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芪参益气滴丸联合间充质干细胞移植改善小鼠心功能与巨噬细胞表型的相关性研究
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作者 何贵新 秦伟彬 +5 位作者 林琳 刘鹏业 陈雅璐 任加以 陈天宇 吴凯 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2019年第7期1554-1557,I0007,I0008共6页
目的:基于心肌梗死后巨噬细胞在损伤心肌修复过程中的主要效应及炎症影响干细胞的存活,探讨芪参益气滴丸是否可以影响巨噬细胞表型从而达到提高骨髓间充质干细胞的存活率、加强心肌细胞保护作用。方法:本研究采用eGFP+/-雄性实验小鼠,... 目的:基于心肌梗死后巨噬细胞在损伤心肌修复过程中的主要效应及炎症影响干细胞的存活,探讨芪参益气滴丸是否可以影响巨噬细胞表型从而达到提高骨髓间充质干细胞的存活率、加强心肌细胞保护作用。方法:本研究采用eGFP+/-雄性实验小鼠,将小鼠随机分为PBS组(MI+PBS)、干细胞移植芪参益气滴丸组(MI+MSCs+QSYQ)和干细胞组(MI+MSCs),每组20只实验小鼠。心肌梗死模型造模前2周干细胞移植芪参益气滴丸组开始予芪参益气滴丸溶液灌胃(3.9 mg/mL,无菌水溶解),而其他两组则予等量无菌水灌胃作为对照。将实验前期分离培养所获得小鼠骨髓间充质干细胞计数后PBS重悬备用,采取开胸结扎心脏前降支建立小鼠心肌梗死模型,建立心肌梗死模型后运用30G进样针抽取20μL干细胞悬液,在心肌小鼠模型梗死区取4个点均匀注射,每个点注射量约5μL。空白组则予抽取等量的PBS,操作方法一致,术后撤除呼吸机,缝合术口。造模前、干细胞移植后2周、3周行超声心动图检测,评估心功能及左室重构情况,观察3周后处死实验小鼠,留取心脏标本予HE染色计算心肌梗死面积,并最终于荧光显微镜下观察巨噬细胞表型特征。结果:干细胞移植3周后心脏超声评估结果显示MI+MSCs+QSYQ组的LVIDd、LVIDs明显小于另外两组,而心脏FS和EF值均明显升高(P<0.05),心肌HE染色结果提示与单纯注射PBS相比较,移植MSCs能够明显减少梗死面积,且明芪参益气滴丸联合MSCs能够进一步减少心肌梗死面积。免疫荧光双标方提示间质充质干细胞移植3周后3组实验小鼠心肌梗死区均无M1型巨噬细胞亚群滞留,而存在大量M2型巨噬细胞浸润,并且MI+MSCs+QSYQ组的M2型巨噬细胞数量最多。结论:心肌梗死后骨髓间充质干细胞移植具有促进小鼠巨噬细胞向M2型表型转化的作用,而芪参益气滴丸联合骨髓间充质干细胞移植能够进一步增加巨噬细 展开更多
关键词 间质充质干细胞 芪参益气滴丸 心肌梗死 巨噬细胞表型 小鼠
红景天苷促进小鼠脊髓损伤后巨噬细胞表型转变及神经功能修复 预览
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作者 卢桃利 霍芳芳 +1 位作者 翟中杰 张蓓 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2019年第12期2986-2991,共6页
目的探讨红景天苷对小鼠脊髓损伤后损伤局部炎性反应的影响及促进神经功能恢复的作用机制。方法构建C57BL/6小鼠T10节段脊髓损伤模型。随机分为对照组和红景天苷组。术后3d、7d和14d,采用免疫荧光双标法及实时荧光聚合酶链反应(RT-PCR)... 目的探讨红景天苷对小鼠脊髓损伤后损伤局部炎性反应的影响及促进神经功能恢复的作用机制。方法构建C57BL/6小鼠T10节段脊髓损伤模型。随机分为对照组和红景天苷组。术后3d、7d和14d,采用免疫荧光双标法及实时荧光聚合酶链反应(RT-PCR)观察巨噬细胞促炎(M1)和抑炎(m2)表型细胞表达并计数;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测损伤局部组织炎症因子的表达。采用神经功能评分(BNS)评估小鼠神经功能恢复情况。结果与对照组相比,红景天苷组M1表型细胞(iNOS/CD11b/CD86)表达降低(P<0.05),m2表型细胞(Arg1/CD11b/YM-1)表达增加(P<0.05);红景天苷组能下调促炎因子〔肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6、IL-1β〕表达(P<0.05),促进抑炎因子IL-10表达(P<0.05),还能促进脊髓损伤后神经功能恢复(P<0.01)。结论红景天苷能促进小鼠脊髓损伤后巨噬细胞由M1向m2表型转变,抑制炎症因子表达。红景天苷可能通过参与巨噬细胞极性发挥神经保护作用。 展开更多
