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农杆菌介导的浸花法转化甘蓝型油菜过程中柱头顶端开裂时期的确定 预览
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作者 王宁宁 王伟杰 +6 位作者 王玉康 曹维 李明 Sundus Zafar 胡茂龙 浦惠明 谭小力 《江苏农业科学》 2019年第18期114-116,共3页
农杆菌介导的浸花法(floral-dip)是一种简便、快速、高效、重复性好、稳定性高的非组织培养的遗传转化法,在拟南芥中已得到了广泛的应用,但由于诸多因素的影响,其在油菜中的转化效率受到了很大的制约。以甘蓝型油菜为研究对象,通过对雌... 农杆菌介导的浸花法(floral-dip)是一种简便、快速、高效、重复性好、稳定性高的非组织培养的遗传转化法,在拟南芥中已得到了广泛的应用,但由于诸多因素的影响,其在油菜中的转化效率受到了很大的制约。以甘蓝型油菜为研究对象,通过对雌蕊柱头开裂时间的研究,发现即将开放的10~15个花苞的柱头是裂开的,此时最有利于农杆菌进入子房室完成转化。对这部分花蕾进行浸花法转化,得到的T1代种子发芽后通过除草剂筛选获得抗性转基因植株,进一步对这些植株进行PCR验证,其阳性率高达72.7%。该研究能进一步提高农杆菌转化效率,实现甘蓝型油菜更有效的遗传转化。 展开更多
关键词 甘蓝型油菜 浸花法 柱头开口 转化效率 杆菌
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根癌农杆菌介导的马铃薯遗传转化体系的研究 预览
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作者 张萍 《陕西农业科学》 2019年第4期27-29,40共4页
以NHD-3、NC、NF三种马铃薯品种的茎段为外植体,筛选出诱导形成愈伤组织的培养基,探讨不同转化条件对马铃薯遗传转化效率的影响。结果表明:在1.0mg·^L-16-BA浓度不变情况下,愈伤诱导培养基中NHD-3、NC、NF茎段分别在NAA浓度为0.2、... 以NHD-3、NC、NF三种马铃薯品种的茎段为外植体,筛选出诱导形成愈伤组织的培养基,探讨不同转化条件对马铃薯遗传转化效率的影响。结果表明:在1.0mg·^L-16-BA浓度不变情况下,愈伤诱导培养基中NHD-3、NC、NF茎段分别在NAA浓度为0.2、0.3、0.4mg·L^-1时愈伤形成及生长最好;在茎段预培养2d,共培养2d,农杆菌菌液在OD-6000.6的条件下转化所得抗性愈伤诱导率最高。 展开更多
关键词 马铃薯 杆菌 遗传转化
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Bar+CP4EPSPS基因转化紫花苜蓿的研究及抗性鉴定
3
作者 王英哲 王一楠 +3 位作者 任伟 徐安凯 刘艳芝 郝东云 《北方园艺》 CAS 北大核心 2019年第18期32-39,共8页
为了提高苜蓿抗除草剂的能力,以'公农1号'紫花苜蓿为试验材料,采用农杆菌介导的方法将Bar基因和CP4EPSPS基因转入紫花苜蓿中,研究了优化影响转化的5个主要因子(分别为外植体、农杆菌种类、侵染浓度、共培养时间、筛选浓度),建... 为了提高苜蓿抗除草剂的能力,以'公农1号'紫花苜蓿为试验材料,采用农杆菌介导的方法将Bar基因和CP4EPSPS基因转入紫花苜蓿中,研究了优化影响转化的5个主要因子(分别为外植体、农杆菌种类、侵染浓度、共培养时间、筛选浓度),建立了农杆菌介导的'公农1号'紫花苜蓿高效转化体系,获得转基因植株。结果表明:选择再生苗叶片作为外植体、EHA105农杆菌侵染、菌液浓度OD600值为0.8、共培养3 d、转化过程中草铵膦筛选浓度选择2 mg·L-1为宜,是最佳转化方案。试验结合分子检测和试纸条检测初步证明目的基因已经整合到紫花苜蓿中,最终喷施草甘膦确定12株为转基因植株。 展开更多
