期刊文献+
共找到1,204篇文章
< 1 2 61 >
每页显示 20 50 100
生物反应器悬浮培养Vero细胞制备水貂犬瘟热活疫苗 预览
1
作者 冯二凯 程悦宁 +5 位作者 罗国良 易立 王振军 郭利 陈立志 程世鹏 《中国兽药杂志》 2019年第6期41-47,共7页
为实现利用生物反应器制备规模化、自动化生产水貂犬瘟热Vero活疫苗,在7 L生物反应器中悬浮培养Vero细胞,并考察培养基、细胞初始接种密度、培养方式、病毒感染复数和感染时间等参数对细胞增殖、病毒滴度以及细胞代谢的影响。结果显示,... 为实现利用生物反应器制备规模化、自动化生产水貂犬瘟热Vero活疫苗,在7 L生物反应器中悬浮培养Vero细胞,并考察培养基、细胞初始接种密度、培养方式、病毒感染复数和感染时间等参数对细胞增殖、病毒滴度以及细胞代谢的影响。结果显示,在含有5 g/L微载体的DMEM培养基中接种Vero细胞(30~40 cells/球),设定p H、温度、溶氧值和转速分别为7.2、37℃、50%和55 r/min,培养方式为批次培养(0~48 h)+灌流培养(48~96 h)组合方式,培养Vero细胞3~4 d或细胞密度达到200 cells/球以上时,按照MOI=0.0001~0.001吸附接毒,调低温度(33℃)继续培养100~120 h,即可获得高滴度病毒液(106.5~107.2TCID50/0.1 m L),经无菌检验合格后,配制水貂犬瘟热Vero细胞活疫苗(CDV3-CL株,悬浮培养),疫苗符合《中国兽药典》三部(2015版)的规定。试验建立了7 L生物反应器悬浮培养Vero细胞制备水貂犬瘟热活疫苗的新工艺,为进一步规模化生产奠定了基础。 展开更多
关键词 VERO细胞 大规模培养 微载体 悬浮培养 生物反应器
在线阅读 免费下载
高致病性猪繁殖与呼吸综合征活疫苗(TJM-F92株)微载体悬浮培养疫苗比较研究
2
作者 苏玮玮 赵攀攀 +4 位作者 夏铭崎 丁赫楠 张秀华 张树成 王炜 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第7期108-112,170共6页
为了改进高致病性猪繁殖与呼吸综合征( HP-PRRS)疫苗培养工艺,对 HP-PRRSV 微载体悬浮培养( TJM-F92 株)活疫苗的抗原生产工艺、疫苗的安全性及免疫效力等方面进行研究,并与转瓶培养工艺进行比较。结果表明:微载体悬浮培养工艺生产 HP-P... 为了改进高致病性猪繁殖与呼吸综合征( HP-PRRS)疫苗培养工艺,对 HP-PRRSV 微载体悬浮培养( TJM-F92 株)活疫苗的抗原生产工艺、疫苗的安全性及免疫效力等方面进行研究,并与转瓶培养工艺进行比较。结果表明:微载体悬浮培养工艺生产 HP-PRRSV( TJM-F92 株)优于转瓶培养工艺,其病毒含量比转瓶培养工艺高约 10 倍,且批间差异小;HP-PRRSV 微载体悬浮工艺活疫苗( TJM-F92株)安全性与转瓶培养工艺活疫苗相比无显著差异,均安全;4 批活疫苗细菌、支原体、外源病毒检测合格,病毒含量、真空度和剩余水分均符合标准,但免疫效力明显优于转瓶培养工艺活疫苗。说明从疫苗工业化生产及产品质量控制方面来衡量,微载体悬浮培养工艺比转瓶培养工艺更具有优势。 展开更多
关键词 高致病性猪繁殖与呼吸综合征 活疫苗 微载体 悬浮培养 转瓶培养
基于GRA的模糊核聚类DRVM软测量建模与优化 预览
3
作者 黄永红 吴红生 虞永胜 《自动化与仪表》 2019年第3期66-72,共7页
