期刊文献+
共找到183篇文章
< 1 2 10 >
每页显示 20 50 100
干扰foxM1基因表达可增强骨髓间充质干细胞的成骨分化能力 预览 被引量:1
1
作者 陈钦桂 曾勉 +2 位作者 何婉媚 张莉珊 郑海崇 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第5期673-679,共7页
背景:foxM1基因被认为参与了干细胞分化命运的调控,但其对间充质干细胞成骨分化的影响尚未见报道,关于foxM1基因的研究也主要集中于肿瘤领域。目的:探索干扰foxM1基因表达水平对骨髓间充质干细胞成骨分化能力的影响。方法:全骨髓贴壁法... 背景:foxM1基因被认为参与了干细胞分化命运的调控,但其对间充质干细胞成骨分化的影响尚未见报道,关于foxM1基因的研究也主要集中于肿瘤领域。目的:探索干扰foxM1基因表达水平对骨髓间充质干细胞成骨分化能力的影响。方法:全骨髓贴壁法培养SD大鼠(中山大学实验动物中心提供)骨髓间充质干细胞,构建含嘌呤霉素抗性基因的foxM1shRNA重组慢病毒载体并转染大鼠骨髓间充质干细胞,经嘌呤霉素筛选建立foxM1稳定敲低细胞株,另设置空病毒载体组以及未转染组。使用骨髓间充质干细胞成骨诱导分化培养基诱导培养并行茜素红染色检测其成骨分化能力,使用定量RT-PCR检测成骨相关基因的表达水平,同时提取胞核蛋白,Westernblot检测β-catenin蛋白表达水平。结果与结论:①与空病毒载体组以及未转染组比较,foxM1敲低的大鼠骨髓间充质干细胞经成骨诱导分化后形成的骨结节数量明显增多,成骨相关基因col1a1和runx2表达水平均显著升高,但胞核β-catenin蛋白水平无明显改变;②干扰foxM1基因表达可增强骨髓间充质干细胞的成骨能力。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 成骨 诱导分化 慢病毒载体 foxM1基因 基因干扰 β-catenin 国家自然科学基金 叉头转录因子类 RNA干扰 骨髓 间质干细胞 细胞分化 成骨细胞 组织工程
在线阅读 下载PDF
长链非编码RNA肺腺癌转移相关转录本1在大鼠急性缺血缺氧再灌注肾损伤过程中表达与作用 预览
2
作者 李莉 杨晓霞 +3 位作者 于艳 李嵘 马峰 刘晓渭 《临床军医杂志》 CAS 2019年第2期167-169,共3页
目的探讨急性缺血再灌注肾损伤(AIKI)大鼠肾组织中长链非编码RNA肺腺癌转移相关转录本1(MALAT1)的表达情况及其对急性肾衰竭的影响。方法选取清洁级雄性SD大鼠128只为研究对象,随机分为对照组(n=40)、模型组(n=44)与实验组(n=44)。其中... 目的探讨急性缺血再灌注肾损伤(AIKI)大鼠肾组织中长链非编码RNA肺腺癌转移相关转录本1(MALAT1)的表达情况及其对急性肾衰竭的影响。方法选取清洁级雄性SD大鼠128只为研究对象,随机分为对照组(n=40)、模型组(n=44)与实验组(n=44)。其中,模型组与实验组均按照国际标准建立大鼠AIKI模型,实验组每天注射MALAT1siRNA。分别于2、24、48、72h及7、14d各处死6只大鼠,采集肾组织样本,实时定量PCR法检测MALAT1的表达水平;分别于48、72h检测血清生化指标。结果急性肾损伤后,MALAT1表达显著增加,达到峰值后逐渐下降。尾静脉注射MALAT1siRNA后,MALAT1、血清尿素氮、肌酐水平显著降低。结论MALAT1在AIKI大鼠的肾组织中表达显著增加,活体水平MALAT1表达的下调对急性肾损伤有缓解作用。 展开更多
关键词 长链非编码RNA肺腺癌转移相关转录本1 急性缺血缺氧再灌注肾损伤 基因干扰
在线阅读 下载PDF
毒品成瘾的药物治疗研究进展
3
作者 秦建贞 《中国新药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期1468-1471,共4页
毒品滥用已经成为当今世界的一大毒瘤,而且发展势头迅猛,如何有效戒除毒品成瘾是当今科学研究的热点,而如何开发有效的药物进行毒品成瘾治疗则是研究重点。随着科技发展,开发药物进行毒品成瘾治疗的研究也越来越多。本文概述了毒品成瘾... 毒品滥用已经成为当今世界的一大毒瘤,而且发展势头迅猛,如何有效戒除毒品成瘾是当今科学研究的热点,而如何开发有效的药物进行毒品成瘾治疗则是研究重点。随着科技发展,开发药物进行毒品成瘾治疗的研究也越来越多。本文概述了毒品成瘾的药物治疗研究进展:鸦片战争时期的戒烟方开启了中药对毒品成瘾治疗的先河;进而概述了现代医学研究进展中的毒品成瘾替代维持疗法药物美沙酮;随着免疫疗法的快速发展,开发毒品疫苗成为毒品成瘾治疗研究中的一个重要分支;毒品成瘾机制的深入研究和分子生物学的发展使得基因干扰和表观遗传学成为毒品成瘾治疗药物开发的一个新视角;最后,建立具有强大遗传学功能的毒品成瘾新型动物模型可能会有助于大规模治疗毒品成瘾的药物筛选。 展开更多
关键词 毒品成瘾 中药 美沙酮 疫苗 基因干扰 表观遗传学
受体相互作用蛋白2在结直肠癌组织的表达及其与肿瘤侵袭转移的关系
4
作者 周超熙 王贵英 +2 位作者 牛文博 刘友强 贾春英 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1114-1117,共4页
