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白花蛇舌草-半枝莲药对乙酸乙酯组分对破骨细胞分化的抑制作用
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作者 徐元 陈龙 章丹丹 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期44-50,共7页
目的研究白花蛇舌草-半枝莲药对乙酸乙酯组分( YDW11)对破骨细胞分化的抑制作用.方法UPLC-MS 法鉴定YDW11 中化学成分后,MTT 法分析其对RAW264.7 细胞活力的影响.100 ng /mL 核因子-κB 受体活化因子配体( RANKL)诱导RAW264.7 细胞7 d ... 目的研究白花蛇舌草-半枝莲药对乙酸乙酯组分( YDW11)对破骨细胞分化的抑制作用.方法UPLC-MS 法鉴定YDW11 中化学成分后,MTT 法分析其对RAW264.7 细胞活力的影响.100 ng /mL 核因子-κB 受体活化因子配体( RANKL)诱导RAW264.7 细胞7 d 以建立破骨细胞模型后,抗酒石酸酸性磷酸酶( TRAP)染色考察TRAP 阳性多核细胞数,相应试剂盒测定TRAP 酶活性.QRT-PCR 检测TRAP、树突状细胞-特异性跨膜蛋白( DC-STAMP)、活化T细胞核因子cl ( NFATc1)基因表达,Western blotting 检测核因子κB 受体活化因子( RANK)、肿瘤坏死因子受体相关因子6 ( TRAF6)、NFATc1、组织蛋白酶K 蛋白表达,Taqman MicroRNA RT-PCR 检测miR-155 表达.结果YDW11中有16 种成分,鉴定出对羟基苯乙酮、野黄芩苷、木犀草素、芹菜素.与模型组比较,YDW11 组( 25、50 μg /mL)阳性多核细胞数显著减少( P< 0.01),并对细胞活力无明显影响( P> 0.05);呈剂量依赖性地显著抑制酶活性,TRAP、DC-STAMP、NFATc1 基因表达,RANK、TRAF6、NFATc1、组织蛋白酶K 蛋白表达( P<0.05),并显著提高miR-155 表达( P<0.05).结论YDW11 可通过上调miR-155 表达、下调相关基因和蛋白表达抑制RANKL 诱导的破骨细胞分化. 展开更多
关键词 白花蛇舌草 半枝莲 药对 乙酸乙酯组分 破骨细胞 分化
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Ngn2基因转染对小鼠体外培养三维视杯结构视网膜神经元分化的调控作用 预览
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作者 冷云霞 张蒙 +2 位作者 吴敏 任国梁 高宗银 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期10-15,共6页
目的探讨Ngn2基因对小鼠体外培养三维视杯结构视网膜神经元分化的调控作用。方法采用小鼠诱导多能干细胞(iPSC)在特定条件下体外培养获取视泡结构(OV),OV培养过程中通过慢病毒介导Ngn2基因多次转染OV,并在OV发育成熟后进行诱导,促进OV... 目的探讨Ngn2基因对小鼠体外培养三维视杯结构视网膜神经元分化的调控作用。方法采用小鼠诱导多能干细胞(iPSC)在特定条件下体外培养获取视泡结构(OV),OV培养过程中通过慢病毒介导Ngn2基因多次转染OV,并在OV发育成熟后进行诱导,促进OV内细胞向视网膜神经细胞的特异性分化。以绿色荧光蛋白(EGFP)基因作为对照,免疫荧光法检测OV内视网膜神经细胞的分化情况,采用逆转录PCR和Western blot法定量检测OV内视网膜神经细胞特异性蛋白Pax6、Islet1和Brn3b基因和蛋白的表达情况。结果成功培养出小鼠iPSC来源的OV。慢病毒介导下经Ngn2基因诱导的OV组织内部神经细胞的分化数量增加。逆转录PCR和Westernblot法定量检测结果显示,Ngn2转染组OV内视网膜神经细胞特异性蛋白Pax6、Islet1和Brn3b在基因及蛋白水平的相对表达量均明显高于EGFP转染组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论Ngn2基因转染可有效提高OV内视网膜神经细胞的分化数量,使体外培养的OV发育更为成熟,形成更为完善的视网膜细胞神经环路。 展开更多
关键词 神经视网膜 Ngn2基因 视泡 分化 基因转染
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碱性成纤维细胞因子对SD大鼠表皮干细胞分化为神经干细胞的影响 预览
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作者 许正伟 贺宝荣 +2 位作者 刘团江 郭华 郝定均 《安徽医药》 CAS 2019年第3期445-449,共5页
