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LED蓝光与柠檬酸对大肠杆菌的协同抗菌作用 预览
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作者 俞建峰 夏晓露 +2 位作者 崔政伟 陈健 张楚唯 《食品与机械》 CSCD 北大核心 2018年第1期62-66,共5页
为了开发新型食品抗菌方法,研究了LED蓝光辐照强度、柠檬酸质量浓度和温度3个因素对营养肉汤中大肠杆菌O157:H7抗菌性能的影响。结果表明:LED蓝光在低温(12℃)下对大肠杆菌O157:H7的抗菌效果优于室温(25℃),且抗菌效果随着光照... 为了开发新型食品抗菌方法,研究了LED蓝光辐照强度、柠檬酸质量浓度和温度3个因素对营养肉汤中大肠杆菌O157:H7抗菌性能的影响。结果表明:LED蓝光在低温(12℃)下对大肠杆菌O157:H7的抗菌效果优于室温(25℃),且抗菌效果随着光照剂量的增加而增强;柠檬酸在低温下对大肠杆菌O157:H7的影响较弱,但在室温下可明显减缓其生长速率;与空白对照组相比,在使用4 072.3J/cm~2光照剂量的LED蓝光照射后,大肠杆菌O157:H7的数量在低温下可减少(2.60±0.19)lg CFU/mL,而在室温下仅减少(0.67±0.12)lg CFU/mL;加入柠檬酸后,显著增强了LED蓝光的抗菌效果,在使用2 471.0J/cm~2光照剂量的LED蓝光照射后,大肠杆菌O157:H7的数量在低温下可减少(5.13±0.11)lg CFU/mL,在室温下可减少(3.08±0.11)lg CFU/mL。 展开更多
关键词 LED蓝光 柠檬酸 大肠杆菌O157 H7 协同作用
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实时荧光环介导等温扩增技术快速检测牛肉中的大肠杆菌O157
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作者 苑宁 石磊 +5 位作者 王永 陈发荣 时凡 徐慧 贾丽娜 张伟 《食品安全质量检测学报》 CAS 2018年第24期6489-6495,共7页
目的建立实时荧光环介导等温扩增技术(real-time fluorescence loop-mediated isothermal amplification,RF-LAMP)快速检测大肠杆菌(Escherichia coli,EHEC)O157的分析方法。方法针对大肠杆菌O157编码O抗原的rfbE基因设计引物。对该方... 目的建立实时荧光环介导等温扩增技术(real-time fluorescence loop-mediated isothermal amplification,RF-LAMP)快速检测大肠杆菌(Escherichia coli,EHEC)O157的分析方法。方法针对大肠杆菌O157编码O抗原的rfbE基因设计引物。对该方法进行特异性验证,同时对大肠杆菌0157:H7纯培养物的灵敏度和人工污染牛肉的检出限进行测定,对61份牛肉样品进行RF-LAMP检测,并与GB 4789.36-2016方法进行比较,评价RF-LAMP方法的敏感性、特异性和准确度。结果10株大肠杆菌O157呈阳性结果,21株非大肠杆菌O157呈阴性结果,该方法特异性良好。纯培养物检测的灵敏度为5.1 CFU/mL,人工污染的牛肉样品的检出限为5.1CFU/g。结论本研究建立的RF-LAMP技术特异性好、灵敏度高、操作简单,可实时监测扩增反应,避免了繁琐的电泳过程,实现了对大肠杆菌O157的快速检测,对大肠杆菌O157引起的食源性疾病的预防和控制具有重要意义。 展开更多
关键词 实时荧光 环介导等温扩增 大肠杆菌O157 rfbE基因 牛肉 快速检测
屠宰环节牛羊产品中大肠杆菌O157污染状况调查 预览
