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青海省2013-2017年脊髓灰质炎病原学监测结果分析
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作者 李崇亥 赵生仓 +2 位作者 范丽霞 巴卓玛 李得恩 《医学动物防制》 2019年第3期252-254,共3页
目的通过对青海省2013-2017年急性驰缓性麻痹(Acllte flaccid paralysis,AFP)病例与健康人群的病原学进行监测,为维持无脊灰状态提供准确、可靠的科学依据。方法采用RD、L20B细胞对AFP病例及健康人群的粪便标本进行病毒分离,分离到的脊... 目的通过对青海省2013-2017年急性驰缓性麻痹(Acllte flaccid paralysis,AFP)病例与健康人群的病原学进行监测,为维持无脊灰状态提供准确、可靠的科学依据。方法采用RD、L20B细胞对AFP病例及健康人群的粪便标本进行病毒分离,分离到的脊髓灰质炎毒株送至国家脊髓灰质炎实验室进行鉴定。结果 2013-2017年共接收AFP病例粪便标本106份,分离到脊髓灰质炎病毒(Poliovirus,PV) 1株,分离率为0. 94%,分离到非脊灰肠道病毒(NonPolio Enterovirus,NPEV) 11株,分离率为10. 38%。共接收全省健康人群粪便标本790份,分离到PV 6株,分离率为0. 76%,分离到NPEV 143株,分离率为18. 10%。AFP病例及健康人群标本中分离到的所有PV毒株中,PVⅠ型5株,PVⅢ型1株,PVⅠ+PVⅢ混合型1株,均为脊灰疫苗相关株,无脊灰野病毒株。结论青海省2013-2017年无本地脊灰野毒株病例流行,阻断了脊灰本地野病毒的传播,保持了无脊灰状态。 展开更多
关键词 脊髓灰质炎病毒 非脊灰肠道病毒 病原学监测
河北省2016年脊髓灰质炎实验室运转情况分析
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作者 张俊棉 孙丽 +6 位作者 刘岩 赵娜 陈玫 朱怡青 郭玉 李静 张振国 《医学动物防制》 2018年第6期516-519,共4页
目的分析河北省2016年脊髓灰质炎(脊灰)实验室运转情况,为维持河北省无脊灰状态提供实验室依据。方法对河北省各市通过急性弛缓性麻痹(Acute flaccid paralysis,AFP)病例监测信息报告管理系统报告的AFP病例及河北省脊灰实验室监测... 目的分析河北省2016年脊髓灰质炎(脊灰)实验室运转情况,为维持河北省无脊灰状态提供实验室依据。方法对河北省各市通过急性弛缓性麻痹(Acute flaccid paralysis,AFP)病例监测信息报告管理系统报告的AFP病例及河北省脊灰实验室监测数据进行分析,对WHO要求的各项监测指标进行评价。结果 2016年河北省AFP病例监测信息报告管理系统共报告AFP病例365例,实验室收到362例AFP病例粪便标本719份,5例分离到脊灰病毒(Poliovirus,PV),分离率为1.38%;49例分离到非脊灰肠道病毒(NPEV),分离率为13.54%。分离的PV分离成单血清型共计10株,VP1区编码区核苷酸均发生了不同程度变异,但都以低个数变异为主,均为疫苗相似株(Sabin Like,SL)。2016年接受WHO一次病毒分离和两次型内鉴定(Intra-typic differentiation,ITD)盲样标本能力考核,实验室各项监测指标均远远超过WHO的认证标准。按WHO要求,细胞支原体检测结果均为阴性,没有受到支原体污染,细胞敏感性的评价两种细胞都对PV敏感、有效。结论河北省脊灰实验室运转正常,没有发现脊灰野病毒(Wild poliovirus,WPV)和疫苗衍生脊灰病毒(Vaccine-derived poliovirus,VDPV)及VDPV病例,为河北省维持无脊灰状态提供了准确、可靠的病毒学依据。 展开更多
关键词 脊髓灰质炎实验室 运转 脊髓灰质炎病毒 疫苗衍生脊髓灰质炎病毒
脊髓灰质炎2型病毒样颗粒在毕赤酵母内的表达与鉴定 预览
3
作者 赵辉 温晔 +3 位作者 彭少丹 晏巧玲 马金 朱涛 《微生物学免疫学进展》 2018年第4期7-13,共7页
