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我国蓝舌病病毒血清24型毒株的分离与遗传特征分析
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作者 杨恒 王金萍 +8 位作者 李乐 肖雷 孟锦昕 寇美玲 廖德芳 何于雯 高林 李占鸿 李华春 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期31-37,共7页
掌握云南省蓝舌病病毒(BTV)的活动情况与流行毒株的遗传特征。2012—2015年,在云南省的师宗县、江城县与芒市分别设立3个监控点,进行BTV的分离。自监控动物采集的BTV核酸阳性血液通过'鸡胚-C6/36细胞-BHK细胞'接种的方式进行病... 掌握云南省蓝舌病病毒(BTV)的活动情况与流行毒株的遗传特征。2012—2015年,在云南省的师宗县、江城县与芒市分别设立3个监控点,进行BTV的分离。自监控动物采集的BTV核酸阳性血液通过'鸡胚-C6/36细胞-BHK细胞'接种的方式进行病毒分离;采用RT-PCR与中和试验进行分离病毒的血清型鉴定;设计特异性引物对分离病毒的Seg-2、Seg-3、Seg-7与Seg-6基因节段进行RT-PCR扩增与克隆测序。2012—2015年,从云南省的师宗县、江城县与芒市分别分离获得3株BTV-24型毒株。分离病毒的Seg-2、Seg-3、Seg-7与Seg-6序列系统发育分析显示:我国毒株的Seg-2与BTV-24型参考毒株聚为一簇,而Seg-6与BTV-10型毒株聚为一簇;我国毒株的Seg-3在系统发生树上划分为'东方型'地域型,Seg-7在系统发生树上形成一个独立于其他地域型的分支。本试验报道了我国BTV-24型毒株的分离与Seg-2、Seg-3、Seg-6与Seg-7序列特征,结果表明,我国BTV-24型毒株的Seg-6基因节段与BTV-10型毒株发生了基因重配;Seg-7具有独特的遗传特征,形成了一个新的Seg-7地域型,暂定为'Chinese topotype'。本试验为进一步开展BTV-24型的流行病学、感染特性与疫苗的研究奠定基础。 展开更多
关键词 蓝舌病病毒 蓝舌病病毒血清24型 病毒分离 基因重配 地域型
一株牛副流感病毒3型的分离鉴定及系统进化树分析
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作者 崔一龙 杨达汉 +3 位作者 石芸 尹有勤 薛江东 马德慧 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2019年第1期25-28,共4页
目的分离鉴定一株疑似为牛副流感病毒3型(bovine parainfluenza virus type 3,BPIV3)的毒株,并分析系统进化树。方法从内蒙古某牛场患有呼吸道疾病的病牛鼻液中分离一株疑似为BPIV3的毒株,将分离毒株在MDBK细胞上进行增殖,并通过血凝试... 目的分离鉴定一株疑似为牛副流感病毒3型(bovine parainfluenza virus type 3,BPIV3)的毒株,并分析系统进化树。方法从内蒙古某牛场患有呼吸道疾病的病牛鼻液中分离一株疑似为BPIV3的毒株,将分离毒株在MDBK细胞上进行增殖,并通过血凝试验及RT-PCR鉴定,同时对其N基因序列进行测定及分析,建立亲缘关系进化树。结果该分离病毒可在MDBK细胞上增殖,且可产生特异性细胞病变,第6代细胞的毒力为10^7.1 TCID50/100μL,与GenBank中已发表的BPIV3毒株N基因片段的同源性为99.9%,与序列号为D84095.1的BPIV3等亲缘性最近。结论本研究获得的分离株为BPIV3,与日本分离株(D84095.1)同源性较高。 展开更多
关键词 牛副流感病毒3型 病毒分离 血凝试验 RT-PCR 系统进化树
Exosomes Released from Rabies Virus-Infected Cells May be Involved in the Infection Process
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作者 Jingyu Wang Fan Wu +8 位作者 Chuntian Liu Wenwen Dai Yawei Teng Weiheng Su Wei Kong Feng Gao Linjun Cai Ali Hou Chunlai Jiang 《中国病毒学:英文版》 CAS CSCD 2019年第1期59-65,共7页
Exosomes are cell-derived vesicles that are secreted by many eukaryotic cells. It has recently attracted attention as vehicles of intercellular communication. Virus-infected cells release exosomes, which contain viral... Exosomes are cell-derived vesicles that are secreted by many eukaryotic cells. It has recently attracted attention as vehicles of intercellular communication. Virus-infected cells release exosomes, which contain