目的检测结直肠癌(CRC)组织中受体相互作用蛋白2(RIP2)的表达,观察抑制RIP2表达后肿瘤细胞的变化,探讨RIP2在CRC侵袭迁移中发挥的作用。方法应用免疫组织化学染色(IHC)技术检测2018年1月至2018年12月在河北医科大学第四医院外二科住院... 目的检测结直肠癌(CRC)组织中受体相互作用蛋白2(RIP2)的表达,观察抑制RIP2表达后肿瘤细胞的变化,探讨RIP2在CRC侵袭迁移中发挥的作用。方法应用免疫组织化学染色(IHC)技术检测2018年1月至2018年12月在河北医科大学第四医院外二科住院手术的68例CRC肿瘤组织[其中男47例,女21例,年龄(54.06±9.18)岁]及50例癌旁正常黏膜石蜡组织中RIP2、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9的表达,并记录患者的病理参数。分析RIP2与CRC病理参数的关系;分析3种蛋白之间的关系。应用RNA干扰(RNAi)技术抑制结肠癌细胞株HT29中RIP2,检测转染前后细胞侵袭迁移能力的变化。应用SPSS22.0统计软件分析,采用秩和检验、Spearman相关分析、单因素方差分析(ANOVA)、t检验。结果IHC结果显示,CRC组织中RIP2阳性表达率(67.65%)高于癌旁正常黏膜(28.00%)(χ^2=4.819,P<0.01);RIP2表达与肿瘤浸润深度、淋巴结转移明显相关(χ^2=4.390,P<0.05;χ^2=5.569,P<0.05);CRC组织中RIP2与MMP-2、RIP2与MMP-9之间表达呈正相关(r=0.326,P<0.01;r=0.439,P<0.01)。抑制HT29细胞中RIP2表达后细胞迁移能力减弱,差异有统计学意义(F=36.471,P<0.01),MMP-2、MMP-9表达降低,差异有统计学意义(F=9.090,P<0.05;F=5.732,P<0.05)。结论CRC组织中RIP2存在表达增高且与患者肿瘤转移有关,RIP2可能调节MMP-2、MMP-9表达,与促进肿瘤侵袭转移有关。 展开更多
关键词 结直肠癌 受体相互作用蛋白2 基因干扰 侵袭 转移
电针通过调节IκB激酶β表达抑制局灶性脑缺血再灌注大鼠脑内炎症损害的机制 预览
5
作者 秦文熠 荣晓凤 罗勇 《中国康复理论与实践》 CSCD 北大核心 2019年第4期407-415,共9页
目的观察局灶脑缺血再灌注后大鼠脑内炎性损害的变化,探讨炎症反应中激活核因子-κB(NF-κB)信号通路的关键蛋白IκB激酶(IKK)β的启动作用及电针抑制炎性损害的机制。方法将雄性Sprague-Dawley大鼠240只按随机数字表法随机分为假手术... 目的观察局灶脑缺血再灌注后大鼠脑内炎性损害的变化,探讨炎症反应中激活核因子-κB(NF-κB)信号通路的关键蛋白IκB激酶(IKK)β的启动作用及电针抑制炎性损害的机制。方法将雄性Sprague-Dawley大鼠240只按随机数字表法随机分为假手术组、模型组、电针组、IKKβ沉默组、IKKβ过表达组和IKKβ过表达+电针组,每组设再灌注后6h、12h、24h、48h和72h共5个时间点。利用改良线栓法制备右侧大脑中动脉闭塞再灌注模型。利用基因沉默及基因过表达技术对IKKβ基因进行干预。结果与模型组比较,IKKβ沉默组神经功能评分升高(P<0.05),脑梗死体积减小(P<0.05),NF-κBp65激活受抑制,促炎因子含量降低(P<0.05)。与IKKβ沉默组比较,IKKβ过表达组上述结果均明显变差(P<0.05),且大脑缺血皮质区小胶质细胞明显活化。IKKβ过表达+电针组小胶质细胞活化及IKKβ激活明显受抑制。结论IKKβ基因沉默能明显抑制NF-κB信号通路介导的大脑缺血皮质区的炎症反应,IKKβ过表达则缺血皮质区炎性损害程度较重。电针通过调节IKKβ活性从而抑制局灶脑缺血再灌注后的炎症损害。 展开更多
关键词 局灶脑缺血再灌注 电针 炎症反应 IκB激酶β 基因干扰 小胶质细胞 大鼠
在线阅读 下载PDF
基于腺病毒介导的PD-1干扰对艾灸调控实验性类风湿性关节炎大鼠TCR信号通路Lck、Fyn表达的影响 被引量:1
6
作者 赖德利 周海燕 +1 位作者 陶渊 刘旭光 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2019年第1期45-48,共4页
