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双炔失碳酯对离体黄体,蜕膜和滋养层细胞的影响 预览 被引量:46
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作者 孙朝霞 陈浩宏 《生殖与避孕》 CAS CSCD 北大核心 1999年第4期 220-225,共6页
本文以细胞的形态和存活率为指标,用米非司酮作为阳性对照,观察了双炔失碳酯对无血清培养的大鼠黄体、人蜕膜和滋养层细胞的直接损伤作用;同时进一步观察了双炔失碳酯对大鼠黄体细胞分泌功能的影响。结果表明:(1)双炔失碳酯对大... 本文以细胞的形态和存活率为指标,用米非司酮作为阳性对照,观察了双炔失碳酯对无血清培养的大鼠黄体、人蜕膜和滋养层细胞的直接损伤作用;同时进一步观察了双炔失碳酯对大鼠黄体细胞分泌功能的影响。结果表明:(1)双炔失碳酯对大鼠黄体细胞、人蜕膜和滋养层细胞有直接损伤作用,其LD50分别为:14.34±0.9μg/ml、17.33±4.1μg/ml和34.87±4.9μg/ml。在非致死剂量(5μg/ml)下双炔失碳酯未能抑制hCG和孕烯醇酮促进大鼠黄体细胞孕酮生成作用;但能极显著地抑制Forskolin的促孕酮分泌作用。本文结果提示:溶黄体作用是双炔失碳酯抗早孕的主要机理,对于蜕膜和滋养层的直接损伤作用也是其抗早孕有效环节之一。 展开更多
关键词 双炔失碳酯 黄体细胞 蜕膜 滋养层细胞 孕酮
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组织块法培养人绒毛膜滋养层细胞 被引量:12
2
作者 王雪萍 徐德忠 +2 位作者 李远贵 闫永平 罗深秋 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2001年第1期 57-59,共3页
目的培养符合实验要求的人绒毛膜滋养层细胞。方法用组织块法行原代培养,胰蛋白酶消化法行传代培养,免疫组织化学染色进行细胞鉴定。结果 6d时,细胞开始由组织块边缘向外生长;15d时,即可进行传代。角蛋白染色示细胞纯度达95%以上... 目的培养符合实验要求的人绒毛膜滋养层细胞。方法用组织块法行原代培养,胰蛋白酶消化法行传代培养,免疫组织化学染色进行细胞鉴定。结果 6d时,细胞开始由组织块边缘向外生长;15d时,即可进行传代。角蛋白染色示细胞纯度达95%以上。结论组织块法培养人绒毛膜滋养层细胞简便易行,可获得符合实验要求的人绒毛膜滋养层细胞。 展开更多
关键词 滋养层细胞 绒毛膜 细胞培养 组织块法
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HBsAg进入体外培养的人绒毛膜滋养层细胞的初步研究 被引量:7
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作者 王雪萍 徐德忠 +3 位作者 李远贵 闫永平 门可 张景霞 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2003年第1期 16-20,共5页
目的检测HBsAg进入体外培养的人绒毛膜滋养层细胞的情况,为HBV宫内传播机制研究提供理论依据.方法用胰蛋白酶(0.25%)-DNase Ⅰ(0.15 U/m1)联合消化法,获取纯度较高的人绒毛膜滋养层细胞.将状态良好的对数生长期人绒毛膜滋养层细胞分为6... 目的检测HBsAg进入体外培养的人绒毛膜滋养层细胞的情况,为HBV宫内传播机制研究提供理论依据.方法用胰蛋白酶(0.25%)-DNase Ⅰ(0.15 U/m1)联合消化法,获取纯度较高的人绒毛膜滋养层细胞.将状态良好的对数生长期人绒毛膜滋养层细胞分为6组,HBsAg-anti-HBs复合物组(Ⅰ),热灭活的HBsAg、HBeAg、anti-HBc均阳性血清和高滴度anti-HBs阳性血清共同孵育物组(Ⅱ),热灭活的HBsAg、HBeAg、anti-HBc均阳性血清组(Ⅲ),HBsAg组(Ⅳ),热灭活的正常人血清组(V),及正常细胞培养液组(Ⅵ,空白对照组).分别收集各组细胞铺片,免疫组化检测细胞的感染状况.结果所获人绒毛膜滋养层细胞纯度较高,符合后续实验要求.用鼠抗人anti-HBs免疫组化检测收集的细胞铺片,发现Ⅰ、Ⅱ组均有大量HBsAg阳性信号,Ⅲ组细胞亦有少量HBsAg阳性信号出现,其他各组细胞均未发现HBsAg阳性信号.结论体外培养的人胎盘滋养层细胞能将HBsAg-抗HBs复合物中的HBsAg,但不能将单独的HBsAg"摄人"胞内. 展开更多
