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新型精胺氧化酶小分子抑制剂SI-4650抗人骨肉瘤活性及分子机制研究
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作者 周游 王艳林 +2 位作者 孙丽丹 曹春雨 杨建林 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期454-462,共9页
SI-4650是本实验室新近发现的一种新型精胺氧化酶(spermine oxidase, SMO)小分子抑制剂,本研究的目的是进一步探究SI-4650对人骨肉瘤143B细胞增殖、迁移能力的影响及其分子机制。研究利用化学发光法和高效液相色谱法分析SI-4650对143B... SI-4650是本实验室新近发现的一种新型精胺氧化酶(spermine oxidase, SMO)小分子抑制剂,本研究的目的是进一步探究SI-4650对人骨肉瘤143B细胞增殖、迁移能力的影响及其分子机制。研究利用化学发光法和高效液相色谱法分析SI-4650对143B细胞中SMO活性的影响;DIOC6(3)探针染色/流式细胞术分析细胞中活性氧的堆积水平;MTT法和流式细胞术检测SI-4650对细胞增殖和周期的影响;Transwell法和Western blot分析细胞迁移相关蛋白的表达;PI/FITC-Annexin V双染、倒置荧光显微镜观察和Western blot法分析细胞凋亡和自噬。结果显示,SI-4650可显著性抑制人骨肉瘤143B细胞内SMO酶活性,高效抑制143B细胞的增殖和迁移能力,并引起S期周期阻滞,其机制可能与干扰多胺代谢、活化线粒体介导的细胞凋亡途径和引起自噬性死亡相关。上述研究结果提示,SI-4650具有用于人骨肉瘤临床治疗的潜在价值。 展开更多
关键词 多胺代谢 精胺氧化酶抑制剂 骨肉瘤细胞 细胞增殖 迁移 凋亡 自噬
靶向Bak1的shRNA表达腺病毒构建及其对人骨肉瘤细胞的影响 预览
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作者 黄红 柴爽 +2 位作者 万雷 王吉利 黄宏兴 《江西医药》 CAS 2018年第4期310-314,共5页
目的构建沉默人Bcl-2拮抗1基因(Bak1)的重组腺病毒,感染人成骨肉瘤细胞MG63并检测其对细胞活性的影响。方法设计特异性针对Bak1的sh RNA序列及无关对照序列scr,分别构建重组腺病毒表达载体,感染人成骨肉瘤细胞MG63,利用q PCR和Western... 目的构建沉默人Bcl-2拮抗1基因(Bak1)的重组腺病毒,感染人成骨肉瘤细胞MG63并检测其对细胞活性的影响。方法设计特异性针对Bak1的sh RNA序列及无关对照序列scr,分别构建重组腺病毒表达载体,感染人成骨肉瘤细胞MG63,利用q PCR和Western blot检测Bak1基因沉默后的MG63细胞Bak1 m RNA及蛋白的表达,筛选出能高效沉默目标基因的重组腺病毒表达载体,并对其进行包装扩繁,荧光显微镜观察计算病毒滴度,利用MTT法检测高效沉默的重组腺病毒感染MG63细胞后的细胞活性。结果 (1)测序列结果表明,sh RNA序列已成功克隆入到p Ad-GFP载体上;(2)sh RNA-3的沉默效率最高,扩增纯化后腺病毒滴度达到7.7×10^8GFU/ml;(3)MTT检测显示与NC对照组相比,sh RNA-3组MG63细胞活性增强(P〈0.5)。结论成功构建了沉默Bak1的重组腺病毒,为进一步研究Bak1的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 组织构建 Bcl-2拮抗1 基因沉默 骨肉瘤细胞 细胞活性
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HIF-1α表达对人骨肉瘤细胞自噬的影响
3
作者 李旭 赵薇 +1 位作者 赵宇 谢鑫 《解剖科学进展》 2018年第4期361-363,共3页