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作者 谢建华 侯亚莉 +6 位作者 周莉 叶洁莹 汪子淳 梁望旺 杨泽林 熊仲良 米自由 《中国兽医杂志》 北大核心 2018年第8期78-80,共3页
初步调查分析屠宰环节529份牛羊产品中大肠杆菌O157污染状况,同时对分离出的16株大肠杆菌O157进行药敏试验和致病性分析.结果表明,大型屠宰场的牛羊产品受大肠杆菌O157污染程度较重为4.42%,手工屠宰场比机械屠宰场污染程度重,为4.27%,... 初步调查分析屠宰环节529份牛羊产品中大肠杆菌O157污染状况,同时对分离出的16株大肠杆菌O157进行药敏试验和致病性分析.结果表明,大型屠宰场的牛羊产品受大肠杆菌O157污染程度较重为4.42%,手工屠宰场比机械屠宰场污染程度重,为4.27%,西北方向比西南方向污染重,达到5.08%,羊产品比牛产品污染重,为5.91%,出场前胴体拭子比刚宰出的污染重,达到5.84%.16株分离菌株对常见抗生素均敏感,且这些菌株都存在肠溶血素(ehxA基因)、紧密素(eaeA基因)和+93uidA毒力基因,志贺毒素(Stx1)均缺失和志贺毒素(Stx2)部分缺失. 展开更多
关键词 大肠杆菌O157 牛羊产品 细菌污染
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基于反转录环介导等温扩增技术检测大肠杆菌O157 预览
4
作者 梁玉林 刘秀 +2 位作者 周鹏飞 周振森 尹建军 《生物技术通报》 CSCD 北大核心 2018年第6期59-65,共7页
建立反转录环介导等温扩增(Reverse transcriptase loop-mediated isothermal amplification RT-LAMP)方法特异性检测大肠杆菌O157。针对大肠杆菌O157的特异性保守rfb E基因设计多组引物,通过对引物筛选和反应条件优化,建立了检测大... 建立反转录环介导等温扩增(Reverse transcriptase loop-mediated isothermal amplification RT-LAMP)方法特异性检测大肠杆菌O157。针对大肠杆菌O157的特异性保守rfb E基因设计多组引物,通过对引物筛选和反应条件优化,建立了检测大肠杆菌O157的实时荧光RT-LAMP方法。利用大肠杆菌O157及其人工污染脱脂乳样品,研究了方法的特异性和灵敏度,并与r RTPCR(Real-time fluorescent quantitative reverse transcription polymerase chain reaction)方法的灵敏度进行比较。结果显示,等温65℃条件下,30 min内能完成RT-LAMP扩增反应。所建立的实时荧光RT-LAMP方法特异性强,除了2株大肠杆菌O157以外其余菌株均未产生特异性扩增反应。同时该方法灵敏度高,对人工污染脱脂乳样品检测灵敏度能达到20 CFU/g,比r RT-PCR方法高10倍。建立的实时荧光RT-LAMP方法将为大肠杆菌O157现场快速检测提供有力手段。 展开更多
关键词 反转录-环介导等温扩增 大肠杆菌O157 检测 脱脂乳
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食源性大肠杆菌O157毒力、耐药性及CRISPR分型分析
5
作者 杨广珠 张淑红 +2 位作者 黄远斌 吴清平 张菊梅 《现代食品科技》 北大核心 2017年第12期29-37,227共10页
