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蓖麻延伸因子基因的克隆与表达分析 预览
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作者 王芳 董美玲 +5 位作者 董乐 王云 朱国立 许珊珊 吕冬雪 王建颖 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期464-472,共9页
为探讨蓖麻延伸因子基因(RcEF-1α)作为参考基因进行相关研究的可行性,以蓖麻雌性花为试验材料,扩增RcEF-1α(GenBank登录号:XM002518027. 3)的编码序列(CDS),并将其亚克隆至原核表达载体pET32a(+)构建成重组载体p ET32a(+)-RcEF-1α;将... 为探讨蓖麻延伸因子基因(RcEF-1α)作为参考基因进行相关研究的可行性,以蓖麻雌性花为试验材料,扩增RcEF-1α(GenBank登录号:XM002518027. 3)的编码序列(CDS),并将其亚克隆至原核表达载体pET32a(+)构建成重组载体p ET32a(+)-RcEF-1α;将p ET32a(+)-RcEF-1α转化至大肠杆菌表达菌株BL21 (DE3)中进行优化表达,表达蛋白经纯化后进行Western blot验证。结果表明,异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)可诱导一个分子量约66 kD的特异蛋白;采用纯化的表达蛋白免疫新西兰白兔制备抗RcEF-1α的多克隆抗血清,用多克隆抗血清进行Western blot验证,发现多克隆抗血清具有针对RcEF-1α的特异性,经ELISA检测,其效价为1∶51 200;以抗血清为一抗,通过Western blot分析RcEF-1α在时空条件一致且正常生长的根、茎、叶、雌花、雄花和果实中的表达量,结果显示,蓖麻各组织中RcEF-1α蛋白质的含量存在显著差异,其中雌花和雄花中的含量显著高于其他组织。RT-qPCR分析结果表明,蓖麻各组织中RcEF-1αmRNA差异不显著。本研究结果为蓖麻功能基因表达分析参考基因的筛选提供了一定的理论依据。 展开更多
关键词 蓖麻 转录延伸因子-1α 基因克隆 原核表达 组织表达
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布氏鲳鲹GHRH基因克隆、组织和胚胎表达模式
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作者 朱凡 王茜 +5 位作者 李岩强 周智 王海洋 叶恒振 骆剑 陈国华 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期1969-1976,共8页
促生长激素释放激素(growth hormone releasing hormone, GHRH)主要生物学功能是刺激垂体细胞分泌生长激素,已被证实是动物体生长轴的重要调控因子之一,布氏鲳鲹是一种生长快速的海洋鱼类,为了揭示其代谢旺盛的调节机制,本研究从GHRH入... 促生长激素释放激素(growth hormone releasing hormone, GHRH)主要生物学功能是刺激垂体细胞分泌生长激素,已被证实是动物体生长轴的重要调控因子之一,布氏鲳鲹是一种生长快速的海洋鱼类,为了揭示其代谢旺盛的调节机制,本研究从GHRH入手,利用RACE技术和qPCR方法对布氏鲳鲹GHRH基因进行了克隆、组织和胚胎表达模式研究。实验结果显示,布氏鲳鲹GHRH基因cDNA序列全长1019bp,5’UTR、3’UTR长度分别为327 bp和164 bp,开放阅读框528 bp,共编码175个氨基酸;同源性分析结果表明,布氏鲳鲹GHRH基因与其它鲈形目鱼类的同源性在91%以上。布氏鲳鲹GHRH基因的表达区域大多都集中在中枢系统,其中下丘脑表达量最高;GHRH在受精卵期到后续发育过程中均检测到表达,其表达水平在仔鱼期达到最高。序列分析、组织及胚胎表达的结果表明,布氏鲳鲹GHRH的调节模式仍然可能通过下丘脑调节垂体释放GH,GHRH在个体发育的较早阶段即开始发挥作用。本研究掌握了布氏鲳鲹GHRH基因的基本规律,为进一步研究生长轴的调控提供了理论参考。 展开更多
关键词 布氏鲳鲹 GHRH基因 基因克隆 组织表达 胚胎表达
藏绵羊HMOX1基因表达及其多态性与低氧适应性的关联分析
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作者 何建文 张伟 +4 位作者 刘秀 李少斌 王继卿 胡江 罗玉柱 《农业生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期441-448,共8页