目的探讨HIF-1α的表达程度对人骨肉瘤细胞自噬的影响。方法传代培养人骨肉瘤细胞株(MG-63),施加不同条件诱导各组细胞中HIF-1α不同程度表达,MTT法检测细胞增殖抑制率变化,Western blot检测HIF-1α、Beclin-1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ表达。结... 目的探讨HIF-1α的表达程度对人骨肉瘤细胞自噬的影响。方法传代培养人骨肉瘤细胞株(MG-63),施加不同条件诱导各组细胞中HIF-1α不同程度表达,MTT法检测细胞增殖抑制率变化,Western blot检测HIF-1α、Beclin-1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ表达。结果低氧条件下HIF-1α表达增加,细胞增殖受到抑制,同时LC3Ⅱ/LC3Ⅰ,Beclin-1表达水平增加;当诱导HIF-1α过度表达时,细胞增殖受抑制更明显,同时LC3Ⅱ/LC3Ⅰ,Beclin-1表达水平增加亦更明显;当HIF-1α表达受到抑制时,细胞增殖受抑制减弱,同时LC3Ⅱ/LC3Ⅰ,Beclin-1表达水平亦较少。结论 HIF-1α可能参与人骨肉瘤细胞的发病机制。 展开更多
关键词 骨肉瘤细胞 HIF-1Α 自噬
Cell-SELEX筛选人骨肉瘤细胞MG-63核酸适配体的实验研究 预览
4
作者 翁艳 陈冬冬 +2 位作者 涂少臣 周燕芸 张韬 《福建医药杂志》 CAS 2018年第2期111-114,共4页
目的获取人骨肉瘤细胞MG-63的核酸适配体,并对核酸适配体克隆进行测序。方法通过细胞指数富集的配基系统进化(Cell-SELEX)技术建立人骨肉瘤细胞核酸适配体筛选平台,对筛选过程中的文库PCR退火温度、PCR循环扩增次数进行优化和改进,获... 目的获取人骨肉瘤细胞MG-63的核酸适配体,并对核酸适配体克隆进行测序。方法通过细胞指数富集的配基系统进化(Cell-SELEX)技术建立人骨肉瘤细胞核酸适配体筛选平台,对筛选过程中的文库PCR退火温度、PCR循环扩增次数进行优化和改进,获取人骨肉瘤细胞MG-63的核酸适配体,并对核酸适配体克隆进行测序。结果在其他条件不变的情况下,文库PCR退火温度56.2℃、循环扩增15次能获得足量的扩增产物,挑选20个克隆进行测序,得到5条核酸适配体序列。结论应用Cell-SELEX技术可成功筛选人骨肉瘤细胞MG-63核酸适配体,为后期骨肉瘤循环肿瘤细胞的分离检测奠定实验基础。 展开更多
关键词 核酸适配体 Cell-SELEX 骨肉瘤细胞
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帕金森病相关蛋白DJ-1对人骨肉瘤细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移能力的影响 预览
5
作者 李宏维 胡旭昌 +1 位作者 马兵 张海鸿 《中南大学学报:医学版》 CSCD 北大核心 2018年第10期1054-1060,共7页
目的:研究帕金森病相关蛋白DJ-1对人骨肉瘤细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响及其作用机制。方法:Western 印迹检测骨肉瘤细胞株(MG-63,Saos-2和U2OS)及正常人成骨细胞株hFOB1.19中DJ-1和第10号染色体上缺失的磷酸酶与张力蛋白同... 目的:研究帕金森病相关蛋白DJ-1对人骨肉瘤细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响及其作用机制。方法:Western 印迹检测骨肉瘤细胞株(MG-63,Saos-2和U2OS)及正常人成骨细胞株hFOB1.19中DJ-1和第10号染色体上缺失的磷酸酶与张力蛋白同源物(phosphatase and tensin homolog deleted from chromosome 10,PTEN)基因的表达。DJ-1 siRNA处理人骨肉瘤细胞后,采用Western印迹检测DJ-1的蛋白表达水平;细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)法检测细胞存活率;膜联蛋白V(annexin V)-异硫氰酸荧光素(fl uorescein isothiocyanate,FITC)/碘化吡啶(propidium iodide,PI)双染检测细胞凋亡;Transwell侵袭和迁移实验检测细胞侵袭和迁移水平。结果:与hFOB1.19细胞比较,骨肉瘤细胞DJ-1蛋白表达水平显著升高(均P〈0.05),其中U2OS细胞升高最为显著(P〈0.01)。DJ-1 siRNA可显著降低U2OS细胞中DJ-1蛋白表达水平、降低细胞存活率、促进细胞凋亡、抑制细胞侵袭和迁移水平,以及增加PTEN蛋白表达水平(均P〈0.05)。另外,与hFOB1.19细胞比较,PTEN在骨肉瘤细胞中的蛋白表达水平显著降低(P〈0.05)。结论:DJ-1可抑制人骨肉瘤细胞增殖,促进细胞凋亡,抑制细胞侵袭和迁移水平,其机制可能与增加PTEN蛋白的表达水平有关。 展开更多
