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DSA对NK细胞介导ADCC效应中血管内皮细胞损伤的影响
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作者 闫旭丽 苏丽萍 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期580-584,共5页
目的:探讨抗供者特异性抗体(DSA)在自然杀伤细胞(NK)介导抗体依赖细胞介导的细胞毒效应(ADCC)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)损伤作用。方法:收集10名健康供者为山西医科大学附属肿瘤医院血液科确诊为AML拟行allo-HSCT的患者提供的外周静脉... 目的:探讨抗供者特异性抗体(DSA)在自然杀伤细胞(NK)介导抗体依赖细胞介导的细胞毒效应(ADCC)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)损伤作用。方法:收集10名健康供者为山西医科大学附属肿瘤医院血液科确诊为AML拟行allo-HSCT的患者提供的外周静脉血,并分离提取外周血NK细胞为效应细胞。选取培养至4-6代HUVEC与DSA共培养,将结合DSA的HUVEC作为靶细胞(CDH组),未结合DSA的HUVEC作为阴性对照(UDH组);将效应细胞与靶细胞共培养后通过流式细胞仪检测细胞因子干扰素-γ(IFN-γ)表达,应用MTT法检测HUVEC细胞活性,间接反映DSA介导ADCC效应对内皮细胞损伤作用的强弱。结果:随着效靶比增加,HUVEC细胞活性降低,IFN-γ表达水平增高,在同一效靶比(1∶1、10∶1、20∶1)下,CDH组HUVEC细胞活性明显低于UDH组,IFN-γ表达水平明显高于UDH组;在效靶比为1∶1时,随着DSA浓度提高,CDH组HUVEC细胞OD值渐降低,IFN-γ表达水平增高,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:DSA可通过NK细胞介导的ADCC效应损伤血管内皮细胞。 展开更多
关键词 抗供者特异性抗体 NK细胞 内皮细胞 单个细胞 抗体依赖细胞介导的细胞毒效应 造血干细胞移植
活动性结核患者结核分枝杆菌抗原特异性多能T淋巴细胞细胞因子的分泌特征
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作者 蔡灵芝 何丽波 +1 位作者 林宇航 潘沛沛 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期179-183,共5页
目的 探讨活动性结核病患者外周血结核分枝杆菌抗原特异性多能T淋巴细胞细胞因子的分泌特征。方法 选取2015年11月-2017年3月医院收治的活动性结核病患者、肺部感染/肿瘤患者及同期来健康体检的正常人50例作为对照组。采用γ干扰素释放... 目的 探讨活动性结核病患者外周血结核分枝杆菌抗原特异性多能T淋巴细胞细胞因子的分泌特征。方法 选取2015年11月-2017年3月医院收治的活动性结核病患者、肺部感染/肿瘤患者及同期来健康体检的正常人50例作为对照组。采用γ干扰素释放试验(IGRAS)和流式细胞技术检测CD4+辅助性T细胞1(Th1细胞)和CD8+细胞毒性T细胞(CTL)分泌的肿瘤坏死因子(TNF-α)、干扰素(IFN-γ)和白介素-2(IL-2)的分泌情况和分布特征。结果 ESAT-6刺激单个核细胞后,每106个细胞的SFU为84.4±18.1;而CFP-10刺激为54.2±10.8。50例活动性结核病样本中,36例(72.0%)对ESAT-6和CFP-10有反应,14例(28.0%)仅对1种肽有反应。CD4+Th1细胞和CD8+CTL分泌的TNF-α、IFN-γ和IL-2三种细胞因子特征类似。活动性结核病组CD4+Th1细胞分泌TNF-α低于肺部感染/肿瘤组和健康对照组(P<0.05),而IFN-γ、TNF-α+IL-2、TNF-α+IFN-γ+IL-2均高于肺部感染/肿瘤组和健康对照组(P<0.05)。活动性结核病组CD8+CTL分泌的TNF-α低于肺部感染/肿瘤组和健康对照组(P<0.05)。IFN-γ、IL-2、TNF-α+IL-2、TNF-α+IFN-γ+IL-2均高于肺部感染/肿瘤组和健康对照组(P<0.05)。结论 活动性结核病患者外周血单个核细胞中结核分枝杆菌抗原特异性多能T淋巴细胞(CD4+Th1和CD8+CTL)分泌的IFN-γ+TNF-α+IL-2对于鉴别活动性结核病、肺部感染/肿瘤有一定价值。 展开更多
关键词 单个细胞 分枝杆菌 细胞因子 淋巴细胞
外周血核因子-κB、基质金属蛋白酶-9和炎症因子在小儿急性期川崎病发生、发展中的作用及其机制 预览
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作者 王琴 白淑霞 《海军医学杂志》 2019年第5期400-403,共4页
