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骨碎补总黄酮联合纳米骨材料促进MC3T3-E1细胞的增殖分化 预览
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作者 李晋玉 俞兴 +7 位作者 姜俊杰 徐林 赵学千 孙旗 郑晨颖 白春晓 刘楚吟 贾育松 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2020年第7期1030-1036,共7页
背景:前期研究发现,骨碎补总黄酮可促进纳米骨材料表面MC3T3-E1细胞的成骨分化,其作用机制有待进一步研究。目的:探究骨碎补总黄酮联合纳米骨材料对MC3T3-E1细胞发挥作用的机制。方法:将MC3T3-E1细胞与纳米骨材料共培养,选取100mg/L和25... 背景:前期研究发现,骨碎补总黄酮可促进纳米骨材料表面MC3T3-E1细胞的成骨分化,其作用机制有待进一步研究。目的:探究骨碎补总黄酮联合纳米骨材料对MC3T3-E1细胞发挥作用的机制。方法:将MC3T3-E1细胞与纳米骨材料共培养,选取100mg/L和250mg/L骨碎补总黄酮进行药物干预,以10μg/L转化生长因子β刺激为阳性对照组。分组如下:①正常组;②DKK1组:Wnt通路抑制剂DKK1(0.1mg/L)阻断Wnt/β-catenin信号通路;③DKK1+转化生长因子β组;④DKK1+100mg/L骨碎补总黄酮组;⑤DKK1+250mg/L骨碎补总黄酮组;⑥DKK1+纳米骨+转化生长因子β组;⑦DKK1+纳米骨+100mg/L骨碎补总黄酮组;⑧DKK1+纳米骨+250mg/L骨碎补总黄酮组。在干预24,48 h后收获细胞,免疫荧光双染法观察Wnt/β-catenin通路中Wnt与LRP结合情况,Real-time PCR和Western blot检测β-catenin、LRP5、Gsk-3β、Cyclin D1、RUNX2的表达。结果与结论:①激光共聚焦扫描显微镜下显示DKK1+转化生长因子β组、DKK1+250mg/L骨碎补总黄酮组、DKK1+纳米骨+转化生长因子β组、DKK1+纳米骨+250mg/L骨碎补总黄酮组棕黄色染色较明显,表明Wnt与LRP结合较其他组更好;②Real-time PCR和Western blot结果显示,骨碎补总黄酮可促进β-catenin、LRP5、RUNX2的表达,下调GSK-3β的表达,说明骨碎补总黄酮通过激活经典Wnt/β-catenin信号通路促进成骨细胞增殖分化,且骨碎补总黄酮诱导的基因活化呈剂量依赖性。 展开更多
关键词 骨碎补总黄酮 纳米骨 WNT/Β-CATENIN信号通路 成骨细胞 MC3T3-E1细胞
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microRNA-145在宫颈癌中的表达及其对Wnt/β-catenin信号通路的抑制作用 预览
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作者 王香青 马振军 +1 位作者 包洪云 孔方方 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期117-121,共5页
目的:探讨microRNA-145在宫颈癌中表达的临床意义及其对Wnt/β-catenin信号通路的调控作用。方法:收集2002年1月至2004年12月解放军464医院62例宫颈癌患者的组织标本,采用实时荧光定量PCR方法检测microRNA-145表达并将其分为高表达组和... 目的:探讨microRNA-145在宫颈癌中表达的临床意义及其对Wnt/β-catenin信号通路的调控作用。方法:收集2002年1月至2004年12月解放军464医院62例宫颈癌患者的组织标本,采用实时荧光定量PCR方法检测microRNA-145表达并将其分为高表达组和低表达组,分析其与临床病理参数的关系。将microRNA-145表达质粒和无义对照质粒分别转染入宫颈癌HeLa中,分为过表达microRNA-145组和对照组,采用细胞免疫荧光染色法分析细胞中β-catenin表达定位的变化,双荧光素酶报告系统检测细胞中TCF/LEF转录活性及与Cateninδ-1的直接作用,采用Western blot法检测microRNA-145对Cateninδ-1、C-MYC和CyclinD1表达的影响。结果:microRNA-145低表达组患者的总生存期为(41.28±2.00)个月,高表达组为(46.06±0.95)个月,两者比较差异具有统计学意义(P<0.05),低表达组患者预后较差。过表达microRNA-145组HeLa细胞中的β-catenin主要分布于胞浆,对照组主要位于细胞核和胞浆;过表达microRNA-145组细胞中TCF/LEF转录活性受到抑制,伴随着Cateninδ-1、C-MYC和CyclinD1表达下调,microRNA-145与Cateninδ-1可直接结合发挥作用。结论:microRNA-145可通过与Cateninδ-1直接作用,抑制Wnt/β-catenin信号通路转导,从而发挥抑制宫颈癌演进的生物学功能。 展开更多
关键词 microRNA-145 宫颈癌 WNT/Β-CATENIN信号通路 Β-CATENIN TCF/LEF Cateninδ-1
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β-catenin在硬皮病皮损中的表达及其对人表皮角质形成细胞上皮-间质转化的影响
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作者 刘金娟 杨宏发 +1 位作者 李勇坚 陈艳明 《四川大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期654-659,共6页
