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物理损伤主导促进小鼠肝脏肿瘤生长的研究
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作者 赵广银 苏乔 +4 位作者 李雯雯 李武国 李文英 黄浩机 曹伟杰 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期452-454,共3页
目的观察物理损伤因素在无免疫调节因素的情况下,对小鼠肝脏肿瘤早期生长的促进作用。方法以重度免疫缺陷NCG小鼠作为建模对象,建立两类肝脏肿瘤模型。模型一:脾脏注射人肝癌SMMC-7721-RFP-Luc2细胞,建立脾脏注射肝转移动物模型,其中实... 目的观察物理损伤因素在无免疫调节因素的情况下,对小鼠肝脏肿瘤早期生长的促进作用。方法以重度免疫缺陷NCG小鼠作为建模对象,建立两类肝脏肿瘤模型。模型一:脾脏注射人肝癌SMMC-7721-RFP-Luc2细胞,建立脾脏注射肝转移动物模型,其中实验组(n=7)物理损伤小鼠肝左外叶,对照组(n=6)无损伤;模型二:人肝癌SMMC-7721-RFP-Luc2细胞成瘤后组织块移植小鼠肝脏肝左外叶,建立组织块肝脏原位移植动物模型,其中实验组(n=7)物理损伤小鼠肝左外叶,对照组(n=6)无损伤。利用活体成像系统比较两种模型肝脏物理损伤与否与肝脏部位肿瘤生长速度的关系。结果脾脏注射肝转移动物模型第11天行活体成像检测,物理损伤组小鼠成瘤率100%(7/7),对照组成瘤率60%(3/5),两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。组织块肝脏原位移植动物模型第7天行活体成像检测,物理损伤组小鼠成瘤率100%(5/5),对照组成瘤率66.7%(4/6),两组比较差异有统计学意义(P<0.05);第14天行活体成像检测,物理损伤组小鼠成瘤率100%(5/5),对照组成瘤率83.3%(5/6),两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论物理损伤因素在无免疫调节因素的情况下,对小鼠肝脏肿瘤早期生长具有显著促进作用。 展开更多
关键词 肝细胞癌 物理损伤 模型 动物 活体成像系统
组织自发荧光在电刺激治疗新生大鼠缺氧缺血性脑损伤中的运用
2
作者 张晓钿 李红海 +2 位作者 田树红 谭鹏 符健 《中国新药杂志》 CSCD 北大核心 2017年第21期2578-2583,共6页
目的:采用荧光检测技术,探讨组织自发荧光在电刺激治疗新生大鼠缺氧缺血性脑损伤中的运用。方法:60只SD新生大鼠,雌雄兼有,按体重随机分为假手术组、电刺激组和模型组,每组20只。用Rice-Vannucci法制作新生大鼠缺氧缺血性脑损伤模型,... 目的:采用荧光检测技术,探讨组织自发荧光在电刺激治疗新生大鼠缺氧缺血性脑损伤中的运用。方法:60只SD新生大鼠,雌雄兼有,按体重随机分为假手术组、电刺激组和模型组,每组20只。用Rice-Vannucci法制作新生大鼠缺氧缺血性脑损伤模型,采用caliper精诺真IVIS小动物活体成像仪器检测新生大鼠脑组织的自发荧光。通过荧光检测,比较模型组、电刺激组和假手术组新生大鼠对应的脑组织部位自发荧光强弱的变化。结果:3组新生大鼠脑组织从完整到局部及切片的检测结果显示,损伤部位的自发荧光信号显著增强,模型组大鼠损伤面积和程度最严重,脑组织自发荧光强度由弱到强分别为假手术组→电刺激组→模型组。结论:荧光强度越强,表明损伤越严重。电刺激治疗能减轻损伤的面积和程度。本研究为电刺激治疗新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的研究及其评价提供了新的方法。 展开更多
关键词 新生大鼠 脑组织 自发荧光 缺氧缺血性脑损伤 活体成像系统
人结肠癌原位移植瘤裸小鼠模型的活体成像观察 预览 被引量:2
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作者 赵永江 朱淼鑫 +5 位作者 袁立新 孙磊 耿沁 李静 姚明 闫明霞 《实验动物与比较医学》 CAS 2016年第3期174-179,共6页
目的 建立人结肠癌原位移植瘤裸小鼠模型,探讨小动物活体成像系统在结肠癌原位移植瘤模型中的应用.方法 应用慢病毒转染的方法建立同时表达绿色荧光蛋白及荧光素酶(GFP/Luc)的人结肠癌细胞HCT-116,分别采用组织决法及培养细胞法建立... 目的 建立人结肠癌原位移植瘤裸小鼠模型,探讨小动物活体成像系统在结肠癌原位移植瘤模型中的应用.方法 应用慢病毒转染的方法建立同时表达绿色荧光蛋白及荧光素酶(GFP/Luc)的人结肠癌细胞HCT-116,分别采用组织决法及培养细胞法建立裸小鼠结肠癌原位移植瘤模型,通过小动物活体成像系统动态观察肿瘤在肠原位的生长及转移情况.结果 成功建立了稳定表达GFP/Luc的人结肠癌细胞,并应用该细胞成功建立了结肠癌原位移植瘤动物模型.经连续7周动态观察表明,随着肿瘤移植时间的延长,腹部皮下触诊显示肿瘤逐渐增大,小动物活体成像显示荧光素表达面积和强度也逐渐增大.结论 小动物活体成像系统能够客观评价结肠癌的原位生长及转移情况,为体内深部肿瘤的观察和研究提供了有效的参考依据. 展开更多
