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溶栓候选药物双吲哚海洋生物碱FGFC1的转化特性
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作者 张本帅 姜胜男 +5 位作者 杨晶 钱士云 马子宾 郭锐华 包斌 吴文惠 《上海海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期634-642,共9页
研究新型海洋纤溶化合物FGFC1体外药物代谢动力学特征及其转化产物。从Wistar大鼠获得肝微粒体,lowry法检测肝微粒体蛋白浓度,HPLC方法检测FGFC1及其转化产物的增减,LC-MS/MS方法分析和鉴定FGFC1的转化产物,4-苯基-1,2,3-噻二唑、去乙... 研究新型海洋纤溶化合物FGFC1体外药物代谢动力学特征及其转化产物。从Wistar大鼠获得肝微粒体,lowry法检测肝微粒体蛋白浓度,HPLC方法检测FGFC1及其转化产物的增减,LC-MS/MS方法分析和鉴定FGFC1的转化产物,4-苯基-1,2,3-噻二唑、去乙酰环丙氯地孕酮、苯妥英钠和酮康唑为CYP450酶系亚型的选择性抑制剂。结果显示,FGFC1的体外代谢半衰期T1/2=(96.25±2.3) min,固有清除率CLint=(0.072 0±0.001 4)mL/(min·mg)。FGFC1的唯一转化产物是((2S,3S)-2-((E)-7,8-dihydroxy-4-methylnon-3-en-1-yl)-3,5,8-trihydroxy-2-methyl-3,4,8,9-tetrahydropyrano[2,3-e]isoindol-7 (2H)-one)(PIO),其分子质谱和片段峰(m/z)分别为463.20[M+C2H3N+H]+和m/z 110.90[C7H8O+H+H]+、215.70[C13H26O2+H]+、337.00[C18H27NO5]+、337.00[C25H31NO2]+。苯妥英钠显著抑制肝微粒体酶系CYP3A4亚型,FGFC1的转化产物PIO被减少49.11%。研究表明,肝微粒体CYP3A4亚型酶系通过N-脱烷基反应、N-氧化反应和水解反应转化FGFC1为PIO。 展开更多
关键词 肝微粒体 FGFC1 生物转化 半衰期 PIO
肠道菌群与中药相关性研究进展 预览
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作者 刘程智 王莹 +2 位作者 梁倩 周琢艳 陈欢 《浙江中医药大学学报》 CAS 2019年第8期828-834,共7页
[目的]探讨肠道微生物与中药相互关系及作用机制。[方法]通过pubmed、知网等平台分别以"microbiome""microbiota""Traditional Chinese Medicine"英文关键词和以"中药""疾病"和"... [目的]探讨肠道微生物与中药相互关系及作用机制。[方法]通过pubmed、知网等平台分别以"microbiome""microbiota""Traditional Chinese Medicine"英文关键词和以"中药""疾病"和"肠道微生物"等为中文关键词进行文献检索,搜集整理国内外有关中药和肠道菌群的研究报道,对肠道菌群和中药的关系进行归类总结。[结果]将搜集到的文献根据作用对象进行归类,中药及其活性成分与肠道菌群之间的关系为互作关系,目前的研究主要聚焦在中药和菌群结构之间关系。一方面,中药可以通过选择性地抑制或者促进不同种类肠道微生物生长来实现对菌群结构和代谢功能的调节,从而促进人体的健康。另一方面,肠道微生物对中药有效成分进行生物转化,调节生物利用度和活性,在一些情况下也存在减弱药效或者增强毒副作用的可能。[结论]中药及中药活性成分与菌群的互作关系研究已经取得一些阶段性的成果,展示了肠道菌群在发现中药新用途及指导个性化用药等中药开发活动中的价值,而互作的机制仍有待通过联系到具体的菌株或者酶、群落功能分析,代谢状态分析等研究方法进一步深入。 展开更多
关键词 肠道菌群 中药 生物转化 益生元 多糖
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Absorption and biotransformation of four compounds in the Guizhi decoction in the gastrointestinal tracts of rats
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作者 Gao Huan Zhang Lishi +1 位作者 Song Jiannan Bai Dong 《中医杂志:英文版》 SCIE CAS CSCD 2019年第3期332-338,共7页