目的探讨β-连环蛋白(β-catenin)在系统性硬皮病(SSc)患者皮损中的表达及其对人表皮角质形成细胞上皮-间质转化(EMT)的影响。方法采用免疫组织化学SP法检测45例SSc患者皮损组织及20例健康成人皮肤组织中β-catenin、Snail1、上皮性钙... 目的探讨β-连环蛋白(β-catenin)在系统性硬皮病(SSc)患者皮损中的表达及其对人表皮角质形成细胞上皮-间质转化(EMT)的影响。方法采用免疫组织化学SP法检测45例SSc患者皮损组织及20例健康成人皮肤组织中β-catenin、Snail1、上皮性钙黏附蛋白(E-cadherin)的表达情况。采用不同质量浓度Wnt10b[0(空白对照)、2、4 ng/mL]处理人表皮角质形成细胞HaCaT 48 h,免疫荧光实验检测β-catenin在HaCaT细胞中的定位;实时荧光定量PCR检测HaCaT细胞中Snail1、Snail2 mRNA水平;Western blot法检测HaCaT细胞中β-catenin、波形蛋白(Vimentin)、神经性钙黏附蛋白(N-cadherin)、E-cadherin蛋白表达。结果β-catenin、Snail1、E-cadherin阳性率在SSc患者皮损组织中依次为100%、88.89%和2.22%,在健康成人皮肤组织中依次为0%、10.00%和95.00%,两组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。与空白对照组比较,不同质量浓度Wnt10b(2、4 ng/mL)处理可诱导HaCaT细胞中β-catenin表达上调并促进β-catenin由细胞质向细胞核中转位,同时还可以提高HaCaT细胞中Snail1和Snail2 mRNA表达(P<0.05),并上调Vimentin、N-cadherin蛋白表达和下调E-cadherin蛋白表达(P<0.05)。结论 SSc皮损中存在异常活化的Wnt/β-catenin信号通路及异常表达的EMT相关蛋白,且激活Wnt/β-catenin信号通路可促进HaCaT细胞EMT的发生。 展开更多
关键词 Β-CATENIN 系统性硬皮病 WNT/Β-CATENIN信号通路 上皮-间质转化
WNT/β-catenin信号通路与EMs侵袭及预后的相关性 预览 被引量:1
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作者 张星光 马建婷 +1 位作者 傅云雀 傅家欣 《中国妇幼健康研究》 2019年第3期302-306,共5页
目的通过比较子宫内膜异位症(EMs)患者异位子宫内膜与非EMs患者正常子宫内膜中β-catenin、血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和微血管密度(MVD)的表达情况,同时结合EMs患者手术前后的血清CA125水平,探讨Wnt/β-catenin... 目的通过比较子宫内膜异位症(EMs)患者异位子宫内膜与非EMs患者正常子宫内膜中β-catenin、血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和微血管密度(MVD)的表达情况,同时结合EMs患者手术前后的血清CA125水平,探讨Wnt/β-catenin信号通路在EMs侵袭发生机制中的作用及与EMs复发的相关性。方法收集2012年7月至2014年12月期间在余姚市人民医院妇产科住院并行手术治疗的EMs患者的异位子宫内膜组织标本100例作为观察组,另取同期因其他妇科良性疾病入院治疗患者的正常子宫内膜组织标本100例作为对照组。以免疫组化法检测β-catenin、VEGF、MMP-9和MVD在组织标本中的表达强度;检测EMs患者手术前后血清CA125的水平,结合EMs分期及术后复发情况,分析β-catenin、VEGF、MMP-9和MVD的蛋白表达强度与复发的相关性。结果β-catenin、VEGF、MMP-9和MVD在异位子宫内膜组织和正常子宫内膜组织腺上皮细胞和间质细胞中均有表达,以腺上皮细胞表达为主。观察组β-catenin、VEGF、MMP-9和MVD的平均光密度值均显著高于对照组(t值分别为3.254、5.426、2.537、2.091,均P<0.05),各指标的表达情况与EMs分期均呈显著正相关(r值分别为0.834、0.651、0.588、0.742,均P<0.05)。EMs患者术后血清CA125水平显著低于术前水平(t=8.375,P<0.05),EMs患者手术前、后血清CA125水平均与EMs分期呈显著正相关(r值分别为0.622、0.781,均P<0.05)。手术1年后100例EMs患者复发11例,EMs患者复发例数与EMs分期及β-catenin、VEGF、MMP-9和MVD的表达强度均呈现一定的正相关性,但由于复发例数较少,相关性检验差异未见统计学意义(均P>0.05)。结论β-catenin、VEGF、MMP-9和MVD的高表达与EMs发病相关,表明Wnt/β-catenin信号通路对EMs的迁移和侵袭过程有一定的影响,且影响越大,术后疾病复发的可能性越大。 展开更多
关键词 WNT/Β-CATENIN信号通路 子宫内膜异位症 Β-CATENIN 血管内皮生长因子 基质金属蛋白酶-9 微血管密度 CA125 复发
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Wnt/β-catenin信号通路对小鼠海马神经干细胞的影响 预览
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作者 张先虎 朱俊德 +2 位作者 龙婷婷 王俊婕 康朝胜 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2019年第1期44-49,共6页