关键词 人结肠癌 原位移植 活体成像系统 慢病毒载体
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组织自发荧光在大鼠心肌缺血实验中的应用 预览
4
作者 李峰杰 张金艳 +4 位作者 何萍 李贻奎 赵乐 郝伟 李连达 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期885-888,共4页
目的基于特定的荧光检测技术,探讨组织自发荧光在大鼠心肌缺血性损伤实验中的应用。方法本研究通过Kodak FX Pro活体成像技术检测大鼠心肌组织的自发荧光。通过荧光检测,比较正常大鼠和心肌缺血性损伤大鼠的心肌组织对应部位自发荧光... 目的基于特定的荧光检测技术,探讨组织自发荧光在大鼠心肌缺血性损伤实验中的应用。方法本研究通过Kodak FX Pro活体成像技术检测大鼠心肌组织的自发荧光。通过荧光检测,比较正常大鼠和心肌缺血性损伤大鼠的心肌组织对应部位自发荧光的变化,并进行定量分析。结果心肌缺血损伤后,损伤部位组织自发荧光信号明显增强,将荧光信号通过活体成像系统进行定量,与正常心肌组织比较差异有统计学意义。结论大鼠心肌组织在心肌缺血损伤后,心肌组织的自发荧光明显增强,为大鼠心肌缺血损伤模型的研究及其评价提供新的方法。有利于定位、定性、定量比较研究,可用于病理、生理、药理及作用机制等多方面研究。 展开更多
关键词 大鼠 心肌组织 心肌缺血损伤 N-BT 自发荧光 活体成像系统 定量分析
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人肺癌原位移植瘤模型的建立及活体成像观察 预览 被引量:1
5
作者 刘乾 刘松 +1 位作者 韩锋锋 郭雪君 《实验动物与比较医学》 CAS 2016年第4期250-256,共7页
目的 通过建立人肺癌原位移植瘤模型,研究人肺癌高、低转移细胞的体内生物学特性.方法 应用慢病毒转染的方法建立同时表达绿色荧光蛋白及荧光素酶(GFP/Luc)的人肺癌低转移细胞SPC-A-1和高转移细胞SPC-A-1sci,在此基础上,建立裸小鼠肺... 目的 通过建立人肺癌原位移植瘤模型,研究人肺癌高、低转移细胞的体内生物学特性.方法 应用慢病毒转染的方法建立同时表达绿色荧光蛋白及荧光素酶(GFP/Luc)的人肺癌低转移细胞SPC-A-1和高转移细胞SPC-A-1sci,在此基础上,建立裸小鼠肺原位移植瘤动物模型,采用小动物活体成像技术和解剖学方法观察肿瘤在肺原位的生长及转移情况.结果 成功建立了稳定表达GFP/Luc的人肺癌高、低转移细胞,并成功建立了肺癌原位移植瘤动物模型.小动物活体成像系统检测显示,SPC-A-1-GFP-Luc和SPC-A-1 sci-GFP-Luc细胞模型中荧光素酶表达率分别为50%(12/24)和62.5%(20/32),SPC-A-1 sci-GFP-Luc组荧光素酶表达的面积及表达强度高于SPC-A-1-GFP-Luc组.解剖学检查显示,SPC-A-1和SPC-A-lsci组的肺原位成瘤率分别为50%(12/24)和62.5% (20/32);体内自发转移率分别为25% (3/12)和40% (8/20).结论 通过建立肺原位移植瘤动物模型能够再现肿瘤在肺内的生长及转移等生物学特性,小动物活体成像系统能够对其生物学特性进行客观评价. 展开更多
关键词 人肺癌 原位移植 活体成像系统 慢病毒载体
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自然杀伤T淋巴细胞对黑色素瘤细胞的免疫调节及杀伤功能实验研究 预览
6
作者 黄建敏 师煜博 陈忠华 《国际检验医学杂志》 CAS 2016年第5期613-615,共3页
