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渗透剂对白刺花体细胞胚成熟及萌发的影响 预览
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作者 吴丽芳 魏晓梅 《广西植物》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期1107-1114,共8页
该研究以蔗糖、麦芽糖、山梨醇及PEG(6000)为渗透剂,探讨了不同渗透剂对白刺花体细胞胚发育、胚成熟及萌发的影响。结果表明:白刺花下胚轴形成的胚性愈伤组织接种至MS+2,4-D 0.2 mg·L^-1+NAA 1.0 mg·L^-1+6-BA 2.0 mg·L^... 该研究以蔗糖、麦芽糖、山梨醇及PEG(6000)为渗透剂,探讨了不同渗透剂对白刺花体细胞胚发育、胚成熟及萌发的影响。结果表明:白刺花下胚轴形成的胚性愈伤组织接种至MS+2,4-D 0.2 mg·L^-1+NAA 1.0 mg·L^-1+6-BA 2.0 mg·L^-1+TDZ 1.0 mg·L^-1+蔗糖40 g·L-1+谷氨酰胺100 mg·L^-1+植物凝胶3 g·L-1的培养基上,体细胞胚发生率高达66.21%,总胚数为79个;7%蔗糖可使体细胞胚成熟率高达64.36%,同时也可提高多子叶畸形胚形成;2%麦芽糖+2%山梨醇+4%蔗糖组合使体细胞胚成熟率最高达88.89%,畸形胚比例最低;30 g·L-1 PEG培养时,体细胞成熟率最高,为82.35%;鱼雷期的体细胞胚最合适转接,可使体胚萌发率达90.58%,复合糖上培养得到的成熟体细胞胚生根率最高,为87.47%。这为实现白刺花体细胞胚育苗奠定了理论基础,并提供了可行的方案。 展开更多
关键词 白刺花 渗透剂 体细胞 体细胞成熟 体细胞萌发
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不同红蓝配比的光质对棉花体细胞胚胎发生和植株再生的影响 预览
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作者 魏喜 王倩华 +4 位作者 葛晓阳 陈艳丽 丁颜朋 赵明哲 李付广 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期968-980,共13页
【目的】设置不同的光质组合,明确不同光质对棉花体细胞胚胎发生的影响,为提高棉花体细胞胚胎发生能力和加快棉花转基因过程提供依据。【方法】分别设置不同红蓝配比的光质组合B﹕R(蓝﹕红)=1﹕1、B﹕R(蓝﹕红)=3﹕1、B﹕R(蓝﹕红)=1﹕3... 【目的】设置不同的光质组合,明确不同光质对棉花体细胞胚胎发生的影响,为提高棉花体细胞胚胎发生能力和加快棉花转基因过程提供依据。【方法】分别设置不同红蓝配比的光质组合B﹕R(蓝﹕红)=1﹕1、B﹕R(蓝﹕红)=3﹕1、B﹕R(蓝﹕红)=1﹕3和DL(日光灯),将CCRI12(中棉所12)棉花下胚轴切段依次在愈伤诱导培养基上(callus induction medium,CIM)、胚性愈伤组织诱导培养基上(embryogenic callus differentiation medium,ECDM)、体细胞胚诱导培养基上(embryoid induction medium,EIM)和再生植株诱导培养基(regenerated-plantlet induced medium,RIM)上培养。统计在4种不同光质配比下,体细胞胚胎发生各个阶段对应的指标,包括愈伤增殖率(callus proliferation rate,CPR)、愈伤增殖量、胚性愈伤分化率、体细胞胚数量、生根率、下胚轴数量、再生棉花植株数量、叶绿素浓度等。【结果】与B﹕R=1﹕3和DL光质组合相比,B﹕R=1﹕1和B﹕R=3﹕1的光质组合均显著促进了愈伤的增殖率,但抑制体细胞胚长出下胚轴;与B﹕R=1﹕1和B﹕R=3﹕1相比,B﹕R=1﹕3和DL光质组合均促进胚性愈伤分化和诱导体细胞胚的产生,在诱导下胚轴生根方面,B﹕R=1﹕1组合生根率明显高于其他3种处理;B﹕R=1﹕3和B﹕R=1﹕1处理后下胚轴成苗数、植株高度和叶绿素浓度明显高于B﹕R=3﹕1和DL光质组合,B﹕R=1﹕3的促进效果最明显。【结论】明确了不同光质组合在体细胞胚胎发生各个阶段的调控作用,在体细胞胚胎发生各个阶段可以选择性地应用最优的光质组合。其中红蓝配比为B﹕R=1﹕3的光质组合在整体上能促进棉花体细胞胚胎的发生。 展开更多
关键词 陆地棉 红蓝光配比 体细胞胎发生 愈伤 性愈伤 体细胞 再生苗
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杧果幼胚发育阶段对离体培养物诱导效果的影响 预览