禽流感疫苗犬肾上皮连续细胞系(MDCK)在悬浮培养生产过程中,营养物质葡萄糖的消耗及代谢产物乳酸的累积是影响活细胞生长的关键因素。软测量方法是分析测量该影响因素及活细胞密度等关键参数的有效方法。针对动态关联向量机(DRVM)软测... 禽流感疫苗犬肾上皮连续细胞系(MDCK)在悬浮培养生产过程中,营养物质葡萄糖的消耗及代谢产物乳酸的累积是影响活细胞生长的关键因素。软测量方法是分析测量该影响因素及活细胞密度等关键参数的有效方法。针对动态关联向量机(DRVM)软测量建模过程中影响主导变量的因素较多,辅助变量的选择直接关系到模型的复杂度等问题,提出了采用灰色关联分析(GRA)的方法来选择与主导变量关联度高的辅助变量;采用了模糊核聚类分析法(KFCM)实现样本的聚类,提升DRVM模型的鲁棒性,提高泛化能力。对MDCK细胞的悬浮培养过程进行仿真验证,并与DRVM模型进行比较。结果表明,GRAKFCM-DRVM软测量建模方法预测精度更高、更稳定,为实时控制提供了很好的基础。 展开更多
关键词 软测量 灰色关联分析 核模糊聚类 动态关联向量机 MDCK细胞 悬浮培养
在线阅读 下载PDF
忧遁草茎段悬浮培养快繁体系的建立 预览
4
作者 刘铭 刘兴斌 张宗申 《河南农业科学》 北大核心 2019年第1期115-119,共5页
为了促进药食两用植物忧遁草资源的开发利用,将忧遁草无菌茎段置于液体培养基中,采用正交设计法优化植物生长调节剂组合、基本培养基类型、NO3^-/NH4^+值、PO4^3-和蔗糖质量浓度,以繁殖系数为指标,建立其悬浮高效繁殖的工艺。结果表明,... 为了促进药食两用植物忧遁草资源的开发利用,将忧遁草无菌茎段置于液体培养基中,采用正交设计法优化植物生长调节剂组合、基本培养基类型、NO3^-/NH4^+值、PO4^3-和蔗糖质量浓度,以繁殖系数为指标,建立其悬浮高效繁殖的工艺。结果表明,改良的1/2MS培养基(20mmol/LKNO3+5mmol/LNH4NO3+1.5mmol/LKH2PO4)+蔗糖20g/L+IBA 1.0mg/L+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.8mg/L+KT 0.2mg/L(pH值6.0)是最适合忧遁草茎段悬浮培养的配方,其无菌苗根数为4.09个,根长为5.47cm,茎高为11.79cm,植株形态为叶片展开充分,叶色深绿,植株健壮。 展开更多
关键词 忧遁草 快繁 悬浮培养 正交设计
在线阅读 下载PDF
油棕细胞悬浮培养及植株再生技术 预览
5
作者 潘登浪 邹积鑫 +2 位作者 曾宪海 林位夫 Khengtuan Chean 《广东农业科学》 CAS 2019年第2期59-65,173共8页
【目的】建立油棕胚性体细胞悬浮培养植株再生技术体系,为油棕优株无性系种植材料高效繁育、细胞生物学研究、生物技术育种研究等提供技术平台和参考。【方法】以源于成龄油棕芯叶的瘤状愈伤组织为材料,采用不同质量浓度2,4-D、麦草畏... 【目的】建立油棕胚性体细胞悬浮培养植株再生技术体系,为油棕优株无性系种植材料高效繁育、细胞生物学研究、生物技术育种研究等提供技术平台和参考。【方法】以源于成龄油棕芯叶的瘤状愈伤组织为材料,采用不同质量浓度2,4-D、麦草畏与德夸霉素组合诱导易碎胚性愈伤组织,分析不同激素质量浓度及其组合对油棕体细胞悬浮系增殖与后续体胚发育的影响。【结果】0.1 mg/L德夸霉素与一定浓度2,4-D或麦草畏组合,促进胚性愈伤组织形成,0.1 mg/L德夸霉素与1 mg/L麦草畏组合诱导易碎胚性愈伤组织较佳,诱导率为28.67%;用生长旺盛、质地松散的易碎胚性愈伤组织悬浮培养21 d可建立生长状态较均一、分散性好的悬浮细胞系;0.3 mg/L德夸霉素与1 mg/L麦草畏组合较有利于悬浮细胞系增殖和后续体胚发育;将悬浮细胞系转到MS+谷氨酰胺100 mg/L +蔗糖30g/L培养基上,于28(±2)℃、2 000 lx下进行胚诱导培养,每两周更换新培养基1次,培养60 d可获得直径大于1 mm的胚,最高每瓶295粒;将大于1 mm的胚转到固体培养基培养可获得再生植株。【结论】适当质量浓度德夸霉素与2,4-D或麦草畏组合,促进油棕芯叶瘤状愈伤组织形成易碎胚性愈伤组织;用生长旺盛、质地松散的易碎胚性愈伤组织悬浮培养21 d可建立生长状态较均一、分散性好的悬浮细胞系;初步发现含适当质量浓度德夸霉素与麦草畏液体培养基利于悬浮细胞系增殖和后续体胚发育。 展开更多
