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经鼻腔移植人脐带间充质干细胞修复新生大鼠缺氧缺血性脑损伤 预览
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作者 杨汉华 田树凤 +2 位作者 谢丽春 陈运彬 马廉 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第21期3386-3391,共6页
背景:动物实验显示人脐带间充质干细胞移植具有显著的神经保护作用,其移植途径包括经静脉、动脉、腰穿、脑立体定向移植和侧脑室移植多种,均存在不足。目的:探讨通过鼻腔移植人脐带间充质干细胞修复新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的可行性和... 背景:动物实验显示人脐带间充质干细胞移植具有显著的神经保护作用,其移植途径包括经静脉、动脉、腰穿、脑立体定向移植和侧脑室移植多种,均存在不足。目的:探讨通过鼻腔移植人脐带间充质干细胞修复新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的可行性和有效性。方法:取90只7d龄SD大鼠(汕头大学医学院实验动物中心提供),随机分3组,每组30只:假手术组分离左颈总动脉后缝合皮肤;模型组采用结扎切断左颈总动脉联合缺氧仓的方法中制备缺氧缺血性脑损伤模型;实验组采用同样方法制备缺氧缺血性脑损伤模型,同时鼻腔滴入绿色荧光蛋白标记的人脐带间充质干细胞。建模后3d取脑组织,进行尼氏染色、TUNEL染色及免疫荧光染色;建模后14,29d,水迷宫实验检测大鼠记忆、学习能力,14d水迷宫实验完成后行脑组织TUNEL染色。动物实验经深圳大学医学部实验动物伦理委员会批准(伦理批准号:2016-121)。结果与结论:①尼氏染色:模型组大脑皮质及海马CA1区神经元排列均不规则,尼氏小体数量少;实验组大鼠大脑皮质及海马CA1区神经元排列较模型组规则,尼氏小体数量较多;②TUNEL染色:建模后3,14d,模型组凋亡细胞数多于假手术组(P<0.05),实验组凋亡细胞数少于模型组(P<0.05);③免疫荧光染色:实验组脑组织中可见绿色标记的人脐带间充质干细胞,主要分布于损伤侧海马及大脑皮质区域,非损伤侧脑组织偶可见绿色标记细胞,未见绿色荧光与GFAP或NSE染色双阳性细胞;④实验组建模后14,29d的平均逃逸潜伏期均低于模型组(P<0.05);⑤结果表明:经鼻腔移植人脐带间充质干细胞修复新生大鼠缺氧缺血性脑损伤,可减少神经细胞凋亡,改善大鼠记忆学习能力。 展开更多
关键词 干细胞 脐带干细胞 间充质干细胞 脐带间充质干细胞 移植 缺氧缺血性脑损伤 鼻腔给药 水迷宫实验
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脑脊液促进间充质干细胞神经元样分化的特点 预览
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作者 任超 冀永强 管丽娜 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第17期2770-2775,共6页
背景:目前研究表明对内源神经干细胞进行调控,或进行外源神经干细胞移植,是治疗痴呆等神经系统疾病最新和最有希望的方法。其中外源其他组织来源干细胞向神经干细胞定向分化的成功,为神经干细胞的来源增加了新途径。近年研究表明脑脊液... 背景:目前研究表明对内源神经干细胞进行调控,或进行外源神经干细胞移植,是治疗痴呆等神经系统疾病最新和最有希望的方法。其中外源其他组织来源干细胞向神经干细胞定向分化的成功,为神经干细胞的来源增加了新途径。近年研究表明脑脊液既可营养神经细胞,又可成为一种有效、适宜的诱导剂,为神经干细胞的获得增加新的途径。目的:文章将对国内外脑脊液对干细胞影响的相关研究进行综述,以期为将来神经干细胞临床应用提供帮助。方法:以'Cerebrospinal fluid,Stem cells,Induced differentiation,Neural stem cells,Stem cell transplantation therapy'为英文关键词,通过计算机检索PubMed数据库与Embase数据库;以'脑脊液、干细胞、诱导分化、增殖、分化、神经干细胞、间充质干细胞、胚胎干细胞、银杏叶提取物、干细胞移植治疗、神经变性疾病'为中文关键词,计算机检索CNKI数据库,万方数据库,维普数据库等科技期刊数据库;检索时间为1998-12-10至2018-12-10。对脑脊液对间充质干细胞、胚胎干细胞及神经干细胞等的影响进行总结分析,为将来神经干细胞临床应用提供帮助。结果与结论:①'脑脊液-干细胞'相互作用是治疗神经系统疾病的希望;②脑脊液也能促进间充质干细胞分化成为神经元样细胞;③脑脊液能诱导人胚胎源干细胞分化为神经样细胞,但所得不同类型细胞的比例不同;④脑脊液能诱导内源性神经干细胞的增殖分化。 展开更多
关键词 脑脊液 干细胞 诱导分化 增殖 分化 神经干细胞 间充质干细胞 胚胎干细胞 银杏叶提取物 干细胞移植治疗 神经变性疾病
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不同来源干细胞在口腔骨再生中的应用 预览
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作者 沈梦杰 杨琨 刘琪 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第25期4068-4074,共7页