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作者 许文天 武红霞 +6 位作者 高玉尧 李丽 梁清志 马小卫 姚全胜 詹儒林 王松标 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期1704-1711,共8页
【目的】明确幼胚愈伤诱导和胚抢救最佳时期,为杧果高效体胚发生体系构建及胚抢救技术有效利用提供依据。【方法】以‘热农1号’杧果为材料,探讨幼胚不同发育时期和植物生长调节剂对愈伤组织诱导的影响,同时比较了幼胚不同发育时期对幼... 【目的】明确幼胚愈伤诱导和胚抢救最佳时期,为杧果高效体胚发生体系构建及胚抢救技术有效利用提供依据。【方法】以‘热农1号’杧果为材料,探讨幼胚不同发育时期和植物生长调节剂对愈伤组织诱导的影响,同时比较了幼胚不同发育时期对幼胚萌发的影响。【结果】授粉后25 d幼胚处于球形胚期,30 d处于心形胚期,35 d处于鱼雷胚期,40 d之后处于子叶胚期。授粉后40 d早期子叶胚愈伤组织诱导率显著高于其他时期;早期子叶胚在含有3.0 mg·L^-12,4-D、1.0 mg·L^-1 KT(或0.5 mg·L^-1 KT及0.5 mg·L^-1 ZT)培养基(PM3和PM4)中愈伤组织诱导率最高,为54.4%~62.2%,显著高于其他培养基。授粉后35 d鱼雷胚的萌发率最高,为47.2%,显著高于其他时期。愈伤组织能经体胚发生途径正常成苗,幼胚萌发后也能正常发育成苗。【结论】‘热农1号’杧果幼胚愈伤诱导最适宜的时期是早期子叶胚,胚抢救最适宜的时期是鱼雷胚阶段。 展开更多
关键词 杧果 体细胞 抢救 发育时期 细胞学观察
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油棕细胞悬浮培养及植株再生技术 预览
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作者 潘登浪 邹积鑫 +2 位作者 曾宪海 林位夫 Khengtuan Chean 《广东农业科学》 CAS 2019年第2期59-65,173共8页
【目的】建立油棕胚性体细胞悬浮培养植株再生技术体系,为油棕优株无性系种植材料高效繁育、细胞生物学研究、生物技术育种研究等提供技术平台和参考。【方法】以源于成龄油棕芯叶的瘤状愈伤组织为材料,采用不同质量浓度2,4-D、麦草畏... 【目的】建立油棕胚性体细胞悬浮培养植株再生技术体系,为油棕优株无性系种植材料高效繁育、细胞生物学研究、生物技术育种研究等提供技术平台和参考。【方法】以源于成龄油棕芯叶的瘤状愈伤组织为材料,采用不同质量浓度2,4-D、麦草畏与德夸霉素组合诱导易碎胚性愈伤组织,分析不同激素质量浓度及其组合对油棕体细胞悬浮系增殖与后续体胚发育的影响。【结果】0.1 mg/L德夸霉素与一定浓度2,4-D或麦草畏组合,促进胚性愈伤组织形成,0.1 mg/L德夸霉素与1 mg/L麦草畏组合诱导易碎胚性愈伤组织较佳,诱导率为28.67%;用生长旺盛、质地松散的易碎胚性愈伤组织悬浮培养21 d可建立生长状态较均一、分散性好的悬浮细胞系;0.3 mg/L德夸霉素与1 mg/L麦草畏组合较有利于悬浮细胞系增殖和后续体胚发育;将悬浮细胞系转到MS+谷氨酰胺100 mg/L +蔗糖30g/L培养基上,于28(±2)℃、2 000 lx下进行胚诱导培养,每两周更换新培养基1次,培养60 d可获得直径大于1 mm的胚,最高每瓶295粒;将大于1 mm的胚转到固体培养基培养可获得再生植株。【结论】适当质量浓度德夸霉素与2,4-D或麦草畏组合,促进油棕芯叶瘤状愈伤组织形成易碎胚性愈伤组织;用生长旺盛、质地松散的易碎胚性愈伤组织悬浮培养21 d可建立生长状态较均一、分散性好的悬浮细胞系;初步发现含适当质量浓度德夸霉素与麦草畏液体培养基利于悬浮细胞系增殖和后续体胚发育。 展开更多
关键词 油棕 性愈伤组织 悬浮培养 体细胞 油料作物
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枣幼胚体细胞胚发生发育的组织学观察 预览 被引量:1
5
作者 任海燕 弓桂花 +2 位作者 王永康 赵爱玲 薛晓芳 《农学学报》 2019年第3期32-35,共4页
为深入研究枣体细胞胚胎发生的形态建成过程,以‘小梨枣’幼胚为材料,采用苏木精-伊红法染色和石蜡切片技术对体细胞胚发生、发育进行了组织学观察。结果表明:胚型愈伤组织细胞体积小,细胞核大,细胞质浓,细胞排列紧密;而非胚性愈伤组织... 为深入研究枣体细胞胚胎发生的形态建成过程,以‘小梨枣’幼胚为材料,采用苏木精-伊红法染色和石蜡切片技术对体细胞胚发生、发育进行了组织学观察。结果表明:胚型愈伤组织细胞体积小,细胞核大,细胞质浓,细胞排列紧密;而非胚性愈伤组织细胞体积大,细胞核小,细胞质稀薄。体细胞胚产生于幼胚愈伤组织的表层细胞或内部细胞,且发生不同步,其发育过程与合子胚发育过程相似,即经历球形期、心形期和鱼雷期,最终形成子叶形胚。 展开更多
