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脂多糖通过上调SSAO活性抑制泡沫细胞ABCA1表达和促进细胞内脂质蓄积
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作者 曹冬黎 王立金 邓云 《中国动脉硬化杂志》 CAS 北大核心 2016年第11期1091-1096,共6页
目的探讨脂多糖(LPS)是否通过调节氨基脲敏感性胺氧化酶(SSAO)活性改变血管平滑肌细胞源性泡沫细胞三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)蛋白质的表达和脂质蓄积。方法氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)孵育小鼠主动脉平滑肌原代细胞使其... 目的探讨脂多糖(LPS)是否通过调节氨基脲敏感性胺氧化酶(SSAO)活性改变血管平滑肌细胞源性泡沫细胞三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)蛋白质的表达和脂质蓄积。方法氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)孵育小鼠主动脉平滑肌原代细胞使其泡沫化,不同浓度LPS和SSAO抑制剂氨基脲(SEM)处理细胞6 h后,高效液相色谱分析细胞SSAO活性、总胆固醇、游离胆固醇和胆固醇酯含量,葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法检测培养基葡萄糖含量,荧光分光光度计检测过氧化氢(H2O2)含量,液体闪烁计数器检测细胞内胆固醇流出,Western blot检测ABCA1蛋白质表达的变化。结果 LPS增加泡沫细胞SSAO活性,促进葡萄糖消耗,增加H2O2生成,SEM作用后完全抑制此作用;LPS抑制细胞ABCA1蛋白质的表达,细胞内胆固醇流出减少,细胞总胆固醇、游胆固醇与胆固醇酯增加;SEM作用后部分抑制LPS的这种作用。结论 LPS下调ABCA1蛋白质表达而促进细胞内脂质蓄积与SSAO活性增加相关。 展开更多
关键词 脂多糖 氨基脲敏感性胺氧化酶 三磷酸腺苷结合盒转运体A1 脂质蓄积
SSAO介导的氧化脱氨反应对3T3-L1脂肪细胞的氧化应激作用 预览 被引量:1
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作者 张琼丽 罗红军 +2 位作者 李慧 林哲绚 罗文鸿 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期468-474,共7页
目的:观察氨基脲敏感型胺氧化酶(SSAO)催化其底物甲胺(MA)和苯甲胺(BZA)的氧化脱氨反应对成熟3T3-L1脂肪细胞的氧化应激作用。方法:3T3-L1前脂肪细胞诱导分化为成熟脂肪细胞;高效液相色谱法检测不同分化天数下细胞SSAO活性的变... 目的:观察氨基脲敏感型胺氧化酶(SSAO)催化其底物甲胺(MA)和苯甲胺(BZA)的氧化脱氨反应对成熟3T3-L1脂肪细胞的氧化应激作用。方法:3T3-L1前脂肪细胞诱导分化为成熟脂肪细胞;高效液相色谱法检测不同分化天数下细胞SSAO活性的变化;MTT法检测不同浓度的MA或BZA对细胞活力的影响;荧光探针方法检测细胞在药物作用下产生的活性氧;以0.5 mmol/L MA或BZA处理成熟脂肪细胞或未经诱导分化的前脂肪细胞4 h,观察细胞产生的甲醛(FA)、苯甲醛(BZ)、脂质过氧化指标丙二醛(MDA)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)和谷胱甘肽(GSH)的变化。结果:SSAO活性随细胞分化天数的增加而增加,并于第8天达到高峰;不同浓度MA或BZA作用细胞4 h对细胞活力无显著影响(P〉0.05);0.5 mmol/L MA或BZA孵育后,细胞产生的活性氧增高,约为阴性对照组的3~4倍,差异有统计学意义(P〈0.05);在成熟脂肪细胞中,MDA的含量增加,而T-SOD和GSH的活性和含量减少,与阴性对照组相比,差别有统计学意义(P〈0.05);MA和BZA作用未经诱导分化的前脂肪细胞,其MDA和SOD和GSH的变化不明显,差别无统计学意义(P〉0.05)。结论:SSAO可能通过其介导的氧化脱氨反应引起3T3-L1成熟脂肪细胞产生氧化应激。 展开更多
关键词 氨基脲敏感型胺氧化酶 脂肪细胞 甲胺 苯甲胺 氧化应激
