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小麦-长穗偃麦草异染色体系筛选与鉴定 预览
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作者 殷月辉 徐勤省 +3 位作者 亓斐 鲍印广 王洪刚 李兴锋 《山东农业科学》 2019年第4期1-6,共6页
二倍体长穗偃麦草(Thinopyrum elongatum (Host) A. Love,2n=2x=14,EE)具有抗病性强、耐盐碱、抗旱、多花多实等优异性状。为明确引进的小麦-长穗偃麦草后代种质系的染色体遗传组成,本研究综合利用原位杂交与分子标记技术结合田间农艺... 二倍体长穗偃麦草(Thinopyrum elongatum (Host) A. Love,2n=2x=14,EE)具有抗病性强、耐盐碱、抗旱、多花多实等优异性状。为明确引进的小麦-长穗偃麦草后代种质系的染色体遗传组成,本研究综合利用原位杂交与分子标记技术结合田间农艺性状对其进行鉴定。结果表明,16份小麦-长穗偃麦草种质系中,L20161461、L20161462两份材料是二体异附加系,分别附加6E和7E染色体;L20160940、L20160942、L20161457、L20161459四份材料是二体异代换系,分别是4E/4D、4E/4D、1E/1D、3E/3B;与中国春相比,L20160947的千粒重增幅57.02%,达到极显著水平;在2.2%NaCl溶液处理下,L20160940的耐盐性高于中国春。本研究为这些材料在小麦遗传改良中的进一步利用奠定了基础。 展开更多
关键词 长穗偃麦草 小麦 异附加系 异代换系 原位杂交 分子标记
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半滑舌鳎gata5基因的克隆及表达分析 预览
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作者 董忠典 张宁 +2 位作者 崔忠凯 徐文腾 陈松林 《广东海洋大学学报》 CAS 2019年第3期6-14,共9页
【目的】研究半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)gata5基因(csgata5)的序列特征及该基因在半滑舌鳎性腺分化、成熟过程中的表达模式。【方法】通过克隆获得csgata5编码区序列,利用荧光定量PCR(RT-qPCR)方法检测csgata5 mRNA在不同类型性... 【目的】研究半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)gata5基因(csgata5)的序列特征及该基因在半滑舌鳎性腺分化、成熟过程中的表达模式。【方法】通过克隆获得csgata5编码区序列,利用荧光定量PCR(RT-qPCR)方法检测csgata5 mRNA在不同类型性腺、胚胎和性腺发育中的表达模式,借助原位杂交技术定位csgata5 mRNA表达的细胞类型。【结果】克隆获得csgata5 cDNA序列1 777 bp,包含1 167 bp的编码区(Coding sequence,CDS),262 bp的5′UTR和348 bp的3′UTR区,预测csgata5编码388个氨基酸残基(aa),分子质量为41.9 ku,等电点为8.90,在C端含有两个典型的GATA锌指结构域;基因组分析显示csgata5位于半滑舌鳎10号染色体上,包含7个外显子和6个内含子区。RT-qPCR分析显示csgata5 mRNA在2龄雄鱼和伪雄鱼精巢中表达高于卵巢;csgata5m RNA主要定位在卵母细胞、精原细胞和精子中。胚胎发育过程中,csgata5m RNA表达在1细胞期至囊胚期呈下降趋势,之后上升,至原肠胚期达到峰值,随后降低并维持较低水平至孵化出膜。在精巢发育过程中,csgata5m RNA表达水平呈升高趋势,在1龄达到检测的峰值;在卵巢发育过程中,csgata5m RNA表达趋势类似精巢,表达水平低于同期精巢。【结论】csgata5参与半滑舌鳎原肠胚期的组织器官分化,具有促进原始生殖细胞向雄性生殖细胞分化及雄性生殖细胞发育的作用。 展开更多
关键词 半滑舌鳎 gata5 RT-QPCR 原位杂交 性腺分化
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空芯针穿刺活检术与微创旋切活检术在乳腺疾病诊断中的应用比较
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作者 杨奕 陈益定 +3 位作者 朱娟英 王超仙 杨兴霞 夏光发 《实用肿瘤杂志》 CAS 2019年第3期261-265,共5页