目的探讨自然杀伤T淋巴细胞(NKT细胞)在细胞免疫调节及杀伤功能中的作用。方法建立混合淋巴细胞培养(MLC)体系,B16F10-luc-G5细胞作为靶细胞,以总淋巴细胞为效应细胞。(1)调节效应实验以NKT细胞或CD4~+CD25~+T淋巴细胞为调节细胞,分为3... 目的探讨自然杀伤T淋巴细胞(NKT细胞)在细胞免疫调节及杀伤功能中的作用。方法建立混合淋巴细胞培养(MLC)体系,B16F10-luc-G5细胞作为靶细胞,以总淋巴细胞为效应细胞。(1)调节效应实验以NKT细胞或CD4~+CD25~+T淋巴细胞为调节细胞,分为3组:NKT组、CD4~+CD25~+T组、靶细胞空白对照组;另设有1640空白对照组(RPMI1640溶液)。(2)杀伤效应实验以NKT或自然杀伤(NK)细胞为效应细胞,分为3组:NKT组、NK组、靶细胞空白对照组。混合培养24、48、72h后,通过活体成像系统检测该培养系统的靶细胞生物发光,以监测NKT细胞的调节及杀伤效应。结果 (1)调节效应实验:NKT组及CD4~+CD25~+T组测定光子数分别与两空白对照组比较,以及NKT组内培养24h与72h时测得光子数比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。(2)杀伤效应实验:NKT组及NK组与靶细胞空白对照组所测光子数比较,差异均有统计学意义(P<0.05);且培养24、72h时NKT组与NK组光子数比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 NKT细胞具有抑制总淋巴细胞对靶细胞的杀伤效应,且抑制效应具有时间性,其调节作用较CD4~+CD25~+T淋巴细胞强。NKT细胞具有对靶细胞的杀伤效应,但较NK细胞弱。 展开更多
关键词 自然杀伤T淋巴细胞 自然杀伤细胞 CD4+CD25+T淋巴细胞 B16F10-luc-G5细胞 活体成像系统
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组织自发荧光在大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤中的应用 预览 被引量:1
7
作者 田树红 王日超 +1 位作者 邢桂兰 符健 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期1473-1476,共4页
目的基于特定的荧光检测技术,探讨组织自发荧光在大鼠局灶性脑缺血及再灌注损伤中的应用.方法本研究通过caliper精诺真IVIS活体成像技术检测大鼠脑组织的自发荧光.通过荧光检测,比较正常大鼠和局灶性脑缺血/再灌注损伤大鼠脑组织对应部... 目的基于特定的荧光检测技术,探讨组织自发荧光在大鼠局灶性脑缺血及再灌注损伤中的应用.方法本研究通过caliper精诺真IVIS活体成像技术检测大鼠脑组织的自发荧光.通过荧光检测,比较正常大鼠和局灶性脑缺血/再灌注损伤大鼠脑组织对应部位自发荧光强弱的变化,并进行定量分析.结果实验结果表明,局灶性脑缺血/再灌注损伤脑组织的自发荧光发生了明显变化,损伤部位的自发荧光信号明显增强,将荧光信号通过活体成像系统进行定量,与正常脑组织比较差异有统计学意义,P〈0.01.结论大鼠脑组织在局灶性脑缺血/再灌注损伤后,脑组织的自发荧光明显增强,为大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤模型的研究及其评价提供新的方法. 展开更多
关键词 大鼠 脑组织 自发荧光 局灶性脑缺血/再灌注 活体成像系统
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牛磺酸在重型颅脑创伤裸鼠体内的分布
8
作者 王伟 黄慧玲 +3 位作者 杨铭 武俏丽 温晓昶 姚鑫 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期86-88,共3页
目的应用小动物活体成像技术观察牛磺酸(Tau)在重型颅脑创伤裸鼠体内的分布及代谢。方法将32只雄性BALB/C裸鼠随机分为正常(normal)组、假手术(sham)组、牛磺酸治疗(TBI·Tau)组和脑创伤染料组(TBI·Cy7)。后两组用... 目的应用小动物活体成像技术观察牛磺酸(Tau)在重型颅脑创伤裸鼠体内的分布及代谢。方法将32只雄性BALB/C裸鼠随机分为正常(normal)组、假手术(sham)组、牛磺酸治疗(TBI·Tau)组和脑创伤染料组(TBI·Cy7)。后两组用液压打击仪制作左侧重型脑创伤模型,sham组在相同位置只开骨窗,不予打击。TBI-Tau、sham组伤后立即尾静脉注射Cy7.Tau,TBI。Cy7组注射游离Cy7,normal组不做处理,直接注射Cy7-Tau,剂量均为5mg/kg。给药后1、2.4、8、12、24h行活体成像。结果各组给药后体内荧光强度灰度值12h内呈线性下降,Tau主要通过肾脏代谢;sham组手术切口皮缘24h仍有较高浓度Tau富集(0.0340±0.0058);TBI.Tau组1、2.4、8h体内荧光灰度值均强于sham组(P〈0.05),24h离体脑组织成像显示TBI-Tau组脑创伤处有高浓度Tau富集(0.640±0.096,与sham组比较,P〈0.01)。结论活体成像技术可实时监测Tau在颅脑创伤裸鼠体内的分布、代谢,Tau主要通过肾脏代谢,在脑创伤区域、皮肤切口处有特异性富集并长时间存在。 展开更多