关键词 体细胞 组织学观察
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早实核桃体细胞胚发生和植株再生的影响因素研究 预览
6
作者 常英英 张启香 +2 位作者 宋晓波 査巍巍 裴东 《林业科学研究》 CSCD 北大核心 2019年第3期34-39,共6页
[目的]建立2种早实核桃高效和稳定的体胚发生体系,为离体快繁技术及其基础研究提供技术和理论支撑,也为核桃遗传转化体系的构建奠定基础。[方法]分别以实生核桃‘林早香’和嫁接核桃‘中林6号’花后4277d的幼胚为试材进行离体培养,通过... [目的]建立2种早实核桃高效和稳定的体胚发生体系,为离体快繁技术及其基础研究提供技术和理论支撑,也为核桃遗传转化体系的构建奠定基础。[方法]分别以实生核桃‘林早香’和嫁接核桃‘中林6号’花后4277d的幼胚为试材进行离体培养,通过统计体胚诱导率,筛选体胚的最佳诱导时期;统计多次继代的体胚畸变率,并筛选最适ABA调节浓度;选取发育成熟的体胚进行饱和NH4NO3溶液脱水处理,分别处理0、24、48、72、96和120h后统计失水量和转株率,探讨脱水程度对体胚植株再生的影响。[结果]外植体的发育时期对体胚发生至关重要,以‘林早香’和‘中林6号’幼胚为外植体进行体胚诱导,最佳诱导时期分别为花后约49d和56d,体胚诱导率分别为88.32%和86.67%。体胚经多次继代培养后产生较高畸变率,适量ABA处理不仅降低体胚畸变率,且提高体胚发生率,最佳ABA调节浓度为1.0mg·L^-1。随着体胚脱水时间的延长,体胚失水量逐渐增加,植株再生率先升高后降低,脱水72h时,‘林早香’和‘中林6号’的体胚萌发率达到最高,分别为56.67%和53.33%,此时失水量分别为38.73%和40.56%。[结论]早实核桃幼果发育过程中,合子胚的体胚发生率随着发育时期变化,适宜发育时期是提高体胚诱导发生的关键;适量ABA在体胚多次继代培养过程中对畸形胚起重要调节作用;适度的脱水处理对核桃体胚再生具有良好的促进作用。 展开更多
关键词 早实核桃 体细胞 植株再生
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天山云杉体细胞胚的成熟及萌发条件 预览
7
作者 依巴代提·木合旦尔 伊丽米努尔 +1 位作者 张毓涛 刘康 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第8期176-183,共8页
【目的】建立天山云杉体细胞胚成熟及萌发阶段的适宜培养条件,为该树种的体细胞胚大规模繁殖和工厂化生产提供基础。【方法】以天山云杉成熟合子胚为外植体所诱导形成的胚性愈伤组织为材料,通过14个株系、4种成熟培养基、接种量(100、15... 【目的】建立天山云杉体细胞胚成熟及萌发阶段的适宜培养条件,为该树种的体细胞胚大规模繁殖和工厂化生产提供基础。【方法】以天山云杉成熟合子胚为外植体所诱导形成的胚性愈伤组织为材料,通过14个株系、4种成熟培养基、接种量(100、150、200mg的新鲜胚性愈伤组织)、ABA浓度(1.9、3.8、7.6、19、38μmol·L^-1)等体细胞胚成熟培养条件,以及对不同起源(体细胞胚、合子胚和种子)的幼苗形态特征的比较,筛选出最优的天山云杉体细胞胚成熟与萌发条件。采用SPSS18.0等统计软件对体细胞胚进行统计分析。【结果】1)天山云杉14个株系诱导体细胞胚的结果表明,不同株系在同一成熟培养基上诱导体细胞胚的数量存在差异;其中4个株系及其接种量对体细胞胚形成数量影响的结果表明,不同株系及其接种量诱导体细胞胚的数量也存在差异,当接种量为100mg时,T36株系的体细胞胚诱导数量最高,为3470±546个,显著高于其他接种量和株系(P<0.05)。2)在4种不同成熟培养基上,均形成了成熟的体细胞胚,在1/2BLG+30g·L^-1麦芽糖培养基上形成的体细胞胚数量高于其他培养基,分别为2044个(T6株系)和2282个(T36株系),且与其他培养基差异显著(P<0.05)。3)不同ABA浓度对天山云杉体细胞胚诱导数量的影响无显著性差异(P>0.05),在ABA浓度为1.9~38μmol·L^-1时,其体细胞胚平均诱导数量为2850~2913个,其中以7.6μmol·L^-1ABA的浓度处理效果较好,平均获得2913个正常体细胞胚,高于其他处理。4)将不同起源(体细胞胚、合子胚和成熟种子)萌发的小植株进行对比,结果表明,体细胞胚和合子胚幼苗发育阶段基本一致,但合子胚的幼苗比体细胞胚的幼苗约大1倍,但二者间差异不显著(P>0.05);体细胞胚与合子胚子叶的平均数量一致,二者无显著差异(P>0.05),多数幼苗子叶数量为7~8个。【结论】天山云杉体细胞胚成熟阶段的� 展开更多
关键词 天山云杉 体细胞 脱落酸
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巴西橡胶树体胚胚性愈伤组织悬浮系的建立和植株再生