关键词 帕金森病相关蛋白DJ-1 骨肉瘤细胞 增殖 凋亡 侵袭和迁移
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miR-181a重组穿梭载体的构建及其对人骨肉瘤细胞迁移侵袭能力的影响 预览
6
作者 范丽娟 苏奇 +1 位作者 李建龙 高曦 《福建医药杂志》 CAS 2018年第1期123-125,共3页
目的探讨miR-181a对人骨肉瘤细胞迁移侵袭能力的影响。方法通过构建miR-181a重组穿梭载体,并将其转染到人骨肉瘤细胞MG63中,以Transwell实验检测人骨肉瘤细胞MG-63的迁移和侵袭能力。结果pGV314-miR-181a重组穿梭载体组相对于空白对... 目的探讨miR-181a对人骨肉瘤细胞迁移侵袭能力的影响。方法通过构建miR-181a重组穿梭载体,并将其转染到人骨肉瘤细胞MG63中,以Transwell实验检测人骨肉瘤细胞MG-63的迁移和侵袭能力。结果pGV314-miR-181a重组穿梭载体组相对于空白对照组及pGV314空载体组,细胞迁移和侵袭的能力获得增强,组间差异有统计学意义(P〈0.05)。结论miR-181a能显著提升人骨肉瘤细胞的迁移和侵袭能力。 展开更多
关键词 miR-181a 重组穿梭载体 骨肉瘤细胞 迁移 侵袭
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HELQ对骨肉瘤细胞增殖、侵袭、迁移的影响及机制 预览
7
作者 钟俊桥 周云飞 +3 位作者 刘家明 刘东宁 周扬 刘志礼 《山东医药》 北大核心 2017年第48期15-18,共4页
目的探讨POLQ样蛋白解旋酶(HELQ)对骨肉瘤细胞增殖、侵袭、迁移的影响及作用机制。方法将体外培养的人源骨肉瘤细胞系U2-OS、143B随机分为Lv-HELQ组、NC组、Lv-sh HELQ组,分别转染Lv-HELQ、Lv-Negative、Lv-sh HELQ慢病毒载体。转染4... 目的探讨POLQ样蛋白解旋酶(HELQ)对骨肉瘤细胞增殖、侵袭、迁移的影响及作用机制。方法将体外培养的人源骨肉瘤细胞系U2-OS、143B随机分为Lv-HELQ组、NC组、Lv-sh HELQ组,分别转染Lv-HELQ、Lv-Negative、Lv-sh HELQ慢病毒载体。转染48 h时,采用Western blotting法检测HELQ蛋白表达,结果显示两种细胞Lv-HELQ组HELQ蛋白相对表达量均高于NC组,Lv-sh HELQ组均低于NC组,组间比较P均〈0.05,提示HELQ转染成功。三组(两种细胞)转染48 h时,采用CCK8法检测细胞增殖情况(光密度值),采用Wound healing法检测细胞迁移率,采用Transwell invasion法检测细胞穿膜细胞数(侵袭能力),采用彗星实验检测彗星尾部DNA百分比。结果两种细胞Lv-HELQ组光密度值均高于NC组,Lv-sh HELQ组光密度值均低于NC组,组间比较P〈0.05或〈0.01。两种细胞Lv-HELQ组细胞迁移率、穿膜细胞数及均彗星尾部DNA百分比均低于NC组,Lv-sh HELQ组均高于NC组,组间比较P均〈0.05。结论 HELQ可抑制人骨肉瘤细胞增殖、侵袭、转移,修复DNA损伤可能是其作用机制。 展开更多
关键词 骨肉瘤 POLQ样蛋白解旋酶 骨肉瘤细胞 细胞增殖 细胞侵袭 细胞迁移 DNA损伤
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蛇床子素促进人骨肉瘤细胞株SAOS-2凋亡 被引量:1
8
作者 吕怡凝 刘天华 +3 位作者 彭燕丽 刘真宏 王璐 单宏丽 《现代生物医学进展》 CAS 2017年第11期2012-2015,共4页
