期刊文献+
共找到5,352篇文章
< 1 2 250 >
每页显示 20 50 100
乐芮(Luveris)与果纳芬(Gonal-F)对牛未成熟卵母细胞体外发育潜力的影响 预览
1
作者 王雪梅 郭燕京 +6 位作者 高瑞阁 李静 刘昕媛 吴喆 林悠悠 杨丽萍 常彩红 《海南医学院学报》 CAS 2019年第3期161-164,共4页
目的:探讨黄体生成素乐芮药物(Luveris,L)及卵泡刺激素果纳芬药物(Gonal-F,G)对体外未成熟牛卵母细胞成熟培养的影响。方法:购买商品化的牛未成熟卵母细胞2000枚,分为2组,Luveris组及Gonal-F组,每组1000枚。每组根据药物浓度0、5、10、2... 目的:探讨黄体生成素乐芮药物(Luveris,L)及卵泡刺激素果纳芬药物(Gonal-F,G)对体外未成熟牛卵母细胞成熟培养的影响。方法:购买商品化的牛未成熟卵母细胞2000枚,分为2组,Luveris组及Gonal-F组,每组1000枚。每组根据药物浓度0、5、10、20、40IU/mL再分组培养,培养24、48h后,解剖显微镜下评估COCs扩展程度,倒置显微镜下对卵母细胞核成熟(GV,MI,MⅡ)及第一极体排出情况进行评估。结果:Luveris及Gonal-F均随剂量依赖性显著性促进COCs的扩展。L与G培养24h和48h卵母细胞MⅡ成熟率分别是20IU/mLL为33.3%和37.5%,40IU/mLL为33.3%和53.6%;20IU/mLG为15.1%和16.2%;40IU/mLG为38.9%和39.5%。结论:黄体生成素可以像卵泡刺激素一样在卵泡发育早期促进体外牛卵母细胞的成熟发育,可以延迟卵母细胞GVBD。 展开更多
关键词 LH Luveris Gonal-F 卵母细胞 发育潜能 体外成熟 体外培养
在线阅读 免费下载
未成熟卵母细胞体外培养技术研究进展
2
作者 付蕾 《中国妇幼保健》 CAS 2019年第6期1438-1441,共4页
不孕症的医学定义为1年未采取任何避孕措施,性生活正常而没有成功妊娠。据国家计划生育委员会的统计,30年前全国初婚女性不孕症总发生率约为6.89%[1]。近年来,由于社会环境和生活方式的改变,晚婚晚育者、卵巢功能不全者、年轻化肿瘤患... 不孕症的医学定义为1年未采取任何避孕措施,性生活正常而没有成功妊娠。据国家计划生育委员会的统计,30年前全国初婚女性不孕症总发生率约为6.89%[1]。近年来,由于社会环境和生活方式的改变,晚婚晚育者、卵巢功能不全者、年轻化肿瘤患者等都逐年增多,中国不孕症患者比例大幅上升。 展开更多
关键词 体外成熟 未成熟卵母细胞 体外培养
不同培养基与饲养细胞组合对多房棘球绦虫体外培养模型的影响 预览
3
作者 韩振阳 邓子 +1 位作者 王泽宇 张示杰 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第19期3080-3085,共6页
背景:多房棘球绦虫原头节的体外成囊培养是提取与研究其生发层干细胞的实验基础。D-MEM与RPMI-1640是最适宜用于泡球蚴体外培养的商业培养基,HeLa细胞与大鼠肝癌细胞(ATCC No. CRL-1600)也是常用饲养细胞。目的:构建多房棘球绦虫体外培... 背景:多房棘球绦虫原头节的体外成囊培养是提取与研究其生发层干细胞的实验基础。D-MEM与RPMI-1640是最适宜用于泡球蚴体外培养的商业培养基,HeLa细胞与大鼠肝癌细胞(ATCC No. CRL-1600)也是常用饲养细胞。目的:构建多房棘球绦虫体外培养模型,观察泡球蚴在不同饲养细胞[HeLa细胞与大鼠肝癌细胞(ATCC No.CRL-1600)]及含有体积分数10%胎牛血清的不同培养基[D-MEM(高/低糖型)与RPMI-1640]下生长情况。