关键词 油棕 胚性愈伤组织 悬浮培养 体细胞胚 油料作物
在线阅读 下载PDF
水貂犬瘟热Vero细胞活疫苗(CDV3-CL株,悬浮培养)安全性评价 预览
6
作者 冯二凯 易立 +5 位作者 罗国良 王振军 郭利 陈立志 程世鹏 程悦宁 《中国兽药杂志》 2019年第8期15-22,共8页
为考察新研制的水貂犬瘟热Vero细胞活疫苗(CDV3-CL株,悬浮培养)的安全性,分别以一次单剂量(1头份)、单剂量重复和一次超剂量(10头份)接种动物,对疫苗进行全方位安全性评价,试验动物涉及水貂幼崽、育成水貂以及妊娠水貂等,重点观察注射... 为考察新研制的水貂犬瘟热Vero细胞活疫苗(CDV3-CL株,悬浮培养)的安全性,分别以一次单剂量(1头份)、单剂量重复和一次超剂量(10头份)接种动物,对疫苗进行全方位安全性评价,试验动物涉及水貂幼崽、育成水貂以及妊娠水貂等,重点观察注射动物的体温、食欲,生产性能是否发生改变、注射部位是否出现炎症反应以及实验动物接种部位组织病变等,连续观察15d,结果发现,实验动物没有发生炎症反应,动物体温变化也处于正常范围内,证明疫苗是安全的,从而为疫苗的推广奠定基础。 展开更多
关键词 水貂 犬瘟热疫苗 悬浮培养 安全性评价
在线阅读 免费下载
抗松材线虫病马尾松体胚发生与植株再生条件的优化
7
作者 陈婷婷 叶建仁 +2 位作者 吴小芹 沈李元 朱丽华 《南京林业大学学报:自然科学版》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期1-8,共8页
【目的】为使抗松材线虫病马尾松(Pinus massoniana Lamb.)快速大规模繁殖,对抗性马尾松体细胞胚胎发生和植株再生条件进行优化。【方法】以抗病马尾松未成熟合子胚为材料,探讨胚性愈伤组织的诱导、增殖与维持、分化成熟以及萌发的合适... 【目的】为使抗松材线虫病马尾松(Pinus massoniana Lamb.)快速大规模繁殖,对抗性马尾松体细胞胚胎发生和植株再生条件进行优化。【方法】以抗病马尾松未成熟合子胚为材料,探讨胚性愈伤组织的诱导、增殖与维持、分化成熟以及萌发的合适培养条件,并对体细胞胚进行生根诱导,对再生植株进行壮苗培养以及驯化移栽。【结果】以LP为基本培养基,添加2.0 mg/L 2,4-D(二氯苯氧乙酸)和1.0 mg/L 6-BA(6-苄氨基腺嘌呤),抗性马尾松胚性愈伤组织诱导率最高达27.8%。在胚性愈伤组织增殖维持过程中,悬浮培养中的增殖系数和同步化程度都显著高于固体培养,且经过悬浮培养的细胞系分化能力更强。萌发过程中只有少量能顺利分化出根系,未能顺利分化出根的体胚于添加适量IBA和NAA的生根培养基中能够更好地生根。壮苗培养过程中,添加0.01 mg/L油菜素内酯有助于体胚苗的生长。体胚苗在驯化移栽时不同大小的苗移栽成活率相差较大,5 cm左右的体胚苗成活率最高达90.3%。【结论】生长素2,4-D和6-BA组合(2.0 mg/L和1.0 mg/L)对抗性马尾松胚性愈伤组织诱导率较好;悬浮培养后的细胞系更利于诱导体胚,适宜浓度的IBA和NAA(1.0 mg/L和0.2 mg/L)能够促进体胚苗根系生长。在壮苗培养基中添加适量油菜素内酯能够促进抗性马尾松再生植株的生长,待苗长至5 cm左右移栽较好。 展开更多
关键词 松材线虫病 抗病马尾松 体胚发生 植株再生 悬浮培养 生根
抗松针褐斑病湿地松体细胞的悬浮培养 预览
8
作者 方珞 吴小芹 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期13-18,共6页