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作者 栾林莉 宋玉凤 +1 位作者 侯辛辛 陈健妙 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期2614-2621,共8页
以巴西橡胶树‘热研7-33-97’品种花药体胚胚性愈伤组织的新鲜增殖组织为培养材料,建立和优化适合橡胶树胚性愈伤组织增殖的悬浮培养体系,并对悬浮组织进行体细胞胚的成熟诱导和植株再生。结果表明:橡胶树体细胞胚诱导的易碎胚性愈伤组... 以巴西橡胶树‘热研7-33-97’品种花药体胚胚性愈伤组织的新鲜增殖组织为培养材料,建立和优化适合橡胶树胚性愈伤组织增殖的悬浮培养体系,并对悬浮组织进行体细胞胚的成熟诱导和植株再生。结果表明:橡胶树体细胞胚诱导的易碎胚性愈伤组织是建立稳定、均一的悬浮细胞系非常适合的材料;改良MS+1.0 mg/L 2,4-D+1.5 mg/L KT+0.5 mg/L NAA有利于细胞分裂,最适初始接种量为1.2 g/50 mL,旧培养液比例为1/3;悬浮培养物易分散、细胞大小均一、形态一致,细胞团由4~15个细胞聚合而成,细胞颜色淡黄色,培养基清澈透亮;胚性愈伤悬浮细胞的生长曲线呈S形,第3~第7天是指数增长期,最适继代周期为7~8 d;在一个生长周期内,培养液的pH先降后升,最后逐渐趋于稳定,而电导率则持续下降;三次继代后,将悬浮培养物接种到固体分化培养基上分化可得到成熟体细胞胚状体,将其接种到植株再生培养基上,45 d后可成功获得再生植株。橡胶树花药体胚胚性愈伤组织悬浮系的建立,为橡胶树胚性愈伤组织的快速增殖及体细胞胚的规模化繁育提供帮助。 展开更多
关键词 巴西橡胶树 体细胞 悬浮细胞 植株再生
芒果‘金煌’愈伤增殖、早期体细胞胚发生及细胞学观察
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作者 许文天 武红霞 +6 位作者 罗纯 李丽 梁清志 马小卫 姚全胜 高玉尧 王松标 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期3001-3008,共8页
本研究以‘金煌’芒果(Mangifera indica L.)幼果的珠心组织为外植体进行愈伤组织诱导,探索了植物生长调节物质对愈伤组织增殖、早期体细胞胚发生的影响,并对培养物进行形态学与组织学的鉴定。结果表明,植物生长调节物质对愈伤组织的增... 本研究以‘金煌’芒果(Mangifera indica L.)幼果的珠心组织为外植体进行愈伤组织诱导,探索了植物生长调节物质对愈伤组织增殖、早期体细胞胚发生的影响,并对培养物进行形态学与组织学的鉴定。结果表明,植物生长调节物质对愈伤组织的增殖等性状有显著的影响,其中含有1.0 mg/L 2,4-D+1.0 mg/L KT的改良B5基本培养基(B5大量元素+MS微量元素/有机物/铁盐)+4%蔗糖+10%椰子水+500 mg/L谷氨酰胺+0.7%琼脂+0.2%活性炭显著提高愈伤组织的颗粒性和胚性愈伤组织的比例,并且有利于愈伤组织体积增大和长势提高。非胚性愈伤组织呈微黄色致密状,胚性愈伤组织主要呈现黄色或白色颗粒状。胚性愈伤组织在含有5.0 mg/L ABA+500 mg/L PEG的体细胞胚发生培养基上体细胞胚产量最高,平均0.2 g胚性团上产生体细胞胚数量达40.67个,显著高于ABA或PEG单独处理。 展开更多
关键词 芒果 愈伤组织诱导 增殖 体细胞 组织形态学
培养基成分对黑松体胚发育成熟的影响 预览
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作者 孙婷玉 王艳丽 +3 位作者 沈李元 吴小芹 朱丽华 叶建仁 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第4期178-186,共9页
【目的】对日本抗性黑松体细胞胚成熟的影响因子进行研究,探究各因素在体细胞胚发生过程中的作用,为进一步提高体细胞胚发生的质量和数量提供理论依据。【方法】胚性细胞团在固体增殖培养基上继代生长10天,使用灭菌(75%乙醇擦拭、紫外灭... 【目的】对日本抗性黑松体细胞胚成熟的影响因子进行研究,探究各因素在体细胞胚发生过程中的作用,为进一步提高体细胞胚发生的质量和数量提供理论依据。【方法】胚性细胞团在固体增殖培养基上继代生长10天,使用灭菌(75%乙醇擦拭、紫外灭菌30 min)的电子天平称量1 g胚性细胞团,采用50mL无菌量筒(紫外灭菌30 min)量取 30 mL培养液中于100 mL的三角瓶中,将1g胚性细胞团转至100 mL的三角瓶中,手动搅拌至细胞团分散,置于90 r·min^-1摇床上,25℃黑暗培养7~8天。