血红素加氧酶1(heme oxygenase 1, HMOX1)是血红素加氧酶家族的应激诱导型酶,在机体低氧胁迫代谢调控过程中扮演着重要角色。藏绵羊(Ovis aries)在长期进化过程中形成了独特的低氧适应策略来维持自身的氧平衡。为了探讨HMOX1基因的组织... 血红素加氧酶1(heme oxygenase 1, HMOX1)是血红素加氧酶家族的应激诱导型酶,在机体低氧胁迫代谢调控过程中扮演着重要角色。藏绵羊(Ovis aries)在长期进化过程中形成了独特的低氧适应策略来维持自身的氧平衡。为了探讨HMOX1基因的组织表达及其第三外显子(Exon3)区域多态性与藏绵羊高原低氧适应的关系,以寻找与藏绵羊低氧适应相关的分子标记,本研究以不同海拔地区的藏绵羊和湖羊(对照组)为研究对象,利用q RT-PCR及PCR-单链构象多态性(PCR-single-strand conformation polymorphism, PCR-SSCP)方法检测HMOX1基因的组织表达,以及Exon3区域多态位点,分析不同基因型及等位基因与绵羊血液指标的相关性,以及SNPs与绵羊血液指标的关联性。结果表明,HMOX1基因在藏绵羊和湖羊各组织中均有表达。其中同一品种内,HMOX1在藏绵羊脾脏中高表达(P<0.01),其次在肝、肾脏和背最长肌中表达量也较高(P<0.05);而在湖羊中,HMOX1在肺脏和脂肪中高表达(P<0.01),其次在脾脏、肾脏及肝脏中的表达量也较高(P<0.05)。2个品种间同一组织表达比较结果显示,HMOX1基因在肺、脂肪中的表达量差异极显著(P<0.01)。HMOX1基因Exon3区检测到4个SNPs位点和A、B及C 3个等位基因;通过2个品种间不同基因型比较发现,湖羊的AB型个体血红蛋白含量(hemoglobin, HGB)和红细胞压积(hematokrit, HCT)值明显低于藏绵羊的其他基因型(P<0.01),藏绵羊的AA和BB型个体的HGB和HCT值显著高于AB型(P<0.01),AC型血氧饱和度(oxygen saturation, SO2)值显著高于AA和BB型个体;而c.3775G>A位点上MM基因型个体的SO2、HGB、HCT值显著高于NN基因型(P<0.05)。由此说明AA、BB和AC基因型的c.3775G>A位点变异与血液指标存在相关性,且为G时更有利于对低氧环境的适应。因此,HMOX1基因可作为低氧适应的候选基因,为探索藏绵羊低氧适应分子机制提供基础资料。 展开更多
关键词 藏绵羊 血红素加氧酶1基因(HMOX1) 组织表达 多态性 血液分析
小尾寒羊GnRH基因组织表达、多态性及其与产羔性状关联分析
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作者 寸静宇 刘秋月 +6 位作者 王翔宇 狄冉 胡文萍 张效生 张金龙 赵永聚 储明星 《中国农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期73-80,共8页
为揭示GnRH基因在小尾寒羊下丘脑-垂体-卵巢轴(Hypothalamic-pituitary-ovarian axis,HPOA)中的表达规律、多态性及其与产羔数的关系,深入了解其对小尾寒羊多羔的作用,采用实时荧光定量PCR技术对6只小尾寒羊(FecB++型单、多羔母羊各3只... 为揭示GnRH基因在小尾寒羊下丘脑-垂体-卵巢轴(Hypothalamic-pituitary-ovarian axis,HPOA)中的表达规律、多态性及其与产羔数的关系,深入了解其对小尾寒羊多羔的作用,采用实时荧光定量PCR技术对6只小尾寒羊(FecB++型单、多羔母羊各3只)的生殖组织及脑组织中GnRH基因的表达谱进行分析,同时采用Sequenom MassARRAY~?SNP技术对380只小尾寒羊和共380只的小尾寒羊、滩羊、苏尼特羊、策勒黑羊、湖羊和草原型藏羊GnRH基因2个单核苷酸多态性位点(Single nucleotide polymorphisms,SNPs)的进行多态性检测,并与小尾寒羊产羔数进行关联分析。结果显示,GnRH基因在下丘脑、卵巢和子宫组织均有表达,其中在下丘脑高表达。在小尾寒羊多羔群体中,GnRH基因在卵巢、大脑、下丘脑、垂体的表达均极显著高于单羔群体(P<0.01),暗示其可能参与了小尾寒羊多羔性状调控。分型发现GnRH基因2个位点基因型频率和等位基因频率在单、多羔品种间差异均不显著(P>0.05)。关联分析表明,GnRH基因的2个SNPs位点的多态性与小尾寒羊各胎产羔数差异均不显著(P>0.05);2个SNPs在所有绵羊品种中均表现为低度多态(PIC<0.25);卡方适合性检验表明,2个SNPs在各个绵羊品种中均处于Hardy-Weinberg平衡状态(P>0.05)。 展开更多
关键词 绵羊 多羔 GnRH基因 组织表达 SNP 关联
山麻鸭SHH基因克隆和组织表达 预览
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作者 李秀金 陈永浩 +5 位作者 孙敬帅 石逸夫 林晓冰 欧阳宏佳 黄运茂 田允波 《仲恺农业工程学院学报》 CAS 2019年第2期1-5,共5页
本研究旨在克隆鸭SHH基因了解其组织表达情况,以山麻鸭为试验材料,采集下丘脑、垂体和卵巢组织样品,提取RNA逆转录后进行SHH基因克隆,并采用实时荧光定量PCR方法检测其表达水平.本试验克隆获得山麻鸭SHH基因cDNA序列878bp,包含了5′UTR1... 本研究旨在克隆鸭SHH基因了解其组织表达情况,以山麻鸭为试验材料,采集下丘脑、垂体和卵巢组织样品,提取RNA逆转录后进行SHH基因克隆,并采用实时荧光定量PCR方法检测其表达水平.本试验克隆获得山麻鸭SHH基因cDNA序列878bp,包含了5′UTR113bp和编码序列765bp,编码255个氨基酸.氨基酸序列同源性比对发现,山麻鸭SHH基因与其他禽类的同源性较高,在物种间的保守性高.山麻鸭SHH基因在下丘脑表达量显著高于垂体和各级卵泡组织(P<0.01);而在大黄卵泡中表达极显著低于大白卵泡和小黄卵泡(P<0.01).本研究克隆获得SHH基因部分序列并检测其组织表达规律,为后续功能研究打下基础. 展开更多