方法:预先培养HeLa细胞及大鼠肝癌细胞(ATCC No.CRL-1600),从新疆石河子大学第一附属院实验动物中心提供的感染多房棘球绦虫6个月以上的种鼠体内提取原头节后分别与不同饲养细胞及培养基体外共同培养。实验经石河子大学医学院第一附属医院医学伦理委员会批准,批准号:2015-018-01,批准时间:2017-04-07。实验根据饲养细胞与培养基组合分为6组,每组加入1×10~6饲养细胞与50mL含体积分数10%胎牛血清的培养基及5000个原头节,Ⅰ组:HeLa细胞与1640培养基培养;Ⅱ组:HeLa细胞与D-MEM(高糖型)培养基培养;Ⅲ组:大鼠肝癌细胞与1640培养基培养;Ⅳ组:大鼠肝癌细胞与D-MEM(高糖型)培养基培养;Ⅴ组:HeLa细胞与D-MEM(低糖型)培养基培养;Ⅵ组:大鼠肝癌细胞与D-MEM(低糖型)培养基培养,观察泡球蚴原头节的生存、生长和发育,每隔7d计算原头蚴成囊率,使用目镜测微尺测量囊泡平均直径大小。结果与结论:①原头蚴在6种组合中均可长期存活,大部分都形成囊泡,囊泡直径分布在1-6 mm;②培养第56天原头蚴成囊率和囊泡平均直径均为大鼠肝癌细胞与D-MEM(高糖型)培养基组效果最佳(P <0.05),成囊率(72.08±1.79)%,囊泡平均直径(3.379±0.199) mm;③囊泡囊液蛋白定量检测结果显示6组囊液蛋白含量均低于体内囊泡,Ⅳ组蛋白含量高于其他5组(P <0.05);④结果证实:同条件下D-MEM(高糖型)培养基囊泡大小与数量优于其他2种培养基。� 展开更多
关键词 泡球蚴 体外培养 培养 饲养细胞 囊泡 葡萄糖 囊液 直径 成囊率 蛋白定量
在线阅读 下载PDF
囊胚移植在辅助生殖技术临床实践中的优势和存在问题 预览
4
作者 王丽娜 田瑛(综述) +1 位作者 赵剑 王海(审校) 《河北医科大学学报》 CAS 2019年第8期988-992,共5页
世界第一例试管婴儿成功给不孕不育家庭带来了希望,但低妊娠率和多胎妊娠并发症给患者带来经济负担和医疗风险。在过去几十年来,由于胚胎体外培养技术的限制,几乎所有生殖中心以移植卵裂期的胚胎为主。为了提高妊娠率,多数生殖中心是通... 世界第一例试管婴儿成功给不孕不育家庭带来了希望,但低妊娠率和多胎妊娠并发症给患者带来经济负担和医疗风险。在过去几十年来,由于胚胎体外培养技术的限制,几乎所有生殖中心以移植卵裂期的胚胎为主。为了提高妊娠率,多数生殖中心是通过移植多胚胎实现的,这样多胎妊娠并发症的风险就随之而来。提高妊娠率、减少多胎妊娠并发症的发生一直是生殖医学面临挑战之一。近年来,随着胚胎培养技术不断地发展和完善,囊胚形成率和种植率逐步提高,单囊胚移植成为保证妊娠率、降低多胎妊娠并发症的有效手段,逐渐成为人类辅助生殖技术领域新的发展方向。 展开更多
关键词 生殖技术 辅助 体外培养 囊胚培养 胚胎移植
在线阅读 免费下载
电场对体外培养软骨细胞的影响 预览
5
作者 刘小利 袁小燕 《中国医药指南》 2019年第16期286-287,共2页
软骨细胞的增殖和分化对软骨缺损的修复有重要作用,电刺激软骨细胞可影响软骨细胞增殖、分化、迁移等过程。为了明确电刺激对软骨细胞行为的影响,探讨了对外加电场刺激体外培养软骨细胞的作用方式、作用结果以及作用机制。
关键词 电场 软骨细胞 电刺激 体外培养
在线阅读 免费下载
体外长期培养细粒棘球蚴原头蚴生长发育规律的研究 预览
6
作者 郭炜 张宏伟 +7 位作者 林芷伊 张永国 雷振 张琪惠 杨凌志 刘国升 吴向未 彭心宇 《石河子大学学报:自然科学版》 CAS 北大核心 2019年第1期40-46,共7页