OBJECTIVE:To study the absorption and biotransformation of liquiritin,cinnamic acid,paeoniflorin,and glycyrrhizic acid in the Guizhi decoction (GZD) in the gastrointestinal tracts of rats.METHODS:A simple and reliable... OBJECTIVE:To study the absorption and biotransformation of liquiritin,cinnamic acid,paeoniflorin,and glycyrrhizic acid in the Guizhi decoction (GZD) in the gastrointestinal tracts of rats.METHODS:A simple and reliable high-performance liquid chromatography method was established and validated for the analysis of the four components of GZD simultaneously in the gastrointestinal tracts of rats.Rats were randomly divided into in situ gastrointestinal loop model,in vitro anaerobic culture model,and blank control groups.All rats were fasted for 12 h and anesthetized using 20% urethane.Subsequently,the abdominal cavity of each rat was opened,and the stomach,duodenum,jejunum,ileum,cecum,and colon were ligated.For the in situ gastrointestinal loop model group,2.5 mL of GZD (1.0 g crude drug/mL,37 ℃)were injected into the gastrointestinal tract.The abdominal incision was covered with warm,wet cotton,and animals were maintained at 25 ℃.Then,we collected the gastrointestinal tract content after 1.5 h.For the in vitro anaerobic culture model group,the gastrointestinal tract contents of rats were collected and then cultured in 2.5 mL of GZD in an anaerobic environment at 25 ℃ for 24 h.For the blank control group,rats received the same volume of a normal saline solution instead of GZD.High performance liquid chromatography was used to detect the liquiritin,cinnamic acid,paeoniflorin,and glycyrrhizic acid concentrations in each group and calculate the absorption and biotransformation rates of each ingredient.RESULTS:Cinnamic acid (low polarity) was more easily absorbed by each gastrointestinal part than the higher-polarity glycosides.However,the absorption rate in the cecum was higher than that in other parts.The four compounds,cinnamic acid,liquiritin,paeoniflorin,and glycyrrhizic acid,were transformed completely within 24 h in the cecum and colon,whereas they were hardly transformed in the stomach,excluding glycyrrhizic acid.In addition,all ingredients had higher biotransformation rates in the distal small intestine tha 展开更多
关键词 ABSORPTION CINNAMATES Glycyrrhizic acid BIOTRANSFORMATION Chromatography high pressure liquid Guizhi DECOCTION
Microbial synthesis of anti-tumor agent oxysophoridine through one step by filamentous fungus 预览
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作者 Qingfeng Meng Xuan Zhou +2 位作者 Xu Ran Song Yan Shaobin Fu 《制药与生物制药研究杂志(英文)》 2019年第2期48-52,共5页