为了获得大量的抗松针褐斑病胚性愈伤组织试验材料,完善抗性湿地松体胚发生技术,以抗松针褐斑病湿地松胚性愈伤组织为材料,探究抗性湿地松体细胞悬浮培养的较适条件,建立抗性湿地松体细胞的悬浮培养体系。研究结果显示:悬浮培养的胚性... 为了获得大量的抗松针褐斑病胚性愈伤组织试验材料,完善抗性湿地松体胚发生技术,以抗松针褐斑病湿地松胚性愈伤组织为材料,探究抗性湿地松体细胞悬浮培养的较适条件,建立抗性湿地松体细胞的悬浮培养体系。研究结果显示:悬浮培养的胚性细胞较分散,利于胚性细胞充分获取营养,可产成熟体胚153个/g,而固体培养的胚性细胞产胚仅为56个/g。抗性湿地松悬浮细胞的较佳培养周期为7-9 d,较适宜的基本培养基为1/4 DCR,麦芽糖添加量为15 g/L,NAA添加量为0.5 mg/L;较佳的继代添加比为1/2;同时研究还发现不同基因型的抗性湿地松悬浮细胞在相同的培养条件下,细胞活力有一定差异,其中无性系13#-9活力最佳。 展开更多
关键词 抗性湿地松 悬浮培养 体胚发生 胚性愈伤组织
在线阅读 免费下载
β-环糊精对海南粗榧悬浮细胞三尖杉酯类碱合成的分析
9
作者 魏丽蓉 王莞婷 +1 位作者 王柳妍 李永成 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期3009-3015,共7页
海南粗榧(Cephalotaxus mannii)是生产抗癌药物三尖杉酯类生物碱的主要原料。本研究利用不同浓度β-环糊精处理海南粗榧悬浮细胞,通过对细胞悬浮培养过程中细胞生长、产物含量以及代谢途径中关键酶活力分析,研究β-环糊精对海南粗榧生... 海南粗榧(Cephalotaxus mannii)是生产抗癌药物三尖杉酯类生物碱的主要原料。本研究利用不同浓度β-环糊精处理海南粗榧悬浮细胞,通过对细胞悬浮培养过程中细胞生长、产物含量以及代谢途径中关键酶活力分析,研究β-环糊精对海南粗榧生长及次级代谢产物三尖杉酯类碱合成的影响。结果显示,β-环糊精显著提高了三尖杉酯类碱含量并对海南粗榧悬浮细胞的生长有促进作用,添加35 mmol/Lβ-环糊精,产物含量最高(2.26 mg/L),是对照(0.54 mg/L)的4.18倍;悬浮细胞生物量为14.79 g/L,是对照组(9.79 g/L)的1.5倍。同时,β-环糊精提高了细胞6-磷酸葡萄糖脱氢酶以及3-脱氧-D-阿拉伯庚酮糖-7-磷酸合酶活力。因此β-环糊精可通过诱导碳通量转移到磷酸戊糖途径从而促进三尖杉酯类碱的合成,同时也为开发高效诱导子,实现海南粗榧悬浮细胞的工业化生产提供方向。 展开更多
关键词 海南粗榧 Β-环糊精 三尖杉酯类碱 悬浮培养
耳蜗移植神经干细胞的培养和鉴定 预览
10
作者 吴佳源 刘俊 《听力学及言语疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期405-409,共5页
目的 以SD孕鼠的胎鼠海马组织为原材料来分离培养神经干细胞,为后续干细胞移植实验奠定基础。方法 分离3只孕14~15天的SD大鼠胚胎海马组织,用无血清培养技术悬浮培养神经干细胞,测量神经干细胞球的数量和直径。用免疫组化荧光技术检测... 目的 以SD孕鼠的胎鼠海马组织为原材料来分离培养神经干细胞,为后续干细胞移植实验奠定基础。方法 分离3只孕14~15天的SD大鼠胚胎海马组织,用无血清培养技术悬浮培养神经干细胞,测量神经干细胞球的数量和直径。用免疫组化荧光技术检测其巢蛋白(Nestin)的表达;掺入5-溴脱氧尿嘧啶(Brdu),并用免疫荧光双标技术观测神经干细胞的增殖状况。采用荧光染料Hoechest33342标记神经干细胞,然后用10%胎牛血清诱导其分化,用免疫组化荧光技术鉴定神经元特异性烯醇化酶(NSE)、星状胶质细胞特异性表达的胞浆蛋白胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、少突胶质细胞的特异性抗原2,3-环核苷酸磷酸二酯酶(CNP),以确定培养细胞为神经干细胞。结果 用大鼠胚胎海马组织可以成功分离神经干细胞,并可以在体外培养下稳定增殖传代,培养的神经干细胞及经胎牛血清诱导分化后的神经干细胞,经免疫组化荧光技术鉴定后可成功表达特异性标志物Nestin、NSE、GFAP、CNP。结论 以SD胎鼠海马组织为原材料分离培养的神经干细胞具有自我更新能力,并能分化成神经元、星状胶质细胞及少突胶质细胞,获取的细胞可用于干细胞移植。 展开更多