目的:观察蛇床子素(osthole)对人骨肉瘤细胞SAOS-2增殖和凋亡的影响及潜在的调控机制。方法:采用MTT法、TUNEL染色技术和流式细胞术检测不同浓度蛇床子素对骨肉瘤细胞凋亡的影响;Western blot检测蛇床子素对骨肉瘤细胞中与细胞凋亡... 目的:观察蛇床子素(osthole)对人骨肉瘤细胞SAOS-2增殖和凋亡的影响及潜在的调控机制。方法:采用MTT法、TUNEL染色技术和流式细胞术检测不同浓度蛇床子素对骨肉瘤细胞凋亡的影响;Western blot检测蛇床子素对骨肉瘤细胞中与细胞凋亡密切相关的蛋白(Bax、Bcl-2)的变化。结果:蛇床子素作用于SAOS-2细胞后,MTT结果显示SAOS-2细胞的活力受到明显抑制,且与蛇床子素浓度和时间相关;Western blot结果显示细胞中的促凋亡蛋白Bax表达上调,抗凋亡蛋白Bcl-2表达明显减弱,且呈剂量依赖性。结论:蛇床子素可显著抑制人骨肉瘤细胞的增殖且促进其凋亡的作用,可能与上调凋亡蛋白Bax和下调抗凋亡蛋白Bcl-2的表达有关。 展开更多
关键词 蛇床子素 骨肉瘤细胞 细胞凋亡
重组人血管内皮抑制素联合顺铂对人骨肉瘤MG-63细胞VEGF基因表达、增殖及侵袭力的影响 预览
9
作者 张黎明 《河北医药》 CAS 2015年第12期1785-1788,共4页
目的观察重组人血管内皮抑制素(rh Endo)联合顺铂对人骨肉瘤MG-63细胞VEGF基因表达、增殖及侵袭力的影响。方法顺铂、rh Endo、rh Endo联合顺铂分别处理MG-63细胞,采用RT-PCR和Western blot检测细胞VEGF mRNA和蛋白表达量,CCK-8实验... 目的观察重组人血管内皮抑制素(rh Endo)联合顺铂对人骨肉瘤MG-63细胞VEGF基因表达、增殖及侵袭力的影响。方法顺铂、rh Endo、rh Endo联合顺铂分别处理MG-63细胞,采用RT-PCR和Western blot检测细胞VEGF mRNA和蛋白表达量,CCK-8实验检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell小室体外迁移实验检测细胞侵袭和迁移能力。结果 rh Endo联合顺铂组对VEGF mRNA和蛋白表达量、细胞增殖、侵袭迁移的抑制作用以及对细胞凋亡的促进作用均显著高于rh Endo、顺铂单药组,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论重组人血管内皮抑制素联合顺铂能够在抑制骨肉瘤MG-63细胞VEGF表达、细胞增殖和侵袭力、促进细胞凋亡方面发挥协同作用。 展开更多
关键词 重组血管内皮抑制素 骨肉瘤细胞 VEGF 增殖 侵袭转移
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H3受体拮抗剂的筛选及评价 预览
10
作者 胡敏 李永洁 张天泰 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第B11期3-4,共2页
目的建立H3组胺受体拮抗剂体外筛选模型,对定向结构改造的目标化合物进行筛选,发现和寻找活性更强的H3组胺受体拮抗剂.方法通过在人骨肉瘤细胞(U2OS细胞)中共转染组胺H3受体、β-内酰胺酶、β-arrestin,建立能够稳定表达组胺H3受体的U... 目的建立H3组胺受体拮抗剂体外筛选模型,对定向结构改造的目标化合物进行筛选,发现和寻找活性更强的H3组胺受体拮抗剂.方法通过在人骨肉瘤细胞(U2OS细胞)中共转染组胺H3受体、β-内酰胺酶、β-arrestin,建立能够稳定表达组胺H3受体的U2OS细胞系,利用荧光能量共振转移(FRET)技术检测β-内酰胺酶活性,从而评价化合物与H3的结合.基于该模型对定向合成的化合物进行筛选.结果通过对233个定向合成的化合物进行筛选,发现有24个化合物对H3具有较高的抑制活性.进一步的复筛和评价,发现化合物H0369和H0434抑制H3的IC50分别为0.06和0.09μmol·L^-1,且它们结构新颖,符合类药特征,具有进一步研究的价值.结论本研究建立了稳定表达的H3_blaU2OS细胞模型,初步发现了数个对H3组胺受体具有抑制活性的化合物,为以H3受体为靶点的中枢神经系统功能紊乱相关疾病的药物研发提供了基础. 展开更多
关键词 H3受体拮抗剂 体外筛选模型 组胺受体拮抗剂 Β-ARRESTIN 荧光能量共振转移 神经系统功能紊乱 组胺H3受体 骨肉瘤细胞
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miR-30a抑制人骨肉瘤细胞143B的迁移、侵袭和活力 预览
