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Paenibacillus puldeungensis LK18普鲁兰酶基因的克隆表达及酶学性质研究 预览
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作者 苏红玉 崔堂兵 《现代食品科技》 EI CAS 北大核心 2019年第7期107-113,35共8页
本研究根据类芽孢杆菌的普鲁兰酶基因的保守区设计兼并引物,从Paenibacillus puldeungensis LK18中扩增出普鲁兰酶基因(pulA),将其连接至pET-28a(+)载体上,构建出重组表达载体pET-28a(+)-pulA,转入到Escherichia coli BL21(DE3)中,成功... 本研究根据类芽孢杆菌的普鲁兰酶基因的保守区设计兼并引物,从Paenibacillus puldeungensis LK18中扩增出普鲁兰酶基因(pulA),将其连接至pET-28a(+)载体上,构建出重组表达载体pET-28a(+)-pulA,转入到Escherichia coli BL21(DE3)中,成功地表达了重组普鲁兰酶。结果表明:该普鲁兰酶基因全长1968 bp,编码655个氨基酸。通过Ni柱亲和层析纯化出重组蛋白,测定其比酶活为508.8 U/mg,分子量约为76.95 ku。该重组酶的最适反应温度为45℃,在35℃~40℃下保温120 min后剩余酶活达60%以上;最适作用pH为6.0,在pH 6.0~8.0条件具有较好的稳定性;10 mmol/L的K^+和Mg^2+对该重组普鲁兰酶有激活作用,而Zn^2+、Mn^2+、Ni^2+、Fe^2+、Cu^2+、Co^2+、Ca^2+等对其有不同程度的抑制作用。本研究成功地构建出一株可高效表达普鲁兰酶的重组菌株,具备一定的工业应用价值。 展开更多
关键词 PAENIBACILLUS puldeungensis 普鲁兰 克隆表达 学性质
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新型耐热耐酸普鲁兰酶的分离纯化与酶学特性分析 预览
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作者 高兆建 陈雪莲 +5 位作者 王先凤 许祥 李宝林 焦魏 芦宁 尚业成 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2019年第4期75-81,共7页
从泡盛曲霉(Aspergillus awamori) XF发酵液中分离纯化普鲁兰酶(PulXF)并研究其酶学性质。通过硫酸铵沉淀、阴离子交换层析、凝胶过滤层析和疏水层析,纯化得到一种电泳纯的PulXF。纯化倍数8.16倍,比活力为309.28 U/mg。SDS-PAGE检测得... 从泡盛曲霉(Aspergillus awamori) XF发酵液中分离纯化普鲁兰酶(PulXF)并研究其酶学性质。通过硫酸铵沉淀、阴离子交换层析、凝胶过滤层析和疏水层析,纯化得到一种电泳纯的PulXF。纯化倍数8.16倍,比活力为309.28 U/mg。SDS-PAGE检测得单条带,表明PulXF为单亚基蛋白,分子量63.7 kDa。在50-80℃,pH4.58.0范围内,酶能保持高活性,最适反应温度60℃,最适pH5.0。在较广的pH范围内(pH3.08.0),28℃下,经过24 h酶活能保持80%以上活性。Km值和Vmax分别为0.92 mg/mL和11.90μmol/min。酶活测定及TLC分析显示PulXF对普鲁兰多糖有强水解活性,终产物麦芽三糖;对支链淀粉和可溶性淀粉有较弱活性,对直链淀粉、α-环糊精、β-环糊精和糖原无活性。表明从泡盛曲霉XF分离的PulXF属于Ⅰ型普鲁兰酶。Ca2+、Zn2+和Mg2+能够促进酶的活性,其中Ca2+激活作用最强。而PulXF在5%浓度的SDS、CTAB、Tween 80和30%的乙醇中保持高稳定性。基于PulXF在苛刻环境下的高稳定性及高活性,很有希望在淀粉加工、食品饮料等领域以及需要在高温、高酸环境下使用的生物技术工业中使用。 展开更多