关键词 脊髓损伤 巨噬细胞表型 红景天苷 炎症反应
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小檗碱促进巨噬细胞系RAW264.7由M1促炎表型向M2抗炎表型极化 预览
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作者 王青竹 石婧 +4 位作者 刘琴 杨黎星 郭磊 叶菜英 张德昌 《基础医学与临床》 CSCD 2019年第5期646-651,共6页
目的探讨小檗碱(BBR)对巨噬细胞系RAW264.7极化分型的影响。方法将 RAW264.7 细胞分为对照组、高脂和炎性反应模型组(以100 μg/L 脂多糖和100 μg/L 聚合型低密度脂蛋白刺激)和小檗碱低、中、高浓度(5、10、20 μmol/L)处理组。用ELIS... 目的探讨小檗碱(BBR)对巨噬细胞系RAW264.7极化分型的影响。方法将 RAW264.7 细胞分为对照组、高脂和炎性反应模型组(以100 μg/L 脂多糖和100 μg/L 聚合型低密度脂蛋白刺激)和小檗碱低、中、高浓度(5、10、20 μmol/L)处理组。用ELISA和流式细胞计量术检测RAW264.7两种极化分型(M1 型和 M2 型)相关标志物 TNF-α、MCP-1、CD86、IL-4、IL-13、TGF-β1和CD206的表达,以观察细胞极化。用Western blot和RT-qPCR检测载脂蛋白 E(apoE)、极低密度脂蛋白受体(VLDLR)或载脂蛋白E受体2(apoER2)的表达。结果 BBR引起M1型巨噬细胞相应标志物TNF-α、MCP-1和CD86表达减少( P <0.05);M2型巨噬细胞相应标志物IL-4、TGF-β1和CD206表达增加。同时也能够促进RAW264.7细胞内apoE的蛋白表达和VLDLR的mRNA表达( P <0.001)。结论 BBR可能促进apoE与VLDLR的结合,进而诱导RAW264.7从M1促炎表型向M2抗炎表型极化。 展开更多
关键词 小檗碱 巨噬细胞表型 炎性反应 载脂蛋白
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脂多糖通过Galectin-9/Tim-3信号通路调控小鼠巨噬细胞M1/M2表型极化 被引量:1
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作者 张望 章云涛 方强 《中华危重病急救医学》 CSCD 北大核心 2018年第9期836-841,共6页
目的探讨半乳糖凝集素- /T细胞免疫球蛋白黏蛋白-3(Galectin-/Tim-3)信号通路在脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞M/2表型极化中的意义及分子机制。方法体外培养小鼠腹腔巨噬细胞RAW264.7,待细胞生长至80%~90%时用于实验。①将细胞以无... 目的探讨半乳糖凝集素- /T细胞免疫球蛋白黏蛋白-3(Galectin-/Tim-3)信号通路在脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞M/2表型极化中的意义及分子机制。方法体外培养小鼠腹腔巨噬细胞RAW264.7,待细胞生长至80%~90%时用于实验。①将细胞以无血清DMEM培养基培养,并分别以0(空白对照)、0.01、0.1、1、10、100 m/的LPS刺激24 h。采用荧光定量反转录-聚合酶链反应(RT-qPCR)或蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)检测巨噬细胞M1型标志物白细胞介素- 6(IL-6)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和M2型标志物精氨酸酶-1(Arg-1)、白细胞分化抗原206(CD206)以及细胞内Tim-3、Galectin-9的表达。②另取小鼠腹腔巨噬细胞,并分为空白对照组(用无血清DMEM培养基培养24 h)、LPS处理组(用含0.1 m/的LPS无血清DMEM刺激24 h)和α-乳糖预处理组(在LPS刺激前1 h用含40 μmo/ Galectin-9信号拮抗剂α-乳糖的无血清DMEM进行预处理),通过封闭Galectin-9信号以验证Galectin-9在巨噬细胞M/2表型极化中的作用。