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通过RT-PCR检测小鼠胃黏膜感染海尔曼螺杆菌后细胞因子的表达
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作者 李静 刘静华 +4 位作者 王媛媛 李娜 王显飞 陈烨 张亚历 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期378-383,共6页
目的通过比较海尔曼螺杆菌(Helicobacter heilmannii,H.heilmannii)感染BALB/c小鼠、C57BL/6小鼠、裸鼠前后以及不同时期胃黏膜IFN-γ、IL-4、IL-10及IL-1β的mRNA表达水平的变化,确定海尔曼螺杆菌感染小鼠胃黏膜诱发的免疫应答方式。... 目的通过比较海尔曼螺杆菌(Helicobacter heilmannii,H.heilmannii)感染BALB/c小鼠、C57BL/6小鼠、裸鼠前后以及不同时期胃黏膜IFN-γ、IL-4、IL-10及IL-1β的mRNA表达水平的变化,确定海尔曼螺杆菌感染小鼠胃黏膜诱发的免疫应答方式。方法采用小鼠体内传代保存的海尔曼螺杆菌株,分别灌胃3种小鼠,通过胃内接种,使海尔曼螺杆菌定植于小鼠胃内,建立长期稳定的小鼠感染模型。于第4、8、12、24、36周分别处死小鼠,取胃黏膜组织作半定量RT-PCR检测IFN-γ、IL-4、IL-10及IL-1β的mRNA水平。结果感染初期(4~12周),BALB/c、C57BL/6小鼠胃黏膜的IFN-γ、IL-4、IL-10、IL-1β的mRNA表达量较对照组均明显升高(P<0.05),其中IL-4、IL-10、IFN-γ的mRNA水平在第8~12周分别达到最大峰值,而在第4周IL-1β的mRNA水平已达高峰。12周后,BALB/c小鼠的IFN-γ表达明显降低,C57BL/6小鼠的变化不明显;感染后期(36周)的C57BL/6小鼠,IL-4的表达在感染组低于对照组(P<0.05)。免疫缺陷小鼠中IFN-γ、IL-4、IL-10、IL-1β的mRNA的表达量均较对照组增高,组间相比IL-1β、IL-4的mRNA表达差异有统计学意义(P<0.05)。结论细胞因子的表达随海尔曼螺杆菌感染时间的延长而增加,IFN-γ介导的Th1型细胞免疫在海尔曼螺杆菌感染免疫应答中占重要地位。不同品种小鼠对海尔曼螺杆菌感染的免疫应答方式有差别,C57BL/6小鼠对海尔曼螺杆菌感染主要呈Th1型细胞免疫应答,BALB/c小鼠为Th1/Th2混合免疫应答。 展开更多
关键词 海尔曼螺杆菌 动物模型 BALB/C小鼠 C57BL/6小鼠 裸鼠 细胞因子 RT-PCR
Tiam1持续过表达促进多脏器细胞增殖能力的体内研究 预览
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作者 于莉娜 田燕 +3 位作者 翁雅倩 吴晶晶 布威阿丽耶 杨敏慧 《重庆医学》 CAS 2019年第11期1813-1816,共4页
目的以T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1(Tiam1)转基因小鼠及裸鼠为实验载体,探讨Tiam1过表达在细胞增殖中的功能及作用。方法将Tiam1^+/+转基因小鼠及野生型ICR小鼠多器官组织取材、包埋、制片并进行病理形态学观察,免疫组织化学检测增殖标志... 目的以T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1(Tiam1)转基因小鼠及裸鼠为实验载体,探讨Tiam1过表达在细胞增殖中的功能及作用。方法将Tiam1^+/+转基因小鼠及野生型ICR小鼠多器官组织取材、包埋、制片并进行病理形态学观察,免疫组织化学检测增殖标志物Ki-67的表达;利用裸鼠皮下成瘤实验观察Tiam1过表达对结直肠癌细胞株HT29的体内增殖能力的影响。结果Tiam1+/+转基因小鼠的结直肠、胃、肺、肾脏以及睾丸组织均较野生型小鼠表现出更为旺盛的增殖能力;Tiam1稳定过表达能够显著促进结直肠癌细胞株HT29裸鼠皮下肿瘤增殖能力,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论Tiam1持续过表达能够在体内水平促进小鼠多脏器细胞及结直肠癌细胞的增殖能力。 展开更多
关键词 T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1 增殖 转基因小鼠 裸鼠
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人绒毛膜癌JAR细胞裸鼠移植瘤模型的建立及其生物学特性的研究 预览
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作者 崔莹 刘镭 +3 位作者 许倩 鲁艳杰 李玉红 范文静 《承德医学院学报》 2019年第3期181-184,共4页