关键词 普鲁兰 泡盛曲霉XF 分离纯化 学性质
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启动子及信号肽筛选提高普鲁兰酶在地衣芽孢杆菌中的表达
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作者 王倩 初晓宇 +1 位作者 朱宝成 伍宁丰 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期61-69,共9页
普鲁兰酶(pullulanase)是一种淀粉脱支酶,在淀粉糖化加工等工业生产中具有重要的应用价值。选用地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis) BL10作为表达宿主,为了提高其中的普鲁兰酶产量,对来自枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis) 168和地衣... 普鲁兰酶(pullulanase)是一种淀粉脱支酶,在淀粉糖化加工等工业生产中具有重要的应用价值。选用地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis) BL10作为表达宿主,为了提高其中的普鲁兰酶产量,对来自枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis) 168和地衣芽孢杆菌BL10中的15种不同信号肽以及4种不同启动子进行筛选,构建了不同的重组工程菌株,最终发现在以P43为启动子、apr为信号肽的条件下,上清液中普鲁兰酶的表达量最高,酶活可达12 U/m L,且测得其最适反应温度为60℃,最适p H为4.5。结果表明通过对启动子及信号肽进行筛选是提高重组工程菌株中目的蛋白表达量的一种有效手段。 展开更多
关键词 地衣芽孢杆菌 普鲁兰 启动子 信号肽
一种中性普鲁兰酶的高效表达及重组酶在粉丝制作中的应用 预览
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作者 王婕 朱新文 +4 位作者 德青美朵 姚雁 沈微 陈献忠 樊游 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2019年第14期122-127,共6页
为获得适合粉丝制作工艺的普鲁兰酶,研究了嗜热脂肪土芽孢杆菌(Geobacillus stearothermophilus)普鲁兰酶基因GsP在不同枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)宿主菌中的表达及重组酶的应用效果。分别以淀粉酶基因缺失的枯草芽孢杆菌1A717和... 为获得适合粉丝制作工艺的普鲁兰酶,研究了嗜热脂肪土芽孢杆菌(Geobacillus stearothermophilus)普鲁兰酶基因GsP在不同枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)宿主菌中的表达及重组酶的应用效果。分别以淀粉酶基因缺失的枯草芽孢杆菌1A717和蛋白酶基因缺失的菌株WB600为宿主菌,构建了表达GsP的重组菌,酶活检测和SDS-PAGE分析表明,两种重组菌产生的普鲁兰酶均为胞外酶,分别命名为GsP1a和GsPwb。两种重组酶分别用于粉丝制作,以GsP1a处理的芡糊制作的粉丝成品断条率接近于0,由GsPwb处理的芡糊制作的粉丝断条率高于前者,这可能与宿主菌WB600在发酵过程中产生的α-淀粉酶有关。该研究表明,中性普鲁兰酶是粉丝制作中明矾的理想替代物,酶液中α-淀粉酶活性的去除有利于其应用性能的提升。 展开更多
关键词 普鲁兰 嗜热脂肪土芽孢杆菌 马铃薯粉丝
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淀粉酶组合对肉鸡生产性能、肠道形态和屠宰性能的影响