目的构建可稳定表达脊髓灰质炎病毒(poliovirus,PV)类病毒颗粒(virus-like particles,VLPs)的整合型重组毕赤酵母,鉴定PV VLPs在毕赤酵母细胞中的表达及组装情况。方法根据毕赤酵母密码子偏好性优化salk株II型P1和3CD基因并连接到p ... 目的构建可稳定表达脊髓灰质炎病毒(poliovirus,PV)类病毒颗粒(virus-like particles,VLPs)的整合型重组毕赤酵母,鉴定PV VLPs在毕赤酵母细胞中的表达及组装情况。方法根据毕赤酵母密码子偏好性优化salk株II型P1和3CD基因并连接到p Pic ZA载体,构建p Pic ZA-P1-3CD表达载体;用Bgl II线性化p Pic ZA-P1-3CD载体,电转至毕赤酵母GS115中。通过Zeocin抗性筛选获得整合型重组毕赤酵母,随后用高浓度Zeocin抗性筛选得到高表达菌株。甲醇诱导后,用Western Blot检测目的蛋白表达;蔗糖密度梯度离心纯化PV VLPs并进行透射电镜观察。结果成功构建p Pic ZA-P1-3CD表达载体,获得PV VLPs重组毕赤酵母。Western Blot在重组毕赤酵母裂解上清中检测到目的蛋白的表达;蔗糖密度梯度离心纯化后,在透射电镜中观察到直径为30 nm左右的VLPs,其形态与天然的PV颗粒相似。结论成功构建PV-2型VLPs的整合型重组酵母系统,并在毕赤酵母中组装形成了VLPs,为酵母表达系统中PV VLPs疫苗的研制奠定了基础。 展开更多
关键词 脊髓灰质炎病毒 毕赤酵母 蔗糖密度梯度离心 病毒样颗粒
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2015-2016年河北省急性弛缓性麻痹病例病原学检测分析
4
作者 陈玫 孙丽 +5 位作者 赵娜 张俊棉 朱怡青 李静 郭玉 张振国 《中国疫苗和免疫》 北大核心 2018年第3期294-298,共5页
目的分析2015-2016年河北省急性弛缓性麻痹(AFP)病例的脊髓灰质炎(脊灰)病毒检测状况,为河北省继续维持无脊灰状态提供依据。方法收集2015-2016年河北省AFP病例粪便标本进行病毒分离和鉴定,对脊灰病毒分离株采用逆转录-聚合酶链反应... 目的分析2015-2016年河北省急性弛缓性麻痹(AFP)病例的脊髓灰质炎(脊灰)病毒检测状况,为河北省继续维持无脊灰状态提供依据。方法收集2015-2016年河北省AFP病例粪便标本进行病毒分离和鉴定,对脊灰病毒分离株采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增VP1区基因片段,进行核苷酸序列测定和分析。结果从665份AFP病例粪便标本中分离到脊灰病毒12株(1.80%)、非脊灰肠道病毒(NPEV)112株(16.84%)。与Sabin株相比,脊灰病毒VP1区核苷酸发生0个变异3株、1个变异6株、2个变异4株、3个变异2株、4个变异1株;在NPEV分离株中,7-8月份分离株数占47.2%。结论 2015-2016年河北省脊灰病毒分离株均为疫苗相关株,病毒核苷酸变异以低变异为主。 展开更多
关键词 急性弛缓性麻痹 脊髓灰质炎病毒 核苷酸变异
新疆维吾尔自治区脊髓灰质炎实验室2014-2017年细胞系质量控制评价
5
作者 唐海淑 崔惠 +5 位作者 翟啸虎 彭力吉 宁静 关静 邓晟 王东艳 《中国疫苗和免疫》 北大核心 2018年第1期57-60,共4页
目的评价新疆维吾尔自治区脊髓灰质炎(脊灰)实验室2014年8月-2017年8月所用细胞系的质量控制情况。方法分别采用聚合酶链反应(Polymerase chain reaction,PCR)法和96孔微量培养板滴定法开展细胞系支原体检测(Cell mycoplasma dete... 目的评价新疆维吾尔自治区脊髓灰质炎(脊灰)实验室2014年8月-2017年8月所用细胞系的质量控制情况。方法分别采用聚合酶链反应(Polymerase chain reaction,PCR)法和96孔微量培养板滴定法开展细胞系支原体检测(Cell mycoplasma detection,CMD)和细胞敏感性(Cell sensitivity,CS)监测,评价新疆脊灰实验室使用的人横纹肌肉瘤细胞(Human rhabdomyosarcoma,RD)和转人脊灰病毒受体的小鼠肺细胞系(Mouse cell line expressing the gene for the human cellular receptor for poliovinls,L20B)的污染状况和敏感性。结果新疆脊灰实验室2014年8月-2017年8月使用的RD、L20B细胞系支原体检测均为阴性,两种细胞系的滴度与脊灰实验室质量控制(Laboratory quality control,LQC)株比较均在正常范围(±0.5logCCID50/0.1m1)。结论新疆脊灰实验室细胞系质量控制安全有效,所用细胞系无污染且对脊灰病毒敏感,为新疆急性弛缓性麻痹病例监测及维持无脊灰状态提供了质量保证。 展开更多
关键词 脊髓灰质炎病毒 细胞支原体检测 细胞敏感性监测