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作者 张汝益 何方 +3 位作者 王静 邓芳 李琪英 施琼 《基础医学与临床》 CSCD 2015年第1期12-16,共5页
目的探讨miR-30a对人骨肉瘤细胞143B侵袭、迁移和细胞活力的影响。方法过表达或抑制miR-30a分别处理人骨肉瘤细胞143B。划痕实验观察细胞划痕愈合能力;Transwell实验检测143B细胞迁移和侵袭能力;MTT实验检测细胞活力;定量PCR实验确认过... 目的探讨miR-30a对人骨肉瘤细胞143B侵袭、迁移和细胞活力的影响。方法过表达或抑制miR-30a分别处理人骨肉瘤细胞143B。划痕实验观察细胞划痕愈合能力;Transwell实验检测143B细胞迁移和侵袭能力;MTT实验检测细胞活力;定量PCR实验确认过表达miR-30a腺病毒有效性并且检测RUNX2 mRNA表达;Western blot检测细胞中RUNX2总蛋白表达。结果过表达miR-30a抑制了骨肉瘤细胞143B迁移和侵袭(P<0.05),在72 h时,miR-30a明显抑制细胞活力(P<0.01);抑制miR-30a的内源性表达后,143B细胞的迁移和侵袭能力增加(P<0.05),细胞活力也表现出上升水平(P<0.01);同时过表达miR-30a可以抑制RUNX2的蛋白表达,抑制内源性miR-30a后RUNX2蛋白水平表达增加(P<0.05)。荧光素酶活性检测,miR-30a可以靶向于RUNX2(P<0.01)。结论 miR-30a抑制骨肉瘤细胞143B的迁移、侵袭和活力,其作用可以能是通过抑制RUNX2的表达来实现。 展开更多
关键词 miR-30a 骨肉瘤细胞 RUNX2
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实时荧光定量PCR技术诊断人骨肉瘤MG63细胞系中β-catenin基因表达的临床分析 预览 被引量:1
12
作者 林国叶 谢志平 《检验医学与临床》 CAS 2015年第22期3307-3308,3311共3页
目的分析实时荧光定量PCR技术(FQ-PCR)诊断人骨肉瘤MG63细胞系中β-catenin基因表达。方法培养人骨肉瘤MG63细胞系,对其进行分组,对照组细胞使用10%的胎牛血清以及含有青霉素和链霉素的DEME高糖培养基培养。而刺激组则在此基础上用100... 目的分析实时荧光定量PCR技术(FQ-PCR)诊断人骨肉瘤MG63细胞系中β-catenin基因表达。方法培养人骨肉瘤MG63细胞系,对其进行分组,对照组细胞使用10%的胎牛血清以及含有青霉素和链霉素的DEME高糖培养基培养。而刺激组则在此基础上用100ng/mL的wnt3a细胞进行培养。分别在第0、1、2、3、4天分别采集3个孔的细胞,采用细胞消化的方式计算细胞个数,采用FQ-PCR检测人骨肉瘤MG63细胞系中β-catenin基因表达。结果在细胞生长的第0、1天,两组MG细胞数量对比差异无统计学意义(P〉0.05);而在第2、3、4天两组的细胞个数对比差异有统计学意义(P〈0.05)。β-catenin基因表达与wnt3a的蛋白刺激浓度呈非正相关关系,在各个浓度中,以100ng/mL的wnt3a蛋白刺激β-catenin基因表达最高,其他几个浓度的β-catenin基因表达对比差异无统计学意义(P〉0.05)。100ng/mL的wnt3a蛋白刺激在培养6h时β-catenin基因表达最高,并且在6h前,β-catenin基因表达会随时间延长而增加。6h后β-catenin基因表达对比差异无统计学意义(P〉0.05)。结论FQ-PCR能够反映人骨肉瘤MG63细胞中β-catenin基因表达。 展开更多
关键词 骨肉瘤细胞 Β-CATENIN 实时荧光定量PCR技术
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CK2抑制剂对骨肉瘤细胞增殖和侵袭力的作用研究 预览 被引量:2
13
作者 薛剑 靳安民 +1 位作者 吕海 刘建航 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期38-42,共5页