目的:建立人绒毛膜癌JAR细胞裸鼠移植瘤模型,并观察其生物学特性。方法:12只雌性Balb/c裸鼠随机分为正常对照组和模型组。模型组裸鼠皮下注射绒癌JAR细胞悬液建立移植瘤模型,正常对照组相同部位皮下注射生理盐水。记录成瘤率、肿瘤直径... 目的:建立人绒毛膜癌JAR细胞裸鼠移植瘤模型,并观察其生物学特性。方法:12只雌性Balb/c裸鼠随机分为正常对照组和模型组。模型组裸鼠皮下注射绒癌JAR细胞悬液建立移植瘤模型,正常对照组相同部位皮下注射生理盐水。记录成瘤率、肿瘤直径及裸鼠的生存时间;采用HE染色法观察模型组移植瘤组织及主要脏器的病理变化;免疫组化SP法观察模型组移植瘤组织人绒毛膜促性腺激素(β-HCG)的表达情况;ELISA法检测正常对照组和模型组裸鼠血清β-HCG的水平。结果:模型组8只裸鼠全部成瘤,成瘤率为100%。裸鼠带瘤生存时间为(24.75±3.41)天。大体形态观察和组织病理学观察显示,移植瘤组织大量滋养细胞增生伴有出血坏死,细胞异型性明显,核大且深染;主要脏器未见转移。模型组裸鼠移植瘤组织中有β-HCG蛋白的阳性表达;模型组裸鼠血清β-HCG水平明显高于正常对照组(P<0.05)。结论:本研究成功建立了绒癌JAR细胞裸鼠移植瘤模型,可为绒癌的研究提供实验动物模型。 展开更多
关键词 绒癌 裸鼠 移植瘤 人绒毛膜促性腺激素(β-HCG)
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大车前苷介导wnt信号通路对胶质瘤细胞U-251MG增殖、侵袭及裸鼠成瘤的影响
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作者 姜玮 王静 +1 位作者 刘后垚 郭振辉 《医学分子生物学杂志》 CAS 2019年第3期251-257,共7页
目的探讨大车前苷(Plantamajoside, PMS)介导wnt信号通路对胶质瘤细胞U-251MG增殖,侵袭及裸鼠成瘤的影响。方法将正常培养U-251MG细胞分为对照组和PMS干预组,PMS干预组釆用PMS (50、100和200 μg/ml)处理48 h后。采用克隆形成实验测定... 目的探讨大车前苷(Plantamajoside, PMS)介导wnt信号通路对胶质瘤细胞U-251MG增殖,侵袭及裸鼠成瘤的影响。方法将正常培养U-251MG细胞分为对照组和PMS干预组,PMS干预组釆用PMS (50、100和200 μg/ml)处理48 h后。采用克隆形成实验测定细胞增殖情况;流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况;Transwell检测各组细胞侵袭能力;Western印迹检测各组增殖相关蛋白Ki67、PCNA、cleavedCaspase-3、cleaved Caspase-9,侵袭相关蛋白 E-cadherin、Vimentin > VEGF, wnt 信号通路蛋白 B-catenin、TCF4、c-Myc表达。皮下注射胶质瘤细胞U-251MG建立裸鼠模型,PMS组采用高中低剂量PMS腹腔注射治疗,检测肿瘤重量,免疫组化检测Ki67、Caspase-3和VEGF的表达,Western印迹检测β-catenin、TCF4和c-Myc的表达。结果与对照组相比,不同剂量PMS干预组U-251MG细胞克隆数明显减少,凋亡率显著增加(P<0.05),侵袭率显著下降(P<0.01),蛋白Ki-67, PCNA、VEGF和Vimentin的表达显著下调(P<0. 01), cleaved Caspase-3 和 cleaved Caspase-9 的表达显著上调(P<0. 05), E-cadherin 表达显著上调(P<0. 01),β-catenin、TCF4和c-Myc蛋白表达明显下调;PMS高、中、低剂量组裸鼠肿瘤质量显著下降(P<0.01),肿瘤组织中 Caspase-3 的表达显著上调(P<0.01), Ki67、VEGF、β-catenin、TCF4 和 c-Myc 的表达显著下调(P<0.01)。结论PMS可能通过抑制wnt信号通路,抑制U-251MG细胞的增殖和侵袭,抑制裸鼠皮下U-251MG移植瘤的生长。 展开更多
关键词 大车前苷 U-251MG 裸鼠
敲低核转运蛋白对人骨肉瘤细胞增殖和血管生成的体内影响
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作者 葛乔枫 张龙 +1 位作者 孙晓娟 吕智 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第14期1308-1313,共6页
目的探讨核转运蛋白2(karyopherina 2,KPNA2)对人骨肉瘤(osteosarcoma,OS)细胞增殖和血管生成的影响,并从分子层面分析其可能的作用机制。方法构建Sh-KPNA2慢病毒载体(Sh-KPNA2组)及空载体Sh-Control(Sh-Control组)转染骨肉瘤细胞Saos-2... 目的探讨核转运蛋白2(karyopherina 2,KPNA2)对人骨肉瘤(osteosarcoma,OS)细胞增殖和血管生成的影响,并从分子层面分析其可能的作用机制。方法构建Sh-KPNA2慢病毒载体(Sh-KPNA2组)及空载体Sh-Control(Sh-Control组)转染骨肉瘤细胞Saos-2,观察敲低KPNA2后对Saos-2细胞增殖的影响;利用转染Sh-KPNA2和空载体Sh-Control的Saos-2细胞分别构建OS动物模型,小动物活体荧光分子断层成像系统(fluorescence molecular tomography,FMT)验证KPNA2对瘤体血管生成的影响;qRT-PCR和Western blot验证瘤体内KPNA2和睾丸决定因子Y染色体性别决定区基因(SRY related HMG box-2,Sox2)的mRNA和蛋白表达水平。结果 Sh-KPNA2组细胞增殖能力较Sh-Control组明显降低(P<0.05);Sh-KPNA2组荷瘤小鼠瘤体积显著小于Sh-Control组(P<0.05);免疫组化和FMT扫描结果显示,Sh-Control组的血管生成能力显著高于Sh-KPNA2组(P<0.05);瘤体qRT-PCR和Western blot检测结果均显示Sox2在Sh-Control组中表达显著高于Sh-KPNA2组(P<0.05)。结论敲低KPNA2可抑制OS增殖和血管生成,其机制可能与KPNA2影响Sox2的表达有关。 展开更多