目的探讨总结体外连续培养细粒棘球蚴原头蚴生长发育的规律。方法在5%CO2培养箱中37℃条件下,以RPMI-1640为基础培养基含20%胎牛血清的单相培养体系中体外培养原头蚴,在倒置显微镜下定期动态观察原头蚴的体积及形态学变化,计算其成囊率... 目的探讨总结体外连续培养细粒棘球蚴原头蚴生长发育的规律。方法在5%CO2培养箱中37℃条件下,以RPMI-1640为基础培养基含20%胎牛血清的单相培养体系中体外培养原头蚴,在倒置显微镜下定期动态观察原头蚴的体积及形态学变化,计算其成囊率、蒂端发泡形成率等指标随时间变化情况,总结其体外培养生长发育规律。结果体外培养原头蚴在第1周开始形成蒂端发泡,在体外培养的前6周,原头蚴的形态学以蒂端发泡为主要变化特征,其数量逐渐增加,体积逐渐增大。第5周可观察到原头蚴外周形成一层角质层,开始向成囊方向发育;原头蚴的体积随培养时间的延长逐渐增大,观察到最大囊的直径约为:1.2mm,在体外培养的第17周部分原头蚴囊外周的角质层开始变得毛糙,囊的体积缩小,其内部结构变得模糊不清,浓缩聚集成团,与外周的角质层有明显的界限,培养至7个月时,90%以上的囊泡出现上述形态学改变;原头蚴的最大成囊率约为11%。结论1、体外培养原头蚴的体积随培养时间的延长存在从小到大再逐渐缩小的规律;2、体外培养原头蚴在成囊发育过程中可出现多种不同的形态学变化,是否存在多种成囊方式还需要进一步验证。 展开更多
关键词 细粒棘球蚴 原头蚴 体外培养 生长规律
在线阅读 免费下载
哺乳动物内耳毛细胞的体外培养
7
作者 Lu-wen ZHANG Xiao-hui CANG +1 位作者 Ye CHEN Min-xin GUAN 《浙江大学学报:B卷英文版》 SCIE CAS CSCD 2019年第2期170-179,共10页
由于内耳的血脑屏障作用,药物渗入到内耳比较困难。新生小鼠内耳毛细胞的体外培养体系的建立,为体外进行支持细胞转分化机制的研究和进行体外药物损伤毛细胞实验等提供实验技术的前提。为了避免毛细胞体外培养过程中污染杂菌,解剖内耳... 由于内耳的血脑屏障作用,药物渗入到内耳比较困难。新生小鼠内耳毛细胞的体外培养体系的建立,为体外进行支持细胞转分化机制的研究和进行体外药物损伤毛细胞实验等提供实验技术的前提。为了避免毛细胞体外培养过程中污染杂菌,解剖内耳耳蜗的整个过程十分重要。处死小鼠后,将其浸泡在75%酒精中1~3分钟,防止鼠毛污染培养基。打开内耳耳蜗之前,选用添加了青霉素的磷酸盐缓冲液(1×PBS);培养过程中使用的是仅仅添加青霉素的培养基来减少对毛细胞的损伤。在基底膜培养的第一步,选用DMEM(包含5%马血清体积比和5%胎牛血清)作为组织粘附培养的培养基,保证足够的营养,同时更好地维持整个基底膜培养状态下的形态。在之后的培养中,选用DMEM(添加了10%胎牛血清、1%N2和1%B27)作为长期的培养基。使用含有表皮生长因子的N2和B27的培养基进行基底膜以及椭圆囊之后的培养,有助于维持毛细胞的体外生长时间。选用鼠尾胶包被盖玻片后培养,可以增加基底膜和椭圆囊的粘附作用,保证毛细胞静纤毛的向上生长。该文章展现了哺乳动物毛细胞的体外培养的具体方法,能够较好地维持耳蜗基底膜在体外培养的形态,并增加毛细胞体外培养的存活时间。 展开更多
关键词 内耳 毛细胞 体外培养
烟草胚状体诱导的影响因素 预览
8
作者 黄子彧 钟军 +3 位作者 宋浩 黄德文 戴彬 戴林建 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2019年第4期751-756,共6页