关键词 紫花苜蓿 转化 杆菌 BAR基因 CP4EPSPS基因
拟南芥AtIDD4与3×Flag融合蛋白表达植株的构建及其鉴定 预览
4
作者 吴嘉 杨红玉 +4 位作者 乔菊香 张国斌 陈俊丞 黄琼 王云月 《西南林业大学学报》 CAS 北大核心 2019年第4期89-95,共7页
为了利用染色质免疫共沉淀技术研究转录因子AtIDD4蛋白与下游DNA的互作,通过构建35S-AtIDD4CDS-3×Flag农杆菌原核表达载体,利用农杆菌花浸法将35S-AtIDD4CDS-3×Flag结构转入野生型拟南芥中,实现ATIDD4和3×Flag标签的共... 为了利用染色质免疫共沉淀技术研究转录因子AtIDD4蛋白与下游DNA的互作,通过构建35S-AtIDD4CDS-3×Flag农杆菌原核表达载体,利用农杆菌花浸法将35S-AtIDD4CDS-3×Flag结构转入野生型拟南芥中,实现ATIDD4和3×Flag标签的共表达和超表达。结果表明:通过PCR扩增、DNA测序、实时荧光定量RT-PCR等方法对转基因突变体进行鉴定,3×Flag标签与AtIDD4共表达,同时AtIDD4基因的表达量显著提高。 展开更多
关键词 3×Flag 融合标签 杆菌 转基因 拟南芥
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天然的转基因植物——甘薯 预览
5
作者 李林 寿惠霞 《大豆科技》 2019年第4期70-71,共2页
以甘薯为例,阐述其作为一个天然的农杆菌转基因产物,被人们食用超过8000余年的证据,并由此说明,基因在物种间的水平转移无所不在,也是物种进化的动力和源泉。由此可见,转基因作物的安全性是毋容置疑的。
关键词 甘薯 天然 转基因 杆菌 基因水平转移
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油菜农杆菌介导转化体系的优化 预览
6
作者 张姗姗 耿思宇 +1 位作者 徐培林 王景雪 《山西农业科学》 2019年第8期1295-1299,共5页
以甘蓝型油菜湘油15号为试验材料,对农杆菌转化体系中外植体预培养时间、培养基中AgNO3浓度、农杆菌侵染时的菌液浓度、共培养基pH值等进行了优化研究,确立了优化的遗传转化条件。结果表明,外植体在农杆菌侵染和共培养前预培养3d,可明... 以甘蓝型油菜湘油15号为试验材料,对农杆菌转化体系中外植体预培养时间、培养基中AgNO3浓度、农杆菌侵染时的菌液浓度、共培养基pH值等进行了优化研究,确立了优化的遗传转化条件。结果表明,外植体在农杆菌侵染和共培养前预培养3d,可明显提高子叶外植体和下胚轴外植体出愈率和抗性芽苗分化率,有利于获得较高的转化效率;在基因转化中,AgNO3的最佳使用浓度为30μmol/L,最佳的农杆菌侵染菌液OD600为0.4,共培养基pH值5.4是油菜农杆菌介导转化中优化的转化条件。 展开更多
关键词 甘蓝型油菜 杆菌 遗传转化 预培养
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农杆菌介导的甜椒遗传转化体系的建立 预览
7
作者 苏振华 张俊华 +4 位作者 张泽鑫 李妹芳 郭尚敬 曹雪松 冀芦沙 《江西农业学报》 CAS 2019年第6期9-15,共7页