结果①低浓度LPS(0.01 m/、0.1 m/)刺激24 h后,巨噬细胞M1型标志物的表达仅轻度上调(iNOS mRNA)或无明显变化(IL-6 mRNA);而M2型标志物Arg-1 mRNA和CD206 mRNA表达则明显升高,并分别于0.1 m/和0.01 m/的LPS浓度下达到峰值〔与空白对照组比较:Arg-1 mRNA(2-ΔΔCt)为1.85±0.07比1.00±0.02,CD206 mRNA(2-ΔΔCt)为2.03±0.11比1.00±0.05,均P〈0.01〕;随LPS浓度升高,IL-6 mRNA和iNOS mRNA表达持续升高,而Arg-1 mRNA和CD206 mRNA表达则逐渐降低,巨噬细胞M/2表型极化状态发生改变。同时,经LPS刺激后,巨噬细胞内Tim-3蛋白表达在0.01 m/的LPS刺激后即较空白对照组明显上调(Tim-/APDH:0.84±0.04比0.69±0.02,P〈0.01),并在0.1 m/浓度下达峰值,之后随LPS浓度升高而逐渐下降;细胞内Galectin-9及上清中分泌型Galectin-9(s-Galectin-9)蛋白表� 展开更多
关键词 半乳糖凝集素-9 T细胞免疫球蛋白黏蛋白-3 脂多糖 巨噬细胞表型 极化
巨噬细胞表型在鼠疫杆菌和牛布鲁氏杆菌联合免疫效果早期评价中的潜在作用 预览
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作者 窦帅杰 李葛 +5 位作者 张嘉诚 刘艺琼 张艳玲 侯春梅 肖鹤 韩根成 《国际药学研究杂志》 CSCD 北大核心 2018年第1期37-43,共7页
目的在需要多种疫苗同时免疫的应急情况下,如何快速评价联合免疫的效果是目前迫切需要解决的问题。本研究旨在探究巨噬细胞表型变化在早期快速评价鼠疫杆菌和布氏杆菌联合免疫效果中的潜在作用及其可能的应用价值。方法建立鼠疫杆菌、... 目的在需要多种疫苗同时免疫的应急情况下,如何快速评价联合免疫的效果是目前迫切需要解决的问题。本研究旨在探究巨噬细胞表型变化在早期快速评价鼠疫杆菌和布氏杆菌联合免疫效果中的潜在作用及其可能的应用价值。方法建立鼠疫杆菌、牛布鲁氏杆菌疫苗小鼠免疫模型,分别在免疫早期(4 d)和免疫后期(14 d)检测巨噬细胞表型(M1或M2极化)差异,及CD8+T细胞表型功能的变化,分析早期巨噬细胞免疫表型对后期CD8+T细胞功能的影响。结果在联合免疫早期,鼠疫杆菌及牛布鲁氏杆菌同时免疫情况下巨噬细胞M1方向的极化减弱(包括细胞表面CD16/32表达降低及Detectin-1表达升高,细胞内IL-12表达降低及IL-4表达升高),提示疫苗间的相互干扰。同时,两菌联合接种组CD8+T细胞的活性(包括CD8+CD69+T、CD8+INF-γ+T以及CD8+Granzyme B+T细胞的比例)也减弱,出现与巨噬细胞表型一致的变化趋势。结论联合免疫早期巨噬细胞表型与后期反映抗感染免疫应答能力的CD8+T细胞表型及功能出现一致性变化,提示巨噬细胞表型变化有可能应用于早期快速评价联合免疫的效果。 展开更多
关键词 联合免疫 鼠疫杆菌疫苗 牛布鲁氏杆菌疫苗 抗感染药 巨噬细胞表型 CD8+T细胞
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槲皮素促进小鼠脊髓损伤后巨噬细胞表型转变及功能恢复 预览
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作者 卢桃利 霍芳芳 +1 位作者 翟中杰 张蓓 《基础医学与临床》 CSCD 2018年第5期686-691,共6页
目的探讨槲皮素对小鼠脊髓损伤后损伤局部炎性反应的影响。方法通过钳夹法构建C57BL/6小鼠T10节段脊髓损伤模型,随机分为脊髓损伤组(SCI组)和脊髓损伤+槲皮素治疗组(Quercetin组),术后1~14 d于腹腔注射槲皮素(1次/天),SCI组腹... 目的探讨槲皮素对小鼠脊髓损伤后损伤局部炎性反应的影响。方法通过钳夹法构建C57BL/6小鼠T10节段脊髓损伤模型,随机分为脊髓损伤组(SCI组)和脊髓损伤+槲皮素治疗组(Quercetin组),术后1~14 d于腹腔注射槲皮素(1次/天),SCI组腹腔注射0.9%Na Cl溶液。术后3、7和14 d,用激光共聚焦荧光显微镜观察巨噬细胞表型M1(i NOS)和M2(Arg1)并计数;用real-time PCR检测局部组织炎性因子mRNA的表达。用BMS量表对小鼠神经功能损伤修复情况进行评价。结果与SCI组相比,Quercetin组M1(i NOS/CD11b)表型细胞的比例下降(P〈0.05),M2(Arg1/CD11b)表型细胞的比例上调(P〈0.05);同时,Quercetin组促炎因子(TNF-α、NOS2)的表达下降(P〈0.05),抑炎因子(TGF-β、IL-10)的表达上调(P〈0.05)。且Quercetin组在损伤后7和14后BMS评分均显著高于SCI组(P〈0.05)。结论槲皮素可以促进小鼠脊髓损伤后巨噬细胞表型由M1向M2表型转变,抑制炎性因子的表达,对炎性反应的调控是其发挥神经保护作用的可能机制之一。 展开更多