关键词 SD大鼠 神经干细胞 悬浮培养 鉴定
在线阅读 下载PDF
PK-15细胞微载体悬浮培养及PCV2增殖工艺研究 预览
11
作者 梁武 乔健 +2 位作者 李亚杰 易小萍 杨保收 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2019年第4期103-106,110共5页
研究表明,PCV2仅在PK15等少数哺乳动物细胞上增殖,但由于PCV2毒力弱,且不产生细胞病变,获得高滴度病毒难度较大[1]。因此,PCV2的培养滴度高低已成为制约现有疫苗质量的关键瓶颈之一。为建立在生物反应器内微载体逐级放大培养PK-15细胞... 研究表明,PCV2仅在PK15等少数哺乳动物细胞上增殖,但由于PCV2毒力弱,且不产生细胞病变,获得高滴度病毒难度较大[1]。因此,PCV2的培养滴度高低已成为制约现有疫苗质量的关键瓶颈之一。为建立在生物反应器内微载体逐级放大培养PK-15细胞和增殖PCV2技术,本研究以德国Sartorius14L生物反应器微载体悬浮培养PK-15细胞,对PK-15细胞初始接种密度、搅拌转速、微载体浓度、PCV2接毒时间、接毒剂量、收毒时间等工艺参数进行了摸索和优化[2-3]。结果表明:3g/L的微载体和60r/min的搅拌转速下,采用0.5×106cells/mL的初始接种密度操作工艺可获得最佳PK-15细胞生长效能。细胞生长后6h接毒,采用感染复数(MOI)为0.5的接毒比例,细胞接毒后在微载体上生长96h可获得最高的PCV2增殖滴度108.5TCID50/mL,利用该工艺,经过消化转移将PK-15细胞从14L反应器放大至42L反应器,微载体上细胞贴附均匀、生长旺盛,42L反应器中培养72h细胞密度可达39.0×105cells/mL,病毒滴度108.3TCID50/mL,应用生物反应器培养PCV2滴度较常规转瓶培养工艺提高了近10倍。进一步表明PCV2悬浮培养放大与接毒工艺稳定,为下一步实现工业级规模化生产奠定基础。 展开更多
关键词 PK15细胞 猪圆环病毒2型 微载体 悬浮培养
在线阅读 下载PDF
乳腺癌干细胞富集与鉴定的初步研究 预览
12
作者 张颖 代引海 +3 位作者 邱春丽 王茂 马海龙 毛宁 《现代肿瘤医学》 CAS 2019年第6期929-934,共6页
目的:通过从MCF-7、ZR-75-1、MDA-MB-231乳腺癌细胞系中培养富集及鉴定乳腺癌干细胞(breast cancer stem cell,BCSC),寻找培养与富集乳腺癌干细胞的方法。方法:贴壁培养MCF-7、ZR-75-1、MDA-MB-231细胞系,倒置显微镜观察各细胞形态;流... 目的:通过从MCF-7、ZR-75-1、MDA-MB-231乳腺癌细胞系中培养富集及鉴定乳腺癌干细胞(breast cancer stem cell,BCSC),寻找培养与富集乳腺癌干细胞的方法。方法:贴壁培养MCF-7、ZR-75-1、MDA-MB-231细胞系,倒置显微镜观察各细胞形态;流式细胞仪分别分选收集CD44^-CD24^-、CD44^-CD24^+、CD44^+CD24^-及 CD44^+CD24^+细胞,其中CD44^+CD24^-为乳腺癌干细胞,其余三类为对照组;MTT法计数细胞,绘制MCF-7、ZR-75-1、MDA-MB-231细胞系生长曲线;MCF-7细胞系进行无血清悬浮培养1个周期,流式细胞仪检测分子表面标记物CD44^+CD24^-含量,贴壁培养的CD44^+CD24^-乳腺癌干细胞为对照组;将分选的MCF-7(CD44^+CD24^-)和分选的其余MCF-7细胞(非CD44^+CD24^-)进行干性成球实验,鉴定CD44^+CD24^-干性表达。