以低温渗透系甜椒CL122为材料,采用其子叶节为外植体材料,研究了农杆菌介导的甜椒遗传转化体系的主要影响因子,如卡那霉素选择压、农杆菌菌液浓度、乙酰丁香酮浓度、侵染时间、共培养时间、激素浓度等,初步建立了一个高效的甜椒遗传转... 以低温渗透系甜椒CL122为材料,采用其子叶节为外植体材料,研究了农杆菌介导的甜椒遗传转化体系的主要影响因子,如卡那霉素选择压、农杆菌菌液浓度、乙酰丁香酮浓度、侵染时间、共培养时间、激素浓度等,初步建立了一个高效的甜椒遗传转化体系。结果表明:最适的卡那霉素选择压为50mg/L,乙酰丁香酮浓度在100μmol/L时可以明显提高外植体的抗性芽数,最适合的预培养时间和共培养时间为2d,最佳侵染时间5min,外植体在MS+0.2mg/LIAA(吲哚乙酸)+400mg/L特美汀培养基上生根率最高。 展开更多
关键词 甜椒 杆菌 遗传转化 外植体
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抗旱调控基因DREB2A转化辽荞5号的研究
8
作者 丰明 陈庆富 +1 位作者 葛维德 薛仁风 《东北农业科学》 北大核心 2019年第4期29-36,共8页
通过农杆菌介导,将来源于干旱诱导下拟南芥的干旱调控基因DREB2A导入辽宁甜荞品种辽荞5号中,以提高其耐旱性。通过正交试验分析影响农杆菌转化的相关因素,建立并优化了转化体系。结果表明:(1)愈伤组织诱导过程中,选择子叶作为愈伤组织... 通过农杆菌介导,将来源于干旱诱导下拟南芥的干旱调控基因DREB2A导入辽宁甜荞品种辽荞5号中,以提高其耐旱性。通过正交试验分析影响农杆菌转化的相关因素,建立并优化了转化体系。结果表明:(1)愈伤组织诱导过程中,选择子叶作为愈伤组织诱导受体,诱导愈伤培养基激素的配比为:2,4-D浓度为2 mg/L;6-BA浓度为1 mg/L;(2)农杆菌转化过程中,最适农杆菌OD600为0.5、侵染时间3 min、共培养3 d,乙酰丁香酮浓度100 mg/L、筛选培养羧苄霉素浓度50mg/L,草丁膦浓度100 mg/L;(3)通过对转化植株的PCR检测,印证了DREB2A基因已转化到辽荞5号中;(4)通过对转化植株的生理检测初步表明转基因荞麦比非转基因荞麦具有更高的抗旱性。 展开更多
关键词 荞麦 杆菌 遗传转化 DREB2A基因 正交设计 耐旱性
玉米种子芽大小对农杆菌转化的影响 预览
9
作者 吕孟雨 董福双 +3 位作者 柴建芳 周硕 张俊敏 王海波 《湖北农业科学》 2019年第20期168-169,173共3页
以郑58玉米自交系的种子作为试验材料,将玉米种子消毒,发芽后按长度分别将大、小2种玉米芽的生长点进行农杆菌转化,经过共培养后,通过对转化后的再发芽情况和转化芽的绿色荧光蛋白检测,分析玉米芽的大小对转化的影响。结果表明,玉米种... 以郑58玉米自交系的种子作为试验材料,将玉米种子消毒,发芽后按长度分别将大、小2种玉米芽的生长点进行农杆菌转化,经过共培养后,通过对转化后的再发芽情况和转化芽的绿色荧光蛋白检测,分析玉米芽的大小对转化的影响。结果表明,玉米种子芽长度在0.3~0.5 cm时用于农杆菌转化,有利于农杆菌对玉米芽生长点的侵染转化和转化后芽的再生。 展开更多
关键词 玉米 芽长 杆菌 转基因
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能源植物柳枝稷基因工程研究进展 预览
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作者 曹慧颖 张立军 +3 位作者 阮燕晔 张敖 董小妹 张馨悦 《草业科学》 CAS CSCD 2019年第2期394-401,共8页
柳枝稷(Panicum virgatum)是C4暖季草本植物。具有许多优良的农艺性状,如广泛的地理适应性,耐贫瘠,生产成本低,水利用率高,生物质产量高,易于收获,因此被认为是重要的生物能源作物。通过生物技术对柳枝稷进行遗传改良,对于充分开发柳枝... 柳枝稷(Panicum virgatum)是C4暖季草本植物。具有许多优良的农艺性状,如广泛的地理适应性,耐贫瘠,生产成本低,水利用率高,生物质产量高,易于收获,因此被认为是重要的生物能源作物。通过生物技术对柳枝稷进行遗传改良,对于充分开发柳枝稷的生物质潜能,利用柳枝稷生产生物燃料具有重要意义。本文从柳枝稷遗传转化技术及改良性状的角度综述了柳枝稷的基因工程进展,为培育优良柳枝稷新品种提供参考。 展开更多