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作者 郭玉光 杨博 +4 位作者 王敏 冯新雨 陈书琴 朱子昕 杜红方 《畜牧与兽医》 北大核心 2019年第4期17-22,共6页
试验旨在研究α-1,4-淀粉酶、普鲁兰酶和糖化酶组合对肉鸡生长性能、肠道形态和屠宰性能的影响。选取1 960羽1日龄健康罗斯308肉仔鸡,随机分为7个处理,每个处理4个重复,每个重复70羽。对照组饲喂基础饲粮,试验1组在基础饲粮中添加1 800 ... 试验旨在研究α-1,4-淀粉酶、普鲁兰酶和糖化酶组合对肉鸡生长性能、肠道形态和屠宰性能的影响。选取1 960羽1日龄健康罗斯308肉仔鸡,随机分为7个处理,每个处理4个重复,每个重复70羽。对照组饲喂基础饲粮,试验1组在基础饲粮中添加1 800 IU/kgα-1,4-淀粉酶,试验2组在基础饲粮中添加180 IU/kg普鲁兰酶,试验3组在基础饲粮中添加135 000 IU/kg糖化酶,试验4组在基础饲粮中添加1 800 IU/kgα-1,4-淀粉酶+135 000 IU/kg糖化酶,试验5组在基础饲粮中添加1 800 IU/kgα-1,4-淀粉酶+180 IU/kg的普鲁兰酶,试验6组在基础饲粮中添加1 800 IU/kgα-1,4-淀粉酶+135 000 IU/kg糖化酶+180 IU/kg普鲁兰酶。结果表明:与对照组相比,试验6组1~21日龄和22~42日龄阶段末重、日增重显著提高(P<0.05),22~42日龄阶段试验1、2、3、4、6组耗料增重比(FCR)显著下降(P<0.05);试验3组空肠绒毛高度/隐窝深度(VH/CD)显著高于对照组(P<0.05)和试验1组(P<0.05);试验1、4组回肠VH/CD显著高于对照组(P<0.05);各组间屠宰性能差异不显著。试验结果表明,α-1,4-淀粉酶、糖化酶和普鲁兰酶在肉鸡体内存在互作效应,α-1,4-淀粉酶、糖化酶和普鲁兰酶组合添加对肉鸡的促生长效果优于单一类型淀粉酶。 展开更多
关键词 α-1 4-淀粉 糖化 普鲁兰 肉鸡 生长性能 肠道形态 屠宰性能
科研就是在孤独与寂寞中默默前行——记“中国科学院天津工业生物技术研究所”宋诙团队
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作者 韩爱青 《高科技与产业化》 2019年第1期22-25,共4页
近日,2018中国科技产业化促进会创新影响力论坛暨科学技术奖颁奖仪式在北京举行,由中国科学院天津工业生物技术研究所等单位联合研究的项目'三效复合饲用抗生素替代技术'获得了2017~2018年度科技创新一等奖。中国科学院天津工... 近日,2018中国科技产业化促进会创新影响力论坛暨科学技术奖颁奖仪式在北京举行,由中国科学院天津工业生物技术研究所等单位联合研究的项目'三效复合饲用抗生素替代技术'获得了2017~2018年度科技创新一等奖。中国科学院天津工业生物技术研究所研究员宋诙,就是该项目的主要研发人员之一。作为实验室一级项目负责人,宋诙带领实验室团队从2009年开始在工业酶和生物饲料方面进行了多项研究,取得了很多的成果。她常说'科学研究就是要求我们能够耐得住孤独与寂寞',的确,往往一个小的实验成果就需要反复几个月甚至更长时间的研究才可以得出结果. 展开更多
关键词 生物技术研究所 耐得住 印染前处理 骨明胶 法制备 法工艺 普鲁兰 科学院
红曲黄酒来源芽孢杆菌普鲁兰酶基因克隆和生物信息学分析 预览 被引量:1
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作者 徐友强 孙宝国 +7 位作者 蒋玥凤 侯洁 许春艳 王文华 滕超 熊科 范光森 李秀婷 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第2期117-125,共9页