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氨基脲敏感性胺氧化酶病理生理功能的研究进展 预览
3
作者 王振花 陈军 《医学综述》 2014年第8期1363-1366,共4页
氨基脲敏感性胺氧化酶(SSAO)广泛分布于生物体内。SSAO病理生理功能复杂多样,至今尚未完全阐明。目前已知,SSAO催化体内内源性甲胺、丙酮胺脱氨基,生成醛类和过氧化氢等细胞毒性物质,与动脉粥样硬化和糖尿病血管并发症等密切相关。在... 氨基脲敏感性胺氧化酶(SSAO)广泛分布于生物体内。SSAO病理生理功能复杂多样,至今尚未完全阐明。目前已知,SSAO催化体内内源性甲胺、丙酮胺脱氨基,生成醛类和过氧化氢等细胞毒性物质,与动脉粥样硬化和糖尿病血管并发症等密切相关。在脂肪细胞,SSAO可以调节葡萄糖转运及脂肪分解。在内皮细胞,SSAO介导白细胞与内皮细胞的黏附、渗出过程。该文就SSAO病理生理功能的研究现状进行综述。 展开更多
关键词 氨基脲敏感性胺氧化酶 病理生理 甲醛 葡萄糖转运蛋白 炎症
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氨基脲敏感性胺氧化酶与心血管病及糖尿病的研究进展 预览
4
作者 李潮生 陈军 《医学综述》 2014年第13期2317-2319,共3页
氨基脲敏感性胺氧化酶(SSAO)是人体内广泛存在的一种具有多种生理功能的胺氧化酶.SSAO主要催化短链伯胺氧化脱氨并生成相应的醛类、过氧化氢和氨.甲胺和氨基丙酮是SSAO的生理性底物.心血管病及糖尿病患者血浆SSAO活性明显增高,其催化... 氨基脲敏感性胺氧化酶(SSAO)是人体内广泛存在的一种具有多种生理功能的胺氧化酶.SSAO主要催化短链伯胺氧化脱氨并生成相应的醛类、过氧化氢和氨.甲胺和氨基丙酮是SSAO的生理性底物.心血管病及糖尿病患者血浆SSAO活性明显增高,其催化生成的毒性产物可导致血管内皮损伤、氧化应激,从而促进动脉粥样硬化与糖尿病血管并发症的发生、发展.因此,SSAO与心血管病及糖尿病的病理生理研究已成为新的研究热点. 展开更多
关键词 氨基脲敏感性胺氧化酶 抑制剂 动脉粥样硬化 糖尿病
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2-溴乙胺抑制氨基脲敏感性胺氧化酶活性对糖尿病大鼠血管内皮的保护作用
5
作者 王振花 李潮生 +3 位作者 杨大浩 徐峥嵘 蔡军红 陈军 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期476-482,共7页
本研究旨在观察糖尿病大鼠主动脉氨基脲敏感性胺氧化酶(semicarbazide-sensitive amine oxidase,SSAO)的活性变化,探讨2-溴乙胺(2-bromoethylamine,2-BEA)抑制SSAO活性对糖尿病大鼠血管内皮的保护作用。制备大鼠主动脉组织匀浆作为S... 本研究旨在观察糖尿病大鼠主动脉氨基脲敏感性胺氧化酶(semicarbazide-sensitive amine oxidase,SSAO)的活性变化,探讨2-溴乙胺(2-bromoethylamine,2-BEA)抑制SSAO活性对糖尿病大鼠血管内皮的保护作用。制备大鼠主动脉组织匀浆作为SSAO来源,体外应用苯甲胺作为SSAO催化底物,检测不同浓度2-BEA对主动脉SSAO活性的抑制作用。采用链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)单次腹腔注射诱导1型糖尿病大鼠模型,将成年Sprague Dawley(SD)大鼠随机分为正常对照(NC)组、糖尿病模型(DM)组、2-BEA 5 mg/kg组、2-BEA 20 mg/kg组,每组10只,2-BEA每天腹腔注射给药,连续8周。8周末,腹主动脉采血,硝酸还原酶法测定血浆一氧化氮(nitric oxide,NO)含量,放射免疫分析法测定血浆内皮素-1(endothelin-1,ET-1)浓度,高效液相色谱法测定大鼠主动脉SSAO活性,观察主动脉形态及超微结构变化。结果显示,与NC组比,DM组大鼠主动脉SSAO活性、血浆ET-1浓度显著升高(P〈0.01),而血浆NO含量显著降低(P〈0.01);2-BEA抑制糖尿病大鼠主动脉SSAO活性,降低了血浆ET-1浓度并升高了血浆NO含量(P〈0.01),2-BEA 20 mg/kg组效果比5 mg/kg组更明显(P〈0.05),2-BEA组大鼠主动脉内皮损伤较DM组明显减轻。以上结果表明,2-BEA通过抑制主动脉SSAO活性保护糖尿病大鼠血管内皮。 展开更多
关键词 2-溴乙胺 氨基脲敏感性胺氧化酶 甲醛 糖尿病 内皮细胞