关键词 山麻鸭 SHH 基因克隆 组织表达
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芝麻赤霉素合成相关基因鉴定与表达分析 预览
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作者 盛晨 张艳欣 +5 位作者 于景印 高媛 黎冬华 周瑢 张秀荣 王林海 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期399-408,共10页
赤霉素的生物合成是多种酶促反应的过程,与植株发育、逆境响应密切相关。为分析芝麻基因组中赤霉素合成相关基因的分布、结构和活性特征,本研究以芝麻基因组序列和不同组织转录组为对象,通过生物信息学方法,从中共鉴定出32个赤霉素合成... 赤霉素的生物合成是多种酶促反应的过程,与植株发育、逆境响应密切相关。为分析芝麻基因组中赤霉素合成相关基因的分布、结构和活性特征,本研究以芝麻基因组序列和不同组织转录组为对象,通过生物信息学方法,从中共鉴定出32个赤霉素合成相关基因,分属7个不同的基因家族,分布在除5号染色体外芝麻所有的染色体上。不同基因家族蛋白质肽链长度存在较大差异,其中CPS家族的蛋白质序列最长,平均包含776个氨基酸残基;KAO家族蛋白序列长度的变异最大,在401~834个氨基酸之间。所有芝麻赤霉素合成相关基因编码的蛋白质预测为亲水性蛋白。与拟南芥、水稻、大豆、葡萄、高粱、番茄等物种相比,芝麻中赤霉素合成相关基因数目处于中等水平,但CPS家族中芝麻的基因数目明显多于其他物种,进化分析表明,在分析的7个物种中,芝麻与番茄具有较近的进化关系。在不同组织中,7个相关基因家族表达模式不同。KS家族基因在种子、茎尖和叶片中表达相对较高;CPS家族基因在心皮和种子中活性较强,但在茎尖和叶片中几乎没有表达;KAO和KO家族基因在不同组织中整体上具有相对较高的活性,而KS、GA3ox家族的基因在不同组织中整体表达量较低。就不同组织而言,种子中的GA合成相关基因活性整体较高;而在根尖、茎尖、叶片等与芝麻植株形态建成密切相关的3个组织中,这些基因表达以根尖较突出、其次为茎尖,在叶片中的活性整体较低。本研究为解析芝麻赤霉素合成相关基因的结构特征及其在不同组织中的作用特点提供了基因信息和理论参考。 展开更多
关键词 芝麻 赤霉素基因 进化 组织 基因表达
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绵羊SMAD1基因组织表达及其多态性与产羔数关联分析 预览
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作者 田志龙 汤继顺 +4 位作者 孙庆 王玉琴 张效生 张金龙 储明星 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期755-766,共12页
【目的】绵羊产羔数是一个极其复杂的性状,受诸多因素影响。绵羊排卵数是最重要的因素之一,而SMAD蛋白在哺乳动物卵泡发育和颗粒细胞生长分化过程中发挥着重要作用。因此本文基于前期绵羊基因组重测序数据,深入研究SMAD家族成员1 (SMAD ... 【目的】绵羊产羔数是一个极其复杂的性状,受诸多因素影响。绵羊排卵数是最重要的因素之一,而SMAD蛋白在哺乳动物卵泡发育和颗粒细胞生长分化过程中发挥着重要作用。因此本文基于前期绵羊基因组重测序数据,深入研究SMAD家族成员1 (SMAD family member 1, SMAD1)基因在不同繁殖力小尾寒羊组织表达模式,并探讨其多态性与绵羊产羔数的关系,以揭示其影响产羔数的机制,为绵羊分子育种提供科学依据。【方法】首先,采用反转录PCR技术检测SMAD1基因在不同繁殖力小尾寒羊群体大脑,小脑,下丘脑,垂体,子宫,卵巢,输卵管,心脏,肝脏,脾脏,肺脏,肾脏,肾上腺,甲状腺,大肠,小肠,胰腺,瘤胃,肾脂19种组织的表达模式,然后利用实时荧光定量PCR技术检测SMAD1基因在不同繁殖力小尾寒羊下丘脑,垂体,子宫,卵巢,输卵管5种繁殖组织的相对表达量。随后采用Sequenom MassARRAY?SNP技术对SMAD1基因5个单核苷酸多态性(singlenucleotide polymorphism, SNP)位点在小尾寒羊(n=380)、湖羊(n=101)、苏尼特羊(n=21)、草原型藏羊(n=161)、策勒黑羊(n=52)、滩羊(n=22)6个绵羊品种中进行基因型检测,计算其群体遗传学指标,利用SPSS19.0软件分析5个SNPs与小尾寒羊产羔数的相关性。【结果】PCR结果显示,SMAD1基因在不同繁殖力小尾寒羊全身性组织均有表达,在小尾寒羊单羔群体卵巢的表达量极显著高于多羔群体(P<0.01),小尾寒羊单羔群体下丘脑、垂体的表达量显著高于多羔群体(P<0.05);基因分型结果表明,g.12485895A>G,g.12487558G>A和g.12487190G>T位点在单、多羔绵羊品种中基因型和等位基因频率均差异显著(P<0.05);而g.12508874T>C和g.12487467A>G位点在单、多羔绵羊品种中基因型和等位基因频率均差异不显著(P>0.05);群体遗传学分析表明,g.12485895A>G、g.12487558G>A、g.12508874T>C、g.12487467A>G、g.12487190G>T位点在小尾寒羊、湖羊、策勒黑羊、苏尼特 展开更多