不同脊髓灰质炎病毒株3CD蛋白酶在昆虫细胞中的表达及其对P1前体蛋白的剪切 预览
6
作者 马金 李军强 +2 位作者 莘春林 段静留 朱涛 《微生物学免疫学进展》 2018年第1期1-6,共6页
目的获得在昆虫细胞中有效表达脊髓灰质炎病毒P1基因和3CD基因的重组杆状病毒,为制备脊髓灰质炎病毒样颗粒疫苗提供了科学依据。方法将I型脊髓灰质炎病毒(Mahoney株)的P1基因和3CD基因构建到供体质粒中,通过flash BAC ULTRATM系统制... 目的获得在昆虫细胞中有效表达脊髓灰质炎病毒P1基因和3CD基因的重组杆状病毒,为制备脊髓灰质炎病毒样颗粒疫苗提供了科学依据。方法将I型脊髓灰质炎病毒(Mahoney株)的P1基因和3CD基因构建到供体质粒中,通过flash BAC ULTRATM系统制备重组杆状病毒;将Mahoney株的P1基因与Sabin株Ⅲ型的3CD基因组合,用同样方法构建重组杆状病毒。通过接种昆虫细胞草地贪夜蛾细胞(sf-9细胞)对两种病毒进行扩增,再接种昆虫细胞粉纹夜蛾细胞(High five细胞)扩大培养,并通过定量PCR对P1和3CD基因的表达进行验证,利用Western blot检测P1蛋白的表达及被3CD蛋白酶剪切的情况。结果获得了两株稳定表达脊髓灰质炎病毒P1和3CD基因的重组杆状病毒。其中,重组杆状病毒(Bac U-Mahoney-P1-3CD)在感染细胞后,3CD蛋白酶表达量较低,不能有效剪切P1前体蛋白;而重组杆状病毒(Bac U-Mahoney-P1-Sabin PV3 3CD)感染细胞后,3CD蛋白酶的表达量和对P1前体蛋白的剪切效力都有明显提高(P〈0.05)。结论将Mahoney株P1基因和Sabin株Ⅲ型的3CD基因的组合构建重组杆状病毒,可有效地在昆虫细胞中表达P1和3CD基因,并且Sabin株Ⅲ型的3CD蛋白酶可有效地剪切Mahoney株的P1前体蛋白。 展开更多
关键词 脊髓灰质炎病毒 草地贪夜蛾细胞 3CD蛋白酶 P1前体蛋白 重组杆状病毒 类病毒颗粒
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血清对Ⅱ型脊髓灰质炎病毒感染性滴度检测结果的影响 预览
7
作者 张名 伍胤杰 +5 位作者 沈武玲 周健 寸怡娜 平玲 彭佳 孙明波 《医学研究杂志》 2018年第5期43-46,共4页
目的比较6种不同血清对Ⅱ型脊髓灰质炎病毒感染性滴度(CCID50)检测结果的影响。方法分别采用6种未处理血清和6种预处理血清组(免疫吸附法)进行Ⅱ型脊髓灰质炎病毒感染性滴度检测(微细胞病变法),检测了不同组血清中Ⅱ型脊髓灰质炎... 目的比较6种不同血清对Ⅱ型脊髓灰质炎病毒感染性滴度(CCID50)检测结果的影响。方法分别采用6种未处理血清和6种预处理血清组(免疫吸附法)进行Ⅱ型脊髓灰质炎病毒感染性滴度检测(微细胞病变法),检测了不同组血清中Ⅱ型脊髓灰质炎病毒中和抗体滴度,并使用处理血清组进行促细胞生长试验。最后分析不同血清对感染性滴度的影响。结果6种未处理血清组病毒感染性滴度检测结果差异有统计学意义(P〈0.01),6种处理血清组病毒感染性滴度差异无统计学意义(P〉0.05)。未处理组2号血清的中和抗体滴度为1∶4,6号血清的中和抗体滴度为1∶8,其余各组血清的中和抗体滴度均〈1∶4。6种处理血清组的中和抗体滴度均为1∶2。血清促细胞生长试验显示6种处理组血清细胞生长趋势正常。结论Ⅱ型脊髓灰质炎病毒感染性滴度检测前使用免疫吸附对血清进行预处理,可降低血清中存在的中和抗体对检测的影响,为比较不同实验室数据提供可能。 展开更多
关键词 脊髓灰质炎病毒 滴度 中和抗体 血清
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含表没食子儿茶素没食子酸酯手消毒剂对脊髓灰质炎病毒灭活效果研究
8
作者 季曼 张祺 +6 位作者 杨庆雨 邬开朗 张天宝 占发先 徐德 吴建国 彭明军 《中国消毒学杂志》 2018年第10期721-724,共4页
目的检测含表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)手消毒剂对脊髓灰质炎1型疫苗株(PV1)的杀灭力,研究能够有效杀灭无囊膜病毒的新型手消毒剂。方法参照2002年版《消毒技术规范》,采用悬液法和载体法检测液体型和凝胶型含EGCG酒精手消毒剂... 目的检测含表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)手消毒剂对脊髓灰质炎1型疫苗株(PV1)的杀灭力,研究能够有效杀灭无囊膜病毒的新型手消毒剂。方法参照2002年版《消毒技术规范》,采用悬液法和载体法检测液体型和凝胶型含EGCG酒精手消毒剂对PV1的杀灭效果,并以含酒精和含碘手消毒剂为平行对照。结果两种剂型的含EGCG手消毒剂分别在与滴度为8.15 Log TCID50的PV1病毒孵育30 s后,PV1滴度降至1.5 Log TCID50和2.17 Log TCID50。对消毒剂进行除药操作后,经消毒剂处理过的PV1依然处于失活状态。含酒精与含碘手消毒剂处理30 s后PV1感染力分别为5.27 Log TCID50和4.87 Log TCID50,对病毒的杀灭效果均未达到《消毒技术规范》要求。结论含EGCG酒精消毒剂对PV1的杀灭效果不可逆,脂溶性EGCG可增强酒精手消毒剂对无囊膜病毒的杀灭效果。 展开更多