目的:基于腺病毒载体介导的RNAi在体阻断PD-1在类风湿性关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)大鼠模型的表达,研究艾灸对实验性RA大鼠TCR信号通路上Lck、Fyn激酶的影响及其PD-1调控机制。方法:采用弗氏完全佐剂对模型组、治疗组和PD-1干扰... 目的:基于腺病毒载体介导的RNAi在体阻断PD-1在类风湿性关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)大鼠模型的表达,研究艾灸对实验性RA大鼠TCR信号通路上Lck、Fyn激酶的影响及其PD-1调控机制。方法:采用弗氏完全佐剂对模型组、治疗组和PD-1干扰组进行造模。采用腺病毒载体介导的ShRNA-rPD-1进行基因干扰。采用麦粒灸"肾俞""足三里"两穴结束。采集大鼠脾脏组织,免疫组化法检测各组脾脏组织中Fyn、Lck的表达情况。结果:与对照组比较,模型组大鼠脾脏组织中Lck、Fyn的表达量明显升高表现(P<0.01);与模型组比较,治疗组大鼠Lck、Fyn的表达量均明显低于模型组(P<0.01);与治疗组比较,PD-1干扰组大鼠脾脏组织Lck表达降低不如治疗组(P<0.01),Fyn表达有上升趋势,组间比较无明显差异(P>0.05)。结论:可明显降低TCR信号通路信号分子Lck、Fyn的表达,但在PD-1被干扰的情况下,其抑制Lck、Fyn表达的能力下降,表明该作用可能与PD-1对T细胞活化的负性调控作用相关。 展开更多
关键词 艾灸 类风湿性关节炎 PD-1 基因干扰 LCK FYN
EGFR表达抑制对胃癌AGS细胞生物学行为及化疗敏感性的影响 预览
7
作者 张自森 刘世佳 +4 位作者 王世超 巴楠 夏兴洲 王梦丹 马子涵 《现代肿瘤医学》 CAS 2019年第10期1690-1694,共5页
目的:观察表皮生长因子受体(epithelial growth factor receptor,EGFR)表达抑制对胃癌AGS细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡、细胞周期及化疗药物敏感性的影响。方法:设计3条EGFR-siRNA,转染胃癌AGS细胞,CCK-8方法测定细胞增殖,Transwell方法... 目的:观察表皮生长因子受体(epithelial growth factor receptor,EGFR)表达抑制对胃癌AGS细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡、细胞周期及化疗药物敏感性的影响。方法:设计3条EGFR-siRNA,转染胃癌AGS细胞,CCK-8方法测定细胞增殖,Transwell方法检测细胞侵袭和转移能力,流式细胞术测定细胞凋亡与周期,RT-PCR方法检测EGFR mRNA表达,Western blot方法检测EGFR、ERK、p-ERK、AKT和p-AKT蛋白表达。结果:EGFR干扰能有效抑制胃癌AGS细胞中EGFR的基因和蛋白表达水平(P<0.05)。与对照组、阴性siRNA转染组相比,EGFR-siRNA转染组AGS细胞增殖抑制显著增加,迁移、侵袭能力显著下降,细胞凋亡率显著增加(P<0.05),对顺铂、多柔比星、紫杉醇的化疗敏感性显著增加(P<0.05)。EGFR表达抑制后,处于S期的细胞比例明显减少,G 2/M期细胞比例明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。EGFR表达抑制后,AKT和p-AKT表达下调。结论:抑制EGFR表达可抑制胃癌AGS细胞增殖,降低细胞迁移和侵袭能力,增加细胞对顺铂、多柔比星、紫杉醇的化疗敏感性,其机制可能与AKT、p-AKT的表达下降有关。 展开更多
关键词 EGFR 基因干扰 化疗敏感性 胃癌AGS细胞
在线阅读 下载PDF
中国明对虾FBA基因克隆及其在白斑综合征病毒感染中的表达及功能分析 预览 被引量:1
8
作者 史晓丽 孟宪红 +5 位作者 孔杰 栾生 罗坤 曹宝祥 曹家旺 陈宝龙 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2018年第2期112-119,共8页
醛缩酶(FBA)是糖酵解和糖异生中的关键酶,参与多种生物过程。本研究采用RACE技术,克隆获得中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)FBA基因(FcFBA)的全长cDNA序列,并对其进行生物信息学分析。结果显示,中国明对虾FcFBA基因的cDNA全长为249... 醛缩酶(FBA)是糖酵解和糖异生中的关键酶,参与多种生物过程。本研究采用RACE技术,克隆获得中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)FBA基因(FcFBA)的全长cDNA序列,并对其进行生物信息学分析。结果显示,中国明对虾FcFBA基因的cDNA全长为2496 bp,其中,ORF长1098 bp,5′UTR长79 bp,3′UTR长1319 bp。完整的阅读框编码365个氨基酸,分子量为39.8 kDa,预测的理论等电点为6.6。同源性及系统进化分析表明,FcFBA与节肢动物的FBA聚为一类,与卤虫(Artemia franciscana)、家蚕(Bombyx mori)、沙漠蝗(Schistocerca gregaria)的相似度分别是86%、79%和78%。荧光定量PCR结果显示,FcFBA在肌肉中的相对表达量最高,肝胰腺中最低。WSSV感染后,该基因在鳃、肝胰腺和肌肉中呈现出不同的时空表达特点。dsRNA干扰24 h以后,抑制效率达到最大。与PBS对照组相比,FcFBA干扰组(dsRNA组)加快了对虾染病后的死亡速度。本研究表明,FcFBA基因可能参与了中国明对虾生物胁迫的应答反应。 展开更多
关键词 中国明对虾 FBA基因 基因克隆 组织表达 基因干扰