为深入了解食品源大肠杆菌O157的生物学特点,本研究对2014-2015年分离的39株大肠杆菌O157进行了PCR鉴定,毒力基因和耐药性检测,并利用规律成簇的间隔短回文重复序列(CRISPR)分型技术对菌株的遗传特性进行了分析。结果表明,39株菌株中... 为深入了解食品源大肠杆菌O157的生物学特点,本研究对2014-2015年分离的39株大肠杆菌O157进行了PCR鉴定,毒力基因和耐药性检测,并利用规律成簇的间隔短回文重复序列(CRISPR)分型技术对菌株的遗传特性进行了分析。结果表明,39株菌株中有8株鉴定为O157:H7,31株为O157;检测的11种毒力基因中,eae存在于所有菌株中,stx2存在于82.50%菌株中,stx1未检出,其他毒力岛基因esp A、etp D、tir、tox B、iha和kat P携带率分别为92.31%、94.87%、87.18%、79.49%、69.23%和46.15%。药敏试验结果表明,菌株对四环素、复方新诺明、链霉素、氯霉素和氨苄西林等抗生素高度耐药,超过30%菌株具有多重耐药性。CRISPR分型结果表明菌株具有较高的遗传多样性,39株菌株中有33株存在CRISPR1位点,8株E.coli O157:H7产生了相同的CRISPR spacer图谱,而26株E.coli O157产生了13种spacer图谱。本研究为食源性疾病的监测、疾病溯源和流行病学研究提供重要的基础数据。 展开更多
关键词 大肠杆菌O157 毒力基因 耐药性 CRISPR分型
大肠杆菌O157快速检测板在肉与肉制品检测中的应用 被引量:2
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作者 肖剑 陈娟丽 +3 位作者 张彬彬 孙霞 谢俊平 宋安华 《食品安全质量检测学报》 CAS 2017年第1期331-335,共5页
目的研究大肠杆菌O157快速检测板在肉与肉制品检测中的应用。方法以GB/T 4789.36-2008《食品卫生微生物学检验大肠埃希氏菌O157:H7/NM检验》作为参考方法,研究大肠杆菌O157快速检测板在肉与肉制品检测中应用的灵敏度、特异性、假阳性... 目的研究大肠杆菌O157快速检测板在肉与肉制品检测中的应用。方法以GB/T 4789.36-2008《食品卫生微生物学检验大肠埃希氏菌O157:H7/NM检验》作为参考方法,研究大肠杆菌O157快速检测板在肉与肉制品检测中应用的灵敏度、特异性、假阳性率、假阴性率、准确度等指标,同时利用卡方检验分析阳性率显著性差异。结果大肠杆菌O157快速检测板灵敏度为100%,不存在假阴性,特异性为96.4%,假阳性率为3.6%,准确度为98%,显著性差异卡方值卡Χ^2为0,均达到定性方法验证的相关指标。结论大肠杆菌O157检测板技术具有快速准确、灵敏度高、操作简单的特点,可以作为一种快速筛查方法广泛应用于肉与肉制品大肠杆菌O157的检测。 展开更多
关键词 大肠杆菌O157 快速检测板 肉制品
基于环介导恒温扩增技术的大肠杆菌O157:H7快速检测试剂盒的评价 被引量:4
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作者 周杨 万强 +3 位作者 蔡芷荷 卢勉飞 吴清平 李健顺 《微生物学通报》 CSCD 北大核心 2017年第8期1996-2004,共9页
【目的】评价基于环介导恒温扩增技术(LAMP)的大肠杆菌O157:H7(Escherichia coli O157:H7)快速检测试剂盒的实效性。【方法】测定快速检测试剂盒的特异性、灵敏度、重复性、保质期以及运输稳定性,并与传统方法对比检测实际样品。... 【目的】评价基于环介导恒温扩增技术(LAMP)的大肠杆菌O157:H7(Escherichia coli O157:H7)快速检测试剂盒的实效性。【方法】测定快速检测试剂盒的特异性、灵敏度、重复性、保质期以及运输稳定性,并与传统方法对比检测实际样品。【结果】大肠杆菌O157:H7标准菌株样品均检测为阳性,非大肠杆菌O157:H7标准菌株样品均检测为阴性,未发现有交叉反应;试剂盒最低检验限为29 CFU;该试剂盒的特异性、灵敏度及准确度与传统方法相比具有较高的一致性;试剂盒对高菌量目标菌和阴性菌样品的检测重复率均为100%,对低菌量目标菌样品的批间检测重复率为94%。试剂盒可在4°C保存9个月以上,并且可进行变温储存72 h以上。【结论】该试剂盒特异性好,灵敏度高,重复性好,储存方便,检测结果稳定、可靠,适用于对食品中大肠杆菌O157:H7的检测需求。 展开更多