关键词 绵羊 SMAD1基因 组织表达 SNP分型 产羔数
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湘村黑猪sirt2基因多态性及其与肉质性状的关联分析和组织表达研究 预览
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作者 崔清明 张星 +9 位作者 彭英林 高峰 陈晨 邓缘 任慧波 胡雄贵 朱吉 罗璇 刘莹莹 左剑波 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第4期1086-1093,共8页
本研究旨在探索沉默信号调节子家族(silent information regulator 1-7,SIRT1-7)sirt2基因在湘村黑猪不同组织间的表达及其多态性与肉质性状间的关联性,以期寻找与湘村黑猪肉质性状相关的分子标记。采用PCR-RFLP方法和基因测序技术对湘... 本研究旨在探索沉默信号调节子家族(silent information regulator 1-7,SIRT1-7)sirt2基因在湘村黑猪不同组织间的表达及其多态性与肉质性状间的关联性,以期寻找与湘村黑猪肉质性状相关的分子标记。采用PCR-RFLP方法和基因测序技术对湘村黑猪sirt2基因多态位点进行分析,采用实时荧光定量PCR技术对sirt2基因在湘村黑猪心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胰腺、后腿肌和背最长肌8个组织中的相对表达量进行分析,利用SAS 9.4软件对sirt2基因突变位点不同基因型与肌肉色值、pH 45 min、pH 24 h、滴水损失、失水率、肌内脂肪、嫩度和眼肌面积进行关联分析。结果显示,在湘村黑猪sirt2基因第8外显子扩增片段中的240 bp处发现1处C→T碱基突变,编码氨基酸由精氨酸(Arg)变为半胱氨酸(Cys),为错义突变,并形成CC、CT和TT3种基因型,CC基因型为优势基因型,C为优势等位基因,经χ^2检验表明该突变位点偏离哈代-温伯格平衡;该位点群体纯合度较高,有效等位基因数为1.301,多态信息含量为0.205,为低度多态(PIC<0.25)。基因多态性与肉质性状关联分析结果表明,TT基因型肉色L*值和滴水损失显著低于CC和CT基因型(P<0.05),CC基因型失水率显著高于CT和TT基因型(P<0.05)。sirt2基因在湘村黑猪8个组织中均有表达,其中在背最长肌中相对表达量最高,与肺脏中表达量差异不显著(P>0.05),但显著高于心脏、肝脏、脾脏、肾脏、胰腺和后腿肌(P<0.05),且心脏、肝脏、脾脏、肾脏和胰腺中相对表达量差异均不显著(P>0.05)。本试验结果表明,sirt 2基因对湘村黑猪肉质性状的发育有一定影响,可作为影响湘村黑猪肉质性状的候选基因进行深入研究。 展开更多
关键词 湘村黑猪 sirt2基因 肉质性状 组织表达 关联分析
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绒毛组织中肝细胞生长因子和转化生长因子-β1与稽留流产的关系 预览
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作者 石春燕 《中国性科学》 2019年第2期99-101,共3页
目的探讨绒毛组织中肝细胞生长因子(HGF)和转化生长因子-β1(TGF-β1)与稽留流产的关系。方法选择2017年1月至2018年1月江苏大学附属医院诊治的600名受检者作为研究对象,将其中已经免疫组化染色法确诊的300例稽留流产患者设为研究组,将... 目的探讨绒毛组织中肝细胞生长因子(HGF)和转化生长因子-β1(TGF-β1)与稽留流产的关系。方法选择2017年1月至2018年1月江苏大学附属医院诊治的600名受检者作为研究对象,将其中已经免疫组化染色法确诊的300例稽留流产患者设为研究组,将300例正常早孕女性设为对照组。采用半定量法检测两组受检者HGF、TGF-β1表达水平,并就两组受检者的HGF、TGF-β1表达水平及其在同一绒毛组织中的相关性进行统计学分析。结果①研究组受检者绒毛组织中HGF阳性表达率(22.7%)明显低于对照组受检者(42.7%),其差异具有统计学意义(P<0.05);两组受检者绒毛组织中的TGF-β1阳性表达率之间差异无统计学意义(P>0.05);②研究组受检者的同一绒毛组织中HGF、TGF-β1表达相关系数是0.458,P<0.05,显示HGF、TGF-β1表达之间存在正相关关系。结论研究组受检者的绒毛组织中HGF表达水平明显低于对照组受检者,而TGF-β1可以调控HGF表达水平的方式参与稽留流产的产生和进展。 展开更多
关键词 肝细胞生长因子 绒毛组织 正常早孕女性 转化生长因子-Β1 稽留流产 表达水平 相关性
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绵羊KISS1基因组织表达及其多态性与产羔数关联分析 预览
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作者 安雪姣 赵生国 +4 位作者 潘章源 文禹粱 田志龙 蔡原 储明星 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2019年第6期45-50,共6页