关键词 颅脑创伤 牛磺酸 分布 活体成像
稳定表达hTERT/Luc的小鼠黑色毒瘤肺转移模型的建立 被引量:3
9
作者 肖毅 高江平 +6 位作者 高昆 阎瑾琦 张亮 王宇 徐元基 王晓雄 于继云 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期89-92,共4页
目的建立稳定共表达荧光素酶基因和人端粒酶逆转录酶(hTERT)的小鼠黑色素瘤B16细胞系,并通过尾静脉注射的方式建立小鼠肿瘤肺转移模型。方法利用DNA重组技术将hTERT基因和荧光素酶基因Luc定向插入到真核表达载体,构建真核表达质粒pI... 目的建立稳定共表达荧光素酶基因和人端粒酶逆转录酶(hTERT)的小鼠黑色素瘤B16细胞系,并通过尾静脉注射的方式建立小鼠肿瘤肺转移模型。方法利用DNA重组技术将hTERT基因和荧光素酶基因Luc定向插入到真核表达载体,构建真核表达质粒pIRES—neo—hTERT和pIRES-hyg3-Luc,利用阳离子脂质体Lipofectamine 2000共转染小鼠黑色素瘤B16细胞,经G418及潮霉素B加压筛选出稳定转染的细胞株。应用Westernblot法及免疫荧光法检测hTERT和Luc基因在B16细胞中的表达;将稳定共表达hTERT和Luc的B16-hTERT/Luc细胞株通过尾静脉注射的方式接种雄性C57BL/6小鼠建立肿瘤肺转移模型,并通过活体成像技术检测小鼠肺部肿瘤的生长。结果建立了稳定共表达hTERT和Luc的小鼠黑色素瘤B16单克隆细胞株B16-hTERT/Luc,经检测hTERT基因和荧光素酶基因Luc在单克隆细胞株中的表达分别为84%和98%。通过尾静脉注射的方式成功建立了小鼠肿瘤肺转移模型,应用活体成像技术能方便地检测到B16.hTERT/Luc肿瘤在小鼠体内的生长情况。结论成功建立了可用于活体成像技术检测的稳定表达hTERT的小鼠黑色素瘤肺转移模型。 展开更多
关键词 荧光素酶 HTERT 活体成像 移植瘤
基于活体成像的裸小鼠肺癌移植瘤模型建立及意义 预览 被引量:1
10
作者 姜昱竹 谢书阳 +1 位作者 胡雪梅 王跃嗣 《山东医药》 CAS 2013年第2期22-24,共3页
目的建立可供生物学功能研究或药物评价的稳定表达绿色荧光蛋白的小鼠肺癌移植瘤模型。方法用脂质体将绿色荧光蛋白表达载体pEGFP—N1转染至人非小细胞肺癌细胞株NCI—H358,经G418筛选获得稳定表达绿色荧光蛋白的NCI—H358-GFP细胞,... 目的建立可供生物学功能研究或药物评价的稳定表达绿色荧光蛋白的小鼠肺癌移植瘤模型。方法用脂质体将绿色荧光蛋白表达载体pEGFP—N1转染至人非小细胞肺癌细胞株NCI—H358,经G418筛选获得稳定表达绿色荧光蛋白的NCI—H358-GFP细胞,接种至裸小鼠皮下建立移植瘤模型。采用活体成像系统连续5周监测小鼠皮下NCI—H358-GFP细胞的动态生长情况。结果获得了在体外及裸小鼠体内均能够长期稳定表达绿色荧光蛋白的NCI—H358-GFP细胞。其接种后裸小鼠皮下全部成瘤,活体成像系统观察发现,随着NCI—H358-GFP细胞接种时间延长,移植瘤体积逐渐增大,荧光光子数逐渐增加。结论成功构建可用于活体成像的裸小鼠肺癌移植瘤模型;该模型可作研究肺癌发生发展机制及抗肿瘤药物的重要工具。 展开更多
关键词 肺肿瘤 绿色荧光蛋白 裸小鼠 移植瘤 活体成像
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慢病毒介导荧光素酶表达的人鼻咽癌细胞小鼠模型的建立 被引量:2
11
作者 吕景礼 李二毛 +2 位作者 李晓艳 周问渠 刘启才 《现代生物医学进展》 CAS 2013年第36期7005-7009,共5页
目的:建立荧光素酶标记的人鼻咽癌细胞裸鼠模型,活体成像系统监测肿瘤的生长并与肿瘤的体积进行对比。方法:构建表达荧光素酶基因2(1uc2)的慢病毒载体,与辅助质粒共转染293T细胞以制备慢病毒,感染人鼻咽癌SUNEl细胞后经嘌呤霉素... 目的:建立荧光素酶标记的人鼻咽癌细胞裸鼠模型,活体成像系统监测肿瘤的生长并与肿瘤的体积进行对比。方法:构建表达荧光素酶基因2(1uc2)的慢病毒载体,与辅助质粒共转染293T细胞以制备慢病毒,感染人鼻咽癌SUNEl细胞后经嘌呤霉素筛选获得表达luc2的细胞株。活体成像设备体外检测不同数量细胞的发光强度,最后以5×10 6个细胞皮下接种BALB/cnu/nu裸鼠,活体成像系统动态记录接种后肿瘤的信号并与肿瘤的体积对比。结果:成功构建慢病毒表达质粒pLenti.1uc2并包装出慢病毒颗粒,病毒感染后嘌呤霉素筛选6天得到鼻咽癌细胞株SUNEl一luc2。细胞株传代后有稳定的发光强度,且经活体检测的每秒光子数与细胞数成正相关(R2=0.96);活体成像观察发现裸鼠接种第2天接种部位的发光强度就达到3-2×10^8,而且成瘤过程中发光强度的变化与肿瘤大小一致。结论:成功构建适用于活体成像的人鼻咽癌SUNEl细胞的裸鼠成瘤模型,该模型从细胞接种开始即可有效动态监测鼻咽癌皮下瘤的生长及转移,从而为鼻咽癌的成瘤机制及药物干预研究提供一个新的手段。 展开更多