目的探讨川崎病中外周血核因子-κB(NF-κB)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9),以及炎症因子的表达及意义。方法选取2015年1月至2016年1月在十堰市人民医院治疗的急性期川崎病患儿30例(KD组),同时选取正常小儿20例作为健康对照组,培养2组外周... 目的探讨川崎病中外周血核因子-κB(NF-κB)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9),以及炎症因子的表达及意义。方法选取2015年1月至2016年1月在十堰市人民医院治疗的急性期川崎病患儿30例(KD组),同时选取正常小儿20例作为健康对照组,培养2组外周血单个核细胞(PBMCs),同时将KD组外周血PBMCs分为佛波酯组(PMA组)(20 nmol/L PMA),PMA+吡咯烷二硫代氨基甲酸(PDTC)组(在PMA基础上增加100 mol/L PDTC)和空白对照组(不作任何干预),采用免疫组化法检测NF-κB活化水平,ELISA法检测MMP-9、白细胞介素(IL)-6和IL-7水平。结果KD组NF-κB活化水平、MMP-9、IL-6和IL-7分别为(50.33±12.18)%、(904.18±83.20)ng/ml、(445.28±93.29)pg/ml和(36.81±9.43)pg/ml,明显高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05);PMA组NF-κB活化水平、MMP-9、IL-6和IL-7明显高于空白对照组(P<0.05);PMA+PDTC组NF-κB活化水平、MMP-9、IL-6和IL-7较PMA组明显降低(P<0.05);KD组患儿NF-κB活化水平与IL-6和IL-7呈正相关(r=0.452和0.447,P<0.05);MMP-9与NF-κB活化水平、IL-6和IL-7无相关性(P>0.05)。结论KD患儿外周血PBMCs中MMP-9表达增强以及NF-κB活化在KD免疫性血管损伤中有重要作用,可为该病诊断、治疗、预后评估提供一定参考依据。 展开更多
关键词 川崎病 因子 ΚB 基质金属蛋白酶 9 单个细胞
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维拉帕米联合干扰素治疗对肾综合征出血热感染患者细胞因子水平的影响 预览
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作者 连红梅 杨竹芳 张曦 《检验医学与临床》 CAS 2019年第18期2653-2656,共4页
目的 探讨维拉帕米联合干扰素对肾综合征出血热感染患者细胞因子水平的影响.方法 选择2016年1月至2018年12月澄城县医院收治的肾综合征出血热感染患者80例为研究对象,采用随机数字表法将患者分为对照组与研究组,每组40例.对照组患者应... 目的 探讨维拉帕米联合干扰素对肾综合征出血热感染患者细胞因子水平的影响.方法 选择2016年1月至2018年12月澄城县医院收治的肾综合征出血热感染患者80例为研究对象,采用随机数字表法将患者分为对照组与研究组,每组40例.对照组患者应用干扰素治疗,研究组患者应用维拉帕米联合干扰素进行治疗.对比两组患者肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-10、IL-6水平、两组患者各临床检验指标恢复正常所需时间以及对比两组患者治疗不同时间点血清中血尿素氮(BUN)、血肌酐(Cr)水平.结果 治疗前两组患者TNF-α、IL-10、IL-6水平差异无统计学意义(P>0.05),治疗后研究组患者TNF-α水平高于对照组,IL-10与IL-6水平均低于对照组(P<0.05);两组患者血小板恢复正常时间差异无统计学意义(P>0.05),研究组患者BUN、Cr、尿蛋白等恢复时间均短于对照组(P<0.05);研究组患者在治疗第1、3、5天时BUN与Cr水平均低于对照组(P<0.05).结论 采用维拉帕米联合干扰素对肾综合征出血热感染患者进行治疗,可以调节细胞因子水平,调节免疫功能、抑制炎性反应,促进患者临床恢复,安全有效,值得应用. 展开更多
关键词 维拉帕米 干扰素 肾综合征出血热 外周血 单个细胞 细胞因子
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慢性乙肝患者外周血PBMC凋亡相关因子和Th1/Th2型细胞因子的水平变化及意义 预览
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作者 刘欣 母齐鸣 王刚 《临床和实验医学杂志》 2019年第13期1394-1397,共4页
目的探讨慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞(PBMC)凋亡相关因子和Th1/Th2型细胞因子水平变化及意义。方法前瞻性选取2017年1月至2017年12月在航空工业三六三医院治疗的慢性乙型肝炎患者102例,其中轻度32例,中度40例,重度30例,健康志愿... 目的探讨慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞(PBMC)凋亡相关因子和Th1/Th2型细胞因子水平变化及意义。方法前瞻性选取2017年1月至2017年12月在航空工业三六三医院治疗的慢性乙型肝炎患者102例,其中轻度32例,中度40例,重度30例,健康志愿者40例作为对照组。检测含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-9(Caspase-9)、Caspase-8、Caspase-3、白细胞介素-2(IL-2)、IL-4、IL-10和干扰素-γ(IFN-γ)水平。记录慢性乙型肝炎患者HBVDNA定量检测结果,分析HBVDNA与各指标相关性。