目的探讨小鼠海马神经干细胞(NSCs)的体外培养及Wnt/β-catenin信号通路激活剂Wnt3a对体外培养NSCs增殖和分化的影响,以期为脑血管与神经系统疾病的预防与治疗提供新的思路。方法通过无血清悬浮培养法获得新生24h小鼠海马NSCs,光镜观察N... 目的探讨小鼠海马神经干细胞(NSCs)的体外培养及Wnt/β-catenin信号通路激活剂Wnt3a对体外培养NSCs增殖和分化的影响,以期为脑血管与神经系统疾病的预防与治疗提供新的思路。方法通过无血清悬浮培养法获得新生24h小鼠海马NSCs,光镜观察NSCs的形态变化,免疫化学染色法鉴定。将NSCs分为正常对照组(sham组),Wnt3a低剂量组(10μg/ml)、Wnt3a中剂量组(25μg/ml)和Wnt3a高剂量组(50μg/ml)。CCK-8法检测各组NSCs增殖活力;流式细胞仪检测各组NSCs的细胞周期;Westernblot法检测各组中神经元特异烯醇化酶(NSE)与胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达变化。结果成功分离、培养小鼠海马NSCs,光镜下呈典型细胞球,巢蛋白(Nestin)阳性。免疫荧光检测显示,NSCs经诱导分化为NSE和GFAP阳性细胞。CCK-8法检测表明,与sham组比较,随着Wnt3a浓度的增加,相应的培养组细胞在450nm处吸光度值增加,NSCs的增殖活力增加,其促进作用呈剂量依赖性(P<0.05)。流式细胞仪检测显示,与sham组比较,随着Wnt3a浓度的增加,相应的培养组细胞所处G1期比例降低,(S+G2)期比例升高,NSCs的增殖速率提高(P<0.05)。Westernblot显示,与sham组比较,Wnt3a低、中和高剂量组的NSE蛋白相对表达量提高(P<0.05),而GFAP蛋白相对表达量降低(P<0.05)。结论体外成功培养NSCs;Wnt3a激活Wnt/β-catenin信号通路可调控NSCs的增殖,促进其向神经元方向分化,抑制其向星形胶质细胞方向分化。 展开更多
关键词 神经干细胞 WNT/Β-CATENIN信号通路 WNT3A 增殖 分化
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Wnt/β-catenin与BMP-2/Smads信号通路及其相互作用对骨质疏松疾病的影响 预览
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作者 林晓芳 方芳 +4 位作者 彭志强 吴雨伦 陈智能 李桂锦 姚新苗 《浙江中医药大学学报》 CAS 2019年第7期711-717,共7页
[目的]对Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)和骨形态发生蛋白(bone morphogenetic protein,BMP-2)/Smads信号通路在骨代谢中的作用及其在骨质疏松症(osteoporosis,OP)预防和治疗中的作用进行综述,以期为OP相关疾病的预防和治疗提供新思路。[... [目的]对Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)和骨形态发生蛋白(bone morphogenetic protein,BMP-2)/Smads信号通路在骨代谢中的作用及其在骨质疏松症(osteoporosis,OP)预防和治疗中的作用进行综述,以期为OP相关疾病的预防和治疗提供新思路。[方法]通过中国知网、万方、Pubmed等数据库检索近年来国内外关于Wnt/β-catenin与BMP-2/Smads信号通路与OP疾病关系的实验研究文献,总结Wnt/β-catenin与BMP-2/Smads信号通路与OP疾病关系的研究概况。[结果]①Wnt/β-catenin信号传导对于骨骼谱系分化至关重要,可防止成骨细胞转分化为软骨细胞。其中的负调控信号分子可能是治疗骨质疏松症的药物靶点,并成为药物治疗骨质疏松症的手段之一。②BMP-2/Smads信号通路中的信号分子可用于骨质疏松靶标的治疗,但其应用时间、浓度也应再继续深入研究,以期达到更好的治疗骨质疏松的效果。③Wnt/β-catenin和BMP-2/Smads信号通路在许多生物学行为中相互重叠、互补或抑制,提示两种信号途径之间存在着复杂的交联关系。[结论]Wnt/β-catenin和BMP-2/Smads信号通路是调节成骨细胞生长、发育和分化的两个重要信号通路,在成骨细胞分化和骨形成过程中发挥重要作用。Wnt/β-catenin和BMP-2/Smads信号通路在OP的预防、治疗及新药的研制和开发中具有广泛应用前景。 展开更多
关键词 WNT/Β-CATENIN信号通路 BMP-2/Smads信号通路 骨质疏松 相互作用
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龟板提取物调控毛囊干细胞Wnt/BMP信号通路促进大鼠压疮修复
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作者 李春 田瑞敏 +1 位作者 李瑜 钟淑贤 《广州中医药大学学报》 CAS 2019年第1期87-93,共7页
【目的】基于毛囊干细胞(hair follicle stemcells,HFSCs)Wnt/BMP信号通路,观察龟板提取物(CPTE)对大鼠压疮皮肤的修复效果。【方法】(1)体内实验:将40只SD大鼠随机分为模型对照组、溶剂对照组、CPTE高浓度组、CPTE低浓度组,每组10只。... 【目的】基于毛囊干细胞(hair follicle stemcells,HFSCs)Wnt/BMP信号通路,观察龟板提取物(CPTE)对大鼠压疮皮肤的修复效果。【方法】(1)体内实验:将40只SD大鼠随机分为模型对照组、溶剂对照组、CPTE高浓度组、CPTE低浓度组,每组10只。复制SD大鼠压疮模型。测算创面愈合率,采用苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠压疮病理变化,采用免疫荧光染色法检测大鼠创面皮肤组织中β-catenin、骨形态发生蛋白4(BMP4)的表达。(2)体外实验:分离培养SD乳鼠HFSCs,采用免疫荧光鉴定细胞表面标志物细胞角蛋白15(CK15)的表达,采用CCK-8法观察CPTE对HFSCs增殖能力的影响,采用Westernblot法观察CPTE对HFSCs中β-catenin、BMP4表达的影响。【结果】CPTE2组大鼠压疮愈合情况优于其他2组。培养的HFSCs细胞表面CK15呈阳性表达;3、10、30μg·mL^-1 CPTE对HFSCs有促增殖作用;与空白对照组比较,CPTE3、10μg·mL^-1组HFSCs中β-catenin蛋白表达上升,BMP4蛋白表达下降(P<0.05或P<0.01或P<0.001)。【结论】CPTE可能通过调控HFSCs中Wnt/BMP通路促进SD大鼠压疮创面修复。 展开更多
关键词 龟板提取物(CPTE) 压疮 毛囊干细胞(HFSCs) WNT/Β-CATENIN信号通路 BMP信号通路 疾病模型 动物 大鼠 细胞培养
冬凌草甲素对结肠癌LOVO细胞增殖和EMT影响的实验研究