结果:MCF-7、MDA-MB-231细胞系富含表面标志物CD44 -CD24^-的乳腺癌细胞;ZR-75-1细胞系富含分子表面标志物CD44^+CD24^+的乳腺癌细胞;生长曲线显示MCF-7、ZR-75-1、MDA-MB-231均呈持续增长,MDA-MB-231细胞生长较MCF-7、ZR-75-1细胞快;通过无血清悬浮培养CD44^+CD24^-乳腺癌干细胞由19.4%富集到88.9%;成球实验中CD44^+CD24^-表型细胞成球数量较分选的其余MCF-7细胞(非CD44^+CD24^-表型)明显增多,成球率分别为(36.5±1.7)%,(1.1±0.5)%。结论:流式细胞仪可成功分选出分子表面标志物为CD44^+CD24^-的乳腺癌干细胞;CD44^+CD24^-可能不是乳腺癌干细胞唯一的表面标志物;MDA-MB-231细胞系较MCF-7、ZR-75-1细胞系生长快;无血清悬浮培养法可简便、高效地富集乳腺癌干细胞;CD44^+CD24^-乳腺癌干细胞干性表达较强。 展开更多
关键词 乳腺癌干细胞 流式细胞仪 悬浮培养 富集 鉴定
在线阅读 下载PDF
悬浮培养瑞香狼毒不定芽过程中黄酮和香豆素类物质的累积
13
作者 夏美玲 姜红 +2 位作者 郭雯华 官旭杰 由香玲 《植物生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期457-465,共9页
本文以瑞香狼毒不定芽为材料,研究了在250 mL培养瓶悬浮培养过程中,影响其生长及活性物质(伞形花内酯、东莨菪内酯、总黄酮)积累的四类因子(蔗糖浓度、培养基强度、接种量、接种长度),初步建立了不定芽的悬浮培养体系。在此基础上,研究... 本文以瑞香狼毒不定芽为材料,研究了在250 mL培养瓶悬浮培养过程中,影响其生长及活性物质(伞形花内酯、东莨菪内酯、总黄酮)积累的四类因子(蔗糖浓度、培养基强度、接种量、接种长度),初步建立了不定芽的悬浮培养体系。在此基础上,研究了3 L生物反应器内,影响不定芽生长及活性物质积累的因素(蔗糖浓度、6-BA浓度、初始接种量)。结果显示,不定芽在250 mL培养瓶中悬浮培养周期是15 d,最佳蔗糖浓度、培养基强度、接种量、接种长度分别是30 g·L^-1、MS培养基、1.0 g、3 cm。在此培养条件下,不定芽中伞形花内酯、东莨菪内酯和黄酮累积量都在15 d达到最大值,分别为0.351、0.035和2.459 mg。3 L生物反应器内不定芽悬浮培养周期为24 d,最佳培养条件为蔗糖30 g·L^-1、6-BA 0.5 mg·L^-1和初始接种量15 g。此条件下,伞形花内酯、东莨菪内酯和黄酮累积量分别为6.041、0.763和51.334 mg。本研究建立了瑞香狼毒不定芽的小型生物反应器培养体系,为进一步大规模培养,高效生产上述三种活性物质奠定了基础。 展开更多
关键词 瑞香狼毒 悬浮培养 黄酮 香豆素
中草药植物组织培养形成有效成份的技术方法 预览
14
作者 徐世锋 王殿亭 《中兽医学杂志》 2018年第7期65-66,共2页
植物组织培养(Plant Tissue Culture)是应用无菌培养的方法培养植物的一个离体部分,也即是一种将自然环境中分离出来的植物细胞或组织放入含有合成培养基的瓶中,在无菌条件下使之生长或发育的方法。运用组织培养方法可以在比较简单易观... 植物组织培养(Plant Tissue Culture)是应用无菌培养的方法培养植物的一个离体部分,也即是一种将自然环境中分离出来的植物细胞或组织放入含有合成培养基的瓶中,在无菌条件下使之生长或发育的方法。运用组织培养方法可以在比较简单易观察的条件下研究细胞、组织或器官的繁殖、生长和分化,以及各种外界因素对它们的影响,从而为解决药物生产中的某些问题开辟了广阔的前景. 展开更多
关键词 愈伤组织 植物组织培养 悬浮培养 继代培养 基本培养 次生物质 药用成分 固体培养 原植物 无机盐类 中草药