viral proteins, RNA, and pathogenic molecules. However, the role of exosomes in virus infection process remains unclear and needs to be further investigated.In this study, we aimed to evaluate the effects of exosomes on rabies virus infection. OptiPrepTM density gradient centrifugation was used to isolate exosomes from rabies virus-infected cell culture supernatants. A rabies virus G protein enzyme-linked immunosorbent assay and acetylcholinesterase activity assays were performed to verify the centrifugation fractions. Exosomes were then characterized using transmission electron microscopy and Western blotting. Our results showed that rabies virus infection increased the release of exosomes. Treatment with GW4869 and si-Rab27 a, two exosomal secretion inhibitors, inhibited exosome release. Furthermore, the inhibitors reduced the levels of extracellular and intracellular viral RNA. These data indicated that exosomes may participate in the viral infection process. Moreover, our results establish a basis for future research into the roles of exosomes in rabies virus infection and as potential targets for developing new antiviral strategies. 展开更多
关键词 EXOSOMES RABIES VIRUS ISOLATION VIRUS infection
进口白羽肉种鸡禽白血病疫情鉴定 预览 被引量:1
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作者 马美哥 于蒙蒙 +13 位作者 许传田 黄庆华 孟照洁 王素艳 邢立晓 常芳芳 李猷 何希君 刘长军 祁小乐 王永强 孙延鸣 王笑梅 高玉龙 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期526-529,共4页
2018年以来,某进口品种肉种鸡发生疑似禽白血病病例,流行范围广,危害严重,为确定该次疫情的病原,本研究从辽宁、山东等地发病鸡场采集55份疑似禽白血病病料样品。病理组织切片观察显示,病料样品肝脏和脾脏均有髓细胞样肿瘤细胞增生。针... 2018年以来,某进口品种肉种鸡发生疑似禽白血病病例,流行范围广,危害严重,为确定该次疫情的病原,本研究从辽宁、山东等地发病鸡场采集55份疑似禽白血病病料样品。病理组织切片观察显示,病料样品肝脏和脾脏均有髓细胞样肿瘤细胞增生。针对禽白血病病毒(ALV)、鸡马立克氏病病毒(MDV)和网状内皮组织增生症病毒(REV)的特异性PCR检测结果显示,55份病料样品中ALV阳性样品12份(21.8%),MDV阳性样品1份(1.82%),REV均为阴性。将12份ALV阳性病料样品经处理后接种DF-1细胞进行病毒分离,ELISA检测结果显示有8份ALV群特异性抗原阳性。ALV多重PCR检测结果表明,8个分离株均为J亚群ALV(ALV-J),测序结果显示,8个分离株之间核苷酸序列同源性为99.5%~100%,与A、B、C、D、E亚群ALV的同源性仅为56.5%~58.8%,与ALV-J的同源性为90.7%~96.6%,进一步表明所有分离株均为ALV-J。上述结果表明,引起该次进口白羽父母代肉种鸡发生禽白血病的病原主要以ALV-J为主,该研究结果为疫情的溯源和有效防控奠定了基础。 展开更多
关键词 进口白羽肉种鸡 禽白血病 J亚群禽白血病病毒 病毒分离
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上海市定点监测猪群伪狂犬病病原学调查与病毒分离鉴定 预览
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作者 鞠厚斌 杨德全 +7 位作者 葛菲菲 刘健 李鑫 杨显超 齐新永 邓波 王建 周锦萍 《中国动物检疫》 CAS 2019年第4期9-13,共5页