关键词 核转运蛋白 骨肉瘤细胞 细胞增殖 肿瘤血管生成 SOX2 裸鼠
CJ016对肺癌细胞增殖抑制作用的实验研究 预览
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作者 万丹 甘萍 +1 位作者 谭永红 于波涛 《西南国防医药》 CAS 2019年第8期837-839,共3页
目的考察CJ016对肺癌细胞增殖的抑制作用。方法采用MTT法检测CJ016对肺癌细胞(H292、H1975、H1299、H520、H460、HCC827)的半抑制率(IC50);建立H1975细胞裸鼠移植瘤模型,考察不同剂量CJ016(5、10、20mg/kg)尾静脉给药对移植瘤生长的影响... 目的考察CJ016对肺癌细胞增殖的抑制作用。方法采用MTT法检测CJ016对肺癌细胞(H292、H1975、H1299、H520、H460、HCC827)的半抑制率(IC50);建立H1975细胞裸鼠移植瘤模型,考察不同剂量CJ016(5、10、20mg/kg)尾静脉给药对移植瘤生长的影响,同时观察其毒性作用。结果CJ016对肺癌细胞生长有明显抑制作用,能有效抑制H1975荷瘤裸鼠肿瘤的生长,且呈现出一定的量效关系。在20mg/kg剂量时其抑瘤率达85.2%,优于阳性对照紫杉醇24mg/kg剂量组(75.5%),同时未见明显不良反应。结论CJ016对肺癌细胞生长有明显抑制作用,能有效抑制H1975细胞荷瘤裸鼠肿瘤生长,且毒性小,安全性良好。 展开更多
关键词 肺癌 CJ016 H1975 细胞增殖 半抑制率 抑瘤率 裸鼠
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苦参碱联合顺铂对人肝癌细胞株HepG2裸鼠移植瘤模型瘤体生长及caspase-3和Survivin表达的影响 预览
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作者 鄂颖 尚德高 尤胜 《临床和实验医学杂志》 2019年第5期457-460,共4页
目的 分析苦参碱联合顺铂对人肝癌细胞株Hep G2裸鼠移植瘤模型瘤体生长及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)和存活素(Survivin)表达的影响。方法 于BALB/c裸鼠腋部皮下注入人肝癌细胞株Hep G2以此构建移植瘤模型。在成瘤后,将28只裸... 目的 分析苦参碱联合顺铂对人肝癌细胞株Hep G2裸鼠移植瘤模型瘤体生长及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)和存活素(Survivin)表达的影响。方法 于BALB/c裸鼠腋部皮下注入人肝癌细胞株Hep G2以此构建移植瘤模型。在成瘤后,将28只裸鼠随机分为对照组(等量生理盐水)、顺铂组(顺铂2 mg/kg)、苦参碱组(苦参碱100 mg/kg)、联用组(苦参碱100 mg/kg+顺铂2 mg/kg)各7只,各组均通过腹腔注射给药。观察各组瘤体生长状况,对各组抑瘤率进行计算。通过免疫组化法对各组瘤组织中caspase-3、Survivin表达水平进行检测,计算和比较各组阳性细胞率。结果 联用组裸鼠抑瘤率为80. 00%,较顺铂组(64. 00%)、苦参碱组(36. 00%)明显升高(P <0. 05)。联用组裸鼠caspase-3阳性细胞率为(77. 89±7. 35)%,较对照组(19. 89±4. 14)%、顺铂组(64. 86±9. 34)%、苦参碱组(36. 97±9. 35)%均显著上升(P <0. 05)。联用组裸鼠Survivin阳性细胞率为(20. 04±4. 37)%,较对照组(84. 85±14. 75)%、顺铂组(39. 05±7. 69)%、苦参碱组(64. 06±9. 14)%均显著降低(P <0. 05)。结论 单用顺铂或苦参碱对人肝癌细胞株Hep G2裸鼠移植瘤均具有一定的抑瘤作用,但二者联用的抑瘤作用更为明显。其作用机制可能与苦参碱联合顺铂处理可对caspase-3、Survivin表达水平造成影响,进而促使肿瘤细胞凋亡存在密切关系。 展开更多
关键词 裸鼠 肝癌 移植瘤模型 苦参碱 顺铂 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3 存活素
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iEESI-MS技术联合PLS快速判定裸鼠肺癌移植瘤边界的实验研究 预览
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作者 谢灿洪 肖义坡 +4 位作者 徐建军 喻东亮 张文雄 梁永刚 魏益平 《南昌大学学报:医学版》 CAS 2019年第3期1-5,10共6页
