【方法】首先用Western blot初步检测了在蛋白激酶抑制剂flavopiridol处理下流感病毒NP和M1蛋白的水平,然后通过免疫荧光实验观察了宿主细胞中流感病毒vRNP的合成,又利用噬斑实验检测了flavopiridol对病毒复制的影响,最后通过检测flavopiridol处理的宿主细胞内RNA聚合酶Ⅱ的磷酸化状态和病毒各种RNA的合成量,探究了flavopiridol抑制流感病毒复制的机理。【结果】结果表明,flavopiridol在细胞水平上可以显著抑制流感病毒蛋白质和vRNP的合成及病毒的复制,同时flavopiridol也可以抑制宿主RNA聚合酶Ⅱ大亚基CTD结构域七肽重复序列中的2位丝氨酸的磷酸化来抑制聚合酶的转录延伸活性,显著地减少病毒vRNA的合成。【结论】Flavopiridol可以通过抑制宿主细胞RNA聚合酶Ⅱ的转录延伸活性有效地抑制流感病毒的复制。 展开更多
关键词 FLAVOPIRIDOL 流感病毒 RNA聚合酶
小鼠生发泡期卵母细胞成熟过程中转录沉默机制的探讨 被引量:1
10
作者 夏梦 刘明兮 +3 位作者 周涛 何辉 万茹 霍然 《南京医科大学学报:自然科学版》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期956-961,共6页
目的:探讨小鼠生发泡卵母细胞成熟过程中发生大规模转录沉默的机制。方法:选用4~6周龄ICR雌性小鼠,分离生发泡(germinal vesicle,GV)期卵母细胞,运用RNA聚合酶Ⅱ抗体(anti-RNA PolⅡCTD,clone 4H8)及其羧基末端结构域(CTD)基团... 目的:探讨小鼠生发泡卵母细胞成熟过程中发生大规模转录沉默的机制。方法:选用4~6周龄ICR雌性小鼠,分离生发泡(germinal vesicle,GV)期卵母细胞,运用RNA聚合酶Ⅱ抗体(anti-RNA PolⅡCTD,clone 4H8)及其羧基末端结构域(CTD)基团第2位丝氨酸磷酸化的抗体(anti-RNA PolⅡCTD Ser2-P,clone H5)、组蛋白H3K4/H3K9三甲基化的抗体(anti-H3K4me3、anti-H3K9me3)进行免疫荧光染色。观察伴随GV期小鼠卵母细胞染色质构型由非包围核仁(non-surround nucleolus,NSN)型转变为包围核仁(surround nucleolus,SN)型的过程,这两对标记物的表达及分布变化。结果:在NSN型的GV期卵母细胞中,RNA PolⅡCTD Ser2-P于核浆中呈特征性斑块状分布,同时H3K4me3在核浆中也显示强阳性信号;但在SN型卵母细胞中,RNA PolⅡCTD Ser2-P失去特征性分布,转变为核浆中弥漫性分布,H3K4me3的核浆中阳性信号也消失。结论:RNA聚合酶Ⅱ的活性降低及组蛋白修饰状态的改变在小鼠GV期卵母细胞成熟过程的大规模转录沉默中发挥了重要作用。 展开更多
关键词 生发泡卵母细胞 转录沉默 RNA聚合酶 组蛋白H3K4/K9三甲基化
中介体复合物——真核转录调控中的中央控制器
11
作者 汪炜 尹景雯 +1 位作者 刘艾洁 王纲 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2011年第6期597-607,共11页
中介体复合物(Mediator Complex)是由多个在进化上高度保守的蛋白质组成的复合物,它是RNA聚合酶II转录装置中的一个重要辅助因子,是介于转录因子与RNA聚合酶II之间传递信息的桥梁。在哺乳动物细胞中,不同信号转导通路通过激发其特... 中介体复合物(Mediator Complex)是由多个在进化上高度保守的蛋白质组成的复合物,它是RNA聚合酶II转录装置中的一个重要辅助因子,是介于转录因子与RNA聚合酶II之间传递信息的桥梁。在哺乳动物细胞中,不同信号转导通路通过激发其特异控制的转录因子与中介体复合物中特定的组分蛋白发生相互作用,从而调控下游基因的表达。此外,中介体复合物还可以与各种辅因子相互作用,而这些相互作用最终使得中介体复合物可以整合接收到的各种信息并输出为下游基因的激活或沉默,进而控制细胞的增殖、分化及各种生理功能。该文将结合近年来的研究成果,对中介体复合物在真核转录中的调控机制及其生物学功能作一简要综述。 展开更多