关键词 大肠杆菌O157 H7 环介导等温扩增技术 快速检测试剂盒 评价
茶树油/β-环糊精纳米脂质体的制备及其在牛肉抗菌中的应用研究 预览
8
作者 林琳 代娅婕 +3 位作者 纪悦 魏晓鸥 王莹 崔海英 《中国食品添加剂》 北大核心 2017年第11期123-127,共5页
目的:克服茶树油(TTO)易挥发不稳定、水溶性差的缺点,拓展其在食品抗菌添加剂中的应用范围。方法:首先采用饱和水溶液法制得TTO/β-CD包合物,再通过薄膜-超声分散法将包合物包埋进纳米脂质体中。结果:当体系中TTO/β-CD包合物的浓... 目的:克服茶树油(TTO)易挥发不稳定、水溶性差的缺点,拓展其在食品抗菌添加剂中的应用范围。方法:首先采用饱和水溶液法制得TTO/β-CD包合物,再通过薄膜-超声分散法将包合物包埋进纳米脂质体中。结果:当体系中TTO/β-CD包合物的浓度为20 mg/mL时,制备得到的纳米脂质体具有最佳的稳定性和包封率(平均粒径为365 nm,PDI为0.249,Zeta电位为-36.0 mV,包封率为59.71%)。抗菌实验显示TTO/β-CD纳米脂质体在牛肉中对大肠杆菌O157具有显著的抗菌效果,且不会影响牛肉的感官品质。结论:通过β-环糊精包埋可以显著提TTO的稳定性、水溶性及其在纳米脂质体中的包封率,因此TTO/β-CD纳米脂质体在肉制品的抗菌保鲜中具有广阔的应用前景。 展开更多
关键词 茶树油(TTO) Β-环糊精 纳米脂质体 大肠杆菌O157 牛肉
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三重荧光PCR检测食源性致病菌方法的建立与初步应用 预览
9
作者 谢海燕 蔡奕琪 +2 位作者 张端秀 徐振娜 洪伟彬 《中国兽医杂志》 北大核心 2017年第3期86-89,共4页
根据大肠杆菌O157的rfbE基因、志贺肠杆菌ipaH基因、单增李斯特杆菌hlyA基因的保守序列,设计引物和探针,通过优化反应体系,测定其灵敏度、特异性和重复性,建立了可同时检测上述3种食源性致病菌的多重实时荧光PCR方法。试验结果显示,该... 根据大肠杆菌O157的rfbE基因、志贺肠杆菌ipaH基因、单增李斯特杆菌hlyA基因的保守序列,设计引物和探针,通过优化反应体系,测定其灵敏度、特异性和重复性,建立了可同时检测上述3种食源性致病菌的多重实时荧光PCR方法。试验结果显示,该方法对大肠杆菌O157、志贺肠杆菌、单增李斯特杆菌进行3联扩增的相对灵敏度检测限分别为5×10^2、5×10^2和5×10^3CFU/mL;对10株标准/参考菌株的检测结果,只有目的菌株呈阳性反应;用该方法检测26份冻肉样品,与传统的细菌分离鉴定法结果一致,说明研究建立的方法是鉴定3种食源性致病菌的有效方法。 展开更多
关键词 大肠杆菌O157 志贺氏肠杆菌 单增李斯特杆菌 三重荧光PCR 方法建立 初步应用
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豆类及其制品中大肠杆菌O157和O104的双重real-time PCR检测方法
10
作者 赵晓美 赵贵明 +3 位作者 王娉 陈颖 焦彦朝 罗阿东 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期255-259,共5页