关键词 绒毛膜滋养细胞 免疫组织化学 乙型肝炎病毒 宫内传播
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人早孕绒毛滋养层细胞的分离纯化及马鞭草对其分泌绒毛膜 … 预览 被引量:15
4
作者 徐昌芬 卢晓东 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第2期 145-148,共4页
从正常妊娠6~8周早期胎盘Percoll梯度离心分离滋养层细胞进行体外培养,观察马鞭草对培养的滋层细胞形态及绒毛膜促性细胞激素(HCG)分泌功能的影响,探讨了马鞭等抗早孕的细胞学作用机理,结果表明25,50mg/ml... 从正常妊娠6~8周早期胎盘Percoll梯度离心分离滋养层细胞进行体外培养,观察马鞭草对培养的滋层细胞形态及绒毛膜促性细胞激素(HCG)分泌功能的影响,探讨了马鞭等抗早孕的细胞学作用机理,结果表明25,50mg/ml马鞭草乙醇提取液对滋养层细胞HCG分泌有明显的抑制作用,给药后24h即见部分细胞变圆,48h大多固缩死亡,一定浓度的马鞭草可直接杀伤滋养层细胞,抑制HCG的分泌而中止早孕。 展开更多
关键词 滋养层细胞 马鞭草 分离纯化 HCG 抗早孕
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马鞭草抗早孕作用的动物实验研究 预览 被引量:7
5
作者 欧宁 徐昌芬 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第3期 209-211,共3页
给早孕小鼠灌服马鞭草提取液,光镜观察细胞生长情况,细胞的变化及微血管分布情况,观察其对早孕小鼠子吕,胎盘,胎仔的影响,并作形态描述。实验表明:马鞭草能明显抑制胚胎生长使其固缩死亡,胚胎重量0.129±0.075g... 给早孕小鼠灌服马鞭草提取液,光镜观察细胞生长情况,细胞的变化及微血管分布情况,观察其对早孕小鼠子吕,胎盘,胎仔的影响,并作形态描述。实验表明:马鞭草能明显抑制胚胎生长使其固缩死亡,胚胎重量0.129±0.075g,与空白对照组比较有差异。胎仔长0.32±0.14cm,与空白对照组比较有极显著差异,与米非司酮组比较有无显著差异。 展开更多
关键词 马鞭草 滋养层细胞 抗早孕 动物实验
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α-苦瓜籽蛋白对体外培养人胚泡滋养层和蜕膜细胞的影响 预览 被引量:10
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作者 韩维田 吴强 +6 位作者 张志芬 关凤云 刘福阳 杨显荣 曲鸥 孙晓玲 宋玉兰 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1991年第3期 200-203,共4页
通过观察α-苦瓜籽蛋白对体外培养的人胚泡滋养层细胞形态、HCG分泌功能的影响,以及对人蜕膜细胞形态改变,探讨了α-苦瓜籽蛋白抗早孕的细胞学作用机理。0.13,0.50,2.00,8.00 μg/mlα-苦瓜籽蛋白对滋养层细胞形态有不同程度的损伤,时... 通过观察α-苦瓜籽蛋白对体外培养的人胚泡滋养层细胞形态、HCG分泌功能的影响,以及对人蜕膜细胞形态改变,探讨了α-苦瓜籽蛋白抗早孕的细胞学作用机理。0.13,0.50,2.00,8.00 μg/mlα-苦瓜籽蛋白对滋养层细胞形态有不同程度的损伤,时间越长、浓度越大则损伤越重;滋养层细胞分泌HCG功能受到明显抑制,同时对蜕膜细胞也有一定的毒性作用。实验证明:α-苦瓜籽蛋白具有直接损伤滋养层细胞以及毒害蜕膜细胞而达到抗早孕的作用。 展开更多