红曲黄酒酿造原料为大米,淀粉质量分数在70%以上,微生物来源淀粉酶系对淀粉的水解至关重要,影响甚至决定红曲黄酒酿造的原料转化过程和产品品质。从酒曲中分离具有淀粉水解能力的芽孢杆菌2株,编号BHQ03和BHQ06,进行分子生物学鉴定并分别... 红曲黄酒酿造原料为大米,淀粉质量分数在70%以上,微生物来源淀粉酶系对淀粉的水解至关重要,影响甚至决定红曲黄酒酿造的原料转化过程和产品品质。从酒曲中分离具有淀粉水解能力的芽孢杆菌2株,编号BHQ03和BHQ06,进行分子生物学鉴定并分别从2株菌中克隆获得pulL1和pulL2,pulL3和pulL4共4个I型普鲁兰酶基因,其中基因pulL1和pulL3均编码713个氨基酸,序列相似度96.31%,基因pulL2和pulL4均编码852个氨基酸,序列相似度99.77%。对基因pulL1和pulL2编码蛋白PulL1和PulL2进一步分析发现,二者均属于G13家族,具有4段特征性保守区域。PulL2的N-端含有32个氨基酸残基的信号肽序列,且催化活性位点存在突变(D407G)。结合文献研究和三维结构模拟,分析普鲁兰酶的具体催化过程。上述研究为科学解析红曲黄酒酿造的淀粉水解过程提供参考。 展开更多
关键词 红曲黄酒 芽孢杆菌 淀粉水解 普鲁兰 生物信息学分析
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短链葡聚糖-姜黄素纳米乳液的制备及结构表征 预览
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作者 冯涛 曾小兰 +1 位作者 王珂 Osvaldo Campanella 《农业工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第1期303-309,共7页
利用短链葡聚糖(short glucan chains,SGC)的螺旋空间结构来包埋姜黄素(curcumin,CUR)。通过使用高剪切分散乳化机高速剪切溶液5min,用纳米均质机在50MPa压力下高压均质经剪切后的乳液2次制备成纳米乳液以提高其包埋率和载药量。XRD(x-r... 利用短链葡聚糖(short glucan chains,SGC)的螺旋空间结构来包埋姜黄素(curcumin,CUR)。通过使用高剪切分散乳化机高速剪切溶液5min,用纳米均质机在50MPa压力下高压均质经剪切后的乳液2次制备成纳米乳液以提高其包埋率和载药量。XRD(x-ray diffraction)和TGA(thermogravimetric analysis)很好的验证了包合物的形成,通过TGA、SEM(scanning electron microscopy)、激光粒径分析仪等各种表征分析得出短链葡聚糖-姜黄素纳米乳液制备成功,所制得的乳液对姜黄素的包埋率和载药量都高于短链葡聚糖-姜黄素包合物,分别达到了71.11%和12.07%,说明制备成纳米乳液对姜黄素的包埋率和载药量都有了明显的提高。所制备的纳米乳液的粒径小于300nm,粒径分布均一,Zeta电位观测表明所制得的乳液的稳定性有所提高。为提高食品及医药领域姜黄素的生物利用率提供了一定的参考意义。 展开更多
关键词 乳液 纳米包合材料 微观结构 蜡质玉米淀粉 短链葡聚糖 普鲁兰 姜黄素 纳米乳液
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酶制剂在玉米木薯混合原料酒精发酵中的应用研究 预览
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作者 郑彬 刘燕 +3 位作者 张彩莹 史利娟 刘钺 李勇 《酿酒科技》 2019年第1期71-75,85共6页
研究玉米木薯混合原料酒精发酵中添加酸性蛋白酶、普鲁兰酶、木聚糖酶的作用效果。通过单因素试验及正交优化试验确定了3种酶制剂的最佳添加量:酸性蛋白酶16U/g原料、木聚糖酶170U/g原料、普鲁兰酶20U/g原料。添加复合酶制剂可以提高酵... 研究玉米木薯混合原料酒精发酵中添加酸性蛋白酶、普鲁兰酶、木聚糖酶的作用效果。通过单因素试验及正交优化试验确定了3种酶制剂的最佳添加量:酸性蛋白酶16U/g原料、木聚糖酶170U/g原料、普鲁兰酶20U/g原料。添加复合酶制剂可以提高酵母菌数量、加快醪液过滤速度、缩短发酵时间、提高拌料浓度及淀粉利用率。发酵条件优化试验表明,在接种时添加复合酶制剂,发酵料水比为1∶2.1、发酵醪液初始pH值为5.0、发酵时间为56h。 展开更多