为研究 KISS1基因在常年发情的小尾寒羊和季节性发情的草地型藏羊中的表达模式,以及 KISS1基因多态性与绵羊繁殖之间的关系,实验采用 qPCR技术对比分析 KISS1基因在 2个品种绵羊的 10种繁殖相关组织中的表达差异,同时利用 Sequenom Mass... 为研究 KISS1基因在常年发情的小尾寒羊和季节性发情的草地型藏羊中的表达模式,以及 KISS1基因多态性与绵羊繁殖之间的关系,实验采用 qPCR技术对比分析 KISS1基因在 2个品种绵羊的 10种繁殖相关组织中的表达差异,同时利用 Sequenom MassARRAY SNP 技术对常年发情绵羊(小尾寒羊、策勒黑羊和湖羊)和季节性发情绵羊(滩羊、苏尼特羊和草地型藏羊)KISS1基因 2 个 SNPs 位点多态性进行检测,并与小尾寒羊产羔数进行关联分析。qPCR 结果显示:KISS1基因在小尾寒羊下丘脑、大脑、垂体和甲状腺中的表达量高于草原型藏羊(P<0.05);分型结果表明,g.1317523C>T 位点基因型频率和等位基因频率在常年发情和季节性发情绵羊品种间差异均达到极显著水平(P<0.01);群体遗传学分析表明,g.1317523C>T 位点在 6 个绵羊群体中均表现为中度多态(0.25<PIC<0.5);卡方适合性检验表明,g.1317523C>T 位点在小尾寒羊、滩羊、苏尼特羊和湖羊中均处于哈代温伯格平衡状态(P>0.05),g.1311578G>T 位点在苏尼特羊和湖羊中处于哈代温伯格平衡状态(P>0.05);关联分析表明,这 2个 SNPs位点与小尾寒羊前 3胎产羔数均无显著关联(P>0.05),但 g.1311578G>T 位点 TT 型各胎产羔数均大于 GT 和 GG 型。综上, KISS1基因与绵羊的季节性繁殖密切相关,并且 g.1311578G>T 位点对绵羊产羔性状有潜在调控作用。 展开更多
关键词 绵羊 KISS1基因 组织表达 SNP 分型 季节性繁殖 产羔数
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黄体期和卵泡期小尾寒羊KiSS-1与RFRP-3组织表达研究
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作者 安雪姣 潘章源 +10 位作者 赵生国 李春艳 田志龙 狄冉 刘秋月 胡文萍 王翔宇 张效生 张金龙 蔡原 储明星 《中国农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期82-90,共9页
为分析KiSS-1和RFRP-3基因在小尾寒羊不同繁殖时期(黄体期和卵泡期)下丘脑、垂体、性腺轴各组织中的表达差异,阐明这2个基因在绵羊发情转换中的表达模式,以常年发情的小尾寒羊为研究对象,采用实时荧光定量PCR技术,对比分析了KiSS-1和RFR... 为分析KiSS-1和RFRP-3基因在小尾寒羊不同繁殖时期(黄体期和卵泡期)下丘脑、垂体、性腺轴各组织中的表达差异,阐明这2个基因在绵羊发情转换中的表达模式,以常年发情的小尾寒羊为研究对象,采用实时荧光定量PCR技术,对比分析了KiSS-1和RFRP-3基因在黄体期和卵泡期的小尾寒羊下丘脑—垂体—性腺轴各组织中的表达差异。结果表明:1)KiSS-1和RFRP-3基因在下丘脑、垂体、卵巢等10种组织中均有表达;2)黄体期和卵泡期下丘脑中KiSS-1基因表达量均显著高于其他组织(P<0.05),卵泡期下丘脑和松果体中KiSS-1基因表达量均显著高于黄体期(P<0.05);3)黄体期和卵泡期下丘脑和卵巢中RFRP-3基因的表达量均显著高于其他组织(P<0.05),且卵巢中RFRP-3基因在黄体期的表达量显著高于卵泡期(P<0.05)。综上,研究发现KiSS-1和RFRP-3基因在绵羊发情调控中均发挥重要作用,KiSS-1促进发情而RFRP-3抑制发情。 展开更多
关键词 小尾寒羊 繁殖时期 KISS-1 RFRP-3 组织表达
牦牛Bcl-2、Bax基因克隆及其在生殖轴上的表达分析 预览
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作者 夏忆 王琴 +3 位作者 何向东 陈莹 吉格莫体 字向东 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第7期1881-1889,共9页
试验旨在分析Bcl-2与Bax基因的序列特性,并分析其在母牦牛生殖轴上的表达特点,为探讨其在牦牛繁殖活动中的调控作用奠定基础。试验采集健康母牦牛与母黄牛下丘脑、垂体、卵巢、输卵管及子宫组织样品,通过RT-PCR扩增并克隆Bcl-2与Bax基因... 试验旨在分析Bcl-2与Bax基因的序列特性,并分析其在母牦牛生殖轴上的表达特点,为探讨其在牦牛繁殖活动中的调控作用奠定基础。试验采集健康母牦牛与母黄牛下丘脑、垂体、卵巢、输卵管及子宫组织样品,通过RT-PCR扩增并克隆Bcl-2与Bax基因,并采用生物信息学软件进行序列分析;利用实时荧光定量PCR法检测Bcl-2与Bax基因在牦牛与黄牛不同组织中的表达差异。结果表明,牦牛Bcl-2编码区全长690 bp,编码229个氨基酸;与黄牛Bcl-2基因核苷酸序列同源性最高,为99.86%,其次是山羊、绵羊,同源性分别为98.41%、97.97%;系统进化树表明,牦牛与黄牛亲缘关系最近。