关键词 α苦瓜籽蛋白 滋养层细胞 蜕膜细胞
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环孢素A对人蜕膜免疫细胞分泌IL-10与IFN-γ的调控作用 预览 被引量:7
7
作者 周雯慧 杜美蓉 +2 位作者 董琳 贺银燕 李大金 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期 314-317,共4页
探讨环孢索A(CsA)对人早孕期母胎界面主要组成细胞IL-10与IFN-γ分泌的调节作用,为反复自然流产等妊娠疾患的治疗提供新线索。收集6~10孕周行人工流产术的正常妊娠妇女绒毛和蜕膜组织;分离、培养蜕膜免疫细胞、滋养细胞与蜕膜基质... 探讨环孢索A(CsA)对人早孕期母胎界面主要组成细胞IL-10与IFN-γ分泌的调节作用,为反复自然流产等妊娠疾患的治疗提供新线索。收集6~10孕周行人工流产术的正常妊娠妇女绒毛和蜕膜组织;分离、培养蜕膜免疫细胞、滋养细胞与蜕膜基质细胞;ELISA法检测给予环孢素A(0μmol/L,1μmol/L)24、48、72h后蜕膜免疫细胞、滋养细胞及蜕膜基质细胞培养上清中IL-10与IFN-γ分泌水平。结果显示,(1)1μmol/L CsA可以明显促进人早孕期蜕膜免疫细胞分泌IL-10(P〈0.01).并抑制其产生IFN-γ(P(0.01);1μmol/L CsA不影响原代培养的人早孕期滋养细胞与蜕膜基质细胞IL-10的分泌(P〉0.05);不论是否给予CsA处理,原代培养的人早孕期滋养细胞与蜕膜基质细胞均不产生IFN-γ。结果表明,CsA通过促进蜕膜免疫细胞分泌IL-10,并抑制其产生IFN-γ,从而有利于母胎界面形成Th2型免疫优势。 展开更多
关键词 环孢素A 滋养细胞 蜕膜基质细胞 免疫细胞
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子痫前期滋养细胞功能障碍病因学研究进展 被引量:9
8
作者 张惠(综述 刘伟(审校) 《中国实用妇科与产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期 305-308,共4页
子痫前期(preeclapmpsia,PE)是围生期母婴死亡的主要原因之一,发病率为1%~5%,其病理生理改变发生在妊娠早期。但在妊娠20周后发病,主要表现为高血压、蛋白尿、水肿,病情严重时会出现全身抽搐及多脏器功能损伤。子痫前期的病... 子痫前期(preeclapmpsia,PE)是围生期母婴死亡的主要原因之一,发病率为1%~5%,其病理生理改变发生在妊娠早期。但在妊娠20周后发病,主要表现为高血压、蛋白尿、水肿,病情严重时会出现全身抽搐及多脏器功能损伤。子痫前期的病情变化复杂且很难预知,通常以终止妊娠控制病情发展,其病因和发病机制目前尚不明确。 展开更多
关键词 子痫前期 胎盘 滋养细胞 病因学
缺氧对滋养细胞sFlt-1及VEGF基因及蛋白表达的影响 被引量:8
9
作者 周琼 乔福元 +2 位作者 刘海意 吴媛媛 龚洵 《生殖与避孕》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期300-304,共5页
目的:探讨缺氧对滋养细胞可溶性血管内皮生长因子受体1(soluble fims-like tyrosine kinase receptor-1,sFlt-1)及血管内皮生长因子(vascular epithelial growth factor,VEGF)表达的影响。方法:CoCl2诱导人早孕绒毛滋养细胞系TEV-... 目的:探讨缺氧对滋养细胞可溶性血管内皮生长因子受体1(soluble fims-like tyrosine kinase receptor-1,sFlt-1)及血管内皮生长因子(vascular epithelial growth factor,VEGF)表达的影响。方法:CoCl2诱导人早孕绒毛滋养细胞系TEV-1化学缺氧,分别于0h、24h、48h、72h、96h、120h用Real-time RT-PCR法检测滋养细胞中sFlt-1及VEGF mRNA表达,ELISA法检测细胞培养上清液中sFlt-1及VEGF蛋白表达。