期刊文献+
共找到81篇文章
< 1 2 5 >
每页显示 20 50 100
乙脑/寨卡嵌合病毒感染性克隆构建及病毒拯救
1
作者 黄荣 冯亚岚 +3 位作者 冷生玲 袁磊 唐丽萍 杨健 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2019年第1期17-22,共6页
目的构建乙脑/寨卡嵌合病毒感染性克隆并拯救嵌合病毒。方法通过分子克隆技术将寨卡病毒prM/E基因克隆到乙脑病毒疫苗株SA-14-14-2感染性克隆的KasI和BglⅡ位点,构建乙脑/寨卡嵌合病毒感染性克隆,体外转录嵌合病毒RNA,再将RNA电转染BHK2... 目的构建乙脑/寨卡嵌合病毒感染性克隆并拯救嵌合病毒。方法通过分子克隆技术将寨卡病毒prM/E基因克隆到乙脑病毒疫苗株SA-14-14-2感染性克隆的KasI和BglⅡ位点,构建乙脑/寨卡嵌合病毒感染性克隆,体外转录嵌合病毒RNA,再将RNA电转染BHK21细胞拯救病毒,并用免疫荧光技术、测序和噬斑试验进行鉴定,通过动物试验初步鉴定嵌合病毒的神经毒力。结果感染性克隆质粒可被相应限制性内切酶切下与理论值相吻合的核酸片段(1.1、0.7、0.4bp);拯救的病毒可在BHK21细胞形成噬斑,能被寨卡病毒抗血清识别;测序表明嵌合病毒含有寨卡病毒的prM/E基因。用嵌合病毒攻击小鼠,显示具有神经毒力,接种后14d小鼠全部死亡。结论成功拯救乙脑/寨卡嵌合病毒。该嵌合病毒对小鼠有较强的神经毒力,为寨卡病毒疫苗研发提供一种新的思路。 展开更多
关键词 寨卡病毒 疫苗 嵌合病毒
以乙脑减毒活疫苗SA14-14-2为骨架的重组嵌合登革4病毒的构建与鉴定 预览
2
作者 解东洋 祝琴 +5 位作者 刘忠钰 赵慧 邓永强 叶青 李晓峰 秦成峰 《寄生虫与医学昆虫学报》 2018年第2期80-86,共7页
登革4型病毒近年来在我国东南沿海地区时有流行,威胁人民健康与公共卫生安全.本研究以乙脑减毒活疫苗SA14-14-2为骨架,通过反向遗传学技术构建了携带登革4型病毒主要结构蛋白prM/E基因重组嵌合病毒(ChinDENV4);进一步通过蚀斑、 生长... 登革4型病毒近年来在我国东南沿海地区时有流行,威胁人民健康与公共卫生安全.本研究以乙脑减毒活疫苗SA14-14-2为骨架,通过反向遗传学技术构建了携带登革4型病毒主要结构蛋白prM/E基因重组嵌合病毒(ChinDENV4);进一步通过蚀斑、 生长曲线、 动物实验等对其生物学特征进行了鉴定.结果显示,重组嵌合病毒ChinDENV4可高效表达登革4型病毒的结构蛋白,蚀斑大小与亲本株类似;ChinDENV4并能够在BHK-21、C6/36等细胞中高效复制,滴度分别达到1.26×105和1.58×106 PFU/mL.更重要的是,嵌合病毒ChinDENV4在乳鼠模型中的神经毒力显著弱于亲本株.本研究成功构建了乙脑/登革4型嵌合病毒,为下一步四价嵌合登革减毒活疫苗研究奠定了重要基础. 展开更多
关键词 乙脑病毒 登革4型病毒 反向遗传学 减毒活疫苗 嵌合病毒
在线阅读 下载PDF
中博生物猪繁殖与呼吸综合征嵌合病毒活疫苗(PC株)媒体发布会在武汉隆重举行 预览
3
《兽医导刊》 2018年第19期46-47,共2页
2018年9月15日上午,“中博生物猪繁殖与呼吸综合征嵌合病毒活疫苗(PC株)媒体发布会”在湖北武汉隆重举行。武汉中博生物股份有限公司(以下简称“中博生物”)高管团队会同中博优秀合作伙伴代表以及众多知名行业媒体,共同见证了这一... 2018年9月15日上午,“中博生物猪繁殖与呼吸综合征嵌合病毒活疫苗(PC株)媒体发布会”在湖北武汉隆重举行。武汉中博生物股份有限公司(以下简称“中博生物”)高管团队会同中博优秀合作伙伴代表以及众多知名行业媒体,共同见证了这一荣耀时刻。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征 嵌合病毒 活疫苗 生物 媒体 武汉 C株 合作伙伴
