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重组铜绿假单胞菌外膜蛋白D的原核表达与多克隆抗体制备研究 预览
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作者 伍娜娜 荣娜 +5 位作者 康超 刘祥 陈琛 陈春琳 马心怡 吴三桥 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期99-105,共7页
为获得铜绿假单胞菌外膜蛋白OprD并研究其分子功能。本研究采用分子克隆构建OprD蛋白重组表达菌株,用正交试验设计方法获得OprD菌株的最优表达条件和培养条件,通过SDS-PAGE切胶的方法纯化OprD蛋白,小鼠免疫制备OprD多克隆抗血清,蛋白质... 为获得铜绿假单胞菌外膜蛋白OprD并研究其分子功能。本研究采用分子克隆构建OprD蛋白重组表达菌株,用正交试验设计方法获得OprD菌株的最优表达条件和培养条件,通过SDS-PAGE切胶的方法纯化OprD蛋白,小鼠免疫制备OprD多克隆抗血清,蛋白质印迹法检测抗血清的特异性。使用DNAMan和MEGA软件对OprD蛋白进行同源性和系统发生分析。结果表明,OprD重组载体双酶切、DNA测序鉴定结果、OprD蛋白表达与纯化条带大小分别与预测相符。正交试验获得OprD菌株的最优培养条件为:葡萄糖浓度为0,转速230r/min,装液量为50mL;最优表达条件为:菌液OD600=0.8时加入终浓度为0.3mmol/L的异丙基β-D-1硫代吡喃半乳糖苷(IPTG),37℃诱导12h。SDS-PAGE电泳切胶纯化获得纯度较高的OprD蛋白。蛋白质印迹法证实OprD蛋白抗血清具有较好的特异性。OprD蛋白序列系统发生分析发现,同菌属细菌存在较高的同源性,并且亲缘关系较近的细菌中OprD蛋白可能具有相似的分子功能。 展开更多
关键词 铜绿假单胞菌 外膜蛋白OprD 多克隆抗体 诱导条件
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大肠杆菌外膜蛋白F的原核表达、多克隆抗体制备及生物信息学分析 预览
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作者 伍娜娜 康超 +5 位作者 荣娜 刘祥 陈春琳 陈琛 丁锐 吴三桥 《河南农业科学》 北大核心 2019年第3期145-152,共8页
为获得大肠杆菌外膜蛋白OmpF并对其耐药性功能进行研究,通过分子克隆技术构建OmpF蛋白重组表达菌株,利用正交试验法获得OmpF菌株的最佳培养条件和表达条件,采用SDS-PAGE电泳切胶纯化方法获得OmpF蛋白,免疫小鼠获得OmpF蛋白多克隆抗体,We... 为获得大肠杆菌外膜蛋白OmpF并对其耐药性功能进行研究,通过分子克隆技术构建OmpF蛋白重组表达菌株,利用正交试验法获得OmpF菌株的最佳培养条件和表达条件,采用SDS-PAGE电泳切胶纯化方法获得OmpF蛋白,免疫小鼠获得OmpF蛋白多克隆抗体,Western blotting方法检测多克隆抗体的特异性,使用DNAMAN8.0与MEGA5.0软件对OmpF蛋白进行同源性和系统发生分析。结果显示,PCR扩增获得1089bp的ompF基因,成功构建pET-32a-ompF载体,其诱导表达产物分子质量为38ku,与预期大小一致。正交试验获得OmpF菌株的最佳培养条件为葡萄糖浓度为0,转速为230r/min,装液量为50mL;最佳表达条件为诱导时菌液OD600为0.5,IPTG终浓度为0.1mmol/L,诱导时间为8h,温度为28℃。SDS-PAGE切胶纯化获得高纯度的OmpF蛋白后,利用Western blotting证实OmpF蛋白抗血清具有较好的特异性。OmpF蛋白序列系统发生分析发现,OmpF蛋白在不同种类的细菌中具有较高的同源性,OmpF蛋白产生的抗体可能为不同种细菌的感染提供交叉免疫保护作用,并且不同种类细菌中OmpF蛋白可能具有相似的分子功能。 展开更多
关键词 大肠杆菌 外膜蛋白OmpF 原核表达 正交试验 诱导条件 生物信息学分析