关键词 混合原料 酸性蛋白 普鲁兰 木聚糖 酒精发酵
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普鲁兰酶产生菌的诱变选育及其发酵工艺的优化 预览
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作者 卢佳琦 李市场 +2 位作者 刘永康 冯腾柱 王大红 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期705-712,共8页
为了提高普鲁兰酶产酶酶活,以GX-6为出发菌株,采用低能离子束修饰技术对其进行诱变,并通过响应面法优化其发酵培养基。结果表明,最佳离子束诱变参数为:注入能量10 keV、诱变剂量1×1015ions·cm-2、诱变时间38 s,此条件下菌株... 为了提高普鲁兰酶产酶酶活,以GX-6为出发菌株,采用低能离子束修饰技术对其进行诱变,并通过响应面法优化其发酵培养基。结果表明,最佳离子束诱变参数为:注入能量10 keV、诱变剂量1×1015ions·cm-2、诱变时间38 s,此条件下菌株正突变率比负突变率高,利用离子束诱变技术反复诱变,最终获得一株普鲁兰酶酶活较高且遗传性稳定的突变菌株GX-6-2,其酶活为2. 13 U·mL-1,较出发菌株酶活(0. 65 U·mL-1)提高了2. 28倍。由Plackett-Burmen试验分析得到影响普鲁兰酶酶活的3个显著因素分别是玉米淀粉、麦芽糖和吐温-80。通过响应面试验得到最佳发酵培养参数为:玉米淀粉56. 5g·L-1、麦芽糖11. 5 g·L-1、吐温-80 1. 0 mL·L-1、黄豆饼粉25 g·L-1、pH值7. 0、发酵温度37℃、接种量3%、发酵时间24 h、装液量50 mL、转速180 r·min-1,此条件下诱变菌株的酶活为2. 57 U·mL-1,较出发菌株酶活提高了2. 95倍。对突变菌株的发酵特性进行初步研究发现,发酵培养24 h时,突变菌株酶活达到2. 67 U·mL-1,较出发菌株提高了3. 11倍。本研究结果为利用低能离子束修饰技术诱变选育普鲁兰酶产生菌提供了一定的理论参考。 展开更多
关键词 低能离子束 诱变 普鲁兰 响应面试验
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不同淀粉脱支酶对菠萝蜜种子淀粉分子结构的影响及糊化特性研究 预览
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作者 张雨桐 张彦军 +2 位作者 徐飞 谭乐和 李士泽 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2019年第1期150-157,共8页
采用普鲁兰酶和异淀粉酶制备脱支菠萝蜜种子淀粉(debranched jackfruit seed starch,DS)及脱支菠萝蜜种子支链淀粉(debranched jackfruit seed amylopectin,DAP),旨在研究所得DS 和DAP 之间的差异。结果表明,DS 具有较宽的分子量分布,而... 采用普鲁兰酶和异淀粉酶制备脱支菠萝蜜种子淀粉(debranched jackfruit seed starch,DS)及脱支菠萝蜜种子支链淀粉(debranched jackfruit seed amylopectin,DAP),旨在研究所得DS 和DAP 之间的差异。结果表明,DS 具有较宽的分子量分布,而DAP 具有较窄的分子量分布。普鲁兰酶水解α-1,6 糖苷键更完全,所以普鲁兰酶DS 和DAP 平均分子量更低。普鲁兰酶水解较短侧链更有效,异淀粉酶则可水解外分支链。异淀粉酶DAP 具有高比例B2 链、B3 链和长平均链长,导致其具有低的峰值黏度、谷值黏度、崩解值、最终黏度和回生值,但糊化温度高。因此,淀粉脱支酶的选择和直链/支链淀粉组成均能导致淀粉分子结构和糊化特性显著不同(p<0.05),可根据特定需要选择合适制备方法增强或抑制菠萝蜜种子淀粉固有性质或赋予其新的特定性质。 展开更多