在线阅读 下载PDF
现代猪育种新技术
4
作者 姜淑静 任欣欣 李宝华 《猪业观察》 2018年第5期42-44,共3页
前言:当前养猪技术的繁荣,与现代遗传学的理论水平发展息息相关,伴随着遗传学的繁荣,我们对于猪的选种经历了最初的表型选择到后期的育种能力选择再到当前的基因型选择,结合当前先进的计算机信息技术,养猪技术越来越先进,而这个也从侧... 前言:当前养猪技术的繁荣,与现代遗传学的理论水平发展息息相关,伴随着遗传学的繁荣,我们对于猪的选种经历了最初的表型选择到后期的育种能力选择再到当前的基因型选择,结合当前先进的计算机信息技术,养猪技术越来越先进,而这个也从侧面促进了育种准确性以及效率的飞速提高。在种种迹象当中,都已经表明了当前的育种技术已经不再是对于某一项单一技术的简单运用,而是结合了遗传学、信息技术以及育种实践的多项技术的共同体。 展开更多
关键词 蓝耳病疫苗 变异株 活疫苗 猪育种 嵌合病毒
猪蓝耳病防控有了高技术“武器”
5
作者 章勇 《猪业观察》 2018年第5期44-46,共3页
2006年夏,一场'猪高热综合征'肆虐我国养猪业,先后波及近30个省份。因为发病原因不明,没有有效预防和治疗手段,生猪发病死亡率比较高,给发病地区养猪业造成较大的损失。2007年1月,我国确定变异猪蓝耳病(猪繁殖与呼吸综合征)病... 2006年夏,一场'猪高热综合征'肆虐我国养猪业,先后波及近30个省份。因为发病原因不明,没有有效预防和治疗手段,生猪发病死亡率比较高,给发病地区养猪业造成较大的损失。2007年1月,我国确定变异猪蓝耳病(猪繁殖与呼吸综合征)病毒是猪'高热病'主要病原,并定名为高致病性猪蓝耳病,这是世界首次发现变异的猪蓝耳病病毒。 展开更多
关键词 猪蓝耳病 变异株 嵌合病毒 活疫苗 蓝耳病疫苗
鹅细小病毒VP1蛋白氨基酸点突变在鹅胚化疫苗株毒力减弱中的关键作用 被引量:1
6
作者 王建业 黄钰 +2 位作者 段进坤 朱礼倩 朱国强 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期2005-2008,2013共5页
为了进一步明确各编码蛋白基因在鹅细小病毒(gooseparvovirus)鹅胚化疫苗株毒力减弱中的作用,以先前构建的弱毒疫苗株感染性质粒pSYG61v和强毒株感染性质粒pLH为基础,通过重叠PCR方法,在pSYG61v和pLH质粒之间互换Rep1和VP1基因片... 为了进一步明确各编码蛋白基因在鹅细小病毒(gooseparvovirus)鹅胚化疫苗株毒力减弱中的作用,以先前构建的弱毒疫苗株感染性质粒pSYG61v和强毒株感染性质粒pLH为基础,通过重叠PCR方法,在pSYG61v和pLH质粒之间互换Rep1和VP1基因片段,获得了6个嵌舍质粒pSYG-vRepl、pSYG-vVPl、pSYG-vRC、pLH-aRepl、pLH-aVP1和pLH-aRC。将质粒以绒毛尿囊膜途径转染11日龄鹅胚分别拯救出嵌合病毒。嵌合病毒的雏鹅攻毒试验表明,携带强毒株VP1基因的psYGvRC、pSYG-vVP1和pLH—aRepl这3个嵌合病毒对雏鹅表现出明显致病性,死亡率在75.0%-82.5%。完全携带弱毒株rep-cap编码框的pLH-aRC嵌合病毒攻毒组雏鹅无一死亡。携带强毒株Repl基因的pLH—aVP1和psYpvRep1嵌合病毒攻毒组雏鹅也无一死亡,但在试验期内部分雏鹅明显生长迟缓。嵌合病毒攻毒试验结果表明,结构蛋白VP1基因的氨基酸点突变对GPV鹅胚化疫苗株的毒力减弱起着关键作用。 展开更多
关键词 鹅细小病毒 疫苗株 点突变 嵌合病毒 毒力
3′-U3区碱基突变不影响禽白血病病毒的体外复制能力 预览 被引量:1
7
作者 高雁怩 高奇 +9 位作者 李晓菲 贠炳岭 祁小乐 王永强 刘长军 崔红玉 张艳萍 高宏雷 王笑梅 高玉龙 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期608-614,共7页