关键词 中介体复合物 转录调控 RNA聚合酶:真核生物
新型CDK9小分子抑制剂的设计和发现 预览 被引量:1
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作者 秦立 纪庆 +4 位作者 高瀛岱 刘娟妮 杨铭 邵晓枫 熊冬生 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期 1299-1303,共5页
目的通过同源模建、计算机虚拟筛选和生物活性筛选,寻找新型的CDK9小分子抑制剂。方法采用同源模建方法得到CDK9的三维晶体构象,用DOCK(分子对接)对小分子三维数据库进行虚拟筛选。采用MTT法对挑选出的化合物进行生物活性测定,然后挑... 目的通过同源模建、计算机虚拟筛选和生物活性筛选,寻找新型的CDK9小分子抑制剂。方法采用同源模建方法得到CDK9的三维晶体构象,用DOCK(分子对接)对小分子三维数据库进行虚拟筛选。采用MTT法对挑选出的化合物进行生物活性测定,然后挑选高活性的化合物进行CDK9与小分子之间相互作用的研究,验证化合物对CDK9激酶活性的抑制作用。结果用DOCK程序对三维化合物库虚拟筛选后挑选出得分高的前1000个化合物,按结构差异化分类,最终选择并购买了27个代表性化合物进行进一步生物学活性测定。27个化合物中12个化合物明显抑制肿瘤细胞的增殖,其中1个化合物C-21的半数抑制浓度(IC50)在20μmol.L-1以下。选择C-21类化合物进一步进行研究,结果显示此化合物能够有效抑制各类肿瘤细胞系的增殖。酶学水平研究表明此类化合物能够有效抑制CDK9激酶活性,并在较低浓度范围内呈明显的剂量依赖关系。结论通过同源模建、计算机虚拟筛选、生物活性实验和分子水平研究,得到了一类靶向CDK9的全新的先导化合物。 展开更多
关键词 CDK9 同源模建 小分子抑制剂 RNA POLYMERASE 磷酸化 肿瘤靶点 先导物
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人肝细胞中雌激素受体α基因启动子使用情况的鉴定
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作者 晏泽辉 邓国宏 +3 位作者 谭文婷 刘国栋 但芸婕 王宇明 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第24期2276-2280,共5页
目的鉴定人肝细胞中雌激素受体α(estrogen receptorα,ESR1)基因启动子使用情况。方法常规培养和刺激HepG2和L02细胞,甲醛固定细胞,超声剪切染色质,采用利用PolⅡ CTD末端Ser5特异性抗体进行染色质免疫沉淀(PolⅡ-ChIP),针对文献... 目的鉴定人肝细胞中雌激素受体α(estrogen receptorα,ESR1)基因启动子使用情况。方法常规培养和刺激HepG2和L02细胞,甲醛固定细胞,超声剪切染色质,采用利用PolⅡ CTD末端Ser5特异性抗体进行染色质免疫沉淀(PolⅡ-ChIP),针对文献报道的8个可能启动子区设计引物进行PCR扩增,鉴定ESR1基因启动子的使用情况。结果β-雌二醇刺激不同肝细胞后进行PolⅡ-ChIP发现,HepG2肝癌细胞株中ESR1启动子E1、E2、F沉淀出有PolⅡ的结合的片段,而在L02细胞株中则仅启动子D有PolⅡ的结合的片段沉淀出来。结论不同肝细胞中ESR1的表达受不同的启动子的调控。HepG2肝癌细胞株中ESR1的表达受启动子E1、E2、F调控,而在L02细胞株中ESR1的表达受启动子D调控。 展开更多
关键词 雌激素受体α(ESR1) 启动子 RNA多聚酶 染色质免疫沉淀
RNA聚合酶Ⅱ启动子SMP8在活化肝星状细胞中的活性