关键词 菠萝蜜种子淀粉 脱支淀粉 普鲁兰 异淀粉 分子结构 糊化特性
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鲜淮山抗性淀粉的研究
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作者 何丽君 余远江 +3 位作者 谢承孟 陈军 龙琳 韦金娜 《轻工科技》 2019年第2期7-9,共3页
为了提高鲜淮山抗性淀粉的含量,该研究以鲜淮山为原料,采用压热-双酶解法制备抗性淀粉,通过单因素试验确定鲜淮山抗性淀粉的最佳制备条件为:25%淀粉乳在105℃压热50min,添加耐热α-淀粉酶0.288 KNU/g,作用15 min,添加普鲁兰酶3U/g,作用... 为了提高鲜淮山抗性淀粉的含量,该研究以鲜淮山为原料,采用压热-双酶解法制备抗性淀粉,通过单因素试验确定鲜淮山抗性淀粉的最佳制备条件为:25%淀粉乳在105℃压热50min,添加耐热α-淀粉酶0.288 KNU/g,作用15 min,添加普鲁兰酶3U/g,作用4h,老化时间24h。该条件下抗性淀粉的质量分数为43%。 展开更多
关键词 鲜淮山 抗性淀粉 耐热α-淀粉 普鲁兰
一株产普鲁兰酶菌株的筛选鉴定、酶学性质及海带多糖酶解产物的抗氧化活性 预览
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作者 吴永 王淑军 +4 位作者 吕明生 房耀维 刘姝 严翠 焦豫良 《食品工业科技》 CSCD 北大核心 2018年第17期106-111,共6页
本研究从连云港海泥中筛选产普鲁兰酶菌株,利用形态学、生理生化特征、基因序列(16S rRNA和gyr B)进行分析鉴定。利用产酶菌株发酵制备普鲁兰酶,初步纯化后分析其酶学性质。利用该普鲁兰酶粗提物对海带多糖进行水解,并对其水解产物进... 本研究从连云港海泥中筛选产普鲁兰酶菌株,利用形态学、生理生化特征、基因序列(16S rRNA和gyr B)进行分析鉴定。利用产酶菌株发酵制备普鲁兰酶,初步纯化后分析其酶学性质。利用该普鲁兰酶粗提物对海带多糖进行水解,并对其水解产物进行抗氧化活性分析。结果表明:筛选得到一株产普鲁兰酶的巨大芽孢杆菌P6(Bacillus megaterium),经发酵纯化后普鲁兰酶比活力为62.3 U/mg,分子量约为43 k Da。该酶的最适反应温度为45℃,最适p H为6.5,在温度40℃下保温5 h,相对残余酶活达95%以上,而60℃下保温1 h,酶全部失活。在p H6-7.5之间保温12 h后,该酶仍有40%以上的相对残余酶活。DPPH和·OH自由基清除实验表明:海带多糖经普鲁兰酶水解后抗氧化活性显著增强(p〈0.05),为普鲁兰酶在食品工业中的应用研究提供了新的方向。 展开更多
关键词 普鲁兰 筛选鉴定 纯化 学性质 海带多糖解产物 抗氧化活性
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极端嗜热菌Thermosipho melanesiensis普鲁兰酶基因的异源表达与酶学性质分析 预览
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作者 王明道 邢岩 +3 位作者 邱爽 王红阳 孙利鹏 邱立友 《信阳师范学院学报:自然科学版》 北大核心 2018年第2期197-202,共6页