Sophoridine and oxysophoridine are alkaloids extracted from Chinese traditional medicinewith significant antitumor activities. Computer-aided design and preliminary structure-activity relationship studiesshowed that t... Sophoridine and oxysophoridine are alkaloids extracted from Chinese traditional medicinewith significant antitumor activities. Computer-aided design and preliminary structure-activity relationship studiesshowed that the biological activity of sophoridine can be improved after oxidation (oxysophoridine) whileits toxicity significantly decreased. A new method to prepare oxysophoridine from natural product Sophoridineby biotransformation was established for the first time except for traditional extraction from plants and chemicalsynthesis. Positive biocatalytic reaction was detected by TLC. Structure of conversion product was elucidatedbased on NMR spectroscopy. Optimizations of reactions including substrate concentration, pH, conversion timeand inoculation quantity were complemented which analyzed by LC-MS. Results showed that filamentous fungusXylariales. sp F005 (CCTCC M2014660) has the capacity of synthetizing oxysophoridine from sophoridinein the selected 37 strains. The yield of oxysophoridine reached highest at conditions pH 6.0, the third day ofconversion time, 5.0 mg substrate and 5% inoculums respectively. The method for preparing oxysophoridinecatalyzed by enzymes with green and sustainable synthetic processes was developed. 展开更多
关键词 BIOTRANSFORMATION ALKALOID FUNGUS natural product condition optimization
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基于UPLC-Q-Orbitrap MS/MS技术研究酸枣仁发酵过程中的化学成分转化 预览
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作者 杜晨晖 李泽 +4 位作者 崔小芳 张敏 裴香萍 詹海仙 闫艳 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2019年第8期1614-1620,共7页
利用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱串联质谱(UPLC-Q-Orbitrap MS/MS)研究了酸枣仁经茯苓发酵前后的主要化学成分变化,初步探讨了茯苓对酸枣仁发酵的转化规律.鉴定了发酵产物中24种化学成分,整合多元统计方法对酸枣仁发酵0,7和14 ... 利用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱串联质谱(UPLC-Q-Orbitrap MS/MS)研究了酸枣仁经茯苓发酵前后的主要化学成分变化,初步探讨了茯苓对酸枣仁发酵的转化规律.鉴定了发酵产物中24种化学成分,整合多元统计方法对酸枣仁发酵0,7和14 d后的差异性化学成分进行研究,采用正交偏最小二乘分析找到7个差异成分.采用t-检验对24种化学成分的相对含量进行分析;并分析了酸枣仁中黄酮苷、皂苷类成分的代谢反应途径.通过茯苓发酵,酸枣仁中化学成分主要发生了脱酰基和脱糖基等水解反应.为酸枣仁发酵产物的化学成分检测提供了快速、直观且准确的方法,为酸枣仁-茯苓共发酵产物的深入开发与利用提供了科学依据. 展开更多
关键词 酸枣仁 茯苓 发酵 超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱串联质谱 生物转化
