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朱砂叶螨烟碱型乙酰胆碱受体α4亚基基因的克隆与序列特征分析 预览
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作者 高品 王帅 +2 位作者 管学琼 卜春亚 师光禄 《北京农学院学报》 2015年第4期1-8,共8页
烟碱型乙酰胆碱受体(nAChR)是一种对神经递质乙酰胆碱起快速反应的激动剂门控离子通道,也是新烟碱类杀虫剂的作用靶标。此研究利用同源克隆结合RACE技术,从朱砂叶螨敏感品系中克隆了一条nAChR基因,全长为2 023bp,开放阅读框长1 635bp,编... 烟碱型乙酰胆碱受体(nAChR)是一种对神经递质乙酰胆碱起快速反应的激动剂门控离子通道,也是新烟碱类杀虫剂的作用靶标。此研究利用同源克隆结合RACE技术,从朱砂叶螨敏感品系中克隆了一条nAChR基因,全长为2 023bp,开放阅读框长1 635bp,编码544个氨基酸。预测分子量(Mr)为62.20kDa,等电点(pI)为5.00。根据同源性及系统发育分析,将其命名为Tcα4,提交至NCBI数据库,获得GenBank登陆号为KP694228。Tcα4具有nAChRα亚基典型结构特征:N端胞外结构域和C端跨膜结构域。Tcα4与二斑叶螨nAChRα4亚基基因序列同源性高达98.71%,与二斑叶螨其他nAChR亚基基因同源性仅在20.07%~43.16%之间,与其他昆虫nAChRα4亚基基因同源性在45.96%~56.07%之间。系统发育分析结果表明朱砂叶螨与二斑叶螨和肩突硬蜱nAChRα4亚基基因在同一分支,与其他昆虫nAChRα4亚基基因则较远。朱砂叶螨nAChRα4亚基基因的克隆为朱砂叶螨其他nAChR亚基基因的研究及以nAChR为作用靶标的新型杀螨剂的研究提供了一种新途径,奠定了基础。 展开更多
关键词 朱砂叶螨 烟碱型乙酰胆碱受体 α4亚基 基因克隆 序列分析
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人整合素分子α4亚基片段的克隆和表达 被引量:2
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作者 刘永全 高杰英 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期 13-15,共3页
目的 克隆并表达人整合素分子α4亚基1.2kbcD-NA片段。方法 从HL-60细胞系中提取总RNA,以RT-PCR法扩增人整合素分子α4亚基片段1.2kbcDNA(1753-2934bp),并将该片段亚克隆至表达载体pGEX-3X,用IPTG诱导表达。结... 目的 克隆并表达人整合素分子α4亚基1.2kbcD-NA片段。方法 从HL-60细胞系中提取总RNA,以RT-PCR法扩增人整合素分子α4亚基片段1.2kbcDNA(1753-2934bp),并将该片段亚克隆至表达载体pGEX-3X,用IPTG诱导表达。结果 克隆了α4亚基1.2kbcDNA片段。序列分析表明。其所编码的氨基酸序列与文献相比较只有一处错义突变(Arg→Gln),经分析突变对抗原性影响不大。将该片段亚克隆至表达载体pGEX-3X,经IPTG诱导在大肠杆菌中获得高效表达。结论 获得了α4亚基1.2kbcDNA片段及其原核表达产物。对研究α4整合素的功能具有重要意义。 展开更多
关键词 整合素分子 α4亚基 RT-PCR CDNA 克隆 表达
人整合素分子α4亚基片段的克隆及大肠杆菌的表达 预览
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作者 刘永全 高杰英 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期 182-185,共4页
目的 克隆并原核表达α4亚基笥段。方法 从IL-6细胞系中提取总RNA,以RT-PCR方法分两段扩增人整素分子α4亚基片段2.0kb cDNA,将两片段连接,并将其中的1.7kb基因片段亚克隆至表达载体PGEX-KG... 目的 克隆并原核表达α4亚基笥段。方法 从IL-6细胞系中提取总RNA,以RT-PCR方法分两段扩增人整素分子α4亚基片段2.0kb cDNA,将两片段连接,并将其中的1.7kb基因片段亚克隆至表达载体PGEX-KG中,IPTG诱导表达。结果 RT-PCR扩增并克隆了α4的两段CDNA,序列分析表明:与文献报道的μ4CDNA序列基本一致。两片段成功连接后将其中的1.7kb亚克隆至表达载体PGEX- 展开更多
关键词 整合素 α4亚基 RT-PCR CDNA 克隆
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Alzheimer′s病与神经型尼古丁胆碱能受体α4基因多态性关联研究 预览
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作者 单可人 齐艳飞 +6 位作者 齐晓岚 何燕 张婷 李毅 吴昌学 任锡麟 官志忠 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期 972-975,共4页
目的探讨Alzheimer′s病(AD)与神经型尼古丁胆碱能受体α4亚单位(CHRNA4)基因所有外显子基因多态性的关联关系。方法用聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)和DNA测序技术分析23例AD病人及30例正常人的CHRNA4基因所有外显... 目的探讨Alzheimer′s病(AD)与神经型尼古丁胆碱能受体α4亚单位(CHRNA4)基因所有外显子基因多态性的关联关系。方法用聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)和DNA测序技术分析23例AD病人及30例正常人的CHRNA4基因所有外显子基因序列。结果CHRNA4的外显子3上发现3个新的多态性位点,这3个多态位点在病例组与对照组之间存在差异显著性。CHRNA4的外显子5上发现3个多态性位点,病例组与对照组之间没有差异。CHRNA4的外显子6上发现7个多态性位点,病例组与对照组之间没有差异。结论在CHRNA4外显子3上发现的3个新的多态性位点与AD发病可能存在相关关系。因此CHRNA4基因外显子3多态性可能与AD发病有关联。 展开更多
关键词 Alzheimer′s病 神经型尼古丁胆碱能受体a4亚单位基因 聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳 DNA测序