目的建立一种快速检测豆类及其制品中肠出血性大肠杆菌O157、O104的双重real-time PCR方法。方法分别选取大肠杆菌O157的特异性基因rfbE和大肠杆菌O104的特异性基因wzy作为靶基因,设计相应的特异性引物探针,建立双重real-time PCR反应体... 目的建立一种快速检测豆类及其制品中肠出血性大肠杆菌O157、O104的双重real-time PCR方法。方法分别选取大肠杆菌O157的特异性基因rfbE和大肠杆菌O104的特异性基因wzy作为靶基因,设计相应的特异性引物探针,建立双重real-time PCR反应体系,并对反应体系及引物浓度等反应条件进行优化。结果最终确定反应体系为:以大肠杆菌O157、大肠杆菌O104菌株的DNA按照1∶3比例混合作为模板,模板DNA 2μL,Master Mix 12.5μL,上游引物(10μmol/L)各1μL,下游引物(10μmol/L)各1μL,探针(10μmol/L)各0.5μL,灭菌水补齐至25μL。实现了同一次处理样品在同一反应体系中同时检测肠出血性大肠杆菌的两种血清型,检测灵敏度的下限可达102CFU/m L(g)。结论该方法特异性好,对其他常见病原菌无扩增,灵敏度高、快速、简便,为食源性致病菌的检测提供了理想手段。 展开更多
关键词 双重real-time PCR 大肠杆菌O157 大肠杆菌O104 快速检测
冻干奶粉样品中大肠杆菌O157和O111的检测方法 预览
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作者 曹文博 郑秋月 +1 位作者 张公亮 侯红漫 《大连工业大学学报》 CAS 北大核心 2016年第5期317-320,共4页
应用实时荧光PCR技术建立一种检测冻干奶粉样品中大肠杆菌的方法。通过传统培养法将大肠杆菌O157和O111分离纯化,根据大肠杆菌O157和O111的两对特异性基因rfbE和wbdl设计引物和探针,进行RT-PCR检测;由于该大肠杆菌可能是产志贺毒素大肠... 应用实时荧光PCR技术建立一种检测冻干奶粉样品中大肠杆菌的方法。通过传统培养法将大肠杆菌O157和O111分离纯化,根据大肠杆菌O157和O111的两对特异性基因rfbE和wbdl设计引物和探针,进行RT-PCR检测;由于该大肠杆菌可能是产志贺毒素大肠杆菌,对STEC的特异性毒力基因stx1、stx2b、eae设计引物和探针并检测。结果表明,该冻干奶粉样品中含有大肠杆菌O157和O111,且致病菌O157检出毒力基因stx1、stx2b、eae,即产志贺毒素与黏附素,致病菌O111检出毒力基因eae,不产志贺毒素而产黏附素。该方法能准确分离大肠杆菌O157和O111,利用实时荧光PCR的高灵敏度和特异性快速检验致病菌及其特异性毒力基因。 展开更多
关键词 大肠杆菌O157 大肠杆菌O111 实时荧光PCR 冻干奶粉
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大肠杆菌O157中肽聚糖水解酶MpaA的克隆、表达、纯化及晶体学研究 预览
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作者 马银良 刘爽 +2 位作者 崔亚琦 康现江 刘秀华 《河北大学学报:自然科学版》 CAS 北大核心 2016年第4期412-416,共5页
采用分子克隆方法将来源于大肠杆菌0157的mpaA基因构建入pET-21b(+)表达载体.诱导MpaA蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中高效表达,通过Ni亲和层析、离子交换层析和凝胶过滤层析三步法纯化得到高纯度蛋白.使用气象扩散法进行... 采用分子克隆方法将来源于大肠杆菌0157的mpaA基因构建入pET-21b(+)表达载体.诱导MpaA蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中高效表达,通过Ni亲和层析、离子交换层析和凝胶过滤层析三步法纯化得到高纯度蛋白.使用气象扩散法进行蛋白质晶体生长的初步筛选与优化,得到MpaA蛋白质单晶,并使用X射线衍射仪进行衍射数据的收集与处理.MpaA晶体分辨率为0.26nm,属于P31空间群,晶胞参数为a=5.9893nm,b=5.9893nm,c=12.9870nm,β=90.000°.MpaA晶体衍射数据的收集为后续结构解析和催化机制的阐明提供了基础. 展开更多
关键词 大肠杆菌O157 肽聚糖水解酶 MpaA 晶体
