期刊文献+
共找到1篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
猪C型凝集素受体8A骆驼单域抗体酵母展示文库的构建
1
作者 魏国燕 李坤 +11 位作者 卢曾军 刘在新 孙普 白兴文 李冬 陈应理 包慧芳 李平花 付元芳 张婧 马雪青 曹轶梅 《中国兽医学报》 CSCD 北大核心 2018年第1期177-182,共6页
为构建猪C型凝集素受体8A(C-type lectin domain family 8,member A,CLEC8A)的单域抗体酵母展示文库,本文首先克隆出了猪CLEC8A基因编码区序列。通过SMART软件分析,鉴定出该受体胞外区基因序列,并插入原核表达载体pET28a(+)... 为构建猪C型凝集素受体8A(C-type lectin domain family 8,member A,CLEC8A)的单域抗体酵母展示文库,本文首先克隆出了猪CLEC8A基因编码区序列。通过SMART软件分析,鉴定出该受体胞外区基因序列,并插入原核表达载体pET28a(+),在大肠杆菌BL21(DE3)中成功表达出了猪CLEC8A胞外区蛋白。表达的蛋白经201佐剂乳化后免疫双峰驼,间接ELISA监测抗体滴度,于六免后15d分离骆驼外周血淋巴细胞。提取总RNA,反转录成cDNA后经巢式PCR扩增获得骆驼WfH基因。纯化的VHH片段与线性化的pCTCON2载体混合后共转入酿酒酵母感受态细胞(EBY100),经细胞内同源重组,成功制备了针对猪CLEC8A受体的骆驼单域抗体酵母展示文库。经菌落计数及测序鉴定结果表明,文库大小约为1.6×10 7,文库重组率达90%,文库多样性丰富。流式细胞术初步鉴定酵母细胞表面成功展示出抗猪CLE8A的单域抗体,为后续文库筛选奠定基础。 展开更多
关键词 猪CLEC8A基因 骆驼单域抗体 酵母展示文库 流式细胞术
上一页 1 下一页 到第
使用帮助 返回顶部 意见反馈