随后,取3mL沉淀悬浮细胞进行继代增殖,每星期继代增殖一次至胚性细胞全部均匀散落于培养液。将继代4次的胚性细胞充分摇匀,取2mL(鲜质量约200mg)胚性悬浮细胞喷洒在不同组分麦芽糖(30、45、60g·L^-1 )、脱落酸(ABA)(0、5、10、 20、30、50mg·L^-1 )、聚乙二醇(PEG8000)(0、50、75、100、125、150g·L^-1 )、活性炭(AC)(1、2、3g·L^-1 )、琼脂(琼脂6、8、10、12g·L^-1 ,植物凝胶2、2.5、3、3.5g·L^-1 )以及麦芽糖、ABA、PEG 3因素的组合固体成熟培养基上。【结果】以#1337为材料的体细胞胚成熟发育过程中,麦芽糖45g·L^-1 ,获得的体细胞胚数量显著增多。ABA浓度为5~20mg·L^-1 ,体细胞胚数量呈显著上升趋势,ABA为20mg·L^-1 时,获得的体细胞胚最多。125g·L^-1 PEG8000为体胚发生最佳浓度;AC 2g·L^-1 时,胚性细胞形成结构完整、数量较多的成熟体胚;成熟培养基中添加琼脂粉,培养基不能凝固,植物凝胶更适合作为成熟培养基凝固剂。3g·L^-1 植物凝胶为抗性黑松体胚发育成熟的最佳浓度。在设计的9种成熟培养基组合中(胚性细胞#1337、#1537、#1637),胚性细胞产生体细胞胚最多的成熟培养基组合为麦芽糖 45g·L^-1 、ABA 10mg·L^-1 、PEG8000 125g·L^-1 。在不同的麦芽糖、ABA和PEG组合中,不同无性系生产体细胞胚数量呈现出不同的变化趋势:胚性细胞系#1337体胚 展开更多
关键词 黑松 松材线虫病 体细胞 聚乙二醇(PEG8000)
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香榧幼胚发育与胚性感受态之间的相关性 预览 被引量:1
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作者 龚丽 胡恒康 +4 位作者 胡渊渊 喻卫武 吴家胜 黄坚钦 张启香 《浙江农林大学学报》 CSCD 北大核心 2018年第5期861-867,共7页
以突破种鳞第8周至第15周种子的香榧Torreya grandis‘Merrillii’幼胚为外植体,研究了香榧幼胚胚龄、生长素等对香榧胚性愈伤组织以及体细胞胚直接发生的影响,筛选出高胚性感受态的香榧幼胚胚龄,并根据幼胚内源吲哚乙酸(IAA)和脱落酸(A... 以突破种鳞第8周至第15周种子的香榧Torreya grandis‘Merrillii’幼胚为外植体,研究了香榧幼胚胚龄、生长素等对香榧胚性愈伤组织以及体细胞胚直接发生的影响,筛选出高胚性感受态的香榧幼胚胚龄,并根据幼胚内源吲哚乙酸(IAA)和脱落酸(ABA)质量分数检测结果,初步确定了高胚性感受态的香榧幼胚生理特点。结果表明:在SH附加0.1 mg·L^-1 NAA培养基中培养,第9周幼胚的胚性愈伤组织发生率最高,为48.3%,第10周幼胚的体胚直接发生率最高,为42.7%;而培养于SH基本培养基中的第14周幼胚直接萌发率最高,为65.1%。香榧不同胚龄幼胚内源ABA及IAA质量分数检测结果表明:不同发育时期香榧幼胚的内源IAA及ABA质量分数具显著差异(P<0.05)。其中香榧第8周幼胚内源IAA的质量分数最高,为53.90 ng·g-1,随着胚龄的逐渐增加,内源IAA质量分数呈下降趋势,第15周内源IAA质量分数最低,为35.60 ng·g^-1。内源ABA质量分数随着胚龄的增加呈先缓慢下降,再快速上升,后下降,其中第15周达到最大值,为160.20 ng·g^-1。通过对香榧幼胚离体培养及内源激素的测定,发现香榧第8~12周幼胚具有较高的胚性感受态。该研究结果对维持香榧幼胚高胚性感受态,开展香榧胚性愈伤组织及体胚发生培养条件的优化提供了技术指导。 展开更多
关键词 植物学 香榧 性愈伤组织 体细胞 内源激素
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桃儿七体细胞胚胎发生的初步探究
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作者 郭生虎 陈虞超 +1 位作者 朱永兴 关雅静 《分子植物育种》 CSCD 北大核心 2018年第19期6455-6460,共6页
以桃儿七种子胚培养获得7 d生的无菌苗,切取无菌苗的下胚轴、子叶做为外植体,通过调控不同生长调节剂浓度配比,诱导培养获得愈伤组织,利用愈伤组织进行体细胞胚胎发生研究,观察体细胞胚胎的发育过程,分析不同激素配比对桃儿七体细胞胚... 以桃儿七种子胚培养获得7 d生的无菌苗,切取无菌苗的下胚轴、子叶做为外植体,通过调控不同生长调节剂浓度配比,诱导培养获得愈伤组织,利用愈伤组织进行体细胞胚胎发生研究,观察体细胞胚胎的发育过程,分析不同激素配比对桃儿七体细胞胚发生的影响,从而建立桃儿七体细胞胚胎发生技术体系。本研究结果表明最适宜桃儿七愈伤组织诱导的培养基是MS+0.2 mg/L NAA+0.1 mg/L GA3+1.0 mg/L 6-BA,有利于胚性愈伤组织转化和增殖的培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+0.1 mg/L GA3+300 mg/L CH+40.0 g/L蔗糖,培养基MS+6-BA 0.5 mg/L+GA30.1 mg/L+NAA 0.01 mg/L有利于体细胞胚的增殖和萌发。 展开更多