关键词 脊髓损伤 巨噬细胞表型 槲皮素 炎性反应
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SHP-2对Apo E基因敲除小鼠动脉粥样硬化斑块及其内部巨噬细胞表型的影响 预览
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作者 朱学灿 路永刚 +2 位作者 于悦卿 霍丽静 帖彦清 《山东医药》 2018年第34期5-8,共4页
目的 观察磷酸酶SHP-2对Apo E基因敲除(Apo E^-/-)小鼠动脉粥样硬化斑块及其内部巨噬细胞(Mφ)表型的影响。方法 将Apo E^-/-小鼠(动脉粥样硬化模型小鼠)随机分为实验组和模型组各16只,均给予高脂饲料喂养,同时实验组腹腔注射溶于... 目的 观察磷酸酶SHP-2对Apo E基因敲除(Apo E^-/-)小鼠动脉粥样硬化斑块及其内部巨噬细胞(Mφ)表型的影响。方法 将Apo E^-/-小鼠(动脉粥样硬化模型小鼠)随机分为实验组和模型组各16只,均给予高脂饲料喂养,同时实验组腹腔注射溶于0.5%DMSO的SHP-2抑制剂PHPS1 3 mg/(kg·d),模型组腹腔注射等量0.5%DMSO,每天注射1次,共16周。用油红O和Movat染色分别评估主动脉整体和主动脉根部斑块面积,天狼星红、免疫组化染色分别检测主动脉根部斑块内胶原、Mφ(galectin-3/MAC-2阳性区域)和平滑肌细胞(β-actin阳性区域),应用实时荧光定量PCR法检测降主动脉中的M1型(i NOS、TNF-α和IL-6)和M2型(IL-10、Arg-1和FIZZ-1)Mφ标志性因子基因。结果 实验组主动脉整体和主动脉根部斑块面积小于模型组,但差异无统计学意义。与模型组比较,实验组主动脉根部斑块内Mφ阳性区域减小(P〈0.05),平滑肌细胞、胶原成分阳性区域增大(P均〈0.05);降主动脉斑块内M1型Mφ标志性因子基因表达降低(P均〈0.05),M2型Mφ标志性因子基因表达升高(P均〈0.05)。结论 磷酸酶SHP-2可抑制Apo E^-/-小鼠动脉粥样硬化斑块内Mφ向M2型分化,从而导致斑块不稳定性增加。 展开更多
关键词 动脉粥样硬化 蛋白酪氨酸磷酸酶 SHP-2抑制剂 斑块稳定性 巨噬细胞表型 APO E基因敲除小鼠
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清热解毒药对组分调控巨噬细胞M1/M2表型及其机制研究
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作者 徐元 陈龙 +2 位作者 蒋义鑫 杨月 章丹丹 《中国中药杂志》 CSCD 北大核心 2018年第18期3722-3728,共7页
考察清热解毒药对白花蛇舌草-半枝莲的组分(YDW11)对巨噬细胞表型M1/M2的调控及其机制。利用脂多糖(lipopolysaceharides,LPS)/干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)和白介素4(interleukin 4,IL-4)/白介素13(interleukin 13,IL-13)分别诱导... 考察清热解毒药对白花蛇舌草-半枝莲的组分(YDW11)对巨噬细胞表型M1/M2的调控及其机制。利用脂多糖(lipopolysaceharides,LPS)/干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)和白介素4(interleukin 4,IL-4)/白介素13(interleukin 13,IL-13)分别诱导鼠源巨噬细胞RAW264.7为M1和M2表型,MTT法检测YDW11对细胞活力的影响;Griess反应法检测细胞上清液中亚硝酸盐含量的变化;Trans-well小室迁移实验考察M2型巨噬细胞对乳腺癌细胞4T1的体外迁移及YDW11干预的影响;qRT-PCR法检测YDW11对细胞内诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,i NOS)、白介素1β(interleukin1β,IL-1β)、精氨酸酶1(arginase-1,Arg-1)、甘露糖受体(mannose receptor,MR)基因表达的影响;Western blot法检测YDW11对i NOS和Arg-1蛋白表达的影响;Taqman microRNA RT-PCR法检测YDW11对miR155表达的影响。质谱(MS)联用超高效液相色谱(UPLC)检测YDW11中的化学成分。结果显示,等比水提取白花蛇舌草-半枝莲药对的乙酸乙酯组分(YDW11)呈剂量依赖性抑制巨噬细胞M1表型中亚硝酸盐含量,同时抑制M2型巨噬细胞引起的乳腺癌细胞4T1体外迁移加剧,且对未刺激的巨噬细胞M0无细胞毒性。YDW11呈剂量依赖性抑制M1表型标记物i NOS和M2表型标记物Arg-1基因及蛋白的表达,抑制M1表型中IL-1β和M2表型中MR的基因表达,调控M1表型上升而M2表型下调的miR155的表达。MS-UPLC联用结果显示,YDW11中含有对羟基苯乙酮、野黄芩苷、木犀草素和芹菜素4种化学成分。结果表明,YDW11部分通过调控miR155的表达,抑制巨噬细胞M1和M2表型标志性产物i NOS和Arg-1的基因和蛋白表达,而调控巨噬细胞M1/M2表型的极化过程。 展开更多