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Construction of a CaHP04-PGUSl hybrid nanoflower through protein-inorganic self-assembly, and its application in glycyrrhetinic acid 3-0-mono-β-D-glucuronide preparation
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作者 Tian Jiang Yuhui Hou +2 位作者 Tengjiang Zhang Xudong Feng Chun Li 《化学科学与工程前沿:英文版》 EI CAS CSCD 2019年第3期554-562,共9页
Glycyrrhetinic acid 3-0-mono-β-D-glucuronide (GAMG), an important pharmaceutical intermediate and functional sweetener, has broad applications in the food and medical industries. A green and cost-effective method for... Glycyrrhetinic acid 3-0-mono-β-D-glucuronide (GAMG), an important pharmaceutical intermediate and functional sweetener, has broad applications in the food and medical industries. A green and cost-effective method for its preparation is highly desired. Using sitedirected mutagenesis, we previously obtained a variant of β-glucuronidase from Aspergillus oryzae Li-3 (PGUS1), which can specifically transform glycyrrhizin (GL) into GAMG. In this study, a facile method was established to prepare a CaHP04-PGUSl hybrid nanoflower for enzyme immobilization, based on protein-inorganic hybrid selfassembly. Under optimal conditions, 1.2 mg of a CaHP04- PGUS1 hybrid nanoflower precipitate with 71.2% immobilization efficiency, 35.60 mg·g^-1 loading capacity, and 118% relative activity was obtained. Confocal laser scanning microscope and scanning electron microscope results showed that the enzyme was encapsulated in the CaHP04-PGUSl hybrid nanoflower. Moreover, the thermostability of the CaHP04-PGUSl hybrid nanoflower at 55°C was improved, and its half-life increased by 1.3 folds. Additionally, the CaHP04-PGUSl hybrid nanoflower was used for the preparation of GAMG through GL hydrolysis, with the conversion rate of 92% in 8 h, and after eight consecutive runs, it had 60% of its original activity. 展开更多
关键词 β-glucuronidase enzyme-inorganic hybrid nanoflower biotransformation glycyrrhizin glycyrrtinic acid 3-O-mono-β-D-glucuronide
交联纳米SiO2固定化蜗牛酶的制备表征及转化淫羊藿苷研究
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作者 李瑞云 刘聪燕 +2 位作者 许婷 杨茹 陈彦 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2019年第20期4904-4910,共7页
目的制备交联纳米Si O2固定化蜗牛酶,并对其理化性质、酶解淫羊藿苷为宝藿苷I的最适酶解条件及酶学性能进行考察。方法采用共价偶联法将蜗牛酶固定在戊二醛交联纳米Si O2上,以相对酶活力为指标,对固定化条件进行优化;采用透射电镜(TEM)... 目的制备交联纳米Si O2固定化蜗牛酶,并对其理化性质、酶解淫羊藿苷为宝藿苷I的最适酶解条件及酶学性能进行考察。方法采用共价偶联法将蜗牛酶固定在戊二醛交联纳米Si O2上,以相对酶活力为指标,对固定化条件进行优化;采用透射电镜(TEM)、傅里叶红外光谱(FTIR)和元素分析法对固定化蜗牛酶的理化性质进行表征;并以淫羊藿苷为底物,以游离酶为对照,考察固定化蜗牛酶的最适酶解条件及酶解动力学参数、重复利用性、热稳定性等酶学性能。结果固定化蜗牛酶制备的最佳酶载比为1∶3,固定化时间为6 h;其转化淫羊藿苷的最适酶解条件为pH 5.0,转化温度60℃,酶与底物质量比1∶2,转化时间12 h。固定化蜗牛酶的酶解动力学参数最大反应速率(Vmax)为0.43μg/min,米氏常数(Km)为0.78 mmol/L,重复使用5次后的相对酶活仍能保持在70%以上。结论制备的交联纳米Si O2固定化蜗牛酶机械强度高、稳定性好,不但可重复使用,还可定向水解淫羊藿苷为活性更强的宝藿苷I,工艺简单易行,转化效率高,适宜于工业化生产。 展开更多