目的研究碱性成纤维细胞因子(bFGF)对大鼠表皮干细胞分化为神经细胞的影响。方法分离获得饲养了1~3天的新生SD大鼠表皮基底层组织,利用10^min快速贴壁法消化、分离获得表皮干细胞,于倒置显微镜下观察表皮干细胞的形态。培养表皮干细胞... 目的研究碱性成纤维细胞因子(bFGF)对大鼠表皮干细胞分化为神经细胞的影响。方法分离获得饲养了1~3天的新生SD大鼠表皮基底层组织,利用10^min快速贴壁法消化、分离获得表皮干细胞,于倒置显微镜下观察表皮干细胞的形态。培养表皮干细胞的培养基为K-SFM,然后按照不同密度表皮干细胞进行分组处理(0.1×10^7/mL,0.3×10^7/mL,0.5×10^7/mL,0.1×10^6/mL),每组加入20ng/mL的bFGF,利用细胞免疫组织化学法检测细胞标志物Nestin和NSE的变化,以及观察细胞形态发生的变化。结果成功分离得到SD大鼠表皮干细胞;bFGF诱导后,0.3×10^7/mL组和0.1×10^7/mL组细胞第3天即可见细胞开始伸展生长,在约1周时细胞开始分化成神经细胞;且在细胞形态发生双极化改变的数目趋势上也具有一致性;Nestin和NSE检测均呈阳性表达。结论bFGF有助于诱导表皮干细胞向神经细胞的分化,而且该诱导作用具有一定的细胞密度依赖性。 展开更多
关键词 碱性成纤维细胞因子 表皮干细胞 神经细胞 分化
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抑制自噬对根尖乳头干细胞成骨分化水平的影响
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作者 黄颖 熊华翠 +5 位作者 陈柯 朱晓斌 尹小萍 梁韵 罗薇 雷期音 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期106-112,共7页
目的探讨抑制自噬对根尖乳头干细胞成骨分化水平的影响。方法5、10ng/mL肿瘤坏死因子-α(TNF-α)分别处理根尖乳头干细胞(SCAPs),对照组不做处理,检测自噬相关蛋白LC3-II表达水平,GFP-LC3质粒转染并检测细胞内GFP-LC3数目,吖啶橙染色检... 目的探讨抑制自噬对根尖乳头干细胞成骨分化水平的影响。方法5、10ng/mL肿瘤坏死因子-α(TNF-α)分别处理根尖乳头干细胞(SCAPs),对照组不做处理,检测自噬相关蛋白LC3-II表达水平,GFP-LC3质粒转染并检测细胞内GFP-LC3数目,吖啶橙染色检测酸性囊泡情况。TNF-α,TNF-α+3-MA分别处理SCAPs,检测LC3-II的表达水平,GFP-LC3质粒转染并检测GFP-LC3数目,CCK-8法检测细胞活力,流式细胞仪检测细胞凋亡。TNF-α、TNF-α+3-MA分别处理SCAPs,对照组不做处理,诱导成骨向分化,qRT-PCR检测分化第3、7、14天时成骨相关基因碱性磷酸酶(ALP)、骨涎蛋白(BSP)、骨钙素(OCN)的表达。结果TNF-α可诱导SCAPs自噬活化:TNF-α组LC3-II/β-actin水平较对照组升高且具有浓度依赖性(P<0.05),TNF-α组GFP-LC3数目较对照组升高且具有浓度依赖性(P<0.05),TNF-α组酸性囊泡较对照组增多。3-MA可抑制TNF-α诱导的SCAPs自噬活化:TNF-α+3-MA组LC3-II/β-actin水平及细胞内GFP-LC3数目较TNF-α组显著降低(P<0.05),并下调细胞活力(P<0.05),上调细胞凋亡水平(P<0.05)。抑制自噬导致SCAPs成骨分化的抑制:TNF-α+3-MA组ALP、BSP表达量在分化第3、7、14天均较TNF-α组降低(P<0.05),OCN的表达量在第3、7天较TNF-α组降低(P<0.05)。结论TNF-α可诱导SCAPs自噬水平的活化;自噬可能对TNF-α作用下的SCAPs起细胞保护作用,对抗细胞凋亡;自噬的抑制将下调TNF-α作用下SCAPs的成骨向分化水平,提示自噬在TNF-α作用下SCAPs的成骨分化过程中具有重要作用。 展开更多
关键词 根尖乳头干细胞 肿瘤坏死因子-Α 自噬 分化
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间充质干细胞诱导分化为皮肤附属器的研究进展
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作者 刘琇 臧传宝 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期58-60,共3页
临床患者由于外伤、严重烧伤及瘢痕切除等导致大面积皮肤缺损时面临自体皮肤移植供体不足的难题,且组织工程皮肤因皮肤附属器的缺失,导致汗液无法排出、毛发丧失等使患者生存质量和心理健康受到严重影响。随着再生医学的发展,间充质干... 临床患者由于外伤、严重烧伤及瘢痕切除等导致大面积皮肤缺损时面临自体皮肤移植供体不足的难题,且组织工程皮肤因皮肤附属器的缺失,导致汗液无法排出、毛发丧失等使患者生存质量和心理健康受到严重影响。随着再生医学的发展,间充质干细胞因其来源丰富、低免疫原性、体外扩增能力强及具有多向分化潜能的优势逐渐成为组织工程皮肤种子细胞来源的研究热点。本文就MSCs向毛囊、汗腺、皮脂腺等皮肤附属器的诱导分化作一综述。 展开更多
关键词 间充质干细胞 皮肤 毛囊 汗腺 皮脂腺 分化
支持细胞对精原干细胞增殖、分化调控的研究进展
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作者 王烁程 陈晓丽 +1 位作者 张林波 王栋 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期253-260,共8页