目的探讨空芯针穿刺活检术(core needle biopsy, CNB)与微创旋切活检术(vacuum-assisted biopsy, VAB)对有活检指征患者的临床诊断价值,比较两种方法在乳腺疾病诊断、免疫组织化学判断及荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridizatio... 目的探讨空芯针穿刺活检术(core needle biopsy, CNB)与微创旋切活检术(vacuum-assisted biopsy, VAB)对有活检指征患者的临床诊断价值,比较两种方法在乳腺疾病诊断、免疫组织化学判断及荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization, FISH)检验等方面的差异。方法选取150例行CNB的患者,同时选择150例年龄、肿块大小和乳腺影像报告和数据系统(breast imaging reporting and data system, BI-RADS)分类情况相似的行VAB的病例进行配对分析,统计两种活检方式诊断的准确率及术前和术后免疫组织化学、FISH检验的符合率,同时比较两种活检方式术中和术后并发症情况。结果 VAB组与CNB组术前、术后病理诊断一致率分别为98.0%和96.7%(P=0.395)。VAB组65例导管内原位癌(ductal carcinoma in situ, DCIS)中5例为浸润性导管癌(invasive ductal carcinoma, IDC),CNB组64例DCIS中22例为IDC(P=0.034)。VAB组未发现非典型性导管增生(atypical ductal hyperplasia, ADH)病例的鉴定误差,CNB组2例ADH中1例为IDC(P=0.021)。VAB比CNB需要更长的操作时间(P<0.01),疼痛评分报告VAB的疼痛程度与CNB相似(P=0.962)。结论空芯针穿刺活检术是一种简便易行、安全且并发症少的可靠诊断技术,值得临床推广应用。而微创旋切活检术针体更粗、取材更充分,可能在免疫组织化学的判断上更具优势,病理符合率也更加明显,特别是对于IDC低估率明显降低。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤/诊断 最小侵入性外科手术/方法 乳腺肿瘤/外科学 活组织检查 针吸 穿刺术 免疫组织化学 原位杂交 荧光
菌根真菌定殖检测技术研究进展 预览
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作者 史丽琦 郭世辉 +1 位作者 闫更轩 杨洪一 《黑龙江农业科学》 2019年第4期151-153,共3页
菌根真菌可与植物根系形成菌根共生体,从而影响植物生长发育。绝大多数菌根真菌促进植物生长,并能够促进植物抵御环境胁迫,因而了解菌根真菌在植物根部的定殖具有重要意义。本文对锥虫蓝染色法、免疫组化及免疫荧光技术、原位杂交这几... 菌根真菌可与植物根系形成菌根共生体,从而影响植物生长发育。绝大多数菌根真菌促进植物生长,并能够促进植物抵御环境胁迫,因而了解菌根真菌在植物根部的定殖具有重要意义。本文对锥虫蓝染色法、免疫组化及免疫荧光技术、原位杂交这几种主要的菌根真菌定殖检测技术进行了介绍,并对各方法的特点进行了评述。 展开更多
关键词 菌根 锥虫蓝染色法 免疫组化 原位杂交法
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移植微囊化嗅鞘细胞对神经病理性疼痛及L4-5段脊髓P2X7受体表达的影响
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作者 张文俊 熊梅娟 +2 位作者 周七保 孙弋 刘曾旭 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期280-284,共5页
目的探讨微囊化嗅鞘细胞移植对坐骨神经损伤引起病理性疼痛及L4-5段脊髓P2X7受体的表达影响。方法取1只健康SD大鼠,取其嗅球组织并运用差速贴壁方法,在体外进行嗅鞘细胞培养扩增。取48只健康SD大鼠,随机分成4组,即对照组(control)、慢... 目的探讨微囊化嗅鞘细胞移植对坐骨神经损伤引起病理性疼痛及L4-5段脊髓P2X7受体的表达影响。方法取1只健康SD大鼠,取其嗅球组织并运用差速贴壁方法,在体外进行嗅鞘细胞培养扩增。取48只健康SD大鼠,随机分成4组,即对照组(control)、慢性压迫性坐骨神经损伤组(CCI)、嗅鞘细胞移植组(OECs)及微囊化嗅鞘细胞移植组(MC-OECs)。术后7 d及14 d,运用行为学方法检测各组大鼠机械缩足反射阈值,运用原位杂交方法检测各组大鼠L4-5段脊髓P2X7受体阳性细胞百分比及平均吸光度表达情况。结果术后7 d及14 d,与对照组比较,CCI组大鼠机械缩足反射阈值明显减低,L4-5段脊髓P2X7受体阳性细胞百分比及平均吸光度明显增加(P<0.05);与CCI组比,OECs组大鼠机械缩足反射阈值明显增高,P2X7受体阳性细胞百分比及平均吸光度明显减低(P<0.05),与OECs组对比,MC-OECs组大鼠机械缩足反射更高。P2X7受体阳性细胞百分比及平均吸光度更低(P<0.05)。结论微囊化嗅鞘细胞移植能更好地缓解神经病理性疼痛,减低L4-5段脊髓内P2X7受体的表达水平,修复坐骨神经损伤。 展开更多