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作者 常莹 姜华军 +5 位作者 孙雪梅 艾莉 陈婷 袁顺玉 宋宇虎 林菊生 《中华肝脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期150-151,共2页
我们已往的研究已经证实,RNA聚合酶Ⅲ启动子(pol Ⅲ)载体表达的针对TGF β1的核酶,在体外能有效逆转活化HSC的生物学活性。但TGFD1是广泛存在于各种细胞中,并发挥重要生物学效应的细胞因子,因此不具组织和细胞特异性的pol Ⅲ启动... 我们已往的研究已经证实,RNA聚合酶Ⅲ启动子(pol Ⅲ)载体表达的针对TGF β1的核酶,在体外能有效逆转活化HSC的生物学活性。但TGFD1是广泛存在于各种细胞中,并发挥重要生物学效应的细胞因子,因此不具组织和细胞特异性的pol Ⅲ启动子核酶表达系统,在抑制HSC活化的同时会影响到正常肝细胞或其他细胞的功能,这使得基因治疗肝纤维化变得困难。为达到靶向性治疗肝纤维化的目的,我们探讨了在活化HSC中特异性激活的α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)启动子SMP8的生物学活性,研究其内含子1中CArG[CC(A/T)6GG]顺式作用元件对HSC中SMP8特异性启动子活性的影响,为下一步改造该启动子中的内含子1,使其作为靶向性基因治疗载体的启动子提供实验依据。 展开更多
关键词 肝星状细胞 RNA聚合酶 启动区(遗传学)
基于RNA聚合酶Ⅱ的传染性法氏囊病病毒反向遗传系统的建立 预览
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作者 魏永伟 侯贤宏 +3 位作者 章晓栋 徐弘 吕冬梅 于涟 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期 751-754,共4页
应用重叠PCR法在鸡传染性法氏囊病病毒基因组A、B两节段的5’末端和3’末端分别引入具有自我剪切功能的核酶HamRz和HDV序列,然后分别将含有核酶序列的A、B节段构建到pCI真核载体当中,构建真核载体pCI-ma核pCI-mb。在脂质体介导下,将p... 应用重叠PCR法在鸡传染性法氏囊病病毒基因组A、B两节段的5’末端和3’末端分别引入具有自我剪切功能的核酶HamRz和HDV序列,然后分别将含有核酶序列的A、B节段构建到pCI真核载体当中,构建真核载体pCI-ma核pCI-mb。在脂质体介导下,将pCI-ma和pCI-mb共转染Vero细胞。细胞病变观测、间接免疫荧光试验和分子标记检测证实成功实现了鸡传染性法氏囊病病毒的遗传拯救。 展开更多
关键词 IBDV RNA聚合酶 反向遗传
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Functional implications of C-terminus of TBX5 with high homology to C-terminal domain of yeast DNA-directed RNA polymerase Ⅱ largest subunit
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作者 ZHOU Zhu-ren GONG Li-guo +2 位作者 GENG Wen-qing QIU Guang-rong SUN Kai-lai 《中华医学杂志:英文版》 SCIE CAS CSCD 2008年第8期762-765,共4页
关键词 心手综合症 TBX5基因 计算生物学 聚合酶聚合酶
基因转录与pre—mRNA剪接的偶联蛋白
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作者 步天栩(述杨) 杨洁(审阅) 姚智(审阅) 《医学分子生物学杂志》 CAS CSCD 2008年第3期254-257,共4页