结果:滋养细胞缺氧72h后,胞质内可见明显空泡。滋养细胞sFlt-1mRNA及蛋白表达随缺氧时间的延长逐渐升高,且与缺氧72h、96h、120h间差异有显著性(P〈0.05)。而滋养细胞VEGF mRNA及蛋白表达随缺氧时间的延长呈现出先上升后下降的趋势,并于缺氧48h升高达到峰值(P〈0.05)。结论:不同的缺氧时间对滋养细胞VEGF及sFlt-1表达具有重要的调控作用。慢性缺氧可能导致滋养细胞sFlt-1及VEGF表达平衡失调,从而参与子痫前期的发生、发展。 展开更多
关键词 子痫前期 缺氧 滋养细胞 可溶性血管内皮生长因子受体1(sFlt-1) 血管内皮生长因子(VEGF)
人早孕绒毛滋养层细胞的分离纯化及马鞭草抗早孕机理的初步研究 预览 被引量:5
10
作者 徐昌芬 卢小东 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期 137-140,共4页
目的:探讨马鞭草抗早孕的细胞学作用机理。方法;正常妊娠6-8周早期胎盘Percoll梯度离心分离出滋养层细胞进行体外培养,观察马鞭草对培养的滋养层细胞形态及绒毛膜促性腺激素分泌功能的影响。结果:25,50mg/ml马... 目的:探讨马鞭草抗早孕的细胞学作用机理。方法;正常妊娠6-8周早期胎盘Percoll梯度离心分离出滋养层细胞进行体外培养,观察马鞭草对培养的滋养层细胞形态及绒毛膜促性腺激素分泌功能的影响。结果:25,50mg/ml马鞭草乙醇提取液对滋养层细胞生长及绒毛膜促性腺激素分泌有明显的抑制作用。结论;一定浓度的马鞭草可直接杀伤滋养层细胞,抑制绒毛膜促性腺激素的分泌而中止早孕。 展开更多
关键词 滋养层细胞 马鞭草 HCG 早孕 终止妊娠 中药
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E-钙黏蛋白(E-cadherin)对人滋养细胞侵袭能力及妊娠结局的影响 被引量:6
11
作者 赵洪波 薛立荣 李大金 《生殖与避孕》 CAS CSCD 2012年第1期 10-16,37,共8页
目的:探讨黏附分子E-钙黏蛋白(E-cadherin)的表达对人滋养细胞侵袭能力的调控及其与自然流产发生的关系。方法:分别以过表达或小干扰RNA(siRNA)的方法上调或下调人绒毛膜癌细胞株Bewo及JEG-3内源性E-钙黏蛋白表达,Transwell侵袭... 目的:探讨黏附分子E-钙黏蛋白(E-cadherin)的表达对人滋养细胞侵袭能力的调控及其与自然流产发生的关系。方法:分别以过表达或小干扰RNA(siRNA)的方法上调或下调人绒毛膜癌细胞株Bewo及JEG-3内源性E-钙黏蛋白表达,Transwell侵袭实验观察细胞侵袭行为的改变,并应用Western blotting比较4例正常妊娠妇女及4例自然流产妇女绒毛组织内E-钙黏蛋白的表达水平。结果:转染野生型E-钙黏蛋白质粒的Bewo及JEG-3细胞随着E-钙黏蛋白表达的提高,细胞的侵袭能力显著下降(P〈0.05);而转染E-钙黏蛋白siRNA的Bewo及JEG-3细胞,随着E-钙黏蛋白表达的下降,细胞侵袭能力显著提高(P〈0.05)。自然流产妇女较正常妊娠妇女的绒毛组织E-钙黏蛋白的表达水平不同程度出现升高。结论:E-钙黏蛋白参与调控滋养细胞的侵袭能力,其表达水平可能与妊娠结局密切相关。 展开更多
关键词 滋养细胞 E-钙黏蛋白(E-cadherin) 细胞侵袭
VEGF蛋白在子痫前期胎盘中的表达及意义 被引量:5
12
作者 李芹 仇姝 王建军 《河北医学》 CAS 2010年第10期 1157-1160,共4页
目的:检测子痫前期胎盘的VEGF蛋白表达水平,探讨子痫前期的发病机制。方法:采用免疫组织化学方法结合病理图像分析技术,定量分析10例正常妊娠组、17例轻度子痫前期组和13例重度子痫前期组胎盘VEGF蛋白表达。结果:VEGF蛋白主要表达与... 目的:检测子痫前期胎盘的VEGF蛋白表达水平,探讨子痫前期的发病机制。方法:采用免疫组织化学方法结合病理图像分析技术,定量分析10例正常妊娠组、17例轻度子痫前期组和13例重度子痫前期组胎盘VEGF蛋白表达。结果:VEGF蛋白主要表达与胎盘绒毛滋养细胞的胞膜及胞浆内。与正常妊娠组比较,子痫前期组胎盘VEGF蛋白表达显著减少,轻度、重度子痫前期组比较,有显著性差异。结论:子痫前期患者胎盘滋养层细胞VEGF蛋白表达减少可能是子痫前期的发病机制之一,从而为临床治疗子痫前期提供新的方向。 展开更多