关键词 遗传转化 基因型 真空 杆菌 MIRNA
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农杆菌介导双孢蘑菇AS2796转化体系的优化
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作者 王佩 刘文 +1 位作者 周雁 沈祥陵 《菌物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期841-850,共10页
双孢蘑菇Agaricus bisporus是一种药食皆宜的食用真菌,具有极高的经济价值,近年来在双孢蘑菇全基因组测序完成后,功能基因组学的研究逐步提上日程。其中,高效的遗传转化体系作为技术基础成为研究重点。农杆菌介导的遗传转化体系作为一... 双孢蘑菇Agaricus bisporus是一种药食皆宜的食用真菌,具有极高的经济价值,近年来在双孢蘑菇全基因组测序完成后,功能基因组学的研究逐步提上日程。其中,高效的遗传转化体系作为技术基础成为研究重点。农杆菌介导的遗传转化体系作为一种高效的功能基因组研究方法,在双孢蘑菇中已经得到了广泛的应用,但是仍然存在着效率较低的问题有待解决。为了提高双孢蘑菇的农杆菌转化效率,找到双孢蘑菇遗传转化的最优条件,本实验首先对双孢蘑菇的潮霉素抗性压力进行了筛选,结果显示20mg/L的潮霉素浓度可以抑制菌丝生长,而50mg/L的潮霉素浓度则可以完全抑制菌丝生长。其次,对农杆菌菌株、菌液浓度、乙酰丁香酮浓度、菌丝培养时间以及浸染时间做了L16(45)的正交实验,通过对各因素影响的分析,得出对转化效率影响最大的因素为菌丝培养时间和农杆菌菌株,且当菌株为LBA4404、菌液浓度OD600=0.8、乙酰丁香酮浓度为100μmol/L、菌丝培养时间为40d、浸染时间为10min时,农杆菌介导的双孢蘑菇遗传转化效率最高。 展开更多
关键词 双孢蘑菇 杆菌 遗传转化 菌丝
四川小麦优良受体基因型筛选及农杆菌转化因素优化
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作者 蒋云 张洁 +6 位作者 宣朴 余桂容 张军 陈谦 王颖 尹春蓉 郭元林 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期1203-1212,共10页
为了丰富栽培小麦转化受体基因型,优化农杆菌转化小麦幼胚的技术体系,本研究评价了21份四川优良小麦品种(系)的幼胚再生能力,并以筛选到的最佳受体为材料,利用正交设计研究了预培养时间、菌液浓度、侵染时间、抑菌剂浓度、共培养方式和... 为了丰富栽培小麦转化受体基因型,优化农杆菌转化小麦幼胚的技术体系,本研究评价了21份四川优良小麦品种(系)的幼胚再生能力,并以筛选到的最佳受体为材料,利用正交设计研究了预培养时间、菌液浓度、侵染时间、抑菌剂浓度、共培养方式和农杆菌菌株等易互作的6个因素对幼胚抗性愈伤再生率的影响,并探讨了筛选剂卡那霉素(Kanamycin)的适宜浓度。结果表明,21份材料中‘5157’、‘川农16’、‘R364’、‘川麦42’‘、内麦8号’的绿苗率超过了30%,可作为优良转基因受体加以利用。以‘5157’为受体材料建立农杆菌转化体系,正交试验表明菌液浓度和农杆菌菌株对幼胚抗性愈伤再生率的影响达到显著水平,而其他因素影响不显著。经优化后的遗传转化体系为:农杆菌菌株用C58C1,幼胚不经预培养,在菌液OD值为0.4的农杆菌中侵染40 min,共培养介质选用培养基,抑菌剂为200 mg/L羧卞青霉素(Carbenicillin),适宜的卡那霉素筛选浓度为50 mg/L。本研究为四川小麦遗传转化提供了5个候选基因型,为建立和优化小麦幼胚转化技术体系提供了理论依据,同时初步建立了农杆菌转化小麦幼胚的技术体系。 展开更多