背景:近年来,随着干细胞与再生技术的不断进步,骨组织工程得到了迅速的发展。虽然应用于骨组织工程中的种子细胞已经有很多,但对于不同的疾病,研究人员和临床工作者仍然面临着最佳种子细胞选择的问题。口腔骨组织重建是近年来研究的一... 背景:近年来,随着干细胞与再生技术的不断进步,骨组织工程得到了迅速的发展。虽然应用于骨组织工程中的种子细胞已经有很多,但对于不同的疾病,研究人员和临床工作者仍然面临着最佳种子细胞选择的问题。口腔骨组织重建是近年来研究的一个热点,目前应用于口腔骨组织修复的方法很多,但还没有一种方法能够取得满意的临床效果。因此,充分利用干细胞在骨再生过程中的潜能将为口腔骨组织缺损修复提供一种新思路。目的:对不同来源干细胞促进口腔骨组织再生的潜能进行综述,进而为组织工程选择种子细胞提供依据。方法:以"干细胞,骨修复,牙槽骨再生,成骨,骨组织""stem cell, bone repair, alveolar bone regenerate,osteogenesis,bonetissue"为关键词,检索中国生物医学文献数据库(CBM)、CNKI、PubMed、Elsevier以及Web of Science等数据库,通过阅读文题和摘要进行初步筛选,排除与文章主题不相关的文献,最终纳入81篇文献进行结果分析。结果与结论:组织工程为口腔骨再生修复提供了新的方法,但是对于干细胞的选择还没有标准化。应用于骨组织再生的干细胞种类有很多,但因其来源不同在体内发挥的作用也不尽相同,对于特定组织损伤的修复,选择一种合适的干细胞就显得很重要。文章对胚胎干细胞、间充质干细胞以及诱导多能干细胞在口腔骨组织再生中的优缺点进行了比较,旨在为口腔骨组织再生修复种子细胞的选择提供一种参考。 展开更多
关键词 干细胞 胚胎干细胞 间充质干细胞 诱导多能干细胞 牙槽骨修复 骨再生 成骨 骨组织 国家自然科学基金
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牙髓干细胞来源条件培养基促进组织修复与再生的研究进展 预览
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作者 秦杰 王晓春 《医学综述》 2019年第12期2316-2320,共5页
间充质干细胞(MSCs)在再生医学中具有很大的应用潜力。目前,以MSCs为基础的治疗方法的研究正在进行,其中,牙髓干细胞(DPSCs)在是组织工程研究的热点,其具有很强的自我更新和修复组织和器官的能力,并可调节免疫系统。DPSCs的获取方法简... 间充质干细胞(MSCs)在再生医学中具有很大的应用潜力。目前,以MSCs为基础的治疗方法的研究正在进行,其中,牙髓干细胞(DPSCs)在是组织工程研究的热点,其具有很强的自我更新和修复组织和器官的能力,并可调节免疫系统。DPSCs的获取方法简单、无痛、无创伤,无伦理等顾虑。DPSCs的分泌因子可在其条件培养基(CM)中找到,其介导的旁分泌机制在修复过程中起主要作用,可用于修复牙体组织、血管组织、神经组织、骨组织等。DPSCs-CM具有许多优势,可用于同种异体治疗。 展开更多
关键词 牙髓干细胞 间充质干细胞 骨髓间充质干细胞 条件培养基 再生医学
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间充质干细胞在移植物抗宿主病中作用机制的研究进展
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作者 齐松青 江明 《国际输血及血液学杂志》 CAS 2019年第2期154-159,共6页
间充质干细胞(MSC)是一类非造血成体干细胞,其不仅具备自我更新和多向分化潜能,同时亦具有低免疫原性及免疫调节功能。近年,实验室、临床前、临床研究均证实,MSC为预防和减轻移植物抗宿主病(GVHD)的一种有效治疗手段。既往,对MSC的特性... 间充质干细胞(MSC)是一类非造血成体干细胞,其不仅具备自我更新和多向分化潜能,同时亦具有低免疫原性及免疫调节功能。近年,实验室、临床前、临床研究均证实,MSC为预防和减轻移植物抗宿主病(GVHD)的一种有效治疗手段。既往,对MSC的特性、分化潜能及表面标志物均有一定的研究,亦有相关临床研究报道,同时输注MSC与造血干细胞(HSC)可促进HSC植入、支持受者造血功能恢复,以及预防和减轻GVHD,但其作用机制尚未完全明确。因此,笔者拟就近年MSC在GVHD中作用机制的研究进展进行综述,以期对GVHD的预防及诊治提供新的思路。 展开更多
关键词 造血干细胞移植 间质干细胞 间质干细胞移植 移植物抗宿主病 免疫疗法 免疫调节 异基因造血干细胞移植 预防
差速离心、密度梯度离心、超滤离心技术在骨髓间充质干细胞外泌体提取中的应用对比观察 预览
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作者 罗靖莹 贺宏丽 +2 位作者 郭阳 黄玮玮 黄晓波 《山东医药》 CAS 2019年第12期48-52,共5页
目的观察差速离心、密度梯度离心、超滤离心技术在骨髓间充质干细胞(BMSCs)外泌体提取中的应用,筛选外泌体最佳离心提取方法。方法取BMSCs培养48 h后收集细胞上清,平均分成A、B、C组,分别使用差速离心技术、密度梯度离心技术、超滤离心... 目的观察差速离心、密度梯度离心、超滤离心技术在骨髓间充质干细胞(BMSCs)外泌体提取中的应用,筛选外泌体最佳离心提取方法。方法取BMSCs培养48 h后收集细胞上清,平均分成A、B、C组,分别使用差速离心技术、密度梯度离心技术、超滤离心技术提取外泌体;记录各组外泌体提取时间;采用负染色技术观察各组外泌体形态;使用纳米颗粒跟踪分析仪测算各组外泌体浓度及大小;采用BCA法测定外泌体总蛋白浓度;采用Western blotting法检测各组外泌体表面标志蛋白CD9、CD63、Alix。