关键词 血管内皮生长因子 子痫前期 胎盘 滋养层细胞
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子痫前期患者胎盘中miRNA-101和内质网蛋白ERp44的表达和意义 预览 被引量:5
13
作者 常玉华 李坤 《中国生化药物杂志》 CAS 北大核心 2014年第6期共4页
目的探讨子痫前期患者胎盘中miRNA-101和内质网蛋白ERp44的表达和意义。方法选取2013年5月~2014年5月入住山东省交通医院分娩的100例产妇的胎盘绒毛组织,随机均分为对照组和子痫前期组,每组各50例。采用RT-PCR法检测各组胎盘组织中miRNA... 目的探讨子痫前期患者胎盘中miRNA-101和内质网蛋白ERp44的表达和意义。方法选取2013年5月~2014年5月入住山东省交通医院分娩的100例产妇的胎盘绒毛组织,随机均分为对照组和子痫前期组,每组各50例。采用RT-PCR法检测各组胎盘组织中miRNA-101的表达情况;Western blot法检测过表达和封闭miRNA-101后,各胎盘组织ERp44的表达情况;采用流式细胞仪检测滋养细胞的凋亡情况。结果与对照组相比,子痫前期组中miRNA-101的表达明显下调,差异有统计学意义(P<0.05)。在滋养细胞HTR-8/SVneo中过表达miRNA-101后,ERp44的表达显著下调(P<0.05);封闭miRNA-101后,ERp44的表达上调(P<0.05);过表达miRNA-101,细胞凋亡数量减少;封闭miRNA-101,细胞凋亡数量增加。结论子痫前期中,miRNA-101可通过调控内质网蛋白ERp44的表达来调控胎盘滋养细胞的凋亡过程。 展开更多
关键词 miRNA-101 内质网蛋白ERp44 滋养细胞 子痫前期
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缺氧微环境中HIF-1α基因沉默的人绒毛膜癌细胞系JEG-3侵袭和迁移能力观察 预览 被引量:1
14
作者 张展 李鹏云 +2 位作者 闫欢 王艳 余洁 《山东医药》 2018年第3期15-18,共4页
目的观察缺氧微环境中缺氧诱导因子1α(HIF-1α)沉默的人绒毛膜癌细胞系JEG-3的侵袭、迁移能力。方法取对数生长期JEG-3细胞分为A、B、C、D组,其中A、B、C组置于体外缺氧微环境培养,D组不处理。当细胞融合到60%~70%时A、C组分别用HIF-... 目的观察缺氧微环境中缺氧诱导因子1α(HIF-1α)沉默的人绒毛膜癌细胞系JEG-3的侵袭、迁移能力。方法取对数生长期JEG-3细胞分为A、B、C、D组,其中A、B、C组置于体外缺氧微环境培养,D组不处理。当细胞融合到60%~70%时A、C组分别用HIF-1αsiRNA和无关序列转染,B、D组不做处理。采用Transwell细胞侵袭试验及划痕试验检测各组细胞侵袭能力和迁移能力。采用实时荧光定量PCR法和蛋白印迹法检测各组细胞HIF-1α、CXCR4的mRNA和蛋白表达。结果 A组细胞的侵袭和迁移能力明显低于其余3组(P均〈0.05),B、C组细胞侵袭和迁移能力显著高于D组(P均〈0.05)。A组细胞中HIF-1α、CXCR4的mRNA和蛋白表达均低于其余3组(P均〈0.05),B、C组细胞HIF-1α蛋白、CXCR4 mRNA和蛋白表达均高于D组(P均〈0.05)。结果缺氧微环境中HIF-1α沉默的JEG-3细胞侵袭、迁移能力下降,其机制可能与HIF-1α下调细胞CXCR4表达有关。 展开更多
关键词 缺氧诱导因子1Α 趋化因子受体4 滋养细胞 细胞迁移 细胞侵袭 子痫 缺氧微环境
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游离脂肪酸对滋养细胞线粒体长链脂肪酸氧化酶表达的影响 被引量:5