结果轻度组、中度组和重度组Caspase-9、Caspase-8和Caspase-3水平明显高于对照组(P<0.05),其中轻度组Caspase-9、Caspase-8和Caspase-3明显高于中度组和重度组(P<0.05);轻度组、中度组和重度组IL-2和IFN-γ水平明显低于对照组(P<0.05),而IL-4和IL-10明显高于对照组(P<0.05),其中轻度组IL-2和IFN-γ也明显高于中度组和重度组(P<0.05),而IL-4和IL-10则明显低于中度组和重度组(P<0.05);病毒载量与Caspase-9、Caspase-8、Caspase-3、IL-2和IFN-γ呈正相关(r=0.370,r=0.364,r=0.355,r=0.341和r=0.360,P<0.05),与IL-4、IL-10呈负相关(r=-0.411,r=-0.403,P<0.05)。结论慢性乙肝患者外周血PBMC凋亡增强,Th1/Th2免疫调节紊乱,可能在疾病发生发展中起一定作用,且与病毒载量有一定相关性。 展开更多
关键词 慢性乙型肝炎 单个细胞 TH1/TH2型 凋亡因子 细胞因子
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深度测序解析年龄及UCMSC治疗对猕猴lncRNA的影响 预览
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作者 朱向情 陈裕浩 +2 位作者 王严影 高萌 潘兴华 《西南国防医药》 CAS 2019年第6期640-643,共4页
目的分析年龄和脐带间充质干细胞(UCMSC)治疗对外周血单个核细胞长链非编码RNA(lncRNA)的影响。方法分别采集、分离幼年、中年、老年和老年经UCMSC治疗后的4种不同生理状态的猕猴外周血单个核细胞,提取全基因组RNA,进行转录组测序,通过... 目的分析年龄和脐带间充质干细胞(UCMSC)治疗对外周血单个核细胞长链非编码RNA(lncRNA)的影响。方法分别采集、分离幼年、中年、老年和老年经UCMSC治疗后的4种不同生理状态的猕猴外周血单个核细胞,提取全基因组RNA,进行转录组测序,通过生物信息学比较筛选出差异lncRNA并进行分组比较。结果幼年与老年、中年相比,单个核细胞表达上调的lncRNA分别为54和52个,表达下调的lncRNA分别为49和46个;中年与老年相比,表达上调和下调的lncRNA分别为48和63个;老年与经UCMSC治疗组相比,表达上调和下调的lncRNA分别为41和68个。聚类分析发现,随年龄增长,幼年高表达lncRNA减少,而低表达lncRNA增加;UCMSC治疗可使低表达lncRNA升高,而高表达lncRNA降低。结论lncRNA表达谱随年龄的增加而改变,UCMSC治疗可使衰老状态的lncRNA表达谱趋向年轻化方向。 展开更多
关键词 长链非编码RNA 猕猴 年龄 脐带间充质干细胞 单个细胞
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慢性牙周炎患者外周血CD4~+CD25~+调节性T细胞表达
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作者 李宝坤 陈晓涛 +2 位作者 杨柯 何建华 何萌 《中华实用诊断与治疗杂志》 2019年第5期487-490,共4页
目的探讨外周血单个核细胞CD4+CD25+调节性T细胞(Tregulatory, Treg)在慢性牙周炎患者中的表达。方法慢性牙周炎患者40例,其中轻中度组22例和重度组18例;同期31例牙周健康者为对照组。采用流式细胞术检测3组CD4+CD25+CD127low/-Treg、CD... 目的探讨外周血单个核细胞CD4+CD25+调节性T细胞(Tregulatory, Treg)在慢性牙周炎患者中的表达。方法慢性牙周炎患者40例,其中轻中度组22例和重度组18例;同期31例牙周健康者为对照组。采用流式细胞术检测3组CD4+CD25+CD127low/-Treg、CD4+CD25+FoxP3+Treg表达;采用ELISA法测定3组血浆转化生长因子-β(transforming grow factor-β, TGF-β)水平;Pearson法分析CD4+CD25+CD127low/-Treg与CD4+CD25+FoxP3+Treg,CD4+CD25+CD127low/-Treg、CD4+CD25+FoxP3+Treg与牙周袋探诊深度的相关性。结果轻中度组、重度组CD4+CD25+FoxP3+Treg[(2.88±1.50)%、(2.52±1.03)%]、CD4+CD25+CD127low/-Treg表达[(4.42±1.49)%、(3.85±1.02)%]、血浆TGF-β水平[(1 054.18±370.35)、(1 003.78±398.76)ng/L]低于对照组[(3.57±1.11)%、(6.27±1.67)%、(1 296.60±303.17)ng/L](P<0.05),轻中度组与重度组比较差异无统计学意义(P>0.05);Pearson线性相关分析结果显示,CD4+CD25+FoxP3+Treg与CD4+CD25+CD127low/-Treg表达呈正相关(r=0.776,P<0.001),CD4+CD25+FoxP3+Treg、CD4+CD25+CD127low/-Treg均与牙周袋探诊深度呈负相关(r=-0.333,P=0.005;r=-0.551,P<0.001)。结论慢性牙周炎CD4+CD25+Treg介导的免疫应答减弱,可能促进疾病的发生、发展。 展开更多