为探索近年蛋鸡分离株中出现规律性突变的J群禽白血病病毒(ALV-J)3′-U3区对病毒体外复制能力的影响,以ALV-J原型毒株HPRS-103为骨架,利用融合PCR技术构建含蛋鸡分离株SD09DP04的3′-U3区的嵌合病毒的cDNA克隆。嵌合病毒的感染性克隆... 为探索近年蛋鸡分离株中出现规律性突变的J群禽白血病病毒(ALV-J)3′-U3区对病毒体外复制能力的影响,以ALV-J原型毒株HPRS-103为骨架,利用融合PCR技术构建含蛋鸡分离株SD09DP04的3′-U3区的嵌合病毒的cDNA克隆。嵌合病毒的感染性克隆与原型毒株HPRS-103的感染性克隆分别在脂质体介导下转染DF-1细胞,对收获的病毒分别用间接免疫荧光试验、禽白血病抗原和反转录酶试剂盒检测,结果表明成功拯救到2株病毒。对拯救的2株病毒,进行其3′-U3区启动子活性和增强子活性的检测,以及复制动力学比较分析结果显示,出现特异性规律性突变的U3区对于原毒株的体外复制能力无显著影响。所构建的3′-U3区的嵌合病毒的成功拯救对于进一步探索近年ALV-J流行毒株其3′-U3区出现的规律性突变的功能及意义奠定了基础。 展开更多
关键词 U3区 嵌合病毒 J亚群禽白血病病毒 生物学特性
在线阅读 免费下载
经典和高致病性PRRSV疫苗株嵌合病毒的构建及其免疫原性分析 预览 被引量:2
8
作者 张武超 冷超粮 +8 位作者 张洪亮 陈家锃 白云 张秋月 彭金美 刘永刚 童光志 田志军 蔡雪辉 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期241-245,共5页
为研究经典和高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)疫苗株间的生物学差异,本实验以经典PRRSV疫苗株CH-1R的全长感染性克隆p CH-1R为骨架,利用反向遗传操作技术分别将其ORF1a、ORF1b和ORF2-7替换为HP-PRRSV Hu N4-F112的相应片段... 为研究经典和高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)疫苗株间的生物学差异,本实验以经典PRRSV疫苗株CH-1R的全长感染性克隆p CH-1R为骨架,利用反向遗传操作技术分别将其ORF1a、ORF1b和ORF2-7替换为HP-PRRSV Hu N4-F112的相应片段,构建3个全长c DNA嵌合质粒。将构建的3个重组c DNA质粒经体外转录后转染BHK-21细胞,并于Marc-145细胞中传代,拯救出3种嵌合病毒,分别命名为r CH-1R-T1a、r CH-1R-T1b和r CH-1R-T27。病毒一步生长曲线结果表明,3种嵌合病毒在Marc-145细胞中的生长特性与亲本病毒CH-1R基本一致;动物实验结果显示,嵌合病毒实验组血清中PRRSV N蛋白抗体阳转率分别为3/3(r CH-1RT1a)、2/3(r CH-1R-T1b)和1/3(r CH-1R-T27),而CH-1R免疫组血清N蛋白抗体检测始终为阴性。以上结果表明,HP-PRRSV Hu N4-F112非结构蛋白在N蛋白抗体产生中起关键辅助或协同作用。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征 嵌合病毒 ORF1a ORF1b ORF2-7
在线阅读 下载PDF
口蹄疫病毒O/CHN/Mya98/33-P株前导蛋白对病毒感染性的影响 被引量:1
9
作者 张萌 白兴文 +7 位作者 李平花 范朋举 包慧芳 孙普 卢曾军 曹轶梅 陈应理 刘在新 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期2052-2060,共9页