关键词 小麦 杆菌 遗传转化 正交设计 幼胚培养
农杆菌介导谷子成熟胚遗传转化体系的建立与优化
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作者 李颜方 杜艳伟 +4 位作者 张正 王高鸿 赵根有 赵晋锋 余爱丽 《作物杂志》 CAS 北大核心 2019年第3期73-79,共7页
为建立一个稳定的谷子遗传转化体系,对216份谷子种质资源进行筛选,确定材料178成熟胚为受体材料,从植物激素浓度、防褐化剂、农杆菌菌液浓度、侵染时间、乙酰丁香酮(AS)浓度等方面对谷子再生及转化体系进行优化。结果表明,在MS培养基中... 为建立一个稳定的谷子遗传转化体系,对216份谷子种质资源进行筛选,确定材料178成熟胚为受体材料,从植物激素浓度、防褐化剂、农杆菌菌液浓度、侵染时间、乙酰丁香酮(AS)浓度等方面对谷子再生及转化体系进行优化。结果表明,在MS培养基中加入生长素2,4-D 9μmol/L、细胞分裂素Kinetin 4μmol/L、硝酸银8mg/L,愈伤组织诱导率最高且能有效防止褐化。在侵染液和共培养基中加入100μmol/L AS,gus表达效果最好。农杆菌溶液OD600为0.3~0.5,侵染15min,共培养3d时,抗性愈伤组织率最高。获得的转基因植株,经PCR检测及gus染色分析,确定外源bar基因已成功整合到谷子基因组中。初步建立了一套谷子遗传转化体系,为今后谷子遗传转化提供一些参考。 展开更多
关键词 谷子 杆菌 成熟胚 遗传转化 愈伤组织
利用农杆菌介导法快速鉴定小麦病程相关蛋白基因TaPR1的功能 预览
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作者 梁芳 刘亦菲 +2 位作者 崔钟池 王海燕 刘大群 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期12-17,共6页
本研究拟采用农杆菌瞬时表达体系,在小麦叶片中快速表达目的基因,以鉴定其在小麦抗叶锈病防御反应中的功能。在前期研究基础上,将已克隆获得的小麦病程相关蛋白基因TaPR1构建到小麦过表达载体pLGY-02,转化农杆菌菌株GV3101。然后以感病... 本研究拟采用农杆菌瞬时表达体系,在小麦叶片中快速表达目的基因,以鉴定其在小麦抗叶锈病防御反应中的功能。在前期研究基础上,将已克隆获得的小麦病程相关蛋白基因TaPR1构建到小麦过表达载体pLGY-02,转化农杆菌菌株GV3101。然后以感病小麦品种‘金禾9123’为试材,将携带pLGY-02-TaPR1重组质粒的农杆菌GV3101注射到小麦叶片中,以空载体pLGY-02为对照。3 d后接种叶锈菌,14 d后观察小麦叶片表型。同时,在接菌后24、36、48 h时分别采集小麦叶片材料,利用DAB组织化学染色法,监测接种叶锈菌后叶片中H2O2的变化,并通过组织病理学显微观察,快速验证TaPR1在小麦与锈菌互作过程中的功能。结果发现,注射重组质粒pLGY-02-TaPR1的叶片发病程度、叶片孢子堆数均轻于、少于对照组叶片,且发病滞后;DAB组织化学染色结果表明,TaPR1表达量增加使得H2O2的清除在一定程度上受到抑制,小麦叶片中H2O2的分布与积累量均显著多于对照组叶片,说明TaPR1对小麦叶锈菌的致病性具有抑制作用,即TaPR1基因参与了小麦抗叶锈病防御反应。本研究成功构建了能在小麦中瞬时表达的重组载体pLGY-02-TaPR1,并建立了农杆菌介导的在小麦叶片细胞中高效表达外源基因的转化体系,为利用瞬时表达法验证小麦抗性基因功能奠定了基础。 展开更多