目的探讨CK2抑制剂Emodin对人骨肉瘤细胞Saos-2增殖及侵袭力的影响。方法分别用CK2抑制剂Emodin、顺铂及联合两种药物处理Saos-2细胞,通过Western blot检测凋亡、CCK-8法检测细胞增殖;Transwell小室侵袭实验法检测细胞侵袭能力。结果 Em... 目的探讨CK2抑制剂Emodin对人骨肉瘤细胞Saos-2增殖及侵袭力的影响。方法分别用CK2抑制剂Emodin、顺铂及联合两种药物处理Saos-2细胞,通过Western blot检测凋亡、CCK-8法检测细胞增殖;Transwell小室侵袭实验法检测细胞侵袭能力。结果 Emodin抑制CK2后可提高TAp73蛋白表达,激活其活性,促进Saos-2细胞凋亡;CCK-8法表明Emodin可以抑制Saos-2细胞增殖,且联合用药作用更明显;Transwell小室侵袭实验结果表明实验组均可抑制Saos-2细胞侵袭,穿膜细胞数分别为(57.23±3.52)、(52.06±4.54)和(32.83±3.79)个,且联合用药协同作用明显(P〈0.05)。结论 CK2抑制剂Emodin能够抑制骨肉瘤Saos-2细胞的增殖和侵袭,为进一步探索采用小分子蛋白激酶抑制剂辅助治疗骨肉瘤细胞的新途径提供研究基础。 展开更多
关键词 CK2抑制剂 骨肉瘤细胞 肿瘤增殖 肿瘤侵袭 P73
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雷帕霉素联合顺铂治疗人骨肉瘤的研究 被引量:1
14
作者 马俊杰 皮国富 +2 位作者 刘宏建 孙建广 孙若宾 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期1027-1028,共2页
目的比较雷帕霉素联合顺铂与单用雷帕霉素或单用顺铂对人骨肉瘤细胞增殖和凋亡的影响。方法将人骨肉瘤细胞株随机分为4组:空白组、阳性药1组、阳性药2组和治疗组。阳性药1组应用雷帕霉素20mg/L,阳性药2组应用顺铂10mg/L,治疗组联... 目的比较雷帕霉素联合顺铂与单用雷帕霉素或单用顺铂对人骨肉瘤细胞增殖和凋亡的影响。方法将人骨肉瘤细胞株随机分为4组:空白组、阳性药1组、阳性药2组和治疗组。阳性药1组应用雷帕霉素20mg/L,阳性药2组应用顺铂10mg/L,治疗组联合雷帕霉素20mg/L和顺铂10mg/L,空白组加入等量生理盐水。利用噻唑蓝(MTT)比色法检测雷帕霉素联合顺铂或单用霄帕霉素川顷铂对骨肉瘤细胞的增殖抑制率;流式细胞术检测雷帕霉素联合顺铂或单川雷帕霉素/顺铂对骨肉瘤细胞凋亡率的影响。结果联合应用两种药物对人骨肉瘤的抑制牢较单独使用明显增强,且差异有统计学意义(P〈0.05),空白组:0.33±0.02,阳性药1组:0.56±0.05,阳性药2组:0.55±0.03,治疗组:0.95±0.01。单独应用雷帕霉素和顺铂,可诱导骨肉瘤细胞凋亡;联合应用时,诱导凋亡作用显著增强,且差异有统计学意义(P〈0.05)。结论雷帕霉素与顺铂联合应用,可明显抑制骨肉瘤细胞的增殖并诱导其凋亡,比单独应用效果更佳。 展开更多
关键词 雷帕霉素 顺铂 骨肉瘤细胞 治疗
双氢青蒿素对骨肉瘤细胞143B影响的研究 预览 被引量:1
15
作者 刘跃亮 罗进勇 +1 位作者 曾照芳 宋涛 《激光杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期68-69,共2页
目的:研究双氢青蒿素(Dihydroatemisinine,DHA)对人骨肉瘤细胞143B的影响及所导致的形态学变化。方法:采用人骨肉瘤143B细胞株,通过设置对照组和低浓度、中浓度、高浓度的DHA组,H.E染色观察Trandwell小室穿梭能力;划痕愈合实... 目的:研究双氢青蒿素(Dihydroatemisinine,DHA)对人骨肉瘤细胞143B的影响及所导致的形态学变化。方法:采用人骨肉瘤143B细胞株,通过设置对照组和低浓度、中浓度、高浓度的DHA组,H.E染色观察Trandwell小室穿梭能力;划痕愈合实验观察迁移能力;Hoechst33258荧光染色检测细胞凋亡;MTT法检测细胞增殖抑制能力。结果:DHA表现出明显地抑制人骨肉瘤143B细胞的迁移、增殖以及促进凋亡(P〈0.05),且伴随浓度的递增和时间的延长,抑制作用更明显。结论:DHA具有较强的抗入骨肉瘤作用,其机制可能与DHA诱导骨肉瘤细胞凋亡,并抑制其增殖有关。 展开更多
关键词 双氢青蒿素 骨肉瘤细胞 细胞凋亡 细胞增殖
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姜黄素联合顺铂对人骨肉瘤细胞增殖和凋亡的影响 被引量:1
16
作者 刘宏 常玉立 +2 位作者 郑科 呼和 孙天胜 《现代生物医学进展》 CAS 2012年第36期7044-7047,共4页