高血压与冠心病患者血浆氨基脲敏感性胺氧化酶活性和甲醛浓度改变的研究 预览
6
作者 林吉进 刘树楷 +3 位作者 余宏 马青艳 沈心远 任莉 《岭南心血管病杂志》 2013年第5期538-541,共4页
目的 研究原发性高血压(高血压)、冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)患者血浆中内源性甲胺浓度、氨基脲敏感性胺氧化酶活性以及内源性甲醛浓度的变化,以及3者之间的相关性,进一步探讨其临床意义.方法 入选健康人42名、高血压34例、... 目的 研究原发性高血压(高血压)、冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)患者血浆中内源性甲胺浓度、氨基脲敏感性胺氧化酶活性以及内源性甲醛浓度的变化,以及3者之间的相关性,进一步探讨其临床意义.方法 入选健康人42名、高血压34例、冠心病37例、冠心病合并高血压25例,应用高效液相色谱仪检测血浆甲胺浓度、氨基脲敏感性胺氧化酶活性以及甲醛浓度.结果 4组甲胺浓度比较,差异无统计学意义(P>0.05).高血压组、冠心病组、冠心病合并高血压组氨基脲敏感性胺氧化酶活性均较对照组显著升高,差异有统计学意义(P<0.01).冠心病并高血压组的氨基脲敏感性胺氧化酶活性高于单纯高血压组,差异有统计学意义(P<0.05);也高于单纯冠心病组,差异有统计学意义(P<0.05).高血压组、冠心病组、冠心病合并高血压组甲醛浓度与对照组比较,均显著升高,差异有统计学意义(P<0.01和P<0.05);高血压组、冠心病组、冠心病合并高血压组间甲醛浓度比较,差异无统计学意义(P>0.05).氨基脲敏感性胺氧化酶活性与甲醛浓度存在直线相关性(r=0.4463,P<0.01).结论 血浆的氨基脲敏感性胺氧化酶活性和甲醛浓度在高血压、冠心病患者明显升高,提示氨基脲敏感性胺氧化酶活性和甲醛浓度异常升高可能是动脉粥样硬化发生的始动因素之一. 展开更多
关键词 高血压 冠状动脉疾病 甲胺 甲醛 氨基脲敏感性胺氧化酶
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SSAO抑制剂对LPS诱导的巨噬细胞p65核移位的影响 预览
7
作者 林哲绚 李慧 +1 位作者 罗红军 罗文鸿 《现代医院》 2012年第3期 9-11,共3页
目的研究肼屈嗪(HYD)、氨基脲(SEM)、LJPl207、氨基胍(AMI)及二溴乙胺(BEA)五种不同的氨基脲敏感型胺氧化酶(SSAO)抑制剂对脂多糖(LPS)诱导的小鼠腹腔巨噬细胞NF—KBp65蛋白核移位的影响。方法分离培养Balb/c小鼠腹腔巨噬... 目的研究肼屈嗪(HYD)、氨基脲(SEM)、LJPl207、氨基胍(AMI)及二溴乙胺(BEA)五种不同的氨基脲敏感型胺氧化酶(SSAO)抑制剂对脂多糖(LPS)诱导的小鼠腹腔巨噬细胞NF—KBp65蛋白核移位的影响。方法分离培养Balb/c小鼠腹腔巨噬细胞,分别加入含0、10、50、100、200、500μmHYD、SEM、LJPl207、AMI或BEA的培养基,同时加入LPs使之终浓度为10μg/ml,作用2h。免疫荧光法观察几种SSAO抑制剂对LPs诱导的NF—KBp65移位的影响。结果静息状态巨噬细胞p65主要定位于胞浆中,LPs可引起小鼠巨噬细胞p65核移位。HYD、SEM、AMI、BEA、LJPl207均对LPS诱导的p65核移位有不同程度的抑制作用。结论SSAO抑制剂可抑制LPS诱导的巨噬细胞p65核移位,该作用可能与其抗炎作用有关。 展开更多
关键词 氨基脲敏感型胺氧化酶 抑制剂 脂多糖 P65
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内源性甲醛与心血管疾病 预览 被引量:9
8
作者 张凤文 杜军保 唐朝枢 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期 17-21,共5页
内源性甲醛是甲胺由氨基脲敏感性胺氧化酶催化而生成,广泛存在于动物体内多种组织细胞。已经证实,内源性甲醛参与了神经变性病、免疫性疾病以及肿瘤等疾病的发病过程。脂肪细胞、血管内皮细胞和平滑肌细胞富含甲醛生成酶氨基脲敏感性... 内源性甲醛是甲胺由氨基脲敏感性胺氧化酶催化而生成,广泛存在于动物体内多种组织细胞。已经证实,内源性甲醛参与了神经变性病、免疫性疾病以及肿瘤等疾病的发病过程。脂肪细胞、血管内皮细胞和平滑肌细胞富含甲醛生成酶氨基脲敏感性胺氧化酶(semicarbazide—sensitive amine oxidase,SSAO)。甲醛具有细胞毒性,易损伤血管内皮并介导多种致病因素诱导的血管损伤过程,在动脉粥样硬化和糖尿病及其并发症的发病中都具有重要作用。 展开更多