关键词 嗅鞘细胞 微囊化 移植 L4.5段脊髓 P2X7受体 原位杂交 大鼠
曼氏无针乌贼神经肽sCAP基因克隆与组织表达定位 预览
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作者 李颖 周宇鑫 +5 位作者 单雨菡 黄伟 刘慧慧 平洪领 史会来 迟长凤 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期778-785,共8页
为研究曼氏无针乌贼(Sepiella japonica)小心激肽(small cardioactive peptides,sCAP)生理功能,通过RACE技术克隆曼氏无针乌贼sCAP基因(简称SjsCAP,GenBank登录号:MG779491),得到总长度为696 bp的cDNA序列,包括111 bp的5′非编码区(UTR)... 为研究曼氏无针乌贼(Sepiella japonica)小心激肽(small cardioactive peptides,sCAP)生理功能,通过RACE技术克隆曼氏无针乌贼sCAP基因(简称SjsCAP,GenBank登录号:MG779491),得到总长度为696 bp的cDNA序列,包括111 bp的5′非编码区(UTR)和324 bp的3′UTR,预测的开放阅读框(ORF)共261 bp,编码86个氨基酸,相对分子量(MW)为9.331 kD,等电点(pI)为8.52。信号肽以及跨膜区预测结果表明,sCAP中含有明显的信号肽序列和跨膜区结构。因此,推测该蛋白可能由细胞内分泌到细胞外发挥作用。亲水性分析显示该蛋白为亲水性蛋白。基于sCAP氨基酸序列进行的系统进化分析表明曼氏无针乌贼与商乌贼(Sepia officinalis)亲缘关系最近,相似性达到90%。通过荧光定量PCR (Quantitative real-time PCR,qRT-PCR)技术对SjsCAP基因在成熟雄性和雌性曼氏无针乌贼不同组织中的表达量进行分析,结果显示sCAP主要在视叶中显著表达,在脑中也有较高的表达量,其中雄性个体表达量显著高于雌性个体。原位杂交实验结果显示sCAP基因在曼氏无针乌贼的脑组织的视叶、食道上神经团的垂直叶、亚垂直、脑脚叶、背外侧叶和视腺均可以观察到明显的阳性杂交信号。sCAP基因的成功克隆以及组织表达定位分析为sCAP的亚细胞定位以及生物学功能研究奠定一定的基础,同时为曼氏无针乌贼的种质资源保护与开发提供一定的理论支持。 展开更多
关键词 曼氏无针乌贼 SCAP 生物信息学 荧光定量PCR 原位杂交
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骨髓活检组织EBER原位杂交检测影响因素分析 预览
7
作者 郑捷 方庆全 涂金花 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2019年第2期162-166,共5页
目的探讨骨髓活检组织行EBV encoded RNA(EBER)原位杂交检测的影响因素,优化检测条件以期提高骨髓活检组织中EB 病毒的检出率。方法收集35 例EB 病毒相关疾病的骨髓活检标本,通过对比实验,比较不同脱钙方法、不同蛋白酶K 消化条件、不... 目的探讨骨髓活检组织行EBV encoded RNA(EBER)原位杂交检测的影响因素,优化检测条件以期提高骨髓活检组织中EB 病毒的检出率。方法收集35 例EB 病毒相关疾病的骨髓活检标本,通过对比实验,比较不同脱钙方法、不同蛋白酶K 消化条件、不同抗体孵育温度下的骨髓活检组织行EBER 原位杂交检测的切片质量、脱片率及染色质量情况。结果脱钙以运用改良EDTA 脱钙液脱钙20~24h 后流水冲洗30min~1h 最佳;蛋白酶K 消化时间为9min 的组织切片脱片率低,杂交效果最好,阳性细胞着色深,定位准确;在37℃条件下进行抗体孵育杂交染色质量为佳。结论选取合适的脱钙方式,延长蛋白酶K 消化时间,选择最佳抗体孵育温度,可降低脱片率,显著提高骨髓活检组织行EBER 原位杂交检测的染色质量,为EBV 相关疾病的诊断和鉴别诊断提供重要依据。 展开更多
关键词 骨髓活检组织 EBER 原位杂交 影响因素
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荧光原位杂交技术联合尿脱落细胞学、膀胱肿瘤抗原对尿路上皮细胞肿瘤的诊断效能分析 预览
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作者 熊钻 梅玉峰 +5 位作者 王春阳 魏宝珍 刘萍 王亚 沈利华 刘庆 《国际检验医学杂志》 CAS 2019年第10期1201-1204,共4页