关键词 固定化蜗牛酶 交联纳米SiO2 生物转化 淫羊藿苷 宝藿苷Ⅰ
人参真菌菌质的乙酸乙酯部位化学成分研究 预览
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作者 常百金 邱智东 +3 位作者 张涵雪 关安琦 刘莹莹 徐伟 《中国药房》 CAS 北大核心 2019年第2期202-206,共5页
目的:对生物转化得到的人参真菌菌质的乙酸乙酯部位化学成分进行研究,以期获得活性更好、毒性更低的化合物,为新药研发及人参药材的二次开发利用提供参考。方法:将代号为C-1的真菌种子液加至含有人参的培养基中,生物转化得到人参真菌菌... 目的:对生物转化得到的人参真菌菌质的乙酸乙酯部位化学成分进行研究,以期获得活性更好、毒性更低的化合物,为新药研发及人参药材的二次开发利用提供参考。方法:将代号为C-1的真菌种子液加至含有人参的培养基中,生物转化得到人参真菌菌质;称取干燥人参真菌菌质,以70%乙醇溶剂提取浓缩制得稠膏;稠膏加入水混悬,采用乙酸乙酯萃取,获得乙酸乙酯部位。采用薄层色谱、硅胶柱色谱、ODS柱色谱以及半制备液相对上述乙酸乙酯部位进行分离纯化,根据理化性质以及氢谱(1H-NMR)和碳谱(13C-NMR)数据鉴定化合物结构。结果:从人参真菌菌质的乙酸乙酯部位分离、鉴定得到8个化合物,分别为人参皂苷Rs7(1)、人参皂苷Rk3(2)、齐墩果酸-28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(3)、人参皂苷Rs6(4)、20(R)-人参皂苷Rh1(5)、人参皂苷F1(6)、三七皂苷R2(7)、人参皂苷F4(8)。结论:上述化合物均在人参真菌菌质中发现,其中化合物3、5、6、7、8为经生物转化后得到的,证明生物转化技术能改变人参的化学成分。 展开更多
关键词 人参 生物转化 乙酸乙酯部位 化学成分
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天然产物皂苷类化合物生物转化的研究进展 被引量:2
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作者 周中流 李春燕 +3 位作者 陈林浩 杨雅琳 尹文清 刘斌 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第16期173-192,共20页
皂苷是苷元为三萜或螺甾烷类的一类较复杂的糖苷类化合物。天然来源皂苷为底物,采用生物转化技术获取了大量结构新颖的化合物,尤其是具有良好活性的皂苷转化产物,为新药的研究与开发提供了极为有价值的先导化合物。皂苷按母核结构可分... 皂苷是苷元为三萜或螺甾烷类的一类较复杂的糖苷类化合物。天然来源皂苷为底物,采用生物转化技术获取了大量结构新颖的化合物,尤其是具有良好活性的皂苷转化产物,为新药的研究与开发提供了极为有价值的先导化合物。皂苷按母核结构可分为三萜皂苷和甾体皂苷,目前文献报道了89个天然来源皂苷单体的生物转化研究,其中三萜皂苷56个,甾体皂苷33个。皂苷类化合物的生物转化方法包括酶催化、微生物和肠道菌群转化,皂苷的生物酶和微生物转化工艺的研究与优化,是目前规模化制备活性次级皂苷的主要途径。皂苷类化合物的生物转化反应主要包括水解、氧化还原和重排等反应,最终生成苷元、次级糖苷或其衍生物。大多数皂苷的生物转化途径主要是经糖链水解反应,生成多个含糖基较少的次级皂苷,吸收入血并达到靶器官,发挥治疗作用。稀有次级皂苷制备、先导化合物发现和新药开发是皂苷类化合物生物转化研究的主要方向。利用微生物和肠道菌群转化技术研究皂苷的体内代谢与作用机制,也将成为该类成分生物转化研究中的热点。结合国内外近30年来的研究成果,对皂苷类成分的生物转化技术、转化反应类型和转化途径的研究进展进行总结,以期为皂苷类成分生物转化的深入研究和开发利用提供科学依据。 展开更多
关键词 皂苷 生物转化 转化技术 转化途径
稀有原人参二醇型皂苷的人肠道菌群生物转化 预览
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作者 韩铭鑫 李方彤 +3 位作者 张琰 戴雨霖 郑飞 越皓 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2019年第7期1390-1396,共7页