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大肠杆菌O157分离株的药物敏感性及耐药基因的测定 被引量:1
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作者 方根成 郝雪华 《河南预防医学杂志》 2016年第2期126-129,145共5页
目的探讨15株大肠埃希菌0157分析株的耐药情况。方法应用K—B纸片法测定了15株大肠杆菌对22种抗菌药物的敏感性,并利用PCR方法扩增了大肠杆菌0157的β-内酰胺类、氨基糖苷类、糖肽类、大环内酯类和四环素类抗菌药物的耐药基因。结果药... 目的探讨15株大肠埃希菌0157分析株的耐药情况。方法应用K—B纸片法测定了15株大肠杆菌对22种抗菌药物的敏感性,并利用PCR方法扩增了大肠杆菌0157的β-内酰胺类、氨基糖苷类、糖肽类、大环内酯类和四环素类抗菌药物的耐药基因。结果药敏试验结果表明:15株分离株对氟哌酸、左氟沙星、丙氟哌酸、庆大霉素敏感性最高,达到100%,其次是呋哺妥因、磷霉素、链霉素、多粘霉素B、先锋霉素v、头孢氨噻肟,分别达到了93.3%;而对替考拉宁、青霉素耐药.1生最高,耐药率达到了93.3%。15株分离株的5种耐药基因检测结果表明:四环素耐药基因TetM的检测率100.0%,替考拉宁耐药基因VatD/E的检出率为46.7%,β-内酰胺类耐药基因检出率26.7%,红霉素ermB耐药基因检出率40.0%,氨基糖苷类3种耐药基因均未检出。结论本次分离的大肠杆菌0157对临床上常用的抗G-细菌抗生素或广谱抗生素均表现出了较高的敏感性,而对抗G+细菌抗生素均有较高的耐药性。 展开更多
关键词 大肠杆菌O157 药敏试验 耐药基因 测定
实时荧光单引物等温扩增(SPIA)技术检测大肠杆菌O157的方法研究 被引量:2
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作者 李瑞 王建昌 +2 位作者 李静 胡连霞 张伟 《现代食品科技》 EI CAS 北大核心 2016年第2期317-322,316共7页
建立一种快速、灵敏的食品中肠出血性大肠杆菌O157的检测方法。以大肠杆菌O157的特异性基因(rfbE)为靶序列,设计相应的RNA/DNA组合引物和链终止序列,优化引物浓度、Mg2+浓度、温度等反应条件,建立实时荧光单引物等温扩增(Real Time ... 建立一种快速、灵敏的食品中肠出血性大肠杆菌O157的检测方法。以大肠杆菌O157的特异性基因(rfbE)为靶序列,设计相应的RNA/DNA组合引物和链终止序列,优化引物浓度、Mg2+浓度、温度等反应条件,建立实时荧光单引物等温扩增(Real Time Fluorescence Single Primer Isothermal Amplification,实时荧光SPIA)检测大肠杆菌O157的方法,并对该方法的特异性、灵敏度以及人工污染检出限进行检测。确定了实时荧光SPIA法的最适反应条件,该方法可以在55 min内完成检测工作,除大肠杆菌O157外,其他细菌均未产生特异性荧光扩增曲线,而且实时荧光SPIA检测大肠杆菌O157的灵敏度为2.0 CFU/m L,对猪肉人工污染样品中大肠杆菌O157的检出限是4.0 CFU/g。实时荧光SPIA方法检测大肠杆菌O157具有耗时短,灵敏度高,特异性强,方法简便的优越性,为检测食源性致病菌构建了一个技术平台。 展开更多
关键词 大肠杆菌O157 rfbE基因 检测
关于产志贺毒素大肠杆菌O26的解读 预览 被引量:1
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作者 谷悦 《中国食品》 2016年第5期136-137,共2页