【目的】研究口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus,FMDV)前导蛋白对于病毒感染性的影响。【方法】利用反向遗传操作技术,以O/CHN/93现用疫苗株的感染性克隆为骨架,分别构建了含口蹄疫病毒中国分离株O/CHN/Mya98/33-P和O/CHN/Mya9... 【目的】研究口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus,FMDV)前导蛋白对于病毒感染性的影响。【方法】利用反向遗传操作技术,以O/CHN/93现用疫苗株的感染性克隆为骨架,分别构建了含口蹄疫病毒中国分离株O/CHN/Mya98/33-P和O/CHN/Mya98/HN1前导蛋白的两株嵌合全长cDNA感染性克隆,采用实时荧光定量PCR检测两株不同的嵌合病毒感染猪肾原代细胞后细胞内IFNβ和OAS mRNA的转录情况。【结果】嵌合病毒rOHN1Lab增殖能力较弱,其对应诱导产生的IFNβ和OAS mRNA含量较高,而嵌合毒rO33Lab相对于rOHN1Lab增殖能力较强,他们诱导产生的IFNβ和OAS mRNA含量较低。【结论】研究表明口蹄疫病毒中国分离株O/CHN/Mya98/33-P前导蛋白具有更强的抗IFNβmRNA转录的能力,该研究能够为进一步鉴定FMDV前导蛋白抗宿主先天性免疫的关键性位点奠定基础。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 嵌合病毒 前导蛋白 IFNβ 转录 影响
基于HIV-1 pNL4-3构建含CRF07_BC V3的嵌合分子克隆 被引量:1
10
作者 张磊 王彦 +2 位作者 马丽英 王海宁 邵一鸣 《中国热带医学》 CAS 2014年第1期1-4,共4页
目的在感染性克隆pNL4-3骨架上构建含CRF07_BC V3的嵌合分子克隆。方法通过融合PCR将CRF07_BC pXJDC13的V3环与pNL4-3的env骨架进行融合并克隆至pNL4-3上。经过鉴定后将阳性V3嵌合克隆pNL4-3/XJDC13V3转染到293T细胞进行病毒包装并检测... 目的在感染性克隆pNL4-3骨架上构建含CRF07_BC V3的嵌合分子克隆。方法通过融合PCR将CRF07_BC pXJDC13的V3环与pNL4-3的env骨架进行融合并克隆至pNL4-3上。经过鉴定后将阳性V3嵌合克隆pNL4-3/XJDC13V3转染到293T细胞进行病毒包装并检测病毒的感染性。V3嵌合病毒的细胞嗜性分别用Ghost细胞系和MT-2细胞进行测定。结果利用融合PCR克隆方法在pNL4-3骨架上成功构建了含CRF07_BC pXJDC13 V3的嵌合分子克隆pNL4-3/XJDC13V3。该嵌合病毒利用的辅助受体为CCR5,不能利用CXCR4,也不能在MT-2细胞上诱发合胞体。结论在pNL4-3骨架上成功构建了含CRF07_BC pXJDC13 V3嵌合分子克隆pNL4-3/XJDC13V3。该嵌合分子克隆为进一步研究CRF07_BC嗜性转变中V3关键位点提供了有利工具。 展开更多
关键词 人类免疫缺陷病毒 CRF07_BC V3 嵌合病毒
PRRSV强弱病毒株嵌合感染性克隆的构建及鉴定 预览 被引量:4
11
作者 吕健 韦祖樟 +3 位作者 高飞 郑海红 童光志 袁世山 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期263-266,共4页