利用高分离度液相色谱-四极杆飞行时间质谱(RRLC-Q-TOF MS)和超高效液相色谱-三重四极杆质谱(UPLC-QQQ MS)定性定量分析了稀有原人参二醇型皂苷Rd,F2,Rg3,CK和Rh2在离体人肠道菌群中的生物转化过程.并将上述二醇型皂苷与人肠道菌群在体... 利用高分离度液相色谱-四极杆飞行时间质谱(RRLC-Q-TOF MS)和超高效液相色谱-三重四极杆质谱(UPLC-QQQ MS)定性定量分析了稀有原人参二醇型皂苷Rd,F2,Rg3,CK和Rh2在离体人肠道菌群中的生物转化过程.并将上述二醇型皂苷与人肠道菌群在体外厌氧,37℃下共温孵育,采用电喷雾质谱在负离子模式进行检测,鉴定代谢产物,监测其含量变化,拟合代谢路径.结果表明,人参皂苷Rd主要被代谢为F2,Rg3,CK,Rh2和PPD;人参皂苷F2主要被代谢为CK和PPD;人参皂苷Rg3主要被代谢为Rh2和PPD;人参皂苷CK和Rh2主要被代谢为PPD.在离体条件下,人参皂苷Rd,F2和Rg3会被肠道菌群完全转化为其代谢产物,而人参皂苷CK和Rh2则不能被肠道菌群完全转化为其代谢产物.原人参二醇型皂苷在人肠道菌群中的主要转化为脱糖基反应,单糖苷和苷元是稀有原人参二醇型皂苷在人体内发挥药效的物质基础. 展开更多
关键词 稀有原人参二醇型皂苷 人肠道菌群 生物转化 液相色谱质谱联用
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植物天然产物的微生物合成与转化 预览
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作者 薛海洁 王颖 李春 《化工学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第10期3825-3835,共11页
植物天然产物是一类结构复杂、性能多样的次级代谢产物,广泛应用于食品、药品、化妆品等多个领域。目前植物天然产物的主要来源依赖于从植物中提取,这种生产方式周期长且占用大量耕地。微生物细胞因其生长周期短、操作简便、环境友好、... 植物天然产物是一类结构复杂、性能多样的次级代谢产物,广泛应用于食品、药品、化妆品等多个领域。目前植物天然产物的主要来源依赖于从植物中提取,这种生产方式周期长且占用大量耕地。微生物细胞因其生长周期短、操作简便、环境友好、大规模发酵可控等优势而被广泛研究用以替代传统的植物提取法。目前利用微生物细胞工厂合成和转化植物天然产物已成为研究的热点,实现了萜类、黄酮、生物碱、皂苷等多种植物天然产物的合成和转化。本文分别从从头合成和生物转化的角度综述了微生物细胞工厂在植物天然产物合成中的应用,为更加系统、深入地研究植物天然产物的微生物合成与转化提供参考。 展开更多
关键词 微生物细胞工厂 植物天然产物 生物转化 萜类 黄酮 生物碱
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混菌发酵绿茶产脂肪酶及其对酯型儿茶素的水解作用分析 预览
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作者 方洪枫 张慧霞 +1 位作者 王国红 杨民和 《茶叶科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期88-97,共10页
微生物的发酵作用导致黑茶加工过程中儿茶素的生物转化和总茶多酚含量的下降,这一转化过程的代谢途径和调控机制尚不清楚。通过添加冠突曲霉(Aspergillus cristatum)菌株PE-1和黑曲霉(A.niger)菌株PE-4混合发酵绿茶,采用鉴别培养基平板... 微生物的发酵作用导致黑茶加工过程中儿茶素的生物转化和总茶多酚含量的下降,这一转化过程的代谢途径和调控机制尚不清楚。通过添加冠突曲霉(Aspergillus cristatum)菌株PE-1和黑曲霉(A.niger)菌株PE-4混合发酵绿茶,采用鉴别培养基平板检测、酶活性测定和酶蛋白分离纯化,研究脂肪酶活性及其对酯型儿茶素的水解作用。两个菌株单菌发酵和混合菌种发酵绿茶条件下均可以检测到脂肪酶活性,混菌发酵酶活力高于两个菌株单菌发酵的酶活力。混菌发酵条件下获得一个分子量约为37kDa的脂肪酶,对EGCG和ECG有不同的生物转化作用。UPLC检测结果表明,该脂肪酶对EGCG有较好的底物选择性,EGCG的水解率为94.46%,EGC的产率为63.33%;ECG的水解率为15.45%,EC的产率为4.15%。脂肪酶对EGCG和ECG的生物转化将为儿茶素代谢途径的研究和单体儿茶素的生产起到促进作用。 展开更多
关键词 混菌发酵 酯型儿茶素 脂肪酶 生物转化 表没食子儿茶素没食子酸酯
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干酪乳杆菌对虫草素的生物转化研究 预览
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作者 肖璇 杨伟超 +2 位作者 杜蓓蓓 徐慧 赵临襄 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2019年第1期32-36,共5页
探讨干酪乳杆菌( Lactobacillus casei)对虫草素的生物转化。采用L. casei与虫草素共培养的方法,以虫草素水溶液为底物,接入L. casei 活菌体进行厌氧培养,培养液经高效液相色谱(HPLC)和液质联谱(LC/MS)检测后有新产物生成,标记为CA。产... 探讨干酪乳杆菌( Lactobacillus casei)对虫草素的生物转化。采用L. casei与虫草素共培养的方法,以虫草素水溶液为底物,接入L. casei 活菌体进行厌氧培养,培养液经高效液相色谱(HPLC)和液质联谱(LC/MS)检测后有新产物生成,标记为CA。产物CA由制备液相分离、纯化后经核磁共振波谱(NMR)检测,被确定为3′-脱氧肌苷(3′-Deoxyinosine)。结果表明, L. casei 能够对虫草素进行生物转化,可将虫草素C-6位的氨基水解为羟基,生成3′-脱氧肌苷,并在培养72 h时使虫草素转化率达91.2%。 展开更多
