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DNMT1基因沉默对前列腺癌细胞增殖、凋亡及GSTP1、SHOX2、DAPK甲基化状态的影响 预览
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作者 邢红宇 朱明月 +3 位作者 郑俊 吴翔 郑才玲 苏民 《临床和实验医学杂志》 2019年第10期1029-1034,共6页
目的探讨siRNA技术沉默DNA甲基转移酶1(DNMT1)基因表达对前列腺癌细胞(LNCap)增殖、凋亡的影响,初步分析其对谷胱甘肽S转移酶P1(GSTP1)、矮小同源盒基因2(SHOX2)、凋亡相关蛋白激酶(DAPK)甲基化状态的影响。方法体外培养人前列腺癌细胞L... 目的探讨siRNA技术沉默DNA甲基转移酶1(DNMT1)基因表达对前列腺癌细胞(LNCap)增殖、凋亡的影响,初步分析其对谷胱甘肽S转移酶P1(GSTP1)、矮小同源盒基因2(SHOX2)、凋亡相关蛋白激酶(DAPK)甲基化状态的影响。方法体外培养人前列腺癌细胞LNCap、正常前列腺上皮细胞RWPE-1,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)及蛋白印迹(WB)检测细胞中DNMT1 mRNA及蛋白表达水平。实验分为3组:空白对照组(未经任何处理LNCap细胞);si-NC组(转染DNMT1阴性对照质粒的LNCap细胞);si-SH2B1组(转染si-DNMT1的LNCap细胞)。采用CCK-8法检测三组细胞增殖抑制率;流式细胞仪检测细胞凋亡水平。采用甲基化特异性PCR(MSP)检测GSTP1、SHOX2、DAPK基因甲基化状态;qRT-PCR与WB法分别检测各组LNCap细胞DNMT1、GSTP1、SHOX2、DAPK mRNA及蛋白表达情况。结果与正常组细胞相比,前列腺癌组细胞中DNMT1 mRNA及蛋白表达水平均显著升高(P<0.05);si-DNMT1组DNMT1 mRNA及蛋白表达水平均显著低于空白对照组、si-NC组(P<0.05);与空白对照组、si-NC组相比,si-DNMT1组LNCap细胞增殖抑制率、细胞凋亡率、GSTP1、SHOX2、DAPK mRNA及蛋白表达水平均显著升高(P<0.05);与空白对照组、si-NC组相比,si-DNMT1组GSTP1、DAPK、SHOX2基因甲基化水平均显著降低(P<0.05)。结论沉默DNMT1基因后可明显抑制LNCap细胞增殖并促使其凋亡,其可能通过逆转GSTP1、DAPK、SHOX2甲基化状态并上调其表达而发挥作用。 展开更多
关键词 前列腺癌 DNA甲基转移酶1 谷胱甘肽S转移酶P1 矮小同源盒基因2 凋亡相关蛋白激酶
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转录因子T-复合物蛋白10样基因研究进展 预览
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作者 张爱贤(综述) 李立人(综述) 曹晓蕾(审校) 《南通大学学报:医学版》 2012年第1期 51-53,共3页
转录因子T-复合物蛋白10样基因(TCP10L)是近年来新发现的转录抑制因子,仅在灵长类动物内表达。它能通过亮氨酸拉链与凋亡相关蛋白激酶等相互作用。由于TCP10L仅在人类的睾丸和肝脏中表达,因此TCP10L对于研究人类睾丸和肝脏疾病具有重... 转录因子T-复合物蛋白10样基因(TCP10L)是近年来新发现的转录抑制因子,仅在灵长类动物内表达。它能通过亮氨酸拉链与凋亡相关蛋白激酶等相互作用。由于TCP10L仅在人类的睾丸和肝脏中表达,因此TCP10L对于研究人类睾丸和肝脏疾病具有重要意义。 展开更多
关键词 原发性肝癌 T-复合物蛋白10样基因 凋亡相关蛋白激酶
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抑癌基因DAPK在肿瘤的发生、转移、复发、预后中的作用 预览 被引量:7
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作者 王振宝 潘晓琳 +1 位作者 陈少泽 潘泽民 《生命的化学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期 295-298,共4页