将肺微血管内皮细胞(PMVECs)分成5组,EC组上室加入PMVECs及培养基;LPS组上室加入PMVECs及含LPS的培养基(构建内皮细胞损伤模型);A、B、C组上室加入方法同LPS组,下室分别加入A、B、C组外泌体;采用葡聚糖渗漏实验检测外泌体内皮细胞通透性(观察外泌体对内皮细胞的修复作用),以内皮细胞通透指数表示。结果 A、B、C组的外泌体的提取时间分别为(180±8)、(203±10)、(40±5) min,A、B组外泌体的提取时间与C组相比,P均<0. 05。各组外泌体均为大小不等的椭圆形或圆形的膜性结构,边界清晰,但仅A组外泌体可见到典型的杯状结构。A、B、C组的外泌体浓度分别为(4. 46±0. 38)×10^8/m L、(5. 11±0. 16)×10^8/m L、(2. 18±0. 17)×10^8/m L,A、B组与C组外泌体浓度相比,P均<0. 05。A、B、C组的外泌体大小均为20~100 nm。A、B组外泌体总蛋白浓度及CD63、Alix的相对表达量均显著高于C组(P均<0. 05)。A、B、C、LPS、EC组的内皮细胞通透指数分别为2. 17±0. 15、1. 77±0. 32、2. 37±0. 42、2. 93±0. 15、1. 00±0. 00,A、B、C、LPS组的内皮细胞通透指数与EC组相比,P均<0. 05;A、B组的内皮细胞通透指数与LPS组相比,P均<0. 05。结论密度梯度离心技术虽耗时较长,但提取的外泌体纯度、浓度较高,对内皮细胞的修复作用较强,可以作为科研和临床研究的首选外泌体离� 展开更多
关键词 外泌体 外泌体提取方法 差速离心技术 密度梯度离心技术 超滤离心技术 间充质干细胞 骨髓间充质干细胞 肺微血管内皮细胞
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脂肪干细胞在炎性创面中的应用及前景 预览
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作者 张立明 蔡洁云 +1 位作者 潘福强 王静 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第25期4089-4093,共5页
背景:1998年人胚胎干细胞成功获得后,临床医师开始尝试应用干细胞治疗各种创伤,其中一个重要机制是其能够调节创面炎症。目的:探讨脂肪干细胞在创面炎症中的应用及前景。方法:由第一作者用计算机检索中国知网数据库和Pub Med数据库1999... 背景:1998年人胚胎干细胞成功获得后,临床医师开始尝试应用干细胞治疗各种创伤,其中一个重要机制是其能够调节创面炎症。目的:探讨脂肪干细胞在创面炎症中的应用及前景。方法:由第一作者用计算机检索中国知网数据库和Pub Med数据库1999至2018年10月的文献,检索词分别为"脂肪干细胞,创面,炎症"和"adipose-derived stem cells,wound,inflammation",选择内容与脂肪干细胞、创面、炎症相关的文章,同一领域文献则选择近期发表或发表在权威杂志的文章。结果与结论:创面修复是一个复杂有序的变化过程,创面炎症与创面修复的结果密切相关。随着再生医学的发展,干细胞的应用为创面修复带来了新的方法。脂肪干细胞因其自我增殖和多向分化能力强、易获取、储量丰富等特点在创面炎症中有着广阔的应用前景,仍是目前促进创面愈合的最热门研究课题之一。 展开更多
关键词 干细胞 脂肪干细胞 间充质干细胞 创面 炎症 创面愈合 创面修复 综述
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血管外膜细胞生物学特性及对造血干/祖细胞的支持作用 预览
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作者 杨小萍 郑波 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第29期4728-4734,共7页
背景:血管外膜细胞广泛分布于全身的毛细血管和微血管的管壁,是血管周围微环境的重要核心组成成分。它们可以为其他细胞的生长繁殖提供支持作用以及调节机体的免疫状态和免疫防御等。近年来越来越多研究显示,血管外膜细胞是间充质干细... 背景:血管外膜细胞广泛分布于全身的毛细血管和微血管的管壁,是血管周围微环境的重要核心组成成分。它们可以为其他细胞的生长繁殖提供支持作用以及调节机体的免疫状态和免疫防御等。近年来越来越多研究显示,血管外膜细胞是间充质干细胞的前体细胞,其通过细胞接触或旁分泌效应调节造血干细胞的行为并支持造血。目的:就血管外膜细胞的分布、功能以及对造血干/祖细胞的支持作用作一综述。方法:以“pericyte,perivascular cell,hematopoietic stem/progenitor cells”以及“血管外膜细胞,间充质干细胞,周细胞,造血干/祖细胞”为检索词,检索PubMed数据库、CNKI数据库及万方数据库2008至2018年间相关文献,并纳入64篇文献进行综述。结果与结论:血管外膜细胞是间充质干细胞的前体细胞,具有与间充质干细胞相似的生物学特性,表达间充质干细胞的表面标记物,并具有向成骨、成脂及成软骨细胞等分化的潜能,且可调节造血干细胞行为并支持造血。 展开更多
关键词 血管外膜细胞 造血干/祖细胞 间充质干细胞 周细胞 内皮细胞 造血 国家自然科学基金
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诱导多能干细胞来源间充质干细胞对大鼠骨关节炎的治疗作用 预览
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作者 何继晨 严君逸 +4 位作者 程琢玉 程润 赵英杰 魏伟 严尚学 《安徽医药》 CAS 2019年第8期1496-1500,I0001,I0002共7页