近日,据美国食品安全新闻网消息,由美国墨西哥风味连锁餐厅Chipotle食物中毒引发的产志贺毒素大肠杆菌O26疫情在美国蔓延,导致20人住院。美国疾病预防和控制中心(CDC)称,近两年来由产志贺毒素大肠杆菌O26引发的食物中毒事件明显增多,... 近日,据美国食品安全新闻网消息,由美国墨西哥风味连锁餐厅Chipotle食物中毒引发的产志贺毒素大肠杆菌O26疫情在美国蔓延,导致20人住院。美国疾病预防和控制中心(CDC)称,近两年来由产志贺毒素大肠杆菌O26引发的食物中毒事件明显增多,在未来可能引发更多的疫情,尤其是引发溶血性尿毒综合症的病例数量可能会远超过产志贺毒素大肠杆菌O157。 展开更多
关键词 大肠杆菌O157 志贺毒素 食物中毒事件 解读 食品安全 控制中心 疾病预防 美国
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大肠杆菌O157显色培养基在饲料检测中的应用研究
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作者 唐煜 魏裕青 +5 位作者 车妍 李琳 冯海霞 张莹 常运朝 车团结 《饲料研究》 CAS 2016年第21期48-51,共4页
为探讨大肠杆菌O157显色培养基在饲料微生物检测中的应用价值,试验利用免疫磁珠法和大肠杆菌O157显色培养基对60份饲料样品进行大肠杆菌O157分离鉴定,对疑似阳性的菌落提取基因组DNA,利用PCR扩增蜡样芽胞杆菌ofb基因进行测序验证。结果... 为探讨大肠杆菌O157显色培养基在饲料微生物检测中的应用价值,试验利用免疫磁珠法和大肠杆菌O157显色培养基对60份饲料样品进行大肠杆菌O157分离鉴定,对疑似阳性的菌落提取基因组DNA,利用PCR扩增蜡样芽胞杆菌ofb基因进行测序验证。结果表明,饲料样本经过免疫磁珠法筛选后,亚碲酸钾山梨醇麦康凯(CT-SMAC)琼脂检出阳性的样本数为13例(21.67%);大肠杆菌O157显色培养基阳性样本为8例(13.33%);通过ofb基因测序验证CT-SMAC琼脂和显色培养基方法检测假阳性率分别为84.60%和75.00%。大肠杆菌O157显色培养基用于饲料中大肠杆菌O157的检测,能够有效抑制其他杂菌的生长,降低普通培养基检测的假阳性率,适合于饲料中大肠杆菌O157的检测。 展开更多
关键词 大肠杆菌O157 显色培养基 饲料
乳中大肠杆菌O157:H7的荧光定量PCR检测方法的建立 预览 被引量:5
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作者 张微 姚笛 +3 位作者 侯婷婷 郭瑜 佐兆杭 刘鑫 《中国乳品工业》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期52-54,共3页
利用荧光定量PCR技术,建立快速、有效的检测乳中大肠杆菌O157:H7的方法。根据大肠杆菌O157:H7的rfbE基因序列设计一对特异性引物,以大肠杆菌O157:H7的DNA为模板进行PCR扩增,将目的基因进行克隆和测序,利用提取的重组质粒进行荧... 利用荧光定量PCR技术,建立快速、有效的检测乳中大肠杆菌O157:H7的方法。根据大肠杆菌O157:H7的rfbE基因序列设计一对特异性引物,以大肠杆菌O157:H7的DNA为模板进行PCR扩增,将目的基因进行克隆和测序,利用提取的重组质粒进行荧光定量PCR标准曲线的制备,建立荧光定量PCR的检测方法,并进行了灵敏性和特异性检测。结果显示:建立的荧光定量PCR方法特异性强,且灵敏度可达10~ng/uL,利用建立的方法可检测到乳中67.0mL。的大肠杆菌O157:H7。该方法能够使乳中大肠杆菌的检测更为快速,并且更加准确和灵敏。 展开更多
关键词 大肠杆菌O157 H7 荧光定量PCR rfbE基因
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CdSe/CdZnS核壳结构量子点的制备及对大肠杆菌O157的生物标记 预览 被引量:1