关键词 慢性牙周炎 单个细胞 调节性T细胞 转化生长因子-Β
TAP68在多发性骨髓瘤患者骨髓单个核细胞中的表达及其与预后的关系
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作者 武亚婷 廖林晓 +1 位作者 刘延方 王冲 《医药论坛杂志》 2019年第1期12-15,共4页
目的探讨端粒结合蛋白相关蛋白68(TAP68)在多发性骨髓瘤(MM)患者骨髓单个核细胞(BMMCs)中的表达水平及其与预后的相关性。方法选取MM患者25例作为观察组,另选取同期门诊骨髓报告为正常骨髓像的患者10例作为对照组,观察组患者采用硼替佐... 目的探讨端粒结合蛋白相关蛋白68(TAP68)在多发性骨髓瘤(MM)患者骨髓单个核细胞(BMMCs)中的表达水平及其与预后的相关性。方法选取MM患者25例作为观察组,另选取同期门诊骨髓报告为正常骨髓像的患者10例作为对照组,观察组患者采用硼替佐米联合地塞米松方案化疗。利用流式细胞术分选CD138+细胞并通过实时荧光定量检测和蛋白免疫印迹检测检测细胞中TAP68的表达水平,分析TAP68与MM临床分期的关系,并用统计学方法分析TAP68的表达量与临床检验数据的相关性。结果 TAP68在观察组BMMCs中相对表达量显著高于对照组(P<0.05);TAP68在不同分期MM患者BMMCs中表达水平差异有统计学意义(P<0.05);TAP68与M蛋白和β2微球蛋白(β2-MG)呈正相关(r=0.693、0.458,P=0.031、0.037);。治疗后,MM患者BMMCs中TAP68相对表达量显著降低(P<0.05)。结论 TAP68在MM患者BMMCs中表达量明显升高,与临床分期、M蛋白和β2-MG相关;TAP68可能在多发性骨髓瘤的发生发展中起重要作用。 展开更多
关键词 TAP68 多发性骨髓瘤 单个细胞
淋球菌体外感染单个核细胞对IL-1β、NLRP3表达的影响 预览
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作者 陈剑云 张方 +1 位作者 阳慧芝 陈嵘祎 《中国麻风皮肤病杂志》 2019年第3期133-135,共3页
目的:明确不同淋球菌体外感染单个核细胞对IL-1β、NLRP3表达的影响。方法:提取小鼠脾脏单个核细胞,通过利用分光光度计法定量菌液浓度,选取OD450值在0.2、0.6、1.0、1.4的菌液进行稀释,并感染所提取的单个核细胞,共培养6 h后采用实时... 目的:明确不同淋球菌体外感染单个核细胞对IL-1β、NLRP3表达的影响。方法:提取小鼠脾脏单个核细胞,通过利用分光光度计法定量菌液浓度,选取OD450值在0.2、0.6、1.0、1.4的菌液进行稀释,并感染所提取的单个核细胞,共培养6 h后采用实时荧光定量PCR检测各组细胞IL-1β、NLRP3 mRNA表达。结果:实时荧光定量PCR结果显示,IL-1β、NLRP3表达水平均显著高于空白对照组,且出现先升高后下降的趋势,以OD450值=0.6淋球菌悬液感染单核细胞时IL-1β表达最高,而淋球菌悬液OD450值=1.0感染时NLRP3表达最高。结论:淋球菌体外感染单个核细胞可导致其IL-1β、NLRP3的表达明显上调。 展开更多
关键词 淋球菌 单个细胞 IL-1Β NLRP3
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人脐血单个核细胞移植对卵巢早衰大鼠卵巢功能的影响
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作者 包秀芳 王智慧 +3 位作者 郭琛 赵巍 周慧 孙萍 《中国妇产科临床杂志》 CSCD 北大核心 2019年第3期268-269,共2页
目的本研究旨在探讨人脐血单个核细胞(HCMNCs)在大鼠卵巢早衰模型中的修复作用,以期为临床细胞治疗卵巢早衰提供一种理论和实验依据。方法(1)建立卵巢早衰模型;(2)确定POF造模成功;(3)利用Ficoll密度梯度离心法制备HCMNCs细胞悬液;(4)... 目的本研究旨在探讨人脐血单个核细胞(HCMNCs)在大鼠卵巢早衰模型中的修复作用,以期为临床细胞治疗卵巢早衰提供一种理论和实验依据。方法(1)建立卵巢早衰模型;(2)确定POF造模成功;(3)利用Ficoll密度梯度离心法制备HCMNCs细胞悬液;(4)将大鼠随机分为三组:A组大鼠不予任何处置,B组大鼠双侧卵巢各注入10■细胞悬液,C组将等量的L-DMEM培养基注入大鼠的双侧卵巢;(5)利用ELISA方法检测血清E2、FSH、LH水平,卵巢组织切片进行HE染色,观察卵巢未闭锁卵泡数量及卵巢形态学情况。结果HCMNCs细胞悬液移植后50 d:(1)B组大鼠动情周期紊乱率较C组有明显的减少,阴道脱落细胞涂片开始有上皮细胞、角化细胞、白细胞等多样细胞交替的变化;(2)B组血清E2水平较C组升高,两者差异有高度统计学意义(P<0.001);LH、FSH水平较C组LH、FSH水平降低,两者差异有高度统计学意义(P<0.001);(3)卵巢病理切片形态学观察B组未闭锁卵泡数目较C组明显增多,差异有高度统计学意义(P<0.001)。结论人脐血单个核细胞参与修复受损卵巢的功能,可缓解低雌激素的状态,对卵巢早衰的治疗起到积极的作用。 展开更多
关键词 脐血 单个细胞 移植 卵巢早衰 治疗
一次性抗凝负压注射器在自体骨髓快速富集术中的应用 预览