关键词 表没食子儿茶素没食子酸酯 酒精 脊髓灰质炎病毒 手消毒剂
Ⅲ型脊髓灰质炎病毒抗原表位嵌合蛋白的免疫学研究
9
作者 杨筱舟 王晶 +5 位作者 夏文跃 潘小霞 赵冰心 滕玉梅 文喻玲 陈元鼎 《生物技术通讯》 CAS 2018年第3期362-366,共5页
目的:对以轮状病毒(RV)重组VP6蛋白为载体插入Ⅲ型脊髓灰质炎病毒(PV3)VP1蛋白上1个抗原表位(VP1的91~102、254和168位氨基酸残基)所构建的嵌合蛋白6F/PV3N1进行体外免疫学研究。方法:利用分子克隆和基因重组技术将PV3抗原表位... 目的:对以轮状病毒(RV)重组VP6蛋白为载体插入Ⅲ型脊髓灰质炎病毒(PV3)VP1蛋白上1个抗原表位(VP1的91~102、254和168位氨基酸残基)所构建的嵌合蛋白6F/PV3N1进行体外免疫学研究。方法:利用分子克隆和基因重组技术将PV3抗原表位插入RV载体蛋白,构建重组抗原表位嵌合蛋白表达质粒,转染大肠杆菌后表达重组蛋白,经SDS-PAGE确认表达产物,再通过Western印迹分析嵌合蛋白的抗原反应性。结果:用载体蛋白VP6F、轮状病毒Wa病毒株免疫的豚鼠血清抗体分别都能与VP6F和6F/PV3N1产生特异性结合;PV3免疫的豚鼠血清抗体只能与6F/PV3N1产生特异性结合,不能与VP6F产生特异性结合;PV1免疫的豚鼠血清抗体则不能与6F/PV3N1和VP6F产生特异性结合。结论:PV1、PV3之间不存在交叉反应现象,以RV VP6为载体构建的嵌合蛋白6F/PV3N1具有较好的免疫原性,为研发RV/PV3嵌合疫苗提供了基础。 展开更多
关键词 轮状病毒 脊髓灰质炎病毒 抗原表位 嵌合蛋白 免疫原性
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2016年河南省急性弛缓性麻痹病例中脊髓灰质炎病毒监测结果分析 被引量:1
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作者 吕宛玉 张璐 +3 位作者 杨建辉 张明瑜 蒋红丽 徐瑾 《河南预防医学杂志》 2018年第2期115-117,共3页
目的 鉴定分析河南省15岁以下儿童疑似急性弛缓性麻痹(acute flaccid paralysis,AFP)病例中实验室确诊感染脊髓灰质炎(脊灰)病毒(Poliovirus,PV)的型别,为河南省制定更完善的脊灰防控策略及维持“无脊灰野病毒状态”提供科学依据... 目的 鉴定分析河南省15岁以下儿童疑似急性弛缓性麻痹(acute flaccid paralysis,AFP)病例中实验室确诊感染脊髓灰质炎(脊灰)病毒(Poliovirus,PV)的型别,为河南省制定更完善的脊灰防控策略及维持“无脊灰野病毒状态”提供科学依据。方法 依据《WHO脊髓灰质炎实验室手册第4版》操作规程,使用RD和L20B两种细胞对河南省2016年AFP标本进行病毒分离,采用荧光定量PCR法及逆转录PCR法进行病毒序列鉴定和分析。结果 共检测453例疑似AFP病例,其中有7例(1.55%)病例分离出10株脊灰病毒,其中Ⅰ型、Ⅲ型和Ⅰ+Ⅲ型分别为5株,3株和2株。分离到脊灰毒株与Sabin株相比,核苷酸VP1区发生0、1、2、4和6个变异的数量分别为3、1、3、2和1株。结论 2016年河南省分离出脊灰病毒均为脊灰疫苗株,毒株型别以Ⅰ型为主,VP1区核苷酸以低变异为主,未发现疫苗衍生脊灰病毒(Vaccine-derived poliovirus,VDPV)及脊灰野病毒(Wild poliovirus,WPV)。 展开更多
关键词 急性弛缓性麻痹 脊髓灰质炎病毒 鉴定分析
定量检测Ⅲ型Sabin株脊髓灰质病毒突变的荧光MAPREC法的建立和应用
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作者 徐康维 张平 +4 位作者 英志芳 何蕊 王剑锋 江征 李长贵 《药物分析杂志》 CSCD 北大核心 2018年第2期288-292,共5页