关键词 内源性甲醛 氨基脲敏感性胺氧化酶 动脉粥样硬化 糖尿病
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氨基脲敏感型胺氧化酶在心肌缺血再灌注损伤中的作用 预览
9
作者 杨伟 李慧 +1 位作者 林哲绚 罗文鸿 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期 337-344,共8页
目的研究抑制氨基脲敏感型胺氧化酶(SSAO)是否可缓解心肌缺血再灌注(I-R)损伤。方法SD雄性大鼠随机分为4组,每组10只。假手术组:左冠状动脉(LCA)穿线不结扎;假手术+氨基脲组:结扎前10min给予氨基脲(30mg·kg^-1,ip)处理,... 目的研究抑制氨基脲敏感型胺氧化酶(SSAO)是否可缓解心肌缺血再灌注(I-R)损伤。方法SD雄性大鼠随机分为4组,每组10只。假手术组:左冠状动脉(LCA)穿线不结扎;假手术+氨基脲组:结扎前10min给予氨基脲(30mg·kg^-1,ip)处理,LCA穿线不结扎;I-R组:LCA结扎致缺血30min,再灌注180min;I-R+氨基脲组:缺血前10min给予氨基脲(30mg·kg^-1,ip),随后缺血30min,再灌注180min。采用四氮唑蓝染色法测定心肌梗死范围;吸光度法测定血浆肌酸激酶(CK)和髓过氧化物酶(MPO)活性及丙二醛(MDA)和羟自由基含量;高效液相色谱法测定血浆SSAO酶活性;HE染色法进行心肌组织病理学观察。结果与假手术组比较,假手术+氨基脲组各指标均无明显变化;I-R组血浆MPO和SSAO活性、MDA和羟自由基含量均升高,出现明显心肌梗死。与I-R组比较,I-R+氨基脲组心肌梗死范围明显减小,由(43.2±3.1)%减小到(27.7±3.7)%;血浆MPO活性及MDA和羟自由基含量均降低,分别由(27.5±9.3)μmol·min^-1·L^-1,(2.6±0.4)mmol·L^-1和(628±50)mmol·L^-1降低至0(14.2±5.6)μmol·mmol·L^-1,(1.7-t-O.5)mmol·L^-1和(503±88)mmol·L^-1;组织病理学观察结果表明,心肌组织白细胞聚集减少。结论心肌I-R损伤导致血浆SSAO酶活性升高,抑制SSAO酶活性可缓解心肌I-R损伤。 展开更多
关键词 再灌注损伤 氨基脲敏感型胺氧化酶 心肌 活性氧族 血管粘附蛋白-1
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对氨基脲敏感的胺氧化酶生物功能化色谱的方法学研究 预览 被引量:1
10
作者 厉红 屈锋 +1 位作者 徐建栋 邓玉林 《分析化学》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2008年第10期 1349-1353,共5页
采用毛细管电泳法建立了对氨基脲敏感的胺氧化酶(SSAO)生物功能化色谱模型。将SSAO酶固载到一种仿细胞膜的载体——脂质体上,pH值对固定化酶稳定性影响的实验表明,pH5.0是理想的固载条件;SSAO酶活性检测表明游离态和固定态的酶活... 采用毛细管电泳法建立了对氨基脲敏感的胺氧化酶(SSAO)生物功能化色谱模型。将SSAO酶固载到一种仿细胞膜的载体——脂质体上,pH值对固定化酶稳定性影响的实验表明,pH5.0是理想的固载条件;SSAO酶活性检测表明游离态和固定态的酶活性分别为0.0404和0.0347mmol g^-1min^-1。将有活性的固定化SSAO酶作为假固定相添加到磷酸盐缓冲液中(10mmol/L,pH5)。随着固定化酶的浓度从0.004g/L上升到0.856g/L,其特异性底物苯甲胺的有效淌度从4.06×10^-4cm^2/(V·s)下降到0.81×10^-4cm^2/(v·s)。据此,建立的生物功能化色谱模型为研究生物分子间的特异性作用提供了新的技术方法。 展开更多
关键词 生物功能化色谱 毛细管电泳 胺氨化酶 脂质体 苯甲胺
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兔血浆SSAO的分离纯化及其酶动力学研究 预览 被引量:1
11
作者 门华涛 罗红军 +1 位作者 李慧 罗文鸿 《癌变.畸变.突变》 CAS CSCD 2008年第5期 385-388,共4页