【目的】为了烟草胚状体诱导培养体系能得到优化。【方法】以2个烟草杂交品种的花药与叶片分别作为试验材料,对影响胚状体诱导的因子:基因型、外源激素浓度及比例、培养条件、接种密度等进行对比研究。【结果】所有的供试材料均可被诱... 【目的】为了烟草胚状体诱导培养体系能得到优化。【方法】以2个烟草杂交品种的花药与叶片分别作为试验材料,对影响胚状体诱导的因子:基因型、外源激素浓度及比例、培养条件、接种密度等进行对比研究。【结果】所有的供试材料均可被诱导出烟草胚状体,但不同基因型间诱导率差异显著,且花药被诱导出胚状体的能力要强于叶片;在IAA与6-BA浓度不超过0.5mg/L时,胚状体诱导率较不加激素能得到显著提升,超过该浓度后,随着激素浓度的提升反而会使胚状体诱导率下降,愈伤组织诱导率上升;进行10d的暗处理能显著提升胚状体的诱导率。【结论】诱导胚状体产生的最佳培养条件为采用叶片为诱导材料,每培养皿接种35颗,使用1/2MS+0.125mg/LIAA+0.5mg/L6-BA培养基,在黑暗条件下诱导10d后,再转移至光照下培养。 展开更多
关键词 烟草 体外培养 胚状体
在线阅读 下载PDF
异虎耳草素对原代海马神经元细胞抑制性神经递质及其受体基因表达的影响
9
作者 郝雨蒙 王若瑜 +4 位作者 仲启明 仝立国 宋美卿 杨钤 冯玛莉 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第14期93-98,共6页
目的:观察异虎耳草素对原代海马神经元细胞γ-氨基丁酸(GABA),5-羟色胺(5-HT)含量及受体基因表达的影响,探讨其催眠作用机制。方法:体外培养SD乳鼠原代海马神经元细胞,在细胞生长状态最佳时,经神经元特异性烯醇化酶(NSE)免疫组化鉴定纯... 目的:观察异虎耳草素对原代海马神经元细胞γ-氨基丁酸(GABA),5-羟色胺(5-HT)含量及受体基因表达的影响,探讨其催眠作用机制。方法:体外培养SD乳鼠原代海马神经元细胞,在细胞生长状态最佳时,经神经元特异性烯醇化酶(NSE)免疫组化鉴定纯度并给药。分为空白组,地西泮组(25 mg·L^-1),异虎耳草素低、中、高剂量组(5,10,20 mg·L^-1),共5组,给药24 h后流式细胞术检测海马神经元细胞早期凋亡率,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测细胞上清液GABA,5-HT含量,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测细胞内γ-氨基丁酸A型受体(GABAA)基因GABRA1,GABRA5,GABRB2,γ-氨基丁酸B型受体(GABAB)基因GABBR1,5-羟色胺1A型受体(5-HT1A)基因5-HT1A(A),5-HT1A(B),5-HT1A(C)表达的变化。结果:第7天海马神经元细胞生长状态良好,鉴定纯度> 90%;与空白组比较,海马神经元细胞早期凋亡率异虎耳草素中、高剂量组显著降低(P <0. 01),GABA含量异虎耳草素高剂量组显著升高(P <0. 01),GABRA1,GABRA5,5-HT1A(A),5-HT1A(C)mRNA表达异虎耳草素中、高剂量组显著升高(P <0. 05,P <0. 01),GABBR1,5-HT1A(B)mRNA表达异虎耳草素各组均显著升高(P <0. 05,P <0. 01)。结论:异虎耳草素催眠作用机制可能与抑制海马神经元细胞凋亡,升高抑制性神经递质GABA含量,上调GABA与5-HT相关受体基因表达有关。 展开更多
关键词 异虎耳草素 海马神经元细胞 抑制性神经递质 细胞凋亡 体外培养
激素替代治疗解冻移植周期中体外培养时间对卵裂期胚胎移植临床结局的影响 预览
10
作者 董玲凤 张静雯 +3 位作者 黄建洲 池霖生 陈棪焜 马文敏 《生殖医学杂志》 CAS 2019年第1期71-73,共3页