关键词 白花蛇舌草-半枝莲药对 巨噬细胞表型 miR155
回阳生肌方不同拆方对巨噬细胞表型转化的调节作用
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作者 林燕 何秀娟 +3 位作者 赵京霞 薛妍 蒙玉娇 李萍 《北京中医药大学学报》 CSCD 北大核心 2018年第3期196-202,共7页
目的观察回阳生肌方的拆方(益气温阳方、活血通络方)对巨噬细胞表型转化的影响。方法人单核细胞株(THP-1)细胞用佛波醇酯类多克隆刺激剂(PMA)刺激成巨噬细胞后,加入脂多糖(LPS)、γ-干扰素(INF-γ)刺激48 h,转化为M1型巨噬细... 目的观察回阳生肌方的拆方(益气温阳方、活血通络方)对巨噬细胞表型转化的影响。方法人单核细胞株(THP-1)细胞用佛波醇酯类多克隆刺激剂(PMA)刺激成巨噬细胞后,加入脂多糖(LPS)、γ-干扰素(INF-γ)刺激48 h,转化为M1型巨噬细胞。洛伐他汀(40.50 mg/L)作为阳性对照药物;采用CCK-8方法观察益气温阳方、活血通络方对巨噬细胞活性的影响;以中性红法检测其对巨噬细胞吞噬功能的影响。M1型巨噬细胞加入洛伐他汀、益气温阳方、活血通络方24 h后,PCR法检测诱导型一氧化氮合酶(i NOS)mRNA、精氨酸酶1(Arg-1)mRNA的表达;CBA法检测上清液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-12(IL-12)、白细胞介素-10(IL-10)和生长因子(VEGF)的含量;ELISA法检测上清液中转化生长因子β(TGF-β)的含量。结果益气温阳方在浓度4、0.8、0.16 mg/L时、活血通络方在浓度32、6.4、1.28 mg/L时对巨噬细胞增殖无影响,但可促进巨噬细胞对中性红的吞噬,分别作为益气温阳方、活血通络方的高、中、低浓度。加入LPS、INF-γ后,M1型巨噬细胞标志物i NOS mRNA显著升高,而加入洛伐他汀、益气温阳方及活血通络方后显著降低(P〈0.01);M2型巨噬细胞标志物Arg-1 mRNA表达相对于正常组显著降低,而洛伐他汀、益气温阳方和活血通络方都明显促进Arg-1 mRNA表达(P〈0.01),但益气温阳方、活血通络方与洛伐他汀相比,Arg-1 mRNA表达显著降低。以上药物作用M1型巨噬细胞细胞24 h后,TNF-α、IL-6、IL-1含量显著降低,VEGF、TGF-β含量显著升高,益气温阳方高浓度使IL-10含量显著升高(P〈0.05)。与洛伐他汀相比,活血通络方和益气温阳方高浓度组VEGF、TGF-β差异有统计学意义(P〈0.05)。结论益气温阳方和活血通络方均在一定程度上抑制M1型巨噬细胞标志物i NOS mRNA表达和诱导M2型� 展开更多
关键词 回阳生肌方 慢性疮面愈合 益气温阳 活血通络 巨噬细胞表型 人单核细胞
丙戊酸和氢气对缺氧小胶质细胞表型的影响 预览 被引量:1
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作者 吴曦子 曾仁庆 +4 位作者 赵洋子 常盼盼 范晨玲 王红 崇巍 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期36-40,共5页
目的研究丙戊酸(VPA)和氢气(H2)对缺氧小胶质细胞表型的影响。方法对缺氧BV2小胶质细胞分别给予VPA和H2处理后,收集上清和细胞团,应用ELISA、流式细胞术和实时PCR技术检测表型标志物。结果与对照组相比,缺氧增加BV2细胞M1型表型... 目的研究丙戊酸(VPA)和氢气(H2)对缺氧小胶质细胞表型的影响。方法对缺氧BV2小胶质细胞分别给予VPA和H2处理后,收集上清和细胞团,应用ELISA、流式细胞术和实时PCR技术检测表型标志物。结果与对照组相比,缺氧增加BV2细胞M1型表型标志物mRNA(iNOS)的表达,降低M2型表型标志物mRNA(CD206、TGF-β)的表达,使M1型和M2型表型标志物mRNA的比值(CD16∶CD206、iNOS∶CD206、iNOS∶TGF-β)升高(P〈0.05)。