背景与目的:血浆中含有氨基脲敏感型胺氧化酶(SSAO).本文研究以甲胺为底物的兔血浆中具有SSAO酶活性的蛋白组分的酶动力学参数.材料与方法:利用弱阴离子交换柱层析分离兔血浆蛋白,测定各收集组分的SSAO酶活性;以甲胺为底物测定SSAO酶动... 背景与目的:血浆中含有氨基脲敏感型胺氧化酶(SSAO).本文研究以甲胺为底物的兔血浆中具有SSAO酶活性的蛋白组分的酶动力学参数.材料与方法:利用弱阴离子交换柱层析分离兔血浆蛋白,测定各收集组分的SSAO酶活性;以甲胺为底物测定SSAO酶动力学参数.结果:从兔血浆蛋白中分离得到两个具有SSAO酶活性的蛋白组分A和B.以甲胺为底物,未处理的血浆SSAO的酶动力学参数km=(1.83±0.13)mmol L,Vmax=(0.12±0.003)nmol (min·mg).蛋白组分B的酶动力学参数Km值(2.05±0.43)mmol L小于蛋白组分A的Km值(3.14±0.63)nmol L.组分B的酶动力学参数Vmax值(1.46±0.10)nmol (min·mg)小于组分A的Vmax值(2.85±0.20)nmol (min·mg).结论:兔血浆含有两种SSAO酶,均可以催化甲胺氧化脱氨生成甲醛;组分A、B动力学特征有所不同. 展开更多
关键词 氨基脲敏感型胺氧化酶 甲胺 酶动力学
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甲胺对兔心血管内皮的慢性毒性 预览
12
作者 罗文英 林哲绚 +1 位作者 李慧 罗文鸿 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期 24-30,共7页
目的探讨甲胺在体内慢性分布是否导致氨基脲敏感胺氧化酶(SSAO)活性上调从而诱导心血管内皮损伤。方法新西兰兔灌胃给予甲胺100mg·kg^-1,每日1次,连续6个月,隔周称量体重调整给药量。分析动脉血中循环内皮细胞数、血清NO浓度和... 目的探讨甲胺在体内慢性分布是否导致氨基脲敏感胺氧化酶(SSAO)活性上调从而诱导心血管内皮损伤。方法新西兰兔灌胃给予甲胺100mg·kg^-1,每日1次,连续6个月,隔周称量体重调整给药量。分析动脉血中循环内皮细胞数、血清NO浓度和主动脉内皮细胞的超微结构。高效液相色谱法检测血浆SSAO活性及甲醛浓度。结果甲胺组兔动脉血中内皮细胞数、血清NO浓度、血浆SSAO活性及甲醛浓度明显增高。主动脉内皮细胞超微结构显示核内大量包函体、核浓缩和核分裂等病理形态学改变。结论低剂量甲胺在体内慢性分布能够诱导SSAO活性上调而引起心血管内皮损伤。 展开更多
关键词 甲胺 氨基脲敏感胺氧化酶 甲醛 内皮 血管 毒理学
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Synthetic liver X receptor agonist T0901317 inhibits semicarbazide-sensitive amine oxidase gene expression and activity in apolipoprotein E knockout mice
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作者 Xiaoyan Dai Xiang Ou Xinrui Hao Dongli Cao Yaling Tang Yanwei Hu Xiaoxu Li Chaoke Tang 《生物化学与生物物理学报:英文版》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2008年第3期261-268,共8页
Semicarbazide 敏感的胺 oxidase (SSAO ) 催化主要的芳香、脂肪族的胺的氧化 deamination。增加的 SSAO 活动在动脉粥样硬化和糖尿病 mellitus 被发现了。我们假设肝 X 受体(LXR ) 的 anti-atherogenic 效果可能与 SSAO 基因表示和它... Semicarbazide 敏感的胺 oxidase (SSAO ) 催化主要的芳香、脂肪族的胺的氧化 deamination。增加的 SSAO 活动在动脉粥样硬化和糖尿病 mellitus 被发现了。我们假设肝 X 受体(LXR ) 的 anti-atherogenic 效果可能与 SSAO 基因表示和它的活动的抑制有关。在这研究,我们在 apolipoprotein E 大美人在 SSAO 基因表示和它的活动上调查了 LXRagonist T0901317 的效果(apoE <sup>/</sup>) 老鼠。