目的研究体外培养时间对激素替代治疗-冻融胚胎移植(HRT-FET)周期中解冻优质卵裂期胚胎临床结局的影响。方法回顾性分析2016年1月1日至2017年12月31日期间在我院生殖中心实施HRT-FET助孕治疗的270个周期的临床资料。根据解冻后不同的体... 目的研究体外培养时间对激素替代治疗-冻融胚胎移植(HRT-FET)周期中解冻优质卵裂期胚胎临床结局的影响。方法回顾性分析2016年1月1日至2017年12月31日期间在我院生殖中心实施HRT-FET助孕治疗的270个周期的临床资料。根据解冻后不同的体外培养时间分为两组:正常解冻组(168个周期):移植当天早上解冻,解冻后体外培养2~3h移植;提前解冻组(102个周期):移植前1d解冻,体外培养17~18h后移植。比较两组患者的临床妊娠率、种植率、早期流产率。结果两组患者的女方年龄、不孕年限、体重指数(BMI)及子宫内膜厚度等一般资料比较均无显著性差异(P>0.05)。提前解冻组与正常解冻组的临床妊娠率(58.82%vs.58.33%)、胚胎种植率(38.73%vs.39.58%)、早期流产率(11.67%vs.9.18%)比较均无显著性差异(P>0.05)。结论HRT-FET周期中,延长解冻后优质卵裂期胚胎的体外培养时间不能显著改善临床结局。 展开更多
关键词 激素替代治疗 冻融胚胎移植 卵裂期胚胎 体外培养 临床结局
在线阅读 免费下载
软骨仿生环境下的培养在软骨组织工程中的研究进展 预览
11
作者 袁礼波(综述) 徐永清(审校) 《云南医药》 CAS 2019年第1期71-74,共4页
关节软骨为透明软骨,富有弹性,摩擦因数小,能吸收关节间振荡,是维持关节功能的重要结构,临床上因多种原因导致的关节软骨缺损的发病率很高,由于关节软骨中无神经、血管,自愈能力较差,因此,关节软骨自身修复能力有限,即使是小的关节软骨... 关节软骨为透明软骨,富有弹性,摩擦因数小,能吸收关节间振荡,是维持关节功能的重要结构,临床上因多种原因导致的关节软骨缺损的发病率很高,由于关节软骨中无神经、血管,自愈能力较差,因此,关节软骨自身修复能力有限,即使是小的关节软骨损伤也可能导致关节软骨退行性病变[1]。目前的治疗方法如软骨移植、微骨折等已经被广泛的应用于关节软骨的损伤修复[2],但是,研究结果显示,这些方法都存在一些技术上的局限性,均不能实现长期的软骨修复。 展开更多
关键词 软骨 支架 生长因子 软骨组织工程 体外培养
在线阅读 下载PDF
角膜缘干细胞研究新进展 预览
12
作者 李典睿 周善璧 《国际眼科杂志》 CAS 北大核心 2019年第1期63-65,共3页
位于角膜最外层的角膜上皮细胞,正常损耗或创伤后,由角膜缘干细胞不断自我更新补充。当损伤等致角膜缘干细胞缺乏时,则会导致角膜溃疡、新生血管、混浊等角膜病变而影响视力。目前治疗这些角膜疾病的重要方式之一为移植体外培养的角膜... 位于角膜最外层的角膜上皮细胞,正常损耗或创伤后,由角膜缘干细胞不断自我更新补充。当损伤等致角膜缘干细胞缺乏时,则会导致角膜溃疡、新生血管、混浊等角膜病变而影响视力。目前治疗这些角膜疾病的重要方式之一为移植体外培养的角膜缘干细胞。本文将从角膜缘干细胞的定位、体外培养、新细胞来源等方面进行综述。 展开更多
关键词 角膜缘 干细胞 标志物 载体 体外培养
在线阅读 下载PDF
人羊膜上皮细胞的体外培养及诱导分化
13
作者 白立恒 张钰堃 +2 位作者 刘默凝 李岩 曹贵方 《内蒙古大学学报:自然科学版》 CAS 北大核心 2019年第2期162-170,共9页
人羊膜上皮细胞由外胚层发育而来,属于成体干细胞,具有来源广泛、免疫原性低、非致瘤性、不存在医学伦理道德限制等优点.研究目的:建立人羊膜上皮细胞的体外分离培养的方法,检测其向三胚层诱导分化培养潜能.在无菌条件下机械分离羊膜,... 人羊膜上皮细胞由外胚层发育而来,属于成体干细胞,具有来源广泛、免疫原性低、非致瘤性、不存在医学伦理道德限制等优点.研究目的:建立人羊膜上皮细胞的体外分离培养的方法,检测其向三胚层诱导分化培养潜能.