肿瘤对人类生命危害极大,关于肿瘤的形成、发展等方面的研究,已越来越受到人们的关注。现在已认识到,肿瘤的形成是一个多因素、多基因、多阶段的过程,是促细胞生长和抑制细胞生长两大类调节基因失衡的结果。对于这两大类调节基因失衡的... 肿瘤对人类生命危害极大,关于肿瘤的形成、发展等方面的研究,已越来越受到人们的关注。现在已认识到,肿瘤的形成是一个多因素、多基因、多阶段的过程,是促细胞生长和抑制细胞生长两大类调节基因失衡的结果。对于这两大类调节基因失衡的原因及导致肿瘤的发生还不明确。另外,关于肿瘤的预防和治疗等方面研究还不清楚。DAPK基因从发现后,科学家们就认识到其与肿瘤的形成、发展有重要关系。本文就DAPK与肿瘤的关系作一概述。 展开更多
关键词 凋亡相关蛋白激酶 细胞凋亡 肿瘤
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宫颈癌组织中凋亡相关蛋白激酶的表达 预览
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作者 孟志英 赵先兰 《郑州大学学报:医学版》 CAS 北大核心 2008年第2期 335-337,共3页
目的:检测宫颈癌及子宫颈癌前病变组织中凋亡相关蛋白激酶(DAPK)蛋白的表达情况。方法:用免疫组织化学SP法检测52例宫颈癌、60例宫颈上皮内瘤变(CIN)及正常宫颈鳞状上皮组织中DAPK蛋白的表达。结果:正常宫颈、CIN和宫颈癌组织中D... 目的:检测宫颈癌及子宫颈癌前病变组织中凋亡相关蛋白激酶(DAPK)蛋白的表达情况。方法:用免疫组织化学SP法检测52例宫颈癌、60例宫颈上皮内瘤变(CIN)及正常宫颈鳞状上皮组织中DAPK蛋白的表达。结果:正常宫颈、CIN和宫颈癌组织中DAPK蛋白阳性率分别为100%(20/20)、75.0%(45/60)和40.4%·(21/52),差异有统计学意义(χ^2=27.310,P〈0.05)。CINⅠ组织中DAPK蛋白阳性率高于CINⅢ组织(P〈0.05)。DAPK表达与宫颈癌临床分期有关(P〈0.05),而与宫颈癌的病理类型、组织学分级和淋巴结转移等因素无关(P〉0.05)。结论:DAPK作为一种抑癌基因,可能参与了宫颈癌的发生发展,有可能成为一个有价值的宫颈癌分子标志物。 展开更多
关键词 宫颈癌 宫颈上皮内瘤变 凋亡相关蛋白激酶
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冠心病不稳定斑块凋亡相关基因表达紊乱的机制研究 预览 被引量:1
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作者 余小平 曲环 +4 位作者 张斌 李晓苏 杭娟 董会弈 王纯 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第12期 1493-1495,共3页
目的探讨冠心病不稳定斑块中凋亡相关基因的表达情况及调控机制.方法 86例冠心病患者,其中不稳定组42例,稳定组44例.取两组冠脉斑块标本,Northern Blot和Western Blot检测Bax、caspase-3和凋亡相关蛋白激酶(DAPK)的表达水平,并与正常对... 目的探讨冠心病不稳定斑块中凋亡相关基因的表达情况及调控机制.方法 86例冠心病患者,其中不稳定组42例,稳定组44例.取两组冠脉斑块标本,Northern Blot和Western Blot检测Bax、caspase-3和凋亡相关蛋白激酶(DAPK)的表达水平,并与正常对照组进行比较.结果对照组和稳定组的caspase-3表达水平基本类似(P>0.05),不稳定组约为其他组的2倍(P<0.01);不稳定组的Bax和DAPK表达达到对照组的3倍和6倍(P<0.01).对照组冠脉平滑肌细胞(VSMC)置于LDL中培养,细胞凋亡率显著上升(P<0.01);caspase-3的表达上升幅度为正常状态的1.5倍(P<0.05),Bax和DAPK的上升均达到正常细胞的3倍(P<0.01).结论冠状动脉粥样硬化(CAS)组织中,高浓度LDL诱发凋亡相关基因表达紊乱是导致细胞凋亡失衡的重要原因,其中Bax和DAPK可能是这一调控途径中的关键分子. 展开更多
关键词 冠状动脉粥样硬化 不稳定斑块 凋亡 BAX 凋亡相关蛋白激酶 低密度脂蛋白
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甲基化修饰对宫颈癌细胞凋亡相关蛋白激酶表达的调控 预览
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作者 党艳丽 郑维国 +1 位作者 辛晓燕 薛泉 《陕西医学杂志》 CAS 北大核心 2004年第2期 99-101,共3页