择来源于极端嗜热菌Thermosipho melanesiensis(DSM12029)的普鲁兰酶基因,以购自德国菌种保藏中心的基因组为模板,扩增出普鲁兰酶基因TM-pulA;利用酶切酶连构建了重组质粒pET21a-TM-pulA;转入大肠杆菌Rosetta(DE3)菌株中诱导表达并经纯... 择来源于极端嗜热菌Thermosipho melanesiensis(DSM12029)的普鲁兰酶基因,以购自德国菌种保藏中心的基因组为模板,扩增出普鲁兰酶基因TM-pulA;利用酶切酶连构建了重组质粒pET21a-TM-pulA;转入大肠杆菌Rosetta(DE3)菌株中诱导表达并经纯化后,进行了水解产物分析和酶学性质测定.结果显示:TM-pulA为Ⅰ型普鲁兰酶,最适pH为5.8;最适温度是80℃;70℃下半衰期为4.75 h;Mn 2+、Co 2+、AL 3+、Fe 3+、SDS及EDTA对其酶活有不同程度的抑制作用;该酶的K m、V max、K cat及K cat/K m值分别为4.68 g·L-1、0.0085 mmol·L-1·s-1、71.18 s-1、15.21 L·g-1·s-1. 展开更多
关键词 普鲁兰 Thermosipho melanesiensis 异源表达 学性质
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普鲁兰酶酶解处理红薯淀粉及其性质研究 预览 被引量:1
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作者 刘程玲 胡煜莹 +1 位作者 王力翾 王鲁峰 《中国粮油学报》 CSCD 北大核心 2018年第2期6-11,共6页
以红薯淀粉为研究对象,分析普鲁兰酶酶解处理对红薯淀粉性质的影响。结果显示采用普鲁兰酶酶解脱支处理后,红薯直链淀粉质量分数增加了8.57%。对酶解前后淀粉的理化性质、微观颗粒形态、糊化和老化特性以及凝胶特性等进行分析比较,发现... 以红薯淀粉为研究对象,分析普鲁兰酶酶解处理对红薯淀粉性质的影响。结果显示采用普鲁兰酶酶解脱支处理后,红薯直链淀粉质量分数增加了8.57%。对酶解前后淀粉的理化性质、微观颗粒形态、糊化和老化特性以及凝胶特性等进行分析比较,发现酶解后淀粉颗粒表面出现空穴,呈现出不规则的多边形,增加了反应位点;酶解后淀粉溶解度、膨润力降低,淀粉颗粒内部键结合力增强,透光率增加显著,凝沉性增强;酶解后淀粉糊化特性和凝胶特性发生变化,淀粉稳定性增强,高温下耐剪切力增强,硬度增大;淀粉热力学性质:起始糊化温度由63.70℃增加到71.75℃、峰值糊化温度由72.35℃增加到76.20℃、终止糊化温度和糊化焓都升高;还发现酶解后淀粉老化度有增加。粉丝品质会受到原料直链淀粉含量的影响,酶解红薯淀粉在提升红薯粉丝品质方面具有应用前景。 展开更多
关键词 普鲁兰 红薯 淀粉
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Thermotoga petrophila普鲁兰酶基因的异源表达与酶学性质分析 预览
16
作者 邢岩 邱爽 +3 位作者 聂慧慧 孙利鹏 邱立友 王明道 《河南农业大学学报》 CSCD 北大核心 2018年第3期404-411,423共9页
通过生物信息学筛选出来源于超嗜热菌Thermotoga petrophila(DSM13995)的普鲁兰酶基因,以从德国菌种保藏中心购买的基因组作为出发材料,克隆出普鲁兰酶基因TP-pul A;通过二步PCR方法构建含有该嗜热普鲁兰酶基因的载体pET21a-TP-pul A... 通过生物信息学筛选出来源于超嗜热菌Thermotoga petrophila(DSM13995)的普鲁兰酶基因,以从德国菌种保藏中心购买的基因组作为出发材料,克隆出普鲁兰酶基因TP-pul A;通过二步PCR方法构建含有该嗜热普鲁兰酶基因的载体pET21a-TP-pul A;将重组质粒转入大肠杆菌Rosetta(DE3)中测定其酶学性质。结果表明,TP-pul A为Ⅰ型普鲁兰酶,最适pH值为6.4,最适温度是85℃,半衰期为26.28 h,Na~+、K~+、Ca~(2+)、Mg~(2+)对其酶活性有明显的促进作用,Mn~(2+)、Co~(2+)、AL~(3+)、Fe~(3+)、SDS及EDTA对酶活性有不同程度的抑制作用,Km、Vmax、Kcat及Kcat/Km值分别为0.72 g·L-1、0.004 9 mmol·L~(-1)·s~(-1)、154.63 s~(-1)、214.76 L·g~(-1)·s~(-1)。本研究采用的生物信息学方法比传统的筛菌方法简单方便耗时短,且获得的嗜热普鲁兰酶的热稳定性好、催化效率高、对普鲁兰糖有较强的底物亲和能力,具有良好的应用前景。 展开更多