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灵菌红素缩合酶PigC在大肠杆菌中表达条件优化 被引量:1
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作者 李景璇 梅晓彤 +2 位作者 章龙缨 戚展红 尤忠毓 《基因组学与应用生物学》 CSCD 北大核心 2018年第10期4357-4364,共8页
灵菌红素及其类似物具有良好的抗菌性能,在新型抗菌药物开发领域具有广阔的应用前景。灵菌红素缩合酶PigC是酶法合成灵菌红素及其类似物的关键酶,为了提高重组大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)/pET-32a-PigC中pigC基因的表达水平,... 灵菌红素及其类似物具有良好的抗菌性能,在新型抗菌药物开发领域具有广阔的应用前景。灵菌红素缩合酶PigC是酶法合成灵菌红素及其类似物的关键酶,为了提高重组大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)/pET-32a-PigC中pigC基因的表达水平,本研究对其诱导条件进行优化。在单因素实验结果的基础上,依据Box-Behnken中心组合原则设计培养基初始pH、乳糖浓度和诱导温度的3因素3水平响应面实验,以Pig C酶活为响应值优化重组菌的诱导条件。结果表明,在培养基初始pH7.1,乳糖浓度4.2 g/L,诱导温度为16.2℃的最佳条件下,该重组菌所产PigC的最高酶活达62.4 U/mL,是优化前的4.9倍,实际值与响应面预测值拟合良好,说明通过响应面试验设计对该重组菌诱导条件的优化是有效的。本研究为PigC的制备及其酶学特性研究提供了基础资料,为酶法合成灵菌红素及其类似物提供了一定的基础。 展开更多
关键词 灵菌红素 灵菌红素缩合酶PigC 诱导表达条件 响应面法 方差分析
兰州熊蜂(Bombus lantschouensis)SMPD基因原核表达诱导条件的优化 预览
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作者 韩蕾 董捷 +2 位作者 黄家兴 和绍禹 吴杰 《中国蜂业》 2017年第1期21-23,共3页
兰州熊蜂(Bombuslantschouensis)是我国优良熊蜂蜂种,已成功实现人工饲养并应用于设施作物授粉。鞘磷脂磷酸二酯酶(SMPD)是一种水解酶,参与鞘磷脂代谢过程并起关键作用。本研究从诱导温度、IPTG浓度及诱导时间三个因素对SMPD基因... 兰州熊蜂(Bombuslantschouensis)是我国优良熊蜂蜂种,已成功实现人工饲养并应用于设施作物授粉。鞘磷脂磷酸二酯酶(SMPD)是一种水解酶,参与鞘磷脂代谢过程并起关键作用。本研究从诱导温度、IPTG浓度及诱导时间三个因素对SMPD基因的原核表达进行优化,以期获得最佳原核表达条件。结果表明:诱导温度与诱导时间是影响SMPD蛋白表达量的主要因素,而诱导剂IPTG浓度影响较小。当温度为10℃,IPTG终浓度为0.1mM,诱导时间为32h时,目的蛋白表达量高,特异性好,能够满足该蛋白后续纯化实验要求。本研究结果为进一步开展SMPD蛋白功能研究奠定重要基础。 展开更多
关键词 兰州熊蜂 原核表达 SMPD基因 诱导条件
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海洋真菌MF-08产壳聚糖酶诱导条件及酶学性质分析 预览
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作者 李佳茵 王慧敏 祖国仁 《湖北农业科学》 2016年第7期1778-1781,共4页
通过研究不同摇床转速、不同碳源和碳源浓度、不同诱导碳源对海洋真菌MF-08产壳聚糖酶的影响,提高其产酶活性,并对海洋真菌MF-08产壳聚糖酶进行部分酶学性质研究。结果表明,最佳发酵条件为27℃,150 r/min,1.5%蔗糖,0.01%氨基葡萄糖,海... 通过研究不同摇床转速、不同碳源和碳源浓度、不同诱导碳源对海洋真菌MF-08产壳聚糖酶的影响,提高其产酶活性,并对海洋真菌MF-08产壳聚糖酶进行部分酶学性质研究。结果表明,最佳发酵条件为27℃,150 r/min,1.5%蔗糖,0.01%氨基葡萄糖,海水培养基发酵72 h。该壳聚糖酶的最适作用温度为40℃,最适pH 5.2,酶活在pH 4.0~6.0范围内和0~40℃相对稳定;Cu2+、Fe3+和Hg2+对该酶活具有明显的抑制作用。经过培养条件的优化,该菌的最高产酶活性达到1.769 U/m L,与优化前相比提高了7.56倍。 展开更多