关键词 小麦 叶锈菌 病程相关蛋白基因 杆菌 TaPR1 H2O2
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重组人血清白蛋白在紫花苜蓿中的转基因表达 预览 被引量:2
15
作者 陈林涛 韦双双 +4 位作者 黄永林 吴昊 郭子怡 陈银华 王大勇 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2018年第4期720-725,共6页
为获得高产重组人血清白蛋白的转基因紫花苜蓿"游客"(Medicago sativa L. cv.‘Eureka’)株系用于规模化生产rHSA,构建了rHSA植物表达载体。以紫花苜蓿子叶愈伤组织为受体,通过农杆菌介导法进行遗传转化,筛选出潮霉素抗性植株,提取... 为获得高产重组人血清白蛋白的转基因紫花苜蓿"游客"(Medicago sativa L. cv.‘Eureka’)株系用于规模化生产rHSA,构建了rHSA植物表达载体。以紫花苜蓿子叶愈伤组织为受体,通过农杆菌介导法进行遗传转化,筛选出潮霉素抗性植株,提取抗性再生紫花苜蓿植株基因组DNA做PCR鉴定,结果表明重组人血清白蛋白基因片段已整合到紫花苜蓿基因组中;提取转基因植株总蛋白,Western blotting检测结果表明rHSA在转基因植株中成功表达。此结果表明转基因紫花苜蓿可稳定表达rHSA。 展开更多
关键词 重组人血清白蛋白 紫花苜蓿 杆菌 转基因
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农杆菌介导大豆遗传转化影响因素研究进展
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作者 杨柳 于翠梅 +2 位作者 刘铭 赵明哲 谢甫绨 《大豆科学》 CSCD 北大核心 2018年第5期803-808,共6页
大豆基因工程育种和功能基因组分析亟需建立高效大豆转化体系。本文综述了近年来影响农杆菌介导大豆遗传转化体系的农杆菌因素、植物因素及培养条件等方面的进展,主要包括农杆菌菌株、菌株生长状态、大豆基因型、外植体类型、防御酶、... 大豆基因工程育种和功能基因组分析亟需建立高效大豆转化体系。本文综述了近年来影响农杆菌介导大豆遗传转化体系的农杆菌因素、植物因素及培养条件等方面的进展,主要包括农杆菌菌株、菌株生长状态、大豆基因型、外植体类型、防御酶、内源激素及侵染和共培养方法等,为提高大豆遗传转化效率及基因工程育种等相关研究提供参考。 展开更多
关键词 大豆 杆菌 转化 影响因素
以诺丽茎段为外植体的无籽基因转化研究
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作者 贾丹丹 蓝增全 吴田 《西南大学学报:自然科学版》 CSCD 北大核心 2018年第9期7-12,共6页
以诺丽无菌苗不带腋芽的茎段为转化材料,采用根癌农杆菌介导法,将含有无籽基因的质粒pCAMBIA1305.1导入到诺丽细胞中,通过Kan快速筛选、PCR检测等方法对转化子进行鉴定.实验结果表明:抗性芽的平均分化频率为42%,经过PCR检测,以茎为外... 以诺丽无菌苗不带腋芽的茎段为转化材料,采用根癌农杆菌介导法,将含有无籽基因的质粒pCAMBIA1305.1导入到诺丽细胞中,通过Kan快速筛选、PCR检测等方法对转化子进行鉴定.实验结果表明:抗性芽的平均分化频率为42%,经过PCR检测,以茎为外植体进行遗传转化的转化率为5.4%.在转化过程中,有些植株可能会发生饰变.该实验初步证实已把无籽基因转入诺丽,后续需Southern杂交进一步验证. 展开更多
关键词 海巴戟 茎段 杆菌 转基因
农杆菌介导的GbWOX9基因对海岛棉胚性细胞的遗传转化