15
作者 孙晓乐 杨孜 +2 位作者 王晓晔 王伽略 武淑英 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第29期2034-2037,共4页
目的探讨不同链长游离脂肪酸对人滋养细胞线粒体脂肪酸β氧化循环中长链三羟基酰基辅酶A脱氢酶(LCHAD)基因和蛋白表达变化的影响。方法体外无血清培养人绒毛滋养细胞,将细胞分为五组,每组用不同链长脂肪酸孵育细胞,分别为无游离脂... 目的探讨不同链长游离脂肪酸对人滋养细胞线粒体脂肪酸β氧化循环中长链三羟基酰基辅酶A脱氢酶(LCHAD)基因和蛋白表达变化的影响。方法体外无血清培养人绒毛滋养细胞,将细胞分为五组,每组用不同链长脂肪酸孵育细胞,分别为无游离脂肪酸(F-FFA)、短链脂肪酸(SC—FFA)、中链脂肪酸(MC—FFA)、长链脂肪酸(LC—FFA)、极长链脂肪酸(VLC-FFA)。采用实时荧光定量PCR和蛋白印迹法检测各组LCHAD基因和蛋白的表达变化。结果与F-FFA、SC—FFA、MC—FFA3组比较,LC—FFA组LCHAD基因和蛋白明显降低(P〈0.05),VLC—FFA组LCHAD基因明显升高(P〈0.05),而蛋白表达差异无统计学意义(P〉0.05)。F-FFA、SC—FFA、MC—FFA3组之间LCHAD基因和蛋白表达差异无统计学意义(P〉0.05)。与LC—FFA组比较,VLC-FFA组LCHAD基因和蛋白明显升高(P〈0.05)。结论游离脂肪酸对人滋养细胞线粒体脂肪酸B氧化循环LCHAD的基因蛋白表达变化存在影响;LC—FFA刺激下的胎盘滋养细胞中存在LC-FFA线粒体β-氧化代谢障碍。VLC-FFA与脂肪酸β-氧化代谢存在一定的相关性,其相互作用机制还有待进一步研究。短链、中链脂肪酸未显示对线粒体脂肪酸β-氧化代谢的影响。 展开更多
关键词 游离脂肪酸 LCHAD 脂肪酸氧化 滋养细胞
缺氧调控滋养细胞和内皮细胞sFlt-1差异表达的研究 被引量:5
16
作者 周琼 刘海意 +3 位作者 曾万江 龚洵 吴媛媛 乔福元 《现代妇产科进展》 CSCD 北大核心 2009年第11期844-846,共3页
目的:探讨缺氧条件下,人早孕绒毛滋养细胞(TEV-1)及人脐静脉内皮细胞(EVC-304)中可溶性血管内皮生长因子受体-1(sFlt-1)差异表达的特点。方法:CoCl2诱导TEV-1及EVC-304化学缺氧,并于0,6,12,24,48,72,96,120h用ELISA法... 目的:探讨缺氧条件下,人早孕绒毛滋养细胞(TEV-1)及人脐静脉内皮细胞(EVC-304)中可溶性血管内皮生长因子受体-1(sFlt-1)差异表达的特点。方法:CoCl2诱导TEV-1及EVC-304化学缺氧,并于0,6,12,24,48,72,96,120h用ELISA法分别检测上清中sFlt-1蛋白表达,RealtimeRT.PCR法检测各组sFh-1mRNA表达。结果:缺氧72h后滋养细胞sFh-1mRNA及蛋白表达随时间延长明显升高(P〈0.05),而内皮细胞sFh-1mRNA及蛋白表达差异无统计学意义(P〉0.05)。结论:正常情况下滋养细胞及脐静脉内皮细胞中均有sFh-1表达;缺氧诱导滋养细胞sFh-1表达明显增加,而内皮细胞sFlt-1表达对缺氧刺激无明显反应 展开更多
关键词 子痫前期 缺氧 SFLT-1 滋养细胞 脐静脉内皮细胞
enJSRV囊膜蛋白及其受体的瞬时表达与绵羊绒毛膜滋养层细胞融合的诱导研究 被引量:4
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作者 张宇飞 石晶 刘淑英 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期1924-1933,共10页