哺乳动物精子发生是在睾丸支持细胞(Sertoli cells,SCs)调节下完成的,SCs不但为精子发生提供物理支撑和稳定微环境,而且通过分泌多种蛋白对生殖细胞发挥增殖、分化、凋亡、吞噬、免疫豁免等多种调节作用。生理状态下,SCs调控精子发生的... 哺乳动物精子发生是在睾丸支持细胞(Sertoli cells,SCs)调节下完成的,SCs不但为精子发生提供物理支撑和稳定微环境,而且通过分泌多种蛋白对生殖细胞发挥增殖、分化、凋亡、吞噬、免疫豁免等多种调节作用。生理状态下,SCs调控精子发生的确切机制还不是很清楚。因此,本文对SCs与精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)及系列生精细胞特殊的结构关系以及二者间的调控关系进行了综述,以期为推动二者间调控机理的深入研究及提高动物育种繁殖效率提供参考。 展开更多
关键词 精原干细胞 支持细胞 调控 增殖 分化
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瘦素对人根尖乳头干细胞成骨/成牙本质相关基因表达的影响
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作者 尹小萍 熊华翠 +2 位作者 陈柯 黄颖 徐帅妹 《口腔疾病防治》 2019年第1期23-29,共7页
目的探讨瘦素(leptin)对人根尖乳头干细胞(human stem cells from the apical papilla,hSCAPs)增殖及成骨/成牙本质相关基因表达的影响,为临床年轻恒牙根尖持续发育的研究提供实验基础。方法采用人根尖乳头组织块培养法获得hSCAPs,以免... 目的探讨瘦素(leptin)对人根尖乳头干细胞(human stem cells from the apical papilla,hSCAPs)增殖及成骨/成牙本质相关基因表达的影响,为临床年轻恒牙根尖持续发育的研究提供实验基础。方法采用人根尖乳头组织块培养法获得hSCAPs,以免疫荧光染色法、Western blot和qRT-PCR分别检测hSCAPs中leptin及其受体OBRb蛋白及基因的表达。实验组用质量分数为0.1μg/mL的leptin(0.1μg/mL组)和1.5μg/mL的leptin(1.5μg/mL组)分别刺激hSCAPs,对照组仅加入α-MEM培养基,CCK-8、流式细胞仪法、qRT-PCR分别检测各组hSCAPs增殖情况及成骨/成牙本质相关基因:碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、牙本质基质蛋白-1(dentin matrix protein-1,DMP-1)和牙本质涎磷蛋白(dentin sialophosphoprotein,DSPP)、骨钙素(osteocalcin,OCN)mRNA的表达。结果hSCAPs表达leptin及其受体OBRb的蛋白及基因。与对照组相比,实验组细胞增殖能力及S期细胞比例均高于对照组(P<0.05),且其中1.5μg/mL组高于0.1μg/mL组(P<0.05)。3 d和7 d时,0.1μg/mL组、1.5μg/mL组hSCAPs的ALP、DMP-1、DSPP mRNA的表达量高于对照组,且1.5μg/mL组高于0.1μg/mL组,差异有统计学意义(P<0.05),14 d时0.1μg/mL组、1.5μg/mL组hSCAPs的ALP、DMP-1、DSPP mRNA的表达量明显低于对照组(P<0.05);0.1μg/mL组、1.5μg/mL组OCN mRNA的表达量于7 d、14 d时高于对照组,且1.5μg/mL组均高于0.1μg/mL组,差异有统计学意义(P<0.05),于14 d达到峰值。结论Leptin可促进hSCAPs增殖,并上调hSCAPs成骨/成牙本质相关基因的表达。 展开更多
关键词 牙源性 根尖乳头干细胞 瘦素 成骨/成牙本质相关基因 分化 牙本质基质蛋白.1 牙本质涎磷蛋白 骨钙素
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miR-199b促进慢性创面血管化的作用及机制研究 预览
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作者 邱尧 岳毅刚 +2 位作者 邵家松 霍群 张敏 《中国美容医学》 CAS 2019年第1期89-92,共4页
目的:探索miR-199b对HaCaT细胞增殖、迁移及对VEGFA、JAG1、SET信号通路的影响。方法:转染miR-199b上调与下调慢病毒到人永生化表皮细胞(HaCaT)。分为miR-199b上调(up)、miR-199b下调(dowm)、空载对照(NC组)三个组,进行CCK8、凋亡、周... 目的:探索miR-199b对HaCaT细胞增殖、迁移及对VEGFA、JAG1、SET信号通路的影响。方法:转染miR-199b上调与下调慢病毒到人永生化表皮细胞(HaCaT)。分为miR-199b上调(up)、miR-199b下调(dowm)、空载对照(NC组)三个组,进行CCK8、凋亡、周期试验,并采用RT-PCR技术检测VEGFA、JAG1、SET基因的表达,采用WB技术检测miR-199b对下游蛋白变化(如VEGFA、JAG1等分子)的影响。