与缺氧组相比,VPA降低缺氧BV2的M1型表型标志物蛋白(CD16/32)和mRNA(iNOS)的表达,使M1型和M2型表型标志物mRNA的比值(CD16∶CD206、CD32∶CD206、iNOS∶CD206、iNOS∶TGF-β)降低(P〈0.05)。与缺氧组相比,H2降低缺氧BV2的M1型表型标志物蛋白(TNF-α、CD16/32、iNOS)和mRNA(iNOS)的表达,升高M2型表型标志物蛋白(IL-10)和mRNA(CD206、TGF-β)的表达,使M1型和M2型表型标志物mRNA的比值(CD16∶CD206、iNOS∶CD206、iNOS∶TGF-β)降低(P〈0.05)。结论缺氧使小胶质细胞向促炎表型转化;VPA和H2均可抑制缺氧对小胶质细胞的促炎作用。 展开更多
关键词 缺氧 小胶质细胞 氢气 丙戊酸 巨噬细胞表型
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胰岛素对高糖环境中巨噬细胞表型转换的影响 预览
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作者 郜敏 杨沛瑯 +2 位作者 余天漪 刘琰 章雄 《上海交通大学学报:医学版》 CSCD 北大核心 2017年第5期595-600,共6页
目的·研究胰岛素对高糖培养的人单核细胞株THP-1细胞及糖尿病创面巨噬细胞表型转换的影响。方法·分别用正常糖(5.6mmol/L)和高糖(25mmol/L)培养THP-1细胞,PMA刺激贴壁后,LPS诱导分化为M1型巨噬细胞,胰岛素处理细胞6h... 目的·研究胰岛素对高糖培养的人单核细胞株THP-1细胞及糖尿病创面巨噬细胞表型转换的影响。方法·分别用正常糖(5.6mmol/L)和高糖(25mmol/L)培养THP-1细胞,PMA刺激贴壁后,LPS诱导分化为M1型巨噬细胞,胰岛素处理细胞6h。使用RT-PCR、Westernblotting检测M1型标记物诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)以及M2型标记物精氨酸酶1(Arg1)、IL-10表达的变化。高脂饮食喂养联合小剂量链脲佐菌素(STZ)多次腹腔注射诱导2型糖尿病大鼠模型;血糖稳定5周后,在糖尿病大鼠背部制作2个直径1cm的全层皮肤缺损创面,应用随机数字表法将创面随机分为胰岛素处理创面和生理盐水处理创面,分别滴加0.2U胰岛素/20μL生理盐水或20μL生理盐水。于伤后第3、7、25日,观察创面巨噬细胞表型特征;以正常大鼠(n=3)作为正常对照。结果·经高糖培养后,由THP-1细胞诱导分化的巨噬细胞M1型标记物iNOS、TNF-αmRNA表达上调,而M2型标记物Arg1、IL-10mRNA表达下调;胰岛素作用6h后,iNOS、TNF-αmRNA表达下调,iNOS、IL-1β蛋白表达也下调,而Arg1、IL-10mRNA及蛋白表达均上调。此外,高糖培养的巨噬细胞磷酸化NF-κB-p65水平明显升高,而胰岛素干预后磷酸化NF-κB-p65水平显著降低。与正常对照大鼠皮肤创面相比,糖尿病大鼠创面巨噬细胞iNOS表达明显升高;伤后第3、7日,生理盐水处理创面巨噬细胞iNOS高表达;伤后第25日,Arg1表达较低。伤后第7日起,胰岛素处理创面巨噬细胞iNOS表达开始下调;伤后第25日,Arg1的表达显著高于生理盐水处理创面。结论·胰岛素可诱导高糖环境中的巨噬细胞由M1表型向M2表型转换,其机制可能与NF-κB-p65的磷酸化有关。 展开更多
关键词 巨噬细胞表型 胰岛素 糖尿病创面
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巨噬细胞表型改变在先天性巨结肠相关性小肠结肠炎中的研究 预览
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作者 陈绪勇 焦春雷 +4 位作者 付康 冯晨钊 朱天琦 柯昌庶 冯杰雄 《腹部外科》 2016年第6期467-472,共6页
目的通过检测先天性巨结肠患儿结肠组织中巨噬细胞表型的改变,探讨巨噬细胞活化与巨结肠相关性肠炎发病之间的关系。方法收集先天性巨结肠患儿(肠炎组4例,非肠炎组6例)结肠远段及近段标本,行HE染色、评估各段肠管炎症损伤程度,CD6... 目的通过检测先天性巨结肠患儿结肠组织中巨噬细胞表型的改变,探讨巨噬细胞活化与巨结肠相关性肠炎发病之间的关系。方法收集先天性巨结肠患儿(肠炎组4例,非肠炎组6例)结肠远段及近段标本,行HE染色、评估各段肠管炎症损伤程度,CD68和iNOS免疫荧光双染法评估M1型巨噬细胞活化状况,CD68和Arg-1免疫荧光双染法评估M2型巨噬细胞活化状况,RT-qPCR检测各组肠管iNOS及Arg-1的mRNA表达水平。