在线阅读 下载PDF
水曲柳松散愈伤组织的悬浮培养和超低温保存
15
作者 梁雪 张佳薇 +3 位作者 赵兴堂 何利明 康雪 詹亚光 《分子植物育种》 CSCD 北大核心 2018年第16期5376-5385,共10页
以成熟水曲柳胚的三个不同部位作为外植体,利用四种不同类型培养基研究对水曲柳松散愈伤组织诱导产生的不同影响,选出适合诱导松散型和胚性愈伤组织的外植体与培养基组合,进一步探讨悬浮培养以及超低温保存的适宜条件,为水曲柳高效微繁... 以成熟水曲柳胚的三个不同部位作为外植体,利用四种不同类型培养基研究对水曲柳松散愈伤组织诱导产生的不同影响,选出适合诱导松散型和胚性愈伤组织的外植体与培养基组合,进一步探讨悬浮培养以及超低温保存的适宜条件,为水曲柳高效微繁打下基础。主要结果如下:(1)选出较为适宜诱导松散型愈伤组织培养基是WPM+1 mg/L NAA+0.8 mg/L 6-BA+1 g/L CH+20 g/L蔗糖+5.3 g/L琼脂。(2)水曲柳悬浮培养体系的建立确定悬浮培养的培养条件为:接种量为25 mL液体培养基中加入1.5 g愈伤组织,转速120 r/min、蔗糖浓度2%,细胞15 d后增殖1.41倍;悬浮组织直径在约2 mm时易于保持松散型细胞悬浮状态。(3)超低温冷冻保存,在-196℃条件下进行愈伤组织冷冻保存,保护剂采用30%甘油+15%乙二醇+15%DMSO+0.4 mol/L蔗糖时,解冻条件为40℃、暗培养,细胞生命力最高保持在83.3%,其中愈伤组织恢复生长率为3.0%。 展开更多
关键词 水曲柳 松散型愈伤组织 组织培养 悬浮培养 超低温冷冻保存
口蹄疫病毒细胞培养技术研究进展 预览 被引量:1
16
作者 李顺琴 杨君敬 +1 位作者 何诚 王贺民 《动物医学进展》 北大核心 2018年第1期90-94,共5页
口蹄疫病毒可以在原代细胞和传代细胞上增殖,传统培养采用贴壁培养方式,随着微载体技术、无血清培养基研制和悬浮培养技术的发展,无血清培养法和生物反应器自动化设施提高了口蹄疫病毒含量,降低了生产成本,但直接影响了动物免疫保护效... 口蹄疫病毒可以在原代细胞和传代细胞上增殖,传统培养采用贴壁培养方式,随着微载体技术、无血清培养基研制和悬浮培养技术的发展,无血清培养法和生物反应器自动化设施提高了口蹄疫病毒含量,降低了生产成本,但直接影响了动物免疫保护效力。随着基因编辑技术的发展,病毒种子毒、细胞株和细胞微环境研究突飞猛进,这为口蹄疫疫苗制备提供了新的技术支撑。论文介绍了口蹄疫病毒在原代细胞、传代细胞的增殖方式和营养特点,以及贴壁培养和悬浮培养的优缺点,为口蹄疫疫苗的研发和生产提供技术参考。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 原代细胞 传代细胞 贴壁培养 悬浮培养
在线阅读 下载PDF
Vero细胞生物反应器微载体悬浮培养工艺的建立
17
作者 盛程程 冯二凯 +2 位作者 任飞 李文娟 陈立志 《黑龙江畜牧兽医》 北大核心 2018年第1期186-189,257-258共6页
为了实现非洲绿猴肾细胞(Vero细胞)在生物反应器中的大规模生产,并使其可在以Vero细胞为细胞基质的病毒疫苗生产中应用,试验采用控制变量法对Vero细胞微载体悬浮培养相关参数进行逐一摸索研究。结果表明:在3~5 g微载体、1 L培养体系中,... 为了实现非洲绿猴肾细胞(Vero细胞)在生物反应器中的大规模生产,并使其可在以Vero细胞为细胞基质的病毒疫苗生产中应用,试验采用控制变量法对Vero细胞微载体悬浮培养相关参数进行逐一摸索研究。结果表明:在3~5 g微载体、1 L培养体系中,使用DMEM培养基、血清浓度为8%~10%、初始接种密度为30~50个/球,采用灌流式培养方式可使细胞达到最佳状态。说明成功建立了Vero细胞生物反应器的微载体悬浮培养工艺。 展开更多