目的:观察姜黄素联合顺铂对人骨肉瘤细胞MG-63增殖和凋亡的影响。方法:采用不同浓度的姜黄素、顺铂和姜黄素联合顺铂处理人骨肉瘤细胞MG-63不同时间,通过MTT法检测其对MG-63细胞生长的抑制作用;平板克隆实验检测其对MG-63细胞克隆形... 目的:观察姜黄素联合顺铂对人骨肉瘤细胞MG-63增殖和凋亡的影响。方法:采用不同浓度的姜黄素、顺铂和姜黄素联合顺铂处理人骨肉瘤细胞MG-63不同时间,通过MTT法检测其对MG-63细胞生长的抑制作用;平板克隆实验检测其对MG-63细胞克隆形成能力的影响;流式细胞仪检测其对MG-63细胞凋亡的影响。结果:单用姜黄素或顺铂均可以时间和浓度依赖性方式抑制骨肉瘤细胞MG-63的增殖。与空白对照组相比,单用10μmol/L姜黄素和2、4μmol/L顺铂可抑制MG-63细胞的增殖,降低其克隆形成率并提高细胞凋亡率(P〈0.05);而与姜黄素和顺铂单用处理相比,10μmol/L姜黄素分别与2、4μmol/L顺铂联合应用,可更显著抑制MG-63细胞的增殖,降低其克隆形成率并提高细胞凋亡率(P〈0.01)。结论:姜黄素联合顺铂与单药相比能够显著抑制人骨肉瘤细胞MG-63细胞的增值,促进其凋亡,两药对骨肉瘤细胞的杀伤效应具有一定的协同性。 展开更多
关键词 姜黄素 顺铂 骨肉瘤细胞 细胞增殖 细胞凋亡
双氢青蒿素对人骨肉瘤细胞株143B增殖和凋亡的作用 预览 被引量:10
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作者 刘跃亮 罗进勇 +2 位作者 张彦 何通川 曾照芳 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1719-1723,共5页
目的观察双氢青蒿素(dihydroarteminin,DHA)对人骨肉瘤细胞143B的增殖和凋亡的影响以及可能的机制。方法体外培养人骨肉瘤细胞株143B;MTT比色法和克隆形成实验检测不同浓度DHA对骨肉瘤细胞存活与克隆形成能力的影响。Hoechst 33258染... 目的观察双氢青蒿素(dihydroarteminin,DHA)对人骨肉瘤细胞143B的增殖和凋亡的影响以及可能的机制。方法体外培养人骨肉瘤细胞株143B;MTT比色法和克隆形成实验检测不同浓度DHA对骨肉瘤细胞存活与克隆形成能力的影响。Hoechst 33258染色法观察细胞凋亡的形态变化。构建β-Catenin荧光素酶报告基因(β-Catenin-Luc,p-Top)检测DHA作用143B后细胞内β-Catenin活性变化。不同浓度的DHA作用后,Western blot检测与细胞增殖(如PC-NA、Cyclin D1、c-Myc)、凋亡(如Bad、Bcl-2、Caspase-3)密切相关的标志物蛋白质表达变化。结果 DHA作用于143B细胞24 h后,MTT结果显示143B细胞的增殖活性受到明显抑制,且其克隆形成能力减弱(P〈0.05),在DHA浓度达35μmol.L-1时,抑制效率最明显。Western blot结果显示PC-NA表达下调;而促凋亡蛋白Bad和Caspase-3表达上调,Bcl-2蛋白表达明显减弱。结论双氢青蒿素具有较明显的抑制人骨肉瘤细胞的增殖且促进其凋亡的作用,可能通过下调细胞增殖相关蛋白PCNA、Bcl-2和上调促凋亡蛋白Bad和Caspase-3,启动凋亡程序,致143B细胞发生凋亡。 展开更多
关键词 双氢青蒿素 骨肉瘤细胞 细胞增殖 细胞凋亡 WNT信号通路 Β-CATENIN
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三氧化二砷对人骨肉瘤U2-OS细胞增殖和周期的影响 预览 被引量:1
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作者 秦建英 陈清汉 赵意华 《山东医药》 CAS 北大核心 2011年第47期 47-48,共2页