目的 探讨内部萃取电喷雾电离质谱(iEESI-MS)技术联合偏最小二乘法(PLS)在判定裸鼠肺癌移植瘤边界中的应用。方法 建立裸鼠肺癌移植瘤模型。对裸鼠肺癌移植瘤组织和癌旁组织使用自制的取样器和iEESI-MS技术进行快速分析及进行苏木精-伊... 目的 探讨内部萃取电喷雾电离质谱(iEESI-MS)技术联合偏最小二乘法(PLS)在判定裸鼠肺癌移植瘤边界中的应用。方法 建立裸鼠肺癌移植瘤模型。对裸鼠肺癌移植瘤组织和癌旁组织使用自制的取样器和iEESI-MS技术进行快速分析及进行苏木精-伊红(HE)染色,PLS分析指纹质谱数据,碰撞诱导解离实验(CID)分析化学成分。结果 裸鼠肺癌移植瘤组织m/z值分别为783、799、809、833时相对丰度均高于癌旁组织,而m/z值分别为797、821时相对丰度均低于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05)。m/z值783为磷脂酰胆碱钠盐(POPC+Na^+),m/z值799为磷脂酰胆碱钾盐(POPC+K^+)。PLS结果显示裸鼠肺癌移植瘤组织间分布较分散,而癌旁组织间聚集良好。光学显微镜下显示裸鼠肺癌移植瘤组织中癌细胞增殖活跃,排列不整齐,核深染,异形明显,而癌旁组织表现为正常细胞形态和组织结构。结论 采用iEESI-MS技术联合PLS可快速区分裸鼠肺癌移植瘤组织和癌旁组织,为快速判定裸鼠肺癌移植瘤边界提供了新思路。 展开更多
关键词 质谱技术 快速判定 肺癌 移植瘤 边界 动物 实验 裸鼠
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下调SRSF7基因对裸鼠移植瘤生长的影响 预览
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作者 闫丽红 杨利军 杨涛 《中国医药指南》 2019年第15期1-2,6共3页
目的通过RNA干扰技术,研究丝氨酸/富含精氨酸的剪接因子(SRSF7)基因对结直肠癌裸鼠移植瘤模型肿瘤生长的影响。方法构建沉默SRSF7基因慢病毒颗粒,感染HCT116结直肠癌细胞,筛选稳定敲低SRSF7的细胞克隆。将处于对数生长期的细胞接种于BAL... 目的通过RNA干扰技术,研究丝氨酸/富含精氨酸的剪接因子(SRSF7)基因对结直肠癌裸鼠移植瘤模型肿瘤生长的影响。方法构建沉默SRSF7基因慢病毒颗粒,感染HCT116结直肠癌细胞,筛选稳定敲低SRSF7的细胞克隆。将处于对数生长期的细胞接种于BALB/c裸鼠皮下,建立皮下移植瘤模型。观察肿瘤生长情况、绘制肿瘤生长曲线;Real-TimePCR检测移植瘤中SRSF7mRNA的表达水平,免疫组化检测Ki-67和cleaved Caspase-3在肿瘤组织的表达;t-test分析移植瘤体积的差别。结果成功构建了结直肠癌皮下移植瘤模型,在成瘤后3周内,实验组与对照组相比,肿瘤体积较小,差别有统计学意义(P<0.05);Real-TimePCR结果显示实验组肿瘤较对照组SRSF7表达减少(P<0.05);Ki-67、cleaved Caspase-3的免疫组化结果显示,与对照组相比,敲减SRSF7基因后,Ki-67表达减少66%、cleaved Caspase-3表达增加37%。结论在动物水平敲减SRSF7可以抑制结直肠癌的增殖。 展开更多
关键词 SRSF7 结直肠癌 裸鼠 增殖
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槐耳清膏对乳腺癌MCF-7细胞裸鼠移植瘤的抑制作用及其与调控miR-126表达的关系 预览
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作者 鲁明骞 陆海燕 +4 位作者 冯雪松 孔庆志 张蓉 高嫣 李圣杰 《东南大学学报:医学版》 CAS 2019年第2期328-332,共5页
目的:探讨槐耳清膏对乳腺癌MCF-7细胞裸鼠致瘤性生长抑制作用及其与调控miR-126表达的关系。方法:建立裸鼠乳腺癌MCF-7细胞皮下移植瘤模型,随机将裸鼠分为两组,实验组给予槐耳清膏(浓度150mg·ml^-1)0.2ml灌胃,对照组采用0.9%生理盐... 目的:探讨槐耳清膏对乳腺癌MCF-7细胞裸鼠致瘤性生长抑制作用及其与调控miR-126表达的关系。方法:建立裸鼠乳腺癌MCF-7细胞皮下移植瘤模型,随机将裸鼠分为两组,实验组给予槐耳清膏(浓度150mg·ml^-1)0.2ml灌胃,对照组采用0.9%生理盐水0.2ml灌胃,每天两次,共30d,观察裸鼠瘤体积及瘤体重的变化;RT-PCR检测裸鼠移植瘤组织中miR-126的表达。结果:(1)裸鼠在接种MCF-7细胞3周后,实验组裸鼠移植瘤体重为(0.20±0.07)g,而对照组裸鼠移植瘤体重为(0.57±0.32)g,实验组裸鼠移植瘤体重明显低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.01)。(2)实验组裸鼠移植瘤体积为(0.32±0.74)cm^3,而对照组裸鼠移植瘤体积为(0.84±0.62)cm^3,实验组移植瘤体积较对照组小,差异具有统计学意义(P<0.01)。(3)裸鼠移植瘤组织中miR-126表达实验组是对照组的2.406倍,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:槐耳清膏能抑制裸鼠乳腺癌MCF-7细胞的生长,其机制可能是通过上调miR-126的表达从而抑制乳腺癌的发生和发展。 展开更多
关键词 槐耳清膏 MCF-7细胞 裸鼠 移植瘤 MIR-126
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HOXA4调控Wnt/β-catenin信号通路对裸鼠移植胶质瘤的抑制作用 预览