为构建高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)与致弱PRRSV的重组病毒,本研究在PRRSV致弱株APRRS的全长感染性克隆pAPRRS与HP-PRRSV感染性克隆pJXl43的基础上,利用SOE-PCR技术将强弱毒的nsp2区域进行互换,构建了nsp2基因替换的... 为构建高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)与致弱PRRSV的重组病毒,本研究在PRRSV致弱株APRRS的全长感染性克隆pAPRRS与HP-PRRSV感染性克隆pJXl43的基础上,利用SOE-PCR技术将强弱毒的nsp2区域进行互换,构建了nsp2基因替换的强弱毒PRRSV嵌合感染性克隆。将构建的嵌合克隆转染MAl04细胞,4d后观察到典型的细胞病变。通过RT-PCR和间接免疫荧光证明获得了强弱病毒株之间nsv2基因互换的嵌合病毒。这些嵌合病毒的构建和相应反向遗传操作平台的建立,为进一步研究HP.PRRSV的致病机制及相关疫苗的研发奠定了基础。 展开更多
关键词 PRRSV 感染性克隆 嵌合病毒 病毒 猪繁殖与呼吸综合征病毒 PCR技术 鉴定 间接免疫荧光
在线阅读 下载PDF
高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒强弱毒ORF1a、ORF1b、ORF2-ORF7片段互换嵌合病毒的构建及其生物学特性的分析 预览 被引量:3
12
作者 姜一峰 周艳君 +5 位作者 王亚欣 朱建平 徐彦召 童武 虞凌雪 童光志 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期 1-5,共5页
为研究高致病性猪繁殖和呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)强弱毒之间毒力差异的分子基础,本实验分别以HP-PRRSV强毒HuN-F5株及其传代致弱的疫苗病毒株HuN4-F112为亲本病毒,利用反向遗传操作技术分别将ORF1a、ORF1b或ORF2-7编码序列在强弱毒... 为研究高致病性猪繁殖和呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)强弱毒之间毒力差异的分子基础,本实验分别以HP-PRRSV强毒HuN-F5株及其传代致弱的疫苗病毒株HuN4-F112为亲本病毒,利用反向遗传操作技术分别将ORF1a、ORF1b或ORF2-7编码序列在强弱毒之间互换。将6种含有不同嵌合基因的全长病毒基因组的重组质粒体外转录后转染BHK-21细胞,然后在Marc-145细胞中传代,拯救的重组病毒经RT-PCR、测序和免疫荧光鉴定,并分别命名为rHuN4-F5-ORF1a、rHuN4-F5-ORF1b、rHuN4-F5-ORF2-7(以强毒为骨架)和rHuN4-F112-ORF1a、rHuN4-F112-ORF1b、rHuN4-F112-ORF2-7(以弱毒为骨架)。进一步测定这些病毒在Marc-145上的生长曲线,结果显示:以强毒为骨架的嵌合病毒rHuN4-F5-ORF1a生长滴度显著高于亲本强毒rHuN4-F5,而以弱毒为骨架的嵌合病毒rHuN4-F112-ORF1a在细胞上的生长滴度低于其亲本弱毒rHuN4-F112,其他片段替换对病毒在细胞上的生长没有明显影响。本实验结果提示ORF1a对于PRRSV在体外细胞培养上的生长调节起重要作用。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 嵌合病毒 ORF1a ORF1b ORF2-7
在线阅读 下载PDF
非典型性猪瘟病毒云南株/石门株嵌合病毒的构建和拯救 预览
13
作者 孙永科 孔令富 +4 位作者 张晓敏 郑欢莉 林明星 陈海婷 杨玉艾 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期 167-171,共5页