关键词 海洋真菌MF-08 壳聚糖酶 诱导条件 酶学性质
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大肠埃希菌外膜蛋白OmpA表达质粒构建和诱导条件优化 被引量:15
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作者 刘祥 李惠 《生物技术》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期14-19,共6页
目的:构建大肠埃希菌外膜蛋白OmpA原核表达载体,优化OmpA蛋白的表达条件。方法:通过分子克隆获得OmpA蛋白的表达菌株;采用正交试验,获得OmpA菌株的最佳表达条件与培养条件。结果:OmpA重组载体双酶切、DNA测序鉴定与预测结果一致,... 目的:构建大肠埃希菌外膜蛋白OmpA原核表达载体,优化OmpA蛋白的表达条件。方法:通过分子克隆获得OmpA蛋白的表达菌株;采用正交试验,获得OmpA菌株的最佳表达条件与培养条件。结果:OmpA重组载体双酶切、DNA测序鉴定与预测结果一致,WesternBlot分析表明抗体能与OmpA蛋白结合;0mpA菌株最佳诱导表达条件为:IPTG浓度0.1mm01/L,诱导时菌液OD600值0.8,28℃诱导8h;最佳培养条件为:葡萄糖浓度1%,转速230r/min,装液量50mL。结论:成功克隆OmpA基因,确定OmpA蛋白菌株的最佳表达条件与培养条件。 展开更多
关键词 正交试验 OmpA蛋白 诱导条件 数据分析
抗菌肽V13KL原核表达载体的构建及其表达产物的鉴定 被引量:1
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作者 秦莹 乔木 +7 位作者 关继羽 陈玥 孔德龙 安培培 唐博 陈育新 岳占碰 李子义 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期1043-1046,共4页
将V13KL编码基因片段克隆到原核表达载体pET30b(+),并在目的蛋白N端设计肠激酶酶切位点,构建出pET30b(+)-VK13L重组质粒,转化大肠杆菌表达菌株BL21(DE3),优化诱导条件,使得抗菌肽得到了高效表达。经Tricine-SDS-PAGE和West... 将V13KL编码基因片段克隆到原核表达载体pET30b(+),并在目的蛋白N端设计肠激酶酶切位点,构建出pET30b(+)-VK13L重组质粒,转化大肠杆菌表达菌株BL21(DE3),优化诱导条件,使得抗菌肽得到了高效表达。经Tricine-SDS-PAGE和Westernblotting鉴定,目的蛋白的相对分子质量与预期一致。结果表明,V13KL基因成功克隆并且获得表达,在诱导体系中加入1mmol/LIPTG诱导6h便可检测到蛋白表达。 展开更多
关键词 抗菌肽 V13KL 原核表达 诱导条件
野生大豆苯丙氨酸解氨酶(PAL)在不同诱导条件下变化规律 被引量:10
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作者 张必弦 胡小梅 +5 位作者 朱延明 来永才 李炜 肖佳磊 李琬 毕影东 《大豆科学》 CSCD 北大核心 2011年第4期703-705,709共4页
以野生大豆(龙野01-177)为材料,根据PAL酶活性的影响因素,选取48 h为一个周期,每3 h进行取样,研究低温(-4℃)诱导、机械损伤诱导、紫外线照射诱导、激素BAP诱导和正常对照组条件下的酶活性、蛋白含量、酶比活性的变化。结果表明:4... 以野生大豆(龙野01-177)为材料,根据PAL酶活性的影响因素,选取48 h为一个周期,每3 h进行取样,研究低温(-4℃)诱导、机械损伤诱导、紫外线照射诱导、激素BAP诱导和正常对照组条件下的酶活性、蛋白含量、酶比活性的变化。结果表明:4种诱导条件下野生大豆PAL的酶活性和蛋白质含量变化趋势均相同且表现出不同的变化规律;通过比较酶比活性,发现4种诱导条件中,低温诱导效果最好。 展开更多