结果免疫荧光染色显示,肠炎组近段结肠iNOS/CD68阳性细胞的百分比(73.12±2.48)%明显高于肠炎组远段结肠(54.19±1.98)%、非肠炎组近段结肠(49.35±2.70)%及远段结肠(43.18±4.21)%;而肠炎组近段结肠Arg-1/CD68阳性细胞的百分比(33.15±4.81)%明显低于远段结肠(49.32±3.98)%;非肠炎组近段结肠Arg-1/CD68阳性细胞的百分比(45.23±1.95)%亦低于远段结肠(56.52±2.79)%,差异有统计学意义(P〈0.05)。RT-qPCR结果显示,肠炎组近段结肠iNOS表达明显升高,而Ar乎1表达则在肠炎组及非肠炎组的远段结肠升高(P〈0.05)。结论先天性巨结肠相关性小肠结肠炎的发生可能与巨噬细胞向M1型转化有关。 展开更多
关键词 先天性结肠相关性小肠结肠炎 巨噬细胞表型
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牙周炎对小鼠脾脏巨噬细胞表型的影响 预览 被引量:5
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作者 徐怡馨 章锦才 +2 位作者 轩东英 余挺 王向丽 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第10期1568-1570,共3页
目的:研究实验性牙周炎模型小鼠的脾脏巨噬细胞表型、分泌功能及相对数量变化,以探究牙周炎对脾脏巨噬细胞的影响。方法:22只22周龄小鼠随机分为真性结扎组(P10d组)和假性结扎对照组(C组),各11只牙周结扎10 d后处死。流式细胞术... 目的:研究实验性牙周炎模型小鼠的脾脏巨噬细胞表型、分泌功能及相对数量变化,以探究牙周炎对脾脏巨噬细胞的影响。方法:22只22周龄小鼠随机分为真性结扎组(P10d组)和假性结扎对照组(C组),各11只牙周结扎10 d后处死。流式细胞术检测单核巨噬细胞及其M1、M2表型的比例。实时荧光定量PCR法检测脾脏中巨噬细胞相关抗炎型细胞因子IL-1β,抑炎型细胞因子IL-10促炎型mRNA相对表达水平的差异。结果:与C组相比,牙周炎组的M1型巨噬细胞占脾成熟巨噬细胞比例下降,M1/M2比例显著下降,M1型巨噬细胞炎症因子IL-1βmRNA表达水平下降。结论:慢性牙周炎能下调M1型巨噬细胞比例,使巨噬细胞表型M1/M2比例下降,促炎因子IL-1βmRNA表达水平下降。 展开更多
关键词 牙周炎 脾脏 巨噬细胞表型
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创伤环境巨噬细胞表型的时空相关性及其对生物材料支架引导组织再生与修复的意义 预览 被引量:1
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作者 郝绥绥 许海燕 《中国生物医学工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期475-480,共6页
炎症反应是机体对损伤和异物的正常应答,炎症的强度和持续时间影响生物材料在体内的相容性和稳定性。巨噬细胞是调控机体免疫和炎症反应的重要细胞,因此它对生物材料的响应性在认知材料-机体反应中有决定性作用。系统阐述巨噬细胞表型... 炎症反应是机体对损伤和异物的正常应答,炎症的强度和持续时间影响生物材料在体内的相容性和稳定性。巨噬细胞是调控机体免疫和炎症反应的重要细胞,因此它对生物材料的响应性在认知材料-机体反应中有决定性作用。系统阐述巨噬细胞表型与机体创伤环境及对后期的修复和(或)再生、巨噬细胞表型与相关生物材料之间的相互作用,并对其未来发展方向进行评述。 展开更多
关键词 巨噬细胞表型 创伤环境 生物材料 修复 再生
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超短波促进巨噬细胞表型转化并抑制大鼠脊髓损伤后炎症反应的作用 预览
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作者 高琳 冯智萍 +2 位作者 代辰飞 张志强 张立新 《中国康复理论与实践》 CSCD 北大核心 2018年第6期634-640,共7页