目的分析UroVysion荧光原位杂交技术、尿脱落细胞学联合膀胱肿瘤抗原(BTA)诊断上尿路上皮细胞癌的效能,为上尿路上皮细胞癌的诊断提供理论依据。方法选取2014-2017年鄂州市鄂钢医院泌尿外科经膀胱镜活检确诊为上尿路上皮细胞癌患者105... 目的分析UroVysion荧光原位杂交技术、尿脱落细胞学联合膀胱肿瘤抗原(BTA)诊断上尿路上皮细胞癌的效能,为上尿路上皮细胞癌的诊断提供理论依据。方法选取2014-2017年鄂州市鄂钢医院泌尿外科经膀胱镜活检确诊为上尿路上皮细胞癌患者105例作为观察组,选取同期来鄂州市鄂钢医院进行健康体检者100例作为对照组,观察并分析UroVysion荧光原位杂交技术、尿脱落细胞学联合BTA诊断上尿路上皮细胞癌的效果。结果UroVysion荧光原位杂交技术检测诊断上尿路上皮细胞癌的灵敏度、特异度分别为81.90%、92.00%,尿脱落细胞学联合BTA检测诊断上尿路上皮细胞癌的灵敏度、特异度分别为37.14%、93.00%,前者灵敏度明显高于后者,差异有统计学意义(P<0.05),而二者特异性比较,差异无统计学意义(P>0.05)。2种方法随上尿路上皮细胞癌分级的升高检测阳性率逐渐升高,且各类型上尿路上皮细胞癌比较,UroVysion荧光原位杂交技术检出率明显高于尿脱落细胞学联合BTA,差异有统计学意义(P<0.05)。3种方法联合检测诊断上尿路上皮细胞癌的灵敏度、准确度均明显高于单独使用UroVysion荧光原位杂交技术、或尿脱落细胞学联合BTA检测。结论UroVysion荧光原位杂交技术检测上尿路上皮细胞癌的灵敏度、特异度均较好,是一种快速、无创、安全的检测方法,联合尿脱落细胞学与BTA检测可显著提高诊断上尿路上皮细胞癌的准确度,具有良好的应用前景。 展开更多
关键词 原位杂交 荧光 尿/细胞学 抗原 肿瘤/分析 肿瘤 敏感性与特异性
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ALK融合基因阳性非小细胞肺癌的临床研究进展 预览
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作者 刘颖蕾 虞永峰 陆舜 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期527-535,共9页
肺癌是世界上发病率最高的恶性肿瘤,且是癌症死亡的首要原因。80%~85%的肺癌为非小细胞肺癌(NSCLC),NSCLC中间变淋巴瘤激酶(ALK)融合基因阳性率为3%~7%。近年来,针对ALK融合基因的靶向治疗药物发展迅速,克唑替尼、艾乐替尼、劳拉替尼等... 肺癌是世界上发病率最高的恶性肿瘤,且是癌症死亡的首要原因。80%~85%的肺癌为非小细胞肺癌(NSCLC),NSCLC中间变淋巴瘤激酶(ALK)融合基因阳性率为3%~7%。近年来,针对ALK融合基因的靶向治疗药物发展迅速,克唑替尼、艾乐替尼、劳拉替尼等ALK抑制剂的临床使用显著改善了ALK阳性晚期NSCLC患者的生存,而ALK融合基因阳性对早期NSCLC患者预后的影响尚不明确,其是否能从ALK抑制剂治疗中获益仍未可知。该文对ALK融合基因的作用机制、临床病理特征、检测方法、ALK融合基因阳性对NSCLC患者预后的影响及ALK抑制剂的最新进展进行简要阐述,以期为临床工作提供参考。 展开更多
关键词 非小细胞肺 间变性淋巴瘤激酶 原位杂交 荧光 ALK抑制剂 预后
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CLARITY组织透明化技术在蜜蜂肠道组织上的运用 预览
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作者 张洋逸 黄伟峰 +3 位作者 何楠 李佳欢 陈文锋 黄少康 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期703-709,共7页
【目的】以西方蜜蜂Apis mellifera工蜂肠道为例探究组织透明化技术--丙烯酰胺交联替换脂质透明硬化成像/免疫染色/原位杂交兼容组织水凝胶(clear lipid-exchanged acrylamide-hybridized rigid imaging/immunostaining/in situ hybridi... 【目的】以西方蜜蜂Apis mellifera工蜂肠道为例探究组织透明化技术--丙烯酰胺交联替换脂质透明硬化成像/免疫染色/原位杂交兼容组织水凝胶(clear lipid-exchanged acrylamide-hybridized rigid imaging/immunostaining/in situ hybridization-compatible tissue-hYdrogel, CLARITY)在昆虫组织上的应用,确定CLARITY与荧光原位杂交(FISH)相结合在昆虫肠道组织透明化中的适用性。