男 apoE <sup>/</sup> 老鼠(8 个星期旧) 随机被划分成四个组:基础控制组;车辆组;预防组;并且处理组。SSAO 基因表示被即时量的聚合酶链反应分析,它的活动是坚定的。superoxide dismutase 的活动和在主动脉和肝的 malondialdehyde 的内容也是坚定的。在对待 T0901317 的鼠标, SSAO 基因表示显著地在主动脉,肝,小肠,和大脑被减少。在浆液并且在这些纸巾的 SSAO 活动也被禁止。在预防组和处理组的主动脉和肝的 superoxide dismutase 的数量与车辆组相比是显著地更高的(P < 0.05 ) 。在这二个组的纸巾的 Malondialdehyde 与车辆组相比是显著地更低的(P < 0.05 ) 。我们的结果证明 T0901317 在 atherogenic apoE <sup>/</sup> 老鼠禁止 SSAO 基因表示和它的活动。LXR 收缩筋 T0901317 的 atheroprotective 效果与 SSAO 基因表示和它的活动的抑制有关。 展开更多
关键词 肝脏 胺氧化酶 基因 阿朴脂蛋白
不同剂量甲醛对人脐静脉内皮细胞一氧化氮含量的影响 预览 被引量:2
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作者 尹蔚兰 邹丽君 +4 位作者 贺彬琪 让欧艳 李良 贺栋梁 让蔚清 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 2008年第1期 7-12,共6页
目的观察不同剂量甲醛对人脐静脉内皮细胞一氧化氮含量的影响,分析甲醛诱导内皮细胞损伤在心血管疾病发病中的意义。方法将人脐静脉内皮细胞株分别与不同浓度甲醛(分别为0、5、10、20、40和80μmol/L)的DMEM培养基孵育,同时以过氧... 目的观察不同剂量甲醛对人脐静脉内皮细胞一氧化氮含量的影响,分析甲醛诱导内皮细胞损伤在心血管疾病发病中的意义。方法将人脐静脉内皮细胞株分别与不同浓度甲醛(分别为0、5、10、20、40和80μmol/L)的DMEM培养基孵育,同时以过氧化氢(100μmol/L)为阳性对照组,抗氧化剂维生素C(100mg/L)为保护组。共培养24h后,分光光度法检测乳酸脱氢酶漏出量;硫代巴比妥法检测细胞上清液中丙二醛浓度;硝酸还原酶法测定培养液中一氧化氮浓度;生化分析法测定内皮细胞一氧化氮合酶活性;免疫细胞化学法测定内皮型一氧化氮合酶和诱导型一氧化氮合酶的蛋白表达;RT-PCR法测定内皮型一氧化氮舍酶和诱导型一氧化氮合酶的mRNA表达。结果不同浓度甲醛呈剂量依赖性地促进细胞乳酸脱氢酶漏出,促进内皮细胞上清液丙二醛和一氧化氮的产生;降低内皮型一氧化氮合酶的活性,抑制内皮型一氧化氮舍酶在蛋白和基因水平的表达;增加诱导型一氧化氮舍酶活性,促进诱导型一氧化氮合酶在蛋白和基因水平的表达。结论甲醛诱导人脐静脉内皮细胞损伤,机制可能与其抑制内皮型一氧化氮合酶的活性及表达,诱导诱导型一氧化氮合酶的活性及表达,从而诱导内皮细胞产生过多的一氧化氮有关:维生素C通过降低一氧化氮产生,减轻甲醛诱导的内皮细胞损伤。 展开更多
关键词 病理学与病理生理学 甲醛 人脐静脉内皮细胞 一氧化氮 对胺基脲敏感性胺氧化酶 内皮型一氧化氮合酶 诱导型一氧化氮合酶
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甲胺对大鼠内皮的慢性毒理研究 预览 被引量:1
15
作者 罗文英 林哲绚 +1 位作者 李慧 罗文鸿 《汕头大学医学院学报》 2007年第3期 135-137,140,F0002,共5页
目的:探讨Wistar大鼠体内低剂量甲胺的慢性分布是否能导致氨基脲敏感型胺氧化酶(SSAO)活性上调而诱导内皮的损伤。方法:甲胺组20只、对照组10只分别给以甲胺(50ms/ks)、Ns(50mL/kg)持续灌胃6个月后,取胸主动脉免疫组化染色... 目的:探讨Wistar大鼠体内低剂量甲胺的慢性分布是否能导致氨基脲敏感型胺氧化酶(SSAO)活性上调而诱导内皮的损伤。方法:甲胺组20只、对照组10只分别给以甲胺(50ms/ks)、Ns(50mL/kg)持续灌胃6个月后,取胸主动脉免疫组化染色,光镜下观察血管假性血友病因子(vWf)的表达;取升主动脉及心内膜透射电镜下观察内皮细胞的超微结构。检测血浆中SSAO活性、NO及甲醛浓度。结果:甲胺组血浆SSAO活性及甲醛浓度均高于对照组,NO浓度低于对照组,但两组比无统计学意义(P〉0.05)。vWf在甲胺组内膜、内膜下层均有较明显表达,对照组只有弱表达。甲胺组内皮细胞超微结构呈不规则及浓缩核,对照组内皮细胞呈现正常细胞超微结构。结论:低剂量甲胺在大鼠体内的慢性分布能够诱导内皮损伤。 展开更多