真核基因的表达是一个复杂的过程,包括转录、pre-mRNA剪接、翻译等步骤。其中转录和pre-mRNA的剪接是基因表达中的两个重要环节,它们都要通过复杂的蛋白复合物来执行功能。目前研究发现这两个过程并不是绝对独立的,而是偶联在一起同时... 真核基因的表达是一个复杂的过程,包括转录、pre-mRNA剪接、翻译等步骤。其中转录和pre-mRNA的剪接是基因表达中的两个重要环节,它们都要通过复杂的蛋白复合物来执行功能。目前研究发现这两个过程并不是绝对独立的,而是偶联在一起同时进行的。多种蛋白的偶联作用将二者联系在一起。RNA聚合酶Ⅱ、SKIP、SMN以及新近发现的人类P100蛋白不仅参与基因转录调节,同时它们在剪接加工中也具有相应的作用。 展开更多
关键词 转录 剪接 RNA聚合酶 Ski相互作用蛋白 运动神经元生存蛋白
真核转录的结构生物学——2006年诺贝尔化学奖简介 预览 被引量:1
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作者 胡永林 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第10期 918-921,共4页
用X射线晶体学方法测定的一系列RNA聚合酶Ⅱ复合物结构揭示了真核转录的分子机制.
关键词 真核转录 RNA聚合酶 晶体结构
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RNA聚合酶Ⅱ同BAF复合物和转录因子NF1/CTF之间的联系 预览 被引量:2
19
作者 赵丽辉 姜革强 +2 位作者 周洪雷 邓国忠 王丽 《东北师大学报:自然科学版》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期 103-107,共5页
通过免疫荧光共定位实验,研究了RNA聚合酶Ⅱ的亚基Rpb1,Rpb6,Rpb8与BAF复合物和转录因子NF1/CTF在基因转录活动中的联系.实验证实,RNA聚合酶Ⅱ的亚基Rpb1与BAF复合物有联系,Rpb6与BAF复合物联系不紧密,Rpb6与NF1/CTF联系密切,... 通过免疫荧光共定位实验,研究了RNA聚合酶Ⅱ的亚基Rpb1,Rpb6,Rpb8与BAF复合物和转录因子NF1/CTF在基因转录活动中的联系.实验证实,RNA聚合酶Ⅱ的亚基Rpb1与BAF复合物有联系,Rpb6与BAF复合物联系不紧密,Rpb6与NF1/CTF联系密切,Rpb8与BAF复合物和NF1/CTF有部分联系.免疫沉淀实验也证实RNA聚合酶Ⅱ与BAF复合物和NF1/CTF一同参加了转录起始复合物的形成. 展开更多
关键词 BAF复合物 转录因子NF1/CTF RNA聚合酶
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BAF复合物和转录因子NF1/CTF与RNA聚合酶Ⅱ的联系 预览 被引量:1
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作者 姜革强 邓国忠 王霞 《通化师范学院学报》 2006年第2期 77-79,共3页
通过ELISA实验观察小鼠脾T淋巴细胞和Jurkat细胞经ConA处理后。RAF(hSWI/SNF)复合物、转录因子NFI/CTF、RNA聚舍酶Ⅱ蛋白表达量的变化情况,实验证实,细胞活化后.复合物BAF(hSWI/SNF)、转录因子NF1/CTF、RNA聚合酶Ⅱ的表达发... 通过ELISA实验观察小鼠脾T淋巴细胞和Jurkat细胞经ConA处理后。RAF(hSWI/SNF)复合物、转录因子NFI/CTF、RNA聚舍酶Ⅱ蛋白表达量的变化情况,实验证实,细胞活化后.复合物BAF(hSWI/SNF)、转录因子NF1/CTF、RNA聚合酶Ⅱ的表达发生了变化.表明它们和细胞的转录活动有关. 展开更多
关键词 RAF复合物 NF1/CTF RNA聚合酶
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