为了解上海市定点监测猪群伪狂犬病病毒(PRV)感染情况,对2014-2015年来自兽医疾病诊断中心、种猪场、屠宰场和规模场的1 863份样品进行PRV荧光定量PCR检测。结果显示,共检出48份PRV核酸阳性,总阳性率为2.6%(48/1 863),其中2014年为4.3%(... 为了解上海市定点监测猪群伪狂犬病病毒(PRV)感染情况,对2014-2015年来自兽医疾病诊断中心、种猪场、屠宰场和规模场的1 863份样品进行PRV荧光定量PCR检测。结果显示,共检出48份PRV核酸阳性,总阳性率为2.6%(48/1 863),其中2014年为4.3%(39/898),2015年为0.9%(9/965),呈现大幅下降趋势,表明上海市通过加强PR免疫,淘汰散养和中小型养殖场,加强种猪场PR净化等措施,使本市猪群的PRV感染得到了有效控制。对部分阳性样品用BHK-21细胞进行PRV分离鉴定,共获得12株病毒,并对其中1株毒株进行了病毒毒价测定,获得了稳定的毒价,这为下一步的动物试验奠定了良好基础。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病 病原学调查 病毒分离 毒价测定
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流感病毒检测方法研究进展
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作者 朱汝南 钱渊 《中华实用儿科临床杂志》 CSCD 北大核心 2019年第2期102-106,共5页
流感是人类呼吸道感染中常见且流行范围最广的疾病之一。流感不仅对易感和高危人群造成严重威胁,同时也对公共卫生造成重要影响。流感病毒感染的快速、准确诊断对于及时给予特异的抗病毒治疗、有效控制疫情、降低季节性流行和大流行期... 流感是人类呼吸道感染中常见且流行范围最广的疾病之一。流感不仅对易感和高危人群造成严重威胁,同时也对公共卫生造成重要影响。流感病毒感染的快速、准确诊断对于及时给予特异的抗病毒治疗、有效控制疫情、降低季节性流行和大流行期间与流感病毒感染有关的发病率和病死率至关重要。现对目前可用于人类流感病毒感染的诊断方法(包括病毒分离、抗原检测、核酸扩增等)及为了克服一些传统检测方法的局限性而正在研发的新的诊断方法进行综述,以供临床医师参考。 展开更多
关键词 流感病毒 诊断 病毒分离 抗原检测 核酸扩增 快速诊断
蓝舌病病毒血清9型毒株在我国的首次分离 预览
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作者 李占鸿 王金萍 +5 位作者 杨恒 廖德芳 宋建领 高林 何于雯 李华春 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期354-363,共10页
旨在分离流行于我国云南省的蓝舌病病毒(BTV),掌握分离BTV的遗传特征与感染特性。采用"鸡胚-C6/36细胞-BHK-21细胞"接种的方式,采集哨兵牛的BTV阳性血液进行病毒分离;采用血清中和试验以及Segment2与Segment6ORF区的克隆测序... 旨在分离流行于我国云南省的蓝舌病病毒(BTV),掌握分离BTV的遗传特征与感染特性。采用"鸡胚-C6/36细胞-BHK-21细胞"接种的方式,采集哨兵牛的BTV阳性血液进行病毒分离;采用血清中和试验以及Segment2与Segment6ORF区的克隆测序确定分离病毒的血清型;通过病毒噬斑形成和增殖曲线的测定,分析病毒在BHK-21细胞的增殖特性;通过qRT-PCR与血清中和试验分析BTV感染动物血液中病毒含量与中和抗体动态变化情况。结果显示:2013年8月,在云南芒市设定的哨兵牛中分离出一株BTV(毒株号V013/YN/2013),血清中和试验显示V013/YN/2013为BTV-9型病毒,Segment2与Segment6序列分析表明分离的病毒属BTV-9Eastern型,与日本毒株和澳大利亚BTV-9型毒株具有最近的亲缘关系。病毒噬斑与增殖曲线测定结果显示V013/YN/2013在BHK-21细胞上增殖能力明显强于BTV-9型参考毒株。自然感染V013/YN/2013的牛在连续5个月的监控期内未出现临床症状,感染动物虽产生了特异性中和抗体,但血液中始终能持续检测到病毒核酸。本研究首次报道了BTV-9Eastern型毒株V013/YN/2013在我国的分离,为进一步开展中国BTV-9型病毒的全基因组测序、诊断方法的建立、流行病学调查与致病性研究奠定了基础。 展开更多
关键词 蓝舌病病毒 病毒分离 血清型 序列分析 感染特性
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Clinical and Epidemiological Evolution of Sheep Pox in Morocco 预览
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作者 Sara Lafar Khalil Zro +4 位作者 Andy Haegeman Mounir Khayli Kris De Clercq Renaud Lancelot My Mustapha Ennaji 《农业科学与技术:A》 2019年第2期103-113,共11页