目的研究诱导多能干细胞来源间充质干细胞(iPSC-MSCs)对大鼠骨关节炎(OA)的治疗作用。方法采用Hulth法建立大鼠OA模型,编号后运用Excel表格随机分组功能将其分为模型组、iPSC-MSCs组、人脐带来源间充质干细胞(hUC-MSCs)组、玻璃酸钠(HA... 目的研究诱导多能干细胞来源间充质干细胞(iPSC-MSCs)对大鼠骨关节炎(OA)的治疗作用。方法采用Hulth法建立大鼠OA模型,编号后运用Excel表格随机分组功能将其分为模型组、iPSC-MSCs组、人脐带来源间充质干细胞(hUC-MSCs)组、玻璃酸钠(HA)阳性对照组,另设假手术组作为对照,每组10只。除HA组动物多次给药(每周1次,共给药5次)外,其它各组均单次给药,每次每只动物在术侧关节腔注射50μL药物iPSC-MSCs和hUC-MSCs,假手术组和模型组同法给予生理盐水。给药5周后处死动物,观察iPSC-MSCs对关节直径差值、关节腔结构及评分、关节面评分、病理学评分等指标的影响;检测膝关节基质金属蛋白酶(MMP)-13、Ⅱ型胶原(CollagenⅡ)及解聚蛋白样金属蛋白酶(ADAMTS)-5表达情况。结果 iPSCMSCs和hUC-MSCs给药均可显著降低膝关节面Pelletier评分、关节直径和病理Mankin评分,改善关节腔结构,降低X线评分和关节肿胀,且iPSC-MSCs较hUC-MSCs给药在降低Pelletier评分[(1.22±0.67)比(2.00±0.71),P=0.021]方面差异有统计学意义;相比于模型组,iPSC-MSCs关节腔注射给药可显著增加软骨层CollagenⅡ表达[(35.87±8.52)比(69.90±7.65),P<0.01],降低MMP-13[(59.25±5.56)比(33.75±5.85),P<0.01]和ADAMTS-5[(52.25±10.47)比(22.25±6.13),P<0.01]表达水平,且与hUC-MSCs给药差异有统计学意义,iPSC-MSCs组与hUC-MSCs组CollagenⅡ、MMP-13、ADAMTS-5值分别为[(69.90±7.65)比(61.00±5.52),P=0.010]、[(33.75±5.85)比(43.25±6.02),P=0.028]、[(22.25±6.13)比(36.50±4.65),P=0.011]。结论关节腔注射iPSC-MSCs可显著改善OA大鼠关节病理,具有明显的软骨保护作用。 展开更多
关键词 骨关节炎 脐血干细胞移植 注射 关节内 诱导多能干细胞 间质干细胞 软骨损伤 大鼠
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间充质干细胞在类风湿性关节炎治疗中的免疫调节作用 预览
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作者 谢景春 姚观平 余丽梅 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第29期4722-4727,共6页
背景:间充质干细胞拥有强大的抗炎和免疫调节功能,有关其治疗类风湿性关节炎的实验研究已经深入开展,其可能成为临床治疗类风湿性关节炎的新方法,但具体的分子机制有待阐明。目的:为更好地理解间充质干细胞治疗类风湿性关节炎的分子机制... 背景:间充质干细胞拥有强大的抗炎和免疫调节功能,有关其治疗类风湿性关节炎的实验研究已经深入开展,其可能成为临床治疗类风湿性关节炎的新方法,但具体的分子机制有待阐明。目的:为更好地理解间充质干细胞治疗类风湿性关节炎的分子机制,进一步补充间充质干细胞对炎症性关节炎保护作用方面的最新进展,探讨间充质干细胞移植治疗类风湿性关节炎效果的差异,期待这些成果能为开发精准化靶点治疗类风湿性关节炎的药物提供新思路。方法:检索PubMed、Elsevier、CNKI和万方数据库,查阅2008至2019年期间国内外有关类风湿性关节炎与间充质干细胞的文献。检索词分别为“类风湿性关节炎,间充质干细胞”和“mesenchymal stem cells,rheumatoid arthritis”。最后选择55篇文献纳入结果分析。结果与结论:类风湿性关节炎发病机制涉及多种免疫细胞的增殖、分化及多种炎症因子的失衡。间充质干细胞具有免疫调节功能,且对类风湿性关节炎具有明显治疗效果,在抑制T细胞增殖、上调Treg细胞比例、抑制B细胞功能和减少B细胞数量、影响树突状细胞成熟、诱导M2型巨噬细胞产生、抑制M1型巨噬细胞活化方面有重要作用。 展开更多
关键词 干细胞 间充质干细胞 类风湿性关节炎 免疫调节 炎症因子 免疫细胞 国家自然科学基金
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稳定转染红色荧光蛋白基因的人脑胶质瘤起始细胞可自发融合宿主骨髓间充质干细胞并诱导恶性转化 预览
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作者 韩辉 代兴亮 +1 位作者 程宏伟 兰青 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第25期3944-3950,共7页