为研究猪瘟病毒(CSFV)云南株(YN株)突变位点在致非典型性猪瘟中的作用,本研究在CSFV石门株全长感染性克隆的基础上,利用分子克隆技术,将CSFVYN株的1510位-1532位、2471位-2658位、3152位-3176位和11785位-1l816位突变位点基因序... 为研究猪瘟病毒(CSFV)云南株(YN株)突变位点在致非典型性猪瘟中的作用,本研究在CSFV石门株全长感染性克隆的基础上,利用分子克隆技术,将CSFVYN株的1510位-1532位、2471位-2658位、3152位-3176位和11785位-1l816位突变位点基因序列替换CSFV石门株的相应基因序列,构建出嵌合的CSFV感染性克隆质粒pAC-SM-YN。全基因测序鉴定后,体外转录得到病毒RNA,经脂质体转染PK-15细胞方法拯救出了嵌合病毒vSM.YN。经直接荧光染色、对突变位点RT-PCR以及ELISA检测表明拯救嵌合病毒vSM.YN传代稳定。本研究为研究CSFV结构蛋白、病毒致病机理、新型疫苗,尤其是非典型猪瘟的致病机理奠定了基础。 展开更多
关键词 猪瘟 感染性克隆 嵌合病毒 构建
在线阅读 下载PDF
猪繁殖与呼吸综合征病毒强弱毒株嵌合感染性克隆的构建及鉴定 预览
14
作者 吕健 韦祖樟 +3 位作者 高飞 郑海红 童光志 袁世山 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期1598-1602,共5页
查明猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)致病性大幅增高的机制,进而研制用于防治流行PRRSV变异株的高效疫苗无疑是兽医工作者的当务之急。在弱毒株APRRS的全长感染性克隆pAPRRS以及我室构建的高致病性HP PRRSV感染性克隆pJX143的基础上,... 查明猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)致病性大幅增高的机制,进而研制用于防治流行PRRSV变异株的高效疫苗无疑是兽医工作者的当务之急。在弱毒株APRRS的全长感染性克隆pAPRRS以及我室构建的高致病性HP PRRSV感染性克隆pJX143的基础上,构建了nsp2替换的强弱毒PRRSV嵌合感染性克隆。将构建的嵌合克隆转染MA104,4d后观察到典型的CPE。通过RT-PCR和免疫荧光证明获得了一系列强弱毒株之间的嵌合病毒。这些嵌合病毒的构建成功和相应反向遗传操作平台的建立及应用,为研发预防HP PRRSV的高效嵌合疫苗奠定了基础。该类嵌合感染性cDNA克隆也为解析目前流行的HP PRRSV毒力因子和高致病力机制奠定了基础。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸障碍综合征 NSP2 感染性克隆 嵌合病毒
在线阅读 免费下载
异源5′非翻译区在猪繁殖与呼吸综合征病毒感染性拯救过程中的功能解析 预览
15
作者 高飞 陆嘉琦 +3 位作者 姚火春 杨倩 袁世山 童光志 《中国动物传染病学报》 CAS 2011年第6期 7-14,共8页
猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reporoductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)基因组5′非翻译区(untranslated region,UTR)对病毒复制转录等过程至关重要,但其发挥作用的机制尚不清楚。本实验室将欧洲型PRRSV 5′UTR替... 猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reporoductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)基因组5′非翻译区(untranslated region,UTR)对病毒复制转录等过程至关重要,但其发挥作用的机制尚不清楚。本实验室将欧洲型PRRSV 5′UTR替换入北美型PRRSV弱毒株感染性克隆pAPRRS的骨架中,构建pAPLV5。经过DNA转染入MARC-145细胞系中,两次传代后,拯救出嵌合病毒vAPLV5。