Sheep pox is an infectious viral disease that affects specifically sheep and it is caused by the Capripoxvirus genus.The clinical signs include fever,diarrhea,difficulty breathing,nodules,lung lesions and death.In Mor... Sheep pox is an infectious viral disease that affects specifically sheep and it is caused by the Capripoxvirus genus.The clinical signs include fever,diarrhea,difficulty breathing,nodules,lung lesions and death.In Morocco,the 2010 epidemic of sheep pox was characterized by the emergence of a nodular form of the disease.The local strain was isolated and the analysis of affected animals was positively confirmed by virus isolation and real-time polymerase chain reaction(RT-PCR).The epidemiological analysis of 911 data records showed that the virus is endemic in the country;an average of 350 cases per year with an epizootic evolution was observed in 2010.The incidence varies depending on provinces and the disease appears confined to the central and the eastern regions of the country where a very intensive sheep breeding activity is taking place.The statistical analysis showed that there is a positive correlation between the endemicity and the significant factor of the rural market(p=0.006).The annual average morbidity and mortality rates were 2.96%(1.26%to 4.32%)and 0.71%(0.41%to 0.94%),respectively.The clinical findings associated to the epidemiological data analysis confirmed the presence of sheep pox in its nodular form and suggest that new pathogenic strains may have been introduced from Mauritania.The purpose of this work was to provide a better description of the spatiotemporal evolution of sheep pox disease based on some epidemiological indicators and to put forward plausible hypotheses regarding the emergence of the virus in order to implement an adequate control strategy. 展开更多
关键词 SHEEP pox Capripoxvirus EPIDEMIOLOGY CLINICAL SIGNS virus ISOLATION RT-PCR
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乌鲁木齐市手足口病病毒分离技术的研究 被引量:1
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作者 相然 樊旭成 +4 位作者 韩志国 薛娜 蒲玉娇 杨建东 芮宝玲 《医学动物防制》 2019年第1期1-4,共4页
目的探索乌鲁木齐市手足口病病毒分离培养的最适细胞系和最优培养条件,为手足口病的防治提供技术支持。方法采集适当的临床标本,对标本进行核酸提取和鉴定,根据不同的手足口病病毒分离方法,随机选取相应的阳性标本接种于横纹肌肉瘤传代... 目的探索乌鲁木齐市手足口病病毒分离培养的最适细胞系和最优培养条件,为手足口病的防治提供技术支持。方法采集适当的临床标本,对标本进行核酸提取和鉴定,根据不同的手足口病病毒分离方法,随机选取相应的阳性标本接种于横纹肌肉瘤传代细胞(RD),观察结细胞病变效应(CPE),有4+病变的培养液进行RT-PCR鉴定其效果。结果 2013-2015年共检测手足口病病例标本2 267份,肠道病毒总阳性率为79.31%,在病原体进行病毒分离时最佳细胞系是RD细胞,最优培养温度条件是35℃,血清浓度为2%,接种量为300μl,接种方式为直接接种,样本采集以粪便标本最佳。结论合理的细胞系和培养条件可以明显提高病毒的分离培养效率。 展开更多
关键词 手足口病 病毒分离 病原学 流行病学
猪伪狂犬病病毒MQ18变异株的分离鉴定
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作者 曾显成 池雪林 +4 位作者 潘启东 陈珍珍 林琳 修金生 江斌 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期1025-1033,共9页