背景:异种移植瘤中宿主来源间质细胞恶性转化已有报道,但是对恶变的机制知之甚少。目的:旨在使用双色荧光示踪的体内模型研究宿主来源肿瘤间质细胞的恶性转化,并探讨可能的机制。方法:将稳定转染红色荧光蛋白基因的人脑胶质瘤起始细胞(g... 背景:异种移植瘤中宿主来源间质细胞恶性转化已有报道,但是对恶变的机制知之甚少。目的:旨在使用双色荧光示踪的体内模型研究宿主来源肿瘤间质细胞的恶性转化,并探讨可能的机制。方法:将稳定转染红色荧光蛋白基因的人脑胶质瘤起始细胞(glioma-initiatingcellstransfectedwithred fluorescent protein gene,GICs-RFP)接种到表达绿光荧光蛋白的裸鼠体内,建立具有2种荧光的动物模型;通过激光共聚焦观察移植瘤的荧光表达;流式细胞仪检测和分选各种荧光细胞,包括绿色荧光蛋白细胞、红色荧光蛋白细胞和表达这2种荧光的融合细胞;体外亚克隆得到具有恶性肿瘤细胞特征的同时表达绿色荧光蛋白/红色荧光蛋白两种荧光的融合细胞;体外鉴定细胞来源、表面标记物和恶性特征,裸鼠皮下移植验证融合细胞致瘤特性。实验经苏州大学动物实验伦理委员会批准,批准号为ECSU-201800090。结果与结论:GICs-RFP在绿色荧光蛋白裸小鼠的体内致瘤率均为100%(14/14);动物移植瘤模型中均可观察到融合细胞,分选、克隆到的融合细胞不仅共表达绿色荧光蛋白和红色荧光蛋白,而且共表达GICs-RFP标记物Nestin和骨髓间充质干细胞标记物CD44、CD105和CD29;融合细胞在体外表现出高度增殖活性,较GICs-RFP更具侵袭和迁移特征;融合细胞(1×105个/只)在无胸腺裸小鼠的致瘤率为100%(4/4)。提示GICs-RFP自发融合宿主骨髓间充质干细胞并诱导恶性转化,为肿瘤异质性的细胞来源提供了新的双色荧光示踪的证据。 展开更多
关键词 荧光蛋白示踪 细胞融合 恶性转化 胶质瘤起始细胞 荧光裸小鼠 肿瘤微环境 动物模型 间充质干细胞 肿瘤干细胞
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脂肪间充质干细胞移植减轻大鼠肾缺血再灌注损伤的机制 预览
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作者 雷雨 刘蓉安 曾帆 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第5期749-755,共7页
背景:缺血再灌注引起的急性肾损伤是有较高死亡率的临床常见问题,尚缺乏有效治疗方法。目前,已有一些间充质干细胞移植应用于改善此病情的研究,但可能机制仍不明确。目的:观察脂肪间充质干细胞移植对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用及... 背景:缺血再灌注引起的急性肾损伤是有较高死亡率的临床常见问题,尚缺乏有效治疗方法。目前,已有一些间充质干细胞移植应用于改善此病情的研究,但可能机制仍不明确。目的:观察脂肪间充质干细胞移植对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用及其可能机制。方法:实验所用SD大鼠购自北京维通利华实验动物技术有限公司,分离培养SD大鼠腹股沟部位脂肪组织,获得脂肪间充质干细胞并鉴定;将30只大鼠夹闭左肾动脉,45min后去除动脉夹恢复血流建立肾缺血再灌注大鼠模型,随机分为移植对照组和干细胞移植组,每组15只,另取15只大鼠作为假手术组,其中,移植对照组尾静脉注射生理盐水,干细胞移植组尾静脉注射脂肪间充质干细胞。在移植后5,15和30d进行下列检测:荧光显微镜观察大鼠肾组织冰冻切片中脂肪间充质干细胞定植情况;ELISA法检测血清肌酐与尿素氮水平;生化法检测肾组织中丙二醛含量;石蜡切片苏木精-伊红染色观察肾组织病理学结构并进行肾小管损伤评分;Westernblot法检测肾组织中谷胱甘肽过氧化物酶4的表达。结果与结论:①分离培养的SD大鼠脂肪间充质干细胞表达CD90和CD44,具有多向分化能力,移植对照组肾组织无绿色荧光,干细胞移植组在移植后5d可见绿色荧光;②与移植对照组比较,干细胞移植组血清肌酐与尿素氮水平、肾组织丙二醛含量及肾小管损伤评分降低(P<0.05),肾组织谷胱甘肽过氧化物酶4表达升高(P<0.05),肾组织形态结构有明显改善;③以上结果说明,脂肪间充质干细胞移植可减轻大鼠肾缺血再灌注损伤,可能通过促进肾组织中谷胱甘肽过氧化物酶4的表达发挥抗脂质过氧化作用。 展开更多
关键词 脂肪间充质干细胞 肾缺血再灌注损伤 干细胞移植 谷胱甘肽过氧化物酶4 肾小管损伤 急性肾损伤 组织工程 干细胞 间质干细胞
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胶质瘤干细胞和胶质瘤间充质干细胞原代培养的一种新方法 预览
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作者 岑梓文 陈芙蓉 +4 位作者 王静 柯超 陈银生 陈忠平 冯冰虹 《广东医学》 CAS 2019年第12期1673-1677,共5页
目的采用患者来源的胶质瘤组织进行原代培养,对胶质瘤干细胞(glioma stem cell,GSCs)和肿瘤性间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSCs)进行了分选和鉴定。探讨GSCs和MSCs对胶质瘤的生长、耐药等的作用。方法取高级别胶质瘤手术标本剪... 目的采用患者来源的胶质瘤组织进行原代培养,对胶质瘤干细胞(glioma stem cell,GSCs)和肿瘤性间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSCs)进行了分选和鉴定。探讨GSCs和MSCs对胶质瘤的生长、耐药等的作用。方法取高级别胶质瘤手术标本剪碎后使用Ⅱ型胶原酶消化为单细胞悬液。一部分使用GSCs培养基成球悬浮培养,另一部分使用MSCs培养基贴壁培养。GSCs鉴定方法为免疫荧光法检测GSCs相关蛋白分子,如高度表达CD133、SOX-2和Nestin,低表达GFAP和Ⅲβ-tubulin。MSCs鉴定标准为成骨、成软骨以及成脂肪三系分化阳性。结果对62例高级别胶质瘤手术标本进行原代培养,课题组成功分选出13例同源的GSCs和MSCs。结论课题组使用最新并优化的原代培养技术,成功将患者来源的高级别胶质瘤手术标本中培养出GSCs和MSCs,建立了同源的GSCs和MSCs亚群研究模型。 展开更多