关键词 荧光素酶 SUNE1细胞 慢病毒 活体成像
用于活体成像的小鼠肝癌移植瘤模型的建立 预览 被引量:6
12
作者 陈惠 李坤雨 +3 位作者 陈斐 严惠明 韩泽广 邓庆 《兰州大学学报:医学版》 CAS 2012年第1期 10-15,共6页
目的建立可用于活体成像的小鼠肝癌移植瘤模型。方法利用脂质体将荧光素酶表达载体pGL3(LUC/NEO)转染至人肝癌细胞株SMMC-7721、Huh-7、Hep3B、MHCC-97H、HCC-LM6、PLC/PRF/5中,经G418筛选获得稳定表达荧光素酶的细胞克隆。根据体外... 目的建立可用于活体成像的小鼠肝癌移植瘤模型。方法利用脂质体将荧光素酶表达载体pGL3(LUC/NEO)转染至人肝癌细胞株SMMC-7721、Huh-7、Hep3B、MHCC-97H、HCC-LM6、PLC/PRF/5中,经G418筛选获得稳定表达荧光素酶的细胞克隆。根据体外生物发光情况及细胞的生长特性,从中挑选合适克隆,进行裸鼠皮下接种,建立肝癌移植瘤模型。利用活体成像系统监测肿瘤的生长转移情况,并对肝脏组织进行HE染色分析肿瘤细胞的生长分布特点。结果建立了6株肝癌细胞株的荧光素酶基因稳定表达的亚克隆,并且体外验证了各种细胞株中的荧光素酶活性情况;裸鼠皮下成瘤实验显示了SMMC-7721~(Luc+)、Huh7~(Luc+)、PLC/PRF/5~(Luc+)、MHCC-97H~(Luc+)稳定细胞具有成瘤特性;裸鼠肝脏原位注射肝癌细胞(SMMC-7721~(Luc+)、MHCC-97H~(Luc+)、HCC-LM6~(Luc+)、PLC/PRF/5~(Luc+)),利用活体成像系统能够有效对活体肿瘤生长情况进行监测;裸鼠脾动脉注射肝癌细胞(MHCC-97H~(Luc+)、PLC/PRF/5~(Luc+)),利用活体成像系统能够监测到小鼠肝癌模型的生长状况,之后处死小鼠,对肝脏组织HE染色发现肝癌细胞局部分布于肝脏中。结论本研究成功地构建了可用于活体成像的小鼠肝癌移植瘤模型,模型稳定可靠、直观、灵敏,为肿瘤生长转移机制的研究及抗肿瘤药物的研发提供了重要工具。 展开更多
关键词 荧光素酶 肝癌 移植瘤 活体成像
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整合荧光素酶的稳定细胞克隆建立裸鼠肺癌静脉移植瘤模型的探索 预览 被引量:4
13
作者 张金栋 吕景礼 +2 位作者 周问渠 刘启才 李晓艳 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2012年第7期 1055-1057,共3页
目的:应用建立的整合荧光素酶的稳定细胞克隆构建裸鼠肺癌模型,并用活体成像技术检测肿瘤成瘤及变化。方法:细胞计数分析其生长特性,体外测定不同数量的细胞的发光强度;尾静脉注射接种BLAB/c nu/nu裸鼠,活体成像系统监测裸鼠体内肿瘤... 目的:应用建立的整合荧光素酶的稳定细胞克隆构建裸鼠肺癌模型,并用活体成像技术检测肿瘤成瘤及变化。方法:细胞计数分析其生长特性,体外测定不同数量的细胞的发光强度;尾静脉注射接种BLAB/c nu/nu裸鼠,活体成像系统监测裸鼠体内肿瘤的生长及转移,肿瘤组织切片验证移植瘤的病理特性。结果:在稳定表达荧光素酶的SPC-A-1-luc+细胞基因组中能有效扩增到荧光素酶基因;该细胞系具有与母细胞相同的生长曲线,体外检测发现其发光强度与细胞数量呈正相关;尾静脉接种裸鼠后肺部成瘤率为100%,且信号强度随时间递增。结论:建立了稳定整合Luciferase基因的肺腺癌细胞株SPC-A-1-luc+稳定克隆,尾静脉接种后可有效构建肺部肺腺癌成瘤模型,并可动态监测肿瘤的生长及转移。 展开更多
关键词 荧光素酶 SPC-A-1细胞 移植瘤 活体成像
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铁过载对小鼠血清骨转换指标的影响 被引量:6
14
作者 贾鹏 徐又佳 +3 位作者 张鹏 李冰燕 张增利 钱忠明 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期 312-314,共3页