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作者 龙景培 卜贺启 刘殿雷 《实用肿瘤杂志》 CAS 2019年第4期309-315,共7页
目的探讨冬凌草甲素(oridonin,ORI)对结肠癌细胞株LOVO细胞增殖和上皮间质转化(epithelialmesenchymal transition,EMT)的影响及可能的机制。方法不同药物浓度(0、2、4、8、12和16μg/m L)冬凌草甲素处理结肠癌LOVO细胞,不同时间点(24... 目的探讨冬凌草甲素(oridonin,ORI)对结肠癌细胞株LOVO细胞增殖和上皮间质转化(epithelialmesenchymal transition,EMT)的影响及可能的机制。方法不同药物浓度(0、2、4、8、12和16μg/m L)冬凌草甲素处理结肠癌LOVO细胞,不同时间点(24、48和72 h)采用CCK-8法观察细胞增殖情况,RT-PCR检测E-cadherin和Vimentin mRNA表达水平,Western blot检测磷酸化糖原合成酶激酶-3β(phospharylated glycogen synthase kinase-3β,p-GSK-3β)、β-catenin、E-cadherin和Vimentin蛋白表达水平。结果冬凌草甲素对LOVO细胞增殖抑制率呈时间和剂量依赖性(均P<0.05)。4、8和12μg/m L冬凌草甲素作用48 h,增加LOVO细胞E-cadherin基因表达量,减少Vimentin的基因表达量(均P<0.05),也增加LOVO细胞p-GSK-3β(Tyr216)蛋白表达量,减少p-GSK-3β(Ser9)蛋白表达量,同时下调β-catenin蛋白表达量(均P<0.05)。GSK-3β特定的抑制剂CHIR 2μmol/L作用1 h后,再加入12μg/m L冬凌草甲素共同作用24 h,能逆转冬凌草甲素对β-catenin、E-cadherin和Vimentin蛋白表达的影响(均P<0.05)。结论冬凌草甲素可能通过Wnt/β-catenin信号通路抑制结肠癌LOVO细胞的生长增殖和EMT过程。 展开更多
关键词 结肠肿瘤 冬凌草甲素 WNT/Β-CATENIN信号通路 LOVO细胞 p-GSK-3β
Wnt/β-catenin信号通路在阿尔茨海默病神经元变性中的研究进展
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作者 许蓬娟 蔡青 +3 位作者 谭俊珍 常凯旋 陈逸伦 付鹏宇 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期419-423,共5页
目的:阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)是目前老年人最常见的痴呆类型,由于AD发病机制复杂,迄今尚未完全阐明。AD最重要的神经病理学特征是β淀粉样蛋白(amyloid-βprotein,Aβ)沉积、Tau蛋白过度磷酸化形成神经纤维缠结以及脑内... 目的:阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)是目前老年人最常见的痴呆类型,由于AD发病机制复杂,迄今尚未完全阐明。AD最重要的神经病理学特征是β淀粉样蛋白(amyloid-βprotein,Aβ)沉积、Tau蛋白过度磷酸化形成神经纤维缠结以及脑内神经炎症反应的激活,并伴随着神经元的损伤及学习记忆功能受损。越来越多的研究指出Wnt/β-连环蛋白(Wnt/β-catenin)信号通路在神经退行性疾病中,尤其是AD中发挥了重要作用。为明确Wnt/β-catenin信号通路与AD发病、Aβ沉积、Tau蛋白和神经炎症的相关性及其机制,对相关文献进行综述。方法:选择Wnt/β-catenin信号通路与AD、Aβ神经毒性、Tau蛋白磷酸化及神经炎症相关的国内外相关文献进行综述。结果:研究表明Wnt/β-catenin信号通路参与AD的发生和发展,当该通路激活时可以抑制Aβ的沉积、Tau的过度磷酸化及神经炎症,反之则促进Aβ的产生、聚集以及Tau蛋白的磷酸化,神经炎症的发生。结论:本文就Wnt/β-catenin信号途径在AD发病中的重要性加以概述,为AD机制的研究提供了理论基础,也提示激活Wnt信号传导途径可以作为治疗AD的潜在治疗靶点。 展开更多
关键词 WNT/Β-CATENIN信号通路 阿尔茨海默病 Β淀粉样蛋白 TAU蛋白 神经炎症
健脾消癌方对人结肠癌细胞中Wnt信号分子β-catenin、Axin及靶基因MMP-7、CD44的影响
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作者 唐蔚 宋程 +4 位作者 蒋益兰 潘博 杨晓 刘科 陶子豪 《湖南中医杂志》 2019年第1期130-133,共4页
目的:观察健脾消癌方对Wnt信号分子β-连环蛋白(β-catenin)、Axin及靶基因基质金属蛋白酶-7(MMP-7)、CD44的影响,探讨其抗结直肠癌复发转移的作用机制。方法:将对数生长期的HCT116细胞分为空白组,0. 9%氯化钠注射液组,5-Fu组及健脾消... 目的:观察健脾消癌方对Wnt信号分子β-连环蛋白(β-catenin)、Axin及靶基因基质金属蛋白酶-7(MMP-7)、CD44的影响,探讨其抗结直肠癌复发转移的作用机制。方法:将对数生长期的HCT116细胞分为空白组,0. 9%氯化钠注射液组,5-Fu组及健脾消癌方低、中、高剂量组,分别干预48h后,收集细胞,PCR检测β-catenin、Axin及MMP-7、CD44表达。结果:健脾消癌方含药血清可以降低人结肠癌HCT116细胞中β-catenin mRNA表达水平,上调Axin mRNA表达水平,明显抑制MMP-7 mRNA及CD44 mRNA的表达。结论:健脾消癌方抗结直肠癌转移侵袭的药理作用可能与其下调Wnt/β-catenin信号通路的信号分子β-catenin及上调Axin的表达水平并有效降低靶基因MMP-7、CD44的表达水平有关,这可能是健脾消癌方抗结直肠癌复发转移的重要分子机制之一。 展开更多
关键词 健脾消癌方 结直肠癌 WNT/Β-CATENIN通路 信号分子 靶基因 实验研究
基于Wnt/β-catenin信号通路的艾拉莫德对白介素1β诱导的大鼠退变软骨细胞基质代谢的影响研究 预览