关键词 桃儿七 性愈伤组织 体细胞
牡丹组织培养技术研究进展 预览 被引量:1
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作者 文书生 何绒绒 +1 位作者 郑佳康 田如男 《林业科学》 CSCD 北大核心 2018年第10期143-155,共13页
牡丹是我国特有的观赏、药用和油用植物,高效的组织培养技术是加速其育种和繁殖的重要基础。牡丹组织培养技术历经约半个世纪的研究,主要进展包括以下3个方面:1)器官组织培养再生:牡丹器官组织培养再生主要包括器官发生、体细胞胚发... 牡丹是我国特有的观赏、药用和油用植物,高效的组织培养技术是加速其育种和繁殖的重要基础。牡丹组织培养技术历经约半个世纪的研究,主要进展包括以下3个方面:1)器官组织培养再生:牡丹器官组织培养再生主要包括器官发生、体细胞胚发生和无菌短枝扦插这3条途径。(1)牡丹器官发生途径包括愈伤组织和分生结节培养,牡丹的各种繁殖器官和营养器官皆可作为外植体诱导得到愈伤组织,但愈伤组织进一步分化器官难度较大,且尚未得到完整再生植株;牡丹分生结节培养以黄化嫩茎和叶柄薄层为外植体,前人已初步建立了紫斑牡丹和牡丹芍药组间杂种——伊藤的分生结节发生体系,并实现了不定芽和叶状体的分化,但分化率极低,且未能获得再生植株,还发现牡丹分生结节中含有丰富的芍药苷和丹皮酚,这证实了其在药用成分生产中的应用潜力。(2)牡丹体细胞胚发生途径包括直接发生和间接发生,前人通过筛选基因型、培养基和发育时期等实现了多个牡丹品种的体细胞胚直接发生,但体细胞胚萌发率低,且再生成苗困难;间接发生途径以叶柄为外植体,已诱导得到愈伤组织并获得体细胞胚,但体细胞胚发生率极低。(3)牡丹无菌短枝扦插技术历经约30年的研究,完善的启动、增殖、生根和驯化移栽技术体系已经建立,但该技术仍无法实现产业化应用,主要原因在于试管苗的顶芽休眠、两步生根成本高以及移栽成活率低。2)胚珠和胚离体培养成苗:分别以完成器官分化的胚珠(花后60天)和成熟胚(花后90天)为外植体,前人通过筛选植物生长调节剂建立了紫斑牡丹和杨山牡丹的胚珠和胚离体培养体系,并获得了组培苗,但组培苗在驯化移栽阶段死亡。3)花药(花粉)离体培养成苗:以处于第1次分裂期的花粉为外植体可诱导得到花粉胚,培养过程中� 展开更多
关键词 牡丹 组织培养 器官发生 体细胞 无菌短枝扦插 珠培养 培养 花药(花粉)培养
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青海云杉愈伤组织增殖与体胚成熟阶段影响因子研究 预览
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作者 秦彩云 李青梅 +5 位作者 王聪慧 陈士刚 才巨峰 高芳 侯淑荣 陶晶 《森林工程》 2018年第2期21-25,共5页
为探究青海云杉愈伤组织增殖与体胚成熟阶段的主要影响因子,以成熟胚为外植体,进行体胚发生的相关研究。结果显示:胚性愈伤组织保持与增殖阶段的适宜培养基为改良1/2LV+2,4-D3.3mg/L+BA1.1mg/L+水解酪蛋白400mg/L+L-谷氨酰胺400mg/L+蔗... 为探究青海云杉愈伤组织增殖与体胚成熟阶段的主要影响因子,以成熟胚为外植体,进行体胚发生的相关研究。结果显示:胚性愈伤组织保持与增殖阶段的适宜培养基为改良1/2LV+2,4-D3.3mg/L+BA1.1mg/L+水解酪蛋白400mg/L+L-谷氨酰胺400mg/L+蔗糖10g/L+Phytagel凝胶3.5g/L;胚性愈伤组织继代周期以14~16d为宜;体胚发育与成熟过程中,当ABA含量为30mg/L时,两个种源每克胚性组织获得的正常胚数量最多。 展开更多
关键词 青海云杉 性愈伤组织 增殖 体细胞
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橡胶树体细胞胚成苗诱导及炼苗移栽对生长的影响
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作者 李玲 邱彦芬 +6 位作者 桂明春 管艳 田海 唐敏 梁国平 段安安 吴裕 《植物生理学报》 CSCD 北大核心 2018年第12期1797-1802,共6页