关键词 干酪乳杆菌 虫草素 生物转化 3′-脱氧肌苷
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D-甘露糖异构酶的克隆表达及酶法制备D-甘露糖 预览
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作者 胡兴 张涛 +2 位作者 沐万孟 缪铭 江波 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期58-63,共6页
将大肠杆菌BL21中的D-甘露糖异构酶(MIase)基因yihS克隆到表达载体pET-28a(+)中,并转入大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中表达。重组菌株经IPTG诱导培养6 h后MIase发酵酶活可达4.2 U/mL。重组MIase生产D-甘露糖时不需要金属离子的参与。该... 将大肠杆菌BL21中的D-甘露糖异构酶(MIase)基因yihS克隆到表达载体pET-28a(+)中,并转入大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中表达。重组菌株经IPTG诱导培养6 h后MIase发酵酶活可达4.2 U/mL。重组MIase生产D-甘露糖时不需要金属离子的参与。该酶在40℃和pH 7.5条件下表现出催化D-果糖的最高活性,转化率为25%左右;通过研究底物浓度对酶活性的影响,得出该酶的活性不受底物浓度的抑制,以D-果糖为底物时,动力学参数Km为123.32mmol/L,Vmax为113.64μmol/(min·mg),催化效率kcat/Km为0.691 (s·mmol/L)。 展开更多
关键词 D-甘露糖 D-甘露糖异构酶 表达 生物制备
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环黄芪醇的应用及结构修饰的研究进展 预览
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作者 楚治良 高春芳 +3 位作者 刘欣 张静 郭宇冰 韩静 《实用医药杂志》 2019年第10期941-946,共6页
环黄芪醇是黄芪甲苷的苷元,主要存在于中药黄芪中,可以通过黄芪甲苷制备得到。研究发现该化合物可以提高端粒酶的活性,从而延缓细胞衰老。同时,环黄芪醇还具有很好的抗艾滋病病毒(HIV)、预防和治疗腹主动脉瘤、抗炎和抗氧化应激等药理... 环黄芪醇是黄芪甲苷的苷元,主要存在于中药黄芪中,可以通过黄芪甲苷制备得到。研究发现该化合物可以提高端粒酶的活性,从而延缓细胞衰老。同时,环黄芪醇还具有很好的抗艾滋病病毒(HIV)、预防和治疗腹主动脉瘤、抗炎和抗氧化应激等药理活性。目前文献报道环黄芪醇可通过生物转化或化学修饰的方法制得多种新结构化合物。故对环黄芪醇的应用及结构修饰的研究现象进行综述,为进一步探索新的具有药物活性的环黄芪醇类衍生物提供理论依据。 展开更多
关键词 环黄芪醇 黄芪甲苷 化学修饰 生物转化
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黄素依赖型卤化酶的研究进展及应用
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作者 曾佳 占纪勋 《生命科学仪器》 2019年第4期34-45,共12页
卤化物在医药化工领域有着不可替代的地位,然而传统的有机化学卤代反应因其严苛的反应条件和高毒性而限制了推广应用。随着生物化学中酶反应的发展,卤代酶以高效率条件温和的特点被逐渐重视起来。在已发现的各类不同种类以及各样作用机... 卤化物在医药化工领域有着不可替代的地位,然而传统的有机化学卤代反应因其严苛的反应条件和高毒性而限制了推广应用。随着生物化学中酶反应的发展,卤代酶以高效率条件温和的特点被逐渐重视起来。在已发现的各类不同种类以及各样作用机理的卤代酶中,黄素依赖型卤代酶(flavin-dependent halogenases)具有良好的底物特异性以及稳定的催化位点选择性。而通过对蛋白结构的研究以及突变改进酶的特性,这类卤代酶被证明可以用于工业生产以及药物开发。尽管目前对于黄素依赖型的研究正处于起步阶段,但其广泛的分布性以及稳定可控的特性给未来的应用带来光明的前景。 展开更多
关键词 卤化酶 黄素依赖型 催化反应 生物转化
微生物转化制备20-去甲基DM1 预览
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作者 阮海宁 张鑫培 滕云 《发酵科技通讯》 CAS 2019年第3期168-172,185共6页
T-DM1是由曲妥珠单抗和美登素衍生物DM1通过硫醚连接物共价连接的抗体-药物偶联物,20-去甲基DM1是用于T-DM1药代动力学评价的一种重要化合物。以扁平链霉菌(Streptomyces platensis)CGMCC 4.1975作为出发菌株,以DM1中间体Ⅱ为底物,可以... T-DM1是由曲妥珠单抗和美登素衍生物DM1通过硫醚连接物共价连接的抗体-药物偶联物,20-去甲基DM1是用于T-DM1药代动力学评价的一种重要化合物。以扁平链霉菌(Streptomyces platensis)CGMCC 4.1975作为出发菌株,以DM1中间体Ⅱ为底物,可以制备20-去甲基DM1中间体Ⅱ。进一步优化转化反应的底物质量浓度和转化时间,在发酵培养48 h后,添加2.9 g/L的DM1中间体Ⅱ底物0.5 mL,继续培养至72 h结束,可以获得24.4 mg/L 20-去甲基DM1中间体Ⅱ,通过分离纯化和巯基还原,制备得到20-去甲基DM1,产率达到19.3%。利用高效液相色谱(HPLC)、液相-质谱(LC-MS)和核磁共振(NMR)进行分析,结果表明,转化产物为20-去甲基DM1。 展开更多
