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低致病性A/Anhui/1/2013(H7N9)流感病毒感染小鼠肺组织的miRNA表达谱分析 预览
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作者 郭艳娜 刘志远 +5 位作者 孙彤彤 黄楠 赵锦华 刘清政 平继辉 周继勇 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期482-490,共9页
[目的]本试验旨在利用基因芯片测序技术分析宿主miRNA在调控流感病毒感染小鼠肺组织过程中的作用。[方法]应用低致病性H 7N 9亚型A/Anhui/1/2013流感病毒及PBS感染BALB/c小鼠,感染后3 d取小鼠肺组织分别利用转录组测序技术和miRNA芯片... [目的]本试验旨在利用基因芯片测序技术分析宿主miRNA在调控流感病毒感染小鼠肺组织过程中的作用。[方法]应用低致病性H 7N 9亚型A/Anhui/1/2013流感病毒及PBS感染BALB/c小鼠,感染后3 d取小鼠肺组织分别利用转录组测序技术和miRNA芯片测序技术筛选差异表达mRNA和miRNA,并利用RT-qPCR验证差异miRNA。之后分别采用Targetscan、PITA及microRNAorg软件预测靶基因并结合转录组mRNA信息筛选候选miRNA的假定靶基因,最后利用Gene Ontology(GO)和Kyoto Encyclopedia of Gene and Genomes(KEGG)分析差异miRNA的生物学功能及其可能调控的信号通路。[结果]与PBS组相比,低致病性H 7N 9病毒感染组共筛选到265个差异表达miRNA,其中143个miRNA显著上调,122个miRNA显著下调。差异表达miRNA经RT-qPCR验证,10条候选miRNA的RT-qPCR结果与芯片结果有非常好的一致性。进一步KEGG分析表明,这些差异表达miRNA主要富集在Rap1、PI3K-Akt、Hippo、MAPK、Wnt、黏着斑、自噬等免疫相关信号通路中。结合差异mRNA信息进行miRNA-mRNA调控网络分析,显示主要有15条差异表达miRNA和31个差异靶基因富集到这些信号通路中。[结论]成功筛选到了低致病性H 7N 9感染小鼠肺组织后引起的差异表达miRNA,且RT-qPCR证明其与基因芯片测序结果表达趋势具有很好的一致性,为深入研究宿主miRNA在调控低致病性H 7N 9流感病毒与宿主相互作用的分子机制奠定了基础。 展开更多
关键词 致病性H7N9流感病毒 MIRNA 基因芯片测序 表达谱
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抗高致病性H7N1禽流感病毒和马立克氏病毒的重组火鸡疱疹病毒活载体疫苗的研究 预览
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作者 Li Y. +1 位作者 刘丹(摘译) 晋大鹏(校) 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第2期 230,共1页
通过不同方法注射一定剂量的疫苗同时抗多种病原,是目前禽类免疫的一个难题。本研究以火鸡疱疹病毒(HVT)为载体表达高致病性H7N1禽流感病毒血凝素(HA)抗原构建同时抗禽流感和马立克氏病的二价活载体疫苗。利用传染性细菌人工染色体... 通过不同方法注射一定剂量的疫苗同时抗多种病原,是目前禽类免疫的一个难题。本研究以火鸡疱疹病毒(HVT)为载体表达高致病性H7N1禽流感病毒血凝素(HA)抗原构建同时抗禽流感和马立克氏病的二价活载体疫苗。利用传染性细菌人工染色体(BAC)克隆技术构建HVT载体。改造携带HTV基因组的BAC,使其表达高致病性H7N1病毒的HA基因,将其转染鸡胚成纤维细胞(CEF)拯救病毒,获得HTV重组体(rHVT-H7HA)。通过分析感染rHVT-H7HA的CEF可知,rHVT-H7HA表达了HA蛋白,且rHVT-H7HA在体外稳定,经多次传代后其在生长动力学上与HTV相同。1日龄雏鸡接种rHVT-H7HA后,能诱导H7特异性抗体,并使攻毒鸡获得对H7N1的特异性保护。接种rHVT-H7HA的鸡中可检测到核蛋白特异性抗体,因此能区分受感染动物和接种疫苗的动物。rHVT-H7HA不仅能对高致病性H7N1病毒和马立克氏病毒强毒的攻毒提供保护,还能作为DIVA疫苗使用。 展开更多
关键词 重组HTV 载体疫苗 多价疫苗 致病性H7N1禽流感病毒 马立克氏病毒
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意大利分离低致病性H7N3禽流感病毒的分子特征[意大利] 预览
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作者 莫战秋 窦相峰 《国外医学:病毒学分册》 2005年第4期 F0003,共1页
通过对2002年10月在意大利分离的低致病流感病毒A/turkey/214845/02和A/turkey/220158/99(H7N3)亚型基质蛋白、表面糖蛋白、核蛋白和聚合酶2的完整编码区的扩增和测序,确定上述毒株与1999-2001禽流感病原A/turkey/Italy/460... 通过对2002年10月在意大利分离的低致病流感病毒A/turkey/214845/02和A/turkey/220158/99(H7N3)亚型基质蛋白、表面糖蛋白、核蛋白和聚合酶2的完整编码区的扩增和测序,确定上述毒株与1999-2001禽流感病原A/turkey/Italy/4603/99(H7N1/4603/99)LPAI毒株的亲缘关系以便分析两者的流行关系。 展开更多
关键词 意大利分离致病性H7N3禽流感病毒 分子特征 亚型基质蛋白 表面糖蛋白
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