目的:使用荧光标记代替同位素标记,建立定量检测Ⅲ型Sabin株脊髓灰质炎病毒472位U到C突变比例的MAPREC(mutant analysis by PCR and restriction enzyme cleavage)法。方法:提取病毒样品RNA,反转录合成c DNA后进行非对称PCR反应以... 目的:使用荧光标记代替同位素标记,建立定量检测Ⅲ型Sabin株脊髓灰质炎病毒472位U到C突变比例的MAPREC(mutant analysis by PCR and restriction enzyme cleavage)法。方法:提取病毒样品RNA,反转录合成c DNA后进行非对称PCR反应以生成单链DNA扩增产物,之后采用荧光标记引物进行扩增,合成双链产物,以突变位点敏感的限制性内切酶作用后电泳分离,并分析样品的突变比例。结果:采用建立的方法对4个国际标准品进行检测,100%DNA突变标准品、IS DNA标准品、LMVR标准品以及HMVR标准品的标示值分别为100%、0.9%、0.7%、1.1%,检测结果分别为95.59%、0.84%、0.68%、1.07%,与其标示值一致性良好,并且不同实验间RSD均小于15%。检测9个批次样品,结果突变率均小于1%,符合WHO要求。结论:初步建立了基于荧光素标记的MAPREC方法,可以代替同位素法进行病毒突变的定量检测。 展开更多
关键词 MAPREC 脊髓灰质炎病毒 疫苗 荧光标记 突变率
实时荧光定量RT-PCR在脊髓灰质炎病毒型内鉴定中的应用
12
作者 范丽霞 王卫军 +2 位作者 巴卓玛 李崇亥 赵生仓 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第12期1344-1346,1356共4页
目的应用实时荧光定量RT-PCR(rRT-PCR)对脊髓灰质炎病毒(PV)进行型内鉴定(ITD)及基因型鉴定。方法以PV衣壳蛋白(CapsidProtein)VP1编码区基因序列为目标,设计并合成引物和Taqman探针,建立实时荧光定量RT-PCR检测体系,对WHO发放的PV株和... 目的应用实时荧光定量RT-PCR(rRT-PCR)对脊髓灰质炎病毒(PV)进行型内鉴定(ITD)及基因型鉴定。方法以PV衣壳蛋白(CapsidProtein)VP1编码区基因序列为目标,设计并合成引物和Taqman探针,建立实时荧光定量RT-PCR检测体系,对WHO发放的PV株和实验室分离的PV株进行型内鉴定(ITD)和疫苗衍生PV株(VDPV)筛选。结果10份WHO考核标本经ITD试验结果和ITD筛查后的5份苗类似株(SL)VDPV实验结果,经WHO验证完全符合;青海省脊髓灰质炎(下称脊灰)实验室2017年在健康儿童中分离获得2株PV,经ITD和VDPV,结果为SL1。毒株经国家脊灰实验室验证,与上报结果完全符合。结论rRT-PCR方法操作简便、快速,特异敏感,适用于PV的型内鉴定及其感染的实验室诊断。 展开更多
关键词 实时荧光定量RT-PCR 脊髓灰质炎病毒 型内鉴定
中国2014年脊髓灰质炎实验室网络的运转与评价 被引量:5
13
作者 祝双利 朱晖 +6 位作者 范钦 张勇 王东艳 严冬梅 李晓嫘 樊春祥 许文波 《中国疫苗和免疫》 北大核心 2017年第1期1-7,共7页
目的评价中国(未包括香港、澳门特别行政区和台湾地区,下同)2014年脊髓灰质炎(脊灰)实验室网络(Polio Laboratory Network,PLN)运转情况,为中国维持无脊灰状态提供病毒学依据。方法对中国急性弛缓性麻痹(Acute flaccid paralysis... 目的评价中国(未包括香港、澳门特别行政区和台湾地区,下同)2014年脊髓灰质炎(脊灰)实验室网络(Polio Laboratory Network,PLN)运转情况,为中国维持无脊灰状态提供病毒学依据。方法对中国急性弛缓性麻痹(Acute flaccid paralysis,AFP)病例监测信息报告管理系统中31个省份报告的AFP病例和国家脊灰实验室(National Polio Laboratory,NPL)的监测数据进行分析,对PLN的各项运转指标进行评价。结果 2014年中国PLN共报告5 751例AFP病例,收到5 688例AFP病例的11 363份粪便标本;14天内双份粪便标本的采集率为92.16%,合格粪便标本采集率为91.65%,病毒分离结果 18天内反馈率为97.62%。从5 688例粪便标本中132例(2.32%)分离到脊灰病毒(Poliovirus,PV);590例(10.37%)分离到非脊灰肠道病毒(NPEV)。2014年NPL收到省级脊灰实验室送检的分离自AFP病例及其接触者、非AFP病例、健康人的292株L20 B细胞阳性分离物,262株为PV,21株为NPEV,9株为非肠道病毒(Non-enterovirus,NEV)。