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朱砂叶螨烟碱型乙酰胆碱受体α4亚基基因的克隆与序列特征分析 预览
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作者 高品 王帅 +2 位作者 管学琼 卜春亚 师光禄 《北京农学院学报》 2015年第4期1-8,共8页
烟碱型乙酰胆碱受体(nAChR)是一种对神经递质乙酰胆碱起快速反应的激动剂门控离子通道,也是新烟碱类杀虫剂的作用靶标。此研究利用同源克隆结合RACE技术,从朱砂叶螨敏感品系中克隆了一条nAChR基因,全长为2 023bp,开放阅读框长1 635bp,编... 烟碱型乙酰胆碱受体(nAChR)是一种对神经递质乙酰胆碱起快速反应的激动剂门控离子通道,也是新烟碱类杀虫剂的作用靶标。此研究利用同源克隆结合RACE技术,从朱砂叶螨敏感品系中克隆了一条nAChR基因,全长为2 023bp,开放阅读框长1 635bp,编码544个氨基酸。预测分子量(Mr)为62.20kDa,等电点(pI)为5.00。根据同源性及系统发育分析,将其命名为Tcα4,提交至NCBI数据库,获得GenBank登陆号为KP694228。Tcα4具有nAChRα亚基典型结构特征:N端胞外结构域和C端跨膜结构域。Tcα4与二斑叶螨nAChRα4亚基基因序列同源性高达98.71%,与二斑叶螨其他nAChR亚基基因同源性仅在20.07%~43.16%之间,与其他昆虫nAChRα4亚基基因同源性在45.96%~56.07%之间。系统发育分析结果表明朱砂叶螨与二斑叶螨和肩突硬蜱nAChRα4亚基基因在同一分支,与其他昆虫nAChRα4亚基基因则较远。朱砂叶螨nAChRα4亚基基因的克隆为朱砂叶螨其他nAChR亚基基因的研究及以nAChR为作用靶标的新型杀螨剂的研究提供了一种新途径,奠定了基础。 展开更多
关键词 朱砂叶螨 烟碱型乙酰胆碱受体 α4亚基 基因克隆 序列分析
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人整合素分子α4亚基片段的克隆和表达 被引量:2
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作者 刘永全 高杰英 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期 13-15,共3页
目的 克隆并表达人整合素分子α4亚基1.2kbcD-NA片段。方法 从HL-60细胞系中提取总RNA,以RT-PCR法扩增人整合素分子α4亚基片段1.2kbcDNA(1753-2934bp),并将该片段亚克隆至表达载体pGEX-3X,用IPTG诱导表达。结... 目的 克隆并表达人整合素分子α4亚基1.2kbcD-NA片段。方法 从HL-60细胞系中提取总RNA,以RT-PCR法扩增人整合素分子α4亚基片段1.2kbcDNA(1753-2934bp),并将该片段亚克隆至表达载体pGEX-3X,用IPTG诱导表达。结果 克隆了α4亚基1.2kbcDNA片段。序列分析表明。其所编码的氨基酸序列与文献相比较只有一处错义突变(Arg→Gln),经分析突变对抗原性影响不大。将该片段亚克隆至表达载体pGEX-3X,经IPTG诱导在大肠杆菌中获得高效表达。结论 获得了α4亚基1.2kbcDNA片段及其原核表达产物。对研究α4整合素的功能具有重要意义。 展开更多
关键词 整合素分子 α4亚基 RT-PCR CDNA 克隆 表达
人整合素分子α4亚基片段的克隆及大肠杆菌的表达 预览
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作者 刘永全 高杰英 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期 182-185,共4页
目的 克隆并原核表达α4亚基笥段。方法 从IL-6细胞系中提取总RNA,以RT-PCR方法分两段扩增人整素分子α4亚基片段2.0kb cDNA,将两片段连接,并将其中的1.7kb基因片段亚克隆至表达载体PGEX-KG... 目的 克隆并原核表达α4亚基笥段。方法 从IL-6细胞系中提取总RNA,以RT-PCR方法分两段扩增人整素分子α4亚基片段2.0kb cDNA,将两片段连接,并将其中的1.7kb基因片段亚克隆至表达载体PGEX-KG中,IPTG诱导表达。结果 RT-PCR扩增并克隆了α4的两段CDNA,序列分析表明:与文献报道的μ4CDNA序列基本一致。两片段成功连接后将其中的1.7kb亚克隆至表达载体PGEX- 展开更多
关键词 整合素 α4亚基 RT-PCR CDNA 克隆
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人整合素α4亚基cDNA片段的克隆表达和纯化 预览
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作者 刘永全 高杰英 +4 位作者 丁广治 罗振革 孔祥英 彭虹 梅俊杰 《生物技术通讯》 CAS 1997年第Z1期173-173,共1页
整合素(integrins)分子是一类由不同的α和β亚基组成的异二聚体。α4整合素有α4β1和α4β7两种,二者都是表达于细胞表面的粘附分子,其相应的最佳配体分别为VCAM-1(vascu-lar cell adhesion molecule-1)和MAdCAM-1(mucosal addressi... 整合素(integrins)分子是一类由不同的α和β亚基组成的异二聚体。α4整合素有α4β1和α4β7两种,二者都是表达于细胞表面的粘附分子,其相应的最佳配体分别为VCAM-1(vascu-lar cell adhesion molecule-1)和MAdCAM-1(mucosal addressin cell adhesion molecule-1)。人α4亚基由999个氨基酸残基组成,其cDNA长3 kb,糖基化后分子量为150 ku,N端有7个重复序列。在分子的偏中位置有一个蛋白酶作用位点,该位点可将α4分为30和70 ku两个片 展开更多
关键词 整合素 α4亚基 克隆表达 CDNA片段 流行病研究 医学科学院 微生物 粘附分子 骨髓基质细胞 树突状细胞
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