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作者 王明玲 曹新颖 +1 位作者 马超 刘光旺 《护士进修杂志》 2019年第18期1723-1725,共3页
目的探讨一次性抗凝负压注射器在自体骨髓快速富集术中的应用方法及效果。方法选择2015年6月-2017年12月来我院就诊并择期进行股骨钻孔减压合并骨髓生物治疗的患者42例为研究对象,根据随机数字表法将患者分为对照组和观察组,每组21例。... 目的探讨一次性抗凝负压注射器在自体骨髓快速富集术中的应用方法及效果。方法选择2015年6月-2017年12月来我院就诊并择期进行股骨钻孔减压合并骨髓生物治疗的患者42例为研究对象,根据随机数字表法将患者分为对照组和观察组,每组21例。对照组采用传统注射器抽取骨髓血法,观察组采用一次性抗凝负压注射器抽取骨髓血法。观察两组抽取骨髓血的速度、所需时间、骨髓血凝集次数、采集成功率。结果经过对比分析发现,手术期间两组抽取骨髓血150 mL的速度、所需时间、采集成功率、骨髓血凝集次数比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论一次性抗凝负压注射器可以一次性抽取骨髓血,抽取过程负压稳定,方便省力,而且抽取到的骨髓血不会凝集,便于富集单个核细胞,并减少医务人员工作量,提高采取骨髓血的质量,从一定程度上克服了目前临床抽取骨髓血费力、易凝的缺点,具有较好的临床应用前景。 展开更多
关键词 抗凝负压注射器 单个细胞 快速富集术 护理
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枸杞多糖对慢性低氧大鼠外周血单个核细胞中HIF-1α、VEGF mRNA和蛋白表达的影响 预览
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作者 郝雪琦 关文霞 +2 位作者 丁彦琴 张健 李芳 《宁夏医科大学学报》 2019年第1期14-18,23共6页
目的探讨慢性低氧对大鼠外周血单个核细胞(PBMCs)中缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factors-1α,HIF-1α)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达水平及枸杞多糖(lycium barbarum polysaccharides,LBP)... 目的探讨慢性低氧对大鼠外周血单个核细胞(PBMCs)中缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factors-1α,HIF-1α)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达水平及枸杞多糖(lycium barbarum polysaccharides,LBP)干预的影响。方法 28只Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为常氧组、低氧组、低氧/枸杞多糖组。低氧组设置为常压低氧舱(氧浓度为10%),LBP干预组分别给予LBP[200mg·(kg·d)^-1]和[300mg·(kg·d)^-1]2个剂量灌胃。各组干预时间均为4周。干预结束后进行血常规检测,然后收集大鼠外周血并分离PBMCs,采用荧光定量PCR和Western blot分别检测大鼠外周血单个核细胞中HIF-1α、VEGF mRNA和蛋白的表达。结果与常氧组相比,低氧组血红蛋白含量和红细胞比容升高(P均<0.01),与低氧组比较,低氧/枸杞多糖(200mg,300mg)组血红蛋白含量和红细胞比容均降低(P<0.05或<0.01);与常氧组相比,低氧组大鼠外周血单个核细胞中HIF-1α、VEGF在mRNA及蛋白表达水平均升高(P均<0.01);与低氧组相比,低氧/枸杞多糖干预的两个剂量组HIF-1α、VEGF mRNA和蛋白表达水平均下降(P<0.05或<0.01);LBP(300mg)组HIF-1α、VEGF mRNA表达低于LBP(200mg)组(P<0.05)。结论慢性低氧引起大鼠PBMCs中HIF-1α和VEGF基因表达水平上调,LBP干预能够在一定程度下调HIF-1α和VEGF基因表达。 展开更多
关键词 低氧 单个细胞 缺氧诱导因子1Α 血管内皮生长因子 枸杞多糖 大鼠
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重症肌无力患者外周血单个核细胞中miR-146a表达分析
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作者 李文静 王从平 刘群会 《中华实用诊断与治疗杂志》 2019年第3期239-240,共2页