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作者 周娟 周海峰 +2 位作者 周广军 杜亮 贾恩礼 《解放军预防医学杂志》 CAS 2015年第5期487-489,共3页
目的制备CdSe/CdZnS核壳结构量子点并将其作为荧光探针对大肠杆菌O157进行生物标记,为建立病原微生物的量子点标记快速检测新技术提供科学依据。方法利用高温有机合成方法制备CdSe/CdZnS核壳结构量子点,采用透射电镜、荧光光谱、吸收光... 目的制备CdSe/CdZnS核壳结构量子点并将其作为荧光探针对大肠杆菌O157进行生物标记,为建立病原微生物的量子点标记快速检测新技术提供科学依据。方法利用高温有机合成方法制备CdSe/CdZnS核壳结构量子点,采用透射电镜、荧光光谱、吸收光谱进行表征。以巯基乙酸为稳定剂将量子点转移到水相并对大肠杆菌O157进行标记,利用荧光显微镜进行表征。结果制备的CdSe/CdZnS核壳结构量子点尺寸均匀,分散性良好,粒径为5~6 nm,发光峰半峰宽为23 nm。标记量子点上的细菌在365 nm激发下发出明显红光,且形态清晰,边界分明。当菌体浓度低于3.6×106cfu/ml时对量子点荧光强度具有增效作用,随着细菌浓度增大量子点荧光强度增强。结论制备的CdSe/CdZnS核壳结构量子点可用于大肠杆菌O157的快速检测。 展开更多
关键词 CdSe/CdZnS 核壳结构量子点 生物标记 大肠杆菌O157
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胶体金免疫层析法快速检测农产品中的大肠O157∶H7 预览 被引量:1
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作者 马丽萍 袁晓红 +5 位作者 付晓陆 胡津津 陆军良 申屠琰 朱波莹 陈璐瑶 《浙江农业科学》 2015年第7期1076-1077,1094共3页
研究用大肠杆菌O157胶体金快速检测试纸条进行样品检测,并进行敏感性、交叉反应、稳定性和与国标比对等试验.结果表明,该测试条灵敏度可达106 mL-1,不与其他6种已知菌反应,分别在4℃冰箱中放置6和12个月,检测结果无差异.对249份农产品... 研究用大肠杆菌O157胶体金快速检测试纸条进行样品检测,并进行敏感性、交叉反应、稳定性和与国标比对等试验.结果表明,该测试条灵敏度可达106 mL-1,不与其他6种已知菌反应,分别在4℃冰箱中放置6和12个月,检测结果无差异.对249份农产品样本进行了国标比对,并做阳性对照,总符合率为97.9%.证明该方法灵敏度高,特异性强,检测周期短,有良好的开发应用前景. 展开更多
关键词 大肠杆菌O157 胶体金法 免疫层析
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上转发光技术及其在食品中病原微生物检测的应用 预览 被引量:3
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作者 林长青 《食品安全导刊》 2015年第10期38-41,共4页
近年来,由食源性致病菌引发的食物中毒不断发生,1996年日本发生了世界上规模最大的历时3个月、波及40多个都府县、涉及上万人的大肠杆菌O157食物中毒事件;2001年因发生”疯牛病”导致德国卫生部部长和农业部部长辞职;2005年遍及整... 近年来,由食源性致病菌引发的食物中毒不断发生,1996年日本发生了世界上规模最大的历时3个月、波及40多个都府县、涉及上万人的大肠杆菌O157食物中毒事件;2001年因发生”疯牛病”导致德国卫生部部长和农业部部长辞职;2005年遍及整个东南亚的禽流感更为各国的食品安全部门敲响警钟;2011美国23个州爆发了活禽引发的沙门氏菌疫情。 展开更多
关键词 微生物检测 发光技术 食品 大肠杆菌O157 食物中毒事件 应用 病原 食源性致病菌
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