【方法】依照CLARITY技术操作程序,用水凝胶固定西方蜜蜂肠道,并以被动方式透明化,再用靶向东方蜜蜂微孢子虫Nosema ceranae 16S rRNA带异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate, FITC)标记和靶向真核细胞18S rRNA带Texas RED标记的寡核苷酸荧光探针进行肠道组织的荧光原位杂交,然后用DAPI(蓝色)进行细胞核复染,通过激光共聚焦显微镜观察透明化的染色组织。【结果】首次成功将西方蜜蜂肠道组织透明化。在激光共聚焦显微镜下,观察到马氏管的原始分布形态,以及东方蜜蜂微孢子虫在中肠末端分布更密集的空间分布特征,并实现了对肠道组织的3D重构。【结论】CLARITY能应用于蜜蜂肠道组织透明化,透明化组织能进行原位杂交和激光共聚焦观察。CLARITY和FISH相结合免除抗体制备和石蜡切片的麻烦,直观展示肠道内部的真实状态,为昆虫生理病理研究提供了一种可靠特异的标记方法。 展开更多
关键词 西方蜜蜂 东方蜜蜂微孢子虫 组织透明化技术 肠道 激光共聚焦显微镜 原位杂交
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MicroRNA-146a表达与乳腺癌临床分子亚型的相关性研究 预览
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作者 付明刚 郭丽英 《中国现代医学杂志》 CAS 2019年第3期43-46,共4页
目的检测microRNA-146a(miR-146a)在不同临床分子亚型的乳腺癌组织中的表达,分析miR-146a与分子亚型之间的相关性。方法选取新疆医科大学第一附属医院乳腺浸润性导管癌患者手术标本185例,应用原位杂交技术检测乳腺癌石蜡组织中miR-146a... 目的检测microRNA-146a(miR-146a)在不同临床分子亚型的乳腺癌组织中的表达,分析miR-146a与分子亚型之间的相关性。方法选取新疆医科大学第一附属医院乳腺浸润性导管癌患者手术标本185例,应用原位杂交技术检测乳腺癌石蜡组织中miR-146a的表达情况,应用χ^2检验和秩和检验分析miR-146a表达水平在不同临床分子亚型的乳腺癌之间的关系。结果4组不同临床分子亚型的浸润性乳腺癌组织中,miR-146a在LuminaA型中的阳性表达率最高,而miR-146a在basal-like型的阴性表达率最高,临床分子亚型中miR-146a表达差异有统计学意义(P<0.05),进一步分组检验,Lumina A型较basal-like型阳性表达率与Basallike型比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论miR-146a在浸润性乳腺癌组织中的表达与其临床分子亚型相关,浸润性乳腺癌组织中miR-146a阳性表达程度高提示预后较佳,其有望成为乳腺癌新的预后分子判断标志。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 MICRORNAS 原位杂交 分子亚型
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马氏珠母贝(Pinctada fucata martensii)PmHEX基因的功能研究
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作者 范闪闪 郑哲 +2 位作者 郝瑞娟 王庆恒 杜晓东 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期19-24,共6页
几丁质是软体动物贝壳有机框架的重要成分,其代谢在贝壳矿化中发挥重要作用。β-N-乙酰-己糖胺酶(HEX, EC3.2.1.52)是几丁质代谢的关键水解酶。为了探究马氏珠母贝β-N-乙酰-己糖胺酶(Pm HEX)(登录号:MF555152)在贝壳形成中的作用,本研... 几丁质是软体动物贝壳有机框架的重要成分,其代谢在贝壳矿化中发挥重要作用。β-N-乙酰-己糖胺酶(HEX, EC3.2.1.52)是几丁质代谢的关键水解酶。为了探究马氏珠母贝β-N-乙酰-己糖胺酶(Pm HEX)(登录号:MF555152)在贝壳形成中的作用,本研究利用原位杂交(ISH)技术检测Pm HEX基因在外套膜的定位,结果显示Pm HEX的mRNA主要分布于外侧褶的外上皮细胞、中褶的内侧上皮细胞和内褶上皮细胞。利用RNAi技术抑制Pm HEX表达后,Pm HEX在边缘区和套膜区的表达量均显著下调;SEM观察发现实验组的棱柱层和珍珠层的微观结构都出现不同程度的紊乱。综上所述,Pm HEX可能通过影响几丁质代谢,参与马氏珠母贝贝壳棱柱层和珍珠层的矿化过程。 展开更多
关键词 马氏珠母贝 β-N-乙酰-己糖胺酶 贝壳矿化 RNAI 原位杂交
CXCR7在人脑胶质瘤中的表达及意义 预览