目的探讨miR-146a在重症肌无力(myasthenia gravis, MG)患者外周血单个核细胞中的表达及其临床意义。方法 MG患者35例为观察组,同期体检健康者30例为对照组,采用Ficoll分层液法分离外周血单个核细胞,实时荧光定量PCR法检测2组外周血单... 目的探讨miR-146a在重症肌无力(myasthenia gravis, MG)患者外周血单个核细胞中的表达及其临床意义。方法 MG患者35例为观察组,同期体检健康者30例为对照组,采用Ficoll分层液法分离外周血单个核细胞,实时荧光定量PCR法检测2组外周血单个核细胞miR-146a mRNA相对表达量;Pearson法分析MG患者单个核细胞miR-146a mRNA相对表达量与定量MG评分的相关性。结果观察组外周血单个核细胞miR-146a mRNA相对表达量(3.41±0.25)明显高于对照组(0.95±0.12)(P<0.05);全身型MG患者外周血单个核细胞miR-146a mRNA相对表达量(4.18±0.21)高于眼肌型者(3.01±0.15)(P<0.05);MG患者单个核细胞miR-146a mRNA相对表达量与定量MG评分呈正相关(r=0.584,P<0.001)。结论 MG患者外周血单个核细胞miR-146a表达明显上调,且与病情严重程度有关。 展开更多
关键词 重症肌无力 外周血 单个细胞 MIR-146A
参芪固本颗粒配合GINA阶梯方案对肺脾肾虚型支气管哮喘患儿肺功能和外周血单个核细胞中TIPE2表达的影响 预览
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作者 徐妍 刘成全 +3 位作者 林小飞 王玉美 马希贵 鲍丽娟 《现代中西医结合杂志》 CAS 2019年第26期2865-2869,共5页
目的观察参芪固本颗粒配合GINA阶梯方案对肺脾肾虚型支气管哮喘患儿肺功能和外周血单个核细胞中肿瘤坏死因子-α诱导蛋白-8样因子-2(TIPE2)表达的影响。方法将70例肺脾肾虚型支气管哮喘患儿随机分为观察组35例和对照组35例。对照组接受G... 目的观察参芪固本颗粒配合GINA阶梯方案对肺脾肾虚型支气管哮喘患儿肺功能和外周血单个核细胞中肿瘤坏死因子-α诱导蛋白-8样因子-2(TIPE2)表达的影响。方法将70例肺脾肾虚型支气管哮喘患儿随机分为观察组35例和对照组35例。对照组接受GINA阶梯方案治疗,观察组在对照组基础上加用参芪固本颗粒治疗,2组均治疗2个月。观察2组治疗前后中医症状积分、肺功能、生活质量情况,检测2组外周血单个核细胞中TIPE2表达水平及相关炎性细胞因子白细胞介素-4(IL-4)、IL-6、γ干扰素(IFN-γ)水平,统计2组临床疗效。结果2组治疗后气喘、咳嗽、喉间喘鸣、咳痰清稀、大便溏薄、食少纳差、神疲乏力积分和中医症状总积分均显著降低(P均<0.05),且观察组治疗后以上积分均显著低于对照组(P均<0.05);2组治疗后FEV 1、FEV 1/FVC、PEF、MEF50均较治疗前显著升高(P均<0.05),观察组以上指标均显著高于对照组(P均<0.05);2组治疗后外周血单个核细胞中TIPE2 mRNA、TIPE2蛋白、IL-4水平均显著升高(P均<0.05),血清IL-6、IFN-γ水平均显著降低(P均<0.05),观察组治疗后以上指标改善情况均显著优于对照组(P均<0.05)。观察组临床总有效率显著高于对照组(P<0.05)。结论参芪固本颗粒配合GINA阶梯方案治疗肺脾肾虚型支气管哮喘疗效更好,可显著减轻患儿临床症状,改善肺功能,其机制可能与调节外周血单个核细胞中TIPE2表达,从而抑制免疫炎症反应有关。 展开更多
关键词 参芪固本颗粒 支气管哮喘 肺功能 炎症反应 单个细胞 肿瘤坏死因子-α诱导蛋白-8样因子-2
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IL-2/GM-CSF体外处理的自体外周血单个核细胞治疗再生障碍性贫血131例临床研究 预览
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作者 詹昱 陈玲珍 +7 位作者 曲佳 谭雪芳 冯可欣 巫进明 杨郁青 谭明珠 罗英 杨德懋 《国际医药卫生导报》 2018年第21期3219-3223,共5页
目的观察IL-2/GM-CSF体外处理的自体外周血单个核细胞治疗再生障碍性贫血(Aplastic Anemia,AA)患者的疗效和安全性.方法选取2003年10月至2016年5月在本院住院或门诊随访的131例获得性原发性AA患者,中位年龄26(2~77)岁,重型AA71例,... 目的观察IL-2/GM-CSF体外处理的自体外周血单个核细胞治疗再生障碍性贫血(Aplastic Anemia,AA)患者的疗效和安全性.方法选取2003年10月至2016年5月在本院住院或门诊随访的131例获得性原发性AA患者,中位年龄26(2~77)岁,重型AA71例,非重型AA60例.92例(70.2%)曾接受免疫抑制治疗,均无效或不能耐受.取自体外周血单个核细胞,在IL-2、GM-CSF等作用下培养48h后进行静脉输注,每周1~2次,根据疗效及不良反应决定输注疗程.结果131例患者接受细胞输注中位60(15~160)次,中位治疗时间14(3~43)个月,中位随访时间26(4~150)个月.30例(22.9%)完全反应,74例(56.5%)部分反应,总有效率79.4%;27例(20.6%)无效.治疗有效患者从细胞治疗开始到脱离输血、网织红细胞〉20×109/L、Hb增长30g/L以上、ANC〉0.5×109/L、PLT〉20×109/L以及获完全反应的中位时间分别是5(1~21)个月、4(1~16)个月、11(3~27)个月、12(6~25)个月、9(2~35)个月、27(10~56)个月.83例(63.4%)患者在治疗前CD4+/CD8+细胞比值倒置(〈1),治疗后66例不同程度升高,其中55例均为治疗有效患者.部分患者细胞输注过程中出现短暂寒战、发热,无其他治疗相关性不良反应.结论IL-2/GM-CSF体外处理的自体外周血单个核细胞输注有助于改善AA患者的骨髓造血功能,纠正T淋巴细胞功能紊乱,临床观察未发现发热以外的其他不良反应. 展开更多