目的:探讨在DNA甲基转移酶抑制剂5-氮胞苷(5-azacytidine)的化学干预下,宫颈鳞癌细胞SiHa和宫颈腺癌细胞HeLa中凋亡相关蛋白激酶(DAPK)基因与甲基化调控的关系.方法:培养SiHa、HeLa,以10μmol/L浓度的5-氮胞苷干预细胞.提取细胞RNA,用... 目的:探讨在DNA甲基转移酶抑制剂5-氮胞苷(5-azacytidine)的化学干预下,宫颈鳞癌细胞SiHa和宫颈腺癌细胞HeLa中凋亡相关蛋白激酶(DAPK)基因与甲基化调控的关系.方法:培养SiHa、HeLa,以10μmol/L浓度的5-氮胞苷干预细胞.提取细胞RNA,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测凋亡相关蛋白激酶基因mRNA的表达.结果:HeLa细胞的DAPK基因用5-氮胞苷干预前后无明显变化.SiHa中DAPK基因表达缺失,用5-氮胞苷处理后,SiHa中DAPK基因可重新表达.结论:在不同类型宫颈癌细胞中DAPK基因的调控有明显差异.DAPK基因在宫颈鳞癌细胞中的表达受DNA甲基化调控,在腺癌细胞中则不受甲基化调控. 展开更多
关键词 甲基化 宫颈癌 细胞凋亡 凋亡相关蛋白激酶 DNA甲基转移酶 5-氮胞苷 RT-PCR 细胞培养
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FK506对大鼠弥漫性轴索损伤后神经元凋亡及轴突再生相关蛋白表达的影响 预览 被引量:1
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作者 黄廷钦 宋锦宁 +5 位作者 李宇 胡明军 赵雅慧 刘晓斌 郭小叶 郑锋伟 《西安交通大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期45-53,共9页
目的研究FK506对大鼠弥漫性轴索损伤后神经元凋亡及轴突再生相关蛋白神经丝蛋白200(NF200)、神经生长相关蛋白43(GAP-43)、凋亡相关蛋白激酶1(DAPK1)表达的影响。方法通过头颅瞬间旋转损伤装置建立大鼠弥漫性轴索损伤模型,90只SD... 目的研究FK506对大鼠弥漫性轴索损伤后神经元凋亡及轴突再生相关蛋白神经丝蛋白200(NF200)、神经生长相关蛋白43(GAP-43)、凋亡相关蛋白激酶1(DAPK1)表达的影响。方法通过头颅瞬间旋转损伤装置建立大鼠弥漫性轴索损伤模型,90只SD成年雄性大鼠随机分为假手术组、DAI模型组、FK506干预组(各组又分为6h、1d、7d亚组,各组n=10);各组于预定时间点采用mNSS法评估神经功能,免疫组化染色法检测DAPK1、NF200的表达变化,Western blot法检测GAP-43的表达变化、TUNEL检测神经元凋亡,实验数据以均数±标准差记录,使用统计学SPSS 18.0软件进行单因素方差分析,以P〈0.05为差异有统计学意义。结果 FK506干预组较DAI组损伤后的NF200标记轴索病理改变显示,形成轴索肿胀、轴索球数目明显降低;FK506干预组较DAI组各时间点DAPK1蛋白表达明显降低,神经元凋亡数目明显减少,GAP-43、NF200蛋白表达明显升高。结论 FK506能够在DAI后减少神经元细胞凋亡与轴索病理改变,减轻神经组织损伤;FK506能够加速神经元再生,促进脑组织损伤的修复。 展开更多
关键词 FK506 弥漫性轴索损伤 神经丝蛋白200 神经生长相关蛋白43 凋亡相关蛋白激酶1 细胞凋亡 颅脑损伤
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DAPK1、hTERT在口腔鳞癌中的表达及其临床意义研究 被引量:1
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作者 孙长生 王姗 +2 位作者 施磊 孟琰 赵尔杨 《现代生物医学进展》 CAS 2014年第33期6557-6560,6550共5页