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作者 周海霞 侯力键 +3 位作者 王正明 田宇 韩亮 李密馥 《吉林大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期474-478,I0001共6页
目的:建立人胶质瘤荷瘤裸鼠模型,探讨HOXA4对胶质瘤U251细胞体内生长的影响以及对Wnt/β-catenin信号通路的调控作用及其机制。方法:采用慢病毒转染,建立胶质瘤U251细胞稳转同源异型盒基因A4 (HOXA4)siRNA细胞系(si-HOXA4)和稳转空载体... 目的:建立人胶质瘤荷瘤裸鼠模型,探讨HOXA4对胶质瘤U251细胞体内生长的影响以及对Wnt/β-catenin信号通路的调控作用及其机制。方法:采用慢病毒转染,建立胶质瘤U251细胞稳转同源异型盒基因A4 (HOXA4)siRNA细胞系(si-HOXA4)和稳转空载体阴性对照U251细胞系(si-NC)。取对数生长期U251、si-NC和si-HOXA4细胞接种于BALB/c裸鼠颈背部皮下,建立荷瘤裸鼠模型,命名为对照组、si-NC组和si-HOXA4组。观察各组裸鼠成瘤情况并绘制肿瘤生长曲线;培养21d处死裸鼠后剥离肿瘤组织,测量肿瘤体积和质量;qRT-PCR法检测各组裸鼠肿瘤组织中HOXA4、CTNNB1和Gsk3βmRNA相对表达量;免疫组织化学(IHC)法检测各组裸鼠肿瘤组织中HOXA4、β-catenin、Gsk3β、CyclinD1和P53蛋白表达水平。结果:si-HOXA4组裸鼠肿瘤体积和质量小于si-NC组和对照组(P<0.05);si-HOXA4组裸鼠肿瘤组织中HOXA4mRNA相对表达量和HOXA4蛋白表达水平低于其他2组(P<0.05);与si-NC组和对照组比较,si-HOXA4组裸鼠肿瘤组织中CTNNB1mRNA相对表达量降低(P<0.05),β-catenin和CyclinD1蛋白表达水平亦降低(P<0.05),但Gsk3β和P53蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。结论:抑制人胶质瘤U251细胞HOXA4表达可在体内通过Wnt/β-catenin信号通路调控CyclinD1和P53蛋白的表达,从而抑制荷瘤裸鼠肿瘤的生长。 展开更多
关键词 胶质瘤 同源异型盒基因A4 WNT/Β-CATENIN 信号通路 裸鼠 细胞周期蛋白D1 P53蛋白
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南方红豆杉水提物逆转胃癌细胞NCI-N87荷瘤裸鼠曲妥珠单抗耐药实验研究
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作者 王亚坤 邹媛媛 裴静波 《中医学报》 CAS 2019年第8期1700-1704,共5页
目的:观察南方红豆杉水提物联合曲妥珠单抗抑制人胃癌细胞NCI-N87裸鼠移植瘤的作用及对PI3K/AKT信号通路的影响,探索南方红豆杉水提物克服曲妥珠单抗耐药的机制。方法:建立荷瘤裸鼠模型,将40只BALB/c裸鼠接种人HER2阳性胃癌NCI-N87耐药... 目的:观察南方红豆杉水提物联合曲妥珠单抗抑制人胃癌细胞NCI-N87裸鼠移植瘤的作用及对PI3K/AKT信号通路的影响,探索南方红豆杉水提物克服曲妥珠单抗耐药的机制。方法:建立荷瘤裸鼠模型,将40只BALB/c裸鼠接种人HER2阳性胃癌NCI-N87耐药细胞株并随机分组给药及取瘤,TUNEL法检测移植瘤细胞凋亡,Western-blot检测移植瘤中PI3K、AKT1、mTOR蛋白的表达水平,实时荧光定量PCR法检测mRNA表达水平。结果:各治疗组均可见到凋亡细胞,凋亡率同对照组比较显著升高(P<0.05),联合组最为显著(P<0.01)。南方红豆杉联合组较曲妥珠单抗单药能显著降低移植瘤PI3K、AKT1、mTOR蛋白及mRNA的表达(P<0.05)。结论:南方红豆杉水提物可以诱导胃癌细胞的凋亡,联合西药曲妥珠单抗后增强其诱导作用。南方红豆杉水提物可能通过抑制HER2及下游PI3K/AKT信号通路的激活,从而克服曲妥珠单抗耐药。 展开更多
关键词 胃癌 南方红豆杉水提物 胃癌细胞NCI-N87 耐药 PI3K/AKT 曲妥珠单抗 裸鼠
五倍子瘢痕膏对瘢痕疙瘩mTOR信号通路的调控作用研究
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作者 翟晓翔 唐志铭 +2 位作者 丁继存 管志强 蒋婠 《新中医》 CAS 2019年第4期12-15,共4页
目的:观察五倍子瘢痕膏对瘢痕疙瘩哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)信号通路关键分子磷脂酰肌醇3-激酶(Phosphatidylionsitol 3-kinase,PI3K)、10号染色体张力缺失蛋白磷酸酶(Phosphatase and tensin homolo... 目的:观察五倍子瘢痕膏对瘢痕疙瘩哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)信号通路关键分子磷脂酰肌醇3-激酶(Phosphatidylionsitol 3-kinase,PI3K)、10号染色体张力缺失蛋白磷酸酶(Phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten,PTEN)、蛋白激酶B (Protein Kinase B,Akt)、mTOR表达的影响。