262株PV中,7株为疫苗衍生脊灰病毒(Vaccine-derived poliovirus,VDPV),来自内蒙古、山西、河北和湖南;未发现脊灰野病毒(Wild poliovirus,WPV)。从脊灰病毒外环境监测采集的污水标本中分离到4株VDPV。2014年NPL和31个省级CDC脊灰实验室都通过了世界卫生组织(WHO)粪便标本肠道病毒的新检测流程的能力验证标本考核。NPL和8个省级CDC脊灰实验室接受并通过了WHO现场评估认证,其他省级实验室接受了信函认证。结论中国PLN 2014年运转正常,未发现WPV,为维持中国无脊灰状态、早期发现VDPV或VDPV病例、早期采取应对措施阻断其传播提供了重要的病毒学依据。 展开更多
关键词 脊髓灰质炎网络 运转 脊髓灰质炎病毒 疫苗衍生脊髓灰质炎病毒
中国2015年脊髓灰质炎实验室网络的运转与评价 被引量:6
14
作者 祝双利 李晓嫘 +6 位作者 朱晖 王东艳 严冬梅 范钦 樊春祥 张勇 许文波 《中国疫苗和免疫》 北大核心 2017年第2期127-133,共7页
目的 评价中国(未包括香港、澳门特别行政区和台湾地区)2015年脊髓灰质炎(脊灰)实验室网络(Polio laboratory network,PLN)运转情况,为中国维持无脊灰状态提供病毒学依据。方法 对中国急性弛缓性麻痹(Acute flaccid paralysis,AF... 目的 评价中国(未包括香港、澳门特别行政区和台湾地区)2015年脊髓灰质炎(脊灰)实验室网络(Polio laboratory network,PLN)运转情况,为中国维持无脊灰状态提供病毒学依据。方法 对中国急性弛缓性麻痹(Acute flaccid paralysis,AFP)病例监测信息报告管理系统中31个省(自治区、直辖市)报告的AFP病例和中国疾病预防控制中心(CDC)病毒病预防控制所国家脊灰实验室(National Polio Laboratory,NPL)的监测数据库进行统计分析,对PLN的各项运转指标进行评价。结果 2015年中国共报告5 218例AFP病例,PLN收到5 173例AFP病例的10 335份粪便标本;14天内双份粪便标本采集率为92.76%;合格粪便标本采集率为92.16%,病毒分离结果 14天内反馈率为96%。5 173例病例中,L20B阳性69例(1.33%);非脊灰肠道病毒(Non-polio enterovirus,NPEV)阳性472例(9.12%)。NPL收到省级脊灰实验室送检的分离自AFP病例、非AFP病例、AFP病例接触者及健康人的179株L20B细胞阳性分离物,其中173株为脊灰病毒(Poliovirus,PV),4株为NPEV,2株为非肠道病毒(Non-enterovirus,NEV)。173株PV中,8株为疫苗衍生脊灰病毒(Vaccine-derived poliovirus,VDPV),来自浙江、广东和辽宁;未发现脊灰野病毒(Wild poliovirus,WPV)。从脊灰病毒外环境监测采集的污水标本中分离到1株Ⅱ型VDPV。2015年NPL和31个省CDC脊灰实验室都通过了世界卫生组织(WHO)粪便标本脊灰等肠道病毒的新检测流程的能力验证标本考核。NPL和27个省CDC脊灰实验室通过了WHO型内鉴定能力验证考核。结论 中国PLN 2015年运转正常,未发现WPV,为维持中国无脊灰状态,早期发现VDPV或VDPV病例,早期采取应对措施阻断其传播提供了重要的病毒学依据。 展开更多
关键词 脊髓灰质炎实验室网络 脊髓灰质炎病毒 疫苗衍生脊髓灰质炎病毒
2013年-2015年河北省急性弛缓性麻痹病例脊髓灰质炎病毒核苷酸变异情况分析 被引量:2
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作者 赵娜 张俊棉 +3 位作者 陈玫 郭玉 李静 张振国 《中国卫生检验杂志》 CAS 2017年第8期1168-1170,共3页
目的分析河北省2013年-2015年急性弛缓性麻痹(AFP)病例及其密切接触者中脊髓灰质炎病毒(PV)核苷酸变异情况,及时发现可能出现的疫苗衍生脊髓灰质炎病毒(VDPV)及VDPV循环(c VDPVs)。方法对河北省2013年-2015年949例AFP病例(每... 目的分析河北省2013年-2015年急性弛缓性麻痹(AFP)病例及其密切接触者中脊髓灰质炎病毒(PV)核苷酸变异情况,及时发现可能出现的疫苗衍生脊髓灰质炎病毒(VDPV)及VDPV循环(c VDPVs)。方法对河北省2013年-2015年949例AFP病例(每例采双份便标本)及84例AFP病例密切接触者的粪便标本进行病毒分离与鉴定,分离的脊髓灰质炎病毒送国家脊髓灰质炎实验室进行核苷酸序列测定与分析。结果从26例AFP病例和5例AFP病例密切接触者粪便标本中分离到脊髓灰质炎病毒,将混合株进行单型分离后,共得到47株PV,以Ⅰ型PV为主。最大变异个数为6个。在1例AFP病例的粪便标本中,分离到2株Ⅱ型VDPV。结论河北省2013年-2015年分离到2株Ⅱ型VDPV,其余均为疫苗株,河北省继续保持无脊髓灰质炎状态。 展开更多