在线阅读 免费下载
下调大鼠血管内皮细胞血管紧张素转换酶的实验研究 预览 被引量:1
9
作者 周华 张翠芳 +1 位作者 陈瑞瑞 高奋 《中西医结合心脑血管病杂志》 2018年第7期859-864,共6页
目的 构建腺病毒载体使其携带血管紧张素转换酶(ACE)基因短发夹RNA(shRNA),通过RNA干扰技术选择性地下调大鼠血管内皮细胞(ECs)ACE表达。方法 采用RT-PCR法从之前构建的真核表达载体p-ACE-shRNA中扩增ACE-shRNA片段,扩增之后将ACE... 目的 构建腺病毒载体使其携带血管紧张素转换酶(ACE)基因短发夹RNA(shRNA),通过RNA干扰技术选择性地下调大鼠血管内皮细胞(ECs)ACE表达。方法 采用RT-PCR法从之前构建的真核表达载体p-ACE-shRNA中扩增ACE-shRNA片段,扩增之后将ACE-shRNA片段克隆进pDC316穿梭质粒,再将293细胞被构建好的pDC316-ACE-shRNA穿梭质粒载体和pBH-Glox-E1,3Cre骨架病毒转染,进行病毒颗粒包装重组并进行滴度测定和纯化。随后进行原代培养大鼠血管ECs转染,通过实时荧光定量PCR法分别在转染前及转染后24 h、48 h、72 h通过实时荧光定量PCR法来检测ACE mRNA的表达。结果 高滴度的重组病毒被制备完成,携带ACE-shRNA的重组腺病毒载体经PCR检测、限制性内切酶和GFP表达证实构建成功,被转染24 h时大鼠血管ECs ACE mRNA表达无统计学意义变化;但被转染48 h时,ECsACE mRNA表达差异有统计学意义(P〈0.05);被转染后72h时表达更低。结论 实验成功构建重组腺病毒载体并携带ACE-shRNA片段,同时证实shRNA可选择性下调原代培养大鼠血管ECs上ACE表达,可能为心血管病基因治疗和应用提供新思路。 展开更多
关键词 基因干扰 内皮细胞 血管紧张素转换酶
在线阅读 免费下载
结直肠癌中RIP2的表达与侵袭性相关性研究 预览
10
作者 敬国敏 吴立然 +1 位作者 樊坤 裴志刚 《国际检验医学杂志》 CAS 2018年第7期834-836,共3页
目的通过检测结直肠癌(CRC)组织中受体相互作用蛋白2(RIP2)的表达水平,并观察调高RIP2水平后肿瘤细胞的侵袭迁移能力,以探讨RIP2在肿瘤细胞侵袭与迁移中的作用。方法采用免疫组织化学法检测CRC组织(48份)及癌旁黏膜组织(56份)... 目的通过检测结直肠癌(CRC)组织中受体相互作用蛋白2(RIP2)的表达水平,并观察调高RIP2水平后肿瘤细胞的侵袭迁移能力,以探讨RIP2在肿瘤细胞侵袭与迁移中的作用。方法采用免疫组织化学法检测CRC组织(48份)及癌旁黏膜组织(56份)中RIP2的表达水平,并应用JetPRIME试剂将pEGFP-RIP2质粒转染入SW480结肠癌细胞株,上调其RIP2表达水平后,观察肿瘤细胞侵袭迁移能力的变化。结果CRC组织中RIP2表达显著低于癌旁黏膜组织,且差异具有统计意义(P<0.05);上调RIP2后,SW480细胞迁移能力减弱,且差异具有统计意义(P<0.05)。结论RIP2在CRC组织中表达下降,并与肿瘤细胞侵袭转移相关。 展开更多
关键词 结直肠癌 受体相互作用蛋白2 基因干扰 侵袭
在线阅读 下载PDF
长链非编码RNA linc00152在急性肾衰大鼠肾组织中表达及影响 预览 被引量:1
11
作者 李莉 于艳 +3 位作者 李洋平 马峰 冯世栋 刘晓渭 《临床军医杂志》 CAS 2018年第4期387-390,共4页
目的探讨急性肾衰大鼠肾组织中长链非编码RNA linc00152的表达情况及其对急性肾衰的影响。方法选取雄性SD大鼠72只,采用随机数字表法分为对照组(n=6)与模型组(n=66)。模型组建立庆大霉素诱导的急性肾衰大鼠模型,对照组注射同体积生... 目的探讨急性肾衰大鼠肾组织中长链非编码RNA linc00152的表达情况及其对急性肾衰的影响。方法选取雄性SD大鼠72只,采用随机数字表法分为对照组(n=6)与模型组(n=66)。模型组建立庆大霉素诱导的急性肾衰大鼠模型,对照组注射同体积生理盐水。采用实时定量聚合酶链式反应(PCR)法检测对照组及分别于第1、3、7、14、21天自模型组选取的6只大鼠肾组织中血清尿素氮、肌酐、尿N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶含量以及linc00152的表达、分布情况。将剩余36只模型组大鼠分为生理盐水组(n=12)、1 mg/kg siRNA组(n=12)及2 mg/kg siRNA组(n=12)。1 mg/kg siRNA组与2 mg/kg siRNA组分别尾静脉注射1 mg/kg、2 mg/kg linc00152-siRNA以达到活体水平阻断linc00152表达的目的,生理盐水组注射等体积生理盐水,分别于阻断后24、72 h检测linc00152表达水平、血清生化指标及尿液成分。结果模型组第1天血清尿素氮、肌酐、尿N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶含量显著上升,第3天继续上升,第7天达到峰值,第21天基本恢复至正常水平。