关键词 野生大豆 苯丙氨酸解氨酶 诱导条件
黄瓜枯萎病菌产生厚垣孢子诱导条件的研究 预览 被引量:1
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作者 张定法 刘鸣韬 朱盛安 《河南科技学院学报》 2010年第1期 30-32,共3页
研究了诱导黄瓜枯萎病菌[Fusarium.oxysporium f.sp.cucumarinum Owen.]产生厚垣孢子的多种条件.结果表明:黄瓜枯萎病菌在营养成分较多的PD、PS、Richards培养液中不能产生厚垣孢子,而在营养成分较少的马铃薯培养液P1、P2、P3、P4、P5... 研究了诱导黄瓜枯萎病菌[Fusarium.oxysporium f.sp.cucumarinum Owen.]产生厚垣孢子的多种条件.结果表明:黄瓜枯萎病菌在营养成分较多的PD、PS、Richards培养液中不能产生厚垣孢子,而在营养成分较少的马铃薯培养液P1、P2、P3、P4、P5中均能够产生厚垣孢子.马铃薯培养液pH值6、温度30℃、光暗交替、连续振荡培养有利于厚垣孢子的产生. 展开更多
关键词 黄瓜枯萎病菌 厚垣孢子 诱导条件
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提高草菇中纤维降解酶系mRNA丰度的最佳诱导条件初探
10
作者 李迅 邵蔚蓝 《食品科技》 CAS 北大核心 2007年第12期33-35,共3页
草菇具有完备的纤维降解酶系基因,在诱导条件下能产生完整的纤维降解酶系。为了提高纤维降解酶系的mRNA丰度,通过正交的方法确定提高草菇中纤维降解酶系mRNA丰度的最佳诱导条件为:培养基配方为xylan和CMC各0.2%、(NH4)2S040.2%... 草菇具有完备的纤维降解酶系基因,在诱导条件下能产生完整的纤维降解酶系。为了提高纤维降解酶系的mRNA丰度,通过正交的方法确定提高草菇中纤维降解酶系mRNA丰度的最佳诱导条件为:培养基配方为xylan和CMC各0.2%、(NH4)2S040.2%、KH2P040.2%、VBI2.5mg/L、MgSO40.1%,调至pH为7.5.以150r/min的转速培养。 展开更多
关键词 草菇 正交 诱导条件
茄子愈伤组织诱导条件的初探 预览 被引量:2
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作者 孙桂英 刘正坪 《内蒙古农业大学学报:自然科学版》 CAS 2004年第2期 66-68,共3页
本文研究了3种不同诱导条件对茄子愈伤组织诱导的影响,结果表明:光照强度1 000 lx与9 000 lx对茄子愈伤组织诱导率无影响,但1 000 lx的光照强度下诱导所需时间长,且愈伤组织块致密,不易褐变.以茄子不同部位茎段作为外植体,结果是茎基部... 本文研究了3种不同诱导条件对茄子愈伤组织诱导的影响,结果表明:光照强度1 000 lx与9 000 lx对茄子愈伤组织诱导率无影响,但1 000 lx的光照强度下诱导所需时间长,且愈伤组织块致密,不易褐变.以茄子不同部位茎段作为外植体,结果是茎基部的茎段诱导率明显高于近芽部的诱导率.供试的几种苗龄中,55d苗龄的幼苗茎段的诱导率最高,而30d苗龄茎段的诱导率最低. 展开更多
关键词 茄子 愈伤组织 诱导条件 光照强度 外植体
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大规模培养雨生红球藻生产天然虾青素的研究进展和产业化现状 预览 被引量:34
12
作者 魏东 臧晓南 《中国海洋药物》 CAS CSCD 2001年第5期 4-8,共5页
本文综述了近10年来国际上在雨生红球藻的生物学特性、细胞内积累天然虾青素的诱导条件方面的研究进展,以及应用光生物反应器大规模培养雨生红球藻工业化生产天然虾青素的现状,并对国内虾青素的产业化前景进行了展望.