关键词 氨基脲敏感型胺氧化酶 甲胺 内皮 慢性毒理
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脂多糖诱导急性肺损伤过程中SSAO酶的活性变化 预览 被引量:2
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作者 张美 李慧 +1 位作者 罗红军 罗文鸿 《癌变.畸变.突变》 CAS CSCD 2007年第3期 223-226,共4页
背景与目的:探讨SSAO酶在脂多糖诱导急性肺损伤过程中的活性变化。材料与方法:将15只雄性成年新西兰兔随机分为模型A组、模型B组和对照组,每组5只。模型组通过气管插管直接给予脂多糖2mg/kg,其中A组在给药后48h与对照组均用于制作... 背景与目的:探讨SSAO酶在脂多糖诱导急性肺损伤过程中的活性变化。材料与方法:将15只雄性成年新西兰兔随机分为模型A组、模型B组和对照组,每组5只。模型组通过气管插管直接给予脂多糖2mg/kg,其中A组在给药后48h与对照组均用于制作肺组织HE切片;B组用于动物体征观察、外周血白细胞计数和SSAO酶活性检测,并对给药前、后各指标的变化进行比较。结果:模型组给药后外周血白细胞数目和肺组织HE染色等炎症指标与对照相比均有明显变化,SSAO酶活性在给药后的16h酶活性迅速上升至最高,然后在48h逐渐下降至最低点,其升高或降低幅度,较给药前均有统计意义(P〈0.05或P〈0.01)。结论:采用气管直接插管法给予脂多糖的造模方法稳定可靠,在产生急性肺损伤过程中会导致外周血SSAO酶活性明显的规律性波动。 展开更多
关键词 脂多糖 肺炎模型 氨基脲敏感胺氧化酶
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甲胺及其代谢产物甲醛在动物体内的药代动力学 预览 被引量:2
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作者 罗红军 李慧 罗文鸿 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期 120-124,共5页
目的 进一步了解血浆氨基脲敏感型胺氧化酶(SSAO)活性与内源性甲醛的生理学与病理学意义。方法 采用高效液相色谱法测定小鼠、大鼠和兔血浆中SSAO活性和静脉给予甲胺后甲胺及其代谢产物甲醛浓度。结果 小鼠、大鼠和兔血浆中SSAO活性... 目的 进一步了解血浆氨基脲敏感型胺氧化酶(SSAO)活性与内源性甲醛的生理学与病理学意义。方法 采用高效液相色谱法测定小鼠、大鼠和兔血浆中SSAO活性和静脉给予甲胺后甲胺及其代谢产物甲醛浓度。结果 小鼠、大鼠和兔血浆中SSAO活性分别为(4.1±1.0),(2.0±0.3)和(325.8±3.9)μmol·h^-1·L^-1。3种动物单次iv甲胺后,甲胺的分布和代谢迅速。小鼠单次iv 4.2mg·kg^-1甲胺后甲醛浓度在代谢初期缓慢上升,在20-40min达峰后缓慢消除。而大鼠单次iv 4.2mg·kg^-1甲胺后血浆甲醛浓度无明显改变。兔单次iv 2.3,9.6和36.8mg·kg^-1甲胺后,甲胺AUC与剂量不成比例,Cl随剂量增加明显减少,呈非线性动力学特征。甲醛在兔体内消除较快,甲醛AUC与甲胺剂量的比值和全身清除率Cl无明显差异,但ke随给予甲胺剂量的增大而减少,t1/2显著延长。结论 甲胺在3种动物间代谢情况相似,其代谢产物甲醛则明显不同。甲胺给予剂量的不同可能导致甲胺代谢动力学的改变,进而可能影响甲醛的代谢。 展开更多
关键词 氨基脲敏感型胺氧化酶 甲胺 甲醛 药代动力学
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重组氨基脲敏感型胺氧化酶在293T 细胞中的定位及 酶活性测定 预览
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作者 钱九战 李蕊 +3 位作者 罗红军 林哲绚 施金婉 罗文鸿 《癌变.畸变.突变》 CAS CSCD 2017年第4期277-283,共7页