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作者 彭杨茜子 孔瑞娜 +1 位作者 张兰玲 赵东宝 《中国全科医学》 CAS 北大核心 2019年第23期2826-2832,共7页
背景Wnt信号通路广泛存在于软骨细胞中,表现为异常活化的状态,从而影响软骨细胞的增殖和凋亡失衡。艾拉莫德作为一种新的抗炎和免疫调节性质的小分子药物,不仅具有抗风湿药物的免疫调节、抑制关节破坏功能,还可影响骨代谢,但尚未见艾拉... 背景Wnt信号通路广泛存在于软骨细胞中,表现为异常活化的状态,从而影响软骨细胞的增殖和凋亡失衡。艾拉莫德作为一种新的抗炎和免疫调节性质的小分子药物,不仅具有抗风湿药物的免疫调节、抑制关节破坏功能,还可影响骨代谢,但尚未见艾拉莫德作用于软骨细胞相关机制的研究。目的基于Wnt/β-catenin信号通路,从细胞、分子水平探讨艾拉莫德对白介素(IL)-1β诱导的大鼠骨关节炎软骨基质代谢的影响及作用机制。方法2017年2-12月选取SPF级雄性2月龄健康Wistar大鼠10只,将大鼠软骨细胞培养至第2代软骨细胞,获得IL-1β诱导的退变软骨细胞模型。将分离培养的软骨细胞分为空白对照组、溶剂对照组、IL-1β组、艾拉莫德A组、艾拉莫德B组、艾拉莫德C组、塞来昔布A组、塞来昔布B组、塞来昔布C组、IL-1β+Dickkopf-1(DKK-1)组、艾拉莫德+DKK-1组、塞来昔布+DKK-1组。采用实时荧光定量反转录聚合酶链式反应和Western blotting法检测各组β-catenin、基质金属蛋白酶(MMP)-13、Ⅱ型胶原a1(Col2a1)、糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)mRNA及蛋白表达水平。结果IL-1β+DKK-1组12、24、48、72h的β-catenin mRNA表达水平均低于IL-1β组;IL-1β+DKK-1组0、12、24、48、72h的MMP-13mRNA表达水平均低于IL-1β组;IL-1β+DKK-1组12、24、48、72h的Col2a1 mRNA表达水平均高于IL-1β组。IL-1β+DKK-1组12、24、48、72h的β-catenin、MMP-13表达水平均低于IL-1β组,Col2a1表达水平均高于IL-1β组。加入试验药物24h后,艾拉莫德A组、塞来昔布A组的β-catenin mRNA、MMP-13mRNA表达水平均低于IL-1β组、IL-1β+DKK-1组,Col2a1mRNA、GSK-3β mRNA表达水平均高于IL-1β组、IL-1β+DKK-1组;艾拉莫德+DKK-1组的β-catenin mRNA、MMP-13mRNA表达水平均低于艾拉莫德A组,Col2a1mRNA、GSK-3β mRNA表达水平高于艾拉莫德A组;塞来昔布+DKK-1组的β-catenin mRNA、MMP-13 mRNA表达水平低于塞来昔布A组,Col2a1 mRNA、GS 展开更多
关键词 骨关节炎 艾拉莫德 白介素1Β WNT/Β-CATENIN信号通路 软骨细胞
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肝豆汤对Wilson病模型铜负荷大鼠肝脏Wnt/β-catenin信号通路的调控作用 被引量:2
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作者 耿昊 李海 +6 位作者 徐陈陈 董健健 陈燕 韩咏竹 韩永升 杨任民 程楠 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期75-81,共7页
目的:探讨肝豆汤对铜负荷大鼠肝脏中分泌型糖蛋白(Wnt)/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路的调控作用及机制。方法:SD大鼠115只随机分为正常组(20只)、造模组。造模组予以1g·kg^-1·d^-1的硫酸铜饲料及0.02mL·g^-1·d... 目的:探讨肝豆汤对铜负荷大鼠肝脏中分泌型糖蛋白(Wnt)/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路的调控作用及机制。方法:SD大鼠115只随机分为正常组(20只)、造模组。造模组予以1g·kg^-1·d^-1的硫酸铜饲料及0.02mL·g^-1·d^-1的0.185%硫酸铜溶液连续喂养12周;造模成功大鼠随机分为模型组(45只),肝豆汤组(25只)和青霉胺(PCA)组(25只);模型组、肝豆汤组和PCA组分别予以0.02mL·g^-1·d^-1生理盐水,0.4g·kg^-1·d^-1的中药肝豆汤和0.09g·kg^-1·d^-1青霉胺灌胃,连续4周,末次灌胃后取各组大鼠肝脏组织检测:电感耦合等离子体原子发射光谱法(ICP-AES)检测各组大鼠肝铜含量;苏木素-伊红(HE)染色观察各组大鼠肝脏组织病理改变,免疫组织化学法检测肝脏组织氧化应激相关蛋白的表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肝组织中Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白的表达水平。结果:ICP-AES法结果显示,与正常组比较,模型组大鼠肝脏铜含量显著升高(P<0.01);肝豆汤可降低铜负荷大鼠肝脏铜含量(P<0.05),PCA可显著降低模型组大鼠肝脏铜含量(P<0.01);HE染色结果显示,与正常组比较,模型组大鼠肝脏组织镜下可见肝细胞大小不一、排列紊乱,部分肝索丧失;肝豆汤组和PCA组细胞损伤程度较模型组明显降低;免疫组化结果显示:肝豆汤和PCA可显著降低模型组8-羟基脱氧鸟苷(8-Hydroxyguanosine),硝基酪氨酸(Nitrotyrosine)蛋白表达量(P<0.01);Western blot结果显示,肝豆汤和PCA可使铜负荷大鼠肝脏内Wnt通路相关蛋白β-连环蛋白(β-catenin),磷酸化糖原合成激酶3β(glycogen synthase kinase-3,p-GSK3β),原癌基因(cellular myelocytomatosis oncogene,c-Myc)蛋白表达量显著增加(P<0.01)。结论:肝豆汤可通过促进过量铜排出减轻高铜诱导的肝脏损伤,并通过激活肝脏Wnt/β-catenin信号通路促进损伤的肝组织代偿性自愈以达到减轻高铜诱导氧化应激损伤的治疗效果。 展开更多