关键词 急性弛缓性麻痹 脊髓灰质炎病毒 核苷酸变异 疫苗衍生脊髓灰质炎病毒
紫外线和次氯酸钠对Escherichia coli和Poliovirus的消毒作用 被引量:1
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作者 徐丽梅 张崇淼 +2 位作者 王晓昌 吉铮 周进宏 《环境科学》 CSCD 北大核心 2017年第5期1928-1935,共8页
本研究选用大肠杆菌(Escherichia coli)和脊髓灰质炎病毒(poliovirus)分别作为典型的细菌和病毒,利用培养和定量PCR的检测技术,对比研究紫外线消毒和次氯酸钠消毒对细菌和病毒的作用特点.结果表明:脊髓灰质炎病毒比大肠杆菌更难被... 本研究选用大肠杆菌(Escherichia coli)和脊髓灰质炎病毒(poliovirus)分别作为典型的细菌和病毒,利用培养和定量PCR的检测技术,对比研究紫外线消毒和次氯酸钠消毒对细菌和病毒的作用特点.结果表明:脊髓灰质炎病毒比大肠杆菌更难被灭活,达到1-log所需的氯剂量分别为19.2 mg·L^-1·min和10.14 mg·L^-1·min;所需的紫外线剂量分别为6.37 m J·cm^-2和1.81 m J·cm^-2.定量PCR方法检测大肠杆菌和脊髓灰质炎病毒达到1-log的核酸损伤所需的紫外线剂量和氯剂量要比培养法高出1-2数量级,紫外线消毒对脊髓灰质炎病毒的RNA损伤量明显大于对大肠杆菌的DNA损伤,病毒的单链RNA对紫外线的敏感性更强,该结果与培养法正好相反.达到1-log核酸损伤脊髓灰质炎病毒所需的紫外线剂量为135 m J·cm^-2,大肠杆菌所需的剂量为270.3 m J·cm^-2,核酸损伤需要更多的消毒剂量,可能由于消毒过程微生物进入活性但处于非可培养状态(VBNC),以及灭活对微生物其他分子的损伤和微生物死后核酸的持续性. 展开更多
关键词 紫外线 氯消毒 灭活 核酸损伤 定量PCR 大肠杆菌(Escherichia coli) 脊髓灰质炎病毒(poliovirus)
2004—2016年浙江省湖州市急性弛缓性麻痹病例流行病学分析 被引量:2
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作者 俞梅华 钱晓萍 《疾病监测》 CAS 2017年第8期646-650,共5页
目的了解浙江省湖州市〈15岁儿童急性弛缓性麻痹(AFP)病例流行病学特征,为制定防控策略提供参考依据。方法对湖州市2004 2016年AFP病例进行描述流行病学分析,对残留麻痹影响因素进行单因素和多因素非条件logistic回归。结果 2004 201... 目的了解浙江省湖州市〈15岁儿童急性弛缓性麻痹(AFP)病例流行病学特征,为制定防控策略提供参考依据。方法对湖州市2004 2016年AFP病例进行描述流行病学分析,对残留麻痹影响因素进行单因素和多因素非条件logistic回归。结果 2004 2016年湖州市共报告〈15岁AFP病例128例,主要为散发。年平均发病率为2.32/10万。发病高峰多出现于每年1月、3月和8 10月,0~4岁组发病率较高,男性发病率高于女性,男女性别比为2.2∶1。肠道病毒分离率为7.81%。10.16%的AFP病例在麻痹60 d后仍残留麻痹。多因素分析显示〈1岁发病、深部腱反射异常是AFP残留麻痹病例发生的危险因素。结论提高儿童脊髓灰质炎疫苗接种率、加强临床医生培训、教育儿童养成良好卫生习惯、尽早对重症患者开展对症治疗,是降低儿童AFP病例致残率的有效措施。 展开更多
关键词 急性弛缓性麻痹 脊髓灰质炎病毒 残留麻痹 LOGISTIC回归
黑龙江省2013-2015年环境污水中脊髓灰质炎病毒监测分析
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作者 王晓宇 马玉杰 +4 位作者 吕珀 王晗 宋婧 宋长江 孙兆丹 《中国公共卫生管理》 2017年第6期850-853,共4页