为了解福建省猪伪狂犬病病毒(PRV)野毒株的病原学特性及分子遗传变异情况,本研究用羊胚胎鼻甲细胞(OFTu)从疑似暴发伪狂犬病猪场死亡的育肥猪中分离到1株病毒,该病毒能够产生典型的PRV细胞病变,病毒液接种小鼠(0.1 mL/只)及成年兔(0.5 ... 为了解福建省猪伪狂犬病病毒(PRV)野毒株的病原学特性及分子遗传变异情况,本研究用羊胚胎鼻甲细胞(OFTu)从疑似暴发伪狂犬病猪场死亡的育肥猪中分离到1株病毒,该病毒能够产生典型的PRV细胞病变,病毒液接种小鼠(0.1 mL/只)及成年兔(0.5 mL/只)在48~60 h死亡,均表现出典型的伪狂犬病症状。经PCR试验、电镜观察及特异性血清间接免疫荧光试验鉴定为伪狂犬病病毒,命名为MQ18株;并对其进行病毒效价的测定及gC、gE基因核苷酸和氨基酸序列差异性分析。结果显示,分离株TCID50为10-7.71/0.1 mL;将其gC和gE基因序列与国内外17个PRV参考毒株进行同源性比较,核苷酸序列同源性分别为93.5%~99.9%和97.8%~100%,氨基酸序列同源性分别为88.7%~99.8%和95.7%~100%;分子遗传进化树分析显示,gC和gE基因均与国内近6年分离的PRV变异株集聚在一起,属于同一个进化分支;与经典株相比,gC基因编码的氨基酸序列在第63~69位有1个AAASTPA的连续7个氨基酸插入,gE基因编码的氨基酸序列分别在第48位和第496位有1个天冬氨酸(D)的插入,与PRV变异株变异位点相一致。以上结果证实,从发病猪群中分离到1株PRV变异株,本研究结果为选择合适疫苗来防控猪伪狂犬病以及病原学研究提供了参考。 展开更多
关键词 伪狂犬病病毒 变异 分离鉴定 序列分析
山东省某地区牛、羊肠道病毒感染的流行病学调查
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作者 李欣 胡俊英 +5 位作者 林倩 王旭 郑博伟 张泽财 胡莉萍 王新平 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期223-227,共5页
牛、羊肠道病毒感染为国内新近报道的动物传染病,其流行病学本底在国内缺乏。为了解牛、羊肠道病毒感染的情况,本研究应用双抗体夹心ELISA方法对采集于山东省某地区的奶牛、肉牛、绵羊和山羊粪便样品进行了肠道病毒的检测。同时对ELISA... 牛、羊肠道病毒感染为国内新近报道的动物传染病,其流行病学本底在国内缺乏。为了解牛、羊肠道病毒感染的情况,本研究应用双抗体夹心ELISA方法对采集于山东省某地区的奶牛、肉牛、绵羊和山羊粪便样品进行了肠道病毒的检测。同时对ELISA检测为阳性的部分样品进行了病毒分离,并以免疫过氧化物酶单层试验对分离毒株进行了鉴定。结果发现,奶牛的肠道病毒感染率为25.0%,肉牛群的感染率为7.6%,绵羊的肠道病毒感染率58.6%,山羊的肠道病毒感染率为48.5%,该结果为肠道病毒感染的防制提供流行病学的理论依据。 展开更多
关键词 牛肠道病毒 羊肠道病毒 流行病学调查 病毒分离 免疫过氧化物酶单层试验
图们江流域中朝俄边境地区长角血蜱中SFTS病毒监测分析
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作者 李基旭 SHIN-Hyeong Cho +4 位作者 朴文 金光俊 宋振海 全圣焕 朴光明 《中华疾病控制杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期201-205,共5页
目的 掌握图们江流域中朝俄边境地区长角血蜱分布特征,了解该地区长角血蜱携带发热伴血小板减少综合征(severe fever with thrombocytopenia syndrome,SFTS)病毒情况,分离病毒,分析其基因特征。方法 2017年4月~9月,在吉林省图们江流域... 目的 掌握图们江流域中朝俄边境地区长角血蜱分布特征,了解该地区长角血蜱携带发热伴血小板减少综合征(severe fever with thrombocytopenia syndrome,SFTS)病毒情况,分离病毒,分析其基因特征。方法 2017年4月~9月,在吉林省图们江流域中朝俄边境地区珲春市、图们市、和龙市、龙井市采集蜱虫进行形态学分类,选择新鲜长角血蜱对其进行分组,采用实时荧光定量多聚核苷酸链式反应方法检测SFTS病毒。对阳性样品,利用绿猴肾细胞进行病毒分离,并扩增S、M、L基因片段,比对同源性,建立系统进化树,分析其基因特征。结果 长角血蜱主要分布在图们江下游珲春市和图们市,为该两县优势种,分别达到71. 85%和87. 62%。在珲春市长角血蜱中分离到一株病毒,命名为YBHC-TICK2-2017/CHINA。该病毒S片段(1 746 bp)、M片段(3 336bp)、L片段(6 376 bp)基因序列与美国国家生物技术信息中心(National Center for Biotechnology Information,NCBI) DNA序列数据库中记录的中国和韩国SFTS病毒分离株基因序列同源性为98. 00%~99. 00%。系统进化树分析,该病毒株S片段基因序列与中国吉林株(KT890282)分为一簇,M片段和L片段基因序列与中国江苏株(KR230781)分为一簇。结论 长角血蜱在图们江下游中朝俄边境地区具有广泛的分布。该研究首次在该地区长角血蜱中分离到SFTS病毒,提示该地区为SFTS防控重点区域。 展开更多
关键词 SFTS 病毒分离 传播媒介 长角血蜱
马鞍山市2016-2017年流感病原学监测结果分析