通过对嵌合病毒的全长测序发现,嵌合病毒基因组较亲本病毒发生了碱基突变,突变主要集中于Nsp2和Nsp9位置。将Nsp9位置(病毒的RNA依赖的RNA聚合酶,RNA-dependent KNA povymerase,RdRp)的4处突变位点引入嵌合病毒的感染性克隆pAPLV5,所构建的4个突变嵌合克隆转染MARC-145细胞后无需传代即产生细胞病变(cytopathic effect,CPE),且P0代病毒滴度较原嵌合病毒vAPLV5高。通过半定量负链和亚基因组检测发现,突变嵌合病毒的RNA合成水平也较亲本嵌合病毒高。由此推测PRRSV 5′UTR功能可能与RdRp相关,异源的5′UTR通过突变RdRp来发挥其调控作用,完成病毒拯救过程。 展开更多
关键词 非翻译区 RNA依赖的RNA聚合酶 嵌合病毒 转染
在线阅读 免费下载
嵌合中国分离株基因的丙型肝炎病毒(1b/2a)细胞培养模型的建立 预览 被引量:2
16
作者 卢莎 邓瑶 +5 位作者 沈晓玲 管洁 周为民 王岳 阮力 谭文杰 《生物技术通讯》 CAS 2009年第4期 502-505,共4页
目的:建立嵌合中国分离株基因的丙型肝炎病毒(HCV)细胞培养模型。方法:利用3片段融合PCR的方法将中国HCV河北分离株(1b)的全长包膜蛋白基因引入JFH1(2a)株基因骨架,构建包膜蛋白基因区相互置换的嵌合HCV(1b/2a)全长基因组... 目的:建立嵌合中国分离株基因的丙型肝炎病毒(HCV)细胞培养模型。方法:利用3片段融合PCR的方法将中国HCV河北分离株(1b)的全长包膜蛋白基因引入JFH1(2a)株基因骨架,构建包膜蛋白基因区相互置换的嵌合HCV(1b/2a)全长基因组,经线性化后体外转录获得全长RNA,转染Huh7.5.1细胞系,用免疫荧光及蛋白印迹实验检测。结果:该RNA可以产生具有体外感染活性的嵌合HCV,且感染性可在共同培养的细胞间传播。结论:首次在国内建立了嵌合中国HCV分离株基因的HCV细胞培养体系。 展开更多
关键词 丙型肝炎病毒 嵌合病毒 细胞培养
在线阅读 免费下载
乙脑/登革2型嵌合病毒的构建
17
作者 韦艳 陆鹏 +8 位作者 于建石 李建东 刘琴芝 张全福 李川 苗芳 张硕 杭小同 李德新 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期185-189,共5页
在乙脑病毒SA14-14-2株复制子载体pPartial△prM/E中克隆入DV2(Dengue virus serotype 2)的prM/E基因,构建乙脑/登革2型嵌合体克隆。将嵌合体克隆线性化后体外转录,获得的RNA转染BHK-21细胞,5~7d可观察到CPE。收获病毒上清液... 在乙脑病毒SA14-14-2株复制子载体pPartial△prM/E中克隆入DV2(Dengue virus serotype 2)的prM/E基因,构建乙脑/登革2型嵌合体克隆。将嵌合体克隆线性化后体外转录,获得的RNA转染BHK-21细胞,5~7d可观察到CPE。收获病毒上清液分别感染BHK-21细胞及C6/36细胞。接种于C6/36细胞中的嵌合病毒可使细胞出现CPE,RT—PCR、间接免疫荧光和Western blot检测显示:获得的嵌合病毒具有预期嵌合性核酸并能表达DV2的包膜蛋白,但不能在BHK-21细胞中传代培养。成功构建的乙脑/登革2型感染性克隆为进一步研究登革病毒疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 乙脑 登革 嵌合病毒 感染性克隆
反向遗传操作在新城疫病毒中的应用 预览 被引量:4
18
作者 王学理 王兴龙 +1 位作者 李晓艳 任林柱 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期 618-622,共5页