方法:将36只裸鼠瘢痕疙瘩模型随机分成治疗组和模型组,每组18只。治疗组涂抹五倍子瘢痕膏,模型组仅涂抹制作五倍子瘢痕膏的基质,每天3次,连续30天。然后应用免疫组化检测治疗组和模型组瘢痕疙瘩及正常皮肤组织中PI3K、PTEN、Akt、mTOR的表达。结果:与正常皮肤组比较,模型组PI3K、Akt、mTOR表达阳性率升高,而PTEN表达阳性率降低,差异均有统计学意义(P <0.05);与模型组比较,治疗组PI3K、Akt、mTOR表达阳性率降低,而PTEN表达阳性率升高,差异均有统计学意义(P <0.05)。应用Person法对瘢痕疙瘩中mTOR信号通路各关键信号分子表达相关性进行分析,结果 PTEN与PI3K、mTOR、Akt呈负相关,PI3K与mTOR、Akt呈正相关,Akt与mTOR呈正相关。结论:五倍子瘢痕膏抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖的机制与其上调mTOR信号通路中PTEN表达及下调PI3K、Akt、mTOR表达有关。 展开更多
关键词 瘢痕疙瘩 五倍子瘢痕膏 MTOR信号通路 动物实验 裸鼠
结肠癌肝转移裸鼠模型的建立 预览
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作者 李华驰 熊治国 +3 位作者 谢敏 谈凯 殷涛 冯茂辉 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2019年第5期63-68,共6页
目的构建一种转移率高、操作简便、结果可靠的结肠癌肝转移模型,用于结肠癌转移防治的实验研究。方法 15只Balb/c裸鼠平均分为3组(A组、B组、C组),5只Balb/c小鼠单独为D组,以细胞浓度2.5×10^7 / mL 的 HCT116、CT26 细胞悬液 0. 2 ... 目的构建一种转移率高、操作简便、结果可靠的结肠癌肝转移模型,用于结肠癌转移防治的实验研究。方法 15只Balb/c裸鼠平均分为3组(A组、B组、C组),5只Balb/c小鼠单独为D组,以细胞浓度2.5×10^7 / mL 的 HCT116、CT26 细胞悬液 0. 2 mL 分别行脾种植保脾法及切脾法构建结肠癌肝转移模型,对比四组动物模型造模成功率及肝转移灶大小、数目及腹腔内转移情况。结果 A组裸鼠造模成功率100%(5/5),肝及脾均成瘤,肝转移瘤数目较少,较分散,多分布于肝右叶,生存时间平均为(26.6±3.4) d;B组裸鼠造模成功率40%(2/5),转移瘤分散于肝表面,体积较A组大,生存时间平均为(36.8±4.2) d;C组裸鼠造模成功率100%(5/5),肝及脾均成瘤,肝转移瘤数目较多,多个转移瘤融合成团,占据整个肝右叶,生存时间平均为(20.2±2.6) d;D组肝未发现转移灶。三组裸鼠部分出现腹腔转移(A组2只,C组3只),均未出现心、肺、脑、肾转移灶。 3组裸鼠肝转移瘤组织细胞学形态符合腺癌的特征。结论保脾法能获得较高的造模成功率,能有效模拟人类结肠癌细胞经血行转移至肝的途径和过程。 展开更多
关键词 结肠癌 肝转移 裸鼠
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人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤模型的改良
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作者 郑晶 朱博文 +2 位作者 黄煜 颜莉莉 林慧 《中国妇幼保健》 CAS 2019年第18期4307-4309,共3页
目的探讨通过Matrigel与高浓度Ishikawa肿瘤细胞混合接种的方法优化改良人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤模型的可行性。方法培养Ishikawa人子宫内膜癌细胞系,制备高浓度肿瘤细胞与Matrigel等体积悬液,裸鼠右侧肩胛部皮下注射。观察接种后裸... 目的探讨通过Matrigel与高浓度Ishikawa肿瘤细胞混合接种的方法优化改良人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤模型的可行性。方法培养Ishikawa人子宫内膜癌细胞系,制备高浓度肿瘤细胞与Matrigel等体积悬液,裸鼠右侧肩胛部皮下注射。观察接种后裸鼠的存活状况及成瘤情况。石蜡包埋肿瘤组织切片,HE染色观察肿瘤组织病理学特征。结果 10只裸鼠均成功建立肿瘤模型,建模成功率100%。接种28 d内出现1例裸鼠瘤体破溃,9只裸鼠均存活,移植瘤瘤体表面皮肤完整。肿瘤最长径可达15. 1~17. 9 mm,瘤重0. 83~1. 59 g。所有移植瘤组织经病理学证实均符合人子宫内膜癌的特点。结论采用将高浓度Ishikawa细胞与Matrigel混悬法可在短时间内成功构建人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤模型,且移植瘤组织和细胞保留了人子宫内膜癌的病理特征,适用于实验研究的开展。 展开更多
关键词 子宫内膜癌 Ishikawa细胞株 MATRIGEL 裸鼠 动物模型
不同的人癌裸鼠移植瘤模型中磷脂酶A2的表达 预览
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作者 屠珏 周卫民 +2 位作者 蔡月琴 凌云 陈民利 《实验动物与比较医学》 CAS 2019年第4期298-304,共7页