目的:探讨凋亡相关蛋白激酶1(DAPK1)、端粒酶催化亚单位(hTERT)在口腔鳞状细胞癌(OSCC)中的表达,并探讨其临床意义。方法:应用免疫组织化学方法检测DAPK1、hTERT在93例OSCC组织及10例癌旁正常组织中的表达,并分析其与OSCC临床... 目的:探讨凋亡相关蛋白激酶1(DAPK1)、端粒酶催化亚单位(hTERT)在口腔鳞状细胞癌(OSCC)中的表达,并探讨其临床意义。方法:应用免疫组织化学方法检测DAPK1、hTERT在93例OSCC组织及10例癌旁正常组织中的表达,并分析其与OSCC临床病理参数之间的关系及其在OSCC浸润前沿中的作用。结果:癌旁正常组织中DAPK1的表达显著高于OSCC组织中DAPK1的表达,且高、中、低分化OSCC组织中DAPK1的表达比较均有显著差异(P〈0.05),OSCC浸润前沿组织中DAPK1的表达低于非前沿部分(P〈0.05),而DAPK1的表达与OSCC浸润前沿的IFG总分无显著相关性(P〉0.05)。癌旁正常组织中hTERT的表达显著低于OSCC组织中hTERT的表达(P〈0.05),且高、中、低分化OSCC组织中hTERT的表达比较均有显著差异(P〈0.05);OSCC浸润前沿组织中hTERT的表达高于非前沿部分(P〈0.05),且与OSCC浸润前沿的IFG总分有关(P〈0.05)。DAPK1、hTERT的表达均与OSCC患者的性别、年龄、淋巴结转移无显著相关性(P〉0.05)。结论:口腔鳞状细胞癌组织,特别是其前沿组织中DAPK1的表达显著下调和hTERT的表达明显上调,可能通过阻碍口腔鳞状细胞癌细胞凋亡,共同促进口腔鳞状细胞癌的生长、分化和浸润。 展开更多
关键词 凋亡相关蛋白激酶1 端粒酶催化亚单位 口腔鳞状细胞癌
5-氮胞苷对宫颈癌细胞系DAPK1异常甲基化的影响 预览 被引量:7
9
作者 党艳丽 马晓旗 +2 位作者 毕红梅 郑维国 辛晓燕 《西安交通大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期 48-51,共4页
目的观察宫颈癌细胞系SiHa及HeLa中凋亡相关蛋白激酶1(DAPK1)的表达与甲基化修饰之间的相关性,以及5-氮胞苷对细胞DAPK1表达和生长的影响.方法应用甲基化特异性PCR法分析细胞中DAPK1的甲基化状态;采用RT-PCR及免疫组化SABC法检测不同浓... 目的观察宫颈癌细胞系SiHa及HeLa中凋亡相关蛋白激酶1(DAPK1)的表达与甲基化修饰之间的相关性,以及5-氮胞苷对细胞DAPK1表达和生长的影响.方法应用甲基化特异性PCR法分析细胞中DAPK1的甲基化状态;采用RT-PCR及免疫组化SABC法检测不同浓度5-氮胞苷干预对宫颈癌细胞DAPK1 mRNA及蛋白表达的影响;MTT法观察5-氮胞苷对细胞增殖的影响.结果 DAPK1基因在宫颈癌细胞SiHa中有甲基化修饰,5-氮胞苷干预能使其甲基化的DAPK1基因重新表达并抑制细胞生长.结论 DAPK1的甲基化修饰是宫颈癌发生重要机制之一,5-氮胞苷能使甲基化的DAPK1去除甲基化修饰,重新表达并恢复抑癌作用. 展开更多
关键词 宫颈癌细胞 DNA甲基化 凋亡相关蛋白激酶1 5-氮胞苷
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胞二磷胆碱对大鼠弥漫性轴索损伤后神经元保护作用的研究 预览 被引量:4
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作者 杨帆 邓璐 《实用医院临床杂志》 2016年第2期63-65,共3页
目的探讨胞二磷胆碱对大鼠弥漫性轴索损伤(diffuse axonal injury,DAI)后脑细胞功能变化的影响,评估药物的治疗价值。方法采用大鼠头部瞬间旋转损伤装置制备DAI模型,通过胞二磷胆碱及神经元凋亡通路抑制剂辛伐他汀干预控制,对比观察... 目的探讨胞二磷胆碱对大鼠弥漫性轴索损伤(diffuse axonal injury,DAI)后脑细胞功能变化的影响,评估药物的治疗价值。方法采用大鼠头部瞬间旋转损伤装置制备DAI模型,通过胞二磷胆碱及神经元凋亡通路抑制剂辛伐他汀干预控制,对比观察胞二磷胆碱对DAI大鼠神经修复的作用,于术后24、48、72 h及7d提取脑组织标本,western blot法检测SDF-1和神经元凋亡及死亡相关蛋白激酶1(DAPK1)的表达变化,并检测β-APP的表达来指示轴突的损伤程度,用免疫荧光染色指示Rh OA和NOGO-A表达的相关性。结果 DAI模型组24 h后均出现明显的神经细胞坏死和轴突变性等病理改变;大脑皮层Rh OA、NOGO-A、SDF-1和DAPK1随着DAI后时间的延长而增加,经免疫荧光双染色显示两者在脑内的表达有显著的同一性;胞二磷胆碱及辛伐他汀能明显降低SDF-1和DAPK1的表达,胞二磷胆碱作用更加显著。结论胞二磷胆碱可明显改善DAI后神经功能并减轻轴突损伤。 展开更多
关键词 弥漫性轴索损伤 胞二磷胆碱 RH OA 神经元凋亡及死亡相关蛋白激酶1 神经保护 颅脑损伤
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