在无菌条件下机械分离羊膜,使用胰蛋白酶分步消化法收集人羊膜上皮细胞,体外培养,观察其细胞形态与生长规律;并通过免疫细胞化学法,RTPCR及三胚层定向诱导等方法对其进行鉴定.结果:成功从人羊膜中分离得到纯度较高的人羊膜上皮细胞.免疫细胞化学法鉴定结果显示,分离到的羊膜上皮细胞内的角蛋白19呈阳性;RT-PCR鉴定干细胞标志基因REX1、Oct-4和Nanog,在mRNA水平均有表达;定向诱导条件下,人羊膜上皮细胞可向成脂、成神经和成肝样细胞分化.结论:人羊膜上皮细胞可在体外分离培养,具有干细胞特性,可以定向诱导分化成内胚层、中胚层、和三胚层三个胚层组织与细胞. 展开更多
关键词 羊膜上皮细胞 体外培养 诱导分化
松辽黑猪睾丸支持细胞的制备、体外培养及鉴定
14
作者 李欣 赵中利 +4 位作者 罗晓彤 朴庆林 张琪 金海国 于永生 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第5期55-57,178共4页
为了进一步研究精子生成过程,试验采用两步消化法和差速贴壁法分离了松辽黑猪睾丸支持细胞,利用油红O脂肪染色、RT-PCR和细胞生长曲线对分离的细胞进行了鉴定和分析。结果表明:在支持细胞胞质两极或细胞核核膜周围可见圆而大的脂肪滴,... 为了进一步研究精子生成过程,试验采用两步消化法和差速贴壁法分离了松辽黑猪睾丸支持细胞,利用油红O脂肪染色、RT-PCR和细胞生长曲线对分离的细胞进行了鉴定和分析。结果表明:在支持细胞胞质两极或细胞核核膜周围可见圆而大的脂肪滴,可检测到支持细胞标志基因GATA4、Sox9和INHB在分离的细胞中表达,细胞生长曲线符合细胞生长规律。 展开更多
关键词 松辽黑猪 睾丸支持细胞 两步消化法 差速贴壁法 体外培养 油红O脂肪染色 RT-PCR
藏羊巨型住肉孢子虫体外培养方法的建立 预览
15
作者 苏晓雪 康明 《动物医学进展》 北大核心 2019年第4期32-35,共4页
为了建立青海藏羊巨型住肉孢子虫体外培养方法,以贴壁生长和形态完整的非洲绿猴肾细胞(Vero)作为宿主细胞,将青海藏羊巨型住肉孢子虫缓殖子(1.25×10^4个/mL)接种于宿主细胞,连续培养21d,期间观察记录其生长发育状况。结果表明,藏... 为了建立青海藏羊巨型住肉孢子虫体外培养方法,以贴壁生长和形态完整的非洲绿猴肾细胞(Vero)作为宿主细胞,将青海藏羊巨型住肉孢子虫缓殖子(1.25×10^4个/mL)接种于宿主细胞,连续培养21d,期间观察记录其生长发育状况。结果表明,藏羊巨型住肉孢子虫在Vero细胞中生长良好,并在培养液中观察到游离的虫体卵囊,21d后均可分离、纯化出新一代的缓殖子。说明在实验室条件下,成功建立了藏羊巨型住肉孢子虫稳定的体外培养方法。 展开更多
关键词 青海藏羊 非洲绿猴肾细胞 巨型住肉孢子虫 体外培养
在线阅读 下载PDF
间充质干细胞细胞外基质改变脂肪来源干细胞微环境影响其生物学行为的机制分析
16
作者 李子超 易晓巍 易成刚 《中华整形外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期361-366,共6页
目的探究通过加入间充质干细胞产生的细胞外基质,从而改变肪来源干细胞的微环境后,使得脂肪来源干细胞增殖转化功能改善的核心分子和作用机制。方法采用生物信息学方法,从基因表达谱芯片数据库中获取12组供体的转录组信息,并分为4组:Ad ... 目的探究通过加入间充质干细胞产生的细胞外基质,从而改变肪来源干细胞的微环境后,使得脂肪来源干细胞增殖转化功能改善的核心分子和作用机制。