目的观察磷脂酶A2(PLA2)在不同的人癌裸小鼠移植瘤模型中的蛋白表达及特征。方法分别采用肺癌、鼻咽癌、肝癌、胰腺癌、胃癌、结肠癌、食管癌和卵巢癌肿瘤细胞株构建裸小鼠皮下移植瘤模型,待肿瘤生长至瘤体积达1 cm3后,采用酶联免疫吸附... 目的观察磷脂酶A2(PLA2)在不同的人癌裸小鼠移植瘤模型中的蛋白表达及特征。方法分别采用肺癌、鼻咽癌、肝癌、胰腺癌、胃癌、结肠癌、食管癌和卵巢癌肿瘤细胞株构建裸小鼠皮下移植瘤模型,待肿瘤生长至瘤体积达1 cm3后,采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测肿瘤组织、正常组织及血清中4种主要类型PLA2(cPLA2、sPLA2、iPLA2和lp-PLA2)的蛋白表达,并以正常裸小鼠血清作对照。结果在呼吸系统、消化系统和生殖系统的8种人肿瘤细胞裸小鼠移植瘤模型中,肿瘤组织cPLA2、sPLA2、lp-PLA2的蛋白表达均显著或极显著高于正常组织(P<0.05,P<0.01),肿瘤组织iPLA2的蛋白表达均高于正常组织,除人结直肠癌细胞HT-29移植瘤模型外,均呈现极显著性差异(P<0.01)。8种移植瘤模型中,荷瘤小鼠血清中4种类型PLA2的蛋白含量均极显著高于正常小鼠(P<0.01)。结论 4种类型PLA2在呼吸系统、消化系统和生殖系统不同的裸小鼠移植瘤模型的肿瘤组织和血清中均呈现高表达,无肿瘤类型特异性,表明磷脂酶A2可能参与肿瘤的发生、发展。 展开更多
关键词 裸小鼠 移植瘤模型 磷脂酶A2(PLA2)
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扶正健脾方联合化疗通过PI3K/AKT信号通路对肿瘤转移微环境的影响 被引量:1
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作者 付淑娟 周张杰 +7 位作者 吴婷婷 钟薏 张士强 杨蕴 蒋海燕 夏晓婷 吕俊强 杜博倩 《中医学报》 CAS 2019年第4期766-770,共5页
目的:观察扶正健脾方对PI3K/AKT信号通路的影响,分析该方抑制肿瘤转移的作用机制及途径。方法:建立裸鼠结肠癌原位移植高转移模型,分为模型组、5-氟尿嘧啶组、奥沙利铂组、5-氟尿嘧啶+奥沙利铂组、扶正健脾方+5-氟尿嘧啶+奥沙利铂组及... 目的:观察扶正健脾方对PI3K/AKT信号通路的影响,分析该方抑制肿瘤转移的作用机制及途径。方法:建立裸鼠结肠癌原位移植高转移模型,分为模型组、5-氟尿嘧啶组、奥沙利铂组、5-氟尿嘧啶+奥沙利铂组、扶正健脾方+5-氟尿嘧啶+奥沙利铂组及谷氨酰胺+5-氟尿嘧啶+奥沙利铂组,每组10只;原位移植手术第3天开始,均按照0.01 mL·g-1开始腹腔注射给药,第17天到第38天共21 d,连续灌胃处理。第39天仅提供水禁食,第40天处死取材。观察裸鼠体质量和肠道肿瘤的质量,采用免疫组织化学法、Real-Time PCR、Western Blot检测肠道肿瘤组织中AKT、PI3K的表达。结果:①裸鼠体质量和肠道肿瘤质量:各组裸鼠体质量比较,差异无统计学意义(P>0.05);各组肠道肿瘤质量比较,差异有统计学意义(P<0.05),与其他组比较,扶正健脾方+5-FU+奥沙利铂对肿瘤质量有影响,能使瘤体明显缩小(P<0.05),但与谷氨酰胺+5-FU+奥沙利铂组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。②PI3K/AKT表达:扶正健脾方+5-氟尿嘧啶+奥沙利铂组与模型组、5-氟尿嘧啶组、奥沙利铂组比较,明显下调PI3K、AKT表达(P<0.05);扶正健脾方+5-氟尿嘧啶+奥沙利铂组与谷氨酰胺+5-氟尿嘧啶+奥沙利铂组PI3K、AKT表达比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:健脾扶正方联合化疗能有效控制瘤体大小,有效降低PI3K、AKT的表达;与谷氨酰胺联合化疗疗效相当,证实中药扶正健脾方可通过PI3K/AKT信号通路抑制肿瘤转移产生。 展开更多
关键词 扶正健脾方 肠癌 PI3K/AKT信号通路 肿瘤微环境 裸鼠
荧光素酶生物发光报告体系的优化及在肝癌荷瘤裸鼠模型中的应用 预览
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作者 王爽 许坚吉 +1 位作者 刘晓霓 陈德喜 《实用肝脏病杂志》 CAS 2019年第4期482-485,共4页
目的优化荧光素酶生物发光报告体系条件,提高基于荧光素酶生物发光活体成像技术在活体肿瘤研究中的检测灵敏性和应用潜力。方法在一定数目稳定表达荧光素酶的肝癌细胞(HepG2-Luc)基础上(固定荧光素酶量)进行体外luciferin和ATP的最佳浓... 目的优化荧光素酶生物发光报告体系条件,提高基于荧光素酶生物发光活体成像技术在活体肿瘤研究中的检测灵敏性和应用潜力。方法在一定数目稳定表达荧光素酶的肝癌细胞(HepG2-Luc)基础上(固定荧光素酶量)进行体外luciferin和ATP的最佳浓度优化,以此优化条件进行荷瘤裸鼠活体成像灵敏度检测和发光强度分析。结果Luciferin的最佳浓度是1.25mg/ml,ATP缓冲液的最佳浓度是12.5μM。活体成像实验显示,未使用优化体系时,将2×10^6肝癌细胞皮下注射后检测到的光强度为484645,使用优化体系进行检测的发光强度为1483024;对荷瘤裸鼠进行检测时,未使用优化体系时的实验鼠与对照鼠的信号强度比值为0.11,而优化后的比值增加为0.67,说明以此配比优化的荧光素酶报告系统能够明显提高裸鼠体内肿瘤的检出灵敏度,延长发光时间。结论应用我们建立的荧光素酶生物发光报告体系优化方法可以显著提高肝癌荷瘤裸鼠活体成像检测的灵敏度。 展开更多