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作者 张云霞 江良梁 赵志荣 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2019年第2期194-198,共5页
目的分析2016-2017马鞍山市流感病毒病原学监测结果,为流感防制提供科学依据。方法收集、分析马鞍山市2016-2017年流感样病例(influenza-like illness,ILI)监测数据,同时采集部分ILI咽拭子标本,采用RT-PCR法检测流感病毒核酸,对病原学... 目的分析2016-2017马鞍山市流感病毒病原学监测结果,为流感防制提供科学依据。方法收集、分析马鞍山市2016-2017年流感样病例(influenza-like illness,ILI)监测数据,同时采集部分ILI咽拭子标本,采用RT-PCR法检测流感病毒核酸,对病原学检测数据进行统计分析。结果 2016年共检测ILI咽拭子标本2 772份,流感病毒核酸检测阳性383例,总阳性率为13.82%。其中新甲型H1N1亚型59例(占15.40%),H3N2亚型111例(占28.98%),B-Yamagata亚型11例(占2.87%),B-Victoria亚型202例(占52.74%);2017年共检测ILI咽拭子标本2 170份,流感病毒核酸检测阳性614例,总阳性率为28.29%,其中新甲型H1N1亚型38例(占52.74%),H3N2亚型309例(占50.33%),B-Yamagata亚型178例(占28.99%),B-Victoria亚型89例(占14.50%)。不同月份阳性检出率比较差异有统计学意义(年X20162=450.876,X20172=240.002,P均<0.05)。核酸检测阳性率性别差异无统计学意义(X20162=0.171,X20172=0.174,P均>0.05)。不同年龄组间阳性率比较差异有统计学(X20162=160.030,X20172=132.901,P均<0.05)。2016、2017年MDCK细胞培养法分离流感病毒221株和98株,分离率分别为57.70%和15.96%;2016、2017年鸡胚培养法分离流感病毒26株和8株,分离率分别为6.79%和1.30%。两种方法比较有统计学差异(X2=74.815,P<0.05)。结论 2016年马鞍山市流感呈现冬春季两个发病高峰,主要流行株为B-Victoria型;2017年出现夏、冬、春季3个发病高峰,主要流行株为H3N2型。流行株发病高峰的变化可为当地流感防控提供参考,流感监测应进一步加强。 展开更多
关键词 流感病毒 亚型 分离培养 监测
A型塞内卡病毒CH-HNXC株的分离鉴定及其致病性研究 预览 被引量:1
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作者 胡东波 李雪锋 +2 位作者 晋春霞 刘栓 孙哲 《动物医学进展》 北大核心 2019年第8期18-23,共6页
自2007年A型塞内卡病毒(SVA)在猪体内被发现以来,给全球养猪业造成了严重的经济损失,SVA感染的典型症状包括猪口鼻部囊泡的形成及破裂,以及蹄部冠状带水疱引起的跛行。用RT-PCR从河南某猪场具有水疱样病变的猪水疱皮或水疱液中检测到了... 自2007年A型塞内卡病毒(SVA)在猪体内被发现以来,给全球养猪业造成了严重的经济损失,SVA感染的典型症状包括猪口鼻部囊泡的形成及破裂,以及蹄部冠状带水疱引起的跛行。用RT-PCR从河南某猪场具有水疱样病变的猪水疱皮或水疱液中检测到了SVA的特异性核酸片段,并通过IBRS-2细胞进行SVA的分离和传代,将分离得到的SVA命名为CH-HNXC,扩增和测定了VP1基因序列后分析发现,分离株CH-HNXC与之前报道的2017年河南和福建分离株位于较近的进化分支中,与加拿大和泰国分离株亲缘关系较远,表明SVA流行和进化中由相近时间点和较近地理位置带来高的同源性;分离株攻毒猪鼻吻部和蹄部可见水疱和溃烂、跛行等,表明本分离株能引起SVA所致的典型临床症状,为SVA在国内的流行提供了新的证据,为进一步研究SVA的致病机制、开发诊断试剂和疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 A型塞内卡病毒 病毒分离 序列分析 致病性试验
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猪伪狂犬病病毒变异株GD株的分离鉴定及TK和gE基因的进化分析 预览
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作者 邹伟斌 赖月辉 +2 位作者 牛贝贝 吴文福 齐冬梅 《现代畜牧兽医》 2019年第10期8-15,共8页
为了解猪伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)流行变异毒株的病原学特性及分子遗传变异特点,本研究从广东省某疑似暴发猪伪狂犬病的猪场采集的病料中分离到一株PRV毒株,命名为GD株.该病毒在PK-15细胞中能够产生典型的PRV细胞病变,病... 为了解猪伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)流行变异毒株的病原学特性及分子遗传变异特点,本研究从广东省某疑似暴发猪伪狂犬病的猪场采集的病料中分离到一株PRV毒株,命名为GD株.该病毒在PK-15细胞中能够产生典型的PRV细胞病变,病毒滴度可达109.0 TCID50/mL.将病毒感染KM SPF小鼠,接种小鼠在4 d内全部死亡,并且均出现典型的PR症状.序列比对结果显示,PRV GD株的TK和gE基因与国内外PRV参考株的核苷酸同源性分别为99.4%~100%和97.6~99.9%,氨基酸同源性分别为99.4%~100%和95.5%~99.8%.基于gE基因的遗传进化分析发现,PRV GD株与国内近几年分离鉴定的流行变异毒株位于同一分支上.与经典株相比,PRV GD株的gE蛋白氨基酸序列在48和496位均有1个天冬氨酸(D)的插入,符合PRV变异株的典型特征.本研究成功分离到一株PRV变异株,为PRV流行变异毒株的防控和新型疫苗的研究提供一定的科学依据. 展开更多