目的观察铁过载小鼠骨质疏松模型中血清骨转换指标的变化。方法腹腔注射生理盐水和枸橼酸铁铵建立对照和高铁小鼠模型。小动物活体成像系统测定小鼠双侧股骨中段和第四腰椎骨密度。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中铁蛋白、骨特异... 目的观察铁过载小鼠骨质疏松模型中血清骨转换指标的变化。方法腹腔注射生理盐水和枸橼酸铁铵建立对照和高铁小鼠模型。小动物活体成像系统测定小鼠双侧股骨中段和第四腰椎骨密度。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中铁蛋白、骨特异性碱性磷酸酶(BALP)、骨钙素(BGP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP一5b)、I型胶原C端肽(CTX)、核因子KB受体活化因子配体(RANKL)、骨保护素(OPG)含量。结果高铁组小鼠双侧股骨中段和第四腰椎骨密度显著低于对照组(P〈0.05)。高铁组小鼠血清中铁蛋白、TRAP-5b、CTX、RANKL含量分别为(269.72±54.06)μg/L、(41.46±8.00)U/L、(7720.00±3554.00)pmol/L、(94.22±29.79)ng/L,显著高于对照组(101.18±17.10)μg/L、(19.57±9.02)U/L、(3140.00±632.00)pmol/L、(47.70±15.08)ng/L(P〈0.05);BALP、BGP含量分别为(7.84±1.74)μg/L、(58.54±4.60)μg/L,明显低于对照组(18.63±6.23)μg/L、(100.99±18.22)μg/L(P〈0.05);OPG含量两组之间差异无统计学意义(P〉0.05)。结论铁过载可能通过抑制骨形成,促进骨吸收引起小鼠骨质疏松。 展开更多
关键词 铁过载 骨质疏松 骨转换 活体成像系统
活体成像系统检测携荧光素酶增殖缺陷型腺病毒在小鼠体内的表达和分布 被引量:1
15
作者 孟希亭 林晨 +5 位作者 梅佳 王海娟 马飞 张金龙 张颖 钱海利 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期389-393,共5页
目的:研究携带荧光素酶的增殖缺陷型腺病毒(Ad-luciferase,Ad-Luci)经不同途径注射后小鼠体内荧光素酶的表达和分布,为肿瘤的腺病毒载体基因治疗提供参考。方法:建立人胰腺癌PANC-1细胞裸鼠移植瘤模型,Ad-Luci病毒单次或多次瘤体内... 目的:研究携带荧光素酶的增殖缺陷型腺病毒(Ad-luciferase,Ad-Luci)经不同途径注射后小鼠体内荧光素酶的表达和分布,为肿瘤的腺病毒载体基因治疗提供参考。方法:建立人胰腺癌PANC-1细胞裸鼠移植瘤模型,Ad-Luci病毒单次或多次瘤体内注射,或者肌内、尾静脉和腹腔注射Ad-Luci病毒至正常小鼠,采用IVIS Lumina活体成像系统观察荧光素酶在小鼠体内的分布和表达,并观察Ad-Luci病毒的毒性作用。结果:单次瘤内注射Ad-Luci荧光素酶在瘤内持续表达15 d,多次瘤内注射后表达时间更长。肌内注射组荧光素酶随时间延长表达减弱,注射后48 h无荧光素酶表达。尾静脉注射组荧光素酶大部分聚集在肝脏,注射后18 d仍有表达。腹腔注射组4 h后可见荧光素酶的表达,但7 d后无表达。Ad-Luci各注射组小鼠均未出现明显的毒性反应。结论:腺病毒携带外源基因经瘤内注射可在瘤内表达较长时间,多次注射可延长表达时间;经尾静脉注射后主要聚集在肝脏,且表达时间较长。 展开更多
关键词 腺病毒载体 胰腺癌 荧光素酶 活体成像系统 基因治疗
Quantitative Analysis of Cell Tracing by in vivo Imaging System 预览
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作者 郑俊猛 徐利军 +2 位作者 周鸿敏 张维娜 陈忠华 《华中科技大学学报:医学英德文版》 SCIE CAS 2010年第4期,共5页
In vivo imaging system (IVIS) is a new and rapidly expanding technology, which has a wide range of applications in life science such as cell tracing. By counting the number of photons emitted from a specimen, IVIS can... In vivo imaging system (IVIS) is a new and rapidly expanding technology, which has a wide range of applications in life science such as cell tracing. By counting the number of photons emitted from a specimen, IVIS