关键词 WILSON病 肝豆汤 分泌型糖蛋白(Wnt)/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路 肝脏损伤
电针干预对大鼠脑缺血再灌注损伤的神经保护作用及其机制 预览
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作者 张吉芳 韩冰 孙国栋 《山东医药》 CAS 2019年第19期35-38,共4页
目的探讨电针干预对大鼠脑缺血再灌注损伤的神经保护作用及其机制。方法选择成年雄性SD大鼠90只,随机分为假手术组、模型组和电针组,每组30只。模型组和电针组通过改良线栓法建立局灶性脑缺血再灌注损伤模型;假手术组仅分离血管,不进行... 目的探讨电针干预对大鼠脑缺血再灌注损伤的神经保护作用及其机制。方法选择成年雄性SD大鼠90只,随机分为假手术组、模型组和电针组,每组30只。模型组和电针组通过改良线栓法建立局灶性脑缺血再灌注损伤模型;假手术组仅分离血管,不进行阻闭;电针组造模结束即刻电针刺激百会穴、大椎穴,每12h治疗1次,每次30min,共治疗5次。各组分别于再灌注6、24、48h,采用Longa法进行神经功能缺失评分;各组再灌注48h,采用激光多普勒血流仪检测缺血侧局部脑血流量和血流速度;各组随机选取10只,断头处死,迅速取出大脑组织,均匀切片,TTC染色,计算脑梗死体积百分比;各组随机选取10只,断头处死,取缺血侧脑皮质,采用TUNEL染色法检测神经细胞凋亡率;剩余大鼠,断头处死,取脑组织,采用Western blotting法检测Wnt/β-catenin信号通路关键因子β-catenin蛋白及凋亡相关因子Bcl-2、Bax蛋白表达。结果与假手术组比较,模型组脑血流量和血流速度明显降低,神经功能缺失评分、脑梗死面积百分比以及神经细胞凋亡率均明显升高,脑组织Bax蛋白表达明显升高,而β-catenin、Bcl-2蛋白表达明显降低(P均<0.05)。与模型组比较,电针组脑血流量和血流速度均明显升高,神经功能缺失评分、脑梗死面积百分比以及神经细胞凋亡率均明显降低,脑组织Bax蛋白表达明显降低,而β-catenin、Bcl-2蛋白表达明显升高(P均<0.05)。结论电针干预对大鼠脑缺血再灌注损伤具有神经保护作用,其作用机制与激活Wnt/β-catenin信号通路及抑制Bax蛋白表达、促进Bcl-2蛋白表达有关。 展开更多
关键词 脑缺血再灌注损伤 电针疗法 细胞凋亡 WNT/Β-CATENIN信号通路
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Wnt/β-catenin信号通路参与化疗药物诱导的转基因斑马鱼abcb4基因的表达和耐药
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作者 陈露 向文碧 +4 位作者 莫晶 孙琮杰 周艳华 吴西军 何志旭 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期134-139,共6页
目的探讨斑马鱼耐药基因ATP结合盒亚家族B成员4(ABCB4)与Wnt/β联蛋白(β-catenin)信号通路的关系。方法取野生型斑马鱼和转基因斑马鱼均设置空白对照组、阿霉素处理组、长春碱处理组、吉非替尼处理组、阿霉素联合吉非替尼处理组、长春... 目的探讨斑马鱼耐药基因ATP结合盒亚家族B成员4(ABCB4)与Wnt/β联蛋白(β-catenin)信号通路的关系。方法取野生型斑马鱼和转基因斑马鱼均设置空白对照组、阿霉素处理组、长春碱处理组、吉非替尼处理组、阿霉素联合吉非替尼处理组、长春碱联合吉非替尼处理组。每组100枚胚胎分别进行药物处理至第5天,每组取第5天斑马鱼幼鱼50枚进行实验。采用罗丹明123实验检测野生型斑马鱼耐药程度,酶标仪检测转基因的斑马鱼荧光强度,活细胞工作站检测荧光分布位置。Western blot法检测转基因的斑马鱼β-catenin、糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)、 ATP结合盒亚家族B成员4(ABCB4)、增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的蛋白水平。结果罗丹明123实验证实经阿霉素和长春碱药物暴露后的斑马鱼体内产生耐药, EGFP荧光强度检测结果表明经阿霉素和长春碱药物暴露后的转基因斑马鱼荧光强度高,经阿霉素和长春碱药物暴露后的转基因斑马鱼体内β-catenin的累积升高伴随着EGFP和ABCB4蛋白的增加。结论斑马鱼体内Wnt/β-catenin信号通路参与斑马鱼abcb4基因的激活与耐药。 展开更多
关键词 斑马鱼 WNT/Β-CATENIN信号通路 ATP结合盒亚家族B成员4(ABCB4) 耐药
Axin2基因对肝癌细胞中Wnt/β-catenin信号通路相关分子表达的调控及机制
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作者 全柳霞 吴立然 李晶 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2019年第5期512-516,520共6页
目的探讨Axin2基因对肝癌细胞中Wnt/β-catenin信号通路相关分子表达的调控及其机制。方法通过TOPflash试验检测Axin2基因对Wnt/β-catenin信号通路的影响;荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR,QPCR)法检测Axin2基因在正常肝细胞LO2... 目的探讨Axin2基因对肝癌细胞中Wnt/β-catenin信号通路相关分子表达的调控及其机制。方法通过TOPflash试验检测Axin2基因对Wnt/β-catenin信号通路的影响;荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR,QPCR)法检测Axin2基因在正常肝细胞LO2及3种肝癌细胞HepG2、HHCC、HB611中的表达水平;对肝癌细胞HepG2中Axin2的表达进行干扰,并检测Wnt/β-catenin信号通路相关基因(β-catenin、Cyclin A、CDK2、Wnt5a、STAT3、EGFR、APC)mRNA转录水平及相关蛋白(β-catenin、Cyclin A、CDK2、APC)的表达量。结果 Axin2对Wnt/β-catenin信号通路有显著抑制作用,且呈剂量依赖性(P <0. 05);3种肝癌细胞Axin2的表达水平显著低于正常肝细胞LO2(P <0. 05);干扰HepG2细胞中Axin2基因表达后,Axin2基因m RNA转录及蛋白表达水平降低,Wnt信号通路下游基因β-catenin、Cyclin A、CDK2、Wnt5a、STAT3和EGFR基因mRNA转录水平及β-catenin、Cyclin A、CDK2蛋白表达量均上升,而APC基因mRNA转录水平及蛋白表达量降低。结论 Axin2基因通过调控Wnt/β-catenin信号通路相关基因的表达抑制肝癌细胞的生成,本研究为寻找新的肝癌治疗靶点及防治药物提供了实验依据。 展开更多