关键词 猪伪狂犬病病毒 变异毒株 分离 鉴定 进化分析
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四川省猪源盖塔病毒的分离鉴定及遗传进化分析 预览
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作者 江朝源 李飞 +7 位作者 曾喻兵 彭珂楠 张儒博 杜佩珊 冯宇 殷鑫欢 朱玲 徐志文 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期805-814,共10页
目的对检测到的疑似盖塔病毒进行分离鉴定和全基因序列遗传进化分析。方法从四川某猪场1例混合感染猪繁殖与呼吸综合征的仔猪血液中,进行RT-RCR检测,检测到GETV阳性。对样品进行无菌处理后,接种至BHK21细胞,连续传代培养,通过细胞病变... 目的对检测到的疑似盖塔病毒进行分离鉴定和全基因序列遗传进化分析。方法从四川某猪场1例混合感染猪繁殖与呼吸综合征的仔猪血液中,进行RT-RCR检测,检测到GETV阳性。对样品进行无菌处理后,接种至BHK21细胞,连续传代培养,通过细胞病变、蚀斑纯化、RT-RCR扩增和全基因序列测定鉴定细胞培养物。结果我们成功分离到四川首株猪盖塔病毒,并将其命名为SC201807;对该病毒全基因扩增测序并进行序列分析,发现SC201807与GenBank中上传的35株GETV序列相似性为99.0%~96.1%,E2序列高度保守仅在E310(天冬氨酸→谷氨酸)发生突变。全基因组核苷酸以及E2氨基酸序列遗传进化分析显示SC201807株与中国猪源HNJZ-S2及日本蚊源15-I-752、15-I-1105、14-I-605-C2、14-I-605-C1、12IH26亲缘关系最近,处于同一进化分支。结论SC201807株扩充了猪源GETV的感染谱,对其致病性、感染和传播机制、环境微生物学及公共卫生等相关研究提供素材。 展开更多
关键词 盖塔病毒 分离鉴定 序列分析
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蓝舌病毒14型的分离与鉴定
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作者 曹雨 张莹辉 +7 位作者 赵炜 陈新 薄宗义 姚文生 JUNG Yong-Sam 戴建君 钱莺娟 印春生 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期855-860,共6页
为了解我国新疆地区羊蓝舌病的流行情况,对某羊场疑似发生蓝舌病的羊病料进行了采集,并进行病毒分离和鉴定。应用间接ELISA试剂盒检测血清抗体,抗凝血样品接种敏感的BHK21细胞进行连续盲传,对细胞病变呈阳性的样品进行间接免疫荧光鉴定... 为了解我国新疆地区羊蓝舌病的流行情况,对某羊场疑似发生蓝舌病的羊病料进行了采集,并进行病毒分离和鉴定。应用间接ELISA试剂盒检测血清抗体,抗凝血样品接种敏感的BHK21细胞进行连续盲传,对细胞病变呈阳性的样品进行间接免疫荧光鉴定,同时针对VP7片段和VP2片段设计引物进行RT-PCR检测鉴定,并对其L2基因进行系统发育树分析。结果显示,血清中BTV抗体检测均为阳性,接种BHK21细胞后均产生了特异性细胞病变,并与FITC标记的抗BTV单抗特异性结合,针对VP7扩增出1156bp片段,针对VP2分别扩增出850bp和1581bp片段,经测序和序列分析确定为BTV-14型。结果表明,我国新疆地区存在蓝舌病毒14型,这也是我国境内首次分离到蓝舌病毒14型,为进一步防控我国蓝舌病疫情提供了科学依据。 展开更多
关键词 蓝舌病毒 14型 分离 鉴定
口疮病毒四川流行株的分离鉴定及其遗传进化分析
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作者 毛从剑 张兴民 +2 位作者 黄忍 向华 张焕容 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期871-878,共8页
为了解四川地区口疮病毒(ORFV)流行毒株的遗传变异情况,从当地4个黑山羊养殖场采集疑似ORFV感染的羔羊唇部结痂组织,通过MDBK细胞分离培养、PCR、病毒效价测定、间接免疫荧光试验等方法进行分离鉴定,并对分离毒株的保护性抗原基因B2L、... 为了解四川地区口疮病毒(ORFV)流行毒株的遗传变异情况,从当地4个黑山羊养殖场采集疑似ORFV感染的羔羊唇部结痂组织,通过MDBK细胞分离培养、PCR、病毒效价测定、间接免疫荧光试验等方法进行分离鉴定,并对分离毒株的保护性抗原基因B2L、F1L进行克隆与序列分析。结果表明,成功分离到4株ORFV,并将其分别命名为SC-LZ1、SC-LZ2、SC-PZH1、SC-PZH2。序列分析结果显示,这4株分离毒株保护性抗原基因B2L、F1L相对保守,其B2L、F1L基因编码的氨基酸序列与参考株的同源性分别为96.3%~100%和94.2%~100%。本研究为四川地区羊口疮的防制奠定了基础。 展开更多