结果:miR-199b up组OD450/fold值显著高于NC组,差异有统计学意义(P<0.05)、miR-199b down组OD450/fold值略低于NC组,差异无统计学意义(P>0.05)。与NC组相比,G1期miR-199b up组与miR-199bdown组的细胞增多(P<0.05);在S期,miR-199b up组及miR-199b down组的细胞减少(P<0.05);在G2/M期,miR-199bup组及miR-199b down组的细胞减少,差异均具有统计学意义(P<0.05)。与NC组比较,miR-199b up组凋亡细胞百分比下降(P<0.05)、miR-199b down组凋亡细胞百分比上升(P<0.05);SET在miR-199b up组的表达明显低于NC组,在miR-199bdown组表达明显高于NC组。从定量PCR结果可以看出,HaCaT细胞中,miR-199b up组JAG1表达丰度略高于NC组,差异无统计学意义(P>0.05),miR-199b down组JAG1表达丰度明显高于NC组(P<0.05);miR-199b up组VEGFA表达丰度明显低于NC组(P<0.05)、miR-199b down组VEGFA表达丰度明显高于NC组(P<0.05);miR-199b up组SET表达丰度小于NC组(P>0.05)、miR-199b down组SET表达丰度明显大于NC组(P<0.05)。结论:miR-199b可抑制VEGF、JAG1、SET蛋白的表达,为其靶基因,可促进细胞的增殖,延长细胞周期,并抑制细胞凋亡。 展开更多
关键词 微小RNA 增殖 凋亡 分化 信号通路 慢性创面
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miR-21在鸭胚胎期胸肌发育中的功能研究
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作者 顾丽红 徐铁山 +5 位作者 林哲敏 赵建国 林鹏 杨少雄 林大捷 侯水生 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期287-301,共15页
x旨在通过研究鸭miR-21的分子特征、时空表达模式以及对鸭骨骼肌卫星细胞的增殖与分化的影响,为探索骨骼肌发育机制提供支撑。本研究选取180枚(98±5)g鸭蛋,相同条件孵化。从孵化第11天到第27天每天取3枚鸭蛋(分别表示为:E11、E12、... x旨在通过研究鸭miR-21的分子特征、时空表达模式以及对鸭骨骼肌卫星细胞的增殖与分化的影响,为探索骨骼肌发育机制提供支撑。本研究选取180枚(98±5)g鸭蛋,相同条件孵化。从孵化第11天到第27天每天取3枚鸭蛋(分别表示为:E11、E12、E13……E26、E27),无菌状态下逐只采集鸭胚胸肌样品。E27时另取3只鸭胚逐只采集腿肌、心、肝、肾、肌胃、小肠、腹脂和皮脂。混合酶消化法和差速贴壁法分离和纯化骨骼肌卫星细胞,骨骼肌卫星细胞增殖、分化时期分别过表达和干扰miR-21表达,利用荧光定量、蛋白杂交、EdU检测及流式细胞术等检测miR-21对鸭骨骼肌卫星细胞增殖和分化的影响。qRT-PCR结果显示,miR-21的表达随着孵化时间的增加而增加,E19天时到达最高,然后逐渐降低;E27时,miR-21在肝中的表达量最高。在增殖的鸭骨骼肌卫星细胞中过表达miR-21,荧光定量PCR检测CDK2和CyclinD1基因的mRNA表达量分别显著(P﹤0.05)和极显著增加(P﹤0.01),EdU检测阳性细胞数目显著增加(P﹤0.05),流式细胞仪检测发现G2期细胞数目极显著降低(P﹤0.01)、S期细胞数量显著增加(P﹤0.05)。在增殖的骨骼肌卫星细胞中,干扰miR-21表达,所得结果相反。在分化的鸭骨骼肌卫星细胞中过表达miR-21,qRT-PCR检测MyoG和MyHC基因的mRNA表达量均极显著增加(P﹤0.01);蛋白杂交(WB)检测结果显示,MyoG蛋白表达显著增加(P﹤0.05),MyHC蛋白表达极显著增加(P﹤0.01)。免疫荧光检测发现,MyHC阳性细胞数和10核以上的肌管数都极显著增加(P﹤0.01)。在分化的鸭骨骼肌卫星细胞中,干扰miR-21的表达,所得结果相反。结果表明,miR-21具有促进成肌细胞鸭骨骼肌卫星细胞增殖和分化的作用。 展开更多
关键词 MIR-21 骨骼肌卫星细胞 增殖 分化
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miRNAs在破骨细胞中的研究进展
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作者 邓亚军 解琪琪 +5 位作者 李文洲 史卫东 马靖琳 潘云燕 康学文 汪静 《生命科学研究》 CAS CSCD 2019年第1期54-58,共5页
破骨细胞起源于造血干细胞,是体内一种负责骨吸收的骨特异性多核细胞,在骨代谢平衡的调控中起着重要作用。破骨细胞的分化形成及功能活性异常可引起一系列临床疾病,而其分化形成过程受到多种因子的调控,近年来越来越多研究聚焦于miRNAs... 破骨细胞起源于造血干细胞,是体内一种负责骨吸收的骨特异性多核细胞,在骨代谢平衡的调控中起着重要作用。破骨细胞的分化形成及功能活性异常可引起一系列临床疾病,而其分化形成过程受到多种因子的调控,近年来越来越多研究聚焦于miRNAs对破骨细胞分化形成过程的调控作用。因此,本文主要对影响破骨细胞分化形成的相关miRNAs进行综述,为后续相关研究提供参考。 展开更多