关键词 HEPG2细胞 活体成像技术 生物发光 荧光素酶 裸鼠
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慢病毒介导的靶向SNCG敲除对人结肠癌SW1116裸鼠结肠癌肝转移实验模型的影响 预览
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作者 许少华 周东 +1 位作者 张辉 陈昭硕 《福建医药杂志》 CAS 2019年第5期120-123,共4页
目的研究慢病毒介导的丫突触核蛋白(SNCG)基因敲除对人结肠癌SW1116细胞在裸鼠结肠癌肝转移实验模型中的影响。方法前期实验中,通过SNCG基因敲除并慢病毒转染,构建稳定表达的SNCG敲除实验组(RNAi组)、转染空质粒的空质粒对照组(NC组)。... 目的研究慢病毒介导的丫突触核蛋白(SNCG)基因敲除对人结肠癌SW1116细胞在裸鼠结肠癌肝转移实验模型中的影响。方法前期实验中,通过SNCG基因敲除并慢病毒转染,构建稳定表达的SNCG敲除实验组(RNAi组)、转染空质粒的空质粒对照组(NC组)。复苏基因敲除实验组(RNAi组)、空质粒对照组(NC组)及空白对照组(CON组)的野生型SW1116细胞,保脾法建立裸鼠结肠癌肝转移模型,免疫组化染色、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、蛋白质免疫印迹(Western blot)检测SNCG基因的表达。结果1)成功构建裸鼠结肠癌肝转移模型。2)与对照组比较,RNAi组裸鼠移植瘤生长缓慢,原位成瘤率及肝转移率均明显下降。3)免疫组化、RT-PCR及Western blot结果显示,RNAi组SNCG mRNA和蛋白表达均明显下降。结论SNCG基因沉默后,裸鼠脾脏原位移植瘤及转移瘤的数量变少,体积变小。在体内,靶向SNCG敲除降低了原位移植瘤及肝脏转移瘤中SNCG基因的mRNA及蛋白表达,表明SNCG基因对结肠癌的增生、侵袭起积极推动作用。利用RNAi技术抑制SNCG基因的表达有望为结肠癌的基因治疗提供新靶点、新手段。 展开更多
关键词 慢病毒载体 SNCG基因 基因敲除 裸鼠 结肠癌肝转移
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miR-21下调程序性死亡细胞4对抑制裸鼠肾细胞癌肿瘤转化和增殖的实验研究 预览 被引量:1
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作者 吴佳成 陆雅君 姜力 《疑难病杂志》 CAS 2019年第1期61-66,共6页
目的研究微小核糖核酸-21(miR-21)下调程序性死亡细胞4(PDCD4)对裸鼠肾细胞癌的影响和关系。方法将24只BALB/c雄性裸鼠按随机数字表法分为以下3组:阴性对照(NC组,n=8)、miR-21模拟物组(n=8)和miR-21抑制剂组(n=8)。将肾细胞癌786-O细胞... 目的研究微小核糖核酸-21(miR-21)下调程序性死亡细胞4(PDCD4)对裸鼠肾细胞癌的影响和关系。方法将24只BALB/c雄性裸鼠按随机数字表法分为以下3组:阴性对照(NC组,n=8)、miR-21模拟物组(n=8)和miR-21抑制剂组(n=8)。将肾细胞癌786-O细胞皮下移植到小鼠的腋下,然后每天注射NC小干扰RNA(siRNA),前体-miR-21(模拟物)或抗-miR-21(抑制剂)。786-O细胞移植后16d,从小鼠中取出肿瘤并称重。使用逆转录一定量PCR分析癌组织中miR-21和PDCD4mRNA的表达。采用免疫组织化学和Westernblot检测PDCD4蛋白在癌组织中的表达,用PDCD4siRNA或NCsiRNA转染786-O细胞,观察沉默PDCD4对肿瘤细胞生长、增殖和侵袭的影响。雌性软琼脂克隆形成、EdU细胞增殖测定和Transwell迁移和侵袭测定。另取16只BALB/c雄性裸鼠随机分为2组:NC(n=8)和PDCD4siRNA(n=8)。将786-O细胞皮下移植到小鼠的腋下,每天注射NCsiRNA或PDCD4siRNA。移植后16d取出肿瘤并称重。结果与NC组相比,miR-21模拟组的肿瘤重量显著增加,miR-21抑制剂组中的肿瘤重量显著降低(P<0.01)。裸鼠肾癌模型中的miR-21表达在miR-21模拟组中显著上调,与NC组相比显著降低(P<0.01)。在miR-21抑制剂组中,miR-21模拟组PDCD4蛋白水平显著降低,miR-21抑制剂组显著增加(P<0.01),而PDCD4mRNA表达没有显著改变(P>0.05)。在EdU增殖测定中,NCsiRNA组中的新细胞合并EdU的平均百分比为28.6%,并且在PDCD4siRNA转染的细胞中显著增加至44.7%(P<0.05)。在软琼脂克隆形成实验中,Transwell和迁移和侵袭实验显示,PDCD4siRNA转染细胞的集落形成、迁移和侵袭能力显著增加,与NC组相比,肿瘤重量在PDCD4siRNA组中显著增加(P<0.01)。结论miR-21可促进裸鼠肾癌模型癌细胞增生和增殖,转录后下调PDCD4蛋白表达可抑制癌细胞增生和增殖,提示增加PDCD4表达或抑制miR-21表达可能成为治疗肾癌的有效新治疗策略。 展开更多
关键词 程序性死亡细胞4 微小核糖核酸-21 裸鼠 肾癌 肿瘤转化 增殖
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