关键词 口疮病毒 检测 分离鉴定 遗传进化分析
伪狂犬病病毒云南变异毒株的分离鉴定及gE、gD、gC、TK基因序列分析
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作者 刘宁 苏琳琳 +6 位作者 姚俊 王生奎 高林 何于雯 谢佳芮 马荣安 张以芳 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期1674-1683,共10页
2013-2016年期间,从云南陆良、富源、寻甸及西双版纳规模猪场经Bartha-K61疫苗免疫猪群中发生流产的胎儿内脏组织病料中成功分离获得4株伪狂犬病病毒流行毒株,分别命名为FY-YN-2014、LL-YN-2014、XSBN-YN-2015和XD-YN-2014株。经TCID50... 2013-2016年期间,从云南陆良、富源、寻甸及西双版纳规模猪场经Bartha-K61疫苗免疫猪群中发生流产的胎儿内脏组织病料中成功分离获得4株伪狂犬病病毒流行毒株,分别命名为FY-YN-2014、LL-YN-2014、XSBN-YN-2015和XD-YN-2014株。经TCID50测定、动物致病性试验、免疫保护试验及gE、gD、gC、TK基因序列分析,结果显示TCID50分别为10-6.083/100μL、10-5.75/100μL、10-6.583/100μL、10-6.5/100μL。采用Bartha-K61疫苗免疫过的经产母猪血清样品对XSBN-YN-2015分离毒株进行微量病毒中和试验,其结果显示gB抗体阳性、gE抗体阴性的血清样品的中和效价在1∶16~1∶32之间,用gB、gE抗体均为阳性的血清样品时,其中和效价在1∶64~1∶128之间。4株分离毒株接种昆明小白鼠、家兔2~5 d后,均出现奇痒的典型伪狂犬病临床症状。对健康非免疫断奶仔猪进行攻毒,同样出现伪狂犬病的典型发病症状,且能从脑及内脏组织中扩增出伪狂犬病病毒gE基因并成功回收分离到病毒株。在昆明小白鼠上的LD50分别是102.625 TCID50、102.875 TCID50、102.625 TCID50、102.5 TCID50。XSBN-YN-2015株在非免疫断奶仔猪(伪狂犬病病毒gE、gB抗体阴性)测得的LD50=105.33 TCID50。XSBN分离毒株对免疫2次Bartha-K61疫苗的断奶仔猪的攻击试验结果显示,被攻击仔猪均出现高热、精神萎顿、厌食等临床表现,但1周后均能耐过并逐渐康复,提示Bartha-K61疫苗株免疫猪只对当前流行的伪狂犬病病毒云南变异毒株的攻击基本能够提供100%保护。4株伪狂犬病病毒云南流行毒株与近年来国内报道的TJ、HeN1、NH1201等变异毒株的gE、gC、gD及TK基因核苷酸及氨基酸序列均高度一致,同源性高达99%~100%,均分属于同一进化树分支,不过与早期的国内毒株SC、GDSH株,国外毒株Becker、Nia-1、CL15、Kaplan、Kolchis、Hercules、NIA3及疫苗株Bartha相比,均存在一定程度的变异,也未分属于同一进化分支,因此 展开更多
关键词 伪狂犬病病毒 变异毒株 分离鉴定 gE、gD、gC、TK基因 序列分析
四株猪伪狂犬病毒株的分离鉴定与主要毒力基因分析 预览
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作者 易可可 阴文奇 +4 位作者 周远成 蒋金蓁 张白玉 李中银 颜其贵 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2019年第9期1429-1436,共8页
猪伪狂犬病毒(PRV)的流行对中国养猪业造成巨大损失,而2011年后许多已免疫PRV疫苗的猪场频繁出现gE抗体转为阳性现象,感染猪出现PRV的临床症状,并出现所谓的“流产风暴”,学者们怀疑PRV的重新流行与病毒毒力增强和基因变异有关。为了解... 猪伪狂犬病毒(PRV)的流行对中国养猪业造成巨大损失,而2011年后许多已免疫PRV疫苗的猪场频繁出现gE抗体转为阳性现象,感染猪出现PRV的临床症状,并出现所谓的“流产风暴”,学者们怀疑PRV的重新流行与病毒毒力增强和基因变异有关。为了解PRV变异情况,从各地疑似PRV阳性病料中,通过PK-15细胞分离出4个毒株,对毒株传代培养,进行TCID50与LD50测定,对主要毒力基因gB、gC、gE和TK进行扩增测序后分析,确定该4株病毒为PRV株,分别命名为FJ01株、FJ03株、YK株和MS2018株,滴度分别为10-6.63、10-7.08、10-8.10、10-7.18TCID50s·0.1mL^-1,对Balb/c小鼠的LD50分别为102.17、102.72、103.44、103.51TCID50s,可见FJ01株的毒力最强。对4个毒株的毒力基因与其他PRV毒株进行同源性比对并建立进化树,FJ01株、FJ03株、MS2018株与中国近几年流行的变异毒株如HNX株、HNB株、JS-2012株等在一个大进化分支上,亲缘性较近,而与疫苗株Bartha-K61、SA215等,国际经典毒株Becker、Kaplan等亲缘性较远,变异较大。YK株与国际毒株亲缘性更近,其原因有待进一步探索。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病毒 分离鉴定 毒力基因 序列分析
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