旨在深入研究内源性绵羊肺腺瘤病毒(enJSRV)囊膜蛋白在绵羊胎盘形成过程中的作用,本研究体外培养了蒙古绵羊绒毛膜滋养层细胞,采用RT-PCR技术扩增出enJSRV-env基因及其受体Hyal2基因全长序列,定向克隆于真核表达载体pEGFP-C1上。优化绒... 旨在深入研究内源性绵羊肺腺瘤病毒(enJSRV)囊膜蛋白在绵羊胎盘形成过程中的作用,本研究体外培养了蒙古绵羊绒毛膜滋养层细胞,采用RT-PCR技术扩增出enJSRV-env基因及其受体Hyal2基因全长序列,定向克隆于真核表达载体pEGFP-C1上。优化绒毛膜滋养层细胞电转染条件和测定电转效率。将构建好的真核表达质粒分别电转染到绒毛膜滋养层细胞中,在荧光显微镜下观察enJSRV囊膜蛋白及其受体Hyal2的瞬时表达情况。并研究高表达enJSRV-env基因及通过RNA干扰沉默enJSRV-env基因对绒毛膜滋养层细胞的细胞融合活性的影响。结果显示,真核表达质粒构建成功,分别命名为pEGFP-C1/enJSRV-env及pEGFP-C1/Hyal2。研究表明,绵羊绒毛膜滋养层细胞最佳电转染条件为脉冲电压150 V,脉冲时间5.0 ms,电击2次,间隔50 ms。转染pEGFP-C1/enJSRV-env质粒及pEGFP-C1/enJSRV-env与pEGFP-C1/Hyal2共转染的绵羊绒毛膜滋养层细胞中多核细胞数目明显增加,平均每个视野分别可以观察到1.8和2.3个多核细胞。说明enJSRV-env对绒毛膜滋养层细胞的细胞融合有一定的促进作用。本研究为进一步探究enJSRV囊膜蛋白的结构和功能及绒毛膜滋养层细胞融合机理提供试验基础。 展开更多
关键词 内源性绵羊肺腺瘤病毒 内源性逆转录病毒 囊膜蛋白 绒毛膜滋养层细胞 细胞融合
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颗粒蛋白前体通过调控滋养层细胞的侵袭和凋亡影响子痫前期发病
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作者 吴秋雨 郇金亮 《第三军医大学学报》 CSCD 北大核心 2018年第20期1858-1864,共7页
目的 研究颗粒蛋白前体(progranulin,PGRN)对滋养层细胞侵袭、凋亡的影响,并探讨其在子痫前期发病机制中的作用。方法 取子痫前期患者胎盘组织,测定其中PGRN mRNA和蛋白表达。选择子痫前期的3种滋养层细胞系JEG-3、BeWo、JAR以及... 目的 研究颗粒蛋白前体(progranulin,PGRN)对滋养层细胞侵袭、凋亡的影响,并探讨其在子痫前期发病机制中的作用。方法 取子痫前期患者胎盘组织,测定其中PGRN mRNA和蛋白表达。选择子痫前期的3种滋养层细胞系JEG-3、BeWo、JAR以及人原代培养的滋养层细胞,通过定量聚合酶链反应(quantitative polymerase chain reaction,qPCR)和蛋白质免疫印迹(Western blot)实验确定PGRN在其中的表达情况。利用小干扰RNA(small interfering RNA, siRNA)干扰和过表达该细胞系中的PGRN,用qPCR、Western blot实验确定干扰或过表达有效后,分别通过Transwell侵袭实验和流式细胞术测定PGRN差异表达对滋养层细胞侵袭和凋亡的影响,同时在分子水平测定侵袭相关蛋白基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase, MMP)-2、9和凋亡蛋白Caspase-3的表达及活性。结果子痫前期患者胎盘组织中PGRN在mRNA和蛋白水平的表达都显著高于正常组(P〈0.05)。JEG-3、BeWo、JAR细胞系中的PGRN蛋白水平显著高于原代滋养层细胞(P〈0.05)。在BeWo滋养层细胞中,干扰PGRN表达后,其侵袭能力减弱(P〈0.05),凋亡增加(P〈0.01)。分子水平上,MMP-2、MMP-9活性减弱(P〈0.05),Caspase3裂解量增加(P〈0.01)。而过表达PGRN后,BeWo细胞侵袭能力(P〈0.05)和抗凋亡能力(P〈0.01)增加。结论 PGRN能够促进滋养层细胞侵袭和抑制细胞凋亡,通过上调PGRN可能减少子痫前期的发生和发展。 展开更多
关键词 子痫前期 滋养层细胞 侵袭 凋亡 颗粒蛋白前体
胰岛素对滋养层细胞凋亡的调节作用及机制 被引量:1