关键词 再生障碍性贫血 白介素-2 细胞-巨噬细胞集落刺激因子 单个细胞
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Percoll密度梯度离心法分离中枢神经系统组织中的单个核细胞 预览 被引量:1
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作者 吕翠 冯金红 +2 位作者 侯召华 魏云波 韩婷婷 《中国药理学通报》 CSCD 北大核心 2018年第7期1030-1036,共7页
目的建立快速分离小鼠中枢神经系统(CNS)组织中单个核细胞的方法。方法以正常C57BL/6小鼠、实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)和阿尔茨海默病(AD)模型小鼠为研究对象,通过70%~30%Percoll密度梯度离心法,获取小鼠脑组织和脊髓中单个... 目的建立快速分离小鼠中枢神经系统(CNS)组织中单个核细胞的方法。方法以正常C57BL/6小鼠、实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)和阿尔茨海默病(AD)模型小鼠为研究对象,通过70%~30%Percoll密度梯度离心法,获取小鼠脑组织和脊髓中单个核细胞,利用台盼蓝染色检测细胞存活率后,通过流式细胞术进一步分析细胞的表型特点。结果分离得到的单个核细胞存活率在90%以上;流式细胞术分析结果表明,EAE和AD小鼠中浸润到CNS的淋巴细胞群比例明显升高,且介导炎症反应的Th1和Th17细胞亚群比例明显升高,而具有免疫调节作用的Treg细胞亚群比例明显下降。结论采用70%~30%Percoll密度梯度离心法从小鼠CNS中分离的单个核细胞存活率高,细胞活性不受分离过程的影响,可进一步利用流式细胞术分析细胞的表型特征。此方法操作简单快速,适用于对CNS淋巴细胞等单个核细胞的分析。 展开更多
关键词 Percoll密度梯度离心 小鼠 中枢神经系统 单个细胞 流式细胞 淋巴细胞
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不同血细胞分离机采集外周血单个核细胞的质量评估
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作者 于晓燕 曼斌 +4 位作者 白洁 刘丽娟 张燕燕 周倩 贾延军 《中国输血杂志》 2018年第9期1025-1028,共4页
目的通过比较3种型号的血细胞分离机所采集到的单采白细胞样品,及经处理后得到的外周血单个核细胞(PBMC)的质量,为选择最佳血细胞分离机机型和采集参数提供实验依据。方法分别使用,3种不同品牌的血细胞分离机Fenwal Amicus、Spectra o... 目的通过比较3种型号的血细胞分离机所采集到的单采白细胞样品,及经处理后得到的外周血单个核细胞(PBMC)的质量,为选择最佳血细胞分离机机型和采集参数提供实验依据。方法分别使用,3种不同品牌的血细胞分离机Fenwal Amicus、Spectra optia、MCS~+9000采集了20人次的外周血白细胞细胞。单采结束后对样品进行血细胞计数检测,并分离其中的外周血单个核细胞(PBMC),染色后通过流式细胞仪进行细胞分类检测。结果 3种机型所采集到的单采白细胞样品中所含的WBC总数无统计学差异,但是Fenwal Amicus所采集的产品中混入的血小板却明显少于其他2种机型,而MCS~+9000在采集白细胞时会混入更多的红细胞,MCS~+9000所采集到的单采产品含有更多的中性粒细胞、嗜酸性粒细胞,而Fenwal Amicus所得到的嗜碱性粒细胞明显高于MCS~+9000。流式细胞术分析发现,单采产品中分离出的PBMC和单核细胞绝大多数都是活细胞,主要由单核细胞和淋巴细胞组成,而粒细胞的含量很少。Baxter Amicus组最终得到的PBMC总数和T淋巴细胞总数最高,而单核细胞细胞总数则三者差异不大。结论 3种机型的血细胞分离机采集过程都比较顺利,所得到的单采白细胞样品和分离得到的PBMC质量差异不大,符合预期目的,都可用于健康志愿者的白细胞单采。 展开更多
关键词 单个细胞 细胞分离机 细胞计数
利用单个核细胞培养扩增NK细胞体系探索
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作者 黄诗建 闫洪敏 郭子宽 《中国实验血液学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第2期547-551,共5页
目的:探寻一种通过单个核细胞使自然杀伤(NK)细胞在体外培养扩增的新方法,为NK细胞免疫治疗奠定实验基础。方法:收集3份健康足月孕妇的脐带血,应用密度梯度法分离单个核细胞(PBMNC),每份单个核细胞样本均分为CD16 m Ab、CD3 m Ab... 目的:探寻一种通过单个核细胞使自然杀伤(NK)细胞在体外培养扩增的新方法,为NK细胞免疫治疗奠定实验基础。方法:收集3份健康足月孕妇的脐带血,应用密度梯度法分离单个核细胞(PBMNC),每份单个核细胞样本均分为CD16 m Ab、CD3 m Ab和CD16 m Ab+CD3 m Ab处理3组。使用含自体血浆、重组人IL-2、IL-15和IL-21的无血清培养液,在相同条件下培养扩增14 d,计算其扩增倍数。