关键词 非洲绿猴肾细胞 大规模 微载体 悬浮培养 生物反应器 疫苗 培养工艺
悬浮集簇培养与悬浮分散培养对肌源性干细胞增殖的影响
18
作者 于璐 杨晓楠 +5 位作者 徐筑秋 冯蔚枫 陆海滨 周经 黄慜璐 祁佐良 《中国医药》 2018年第7期1095-1098,共4页
目的在悬浮培养肌源性干细胞(MDSC)的基础上初步探讨集簇与分散培养对MDSC增殖活性的影响。方法采取2周龄C57BL/6小鼠四肢骨骼肌,用机械法与多步酶消化法制备细胞悬液进行悬浮培养,在培养过程中分别吹打(分散培养组)与静置(集簇... 目的在悬浮培养肌源性干细胞(MDSC)的基础上初步探讨集簇与分散培养对MDSC增殖活性的影响。方法采取2周龄C57BL/6小鼠四肢骨骼肌,用机械法与多步酶消化法制备细胞悬液进行悬浮培养,在培养过程中分别吹打(分散培养组)与静置(集簇培养组)。光镜观察与细胞计数统计增殖数量。流式细胞检测与分化实验验证细胞干性。结果集簇培养组MDSC呈团簇状,细胞表面光滑,呈小球形,折光率高;分散培养组细胞呈单个或小团簇状,细胞表面光滑,小球形,高折光,偶见细胞皱缩。细胞计数结果显示悬浮集簇培养pp2细胞数量(4.0±0.5)×105个,悬浮分散培养pp2细胞数量(4.2±0.7)×105个,悬浮集簇培养pp6细胞数量(14.9±0.7)×105个,悬浮分散培养pp6细胞数量(10.5±1.3)×105个,分别增加至约3.7倍和2.5倍,悬浮集簇培养增殖量约是分散培养组的1.7倍,差异有统计学意义(P<0.05)。流式细胞检测发现集簇培养表面干性标记物表达量更高。结论悬浮集簇培养较分散培养获得细胞量更多,细胞干性更好。 展开更多
关键词 肌源性干细胞 悬浮培养 集簇 分散
K^+/Na^+浓度比对罗汉果悬浮细胞生长和甜苷V合成的影响
19
作者 陈雨霞 王泽建 +3 位作者 肖慈英 庄英萍 宋云飞 郭美锦 《植物生理学报》 CSCD 北大核心 2018年第5期812-818,共7页
本文研究了不同K^+/Na^+浓度比对罗汉果悬浮细胞生长和甜苷V合成的影响。结果表明,合适的K^+/Na^+浓度比促进细胞生长和甜苷V生物合成。当K^+/Na^+最佳浓度比为15:1时,罗汉果悬浮细胞内K^+浓度、K^+/Na^+、S(K,Na)值均为最... 本文研究了不同K^+/Na^+浓度比对罗汉果悬浮细胞生长和甜苷V合成的影响。结果表明,合适的K^+/Na^+浓度比促进细胞生长和甜苷V生物合成。当K^+/Na^+最佳浓度比为15:1时,罗汉果悬浮细胞内K^+浓度、K^+/Na^+、S(K,Na)值均为最大,此时细胞利用K^+效率最高,细胞生长速率最快。此外,胞外有机酸和胞内氨基酸的变化表明此浓度比例下,细胞可能通过降低TCA循环代谢强度,以及增强EMP途径和MVA途径代谢强度,从而促进萜类化合物前体乙酰CoA向罗汉果甜苷V合成。 展开更多
关键词 罗汉果 悬浮培养 K^+/Na^+浓度比 甜苷V生物合成
新疆橡胶草胚性悬浮细胞体系的建立 预览
20
作者 朱乐乐 杨露露 +3 位作者 任汝豪 杨青哲 张慧艳 闫洁 《北方农业学报》 2018年第6期32-37,共6页
为了建立良好的橡胶草(Taraxacumkok-saghyz Rodin)悬浮细胞培养体系,以橡胶草无菌苗为材料,探究橡胶草悬浮细胞生长变化过程,结果表明:在50mLMS液体培养基中最适接种量为0.6g,最佳继代时间是12d,可以获得稳定的胚性悬浮细胞体系,再生... 为了建立良好的橡胶草(Taraxacumkok-saghyz Rodin)悬浮细胞培养体系,以橡胶草无菌苗为材料,探究橡胶草悬浮细胞生长变化过程,结果表明:在50mLMS液体培养基中最适接种量为0.6g,最佳继代时间是12d,可以获得稳定的胚性悬浮细胞体系,再生率最高达到87.5%,为橡胶草的遗传再生体系奠定基础。 展开更多
关键词 橡胶草 悬浮培养 植株再生
在线阅读 免费下载
上一页 1 2 61 下一页 到第
使用帮助 返回顶部 意见反馈