关键词 破骨细胞 骨吸收 分化 MIRNAS
低氧对人牙周膜干细胞增殖和分化的影响
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作者 郑树灿 邹晖 +4 位作者 黄旭瑶 邵海宾 周勇 张瑞芳 李朝晖 《口腔医学研究》 CAS 北大核心 2019年第1期38-41,共4页
目的:观察低氧预处理对人牙周膜干细胞(human periodontal ligament stem cells,hPDLSCs)干性的影响。方法:收集hPDLSCs并进行鉴定后,分别在常氧(20%O2)和低氧(5%O2)环境下培养5d,噻唑蓝(methyl thiazol tetrazolium,MTT)法检测细胞的... 目的:观察低氧预处理对人牙周膜干细胞(human periodontal ligament stem cells,hPDLSCs)干性的影响。方法:收集hPDLSCs并进行鉴定后,分别在常氧(20%O2)和低氧(5%O2)环境下培养5d,噻唑蓝(methyl thiazol tetrazolium,MTT)法检测细胞的增殖能力。分别在低氧环境培养1d和5d,实时定量聚合酶链反应(Real-time quantitative polymerase chain reaction,Real-time PCR)检测hPDLSCs中干性相关基因Oct4、Sox2、Nanog的mRNA表达水平。细胞增殖核抗原Ki-67染色法和结晶紫染色观察细胞自我更新能力。分别用成骨和成脂诱导hPDLSCs 21d,观察低氧对人牙周膜干细胞多项分化能力的影响。结果:MTT结果显示低氧预处理能显著增强hPDLSCs增殖能力(P<0.05)。Real-time PCR结果显示低氧在第1天和第5天时能够提高细胞的干性基因表达(P<0.05),其中在第5天的时候SOX2的提高最为显著(P<0.05)。结晶紫染色结果表明,低氧环境能够增加细胞克隆形成率(P<0.05)。低氧环境还能增强干细胞的成骨分化能力,成骨相关基因RUNX2的表达显著提高(P<0.05),但是对成脂相关基因的增强不明显,对成脂标志基因PPARγ2的影响不明显。结论:低氧预处理hPDLSCs能够提高细胞的增殖和干性相关基因的表达。另外,低氧环境也能提高干细胞的分化,其中对成骨相关基因的促进作用较为显著,但对成脂分化影响不大。 展开更多
关键词 低氧 人牙周膜干细胞 增殖 分化
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脂肪干细胞向神经方向诱导分化的研究现状 预览
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作者 李珂雅 白琳 +1 位作者 高舒平 秦川 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2019年第2期106-110,共5页
神经退行性疾病是一类以神经元退行性病变为主要特征的疾病,目前在全球范围内频发,尚无有效的治疗措施。干细胞具有自我更新和定向分化的潜能,为神经退行性疾病中大脑功能的恢复提供了新的治疗方法。脂肪干细胞是由中胚层发育而来的多... 神经退行性疾病是一类以神经元退行性病变为主要特征的疾病,目前在全球范围内频发,尚无有效的治疗措施。干细胞具有自我更新和定向分化的潜能,为神经退行性疾病中大脑功能的恢复提供了新的治疗方法。脂肪干细胞是由中胚层发育而来的多潜能干细胞,在特定的生长因子和环境诱导下可以向不同的谱系分化,同时具有获取方便、容易培养的特点,因此脂肪组织来源的干细胞在治疗神经退行性疾病方面有其独特优势。本文就神经退行性疾病概况、脂肪干细胞生物学特性及向神经方向诱导分化的研究现状以综述。 展开更多
关键词 脂肪干细胞 神经退行性疾病 分化
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miR-382-5p通过靶基因PTEN阻滞NB4细胞分化
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作者 刘冬冬 刘北忠 +9 位作者 袁桢 姚娟娟 钟鹏强 刘俊梅 姚仕菲 赵毅 刘路 陈敏 李连文 钟梁 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2019年第1期63-71,共9页
该文主要研究在急性早幼粒细胞白血病NB4细胞中, miR-382-5p通过调控靶基因PTEN(phosphatase and tensin homologue)抑制了全反式维甲酸(all-trans retinoic acid, ATRA)诱导的急性早幼粒细胞分化。我们运用ATRA(1μmol/L)诱导细胞分化;... 该文主要研究在急性早幼粒细胞白血病NB4细胞中, miR-382-5p通过调控靶基因PTEN(phosphatase and tensin homologue)抑制了全反式维甲酸(all-trans retinoic acid, ATRA)诱导的急性早幼粒细胞分化。我们运用ATRA(1μmol/L)诱导细胞分化;Western blot检测PTEN及髓系分化标志物CD11b的蛋白质水平;实时荧光定量PCR检测miR-382-5p的表达水平;过表达PTEN的慢病毒载体分别感染NB4细胞和HL-60、THP-1细胞;脂质体转染miR-382-5p的模拟剂(mimics)和特异性抑制剂(inhibitors)NB4细胞。结果显示, PTEN促进ATRA诱导的NB4细胞分化,而在HL-60和THP-1细胞中并无明显促分化效应。NB4细胞中,脂质体转染miR-382-5p mimics在mRNA和蛋白水平均抑制了PTEN的表达,并且抑制了ATRA诱导的分化;转染miR-382-5p inhibitors则恢复了PTEN表达,同时促进了ATRA诱导的急性早幼粒细胞NB4细胞的分化。该文结果提示, miR-382-5p靶向抑制了PTEN的表达从而抑制ATRA诱导的NB4细胞分化。 展开更多