关键词 Axin2基因 肝癌细胞 WNT/Β-CATENIN信号通路
维生素D 调控Wnt/β-catenin 信号通路抑制乳腺癌干细胞活性 预览
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作者 沙昱彤 黄家明 +5 位作者 卢珍萍 梁欢 征宗梅 杨学攀 施洪飞 朱明明 《中国癌症防治杂志》 CAS 2019年第4期297-302,共6页
目的探讨维生素D对乳腺癌干细胞活性的影响及其可能的作用机制。方法采用MTT法检测不同浓度(1 μmol/L、5 μmol/L、10 μmol/L和20 μmol/L)维生素D对乳腺癌SUM159细胞活力的影响,用无血清培养基悬浮培养富集乳腺癌干细胞CSCSUM159,分... 目的探讨维生素D对乳腺癌干细胞活性的影响及其可能的作用机制。方法采用MTT法检测不同浓度(1 μmol/L、5 μmol/L、10 μmol/L和20 μmol/L)维生素D对乳腺癌SUM159细胞活力的影响,用无血清培养基悬浮培养富集乳腺癌干细胞CSCSUM159,分析维生素D对乳腺癌干细胞活性的影响。Western blot和Real-time qPCR 分别检测乳腺癌干细胞标志物CD133、CD44、Oct-4、Nanog以及Wnt/β-catenin信号通路相关分子p-GSK-3β、β-catenin、c-Myc和cyclin-D1的表达。结果 MTT法检测结果显示,1 μmol/L、5 μmol/L、10 μmol/L和20 μmol/L维生素D均可显著抑制乳腺癌SUM159细胞的活力(P<0.01)。无血清悬浮培养可有效富集乳腺癌干细胞CSCSUM159。维生素D可使乳腺癌干细胞CSCSUM159的成球数量减少,且细胞成球大小较对照组小。Western blot和Real-time qPCR检测结果显示,维生素D干预后,乳腺癌干细胞CSCSUM159中CD133、CD44和Nanog的蛋白表达下调,Wnt/β-catenin信号通路相关分子p-GSK-3β、β-catenin和c-Myc蛋白表达及β-catenin、c-Myc和cyclin-D1 mRNA表达亦下调(P<0.05)。结论维生素D可抑制乳腺癌干细胞活性,可能与其调控Wnt/β-catenin信号通路活性有关。 展开更多
关键词 乳腺癌 维生素D 肿瘤干细胞 WNT/Β-CATENIN信号通路
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Frat1通过Wnt/β-catenin信号通路对非小细胞肺癌A549细胞增殖、凋亡的影响 预览
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作者 郑忻 曲妮妮 +4 位作者 郑凯 束沛 李思佳 秦一冰 黄美玲 《临床肺科杂志》 2019年第10期1855-1859,共5页
目的探讨Frat1能否通过Wnt/β-catenin信号通路对非小细胞肺癌A549细胞的增殖、凋亡产生影响。方法RT-PCR检测非小细胞肺癌组织及正常肺组织中Frat1、β-catenin的表达;CCK-8试验检测Frat1沉默组和Frat1正常表达组非小细胞肺癌A549细胞... 目的探讨Frat1能否通过Wnt/β-catenin信号通路对非小细胞肺癌A549细胞的增殖、凋亡产生影响。方法RT-PCR检测非小细胞肺癌组织及正常肺组织中Frat1、β-catenin的表达;CCK-8试验检测Frat1沉默组和Frat1正常表达组非小细胞肺癌A549细胞的增殖;TUNEL免疫荧光法检测Frat1沉默组和Frat1正常表达组非小细胞肺癌A549细胞的凋亡;Western Blot检测Frat1沉默组和Frat1正常表达组非小细胞肺癌A549细胞β-catenin蛋白的表达。结果非小细胞肺癌组织中Frat1、β-catenin基因的表达显著高于正常肺组织(P<0.05);Frat1沉默组细胞的增殖能力显著弱于Frat1正常表达组(P<0.05);Frat1沉默组细胞的凋亡显著高于Frat1正常表达组(P<0.05);Frat1正常表达组细胞β-catenin蛋白的表达显著高于Frat1沉默组(P<0.05)。结论Frat1与β-catenin在非小细胞肺癌的表达被激活;Frat1能促进非小细胞肺癌A549细胞的增殖,抑制其凋亡,这种作用可能是通过激活Wnt/β-catenin信号通路而实现的。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 Frat1 WNT/Β-CATENIN信号通路 增殖 凋亡
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淫羊藿苷促进软骨细胞增殖的机制研究 预览
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作者 张帅 刘益杰 +3 位作者 李瑜琳 李建华 何东仪 褚立希 《中国医学前沿杂志(电子版)》 2019年第8期41-45,共5页