正常大鼠肾组织中linc00152主要表达于皮质;模型组linc00152表达在皮质和髓质中均为第1天显著上升,第3天继续上升,第7天达到峰值,第21天基本恢复至正常水平,其中,皮质中linc00152水平变化幅度更明显。1 mg/kg、2 mg/kg linc00152-siRNA干预后24 h,急性肾衰大鼠肾皮质中linc00152表达水平分别下降约40%、70%;1 mg/kg、2 mg/kg linc00152-siRNA干预后72 h,急性肾衰大鼠肾皮质中linc00152表达水平分别下降约50%、80%。1 mg/kg、2 mg/kg linc00152-siRNA干预后24、72 h,急性肾衰大鼠血清总蛋白、白蛋白、尿素氮、肌酐、K+、尿蛋白及尿酮体水平均较生理盐水组显著降低,Na+水平均较生理盐水组显著升高,组间比较,差异均有统计学意义(P〈0.05);2 mg/kg linc00152-siRNA干预后24、72 h,急性肾衰大鼠血清总蛋白、白蛋白、尿素氮、 展开更多
关键词 长链非编码RNA linc00152 急性肾衰 基因干扰
在线阅读 下载PDF
多模态磁共振监测基因干扰治疗脑创伤半暗带的研究 被引量:1
12
作者 李利锋 张坤 +3 位作者 蒋锡丽 陈建强 何占平 鲁宏 《实用放射学杂志》 北大核心 2018年第1期128-132,共5页
目的 探究7.0T多模态磁共振成像(MM-MRI)监测通过水通道蛋白4 RNA干扰(AQP4-RNAi)治疗大鼠脑组织创伤半暗带(TP)后脑组织影像的动态变化情况.方法 采用改良的Feeney氏法建立大鼠中度脑创伤模型并对所有大鼠头部行7.0TMM-MRI扫描,... 目的 探究7.0T多模态磁共振成像(MM-MRI)监测通过水通道蛋白4 RNA干扰(AQP4-RNAi)治疗大鼠脑组织创伤半暗带(TP)后脑组织影像的动态变化情况.方法 采用改良的Feeney氏法建立大鼠中度脑创伤模型并对所有大鼠头部行7.0TMM-MRI扫描,观察TP区的T2WI、扩散加权成像(DWI)、表观扩散系数(ADC)和磁敏感加权成像(SWI),对应观察TP区的病理变化,并对测量值进行统计分析.结果 创伤组的rs-T2WI、rs-DWI及rs-SWI随时间延长逐渐增大;r-ADC在1 h升高,6 h到达最高,随后下降至12 h最低;rs-SWI在各时间点差异有统计学意义(P〈0.05).与干扰剂组相比,创伤组rs-T2WI及rs-DWI在6 h及12 h明显下降(P〈0.05),r-ADC在1 h无统计学意义(P〉0.05),6 h及12 h下降差异有统计学意义(P〈0.05),rs-SWI值在各个时间点差异无统计学意义(P〉0.05),rs-SWI与rs-DWI不匹配区在6 h及12 h最明显,干扰剂治疗后不匹配区面积减小.创伤组与安慰剂组各组数值差异无统计学意义(P〉0.05),病理学改变相似,1 h主要为血管源性水肿;6 h及12 h表现为混合性水肿.干扰剂组6 h及12 h细胞内水肿程度明显减轻,血管源性水肿有一定程度减轻.结论 AQP4-RNAi对TP的组织水肿有干预作用, M M-MRI可以反映其病理变化,SWI与DWI不匹配区对尽早发现TP有提示作用,为临床治疗提供有效的影像信息. 展开更多
关键词 创伤性脑损伤 半暗带 多模态磁共振成像 AQP4 基因干扰
结直肠癌中微小RNA-762表达的临床意义及作用机制 预览
13
作者 李强 陈志刚 +2 位作者 任婕 王晓雷 檀碧波 《河北医药》 CAS 2018年第23期3545-3549,共5页
目的 检测微小RNA-762(miR-762)在结直肠癌(CRC)组织和细胞株中的表达情况,并探讨miR-762在CRC中的临床意义及作用机制。方法 应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测48例CRC新鲜肿瘤组织及配对癌旁正常黏膜中miR-762的表达情况,同时检... 目的 检测微小RNA-762(miR-762)在结直肠癌(CRC)组织和细胞株中的表达情况,并探讨miR-762在CRC中的临床意义及作用机制。方法 应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测48例CRC新鲜肿瘤组织及配对癌旁正常黏膜中miR-762的表达情况,同时检测上皮间充质转化(EMT)标志物基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、E-钙粘蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)的mRNA表达情况,并记录患者的临床病理资料。分析miR-762与患者临床病理特征的关系;Spearman相关分析探讨miR-762与MMP-9、E-cadherin、Vimentin mRNA的关系。应用miR-762抑制物转染结肠癌细胞株SW620中miR-762的表达;噻唑蓝(MTT)实验检测转染对SW620细胞活性的影响;Transwell小室实验检测转染对SW620细胞侵袭能力的影响;检测MMP-9、E-cadherin、Vimentin基因表达的变化。结果 qRT-PCR结果显示,miR-762在CRC组织中表达高于癌旁正常黏膜(P<0.05);在淋巴结转移阳性、TNM分期较晚的患者肿瘤组织中miR-762表达更高(P<0.05);在CRC组织中miR-762与MMP-9之间存在正相关,miR-762与E-cadherin存在负相关(P<0.05)。抑制SW620细胞中miR-762表达后细胞活性下降、侵袭能力减弱,同时MMP-9、Vimentin的mRNA和蛋白表达降低,E-cadherin的mRNA和蛋白表达增高(均P<0.05)。结论 miR-762在CRC组织中表达增高且可预测患者的肿瘤侵袭转移,miR-762可能调节CRC细胞的EMT而促进肿瘤进展。 展开更多