关键词 PTEN miR-382-5p 急性早幼粒细胞白血病 全反式维甲酸 分化
牙髓干细胞生物学特性影响因素的研究进展
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作者 胡慧婷 于凤麟 赵月萍 《口腔疾病防治》 2019年第4期268-272,共5页
牙髓干细胞(dentalpulpstemcells,DPSCs)是一种来源于牙髓组织的具有自我更新、高度增殖能力 及多向分化潜能的间充质干细胞。在适当的诱导条件下,可以分化为成骨细胞、成牙本质细胞、软骨细胞、脂 肪细胞、神经元性细胞等多种细胞,目... 牙髓干细胞(dentalpulpstemcells,DPSCs)是一种来源于牙髓组织的具有自我更新、高度增殖能力 及多向分化潜能的间充质干细胞。在适当的诱导条件下,可以分化为成骨细胞、成牙本质细胞、软骨细胞、脂 肪细胞、神经元性细胞等多种细胞,目前已逐渐应用于临床试验及临床前期研究,是口腔组织工程与再生医 学领域重要的种子细胞之一。本文结合近年来国内外文献对影响DPSCs生物学特性的因素作一综述。文献 综述结果表明,组织来源、培养方法、不同环境及诱导条件等多种因素可以影响DPSCs生物学特性,这对牙髓 干细胞的研究及应用具有指导意义。 展开更多
关键词 牙髓干细胞 生物学特性 影响因素 诱导条件 分化 组织工程 再生医学
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应力及细胞外基质与肌腱细胞分化的研究进展 预览
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作者 刘云逸 《当代体育科技》 2019年第4期28-30,共3页
近年来,运动所导致的慢性损伤一直是一个大家比较关注的热点研究方向。而这其中运动导致的肌腱退行性改变也一直是此研究领域里面的一个重点和难点。一般相关研究大多是从各细胞因子、炎症因子之间的相互作用来进行研究,缺乏从细胞分化... 近年来,运动所导致的慢性损伤一直是一个大家比较关注的热点研究方向。而这其中运动导致的肌腱退行性改变也一直是此研究领域里面的一个重点和难点。一般相关研究大多是从各细胞因子、炎症因子之间的相互作用来进行研究,缺乏从细胞分化以及细胞外环境改变对分化影响的角度进行的研究。因此,本文对应力、细胞外基质与肌腱细胞分化之间的关系进行综述,以期对相关领域的研究者有所启发。 展开更多
关键词 运动损伤 分化 细胞外基质 机理研究
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B细胞连接蛋白的结构、功能及其在B细胞相关疾病发展中的作用
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作者 肖斌 李嘉颖 +5 位作者 周梦思 李晓晴 黄晓燕 杭建峰 孙朝晖 李林海 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期253-256,F0003共5页
B细胞连接蛋白,是B细胞受体通路的关键接头蛋白。B细胞连接蛋白通过自身的结构特性及蛋白互作网络参与调控PLC-γ的活性和Ras通路激活,在B细胞受体信号转导中发挥重要作用,广泛参与调控B细胞的增殖、分化、凋亡及信号传导等过程,并与过... B细胞连接蛋白,是B细胞受体通路的关键接头蛋白。B细胞连接蛋白通过自身的结构特性及蛋白互作网络参与调控PLC-γ的活性和Ras通路激活,在B细胞受体信号转导中发挥重要作用,广泛参与调控B细胞的增殖、分化、凋亡及信号传导等过程,并与过敏性疾病、多发性硬化症、染色体组非整倍体、无丙种球蛋白血症、B淋巴细胞白血病、淋巴瘤的发生发展密切相关。本文对B细胞连接蛋白的结构、生物学功能及其在B细胞相关疾病中的作用进行综述:B细胞连接蛋白可与多个效应蛋白协作,激活B细胞受体信号通路,从而影响着B细胞的发育成熟及功能调节;B细胞连接蛋白发生功能性突变,会破坏B细胞稳态并影响B细胞发育成熟,从而导致B细胞相关疾病的发生。全面总结B细胞连接蛋白的生物学功能不仅有助于了解B细胞相关疾病的发生机制,也有望将B细胞连接蛋白作为相关疾病的治疗靶标提供新思路和突破口。 展开更多
关键词 B细胞连接蛋白 B细胞受体 信号通路 分化 B细胞相关疾病
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转录因子Krüppel样因子4抑制骨髓间充质干细胞向髓核样细胞分化研究
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作者 王亚寒 罗建平 +2 位作者 王小刚 杨彬 张新胜 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期27-30,共4页