应用流式细胞术测定CD56~+CD3~-比例;以K562细胞为靶细胞,应用MTT法测定所培养的NK细胞在不同效靶比条件下的杀伤率。结果:培养14 d后,CD16m Ab、CD3 m Ab和CD16 m Ab+CD3 m Ab组细胞总数分别扩增45.71±5.54、87.41±19.77和51.84±4.88倍,在CD3 m Ab组显著高于其它2组(P〈0.05)。培养前CD56~+CD3~-细胞比例为0.1663±0.0201,经培养扩增14 d后CD16 m Ab、CD3 m Ab和CD16 m Ab+CD3 m Ab组CD56~+CD3~-细胞比例分别为0.8167±0.0500、0.8077±0.0589和0.8077±0.0273,3组之间无显著性差别。培养14 d后,MTT法检测显示,在效靶比为1∶1、5∶1和10∶1时3组杀伤效率均无显著差异(P〉0.05)。结论:使用抗CD3 m Ab及IL-2,IL-15和IL-21培养单个核细胞,可获得高纯度和高杀伤活性的NK细胞。本研究为NK细胞的治疗提供了一个简单有效的方法。 展开更多
关键词 单个细胞 NK细胞 细胞培养 CD16单克隆抗体 CD3单克隆抗体
儿童外周血造血干细胞采集影响因素分析 预览
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作者 张根玲 苗莹莹 +2 位作者 滕本秀 李忠俊 冉茜 《临床输血与检验》 CAS 2018年第3期248-249,315共3页
目的探讨性别、年龄、外周血白细胞(WBC)和单个核细胞(mononuclear cell,MNC)计数对儿童外周血造血干细胞采集效果的影响。方法收集2016年1月~2018年1月期间,本院采集的儿童外周血干细胞28例,年龄2岁10个月~14岁,中位年龄10岁。... 目的探讨性别、年龄、外周血白细胞(WBC)和单个核细胞(mononuclear cell,MNC)计数对儿童外周血造血干细胞采集效果的影响。方法收集2016年1月~2018年1月期间,本院采集的儿童外周血干细胞28例,年龄2岁10个月~14岁,中位年龄10岁。共采集31次,自体7例次采用化疗+粒系集落刺激因子动员,异体24例次采用粒系集落刺激因子动员,均在动员后4~5 d进行外周血干细胞采集。单次平均循环血量(7593±2248)ml,单次产品体积(126±42)ml。干细胞产品进行血常规计数和流式细胞仪检测CD34^+细胞数量。结果儿童外周血干细胞单次采集产品MNC与性别、年龄无关(P=0.44;P=0.81),与外周血WBC、MNC计数相关(P=0.03;P=0.01),产品CD34^+细胞数与性别、年龄、外周血WBC无关(P=0.15;P=0.79;P=0.66),与采前MNC计数相关(P=0.02)。其中24例患者采集前外周血MNC〉3.75×10^9/L,单次采集的干细胞产品MNC数为(9.88±3.16)×10^8/kg,CD34+细胞数为(7.51±4.74)×10^6/kg。结论外周血MNC数量是儿童外周血造血干细胞采集效率的重要影响因素,动员后外周血MNC数量〉3.75×10^9/L,具有做为造血干细胞动员效果评价指标的应用价值。 展开更多
关键词 单个细胞 儿童 造血干细胞采集
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多发性骨髓瘤患者外周血单个核细胞中白细胞介素-17的表达及意义 预览
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作者 秦卫玲 邢会茹 +3 位作者 赵玉洁 武金日 窦敬芳 贺立山 《新乡医学院学报》 CAS 2018年第2期140-142,共3页
目的探讨多发性骨髓瘤(MM)患者外周血单个核细胞(PBMC)中白细胞介素-17(IL-17)的表达及意义。方法选取新乡医学院第三附属医院血液科2016年1月至2017年1月确诊的30例MM患者为观察组,选择与观察组患者性别、年龄相匹配的健康献血... 目的探讨多发性骨髓瘤(MM)患者外周血单个核细胞(PBMC)中白细胞介素-17(IL-17)的表达及意义。方法选取新乡医学院第三附属医院血液科2016年1月至2017年1月确诊的30例MM患者为观察组,选择与观察组患者性别、年龄相匹配的健康献血者30例作为对照组。应用密度-梯度离心法分别获取观察组及对照组受试者的PBMC,采用酶联免疫吸附试验检测2组受试者PBMC培养液上清液中IL-17水平;采用实时定量聚合酶链反应检测2组受试者PBMC中IL-17mRNA表达;将对照组受试者的PBMC与观察组患者的血清进行共培养,然后使用扫描电镜观察PBMC的形态。结果观察组和对照组患者PBMC培养液上清液中IL-17水平分别为(30.79±4.96)、(10.10±4.15)ng·L~(-1),观察组患者PBMC上清液中IL-17水平显著高于对照组(t=3.412,P〈0.05)。观察组和对照组患者PBMC中IL-17 mRNA相对表达量分别为4.28±1.34、2.45±0.95,观察组患者PBMC中IL-17 mRNA相对表达量显著高于对照组(t=2.796,P〈0.05)。对照组受试者PBMC与观察组患者血清共培养后,随着共培养时间的延长,细胞形态发生明显改变,部分细胞甚至出现细胞膜脱落、崩解、破裂。结论 PBMC中IL-17过度表达可能在MM发生、发展中起一定的促进作用。 展开更多
关键词 多发性骨髓瘤 单个细胞 细胞介素-17
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