目的探讨淫羊藿苷(icariin,ICA)对软骨细胞增殖功能的影响及其作用机制。方法选取SD大鼠四肢长骨进行关节软骨细胞的分离与培养,将第二代细胞接种至96孔板或6孔板进行培养,并将其随机分为对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组,对照组... 目的探讨淫羊藿苷(icariin,ICA)对软骨细胞增殖功能的影响及其作用机制。方法选取SD大鼠四肢长骨进行关节软骨细胞的分离与培养,将第二代细胞接种至96孔板或6孔板进行培养,并将其随机分为对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组,对照组软骨细胞采用常规培养基培养,低剂量组、中剂量组和高剂量组软骨细胞分别在常规培养基础上添加0.1、1、10 μmol/L的ICA,干预1、3、5 d后采用MTT法与流式细胞术分别检测四组软骨细胞的增殖和凋亡情况,并通过实时荧光定量聚合酶链反应分析ICA干预5 d后Wnt/β-catenin通路相关基因的表达水平。结果 ICA干预1 d后,四组软骨细胞在450 nm波长处的吸光度(optical density 450,OD450)与凋亡率比较差异均无统计学意义(均P > 0.05)。ICA干预3 d后,中剂量组、高剂量组软骨细胞的OD450均显著高于对照组(均P < 0.05),凋亡率均显著低于对照组(均P < 0.05),而低剂量组与对照组软骨细胞的OD450比较差异无统计学意义(P > 0.05)。ICA干预5 d后,低剂量组、中剂量组和高剂量组软骨细胞的OD450均显著高于对照组(均P < 0.05),凋亡率均显著低于对照组(均P < 0.05)。低剂量组、中剂量组和高剂量组软骨细胞的Wnt2、β-catenin、CCND1相对表达水平均显著高于对照组(均P < 0.05)。结论 ICA能通过促进Wnt/β-catenin信号通路而促进软骨细胞的增殖,抑制细胞凋亡,且呈剂量、时间依赖性。 展开更多
关键词 淫羊藿苷 软骨细胞 增殖 WNT/Β-CATENIN信号通路
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SOX7基因对肝癌细胞凋亡、氧化应激及Wnt/β-catenin信号通路的影响 预览
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作者 冯桂银 张庚 +3 位作者 王海伦 梁东启 袁媛 樊艳 《蚌埠医学院学报》 CAS 2019年第7期846-849,854共5页
目的:探讨过表达SOX7对肝癌细胞凋亡、活性氧(ROS)水平及Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法:人肝癌Huh-7细胞分为空白组、空质粒pcDNA3.1组(Vector组)和pcDNA3.1-SOX7重组质粒组(pcDNA3.1-SOX7组)。转染48h,AnnexinV-FITC/PI双染法细... 目的:探讨过表达SOX7对肝癌细胞凋亡、活性氧(ROS)水平及Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法:人肝癌Huh-7细胞分为空白组、空质粒pcDNA3.1组(Vector组)和pcDNA3.1-SOX7重组质粒组(pcDNA3.1-SOX7组)。转染48h,AnnexinV-FITC/PI双染法细胞凋亡试剂盒、DCFH-DA法及Westernblotting分别检测细胞凋亡率、ROS含量及SOX7、β-catenin、cyclinD1和cleaved-caspase3蛋白表达。MTT法检测pcDNA3.1转染24h、48h和72h的细胞活力。结果:pcDNA3.1-SOX7重组质粒组SOX7蛋白表达明显高于空白组(P<0.05)。与空白组比较,pcDNA3.1-SOX7组细胞活力及β-catenin和cyclinD1蛋白表达均明显降低,细胞凋亡率、ROS含量及cleaved-caspase3蛋白表达明显升高(P<0.05)。结论:过表达SOX7可诱导肝癌细胞凋亡,凋亡机制与细胞内ROS水平提高及Wnt/β-catenin信号通路抑制有关。 展开更多
关键词 肝肿瘤 SOX7基因 氧化应激 WNT/Β-CATENIN信号通路 细胞凋亡
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中药独活激活Wnt/β-catenin信号通路对骨质疏松大鼠的作用
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作者 姚琦 高宁阳 +1 位作者 慈元 李志君 《解剖科学进展》 2019年第5期532-535,539共5页
目的探讨中药独活对去卵巢所致骨质疏松SD大鼠的作用及其可能机制。方法将50只SD大鼠,体重200~250 g,随机分为假手术组、模型组、独活低剂量组(0.9 g/kg)、独活高剂量组(1.8 g/kg)、阳性药组(200 mg/kg依普黄酮),每组10只。利用双侧卵... 目的探讨中药独活对去卵巢所致骨质疏松SD大鼠的作用及其可能机制。方法将50只SD大鼠,体重200~250 g,随机分为假手术组、模型组、独活低剂量组(0.9 g/kg)、独活高剂量组(1.8 g/kg)、阳性药组(200 mg/kg依普黄酮),每组10只。利用双侧卵巢切除法制备大鼠骨质疏松模型,手术模型制备成功后,连续灌胃给药60d。测定股骨密度、骨灰重/干重百分比;测定大鼠血清骨钙素(OC)、骨碱性磷酸酶(ALP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)、血清钙、无机磷的水平。免疫组化法测定股骨中骨保护素(OPG)、破骨细胞分化因子(RANKL)蛋白表达;Western blot法检测大鼠骨组织中β-catenin、p-β-catenin、GSK-3β、p-GSK-3β蛋白表达。结果独活高剂量和阳性药均能够增加大鼠股骨密度、骨灰重/干重,降低BGP、ALP及TRAP的水平,并增加血清钙的水平,对无机磷的表达无显著性影响,增加骨组织中OPG蛋白表达水平,降低RANKL蛋白表达水平,增加β-catenin、p-GSK-3β蛋白表达水平,降低p-β-catenin、GSK-3β蛋白表达。结论独活高剂量(1.8 mg/kg)对去卵巢导致的骨质疏松大鼠的治疗作用,与激活Wnt/β-catenin信号通路促进骨形成相关。 展开更多
关键词 独活 卵巢摘除 骨质疏松 骨形成 WNT/Β-CATENIN信号通路 SD大鼠
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