关键词 胶质瘤 原代培养 胶质瘤干细胞 间充质干细胞
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干细胞治疗皮肤缺损:是未来研究的重点 预览
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作者 刘博宇 蒲磊 +2 位作者 张应杰 杨应南 李亚雄 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第25期4082-4088,共7页
背景:干细胞作为一种具备自我更新和多向分化能力的特殊细胞,有潜力应用于治疗皮肤缺损,并因其来源丰富、低免疫原性、能够分化为多个谱系细胞等特性,有望克服现有治疗手段的局限性并发展为新的治疗手段。目的:阐明不同干细胞治疗皮肤... 背景:干细胞作为一种具备自我更新和多向分化能力的特殊细胞,有潜力应用于治疗皮肤缺损,并因其来源丰富、低免疫原性、能够分化为多个谱系细胞等特性,有望克服现有治疗手段的局限性并发展为新的治疗手段。目的:阐明不同干细胞治疗皮肤缺损的机制及研究热点,寻求一种能够符合临床需求的细胞来源。方法:由第一作者检索1998至2018年PubMed数据库收录的与干细胞治疗皮肤缺损相关的文献。检索词为"stem cell,skin defect,wound healing",按纳入、排除标准最后共纳入文献63篇进行综述。结果与结论:干细胞在皮肤缺损治疗上具有巨大潜力,其不仅可以重建损伤的组织,而且可以通过免疫调节及血管新生促进伤口愈合。间充质干细胞与其他种类干细胞相比拥有更大优势,近年来间充质干细胞应用于皮肤缺损修复的研究取得了令人满意的结果,成为目前最理想的细胞来源,也是未来研究的重点。 展开更多
关键词 干细胞 间充质干细胞 皮肤缺损 伤口愈合 免疫调节 血管新生 细胞分化
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BMP-2明胶/壳聚糖水凝胶缓释系统复合羟基磷灰石/二氧化锆泡沫陶瓷与诱导多能干细胞来源MSCs的体外研究
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作者 柴乐 全仁夫 +5 位作者 胡劲涛 黄小龙 吕建兰 张灿 邱锐 蔡兵兵 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期252-258,共7页
目的构建BMP-2明胶/壳聚糖水凝胶缓释系统,与诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPS)来源MSCs复合种植至羟基磷灰石(hydroxyapatite,HA)/二氧化锆(zirconium dioxide,ZrO2)生物多孔泡沫陶瓷材料,体外共培养,探索缓释系统对... 目的构建BMP-2明胶/壳聚糖水凝胶缓释系统,与诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPS)来源MSCs复合种植至羟基磷灰石(hydroxyapatite,HA)/二氧化锆(zirconium dioxide,ZrO2)生物多孔泡沫陶瓷材料,体外共培养,探索缓释系统对iPS-MSCs成骨分化的作用。方法运用油包水相溶液制备BMP-2明胶/壳聚糖水凝胶微球,检测微球的药物包封率、载药率和体外缓释速率。建立HA/ZrO2多孔生物泡沫陶瓷材料复合iPS-MSCs及BMP-2明胶/壳聚糖水凝胶缓释系统共培养体系,作为实验组;以未复合BMP-2明胶/壳聚糖水凝胶缓释系统的细胞-支架复合物作为对照组。两组培养3、7、10、14 d,检测细胞的ALP分泌量,RT-PCR检测核心结合因子α1(core binding factorα1,Cbfa1)、Ⅰ型胶原和锌指结构转录因子(Osterix,OSX)基因表达水平;培养14 d时行免疫组织化学染色观察Ⅰ型胶原表达,并通过扫描电镜观察细胞爬行及黏附状态。结果 BMP-2明胶/壳聚糖水凝胶缓释系统具有较好的药物包封率及载药率,可延长BMP-2的活性时间。共培养体系体外培养各时间点实验组ALP分泌量及Cbfa1、Ⅰ型胶原、OSX基因相对表达量均显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。免疫组织化学染色观察示,实验组荧光数量明显多于对照组,即Ⅰ型胶原表达水平高于对照组;细胞能较均匀地分布于材料上,细胞形态良好。扫描电镜观察示缓释系统能较好地黏附于细胞之间。结论 iPS-MSCs具有促成骨分化能力,在BMP-2明胶/壳聚糖水凝胶缓释系统作用下其促成骨能力显著增强。iPS-MSCs与缓释系统结合后能良好黏附于材料上,且细胞活性较好。 展开更多
关键词 羟基磷灰石 二氧化锆 BMP.2 诱导多能干细胞 MSCS 缓释系统
人诱导多能干细胞体外多向分化能力的方法验证 预览
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作者 冯顶丽 卓丽丹 +2 位作者 芦笛 李红 郭红延 《武警医学》 CAS 2019年第4期303-307,共5页