关键词 结直肠癌 微小RNA-762 基因干扰 分子机制
在线阅读 下载PDF
下调OCT4基因对人骨肉瘤F5M2细胞系增殖能力的影响 预览
14
作者 王建华 宫晨 +4 位作者 刘飞 李定宇 卢晓光 吴韦清 彭平 《骨科》 CAS 2017年第5期394-398,共5页
目的探讨下调八聚体结合转录因子4(OCT4)基因对骨肉瘤细胞F5M2增殖能力的影响。方法采用RNA干扰技术将OCT4基因特异性小干扰RNA(siOCT4)转染到处于对数生长期的F5M2骨肉瘤细胞中作为siOCT4组,并设立siNC组(转染siNC)及空白对照... 目的探讨下调八聚体结合转录因子4(OCT4)基因对骨肉瘤细胞F5M2增殖能力的影响。方法采用RNA干扰技术将OCT4基因特异性小干扰RNA(siOCT4)转染到处于对数生长期的F5M2骨肉瘤细胞中作为siOCT4组,并设立siNC组(转染siNC)及空白对照组。采用实时荧光定量PCR及蛋白免疫印迹法检测并比较siOCT4组和siNC组细胞中的OCT4mRNA水平及蛋白表达水平;采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法及5-乙炔基-2′-脱氧尿苷(EdU)法检测并比较各组细胞的增殖能力;采用克隆形成试验检测并比较三组细胞的克隆形成能力。结果siOCT4组中OCT4的mRNA表达水平及蛋白表达水平均较siNC组显著降低;MTT法的实验结果显示:与siNC组及空白对照组比较,siOCT4组细胞的生长曲线显著右移,增殖能力显著低于其他两组;EdU法检测结果显示:siNC组细胞的24h平均增殖率为48.50%±4.54%,而siOCT4组细胞的24h平均增殖率为32.30%±1.72%;与空白对照组及siNC组细胞比较,siOCT4组的克隆形成能力显著降低;以上差异均具有统计学意义(P均<0.05)。结论下调骨肉瘤细胞F5M2中OCT4的表达能抑制其细胞的增殖能力。 展开更多
关键词 骨肉瘤 OCT4 细胞增殖 基因干扰
在线阅读 下载PDF
大鼠靶向α7nAchR基因shRNA真核表达载体及重组腺病毒构建 预览 被引量:1
15
作者 王定坤 陆付耳 +6 位作者 邹欣 任妍林 董慧 巩静 方珂 徐丽君 王开富 《华中科技大学学报:医学版》 CSCD 北大核心 2017年第4期374-379,共6页
目的构建大鼠烟碱样乙酰胆碱受体α7亚型(α7nAchR)基因短发夹RNA(shRNA)真核表达载体。方法设计并合成编码α7nAchR基因shRNA的DNA模板引物AY318、AY857、AY444+559、AY318+857,并分别与线性化的质粒载体pGenesil-1.1、pGenesil-... 目的构建大鼠烟碱样乙酰胆碱受体α7亚型(α7nAchR)基因短发夹RNA(shRNA)真核表达载体。方法设计并合成编码α7nAchR基因shRNA的DNA模板引物AY318、AY857、AY444+559、AY318+857,并分别与线性化的质粒载体pGenesil-1.1、pGenesil-1.4、pGenesil-1.2,pGenesil-1.3连接,以构建可以编码1条α7nAchR基因shRNA和编码2条α7nAchR基因shRNA的重组质粒载体;重组质粒载体感染感受态的DH5a细胞,提取细菌质粒进行特定酶切,并用1%的琼脂糖凝胶电泳以鉴定重组质粒是否构建成功;用LR体外同源重组法将AY318、AY444+559、AY857shRNA表达框分别从重组质粒pGenesil转移至腺病毒pGSadeno质粒表达载体上,构建重组腺病毒质粒;用相同的方法感染DH5a细胞,并鉴定重组腺病毒pGSadeno质粒是否构建成功;提取线性化的重组腺病毒DNA并转染包装细胞HEK293,经放大培养获得滴度为1.0×1010pfu/mL的重组腺病毒上清;将重组腺病毒感染大鼠GH3垂体瘤细胞,以PCR反应鉴定重组腺病毒载体的α7nAchR基因干扰效果。结果通过酶切片段及其大小,初步判断AY318、AY857、AY444+559、AY318+857shRNA成功重组入质粒载体,重组腺病毒pGSadeno-shRNA包装成功;重组腺病毒感染HEK293细胞,在荧光显微镜下有绿色荧光蛋白表达;重组腺病毒感染GH3细胞后α7nAchR mRNA表达显著减少,且pGSadeno-AY857shRNA干扰效果最明显(85%)。结论具有感染力和干扰大鼠α7nAchR基因表达的shRNA真核表达载体构建成功,且pGSadeno-AY857shRNA具有最强的基因干扰效果。 展开更多