牦牛Bax基因编码区全长579 bp,编码192个氨基酸,与黄牛、藏山羊和金堂黑山羊同源性较高,分别为99.83%、99.48%和99.48%,其次是绵羊、马、人,同源性分别为99.14%、95.34%、94.30%;系统进化树表明,牦牛与黄牛亲缘关系最近。Bcl-2和Bax蛋白不存在信号肽,均为酸性不稳定的疏水蛋白。Bcl-2与Bax基因在黄牛及牦牛下丘脑、垂体、卵巢、输卵管和子宫组织中均有表达,其中牦牛卵巢、子宫中Bcl-2基因表达量分别显著和极显著高于黄牛(P<0.05;P<0.01);牦牛子宫、输卵管中Bax基因表达量显著高于黄牛(P<0.05),牦牛卵巢中Bcl-2/Bax比值极显著高于黄牛(P<0.01),子宫和垂体中显著高于黄牛(P<0.05)。表明Bcl-2与Bax在动物进化中非常保守且在繁殖活动中起重要作用,牦牛卵巢、子宫、输卵管和垂体中的高表达量可能与牦牛处于极端恶劣环境的细胞抗凋亡作用有关。 展开更多
关键词 牦牛 黄牛 BCL-2基因 BAX基因 克隆 组织表达
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威宁绵羊SOCS7和GFAP基因组织表达研究 预览
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作者 张继 易鸣 +6 位作者 程朝友 程均华 付正仙 杨德文 吴雪 邱淦远 刘若余 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第7期1899-1906,共8页
试验旨在检测细胞因子信号传导抑制蛋白7(suppressor of cytokine signaling 7,SOCS7)和胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)基因在威宁绵羊不同组织中的表达水平。以6月龄、1周岁和2周岁的威宁绵羊公、母羊为研究... 试验旨在检测细胞因子信号传导抑制蛋白7(suppressor of cytokine signaling 7,SOCS7)和胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)基因在威宁绵羊不同组织中的表达水平。以6月龄、1周岁和2周岁的威宁绵羊公、母羊为研究对象,采用实时荧光定量PCR测定威宁绵羊不同性别及不同生长阶段心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏及脑6个组织中SOCS7和GFAP基因的相对表达量,从mRNA水平上的探究两个基因之间的表达规律。结果显示,SOCS7基因在威宁绵羊不同组织中均有不同程度的表达,其中脾脏中相对表达量最高,其次是肺脏、肾脏、心脏、肝脏和脑组织,随着威宁绵羊年龄的增大,SOCS7基因在组织中的相对表达量呈现小幅度上升的趋势;GFAP基因在威宁绵羊脑组织中相对表达量最高,其余组织中表达量较低,随着年龄增长总体呈现下降趋势。从性别差异来看,威宁绵羊SOCS7基因相对表达量母羊普遍高于公羊,而GFAP基因则是公羊普遍高于母羊,推测SOCS7基因很有可能负向调控GFAP基因的表达。 展开更多
关键词 威宁绵羊 SOCS7基因 GFAP基因 实时荧光定量PCR 组织表达
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版纳微型猪近交系GOT1基因克隆、序列分析及表达分析 预览
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作者 王配 张霞 +5 位作者 霍金龙 霍海龙 王淑燕 潘伟荣 滕晓红 程霞 《云南农业大学学报:自然科学版》 CSCD 北大核心 2019年第1期29-36,共8页
【目的】细胞质型天冬氨酸氨基转移酶又称谷草转氨酶,由细胞核GOT1基因编码,催化天冬氨酸的氨基转移到α-酮戊二酸形成草酰乙酸和谷氨酸,在物质代谢调控中起重要作用。本研究以版纳微型猪近交系(Banna mini-pig inbred line,BMI)为材料... 【目的】细胞质型天冬氨酸氨基转移酶又称谷草转氨酶,由细胞核GOT1基因编码,催化天冬氨酸的氨基转移到α-酮戊二酸形成草酰乙酸和谷氨酸,在物质代谢调控中起重要作用。本研究以版纳微型猪近交系(Banna mini-pig inbred line,BMI)为材料,克隆GOT1基因,并对其进行生物信息学及组织mRNA表达分析。【方法】利用RT-PCR技术扩增猪GOT1基因,并进行生物信息学分析,同时应用半定量RT-PCR技术明确其mRNA的组织表达特征。【结果】获得了BMI GOT1基因全长1 484 bp的cDNA序列(GenBank登录号:KU705636.1),包含1 242 bp的开放阅读框。生物信息学分析表明:猪GOT1基因位于14号染色体,包含9个外显子和8个内含子;猪GOT1蛋白无信号肽,无跨膜螺旋,有36个磷酸化位点和1个O连接的糖基化位点,定位于细胞质的概率是94.1%,与水牛、黄牛、黑猩猩、人、食蟹猴、大鼠和小鼠的GOT1蛋白依次有95.6%、95.4%、93.0%、92.7%、92.5%、90.3%和90.1%的同源性;二级结构中以α螺旋为主,无规则卷曲和延伸链含量中等,β转角只在局部出现;三级结构同源建模成功。组织表达分析表明:GOT1 mRNA在检测的15个组织中差异表达,肌肉中表达量最高。【结论】为进一步了解该基因的生理功能及调控机制积累了资料。 展开更多
关键词 细胞质型谷草转氨酶 版纳微型猪近交系 组织表达 生物信息学