方法采用生物信息学方法,从基因表达谱芯片数据库中获取12组供体的转录组信息,并分为4组:Ad on NHDF组,记录在聚苯乙烯培养基中加入人新生儿真皮成纤维细胞的细胞外基质后,脂肪来源干细胞的转录组表达情况;Ad on Bm组,记录在聚苯乙烯培养基加入骨髓来源间充质干细胞的细胞外基质后,脂肪来源干细胞的转录组表达情况;Ad on Ad组,记录在聚苯乙烯培养基加入脂肪来源干细胞的细胞外基质后,脂肪来源干细胞的转录组表达情况;Ad on TCPS组,记录脂肪来源干细胞在单纯的聚苯乙烯培养基的转录组表达情况。采用京都基因与基因组百科全书、基因本体、基因集合富集分析等富集分析手段,并利用软件R、Perl、Cytoscape进行差异分析和数据可视化。结果每种间充质干细胞产生其特定的细胞外基质,但在加入不同的细胞外基质培养基培养后的脂肪来源干细胞,都共享部分差异表达的基因和蛋白,如编码胶原家族基因。通过进一步将共享差异基因和功能集团构建蛋白互作关系,最终确定出改变微环境后影响脂肪来源干细胞增殖分化的3个重要分子COL4A1、COL11A1、COL15A1,分子的低表达可能与细胞修复、核苷酸代谢、DNA复制和细胞周期等多种生物学反应和信号通路相关。结论加入间充质干细胞产生的细胞外基质培养基培养的脂肪来源干细胞,编码胶原的基因表达量显著下调,并通过多种途径参与脂肪来源干细胞的增殖分化。 展开更多
关键词 脂肪来源干细胞 间充质干细胞 体外培养 编码胶原基因 富集分析
改良人子宫肌瘤原代细胞体外培养的建立及效果 预览
17
作者 胡光云 宋阳 +3 位作者 孙哲 甄玉花 全小明 王一飞 《广西医学》 CAS 2019年第5期586-589,共4页
目的探讨人子宫肌瘤原代细胞体外培养的改良方法。方法分别采用常规法和改良法获取人子宫肌瘤细胞,并进行原代培养和传代培养。应用光学显微镜、电子透射显微镜观察原代及传代培养细胞的形态学及生长特性;采用平滑肌肌动蛋白及细胞免疫... 目的探讨人子宫肌瘤原代细胞体外培养的改良方法。方法分别采用常规法和改良法获取人子宫肌瘤细胞,并进行原代培养和传代培养。应用光学显微镜、电子透射显微镜观察原代及传代培养细胞的形态学及生长特性;采用平滑肌肌动蛋白及细胞免疫组化法对细胞进行鉴定及纯度评估。比较两种方法获取的细胞数、细胞贴壁率、首次成功传代时间、传代次数以及复苏成功情况。结果免疫组化鉴定结果显示两组细胞平滑肌肌动蛋白抗体呈阳性反应。改良组获得细胞数多于常规组,细胞贴壁率高于常规组,首次传代时间短于常规组(均P <0. 05)。两组传代次数及冻存后复苏成功情况差异均无统计学意义(均P>0. 05)。结论改良后的细胞培养技术可以较快获得较多数量的人子宫肌瘤细胞原代。 展开更多
关键词 子宫肌瘤 原代细胞 体外培养 改良方法
在线阅读 下载PDF
分离培养原代树鼩角膜基质细胞 预览
18
作者 张璐 李妍 +2 位作者 孙子雯 李楠钰 胡竹林 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2019年第5期109-115,共7页
目的探索一种简单、易行的体外快速、分离培养树鼩角膜基质细胞(corneal stromal cells, CSCs)的方法。方法实验分为实验组 A 和实验组 B,取树鼩角膜基质层,实验组 A 剪碎,用 1%的Ⅱ型胶原酶消化 60 min,离心后重悬接种;实验组 B 用Ⅱ... 目的探索一种简单、易行的体外快速、分离培养树鼩角膜基质细胞(corneal stromal cells, CSCs)的方法。方法实验分为实验组 A 和实验组 B,取树鼩角膜基质层,实验组 A 剪碎,用 1%的Ⅱ型胶原酶消化 60 min,离心后重悬接种;实验组 B 用Ⅱ型胶原酶联合中性蛋白酶消化。比较记录原代及传代细胞生长情况、传代时间,细胞行波形蛋白免疫组化及免疫荧光鉴定。结果胶原酶消化法可成功的获取原代细胞, 9 d 后即可进行传代,细胞形态好;传代细胞生长较快,2~3d即可传一代;双酶消化法获得的CSCs较少,10d才可见少量散落细胞,15~20 d 可传代;波形蛋白免疫组化及免疫荧光表达阳性。结论两种方法均可成功培养出 CSCs,但胶原酶消化法能更容易高效分离培养出大量树鼩 CSCs。 展开更多