关键词 α7nAchR SHRNA 基因干扰 重组质粒 重组腺病毒
在线阅读 下载PDF
SGK-1在缺氧诱导小鼠垂体瘤细胞AtT-20增殖、凋亡中的表达及作用探讨 预览
16
作者 韦睿 吴杰 +1 位作者 曾伟 张玮 《山东医药》 北大核心 2017年第18期16-19,共4页
目的观察血清和糖皮质激素调节蛋白激酶1(SGK-1)在缺氧诱导小鼠垂体瘤细胞AtT-20增殖、凋亡中的表达,并探讨其在这一过程中的作用。方法将AtT-20细胞随机分为观察组和对照组,观察组分别加入50、100、200μmol/L CoCl2(模拟缺氧),对... 目的观察血清和糖皮质激素调节蛋白激酶1(SGK-1)在缺氧诱导小鼠垂体瘤细胞AtT-20增殖、凋亡中的表达,并探讨其在这一过程中的作用。方法将AtT-20细胞随机分为观察组和对照组,观察组分别加入50、100、200μmol/L CoCl2(模拟缺氧),对照组不处理,采用MTT法检测24、48、72、96 h时细胞增殖的A570值;将200μmol/L CoCl2加入AtT-20细胞,培养0、24、48、72、96 h时采用流式细胞术测算细胞凋亡率,分别采用半定量PCR法和Western blot法检测SGK-1 mRNA及蛋白。将AtT-20细胞随机分为4组,A、B组转染干扰质粒SGK-1 siRNA,C、D组转染对照质粒si Con,转染24 h后A、C组加入200μmol/L CoCl2,B、D组不处理,分别采用MTT法和流式细胞术检测24、48、72、96 h时细胞增殖的A570值及细胞凋亡率。结果缺氧处理72 h后,观察组随着CoCl2浓度增加及作用时间延长,AtT-20细胞增殖的A570值逐渐降低,与对照组比较差异有统计学意义(P均〈0.05)。与0 h时比较,处理24、48 h时细胞凋亡率无明显变化,处理72、96 h时细胞凋亡率增加(P均〈0.05);与0 h时比较,处理24、48时AtT-20细胞SGK-1 mRNA及蛋白表达量均增加(P均〈0.05),72 h后其表达量无显著变化(P均〉0.05)。A组缺氧后各时点细胞增殖的A570值均低于其余各组,C组缺氧后72、96 h细胞增殖的A570值高于A组而低于B、C组(P均〈0.05)。A组缺氧后各时点细胞凋亡率均高于其余各组,C组缺氧后72 h细胞凋亡率低于A组而高于B、C组(P均〈0.05)。结论缺氧可抑制AtT-20细胞增殖、促进其凋亡,该过程中SGK-1表达增加可保护细胞免受缺氧导致的损伤。 展开更多
关键词 脑缺氧 垂体瘤细胞 血清和糖皮质激素调节蛋白激酶 氯化钴 基因干扰 细胞凋亡 细胞增殖
在线阅读 下载PDF
HIF-1α基因干扰对低氧环境下人鼻黏膜上皮细胞TGF-β1、VEGF、bFGF表达的影响及其机制 预览 被引量:3
17
作者 杨琳红 张爱华 +2 位作者 范宗宪 韩琳 王维峰 《山东医药》 北大核心 2017年第44期42-45,共4页
目的观察低氧诱导因子1α(HIF-1α)基因干扰对低氧环境下人鼻黏膜上皮细胞(HNEC)转化生长因子β_1(TGF-β_1)、血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)表达的影响,并探讨其可能的作用机制。方法体外培养HNEC,... 目的观察低氧诱导因子1α(HIF-1α)基因干扰对低氧环境下人鼻黏膜上皮细胞(HNEC)转化生长因子β_1(TGF-β_1)、血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)表达的影响,并探讨其可能的作用机制。方法体外培养HNEC,取传3代对数生长期细胞随机分为空白对照组、NC-shRNA组、HIF-shRNA组和低氧诱导组。空白对照组不予任何处理,NC-shRNA组、HIF-shRNA组分别予NC-shRNA、HIF-shRNA转染,并于转染24 h后经CoCl_2化学诱导模拟低氧环境;低氧诱导组仅经CoCl_2化学诱导模拟低氧环境。采用实时荧光定量PCR法和Western blotting法检测各组HIF-1α、TGF-β_1、VEGF、b FGF mRNA和蛋白表达;采用Western blotting法检测PI3K/Akt信号通路相关蛋白PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt表达。结果与空白对照组比较,低氧诱导组HIF-1α、VEGF、TGF-β1、bFGF mRNA和蛋白表达均明显升高(P均〈0.05。结论低氧诱导HIF-1α表达可促进人鼻黏膜上皮细胞TGF-β1、VEGF、bFGF表达,干扰HIF-1α基因则抑制上述因子的表达;HIF-1α对上述因子的调控机制可能与其抑制PI3K/Akt信号通路有关。 展开更多
关键词 鼻黏膜上皮细胞 低氧诱导因子1Α 基因干扰 血管内皮生长因子 PI3K/AKT信号通路 低氧环境
在线阅读 下载PDF
干扰c-myc基因表达增强人胰腺癌细胞对吉西他滨和卡铂的敏感性 预览 被引量:3
18
作者 翁克贵 蒋勇 +2 位作者 王颖 冀晓辉 梁冠中 《肿瘤药学》 CAS 2017年第3期273-277,共5页