关键词 雨生红球藻 虾青素 诱导条件 光生物反应器 产业化
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绵羊肺腺瘤病毒受体Hyal-2原核表达诱导条件的优化及其表达产物的鉴定 被引量:1
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作者 朱福余 马学恩 +2 位作者 于立新 孙丽红 么宏强 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第3期25-28,共4页
为了提高绵羊肺腺瘤病毒受体透明质酸酶-2(Hyal-2)在大肠杆菌BL21(DE3)中的表达量,试验对含pGEX-4T-1-Hyal-2重组质粒的BL21(DE3)重组菌原核表达条件进行了优化。结果表明:诱导剂IPTG浓度、作用时间、温度对目的蛋白的表达影响... 为了提高绵羊肺腺瘤病毒受体透明质酸酶-2(Hyal-2)在大肠杆菌BL21(DE3)中的表达量,试验对含pGEX-4T-1-Hyal-2重组质粒的BL21(DE3)重组菌原核表达条件进行了优化。结果表明:诱导剂IPTG浓度、作用时间、温度对目的蛋白的表达影响很大,在37℃条件下加入不同终浓度的IPTG(0.2,0.4,0.6,0.8,1.0mmol/L)对重组菌诱导4h,在终浓度为0.4mmol/L时目的蛋白的表达量最高;加入终浓度为0.5mmol/L的IPTG,在37℃条件下诱导,在不同时间点(2,4,6,8小时)取样,在作用时间为2h,37℃条件下表达的目的蛋白主要以包涵体形式存在,当温度降低时可溶性形式明显增加。通过对诱导条件的优化和摸索发现,绵羊肺腺瘤病毒受体Hyal-2原核表达在诱导剂IPTG浓度为0.4mmol/L、作用时间为2h、温度为37℃时目的蛋白的表达量最高。 展开更多
关键词 绵羊肺腺瘤病毒 受体 透明质酸酶-2 原核表达 诱导条件优化
转氨酶高效表达重组工程菌的培养基及诱导条件优化 预览
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作者 叶质强 冯露 +1 位作者 王心洁 鄂松 《生物化工》 2019年第2期23-27,共5页
通过构建重组菌株PE-ATS(BL21)表达可催化底物合成西格列汀的转氨酶,采用摇瓶正交和单因素实验确定发酵培养基的最佳条件为甘油9.0 g/L,酵母粉16.0 g/L、硫酸铵4.0 g/L、氯化钠6.0 g/L、磷酸氢二钠2.0 g/L、磷酸二氢钾3.0 g/L;最佳表达... 通过构建重组菌株PE-ATS(BL21)表达可催化底物合成西格列汀的转氨酶,采用摇瓶正交和单因素实验确定发酵培养基的最佳条件为甘油9.0 g/L,酵母粉16.0 g/L、硫酸铵4.0 g/L、氯化钠6.0 g/L、磷酸氢二钠2.0 g/L、磷酸二氢钾3.0 g/L;最佳表达条件为36℃、0.6 mmol/L IPTG诱导4 h。该条件下,摇瓶培养菌液OD600=6.63,SDS-PAGE分析显示酶表达量约占可溶蛋白总量的50%,酶活为758 U/L。 展开更多
关键词 重组表达 转氨酶 培养基 诱导条件
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芥菜型油菜毛状根诱导体系构建及TTG1基因功能初步研究 预览
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作者 李隆 程成 +6 位作者 伍小方 张大为 刘丽莉 周静 周美亮 张凯旋 严明理 《作物学报》 CSCD 北大核心 2018年第10期1468-1476,共9页