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作者 张贺军 朱军 《华北理工大学学报:医学版》 2019年第1期49-52,共4页
①目的探讨CXCR7蛋白及CXCR7mRNA的表达水平与人脑胶质瘤病理分级之间的关系。②方法采用SP免疫组织化学及原位杂交方法检测60例胶质瘤肿瘤组织以及30例非肿瘤脑组织中CXCR7蛋白、CXCR7mRNA及的表达。③结果CXCR7蛋白及CXCR7mRNA在非肿... ①目的探讨CXCR7蛋白及CXCR7mRNA的表达水平与人脑胶质瘤病理分级之间的关系。②方法采用SP免疫组织化学及原位杂交方法检测60例胶质瘤肿瘤组织以及30例非肿瘤脑组织中CXCR7蛋白、CXCR7mRNA及的表达。③结果CXCR7蛋白及CXCR7mRNA在非肿瘤组未见表达。CXCR7蛋白在60例的胶质瘤组织中的阳性表达为43例,其中在胶质瘤Ⅰ~Ⅱ级、Ⅲ、Ⅳ级组中阳性表达率为50%、74.1%、94.7%,其中Ⅰ~Ⅱ级与Ⅳ级组,Ⅲ、Ⅳ级组比较(P<0.05)。CXCR7mRNA在60例病理切片中有40例阳性表达,Ⅰ~Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级胶质瘤阳性表达率为40%、66.6%、94.7%,其中Ⅰ~Ⅱ级与Ⅳ级组比较(P<0.05)。④结论CXCR7蛋白、CXCR7mRNA的阳性表达随着胶质瘤的病理分级升高而递增,与其发生、发展密切相关。 展开更多
关键词 CXCR7 胶质瘤 免疫组化 原位杂交
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原位杂交技术在检测HBV核酸和cccDNA中的应用 预览
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作者 徐通 张小楠 袁正宏 《临床肝胆病杂志》 CAS 北大核心 2019年第6期1197-1200,共4页
原位杂交技术(ISH)是分子生物学、组织化学及细胞学相结合而产生的一门新兴技术,能够在细胞和染色体水平上对特定核酸进行定量与定位,广泛应用于病毒学研究。ISH对于HBV中的核酸(RNA、复制中间体DNA),以及共价闭合环状DNA的检测有着重... 原位杂交技术(ISH)是分子生物学、组织化学及细胞学相结合而产生的一门新兴技术,能够在细胞和染色体水平上对特定核酸进行定量与定位,广泛应用于病毒学研究。ISH对于HBV中的核酸(RNA、复制中间体DNA),以及共价闭合环状DNA的检测有着重要意义,就这一技术的发展以及在HBV研究中的应用作梳理与总结。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 共价闭合环状DNA 原位杂交
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间变性淋巴瘤激酶阳性的Spitz肿瘤临床病理学特征及预后
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作者 任静 任敏 +2 位作者 孔蕴毅 蔡旭 孔今城 《中华病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期215-219,共5页
目的探讨间变性淋巴瘤激酶(ALK)阳性的Spitz肿瘤临床病理学特征及预后。方法收集2016年10月至2017年12月间复旦大学附属肿瘤医院诊断的ALK阳性Spitz肿瘤病例13例,常规行HE染色和免疫组织化学染色检测ALK蛋白表达,对7例行荧光原位杂交(FI... 目的探讨间变性淋巴瘤激酶(ALK)阳性的Spitz肿瘤临床病理学特征及预后。方法收集2016年10月至2017年12月间复旦大学附属肿瘤医院诊断的ALK阳性Spitz肿瘤病例13例,常规行HE染色和免疫组织化学染色检测ALK蛋白表达,对7例行荧光原位杂交(FISH)检测ALK相关融合基因,并进行随访。结果患者男性2例,女性11例,年龄4~47岁(平均年龄25岁)。12例诊断为不典型Spitz肿瘤,1例诊断为Spitz痣。临床上,多数患者表现为丘疹或结节,少数为扁平斑块。组织学上,大多数病变以外生型构型为主(9/13),半数以上病例无明显黑色素沉着,表皮内交界成分以黑色素细胞巢团状分布为主,未见Kamino小体。肿瘤基底部构型主要以楔形(5/13)及平坦形为主(7/13)。肿瘤细胞形态为上皮样细胞与梭形细胞混合型8例,单一梭形细胞形态5例,所有病变细胞均呈丛状和/或交叉束状生长模式,3例存在小神经包绕。13例ALK免疫组织化学检测均示肿瘤细胞胞质弥漫强阳性,其中7例行FISH检测证实存在ALK融合基因。所有患者均获随访,随访时间7~21个月(中位数为12个月),均未出现局部复发或淋巴结播散。结论伴有ALK融合基因的Spitz肿瘤具有其特殊的组织病理学特征,主要发生于Spitz痣及不典型Spitz肿瘤中,其临床生物学行为可能较好。 展开更多
关键词 皮肤肿瘤 原位杂交 荧光 免疫组织化学 预后