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威宁绵羊GHR基因克隆及组织表达
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作者 吴雪 易鸣 +6 位作者 程朝友 付正仙 杨德文 程均华 王振 王金洲 刘若余 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期1-6,共6页
本试验以6月龄、1周岁和2周岁的威宁绵羊公母羊为研究对象,利用分子手段对威宁绵羊GHR基因编码区序列进行克隆,并进行生物信息学分析,此外,本试验同时采用实时荧光定量PCR的手段对GHR基因在威宁绵羊不同性别及不同生长阶段心脏、肝脏、... 本试验以6月龄、1周岁和2周岁的威宁绵羊公母羊为研究对象,利用分子手段对威宁绵羊GHR基因编码区序列进行克隆,并进行生物信息学分析,此外,本试验同时采用实时荧光定量PCR的手段对GHR基因在威宁绵羊不同性别及不同生长阶段心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏及背最长肌6个组织中mRNA水平上的表达规律进行探究,结果显示:威宁绵羊GHR基因CDS区序列长度为1 905 bp,发现2个SNP位点。GHR基因在威宁绵羊各组织均有不同程度的表达,在不同性别、不同生长阶段相同组织中的表达具有一定的显著性差异。 展开更多
关键词 威宁绵羊 GHR基因 克隆 组织表达
miR-381在子宫颈鳞癌患者血清和组织中的表达及意义
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作者 王婵丽 肖天慧 +1 位作者 王中海 龚子元 《中国妇幼卫生杂志》 2019年第2期41-45,共5页
目的探讨miR-381在子宫颈鳞癌患者血清和组织中的表达及意义。方法选取2013年6月-2018年6月深圳市南山医院收治的50例宫颈鳞癌患者和50例宫颈上皮内瘤变Ⅲ级患者为研究对象,另选取同期在深圳市南山医院因子宫肌瘤行子宫全切术患者50例... 目的探讨miR-381在子宫颈鳞癌患者血清和组织中的表达及意义。方法选取2013年6月-2018年6月深圳市南山医院收治的50例宫颈鳞癌患者和50例宫颈上皮内瘤变Ⅲ级患者为研究对象,另选取同期在深圳市南山医院因子宫肌瘤行子宫全切术患者50例纳入对照组,采用RT-PCR法分别检测3组血清样本和癌组织样本中miR-381表达水平,并分析miR-381表达水平与宫颈鳞癌患者临床病理特征的相关性。结果miR-381在宫颈鳞癌组和宫颈上皮内瘤变Ⅲ级组患者血清和癌组织中的相对表达量明显低于对照组,且差异均有统计学意义(P<0.05);miR-381在宫颈鳞癌组患者血清和癌组织中的相对表达量明显低于宫颈上皮内瘤变Ⅲ级组,且差异均有统计学意义(P<0.05);宫颈鳞癌患者血清和癌组织中miR-381的表达与病理分级、宫颈间质浸润、盆腔淋巴结转移均存在相关性(P<0.05),而与患者年龄及FIGO分期无明显相关性(P>0.05);血清中miR-381对宫颈鳞癌的诊断效能ROC曲线下面积为0.821(95%CI:0.597~1.042),诊断敏感性为92.07%,特异性为79.42%;癌组织中miR-381对宫颈鳞癌的诊断效能ROC曲线下面积为0.893(95%CI:0.704~1.625),诊断敏感性为95.82%,特异性为83.46%。结论miR-381在宫颈鳞癌患者血清和癌组织中均呈低表达,其表达水平与宫颈鳞癌的发生发展存在相关性,可能成为宫颈鳞癌特异性诊断的潜在标记物。 展开更多
关键词 miR-381 宫颈鳞癌 血清 癌组织 表达
藏山羊GEM基因克隆及组织表达分析
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作者 许晴 王永 +4 位作者 朱江江 张亚楠 马洁琼 黄凯 林亚秋 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期1512-1518,共7页
本研究旨在克隆获得藏山羊GEM基因序列,预测其生物学功能,并阐明其组织表达特征。利用TA法克隆获得藏山羊GEM基因序列,并利用qPCR技术检测该基因在不同组织中的表达丰度。结果显示,藏山羊GEM基因序列1 096 bp,CDS区为936 bp,共编码311... 本研究旨在克隆获得藏山羊GEM基因序列,预测其生物学功能,并阐明其组织表达特征。利用TA法克隆获得藏山羊GEM基因序列,并利用qPCR技术检测该基因在不同组织中的表达丰度。结果显示,藏山羊GEM基因序列1 096 bp,CDS区为936 bp,共编码311个氨基酸;GEM蛋白具有磷酸化位点和糖基化位点共33个,为不稳定碱性疏水蛋白质,主要在细胞核发挥生物学作用;藏山羊GEM基因的核苷酸序列和氨基酸序列均与反刍动物的序列具有很高的同源性;GEM基因在藏山羊肺组织中高表达(p<0.01),其次高表达于脾组织(p<0.01),均极显著高于其他组织。本研究为进一步了解藏山羊GEM基因功能提供基础数据。 展开更多
关键词 藏山羊 GEM基因 克隆 组织表达
藏绵羊PPARα基因遗传变异特征及组织表达分析
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作者 张亚强 刘秀 +4 位作者 李少斌 王继卿 胡江 郝志云 罗玉柱 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期1519-1524,共6页