目的探讨人诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSC)体外多向分化能力的方法。方法 iPSC通过形成拟胚体(embryonic body,EB)的阶段,将其诱导为间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSCs)样细胞,倒置显微镜下观察诱导过程... 目的探讨人诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSC)体外多向分化能力的方法。方法 iPSC通过形成拟胚体(embryonic body,EB)的阶段,将其诱导为间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSCs)样细胞,倒置显微镜下观察诱导过程中细胞形态的变化,流式细胞术检测iPSC来源的MSCs(iPS-MSCs)表面标志物的表达,并进一步将iPSC-MSC诱导为成骨、软骨细胞;或直接EB接种,将其诱导成神经细胞。通过上述方法验证iPSC的多向分化能力。结果诱导后的iPSC-MSC逐渐向外生长变为长梭形;CD29、CD105在iPSC-MSCs中表达阳性,而CD34、CD45则为阴性;碱性磷酸酶、甲苯氨兰染色结果表明iPSC-MSCs具有成骨、成软骨的能力;iPSC亦可直接从EB阶段诱导成神经细胞。结论通过上述方法,可成功诱导iPSC为成骨、成软骨、成神经细胞,为iPSC进一步的研究与应用提供了技术基础。 展开更多
关键词 诱导多能干细胞 间充质干细胞 细胞分化
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人胎盘来源的造血干细胞和间充质干细胞的分离及鉴定
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作者 李欣 赵中利 +3 位作者 罗晓彤 李珈莹 曹阳 于永生 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2019年第1期95-99,105共6页
目的建立人胎盘来源的造血干细胞(placenta hematopoietic stem cells,hP-HSCs)和间充质干细胞(placentaderived mesenchymal stem cells,hP-MSCs)的分离方法,并进行鉴定和组分分析。方法选取10份新生健康婴儿胎盘组织,采用机械破碎法... 目的建立人胎盘来源的造血干细胞(placenta hematopoietic stem cells,hP-HSCs)和间充质干细胞(placentaderived mesenchymal stem cells,hP-MSCs)的分离方法,并进行鉴定和组分分析。方法选取10份新生健康婴儿胎盘组织,采用机械破碎法联合磁珠分选法分离h P-HSCs,胎盘绒毛膜组织块贴壁法分离hP-MSCs,利用形态学观察、集落培养、流式细胞术等进行鉴定。结果 hP-HSCs:分离后有核细胞数(total nucleated cell number,TNC)为(11.82±2.46)×10^8个,TNC回收率≥80%;细胞活性为(99.7±0.3)%;细胞表面抗体CD34^+CD45dim表达率为(8.69±0.36)%,CD34^+总数为(108.0±6.48)×10^6个;集落形成总数为(1.88±1.07)×10^6。hP-MSCs:冻存细胞总数为(40.78±9.35)×10^7个;细胞活性为(99.0±1.5)%;细胞表面抗体CD34^+CD45^+表达率为(0.1±0.1)%,CD44^+CD105^+为(99.6±0.2)%,CD14^+CD19^+为(0.1±0.1)%,CD90^+CD73+为(98.9±0.2)%;且具有良好成脂、成骨分化潜能。结论成功建立了hP-HSCs和hP-MSCs体外分离培养方法,为胎盘的临床应用奠定了基础,并提供了细胞种子资源。 展开更多
关键词 胎盘 造血干细胞 间充质干细胞 组织块法 磁珠分选
间充质干细胞细胞外基质改变脂肪来源干细胞微环境影响其生物学行为的机制分析
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作者 李子超 易晓巍 易成刚 《中华整形外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期361-366,共6页
目的探究通过加入间充质干细胞产生的细胞外基质,从而改变肪来源干细胞的微环境后,使得脂肪来源干细胞增殖转化功能改善的核心分子和作用机制。方法采用生物信息学方法,从基因表达谱芯片数据库中获取12组供体的转录组信息,并分为4组:Ad ... 目的探究通过加入间充质干细胞产生的细胞外基质,从而改变肪来源干细胞的微环境后,使得脂肪来源干细胞增殖转化功能改善的核心分子和作用机制。方法采用生物信息学方法,从基因表达谱芯片数据库中获取12组供体的转录组信息,并分为4组:Ad on NHDF组,记录在聚苯乙烯培养基中加入人新生儿真皮成纤维细胞的细胞外基质后,脂肪来源干细胞的转录组表达情况;Ad on Bm组,记录在聚苯乙烯培养基加入骨髓来源间充质干细胞的细胞外基质后,脂肪来源干细胞的转录组表达情况;Ad on Ad组,记录在聚苯乙烯培养基加入脂肪来源干细胞的细胞外基质后,脂肪来源干细胞的转录组表达情况;Ad on TCPS组,记录脂肪来源干细胞在单纯的聚苯乙烯培养基的转录组表达情况。采用京都基因与基因组百科全书、基因本体、基因集合富集分析等富集分析手段,并利用软件R、Perl、Cytoscape进行差异分析和数据可视化。结果每种间充质干细胞产生其特定的细胞外基质,但在加入不同的细胞外基质培养基培养后的脂肪来源干细胞,都共享部分差异表达的基因和蛋白,如编码胶原家族基因。通过进一步将共享差异基因和功能集团构建蛋白互作关系,最终确定出改变微环境后影响脂肪来源干细胞增殖分化的3个重要分子COL4A1、COL11A1、COL15A1,分子的低表达可能与细胞修复、核苷酸代谢、DNA复制和细胞周期等多种生物学反应和信号通路相关。结论加入间充质干细胞产生的细胞外基质培养基培养的脂肪来源干细胞,编码胶原的基因表达量显著下调,并通过多种途径参与脂肪来源干细胞的增殖分化。 展开更多