纽约食管鳞状上皮癌抗原1在黏液样脂肪肉瘤中的表达及病理诊断价值
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作者 黑淑敏 卫红军 +1 位作者 陈桦 王继纲 《中华病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期225-230,共6页
目的探讨纽约食管鳞状上皮癌抗原1(NY-ESO-1)在常见黏液样软组织肿瘤中的表达情况及其在黏液样脂肪肉瘤中的鉴别诊断价值。方法收集2010—2017年青岛大学附属医院和青岛市市立医院存档的黏液样软组织肿瘤石蜡标本43例,采用免疫组织化学E... 目的探讨纽约食管鳞状上皮癌抗原1(NY-ESO-1)在常见黏液样软组织肿瘤中的表达情况及其在黏液样脂肪肉瘤中的鉴别诊断价值。方法收集2010—2017年青岛大学附属医院和青岛市市立医院存档的黏液样软组织肿瘤石蜡标本43例,采用免疫组织化学EnVision法检测NY-ESO-1的表达,荧光原位杂交(FISH)法检测DDIT3基因状态,逆转录聚合酶链反应(PCR)检测NY-ESO-1 mRNA的表达。结果组织病理学及FISH结果证实本组病例共有11例黏液样脂肪肉瘤和32例其他类型的黏液样肿瘤(包括7例高分化脂肪肉瘤、1例去分化脂肪肉瘤、3例脂肪瘤、2例脂肪母细胞瘤和19例非脂肪源性肿瘤)。免疫组织化学结果显示黏液样脂肪肉瘤中NY-ESO-1阳性表达比例为11/11,阳性部位位于脂肪母细胞的细胞质和细胞核,在具有圆细胞分化的区域表达强度更高。32例其他类型肿瘤中,仅有1例高分化脂肪肉瘤表达NY-ESO-1。在7例(7/11)黏液样脂肪肉瘤和1例(1/7)高分化脂肪肉瘤中检测到NY-ESO-1 mRNA的表达。结论 NY-ESO-1在黏液样脂肪肉瘤表达比例较高,可作为黏液样脂肪肉瘤与其他黏液样肿瘤的鉴别诊断标志物。 展开更多
关键词 脂肪肉瘤 黏液样 免疫组织化学 逆转录聚合酶链反应 原位杂交 荧光 NY-ESO-1蛋白
复合型环保试剂超声组织快速处理技术对肿瘤活检标本蛋白及分子检测的影响
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作者 郑波 王鹏姣 +3 位作者 薛丽燕 刘秀云 郭蕾 应建明 《中华病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期116-119,共4页
目的探讨使用固定、脱水、透明三合一复合型环保试剂超声组织快速处理技术对肿瘤活检标本进行前处理,对后续靶标检测的影响。方法收集2017年2—4月在中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院进行手术的乳腺癌、结直肠癌、肺癌、胃癌、肝... 目的探讨使用固定、脱水、透明三合一复合型环保试剂超声组织快速处理技术对肿瘤活检标本进行前处理,对后续靶标检测的影响。方法收集2017年2—4月在中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院进行手术的乳腺癌、结直肠癌、肺癌、胃癌、肝脏肿物、膀胱肿物、子宫肿物等术后组织标本共56例,模拟术前活检标本进行取材,每例标本取材3块,直径为1~3 mm,分别归入对照组(传统活检组织处理方法)、实验1组(3.7%中性缓冲甲醛固定、复合型环保试剂超声组织快速处理技术建议方法)和实验2组(复合型环保试剂直接固定、较高组织处理温度和较长组织处理时间)。两位病理学家盲法复核实验1组、实验2组的共计43例全自动免疫组织化学检测HER2、Napsin A、甲状腺转录因子(TTF)1、MLH1的细胞核、胞质、胞膜染色结果,4例HER2荧光原位杂交(FISH)结果,20例DNA提取质量及4例肺腺癌EGFR基因突变检测结果,与对照组进行比较。结果实验1组免疫组织化学染色、HER2 FISH、DNA提取质量、EGFR基因突变检测与对照组结果完全一致。实验2组免疫组织化学染色、HER2 FISH及DNA提取质量与对照组及实验1组结果无明显差异,但可能会引起免疫组织化学染色背景增加。实验2组较高处理温度和较长处理时间未对EGFR基因突变检测结果造成影响。结论复合型环保试剂超声组织快速处理技术可以应用到肿瘤活检标本快速检测中,复合型环保试剂可以起到补充固定作用,较高处理温度和较长处理时间对免疫组织化学、FISH及基因突变检测准确性无明显影响。 展开更多
关键词 组织固定 活组织检查 针吸 免疫组织化学 原位杂交 荧光 DNA突变 分析
蚤状溞caspase-3基因在不同环境条件下的表达分析 预览
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作者 吴乐乐 叶功照 +1 位作者 童巧琼 王丹丽 《生物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期29-34,共6页