黄籽油菜具有种皮薄、出油率高等优点,研究油菜黄籽的形成具有重要的意义。前期研究表明,TTG1(TRANSPARENT TESTA GLABRA 1)基因参与了油菜种皮颜色的形成。本研究利用发根农杆菌A4菌株诱导了芥菜型油菜四川黄籽的毛状根,并研究了菌液... 黄籽油菜具有种皮薄、出油率高等优点,研究油菜黄籽的形成具有重要的意义。前期研究表明,TTG1(TRANSPARENT TESTA GLABRA 1)基因参与了油菜种皮颜色的形成。本研究利用发根农杆菌A4菌株诱导了芥菜型油菜四川黄籽的毛状根,并研究了菌液浓度和外植体部位对诱导率的影响。结果表明,菌液浓度OD值为0.8时,诱导效率最高,平均为71.5%;外植体中下胚轴的发根率最高,平均为87.3%。在四川黄籽毛状根中过表达TTG1基因,发现原花色素合成途径中的DFR(dihydroflavonol4-reductase)、ANS(anthocyanidin synthase)和BAN(anthocyanidin reductase)基因的表达受到抑制。本研究优化了油菜毛状根的诱导体系,为利用毛状根体系进行基因功能验证提供了新的思路和方法。 展开更多
关键词 芥菜型油菜 毛状根 诱导条件 TTG1基因 原花色素
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党参毛状根诱导条件研究 预览
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作者 薛雯心 刘立业 +4 位作者 袁金月 刘琪 魏铁锁 郑彦杰 李秀霞 《安徽农业科学》 CAS 2017年第10期121-123,146共4页
[目的]研究党参毛状根的诱导条件。[方法]利用发根农杆菌A4、C58C1和A1476进行毛状根诱导,探讨发根农杆菌种类、外植体类型、菌液浓度、侵染时间和共培养天数等因素对党参毛状根诱导的影响。[结果]3种发根农杆菌中A4诱导率最高;茎段的... [目的]研究党参毛状根的诱导条件。[方法]利用发根农杆菌A4、C58C1和A1476进行毛状根诱导,探讨发根农杆菌种类、外植体类型、菌液浓度、侵染时间和共培养天数等因素对党参毛状根诱导的影响。[结果]3种发根农杆菌中A4诱导率最高;茎段的诱导率最高;发根农杆菌浓度在OD600为0.4时诱导效果较好;较佳侵染时间为5 min;共培养时间为2 d时诱导率较高;头孢噻肟钠浓度为300 mg/L时除菌效果较好。[结论]该试验为大量生产毛状根以及毛状根的后续研究提供试验基础。 展开更多
关键词 党参 毛状根 诱导条件 发根农杆菌
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玉米矮花叶病研究概述 预览
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作者 闫彩清 李凌雨 +2 位作者 王学雄 董民堂 孙迪 《山西农业科学》 2014年第11期1230-1232,共3页
通过查阅大量有关玉米矮花叶病研究资料,结合山西省农业科学院作物科学研究所玉米抗病育种课题组多年研究结果,对玉米矮花叶病的主要病原、发病条件、发病症状、传播途径、病毒株系、抗病资源、防治方法等方面进行综述,以期为玉米矮... 通过查阅大量有关玉米矮花叶病研究资料,结合山西省农业科学院作物科学研究所玉米抗病育种课题组多年研究结果,对玉米矮花叶病的主要病原、发病条件、发病症状、传播途径、病毒株系、抗病资源、防治方法等方面进行综述,以期为玉米矮花叶病的有效防治和相关研究提供一定的参考依据。 展开更多
关键词 玉米矮花叶病 病原 发病条件 症状 传播途径 病毒株系 抗病资源 防治方法
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基因工程菌诱导表达苏云金芽胞杆菌Vip3Aa蛋白的条件优化 预览
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作者 宋飞飞 李梦楠 +2 位作者 陈凡冰 关雄 黄志鹏 《农业生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期1434-1440,共7页