关键词 T-DM1 20-去甲基DM1 微生物转化 扁平链霉菌
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西洋参中人参皂苷的真菌生物转化研究进展 预览 被引量:1
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作者 陈琪琪 吴晗琪 +2 位作者 高秀君 蔡小雨 闫培生 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2019年第5期220-224,共5页
西洋参作为一种名贵的中药材,有着多种多样的化学成分以及非常广泛的生物活性,深受世界各国人民的青睐,人参皂苷是其主要的活性成分。通过对不同真菌(食药用真菌、丝状真菌、西洋参内生真菌)对西洋参及人参皂苷的生物转化,转化产物的种... 西洋参作为一种名贵的中药材,有着多种多样的化学成分以及非常广泛的生物活性,深受世界各国人民的青睐,人参皂苷是其主要的活性成分。通过对不同真菌(食药用真菌、丝状真菌、西洋参内生真菌)对西洋参及人参皂苷的生物转化,转化产物的种类,成分变化及其功效等内容进行综述,为西洋参高效开发利用提供一定的参考价值。 展开更多
关键词 真菌 西洋参 人参皂苷 生物转化 活性成分
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响应面法优化重组亚油酸异构酶产酶条件 预览
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作者 张斯璇 刘瑛 +6 位作者 时旭 史海粟 杜阿楠 武俊瑞 岳喜庆 乌日娜 洛雪 《现代食品科技》 EI CAS 北大核心 2019年第8期174-179,330共7页
共轭亚油酸(CLA)广泛存在于多种食物中,具有减肥、抗癌、抗动脉粥状硬化和抗糖尿病等诸多生理活性。为了获得活性CLA高产,本文将突变的亚油酸异构酶克隆到大肠杆菌中表达,单因素试验确定最优产酶条件为发酵时间18 h、IPTG诱导浓度0.2mmo... 共轭亚油酸(CLA)广泛存在于多种食物中,具有减肥、抗癌、抗动脉粥状硬化和抗糖尿病等诸多生理活性。为了获得活性CLA高产,本文将突变的亚油酸异构酶克隆到大肠杆菌中表达,单因素试验确定最优产酶条件为发酵时间18 h、IPTG诱导浓度0.2mmol/L、20%装液、培养基初始p H7、诱导前菌体生物量OD600=0.4、LA浓度0.5mg/m L、离子浓度0.02%;在此基础上采用响应曲面法优化重组大肠杆菌培养条件提高生产亚油酸异构酶的能力,根据响应面法实验结果分析显示,发酵时间、诱导前生物量和LA浓度对重组亚油酸异构酶的表达有显著影响且均为正效应。三个影响因素最佳组合为发酵时间19.5h、诱导前生物量OD600=0.47和LA浓度0.57 mg/mL,此时预测亚油酸异构酶催化LA转化为CLA最大量为143.33μg/m L。验证显示,发酵CLA的产量为141.75±0.14μg/m L,与预测产量相符;通过优化设计,提高了107.5%。 展开更多
关键词 共轭亚油酸 亚油酸异构酶 响应面法 生物转化
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海葵来源真菌Cochliobolus lunatus(TA 26-46)对土霉素生物转化的研究
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作者 薛莹 石晓慧 +2 位作者 侯雪梅 武京帅 王长云 《中国海洋药物》 CAS CSCD 2019年第5期41-46,共6页
目的研究海葵来源真菌Cochliobolus lunatus (TA26-46)对土霉素的生物转化作用。方法通过在察氏固体培养基平板中添加土霉素,利用海洋真菌体内特殊的转化酶系统对土霉素进行生物转化;利用高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-DAD)进行... 目的研究海葵来源真菌Cochliobolus lunatus (TA26-46)对土霉素的生物转化作用。方法通过在察氏固体培养基平板中添加土霉素,利用海洋真菌体内特殊的转化酶系统对土霉素进行生物转化;利用高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-DAD)进行转化产物的追踪,并运用硅胶柱层析和半制备型HPLC等分离纯化转化产物,利用核磁、质谱等现代波谱分析方法对转化产物进行结构鉴定,并测试转化产物的抗菌活性。结果海洋真菌C.lunatus(TA26-46)对土霉素(1)产生了生物转化作用,从发酵物中分离鉴定得到2个土霉素的降解产物hemi-cyclines A和B(2和3)。抗菌活性测试结果表明,降解产物未显示抗菌活性。结论通过生物学方法,利用海洋真菌C.lunatus(TA26-46)成功对四环类抗生素土霉素进行了生物转化,获得了无抗菌活性的降解产物,为解决环境中的抗生素污染问题提供了借鉴。 展开更多
关键词 海葵来源真菌 Cochliobolus lunatus 土霉素 生物转化
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