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作者 芮存 李娟 +4 位作者 曲延英 陈全家 汪志星 高文伟 张霞 《分子植物育种》 CSCD 北大核心 2018年第13期4294-4300,共7页
为探究WOX9基因在棉花体细胞胚胎发育过程中的功能,借助农杆菌介导化学试剂诱导型植物表达载体p TA7002/GbWOX9和pTA7002/GbWOX9 anti对海岛棉‘新海16’胚性细胞进行遗传转化,以此利用化学诱导剂在胚性细胞中诱导GbWOX9的过量或抑制表... 为探究WOX9基因在棉花体细胞胚胎发育过程中的功能,借助农杆菌介导化学试剂诱导型植物表达载体p TA7002/GbWOX9和pTA7002/GbWOX9 anti对海岛棉‘新海16’胚性细胞进行遗传转化,以此利用化学诱导剂在胚性细胞中诱导GbWOX9的过量或抑制表达。研究结果表明在菌液OD600≈0.5-0.6时进行15 min的农杆菌侵染并共培养24 h之后,将侵染的细胞在500 mg/L头孢和20 mg/L潮霉素的抗性培养基上筛选继代两次,最终获得若干抗性阳性胚性细胞。进一步将抗性阳性细胞在化学诱导剂30μmol/L地塞米松处理5 h后,通过qRT-PCR技术对其进行GbWOX9的基因表达鉴定,结果表明与对照组相比,正、反义转基因抗性阳性细胞中的GbWOX9基因表达量皆有显著差异。该研究初步建立了以潮霉素为筛选标记的海岛棉遗传转化体系,并在此基础上将GbWOX9正义和反义链成功导入‘新海16’胚性细胞中,为其功能的鉴定提供了参考。 展开更多
关键词 海岛棉 GbWOX9 杆菌 潮霉素 胚性细胞
番茄农杆菌转化中菌株选择抗生素敏感性试验 预览
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作者 樊蕾 《河南农业》 2018年第33期38-39,43共3页
以本地秋茬大棚主栽西红柿品种630为材料,选择合适的农杆菌菌种进行转化,同时确定侵染时间及合适的抑制抗生素,筛选合适的抗生素,以保证转化的顺利进行.结果表明,用农杆菌LBA4404侵染2min,更有利于番茄630农杆菌的转化诱导.
关键词 番茄 杆菌 转化
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Micro-Tom番茄转基因植株再生体系的优化 预览
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作者 邱实 张文举 +1 位作者 许馥慧 邓志瑞 《上海大学学报:自然科学版》 CSCD 北大核心 2018年第2期322-330,共9页
转基因植株的再生频率较低一直是植物基因工程研究的瓶颈之一.以番茄的MicroTom突变体为材料,探索了外植体植物激素配比、预培养时间、共培养时间、筛选剂对愈伤组织发生和不定芽生长的影响.结果表明:子叶比下胚轴更适合作为愈伤组织... 转基因植株的再生频率较低一直是植物基因工程研究的瓶颈之一.以番茄的MicroTom突变体为材料,探索了外植体植物激素配比、预培养时间、共培养时间、筛选剂对愈伤组织发生和不定芽生长的影响.结果表明:子叶比下胚轴更适合作为愈伤组织和不定芽诱导的外植体;当玉米素(zeatin,ZT)质量浓度为0.5 mg/L,吲哚乙酸(indole acetic acid,IAA)质量浓度为1.0 mg/L时最有利于不定芽诱导;外植体预培养的适宜时间为3 d,农杆菌和外植体共培养的适宜时间为2 d;外植体对卡那霉素的耐受上限为40 mg/L,替门汀的适宜质量浓度为150 mg/L.实验所建立的转基因再生体系为Micro-Tom番茄的遗传工程应用奠定了基础. 展开更多
关键词 Micro-Tom番茄 玉米素 替门汀 遗传转化 杆菌
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