目的探讨超短波治疗对巨噬细胞表型转化及大鼠脊髓损伤的保护作用。方法 Sprague-Dawley大鼠96只随机分为假手术组、模型组和超短波组,每组32只。模型组和超短波组采用改良Allen法构建大鼠脊髓损伤模型,超短波组于术后第1天起于损伤部... 目的探讨超短波治疗对巨噬细胞表型转化及大鼠脊髓损伤的保护作用。方法 Sprague-Dawley大鼠96只随机分为假手术组、模型组和超短波组,每组32只。模型组和超短波组采用改良Allen法构建大鼠脊髓损伤模型,超短波组于术后第1天起于损伤部位行小剂量超短波治疗。采用BBB评分评估各组大鼠运动功能;HE染色评估各组脊髓空洞大小;免疫组织化学染色、实时PCR及Western blotting法检测各组脊髓组织中诱导型一氧化氮合酶(i NOS)、精氨酸酶-1(Arg-1)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)m RNA及蛋白表达。结果与模型组比较,超短波组BBB评分升高(P〈0.05),i NOS和TNF-α表达减少,Arg-1表达增加(P〈0.05)。结论超短波治疗可促进脊髓损伤周围巨噬细胞从M1型向M2型转化,抑制炎症反应并促进脊髓损伤后修复。 展开更多
关键词 脊髓损伤 超短波 巨噬细胞表型转化 肿瘤坏死因子-Α 修复 大鼠
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土槿乙酸对LPS诱导的RAW 264.7源性巨噬细胞表型偏移的影响 预览 被引量:1
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作者 李运肖 李覃 +3 位作者 周欣 姬文婕 赵季红 李玉明 《武警后勤学院学报:医学版》 2015年第1期5-9,共5页
【目的】观察中药有效成分土槿乙酸(pseudolaric acid B,PB)对脂多糖(lipopolysaccharudes,LPS)诱导的RAW264.7源性巨噬细胞表型偏移的影响,初步探讨其可能的作用机制。【方法】LPS诱导小鼠RAW264.7源性巨噬细胞建立体外细胞模型,... 【目的】观察中药有效成分土槿乙酸(pseudolaric acid B,PB)对脂多糖(lipopolysaccharudes,LPS)诱导的RAW264.7源性巨噬细胞表型偏移的影响,初步探讨其可能的作用机制。【方法】LPS诱导小鼠RAW264.7源性巨噬细胞建立体外细胞模型,实时定量PCR法检测PB处理前后RAW264.7源性巨噬细胞表型偏移的变化,划痕实验和流式细胞术分别检测细胞迁移能力及细胞周期。【结果】PB能够降低LPS诱导的RAW264.7源性巨噬细胞M1表型标志物IL-1β、i NOS、TNF-α的m RNA表达水平,提高M2表型标志物Arg1、Mrc1的m RNA表达水平,使其细胞迁移能力降低、细胞阻滞在G0和G2期。【结论】PB可抑制LPS诱导的RAW264.7源性巨噬细胞向M1型偏移,对巨噬细胞中介的相关疾病可能具有潜在的免疫调节作用。 展开更多
关键词 土槿乙酸 脂多糖 巨噬细胞表型偏移 迁移 细胞周期
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吲哚胺加双氧酶的表达调控THP-1巨噬细胞的极化 被引量:4
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作者 王险峰 王昊 +2 位作者 张帆 刘浩 杜军 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期901-905,共5页
目的研究吲哚胺加双氧酶(IDO)对巨噬细胞表型转化的影响。方法以10 ng/mL佛波酯诱导THP-1人单核细胞,建立分化的巨噬细胞模型,分别以100 U/mL IFN-γ和100 ng/mL巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)刺激分化的THP-1细胞,获得M1型和M2型巨... 目的研究吲哚胺加双氧酶(IDO)对巨噬细胞表型转化的影响。方法以10 ng/mL佛波酯诱导THP-1人单核细胞,建立分化的巨噬细胞模型,分别以100 U/mL IFN-γ和100 ng/mL巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)刺激分化的THP-1细胞,获得M1型和M2型巨噬细胞,利用实时定量PCR(qRT-PCR)、流式细胞术和Western blot法检测巨噬细胞HLA-DR、CC型趋化因子受体7(CCR7)、IL-12p35、IL-10、CXCR4和IDO的表达变化。采用细胞转染实验对分化的THP-1细胞进行IDO的过表达和针对IDO基因的siRNA干扰实验,检测其IL-12p35、CCR7、IL-10和CXCR4的表达变化。结果 IFN-γ可诱导THP-1细胞向M1型发生转化并上调IDO的表达。而在巨噬细胞内过表达IDO促进THP-1向M2型极化,沉默细胞内的IDO基因则导致THP-1细胞极化为M1型。结论 IDO表达可调控巨噬细胞极化。 展开更多
关键词 吲哚胺加双氧酶 巨噬细胞表型转化 IFN-Γ 免疫耐受
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