目的 观察Krüppel样因子4(KLF4)对转化生长因子(TGF)-β1诱导的人骨髓间充质干细胞(BMSCs)向髓核样细胞分化的影响。方法实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和Western blot检测TGF-β1诱导BMSCs 7 d和14 d对KLF4 mRNA和蛋白表达... 目的 观察Krüppel样因子4(KLF4)对转化生长因子(TGF)-β1诱导的人骨髓间充质干细胞(BMSCs)向髓核样细胞分化的影响。方法实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和Western blot检测TGF-β1诱导BMSCs 7 d和14 d对KLF4 mRNA和蛋白表达的影响;建立KLF4过表达BMSC细胞株,用TGF-β1诱导7 d或14 d,细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖,Real-time PCR和Western blot分析髓核细胞相关蛋白聚集蛋白聚糖(Aggrecan)、Ⅱ型胶原蛋白α1链(Col2A1)、性别决定区Y框蛋白9(SOX9)、角蛋白19(KRT19)和叉头蛋白(FOXF1)表达。结果 与对照组比较,TGF-β1诱导后KLF4 mRNA和蛋白表达均显著降低(第7天mRNA:0.653±0.083比1.027±0.068,t=6.012,P<0.01;第14天mRNA:0.453±0.065比1.063±0.096,t=9.105,P<0.01;第7天蛋白,0.601±0.112比0.873±0.051,t=3.874,P<0.05;第14天蛋白:0.251±0.087比0.893±0.078,t=9.543,P<0.01),细胞增殖增加(第7天,166.355±11.132比99.647±6.220,t=9.064,P<0.01;第14天:195.333±10.512比124.667±9.609,t=8.598,P<0.01),Aggrecan、Col2A1、SOX9、KRT19、FOXF1 mRNA (Aggrecan:2.600±0.255比1.017±0.095,t=10.07,P<0.01;Col2A1:3.441±0.259比1.010±0.076,t=15.58,P<0.01;SOX9:2.767±0.139比1.033±0.111,t=16.92,P<0.01;KRT19:3.710±0.210比1.005±0.076,t=20.95,P<0.01;FOXF1:2.783±0.174比1.035±0.132,t=13.88,P<0.01)和蛋白(Aggrecan:0.760±0.072比0.233±0.055,t=10.05,P<0.01;Col2A1:0.941±0.046比0.190±0.040,t=21.36,P<0.01;SOX9:1.237±0.140比0.317±0.065,t=10.31,P<0.01;KRT19:0.897±0.072比0.137±0.051,t=14.84,P<0.01;FOXF1:1.033±0.191比0.181±0.056,t=7.434,P<0.01)表达升高。与TGF-β1单独处理比较,过表达KLF4抑制了细胞增殖(第7天:125.750 ±10.386比166.355±11.132,t=4.620,P<0.05;第14天:148.526±13.449比195.333±10.512,t=4.702,P<0.01),降低了Aggrecan、Col2A1、SOX9、KRT19、FOXF1 mRNA (Aggrecan:1.510±0.187比2.600±0.255,t=5.970,P<0.01;Col2A1:1.727±0.254比3.441±0.259,t=8.176,P<0.01;SOX9:1.493±0.169比2.767±0.139,t=10.08,P<0.01;KRT19:2.117±0.387比3.710±0.210,t=6.273,P<0.01;FOXF 展开更多
关键词 Krüppel样因子4 骨髓间充质干细胞 髓核细胞 增殖 分化
关节软骨细胞和骨髓间充质干细胞不同共培养方式对细胞增殖与分化的影响 预览
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作者 赵文慧 皮洪涛 +13 位作者 冯万文 李向东 王建伟 刘岳鹏 姜洋 马建新 夏亚一 王翠芳 邵林林 李春辉 郁洪阳 刘尚林 董言斌 马亚辉 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第1期24-29,共6页