关键词 角膜基质细胞 体外培养 树鼩 组织工程
在线阅读 下载PDF
胚胎大鼠脊髓神经干细胞体外培养向胆碱能神经元的分化 预览
19
作者 张潇 张金枝 +1 位作者 刘真真 林艳 《临床和实验医学杂志》 2019年第7期676-680,共5页
目的在一定条件下对胚胎大鼠脊髓神经干细胞进行体外培养与诱导,观察其向胆碱能神经元的分化情况,并进行鉴定。方法选取孕龄17d的Wistar大鼠5只,利用胚胎大鼠进行脊髓源神经干细胞分离与培养,并进行神经上皮干细胞蛋白(Nestin)的细胞免... 目的在一定条件下对胚胎大鼠脊髓神经干细胞进行体外培养与诱导,观察其向胆碱能神经元的分化情况,并进行鉴定。方法选取孕龄17d的Wistar大鼠5只,利用胚胎大鼠进行脊髓源神经干细胞分离与培养,并进行神经上皮干细胞蛋白(Nestin)的细胞免疫荧光鉴定。对神经干细胞进行胆碱能神经元定向诱导分化,对照组为单纯诱导培养基,其余各组以诱导培养基为基础,添加生长因子,分为维甲酸(RA)组、音猬因子(SHH)组、SHH+神经营养因子-3(NT-3)组、SHH+RA组,每组1只。细胞诱导分化14d后,进行细胞免疫荧光染色,观察各组胆碱乙酰转移酶(ChAT)阳性细胞比率与细胞分化情况。结果经诱导分化后,神经干细胞向胆碱能神经元进行分化。培养14d,大部分神经细胞从神经干细胞球中央迁出,神经细胞间突起发生交错,呈现出网状结构。经免疫荧光检测,可观察到细胞胞质呈现出红色荧光。对照组未发现ChAT阳性细胞,SHH、RA诱导组可观察到少量的ChAT阳性细胞,SHH+NT-3组和SHH+RA组则可以观察到较多的ChAT阳性细胞。经统计学比较,SHH+NT-3组和SHH+RA组ChAT阳性细胞比率均显著高于对照组、RA组、SHH组,差异均具有统计学意义(P<0.05),且SHH+NT-3组和SHH+RA组组间比较,对照组、RA组、SHH组两两比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论在添加一定生长因子的条件下对胚胎大鼠脊髓神经干细胞进行体外培养,可以诱导其向胆碱能神经元分化。 展开更多
关键词 胚胎大鼠 脊髓神经干细胞 体外培养 胆碱能神经元 细胞诱导 细胞分化 鉴定
在线阅读 下载PDF
小鼠鸡卵巢颗粒细胞分离培养方法的比较与优化 预览
20
作者 扆妍妍 侯雅鑫 +3 位作者 张宇瞳 孙娜 孙耀贵 李宏全 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2019年第1期23-27,I0001共6页
本试验通过分离与培养小鼠、鸡不同等级卵泡颗粒细胞,比较其培养和形态差异,并对提取方法进行优化。试验选取3周龄雌性昆明系小鼠,200日龄的海蓝褐蛋鸡,分别采用优化的方法分离培养卵巢颗粒细胞,通过观察细胞形态、H.E.染色和间接免疫荧... 本试验通过分离与培养小鼠、鸡不同等级卵泡颗粒细胞,比较其培养和形态差异,并对提取方法进行优化。试验选取3周龄雌性昆明系小鼠,200日龄的海蓝褐蛋鸡,分别采用优化的方法分离培养卵巢颗粒细胞,通过观察细胞形态、H.E.染色和间接免疫荧光,对比不同种属颗粒细胞提取方法、培养条件及生长状态。结果表明,与采用机械法分离的小鼠卵巢颗粒细胞相比,采用酶消化法分离的鸡不同等级卵泡颗粒细胞贴壁较快、生长速度快、伪足较多。分析得出小鼠与鸡不同等级卵泡颗粒细胞的分离,培养条件均有差异,且对已有提取方法进行优化,所培养的颗粒细胞状态良好。 展开更多
关键词 小鼠 不同等级卵泡 卵巢颗粒细胞 体外培养
在线阅读 下载PDF
上一页 1 2 250 下一页 到第
使用帮助 返回顶部 意见反馈