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散发性Alzheimer病与神经型尼古丁胆碱能受体α4α7基因多态性的关联研究 预览
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作者 单可人 齐艳飞 +7 位作者 徐鹰 赵明祥 李毅 张婷 刘芳 李光荣 任锡麟 官志忠 《脑与神经疾病杂志》 2006年第4期 256-260,共5页
目的:探讨散发性Alzheimer病(SAD)与神经型尼古丁胆碱能受体n4亚单位(CHRNA4)基因外显子3、α7亚单位(CHRNA7)基因内含子3、7基因多态性的关联关系。方法:用聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳(PCR—DGGE)和DNA测序技术分析23例... 目的:探讨散发性Alzheimer病(SAD)与神经型尼古丁胆碱能受体n4亚单位(CHRNA4)基因外显子3、α7亚单位(CHRNA7)基因内含子3、7基因多态性的关联关系。方法:用聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳(PCR—DGGE)和DNA测序技术分析23例SAD患者及30例正常人的CHRNA4基因外显子3基因序列和16例SAD患者及16例正常人CHRNA7基因全部外显子及其两侧的部分内含子基因序列。结果:在CHRNA4基因外显子3上发现3个新的多态性位点:C104T(X^2—8,41,P<0.05)、A136G(X2—16.21,P<0.05);G169A(X^2=3.98,P<0.05)。研究结果显示3个多态位点在SAD组与对照组之间存在差异显著性。在CHRNA7基因上发现2个新的多态性位点:内含子3G3133418C(X^2=4.571,P>0.05)、内含子7上117643+GTG三碱基插入突变(X^2=1.032,P>0.5)统计学结果该2个多态位点在SAD组与对照组之间无差异显著性。结论:在CHRNA4基因外显子3上发现的3个新的多态性位点(GeneBank登录号为:AY786507 AY857199 AY857197)与散发性Alzheimer病的发病可能存在相关关系。在CHRNA7基因上发现的2个新的多态性位点(GeneBank登录号为:AY641830和AY641831)与散发性Alzheimer病的发病没有显著性的相关关系。因此CHRNA4基因外显子3多态性可能与散发性Alzheimer病发病有关联。 展开更多
关键词 散发性Alzheimer病 神经型尼古丁胆碱能受体α4亚单位 α7亚单位 聚合酶链式反应-变性梯度凝胶 电泳DNA测序
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神经型尼古丁胆碱能受体α4亚单位基因外显子3基因多态性与散发性Alzheimer病的关系 预览 被引量:2
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作者 齐艳飞 单可人 +7 位作者 徐鹰 赵明祥 刘芳 李光荣 张婷 李毅 官志忠 任锡麟 《临床神经病学杂志》 CAS 北大核心 2006年第3期 161-163,共3页
目的 探讨神经型尼古丁胆碱能受体“亚单位(CHRNA4)基因外显子3基因多态性与散发性Alzheimer病(SAD)的关系。方法采用聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳和DNA测序技术分析23例SAD患者(SAD组)及30名健康对照者(正常对照组)的CHRNA... 目的 探讨神经型尼古丁胆碱能受体“亚单位(CHRNA4)基因外显子3基因多态性与散发性Alzheimer病(SAD)的关系。方法采用聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳和DNA测序技术分析23例SAD患者(SAD组)及30名健康对照者(正常对照组)的CHRNA4基因外显子3基因序列。结果对CHRNA4基因外显子3测序发现3个新多态性位点:C104T、A136G、G169A;此3个多态性位点的基因频率在SAD组分别为35%、46%、61%,在正常对照组分别为13%、13%、33%,两组比较差异有显著性(均P〈0.05)。结论在CHRNA4基因外显子3新发现的3个多态性位点可能与SAD的发病存在相关性。 展开更多
关键词 ALZHEIMER病 散发 神经型尼古丁胆碱能受体α4亚单位 基因多态性
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中枢型尼古丁胆碱能受体α4外显子5多态性与阿尔茨海默病的关联 预览
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作者 齐艳飞 单可人 +7 位作者 徐鹰 赵明祥 刘芳 李光荣 张婷 李毅 官志忠 任锡麟 《贵阳医学院学报》 CAS 2005年第3期 202-206,210,共6页
目的: 探讨散发性阿尔茨海默病(Sporadic Alzheimer disease简称SAD)和中枢型尼古丁胆碱能受体α4亚单位(CHRNA4)外显子五基因多态性的关联关系.方法: 用聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)和DNA测序技术分析23例SAD病人及30例... 目的: 探讨散发性阿尔茨海默病(Sporadic Alzheimer disease简称SAD)和中枢型尼古丁胆碱能受体α4亚单位(CHRNA4)外显子五基因多态性的关联关系.方法: 用聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)和DNA测序技术分析23例SAD病人及30例正常人的CHRNA4基因的外显子五序列.结果: 在CHRNA4的外显子五上发现3个多态性位点:G1478A(χ2=0.24,P>0.05);A1374G(χ2=0.24,P>0.05);T1344C(χ2=0.24,P>0.05).由统计学结果得出该3个多态位点在病例组与对照组之间没有差异.结论: 在CHRNA4外显子五上发现的3个多态性位点与阿尔茨海默病(AD)的发病可能不存在相关关系. 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 受体 胆碱能 聚合酶链反应 电泳 琼脂凝胶 中枢型尼古丁胆碱能受体α4亚单位
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