背景:在关节软骨细胞和骨髓间充质干细胞共培养环境中,软骨细胞功能活跃,增殖速度加快,骨髓间充质干细胞促进了软骨细胞的表型维持,而且少量软骨细胞提供的微环境能够诱导骨髓间充质干细胞成软骨分化,降低了软骨分化过程中出现的肥大表... 背景:在关节软骨细胞和骨髓间充质干细胞共培养环境中,软骨细胞功能活跃,增殖速度加快,骨髓间充质干细胞促进了软骨细胞的表型维持,而且少量软骨细胞提供的微环境能够诱导骨髓间充质干细胞成软骨分化,降低了软骨分化过程中出现的肥大表型和软骨内骨化,但是影响共培养系统中细胞增殖分化的因素和细胞间相互作用的机制尚不明确。目的:观察软骨细胞和骨髓间充质干细胞接触共培养对细胞增殖分化的影响,进一步优化共培养方式,为探讨共培养系统中二者的相互作用机制提供依据。方法:分离和培养新西兰兔(南京医科大学实验动物中心提供)软骨细胞和骨髓间充质干细胞,取第2代软骨细胞和骨髓间充质干细胞,以1∶3的比例直接混合在24孔板进行接触共培养为接触共培养组,以1∶3比例分别在Transwell的上室和下室进行非接触共培养为非接触共培养组,共培养21 d。细胞爬片进行甲苯胺蓝染色、COL2a1及Cx43细胞免疫化学染色。应用CCK8检测共培养系统中细胞的增殖情况,ELISA检测共培养细胞上清液中糖胺聚糖和转化生长因子β3水平,Western blot检测共培养细胞COL2a1和Cx43的表达。然后添加转化生长因子β3进行软骨细胞和骨髓间充质干细胞接触共培养和非接触共培养,比较细胞增殖、糖胺聚糖水平、COL2a1及Cx43蛋白表达的变化。结果与结论:①随着共培养时间的延长,细胞增殖能力逐渐增高,接触共培养组细胞吸光度值明显高于非接触共培养组(P<0.05),糖胺聚糖和转化生长因子β3水平以及COL2a1和Cx43的蛋白表达明显高于非接触共培养组;②添加10μg/L转化生长因子β3共培养21 d,接触共培养组细胞增殖、糖胺聚糖水平、COL2a1及Cx43的表达与未添加转化生长因子β3比较无明显变化(P>0.05),而非接触共培养组的细胞增殖、糖胺聚糖水平、COL2a1及Cx43蛋白表达明显提高(P<0.05), 展开更多
关键词 关节软骨细胞 骨髓间充质干细胞 共培养 增殖 分化 糖胺聚糖 Ⅱ型胶原 转化生长因子Β3 缝隙连接 连接蛋白 干细胞 软骨细胞 骨髓 间质干细胞 共同培养技术 转化生长因子Β3 连接蛋白43 组织工程
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细胞外基质蛋白模式对成肌细胞分化的影响 预览
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作者 邱昌俊 浑婷婷 +3 位作者 赵莹彤 詹悦维 赵峰 孙艳 《中国生物医学工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期70-76,共7页
成肌细胞分化机理至今尚不明确,为此主要研究细胞外基质蛋白模式对成肌细胞分化的影响。采用微接触印刷技术制备4种不同的纤维粘连蛋白微图案(平行组、随机组、垂直组、对照组)培养成肌细胞,用免疫荧光染色法分析7 d后各组成肌细胞的分... 成肌细胞分化机理至今尚不明确,为此主要研究细胞外基质蛋白模式对成肌细胞分化的影响。采用微接触印刷技术制备4种不同的纤维粘连蛋白微图案(平行组、随机组、垂直组、对照组)培养成肌细胞,用免疫荧光染色法分析7 d后各组成肌细胞的分化情况,并分析2、6、18 h后各组中的黏附分子、Vinculin以及微丝蛋白F-actin的分布情况,每组实验重复3次,每次取3个样本。肌管形成个数平行排列组与对照组相比,无显著性差异(17.33±0.58 vs 16.00±1.73),与垂直组(7.00±1.00)和无极性组(10.89±0.19)相比则显著高(P<0.05)。在2 h时,微丝在细胞中排列与局部微图案一致;在6 h时,微丝开始沿整体图案长轴方向排列;在12 h时,微丝分布与条带整体图案长轴方向一致;18 h时,所形成的黏着斑会沿着微图案区域分布。细胞外基质蛋白模式会对成肌细胞的分化有影响,不同FN极性排列微图案对成肌细胞的骨架和黏附影响不同,这也可能是后期产生不同分化结果的一个原因。 展开更多
关键词 极性排列 微图案技术 纤连蛋白 黏附 分化
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米黄色脂肪细胞诱导分化方法研究
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作者 寇艳波 刘庆亚 +2 位作者 张波 汤仁仙 王玉刚 《河南科技大学学报:医学版》 2019年第1期6-9,共4页
目的 建立米黄色脂肪细胞分化的方法并进行分析。方法 通过诱导物刺激使脂肪前体细胞3T3-L1向米黄色脂肪细胞分化。细胞分化完成后经油红染色检测胞内脂滴的形成,经荧光定量PCR和Western blot检测米黄色脂肪细胞标志性蛋白Pparγ,Prdm16... 目的 建立米黄色脂肪细胞分化的方法并进行分析。方法 通过诱导物刺激使脂肪前体细胞3T3-L1向米黄色脂肪细胞分化。细胞分化完成后经油红染色检测胞内脂滴的形成,经荧光定量PCR和Western blot检测米黄色脂肪细胞标志性蛋白Pparγ,Prdm16和Ucp1的表达,确定分化成熟的细胞是米黄色脂肪细胞。经转录测序分析脂肪前体细胞和米黄色脂肪细胞差异表达基因及KEGG pathway富集情况。结果 采用本研究中的诱导分化方法得到的分化细胞油红染色阳性,米黄色脂肪细胞标志性蛋白Pparγ、Prdm16、Ucp1均高表达,转录测序显示分化后细胞与未分化细胞基因表达差异较大。结论 本研究建立的米黄色脂肪细胞分化的方法准确可靠,可用于米黄色脂肪细胞形成调控机制等研究。 展开更多
关键词 米黄色脂肪细胞 分化 肥胖 3T3-L1
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