can quantify biological events such as tumor growth. We used B16F10-luc-G5 tumor cells and 20 Babl/C mice injected subcutaneously with B16F10-luc-G5 tumor cells (1×106 in 100 μL) to develop a method to quantitatively analyze cells traced by IVIS in vitro and in vivo, respectively. The results showed a strong correlation between the number of tumor cells and the intensity of bioluminescence signal (R2=0.99) under different exposure conditions in in vitro assay. The results derived from the in vivo experiments showed that tumor luminescence was observed in all mice by IVIS at all days, and there was significant difference (P<0.01) between every two days from day 3 to day 14. Moreover, tumor dynamic morphology could be monitored by IVIS when it was in- visible. There was a strong correlation between tumor volume and bioluminescence signal (R2=0.97) by IVIS. In summary, we demonstrated a way to accurately carry out the quantitative analysis of cells using IVIS both in vitro and in vivo. The data indicate that IVIS can be used as an effective and quantitative method for cell tracing both in vitro and in vivo. 展开更多
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用于活体成像的小鼠肺癌移植瘤模型的建立 被引量:6
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作者 张海燕 李艳 +1 位作者 王喆 张必良 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期1204-1210,共7页
本研究旨在建立可用于活体成像的小鼠肺癌移植瘤模型。利用脂质体将荧光素酶表达载体pGL4.17(luc2/neo)转染至人非小细胞肺癌细胞株A549,经G418筛选获得稳定表达荧光素酶的细胞克隆。根据体外生物发光情况及细胞的生长特性,从中挑选... 本研究旨在建立可用于活体成像的小鼠肺癌移植瘤模型。利用脂质体将荧光素酶表达载体pGL4.17(luc2/neo)转染至人非小细胞肺癌细胞株A549,经G418筛选获得稳定表达荧光素酶的细胞克隆。根据体外生物发光情况及细胞的生长特性,从中挑选合适克隆,进行裸鼠皮下接种,SCID鼠尾静脉接种,建立肺癌移植瘤模型。利用活体成像系统监测肿瘤的生长转移情况,并用切片HE染色进一步验证小鼠模型移植瘤的原位成瘤和转移能力。实验结果表明:本研究成功地构建了可用于活体成像的小鼠肺癌移植瘤模型,模型稳定可靠、直观、灵敏,为肿瘤生长转移机制的研究及抗肿瘤药物的研发提供了重要工具。 展开更多
关键词 荧光素酶 A549细胞 动物模型 移植瘤 活体成像
三阴性裸鼠乳腺癌模型的构建及热层析检测 预览 被引量:1
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作者 霍慧萍 霍建彬 +1 位作者 万文博 李俊来 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期198-204,共7页
