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ELISA法检测食蟹猴血浆中rhCNB多肽的方法学评价 预览 被引量:4
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作者 邵继平 张彩云 +5 位作者 胡不为 谢学立 田树红 王日超 黄道隆 符健 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期528-531,共4页
目的:酶联免疫吸附法(ELISA)定量测定食蟹猴血浆中rhCNB多肽的方法学评价。方法:利用双抗体夹心ELISA法,对rhCNB多肽的方法学灵敏度、线性范围、精密度与准确度和回收率进行方法学验证。结果:该方法特异性高,在0.195-12.5 ng/ml的... 目的:酶联免疫吸附法(ELISA)定量测定食蟹猴血浆中rhCNB多肽的方法学评价。方法:利用双抗体夹心ELISA法,对rhCNB多肽的方法学灵敏度、线性范围、精密度与准确度和回收率进行方法学验证。结果:该方法特异性高,在0.195-12.5 ng/ml的线性范围内,线性关系良好,标准曲线方程为Y=15.1X-0.26,R^2=0.996 8,定量下限(LLOQ)为0.195 ng/ml;该方法的批内精密度CV分别为3.55%、1.39%和4.71%;批间精密度CV分别为1.59%、3.2%和3.8%,均〈5%,准确度在91.9%-108.8%之间,方法回收率在88.5%-108.3%之间,〈110%,说明该ELISA方法的准确度较高。符合验证要求。结论:双抗体夹心ELISA法灵敏度高、通量大、重复性、准确度及精密度好,可用于生物样品中rhCNB多肽的定量检测。 展开更多
关键词 酶联免疫吸附法 食蟹猴 rhCNB多肽 方法学评价
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注射用重组人钙调磷酸酶B亚基稳定性的初步研究 预览 被引量:4
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作者 高锦 赵文军 +2 位作者 王艳丽 刘一群 魏群 《中国新药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期 675-678,共4页
目的:对注射用重组人钙调磷酸酶B亚基(rhCNB)的稳定性进行初步研究,以确定其贮藏条件和有效期。方法:采用毛细管区带电泳(CZE),反相高效液相色谱(RP—HPLC),十二烷基磺酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS—PAGE)非还原电泳、蛋... 目的:对注射用重组人钙调磷酸酶B亚基(rhCNB)的稳定性进行初步研究,以确定其贮藏条件和有效期。方法:采用毛细管区带电泳(CZE),反相高效液相色谱(RP—HPLC),十二烷基磺酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS—PAGE)非还原电泳、蛋白质含量测定Bradford法、圆二色谱(CD)、pH值、生物学活性等检测方法,对rhCNB在贮藏温度条件下的稳定性进行了系统研究。结果及结论:3批注射用rhCNB于2℃~8℃贮藏24个月,各项指标:外观、pH值、蛋白含量、纯度、肽图谱、相对分子质量、CD光谱蛋白质二级结构及生物学活性均无明显变化,稳定性好,有效期可暂定为2年。 展开更多
关键词 重组人钙调磷酸酶B亚基(rhCNB) 稳定性 蛋白质二级结构 有效期
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重组人钙调磷酸酶B亚基的毛细管区带电泳分析方法 预览 被引量:1
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作者 高锦 黄晨西 魏群 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期 788-790,共3页
目的:建立毛细管区带电泳(CZE)分离分析重组人钙调磷酸酶B亚基的新方法。方法:用毛细管区带电泳分离模式,采用未涂层熔融石英毛细管50μm×57cm;电泳缓冲液:0.2mol·L^-1 2-吗啉代乙磺酸-0.05mol·L。柠檬酸盐-乙腈(... 目的:建立毛细管区带电泳(CZE)分离分析重组人钙调磷酸酶B亚基的新方法。方法:用毛细管区带电泳分离模式,采用未涂层熔融石英毛细管50μm×57cm;电泳缓冲液:0.2mol·L^-1 2-吗啉代乙磺酸-0.05mol·L。柠檬酸盐-乙腈(5:5:l,pH2.5);分离电压:15kV;柱温:25℃;压力进样5s;检测波长:214nm,进行纯度分析。结果:所建立的CZE分析方法能够将重组人钙调磷酸酶B亚基与未知杂质有效分离,主峰的迁移时间及峰面积的RSD分别为0.31%和1.5%。结论:所建立的毛细管区带电泳方法可以用于重组人钙调磷酸酶B亚基的纯度分析,它具有高效、快速、简便及样品和试剂消耗少等优点。 展开更多
关键词 钙调磷酸酶 毛细管区带电泳分析 B亚基 重组人 纯度分析 电泳缓冲液 分离分析 分离模式 柠檬酸盐 检测波长 未知杂质 电泳方法 乙磺酸 CZE RSD 峰面积
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HPLC和MALDI-TOF-MS法分析重组人钙调磷酸酶B亚基的纯度和肽图谱 预览 被引量:3
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作者 高锦 王艳丽 魏群 《北京师范大学学报:自然科学版》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期 114-119,共6页
用反相高效液相色谱(RP-HPLC)法对重组人钙调磷酸酶B亚基(rhCNB)的纯度和肽图谱进行了测定,以比较不同批次产品的纯度及其一级结构的一致性,对其进行质量控制.并用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)法进行验证.结果... 用反相高效液相色谱(RP-HPLC)法对重组人钙调磷酸酶B亚基(rhCNB)的纯度和肽图谱进行了测定,以比较不同批次产品的纯度及其一级结构的一致性,对其进行质量控制.并用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)法进行验证.结果表明,运用梯度洗脱RP-HPLC法能对样品进行纯度检查和肽图谱分析,测得3批样品纯度均达到98%以上,肽图谱能达到批间一致.同时用MALDI-TOF-MS法测定.纯度结果二者相符,质谱肽图经计算机辅助分析,确证rhCNB一级结构与天然CNB一致.证明该方法灵敏、准确、可靠. 展开更多
关键词 重组人钙调磷酸酶B亚基(rhCNB) 高效液相色谱法 基质辅肋激光解吸电离飞行时间质谱法 纯度 肽图谱
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