以蚤状溞(Daphniapulex)为研究对象,采用Real-TimePCR技术分析了蚤状溞caspase-3mRNA表达水平随着不同培养温度、种群密度和食物种类变化;用Caspase-3的特异性底物Ac-DEVD-AMC测定了Caspase-3酶活在不同培养温度、种群密度和食物种类条... 以蚤状溞(Daphniapulex)为研究对象,采用Real-TimePCR技术分析了蚤状溞caspase-3mRNA表达水平随着不同培养温度、种群密度和食物种类变化;用Caspase-3的特异性底物Ac-DEVD-AMC测定了Caspase-3酶活在不同培养温度、种群密度和食物种类条件下的变化,并通过整体原位杂交检测了caspase-3基因在蚤状溞不同生殖状态下的定位表达。研究结果:蚤状溞caspase-3mRNA表达量随着温度和种群密度的增加而增加;以Banta培养液培养的蚤状溞caspase-3mRNA表达量与小球藻培养的表达量无显著差异(P>0.05);且caspase-3mRNA的表达量与Caspase-3酶活的变化规律相一致;整体原位杂交结果显示,caspase-3基因在蚤状溞活体细胞几乎都有表达,在两性溞中表达量较高,孤雌成溞中表达量较低。caspase-3基因的表达与环境有关,而蚤状溞的衰老和caspase-3mRNA的表达及Caspase-3的酶活有关,但环境因子如何影响caspase-3基因的表达进而调控枝角类生殖转换还需今后进一步的研究。 展开更多
关键词 蚤状溞 CASPASE-3基因 MRNA表达 酶活 原位杂交
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马氏珠母贝贝壳基质蛋白基因Pm-PNU7的克隆和功能研究 预览
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作者 黄荣莲 范闪闪 杜晓东 《广东海洋大学学报》 CAS 2019年第1期22-29,共8页
【目的】研究马氏珠母贝(Pinctada martensii)贝壳基质蛋白(Shell Matrix Proteins,SMPs)基因(Pm-PNU7)表达与功能。【方法】利用马氏珠母贝基因组和蛋白质组信息分析和RACE技术克隆获得壳基质蛋白新基因Pm-PNU7全长序列,通过原位杂交... 【目的】研究马氏珠母贝(Pinctada martensii)贝壳基质蛋白(Shell Matrix Proteins,SMPs)基因(Pm-PNU7)表达与功能。【方法】利用马氏珠母贝基因组和蛋白质组信息分析和RACE技术克隆获得壳基质蛋白新基因Pm-PNU7全长序列,通过原位杂交对其进行定位,RNA干扰检测其对贝壳形成的影响。【结果】Pm-PNU7的cDNA全长为797 bp,编码145个氨基酸,具有特殊的“KGG”重复序列和富含天冬氨酸(Asp)序列“DDDDDDHDD”。qRT-PCR分析表明,Pm-PNU7基因在外套膜边缘区和套膜区显著高表达(P<0.05);ISH检测显示,Pm-PNU7主要定位于边缘区外褶外侧和内侧上皮细胞、中褶内侧上皮细胞以及套膜区外侧上皮细胞。RNA干扰后,Pm-PNU7在外套膜边缘区和套膜区的表达量均显著下调,贝壳棱柱层和珍珠层微观结构均出现不同程度的紊乱。【结论】Pm-PNU7参与了贝壳棱柱层和珍珠层的形成。 展开更多
关键词 马氏珠母贝 贝壳基质蛋白 原位杂交 RNA干扰
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致病性副溶血性弧菌菌落杂交检测体系的优化 预览
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作者 徐马俊坤 冯博 +3 位作者 张昭寰 孙晓红 潘迎捷 赵勇 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2018年第3期23-28,共6页
对常见食源性致病菌副溶血性弧菌的杂交条件进行了优化。基于副溶血性弧菌的tdh,trh,toxR基因选用了3种探针序列,从菌落杂交样品的预处理方法、杂交时间和显色检测等方面对基于副溶血性弧菌毒力基因的原位杂交实验进行了条件优化。结果... 对常见食源性致病菌副溶血性弧菌的杂交条件进行了优化。基于副溶血性弧菌的tdh,trh,toxR基因选用了3种探针序列,从菌落杂交样品的预处理方法、杂交时间和显色检测等方面对基于副溶血性弧菌毒力基因的原位杂交实验进行了条件优化。结果表明,采用80℃热固定2 h,37℃预杂交10 min后杂交8 h以及封闭1 h的改良方法可获得高特异性、低背景且着色清晰的实验结果。优化的菌落杂交技术检测副溶血性弧菌与传统检测方法相比,具有高效、准确、可区分致病性菌株的优点,为水产品中副溶血性弧菌致病菌株和非致病菌株的同步检测和筛选提供参考。 展开更多
关键词 致病株 副溶血性弧菌 原位杂交 菌落杂交
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