目的通过对2013-2015年黑龙江省多地环境污水的持续监测,分析脊灰病毒在外环境中的流行变化趋势,对疫苗衍生株及野病毒的流行做出预警。方法选择哈尔滨市污水厂、双城市污水厂作为长期固定监测点,另选定多处季节监测点,每月在污水厂入... 目的通过对2013-2015年黑龙江省多地环境污水的持续监测,分析脊灰病毒在外环境中的流行变化趋势,对疫苗衍生株及野病毒的流行做出预警。方法选择哈尔滨市污水厂、双城市污水厂作为长期固定监测点,另选定多处季节监测点,每月在污水厂入水口(未经过处理)采集1L污水作为样本。浓缩后在L20B、RD、HEp-2等三种细胞上培养,鉴定Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型脊灰病毒或非脊灰肠道病毒。结果共采集污水样本94份,其中检测到脊灰病毒的污水有51份,阳性率为54.3%。分离出脊灰病毒208株,其中Ⅰ型22株,Ⅱ型95株,Ⅲ型87株,混合型4株;疫苗高变异株共18株,Ⅱ型脊灰疫苗衍生株1株;非脊灰肠道病毒分离到243株。结论脊灰病毒在复制过程中易发生重组和变异,减毒位点的突变可能引起病毒毒力回升。环境监测可以提早发现脊灰病毒的变化趋势,持续的外环境监测可以对疾病暴发做出预警。 展开更多
关键词 脊髓灰质炎 环境监测 污水 肠道病毒
rRT—PCR与微量中和实验法用于脊灰病毒血清定型的比较
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作者 陈玫 张俊棉 +2 位作者 赵娜 郭玉 张振国 《预防医学情报杂志》 CAS 2017年第8期732-735,共4页
目的对实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(rRT—PCR)法和微量中和实验2种脊灰病毒的血清型鉴定方法进行评价。方法按世界卫生组织(WHO)《脊髓灰质炎实验室手册》第4版进行病毒分离,用rRT—PCR法和微量中和实验方法对分离到的L20B阳... 目的对实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(rRT—PCR)法和微量中和实验2种脊灰病毒的血清型鉴定方法进行评价。方法按世界卫生组织(WHO)《脊髓灰质炎实验室手册》第4版进行病毒分离,用rRT—PCR法和微量中和实验方法对分离到的L20B阳性分离物进行PV的血清型鉴定,用rRT—PCR法进行型内鉴定。结果rRT—PCR法与微量中和实验对L20B阳性分离物进行脊灰病毒的血清型定型,2种方法检测脊灰病毒阳性率差异无统计学意义,检测NPEV阳性率差异也无统计学意义;rRT—PCR方法检测脊灰病毒的灵敏度为100%,特异度为100%;检测NPEV的灵敏度为63.16%,特异度为100%。结论作为WHO推荐使用的新的型内鉴定方法,rRT—PCR法对于脊灰病毒的血清型定型与常规微量中和实验一致率为100%,该方法方便快捷,可以缩短检测时限;对于NPEV的检测特异度较高,但灵敏度低于微量中和实验。 展开更多
关键词 急性弛缓性麻痹 脊髓灰质炎病毒 实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应 微量中和实验
环境污水脊髓灰质炎病毒浓缩方法的比较
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作者 吕珀 马玉杰 +4 位作者 王晓宇 王晗 宋婧 宋长江 孙兆丹 《中国公共卫生管理》 2017年第5期653-655,共3页
目的比较两相分离法和阴离子滤膜吸附法在浓缩处理外环境污水脊髓灰质炎病毒时的回收效率,选择更高效、便捷的方法以提高外环境污水脊灰病毒监测的敏感性。方法在灭菌的外环境污水中人工添加I型脊灰病毒,使之总病毒量分别达到10~4、10^3... 目的比较两相分离法和阴离子滤膜吸附法在浓缩处理外环境污水脊髓灰质炎病毒时的回收效率,选择更高效、便捷的方法以提高外环境污水脊灰病毒监测的敏感性。方法在灭菌的外环境污水中人工添加I型脊灰病毒,使之总病毒量分别达到10~4、10^3、10^2半数组织培养感染剂量(TCID_(50)),再分别用两相分离法和阴离子滤膜吸附法对污水中的脊灰病毒进行浓缩,用实时荧光定量PCR方法和细胞培养方法测定回收病毒的浓度。结果使用实时荧光定量PCR方法测定病毒添加量为10^4TCID_(50)时两相分离法的病毒回收率高于阴离子滤膜吸附法;细胞培养方法测定结果为添加10^4TCID_(50)病毒量时两相分离法和阴离子滤膜吸附法的病毒回收率分别为44.78%和41.06%。结论在对存在脊灰病毒的外环境监测中,两相分离法的浓缩效果整体优于阴离子滤膜吸附法,适合长期应用。 展开更多
关键词 外环境监测 污水 脊灰病毒 两相分离法 阴离子滤膜吸附法
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