目的观察三氧化二砷(As2O3)在体外对人骨肉瘤U2-OS细胞增殖及周期的影响。方法将对数生长期人骨肉瘤U2-OS细胞分为两组,实验组分别加入0.51、.01、.5μmol/L As2O3,阴性对照组加入同体积培养液,阳性对照组加入5-Fu 15 mg/L,采用MTT比... 目的观察三氧化二砷(As2O3)在体外对人骨肉瘤U2-OS细胞增殖及周期的影响。方法将对数生长期人骨肉瘤U2-OS细胞分为两组,实验组分别加入0.51、.01、.5μmol/L As2O3,阴性对照组加入同体积培养液,阳性对照组加入5-Fu 15 mg/L,采用MTT比色法检测各组24、48、72 h增殖抑制率,流式细胞仪检测48 h后细胞周期变化。结果各浓度的As2O3对骨肉瘤U2-OS细胞均具有抑制增殖作用,且呈剂量和时间依赖性;随着As2O3浓度的升高,细胞周期发生S期阻滞,与正常对照组相比有统计学差异(P〈0.05)。结论 As2O3能抑制骨肉瘤U2-OS细胞增殖,其机制可能为使细胞发生S期阻滞。 展开更多
关键词 三氧化二砷 骨肉瘤细胞 增殖 细胞周期
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U-2OS中抑癌基因pitx1突变的鉴定及分析 预览 被引量:1
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作者 袁建敏 王建胜 +1 位作者 李学东 杜世新 《医学信息:上旬刊》 2011年第8期 2288-2290,共3页
目的克隆人骨肉瘤细胞U-2OS中抑癌基因pitx1,进行测序,并检测pitx1下游基因p53的表达情况。方法采用RT-PCR法扩增U-2OS中Pitx1基因,并进行克隆测序;采用定量PCR和western blot方法检测pitx1下游基因p53的RNA和蛋白水平表达情况。结果在U... 目的克隆人骨肉瘤细胞U-2OS中抑癌基因pitx1,进行测序,并检测pitx1下游基因p53的表达情况。方法采用RT-PCR法扩增U-2OS中Pitx1基因,并进行克隆测序;采用定量PCR和western blot方法检测pitx1下游基因p53的RNA和蛋白水平表达情况。结果在U-2OS中抑癌基因pitx1发生突变,其下游基因p53的相对表达量显著低于pitx1野生型细胞株HOS。结论 pitx1属于重要的抑癌基因p53及原癌基因ras的上游调控因子,在pitx1中的突变可能导致了该细胞株的恶变及化疗耐药。 展开更多
关键词 骨肉瘤细胞 U-2OS pitx1突变 P53 RAS 化疗耐药
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抑制人RAD51基因表达对人骨肉瘤细胞体内外增殖能力的影响
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作者 杜利清 白剑强 +6 位作者 刘强 王彦 王小春 王月英 张恒 孟爱民 樊飞跃 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期,共4页
目的:通过抑制人RAD51修复基因(hRAD51)表达,研究hRAD51对骨肉瘤细胞和裸鼠移植瘤生长的影响。方法:构建hRAD51基因沉默的骨肉瘤细胞株HOS-shA2,利用MTT和克隆形成实验从体外观察hRAD51基因沉默对HOS细胞增殖的影响,FCM法检测抑制hRAD5... 目的:通过抑制人RAD51修复基因(hRAD51)表达,研究hRAD51对骨肉瘤细胞和裸鼠移植瘤生长的影响。方法:构建hRAD51基因沉默的骨肉瘤细胞株HOS-shA2,利用MTT和克隆形成实验从体外观察hRAD51基因沉默对HOS细胞增殖的影响,FCM法检测抑制hRAD51基因表达后细胞周期的变化情况,裸鼠成瘤实验观察降低hRAD51表达对骨肉瘤移植瘤生长情况的影响。结果:成功构建了hRAD51基因沉默细胞株HOS-shA2;体外实验显示,HOS-shA2细胞的增殖能力较亲本及阴性对照细胞明显降低(P<0.01);FCM法检测结果显示,hRAD51基因沉默后G2/M期细胞比例增多(P<0.01);HOS-shA2细胞的裸鼠移植瘤生长速度缓慢,剥离瘤体质量明显轻于亲本HOS组和阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:hRAD51在骨肉瘤细胞增殖中发挥重要作用,有望成为肿瘤治疗的新靶点。 展开更多
关键词 抑制 RAD51 基因表达 骨肉瘤细胞 体内外 增殖能力 in vitro OSTEOSARCOMA 基因沉默 移植瘤生长 裸鼠移植瘤 HOS 阴性对照 细胞增殖 骨肉瘤细胞 克隆形成实验 统计学意义 FCM法 肿瘤治疗 修复基因
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