为提高橡胶树(Hevea brasiliensis)体胚植株的成苗率和移栽成活率,以橡胶树花药离体培养获得的成熟子叶形体细胞胚为试验材料,研究不同质量浓度的活性炭对橡胶树体细胞胚成苗诱导的影响,以及炼苗方式、体胚植株不同根系炼苗移栽对其生... 为提高橡胶树(Hevea brasiliensis)体胚植株的成苗率和移栽成活率,以橡胶树花药离体培养获得的成熟子叶形体细胞胚为试验材料,研究不同质量浓度的活性炭对橡胶树体细胞胚成苗诱导的影响,以及炼苗方式、体胚植株不同根系炼苗移栽对其生长的影响。结果表明:活性炭影响橡胶树体胚植株茎的伸长和侧根的形成,活性炭质量浓度为1.0 g·L^-1时成苗率最高,为69.44%,生成的侧根数多。移栽前室外炼苗有利于提高橡胶树体胚植株的成活率,闭瓶炼苗5-7 d后开瓶2-3 d移栽成活率最高,可达95.83%。生根数对体胚植株移栽成活率的影响大,侧根多的体胚植株移栽成活率达96.88%。 展开更多
关键词 橡胶树 体细胞 植株 成苗诱导 炼苗移栽
安祖花胚性愈伤组织诱导及植株再生研究 预览 被引量:1
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作者 刘宝骏 刘国锋 《热带亚热带植物学报》 CSCD 北大核心 2018年第4期407-414,共8页
为构建安祖花(Anthurium andreanum)胚性愈伤组织再生体系,以3个盆栽品种幼嫩叶片和叶柄为外植体,分析了基本培养基、植物生长调节剂组合和培养条件等因素的影响。结果表明,安祖花胚性愈伤组织诱导的最佳培养基为改良MS3+1.5 mg L–1 2,... 为构建安祖花(Anthurium andreanum)胚性愈伤组织再生体系,以3个盆栽品种幼嫩叶片和叶柄为外植体,分析了基本培养基、植物生长调节剂组合和培养条件等因素的影响。结果表明,安祖花胚性愈伤组织诱导的最佳培养基为改良MS3+1.5 mg L–1 2,4-D+0.5 mg L–1 KT+4%蔗糖+2%葡萄糖+0.25%Phytagel,且胚性愈伤组织诱导能力差异显著,表现为‘粉冠军’>‘罗宾奴’>‘冠军’和叶片>叶柄,其中‘粉冠军’叶片的胚性愈伤组织诱导率可达57.9%。胚状体分化的最佳培养基为1/2改良MSa+2%蔗糖+0.25%Phytagel,其中?粉冠军?叶片诱导的胚状体分化率可达31.6%,且在光、暗下分化率的差异不显著。分化苗移栽后的成活率可达100%。 展开更多
关键词 安祖花 性愈伤组织 体细胞 组织培养
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大豆体细胞胚诱导再生的影响因素和相关基因的研究进展
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作者 薛永国 刘鑫磊 +1 位作者 曹旦 栾晓燕 《大豆科学》 CSCD 北大核心 2018年第3期464-470,共7页
大豆是世界上重要的油料和经济作物,也是种植面积最大的转基因作物。大豆体细胞胚再生途径的转基因方法至今仍没有较大突破,主要原因是体细胞胚诱导再生频率低且不稳定,同时受基因型影响明显,这些原因限制了其在不同大豆品种中的应用。... 大豆是世界上重要的油料和经济作物,也是种植面积最大的转基因作物。大豆体细胞胚再生途径的转基因方法至今仍没有较大突破,主要原因是体细胞胚诱导再生频率低且不稳定,同时受基因型影响明显,这些原因限制了其在不同大豆品种中的应用。文章对影响大豆体细胞胚频率的基因型、激素、p H及其它因素进行了梳理总结,从同源克隆、基因定位和重测序等方面对体细胞胚诱导再生的相关基因的研究进展情况进行了详细综述。并对大豆体细胞胚诱导再生的应用前景和存在问题进行了归纳分析,旨在为大豆体细胞胚诱导再生的进一步研究提供参考。 展开更多
关键词 大豆 体细胞 影响因素 再生基因
芍药愈伤组织中体细胞胚发育过程的组织细胞学观察 预览 被引量:2
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作者 魏冬霞 张滕 +1 位作者 郑严仪 于晓南 《植物研究》 CSCD 北大核心 2018年第1期56-63,共8页
以芍药(Paeonia lactiflora Pall.)3个芍药品种的茎段、叶片、叶柄为外植体,诱导体细胞胚发生,并采用石蜡切片法对该发育过程进行组织细胞学观察。结果表明:‘Going Bananas’的茎段愈伤诱导率达100%,增殖率在4.0以上,表现最佳... 以芍药(Paeonia lactiflora Pall.)3个芍药品种的茎段、叶片、叶柄为外植体,诱导体细胞胚发生,并采用石蜡切片法对该发育过程进行组织细胞学观察。结果表明:‘Going Bananas’的茎段愈伤诱导率达100%,增殖率在4.0以上,表现最佳;非胚性愈伤组织最佳诱导、增殖培养基为WPM+IAA 1.0mg·L^-1+6-BA 1.0mg·L^-1+NAA 0.5mg·L^-1+TDZ 0.5mg·L^-1+CH 0.625g·L^-1;愈伤组织转入到1/2 MS(Ca2+加倍)+2,4-D 2.0mg·L^-1+ABA 0.5mg·L^-1或ZT 1.0mg·L^-1的培养基中,连续暗培养90后得到胚性愈伤;之后转入到成熟培养基1/2MS(Ca2+加倍)+6-BA 1.0mg·L^-1+NAA 0.2mg·L^-1中,见光培养60d,逐渐发育至球形胚和心形胚。在石蜡切片观察中,芍药的体细胞胚起源方式包括外起源和内起源两个途径。在外起源方式中包括单个表层细胞的外起源和多个表层下细胞的共同起源。3种方式的区别主要在于起始的位置和起始细胞数量,后期均形成原胚结构。胚性细胞的分裂方式为对称分裂,未发现不对称分裂细胞的存在。 展开更多