目的 探讨干扰c-myc基因表达对人胰腺癌细胞SW1990对化疗药物敏感性的影响。方法 采用实时定量PCR和Western blot检测人胰腺癌细胞系SW1990中c-myc基因的干扰效果;MTT法检测癌细胞对化疗药物吉西他滨和卡铂的敏感性;流式细胞术检测吉西... 目的 探讨干扰c-myc基因表达对人胰腺癌细胞SW1990对化疗药物敏感性的影响。方法 采用实时定量PCR和Western blot检测人胰腺癌细胞系SW1990中c-myc基因的干扰效果;MTT法检测癌细胞对化疗药物吉西他滨和卡铂的敏感性;流式细胞术检测吉西他滨诱导的细胞凋亡情况。结果 c-myc si RNA显著下调人胰腺癌SW1990细胞中c-myc基因的m RNA和蛋白表达水平。干扰c-myc表达后,化疗药物吉西他滨和卡铂对SW1990细胞的半数抑制浓度(IC50)均显著减小(P〈0.05),吉西他滨诱导的SW1990细胞凋亡率显著升高(P〈0.05)。结论 干扰c-myc表达可增强人胰腺癌细胞株SW1990对化疗药物吉西他滨和卡铂的敏感性。 展开更多
关键词 胰腺癌 c-myc 基因干扰 吉西他滨 卡铂 敏感性
在线阅读 免费下载
靶向沉默维生素D受体基因对前列腺癌细胞迁移及侵袭性的影响 被引量:1
19
作者 张远东 赵晖 +1 位作者 李康健 官润云 《中华男科学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第11期969-974,共6页
目的:探讨小干扰RNA靶向沉默维生素D受体(VDR)对前列腺癌PC-3细胞生物学行为的影响。方法:构建VDR-shRNA慢病毒载体,用RT-PCR和Western印迹法分别检测VDR的mRNA和蛋白表达水平;通过细胞划痕愈合实验和Transwell小室检测VDR被沉默... 目的:探讨小干扰RNA靶向沉默维生素D受体(VDR)对前列腺癌PC-3细胞生物学行为的影响。方法:构建VDR-shRNA慢病毒载体,用RT-PCR和Western印迹法分别检测VDR的mRNA和蛋白表达水平;通过细胞划痕愈合实验和Transwell小室检测VDR被沉默后的PC-3细胞迁移能力和侵袭性的变化。结果:VDR-shR-NA质粒显著干扰VDR表达,并成功筛选VDR-shRNA干扰稳定的细胞株;细胞划痕实验结果显示划痕愈合率VDR干扰组为59%明显低于空白对照组73.6%和LV3阴性对照组的77.8%,组间差异有显著性(P〈0.05),空白对照组和LV3阴性对照组组间差异无显著性(P〉0.05)。Transwell小室实验显示VDR干扰组透膜细胞数量明显低于空白对照组和LV3阴性对照组约为50%,细胞组间差异有显著性(P〈0.05),空白对照组和LV3阴性对照组组间差异无显著性(P〉0.05)。VDR干扰组细胞的迁移和侵袭能力明显低于对照组细胞。结论:VDR基因表达水平能影响前列腺癌细胞的迁移及侵袭能力,VDR低表达可致前列腺癌细胞迁移及侵袭能力下降。 展开更多
关键词 PC-3细胞 shRNA 维生素D受体 侵袭性 基因干扰
VDR和GLi1在前列腺癌细胞PC-3中的表达及其相关性 预览
20
作者 张远东 赵晖 +3 位作者 申吉泓 刘孝东 李康健 官润云 《实用医学杂志》 北大核心 2017年第21期3530-3534,共5页
目的 初步探讨慢病毒携带shRNA-VDR载体干扰前列腺癌PC-3细胞中VDR基因对GLi1的影响。方法 依照PC-3细胞的培养条件培养细胞;采用荧光定量PCR法和免疫细胞化学SP法检测PC-3细胞中VDR、GLi1两个基因表达情况;对PC-3细胞病毒侵染进行效率... 目的 初步探讨慢病毒携带shRNA-VDR载体干扰前列腺癌PC-3细胞中VDR基因对GLi1的影响。方法 依照PC-3细胞的培养条件培养细胞;采用荧光定量PCR法和免疫细胞化学SP法检测PC-3细胞中VDR、GLi1两个基因表达情况;对PC-3细胞病毒侵染进行效率评价;运用RT-PCR法检测PC-3细胞VDR基因干扰效果及Gli1转录水平改变情况。结果 细胞培养:拍照记录细胞状态:PC-3细胞生长状态良好,以4 d为1周期进行传代;荧光定量PCR法和免疫细胞化学SP法显示VDR、GLi1均在PC-3细胞中表达;慢病毒侵染效率显示为按照1∶10的比例向PC-3细胞加入LV3-NC慢病毒时,细胞侵染效率最好,约为95%左右;RT-PCR显示:VDR-shRNA慢病毒成功干扰VDR表达,在VDR-shRNA慢病毒转染72 h后与对照组相比实验组VDR基因转录水平下降85%(P〈0.05),同时实验组GLi1基因转录水平与对照组相比上升9%(P〈0.05);而当转染96 h后实验组VDR基因转录水平与对照组相比下降99%(沉默),同时实验组GLi1基因转录水平与对照组相比上升248%(P〈0.05)。结论 所培养的PC-3细胞状态较好;VDR和GLi1基因在PC-3细胞中均表达;慢病毒按照1∶10的比例侵染PC-3效率最高;当VDR被干扰后GLi1表达增高,因而在前列腺癌细胞中维生素D可抑制Hh信号通路可致GLi1表达下调。 展开更多
关键词 PC-3细胞 维生素D受体(VDR) GLI1蛋白 基因干扰
在线阅读 免费下载
上一页 1 2 10 下一页 到第
使用帮助 返回顶部 意见反馈