目的利用标记了荧光素酶和绿色荧光蛋白的人乳腺癌MDA-MB-231细胞系建立乳腺癌裸鼠移植瘤模型,用热层析成像仪联合超声对早期微小肿瘤进行检测。方法采用转染了慢病毒载体的人三阴性乳腺癌细胞系MDA-MB-231,经传代培养后接种于BALB/C裸... 目的利用标记了荧光素酶和绿色荧光蛋白的人乳腺癌MDA-MB-231细胞系建立乳腺癌裸鼠移植瘤模型,用热层析成像仪联合超声对早期微小肿瘤进行检测。方法采用转染了慢病毒载体的人三阴性乳腺癌细胞系MDA-MB-231,经传代培养后接种于BALB/C裸鼠的左肩胛部皮下、右侧第4对乳房垫下及尾静脉注射,利用热层析成像仪和超声仪在肿瘤生长早期进行检测,并用小动物活体成像仪监测肿瘤细胞在裸鼠体内的生长情况。结果成功构建了三阴性乳腺癌裸鼠皮下、原位移植瘤及转移癌模型。利用热层析成像仪和超声仪同时检测微小肿瘤,热层析成像仪对微小肿瘤的检出要早于超声检出。结论热层析成像仪可以较早期地监测到肿瘤的生长变化,探测到异常组织,有望为人类早期乳腺癌的筛查提供一个方便、快捷、灵敏和可靠的检查手段。 展开更多
关键词 三阴性乳腺癌 动物模型 热层析成像仪系统 小动物活体成像系统
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猫爪草提取物离子敏感型原位凝胶肺部药物释放及局部安全性初步评价 被引量:1
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作者 胡春晖 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期1163-1168,共6页
目的对制备的猫爪草提取物离子敏感型原位凝胶(RTRE-ISG)进行肺部滞留性、安全性及局部药物浓度的评价。方法以海藻酸钠作为辅料,猫爪草提取物(70%乙醇)作为溶剂,在室温下磁力搅拌使其充分溶胀,制备得到RTRE-ISG。大鼠通过气管介入... 目的对制备的猫爪草提取物离子敏感型原位凝胶(RTRE-ISG)进行肺部滞留性、安全性及局部药物浓度的评价。方法以海藻酸钠作为辅料,猫爪草提取物(70%乙醇)作为溶剂,在室温下磁力搅拌使其充分溶胀,制备得到RTRE-ISG。大鼠通过气管介入给药后,测定肺部灌洗液中的炎症因子和致纤维化因子水平,筛选出相对安全的处方;再采用Cy5.5作为荧光染料,借助小动物活体成像系统对RTRE-ISG肺部滞留性进行评价;最后运用改良肺泡灌洗技术,对大鼠肺部进行灌洗,测定局部药物浓度。结果 1%海藻酸钠RTRE-ISG在肺部安全性较好,荧光活体成像技术显示其可在肺部滞留120~144 h,肺部局部药物浓度的测定显示1%海藻酸钠RTRE-ISG在5 h释放达到峰值为5.24μg/m L,144 h药物浓度为0.08μg/m L。结论 RTRE-ISG在肺部可滞留120 h以上,可为中药治疗肺结核提供一种新型的缓释制剂。 展开更多
关键词 猫爪草 离子敏感型原位凝胶 肺部安全性 荧光活体成像 肺泡灌洗技术 介入疗法
乳腺癌细胞特异性MGA启动子的扩增及功能分析 预览
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作者 李金桥 梁培龙 +5 位作者 吴峰 杨超 张洪玉 魏力军 戴钟铨 李莹辉 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期1177-1182,共6页
目的探讨人乳腺球蛋白(mammaglobin A,MGA)基因启动子的乳腺肿瘤细胞特异性和调控元件,并验证MGA启动子载体系统在活体肿瘤组织中的表达活性。方法 PCR扩增5.6 kb大小的人MGA启动子片段,并在此基础上构建四个含有萤火虫荧光素酶报告基... 目的探讨人乳腺球蛋白(mammaglobin A,MGA)基因启动子的乳腺肿瘤细胞特异性和调控元件,并验证MGA启动子载体系统在活体肿瘤组织中的表达活性。方法 PCR扩增5.6 kb大小的人MGA启动子片段,并在此基础上构建四个含有萤火虫荧光素酶报告基因的重组载体;瞬时转染到乳腺癌细胞系T47D和人胚肾细胞系HEK293T后,利用双荧光素酶报告基因体系,检测各个MGA启动子活性;稳定转染MGA重组载体到乳腺癌细胞系T47D(T47DEM),进行裸鼠皮下造瘤,活体成像检测报告基因活性。结果 (1)双增强子的启动子活性低于单增强子启动子(降低82%);(2)定点删除YY1结合元件后,启动子活性下降76.2%,乳腺肿瘤细胞特异性下降38.4%;(3)定点删除Nkx2.5后,启动子活性没有明显变化,但特异性降低31.9%;(4)细胞株T47DEM在体形成肿瘤后,表现出明显的报告基因活性。结论研究了两个增强子叠加和两个转录因子结合位点(YY1和Nkx2.5)对MGA启动子活性和特异性的影响;构建的细胞株(T47DEM)可以用于治疗乳腺癌药物的在体筛选。 展开更多
关键词 乳腺特异性 MGA启动子 荧光素酶报告基因体系 皮下造瘤 活体成像系统
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