新城疫(Newcastle disease。ND)是由新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)引起多种禽类发生高度死亡的一种急性传染病。NDV属于副粘病毒科禽腮腺炎病毒属,是负链RNA,全长为15186bp或15 192bp。
关键词 反向遗传操作 新城疫病毒 标记疫苗 嵌合病毒
在线阅读 下载PDF
表达绿色荧光蛋白嵌合狂犬病病毒HEP-GFP株的拯救 预览 被引量:8
19
作者 刘晓慧 艾军 +2 位作者 郭霄峰 孙京臣 梁红茹 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期 401-403,共3页
狂犬病毒(Rabies Virus,RV)是人和犬、猫等多种动物狂犬病的病原,其基因组是单股负链RNA,基因组结构为3’-核蛋白(N)基因-磷蛋白(P)基因-质蛋白(M)基因-糖蛋白(G)基因-大蛋白(L)基因-5’。在病毒的组装过程中,N蛋白与... 狂犬病毒(Rabies Virus,RV)是人和犬、猫等多种动物狂犬病的病原,其基因组是单股负链RNA,基因组结构为3’-核蛋白(N)基因-磷蛋白(P)基因-质蛋白(M)基因-糖蛋白(G)基因-大蛋白(L)基因-5’。在病毒的组装过程中,N蛋白与基因组RNA结合,形成核糖核蛋白体(RNP),在P蛋白与L蛋白组合形成的RNA聚合酶的参与下,启动病毒的生物合成。 展开更多
关键词 狂犬病毒 嵌合病毒 绿色荧光蛋白
在线阅读 下载PDF
猪繁殖与呼吸综合征病毒嵌合感染性克隆的构建和应用 预览 被引量:3
20
作者 李祥健 张建武 +3 位作者 吕健 余丹丹 姚火春 袁世山 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期 1573-1581,共9页
高致病性猪蓝耳病近年来在我国广泛流行,目前尚无高效疫苗用于该病的防制。本研究以PRRSV弱毒感染性克隆-pAPRRS作为主要骨架,将高致病性猪蓝耳病病毒江西分离株(JX143)的主要结构蛋白基因(ORF4—7)以及3’UTR区域替挟入pAPPRS相... 高致病性猪蓝耳病近年来在我国广泛流行,目前尚无高效疫苗用于该病的防制。本研究以PRRSV弱毒感染性克隆-pAPRRS作为主要骨架,将高致病性猪蓝耳病病毒江西分离株(JX143)的主要结构蛋白基因(ORF4—7)以及3’UTR区域替挟入pAPPRS相应编码区域,构建了pSX12(ORF4—7—3’UTR)、p5NX12(ORF5—7—3’UTR)以及p56N12(ORF5—6)三个PRRSV全长嵌合克隆。经DNA转染Marc-145细胞后拯救出嵌合病毒,并对拯救病毒进行了病毒生物学特性的分析;选取拯救病毒v56N12(ORF5—6)和vSX12(ORF4—7—3’UTR)免疫29日龄猪进行免疫原性试验,结果表明,以v56N12免疫后抗体水平相对较低,故免疫原性相对较差;而vSX12病毒免疫后14d血清ELISA抗体达到阳性值(IDEXX ELISA值s/p≥0.4),免疫后28d中和抗体效价从原来的1:5以下上升到1:15以上,说明vSX12具有良好的免疫原性并可进行免疫监测;免疫后28d以强毒JX143株攻毒,结果vSX12免疫组未见发病,而未免疫攻毒对照组全部发病并有1头死亡,vSX12免疫猪攻毒后病毒血症持续6d后消失,而对照组攻毒后至少持续13d,说明vSX12可对高致病性猪蓝耳病提供有效的免疫保护。本研究构建的三个嵌合病毒为开发同时抗经典和变异株PRRSV感染的二价疫苗,以及探寻高致病性猪蓝耳病病毒的毒力因子奠定了基础。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸障碍综合征 高致病性猪蓝耳病 感染性克隆 嵌合病毒 候选疫苗
在线阅读 下载PDF
上一页 1 2 5 下一页 到第
使用帮助 返回顶部 意见反馈
新型冠状病毒肺炎防控与诊疗专栏