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作者 于月成 辛晓燕 +3 位作者 张峰 马向东 王德堂 郭惠玲 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期 496-498,共3页
目的:探讨胰岛素对培养的滋养细胞凋亡的影响及可能的机制. 方法:将培养的妊娠早期滋养层细胞,分为正常对照组(细胞+培养液)、H2O2组(细胞+培养液+H2O2)和胰岛素+H2O2组(细胞+H2O2+胰岛素).采用透射电镜观察及流式细胞术,观察H2O2诱导... 目的:探讨胰岛素对培养的滋养细胞凋亡的影响及可能的机制. 方法:将培养的妊娠早期滋养层细胞,分为正常对照组(细胞+培养液)、H2O2组(细胞+培养液+H2O2)和胰岛素+H2O2组(细胞+H2O2+胰岛素).采用透射电镜观察及流式细胞术,观察H2O2诱导的细胞凋亡及胰岛素对H2O2诱导的细胞凋亡的抑制作用.并检测胰岛素对滋养细胞caspase-3的活性及Bcl-2蛋白表达的影响.结果:H2O2可诱导培养的滋养细胞凋亡,透射电镜下可见特征性的细胞核改变.胰岛素可显著抑制H2O2诱导的细胞凋亡,流式细胞仪检测其凋亡率较H2O2组显著下降(P<0.01).H2O2组滋养细胞中caspase-3的活性较对照组显著增高(P<0.01),而Bcl-2蛋白的表达则较对照组显著下降(P<0.01).结论:胰岛素可明显抑制H2O2诱导的滋养细胞凋亡,其机制可能与降低caspase-3的活性和促进Bcl-2蛋白的表达有关. 展开更多
关键词 滋养细胞 胰岛素 细胞凋亡 半胱天冬酶-3 BCL-2 调节作用
ABCG2在自然流产胎盘滋养层细胞中表达及其机制研究
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作者 聂明朝 王小花 +1 位作者 叶文娇 李嫦虹 《中国妇产科临床杂志》 CSCD 北大核心 2018年第6期532-536,共5页
目的探讨三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2抗体(ABCG2)在人工/自然流产胎盘滋养层细胞中表达差异及其与PI3K/Akt通路的关系。方法将正常妊娠人工流产(对照组,n=65)及早期自然流产妇女(自然流产组,n=78)胎盘绒毛滋养层细胞经原... 目的探讨三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2抗体(ABCG2)在人工/自然流产胎盘滋养层细胞中表达差异及其与PI3K/Akt通路的关系。方法将正常妊娠人工流产(对照组,n=65)及早期自然流产妇女(自然流产组,n=78)胎盘绒毛滋养层细胞经原代培养后,采用MTT法检测两组细胞增殖情况,原位缺口末端标记技术检测凋亡情况,蛋白印迹法检测PI3K/Akt通路蛋白表达。结果对照组24 h、48 h、72 h细胞增殖活力显著高于自然流产组(P均〈0.05)。自然流产组48 h后G0/G1期细胞分布率显著高于对照组(P 〈0.05),而S期细胞分布率显著低于对照组(t=5.027,P 〈0.05)。细胞培养24、48 h后,自然流产组ABCG2 mRNA相对表达量(1.023±0.149,1.289±0.176)均显著低于对照组(0.419±0.041,0.614±0.064)(P 〈0.05);细胞培养24、48 h后,自然流产组滋养层细胞凋亡指数(0.188±0.027,0.307±0.032)显著大于对照组(0.311±0.036,0.605±0.050)(P 〈0.05);细胞培养24 h、48 h后,自然流产组ABCG2、p-PI3K及p-Akt相对表达量均显著低于对照组(P均〈0.05),而Caspase-3相对表达量显著高于对照组(P均〈0.05)。结论早期自然流产患者出现滋养层细胞凋亡及ABCG2低表达,可能与PI3K/Akt-Caspase-3信号通路被抑制有关。 展开更多
关键词 三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2抗体2 自然流产 滋养层细胞 细胞凋亡 信号通路
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