PPARα(Peroxisome proliferator activated receptorsα)基因参与调控线粒体脂肪酸β氧化,在能量代谢中具有重要作用,是动物高原低氧适应的主要候选基因之一。本研究采用PCR-SSCP和测序方法检测2个品种(藏绵羊,湖羊) PPARα基因P1区核... PPARα(Peroxisome proliferator activated receptorsα)基因参与调控线粒体脂肪酸β氧化,在能量代谢中具有重要作用,是动物高原低氧适应的主要候选基因之一。本研究采用PCR-SSCP和测序方法检测2个品种(藏绵羊,湖羊) PPARα基因P1区核苷酸变异及遗传特征。采用实时荧光定量PCR (quantitative real-time PCR, qRT-PCR)检测藏羊与湖羊心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、骨骼肌6个组织的相对表达量。检测表明:在扩增区域发现2个SNPs (c.515-22A>G, c.515-10C>T)对应的等位基因A、B。基因频率在2个群体间具有统计学意义(p<0.01),藏绵羊的优势基因型为AB,湖羊优势基因型为AA。推测AB基因型个体可能更有利于藏绵羊适应高原低氧环境,可作为藏绵羊低氧适应选育的分子标记。PPARα基因在2个绵羊的6个组织中均有不同程度的表达且具有品种间差异性。PPARα基因在藏绵羊心脏的表达量极显著的低于其余5个组织(p<0.01),而2个品种间,藏绵羊各组织的表达量均低于湖羊,其中在心脏、肝脏、肺脏3个组织表达量极显著的低于湖羊(p<0.01)。本研究可丰富绵羊基因组学内容,为藏绵羊低氧适应研究提供基础数据。 展开更多
关键词 PPARα基因 遗传特征 组织表达 适应性
增生性瘢痕组织中肿瘤坏死因子αR1 mRNA的表达及意义 预览
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作者 李勇铁 邹永红 刘德伍 《中国医学创新》 CAS 2019年第17期158-161,共4页
目的:分析肿瘤坏死因子α受体1(TNF-αR1)在增生性瘢痕组织中基因表达情况,为今后从基因方面治疗增生性瘢痕提供依据。方法:选取48例增生性瘢痕组织患者为观察组(其中瘢痕组织增生时间1~3、4~6、7~12个月及1年以上各12例),12例正常瘢痕... 目的:分析肿瘤坏死因子α受体1(TNF-αR1)在增生性瘢痕组织中基因表达情况,为今后从基因方面治疗增生性瘢痕提供依据。方法:选取48例增生性瘢痕组织患者为观察组(其中瘢痕组织增生时间1~3、4~6、7~12个月及1年以上各12例),12例正常瘢痕组织患者为对照组,以RT-PCR法对瘢痕组织中TNF-αR1 mRNA表达进行检测,比较各组TNF-αR1 mRNA水平差异。结果:对照组TNF-αR1 mRNA表达均高于观察组不同时间点TNF-αR1 mRNA表达,差异有统计学意义(P<0.05),且1年以上组织TNF-αR1 mRNA表达量均高于1~3、4~6、7~12个月组织(P<0.05)。结论:增生性瘢痕组织中TNF-αR1 mRNA表达低于正常瘢痕组织,同时随着时间增加增生性瘢痕中TNF-αR1 mRNA表达会显著上升。 展开更多
关键词 瘢痕组织 增生性 RT-PCR 表达 肿瘤坏死因子α受体1
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牦牛TSHB、DIO2和DIO3基因的克隆及其在繁殖轴的表达研究 预览
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作者 王琴 卢建远 字向东 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期132-137,共6页
为了解TSHB-DIO2/DIO3系统对牦牛季节性发情的调控机制,以牦牛为研究对象,运用RT-PCR方法克隆牦牛TSHB、DIO2、DIO3基因的cDNA序列,结合GenBank已公布的普通牛TSHB、DIO2、DIO3基因序列,构建遗传进化树,采用荧光定量PCR技术检测其在牦... 为了解TSHB-DIO2/DIO3系统对牦牛季节性发情的调控机制,以牦牛为研究对象,运用RT-PCR方法克隆牦牛TSHB、DIO2、DIO3基因的cDNA序列,结合GenBank已公布的普通牛TSHB、DIO2、DIO3基因序列,构建遗传进化树,采用荧光定量PCR技术检测其在牦牛下丘脑、垂体、卵巢、输卵管、子宫中的表达水平。结果表明,牦牛TSHB、DIO2、DIO3基因均与普通牛有最近的分子进化关系;TSHB基因CDS区为417 bp,在垂体中的表达水平高于其他组织,差异极显著(P<0.01);DIO2基因cDNA为951 bp,在所检测的组织中均有表达,且在子宫中的表达水平高于其他组织,差异极显著(P<0.01);DIO3基因cDNA为873 bp,在子宫组织中未检测到表达,在卵巢中的表达水平高于垂体、下丘脑和输卵管,差异极显著(P<0.01)。提示TSHBDIO2/DIO3可能参与牦牛繁殖调控,旨为揭示牦牛季节性繁殖分子调控机制提供参考。 展开更多
关键词 TSHB DIO2 DIO3 牦牛 组织表达
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