关键词 脂肪来源干细胞 间充质干细胞 体外培养 编码胶原基因 富集分析
内皮祖细胞条件培养基对间充质干细胞向内皮细胞分化的影响 预览
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作者 韩欢欢 郭黎姣 +5 位作者 杨雄峰 周青 姜慧娇 王小艺 陈雪玲 吴向未 《石河子大学学报:自然科学版》 CAS 北大核心 2019年第2期229-236,共8页
目的探讨体外小鼠内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)条件培养基(CM)对间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)向内皮细胞(endothelial cells,ECs)分化的影响。方法全骨髓贴壁法和差速贴壁法提取培养MSCs和EPCs,流式细... 目的探讨体外小鼠内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)条件培养基(CM)对间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)向内皮细胞(endothelial cells,ECs)分化的影响。方法全骨髓贴壁法和差速贴壁法提取培养MSCs和EPCs,流式细胞术检测MSCs和EPCs表面标记物,双荧光染色和体外成管实验对EPCs进行功能鉴定。将MSCs分为0%EPCs-CM组(对照组)、25%EPCs-CM组和50%EPCs-CM组。qRT-PCR检测各组CD31、vWF、eNOS的mRNA表达水平。体外成管实验检测各组细胞的体外成管能力;免疫荧光检测各组MSCs CD31、CD34表达情况;对各组上清中的NO进行检测。结果流式细胞术结果显示,第3代MSCs高表达Sca-1,低表达CD34、CD11b;EPCs高表达CD34、CD133和VEGFR2,可吞噬Dil-AC-LDL和结合UEA-1。在基质胶上可形成管腔样结构。qRT-PCR显示3周时50%EPCs-CM组CD31、vWF、eNOS表达(2.28±0.25, 1.76±0.71,8.27±1.65),较对照组显著升高( P <0.05)。50%EPCs-CM组MSCs可体外形成管腔样结构;免疫荧光显示50%EPCs-CM组MSCs CD31和CD34的表达明显高于对照组。对照组细胞与实验组细胞上清液中NO的含量(8.81+3.41,20.93±9.47)μmol/L,差异显著( t =3.96, P <0.05)。结论 EPCs-CM能提高MSCs体外成管能力,并促进MSCs向ECs分化。 展开更多
关键词 内皮祖细胞 间充质干细胞 条件培养基 分化 内皮细胞
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慢病毒载体介导CC趋化因子受体7基因过表达可促进大鼠骨髓间充质干细胞归巢 预览
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作者 王志红 陈为民 +2 位作者 林芸 尚晋 魏天南 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第25期3973-3977,共5页
背景:研究发现,骨髓间充质干细胞特异性地表达CC趋化因子受体7(CC chemokine receptor,CCR7),与其配体次级淋巴组织趋化因子(secondary lymphoid-tissue chemokine,SLC)相互作用,有助于骨髓间充质干细胞归巢到损伤部位。目的:探讨CCR7... 背景:研究发现,骨髓间充质干细胞特异性地表达CC趋化因子受体7(CC chemokine receptor,CCR7),与其配体次级淋巴组织趋化因子(secondary lymphoid-tissue chemokine,SLC)相互作用,有助于骨髓间充质干细胞归巢到损伤部位。目的:探讨CCR7基因过表达对大鼠骨髓间充质干细胞体内外归巢特性的影响。方法:利用慢病毒载体介导大鼠骨髓间充质干细胞过表达CCR7基因,建立过表达CCR7的骨髓间充质干细胞。通过Transwell实验体外检测趋化因子SLC对过表达CCR7的骨髓间充质干细胞体外定向迁移的影响。将SD大鼠分为4组,每组动物10只:①对照组:未接受全身照射大鼠作为对照组;②照射组:大鼠接受全身照射(60Co单次全身照射,总剂量为7.5 Gy,照射量率为0.75 Gy/min),输注生理盐水1 mL;③BMSCs-GFP组:大鼠经全身照射后,输注GFP标记的骨髓间充质干细胞悬液1 mL (含细胞5×105个);④CCR7-BMSCs-GFP组:大鼠经全身照射后,输注携带GFP和CCR7基因的骨髓间充质干细胞1 mL (含细胞5×105个)。移植24 h后取大鼠脾脏做冰冻切片,荧光显微镜下观察骨髓间充质干细胞归巢情况,流式细胞技术检测骨髓间充质干细胞在脾脏的归巢率。ELISA方法检测照射后大鼠外周血中SLC水平。结果与结论:①Transwell实验结果表明,过表达CCR7可促进骨髓间充质干细胞向趋化因子SLC迁移募集;②冰冻切片结果显示,过表达CCR7可明显提高骨髓间充质干细胞归巢至损伤脾脏的效率;③流式细胞术测定过表达CCR7的骨髓间充质干细胞归巢至脾脏数量明显高于BMSCs-GFP组(P <0.05);④ELISA结果显示,照射24 h后大鼠外周血中SLC水平明显升高;⑤结果表明,CCR7及其配体SLC对骨髓间充质干细胞的归巢有促进作用。 展开更多
关键词 SLC/CCR7 骨髓 间充质干细胞 过表达CCR7基因 干细胞移植 细胞归巢 脾脏
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