目的:构建氨基脲敏感型胺氧化酶(SSAO)基因真核表达载体,并在293T细胞中进行瞬时表达,确定SSAO体外表达效率、亚细胞定位及酶活性.方法:以pcDNA3-SSAO质粒为模板,PCR扩增获取SSAO编码区全序列,分别构建SSAO与绿色荧光蛋白(GFP)的... 目的:构建氨基脲敏感型胺氧化酶(SSAO)基因真核表达载体,并在293T细胞中进行瞬时表达,确定SSAO体外表达效率、亚细胞定位及酶活性.方法:以pcDNA3-SSAO质粒为模板,PCR扩增获取SSAO编码区全序列,分别构建SSAO与绿色荧光蛋白(GFP)的融合表达质粒pEGFP-N3-SSAO和共表达质粒pIRES2-EGFP-SSAO,并通过酶切和测序验证.再分别将pcDNA3-SSAO、pEGFP-N3-SSAO、pIRES2-EGFP-SSAO和pcFLAG-SSAO重组质粒瞬时转染293T细胞,在荧光显微镜下观察目的蛋白的分布及表达情况.采用高效液相色谱法(HPLC)测定转染上述4种重组质粒及相应空质粒细胞的SSAO活性.结果:测序结果表明重组真核表达质粒构建正确.在瞬时转染pEGFP-N3-SSAO和pIRES2-EGFP-SSAO重组质粒的293T细胞中,转染后3~36 h各组均可观察到绿色荧光,且转染36 h为最佳观察时间点.转染pIRES2-EGFP-SSAO质粒的绿色荧光分布于细胞质中;转染pEGFP-N3-SSAO和pcFLAG-SSAO质粒的绿色荧光及红色荧光均分布于细胞膜上.酶活性检测结果显示转染pcFLAG-SSAO、pIRES2-EGFP-SSAO和pcDNA3-SSAO载体质粒的293T细胞中的SSAO活性分别为111.50±7.07、117.22±9.54、215.74±21.44 nmoL/(mg·h),较各自的空白质粒对照组均显著升高(P均〈0.01),但转染pEGFP-N3-SSAO质粒的细胞SSAO活性极低,仅为2.09±0.29 nmoL/(mg·h).结论:293T细胞中,体外重组表达的SSAO蛋白主要分布于细胞膜上,以pcDNA3为载体外源表达的天然状态SSAO活性最高. 展开更多
关键词 氨基脲敏感型胺氧化酶 重组表达 亚细胞定位 酶活性测定
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2-溴乙胺诱导大鼠脂肪组织比较蛋白质组学研究 预览
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作者 张永谦 胡高飞 +5 位作者 刘晓茜 丁宁 王洪斌 朱勇 李玉娟 邓玉林 《现代仪器》 2010年第3期23-26,41共5页
本文建立正常和2-溴乙胺诱导的大鼠模型。通过基于18O标记二维液相色谱质谱的技术策略,发现2-溴乙胺诱导后的大鼠脂肪组织中有7个蛋白发生上调,34个蛋白发生下调。对胰岛素信号通路中的2个蛋白进行分析。
关键词 氨基脲敏感胺氧化酶 蛋白质组学 18O标记定量 液相色谱电喷雾飞行时间 质谱(LC-ESI-TOF/MS) 液相色谱电喷雾离子阱质谱(LC-ESI-TRAP/MS/MS)
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酶联分光光度法测定3T3-F442A分化细胞表达氨基脲敏感胺氧化酶的活性 预览
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作者 朱沙 王岩 +3 位作者 杜英 李三强 轩小燕 唐悦 《生物医学工程学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期 1161-1165,共5页
测定3T3-F442A细胞分化成脂肪细胞的过程中,细胞表达氨基脲敏感胺氧化酶(Semicarbazide-sensitiveamineoxidase,SSAO)活性的变化情况,用于SSAO病理生理学功能的研究。3T3-F442A细胞在分化的不同天数内,收集细胞,超声波破碎后制备... 测定3T3-F442A细胞分化成脂肪细胞的过程中,细胞表达氨基脲敏感胺氧化酶(Semicarbazide-sensitiveamineoxidase,SSAO)活性的变化情况,用于SSAO病理生理学功能的研究。3T3-F442A细胞在分化的不同天数内,收集细胞,超声波破碎后制备SSAO初提物。用分光光度法研究酶活性的基础上加入一种氧化酶,即采用酶联分光光度法分别研究细胞分化不同时间所表达的SSAO活性。结果显示,体外3T3-F442A细胞在分化过程中,SSAO在细胞内的表达呈曲线上升趋势。分化前细胞内几乎检测不到SSAO的存在,分化的第3d只能检测到少量SSAO,此后,SSAO的表达呈急剧上升趋势,细胞分化后的第6~7dSSAO活性达到高峰。 展开更多
关键词 3T3-F442A细胞 氨基脲敏感胺氧化酶 分化 酶联分光光度法
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