营养期杀虫蛋白(vegetative insecticidal protein,Vip)是在苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)营养生长至对数中期到稳定期期间产生的一类蛋白。为获得苏云金芽胞杆菌Vip3Aa蛋白的高效表达条件,本研究利用正交试验综合考... 营养期杀虫蛋白(vegetative insecticidal protein,Vip)是在苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)营养生长至对数中期到稳定期期间产生的一类蛋白。为获得苏云金芽胞杆菌Vip3Aa蛋白的高效表达条件,本研究利用正交试验综合考察了大肠杆菌(Escherichiacoli)重组基因工程菌BL21-pCzn1-Vip诱导过程中诱导剂浓度、诱导时间和诱导温度对Vip3Aa蛋白表达量的影响。结果表明,该工程菌目的蛋白的最优诱导表达条件:诱导温度21℃、诱导时间8h、诱导剂(异丙基-β-d-硫代半乳糖苷(isopropyl-β-d-thiogalactoside,IPTG))浓度为200μg/mL;直观分析表明,影响目的蛋白表达量的最主要因素为诱导温度,其次为诱导时间,诱导剂浓度影响最小;方差分析结果表明,诱导温度的P值<0.01、诱导时间的P值<0.05、诱导剂浓度的P值>0.05,与直观分析结果相一致;利用优化后诱导表达条件进行培养,测得目的蛋白最高表达量可占总蛋白的27.6%,相当于常规诱导方法的2.3倍。本研究为大量制备高纯度Vip3Aa蛋白及其深入的理论研究和实践应用提供了基础资料。 展开更多
关键词 苏云金芽胞杆菌 Vip3Aa蛋白 诱导表达条件 正交试验
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盐酸苯肼诱发小鼠网织红细胞条件的优化 预览
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作者 曹玲玲 何超 +4 位作者 薛建有 毛群铨 施鸣铭 戚武林 张世馥 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2013年第6期749-751,共3页
目的利用盐酸苯肼诱发小鼠产生网织红细胞的最佳条件选择。方法每天背部皮下给ICR和BALB/c小鼠注射1%盐酸苯肼100~400ILL,连续9d。每天尾静脉取血,利用煌焦油蓝染色,观察染色后网织红细胞的诱发效率并进行统计学分析。结果注射20... 目的利用盐酸苯肼诱发小鼠产生网织红细胞的最佳条件选择。方法每天背部皮下给ICR和BALB/c小鼠注射1%盐酸苯肼100~400ILL,连续9d。每天尾静脉取血,利用煌焦油蓝染色,观察染色后网织红细胞的诱发效率并进行统计学分析。结果注射200uL盐酸苯肼的小鼠诱发的网织红细胞状态最好,第4天诱发效率最高,可达83.16%±3.41%;注射300和400uL盐酸苯肼的小鼠诱发的网织红细胞形态不规则,细胞状态较差小鼠很快死亡。结论ICR小鼠及BALB/c小鼠网织红细胞诱发的最佳条件为:体质量25~35g的小鼠每天注射200uL 1%盐酸苯肼,连续注射4d。 展开更多
关键词 网织红细胞 盐酸苯肼 诱发条件
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番茄溃疡病发生及防治技术 预览 被引量:5
20
作者 李柏宏 《园艺与种苗》 CAS 2012年第6期110-111,共2页
番茄溃疡病是番茄生产上的毁灭性细菌病害。该文主要阐述该病在番茄叶、茎秆、果实被侵染后的症状、病害传播途径、发病条件,提出番茄渍疡病防治技术,为番茄生产、防治提供技术支撑。
关键词 番茄溃疡病 症状 传播途径 发病条件 防治技术
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