关键词 芍药 体细胞 起源方式 组织细胞
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番木瓜成熟种子的体细胞胚简易诱导和植株再生
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作者 魏岳荣 陈彩霞 +2 位作者 杨敏 黄炳雄 杨护 《分子植物育种》 CSCD 北大核心 2018年第12期4010-4015,共6页
目前中国番木瓜产业受到环斑花叶病等病害的严重威胁,利用生物技术手段创制新种质、培育高产优质的抗病新品种成为番木瓜产业发展的亟需。本研究以‘一尺瓜’品种的140-150 d龄果实成熟种子为外植体,研究了其体细胞胚诱导和植株再生技... 目前中国番木瓜产业受到环斑花叶病等病害的严重威胁,利用生物技术手段创制新种质、培育高产优质的抗病新品种成为番木瓜产业发展的亟需。本研究以‘一尺瓜’品种的140-150 d龄果实成熟种子为外植体,研究了其体细胞胚诱导和植株再生技术。结果发现了一种非常简单有效的外植体杀菌消毒方法,即用自来水将果实外表清洗干净,然后用70%酒精对果实进行表面消毒即可。该品种成熟种子理想的胚性愈伤组织诱导培养基组成为:1/2 MS(Murashige and Skoog,1962)+2 mg/L 2,4-D(2,4 dichlorophenoxyacetic acid)+400 mg/L谷氨酰胺+60 g/L蔗糖+7 g/L琼脂粉,胚性愈伤组织诱导率可达45%。将胚性愈伤组织置于含1 mg/L2,4-D的增殖培养基继代培养2个周期后,可获得大量均质的表面含有白色体细胞胚的胚性愈伤组织。胚性愈伤组织团在不含任何激素的培养基上可完成体细胞胚的诱导、成熟、萌发和生根过程。挑取具有芽和根的体细胞胚转移到再生培养基培养30 d后可获得具有正常叶片和根系的完整植株,其发育为正常植株的百分率为52.5%。本研究为番木瓜生物技术育种建立一套简单、高效的体细胞胚再生技术体系提供技术支撑。 展开更多
关键词 番木瓜 '一尺瓜’品种 成熟种子 体细胞 植株再生
激素对不同种源樟树体胚发生的影响 预览
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作者 杨柳 李志辉 林立彬 《中南林业科技大学学报》 CSCD 北大核心 2018年第12期115-120,135共7页
基因研究依赖于植株再生,香樟离体培养植株再生以体胚发生为主。以岳阳、郴州、醴陵、长沙、怀化、娄底樟树Cinnamomumcamphora未成熟合子胚作为外植体,研究不同激素在体胚发生过程中对体胚及愈伤组织诱导、芽分化和生根的影响,目的在... 基因研究依赖于植株再生,香樟离体培养植株再生以体胚发生为主。以岳阳、郴州、醴陵、长沙、怀化、娄底樟树Cinnamomumcamphora未成熟合子胚作为外植体,研究不同激素在体胚发生过程中对体胚及愈伤组织诱导、芽分化和生根的影响,目的在于为湖南省不同种源樟树体胚发生建立基础,完善樟树植株再生体系。结果表明:适合岳阳、怀化樟树诱导体胚发生的最适培养基为MS+1mg·L^-16-BA+0.1mg·L^-12,4-D,其余种源均为MS+1mg·L^-16-BA+0.3mg·L^-12,4-D;岳阳、怀化、娄底种源樟树芽分化最佳培养基为MS+5mg·L^-16-BA+0.1mg·L^-1NAA,醴陵和长沙种源樟树为MS+3mg·L^-16-BA+0.3mg·L^-1NAA,郴州种源为MS+5mg·L^-16-BA+0.3mg·L^-1NAA;诱导岳阳、郴州、醴陵、长沙、怀化、娄底樟树芽生根的最适激素浓度分别为1mg·L^-1IBA+0.1mg·L^-1NAA、1mg·L^-1IBA+0.5mg·L^-1NAA、1mg·L^-1IBA+0.3mg·L^-1NAA、1mg·L^-1IBA、1mg·L^-1IBA+0.1mg·L^-1NAA、1mg·L^-1IBA+0.3mg·L^-1NAA。该研究为樟树的遗传改良和新品种培育提供重要参考依据。 展开更多
关键词 樟树 体细胞 植株再生 激素
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