关键词 超嗜热菌 普鲁兰 THERMOTOGA petrophila 异源表达 学性质分析
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一株不动杆菌产普鲁兰酶的分离纯化及酶学性质的研究
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作者 朱梦 孙海彦 彭明 《轻工科技》 2018年第11期1-4,共4页
微生物所产的普鲁兰酶用途广泛,但国内对普鲁兰酶的研究水平不够深入,使其工业化应用受到了极大的限制。通过硫酸铵分级沉淀,Sephadex G-75层析和DEAE SepHarose Fast Flow强阴离子柱层析技术,对提取的普鲁兰酶进行初步的分离纯化,得到... 微生物所产的普鲁兰酶用途广泛,但国内对普鲁兰酶的研究水平不够深入,使其工业化应用受到了极大的限制。通过硫酸铵分级沉淀,Sephadex G-75层析和DEAE SepHarose Fast Flow强阴离子柱层析技术,对提取的普鲁兰酶进行初步的分离纯化,得到普鲁兰酶纯酶。对该酶的酶学性质进行研究,结果表明,普鲁兰酶最适的硫酸铵分级沉淀浓度为60%,该普鲁兰酶的最适温度为50℃;酶的最适作用pH为8.0;在55℃至60℃之间酶活力稳定最好;在pH7.0-9.0范围内保持较稳定的活性;Ca2+对酶激活作用最强,Ba2+对酶的抑制作用较强;普鲁兰糖作底物时该酶活性最强。 展开更多
关键词 不动杆菌 普鲁兰 分离纯化 学性质
普鲁兰酶在制备麦芽糖浆中的应用研究 预览
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作者 曹玉华 王关斌 +3 位作者 李玉珍 杜瑞锋 黄伟红 李杰 《山东化工》 CAS 2018年第23期41-43,共3页
本文通过优选的普鲁兰酶1#与β-淀粉酶协同作用于淀粉液化液,制备较高纯度的麦芽糖浆,其优选的工艺条件为pH值5.5、温度60℃、β-淀粉酶添加量1.3kg/tds、普鲁兰酶添加量1.0kg/tds,在此条件下,酶解淀粉液化液,能够得到麦芽糖含量为78.7... 本文通过优选的普鲁兰酶1#与β-淀粉酶协同作用于淀粉液化液,制备较高纯度的麦芽糖浆,其优选的工艺条件为pH值5.5、温度60℃、β-淀粉酶添加量1.3kg/tds、普鲁兰酶添加量1.0kg/tds,在此条件下,酶解淀粉液化液,能够得到麦芽糖含量为78.768%的酶解液。 展开更多
关键词 麦芽糖浆 普鲁兰 Β-淀粉
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日粮添加不同水平普鲁兰酶对临武鸭生长性能、养分利用率和器官指数的影响 预览
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作者 林谦 李闯 +3 位作者 张旭 侯振平 蒋桂韬 戴求仲 《饲料工业》 北大核心 2018年第6期10-14,共5页
为研究日粮不同普鲁兰酶水平对3~28日龄雌性临武鸭生长性能、养分利用率和器官指数的影响,试验选取体重接近的健康3日龄雌性临武鸭480只,随机分为6个处理,处理Ⅰ为饲喂基础日粮的对照组,处理Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、V和处理Ⅵ则分别在基础日... 为研究日粮不同普鲁兰酶水平对3~28日龄雌性临武鸭生长性能、养分利用率和器官指数的影响,试验选取体重接近的健康3日龄雌性临武鸭480只,随机分为6个处理,处理Ⅰ为饲喂基础日粮的对照组,处理Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、V和处理Ⅵ则分别在基础日粮基础上添加100、150、200、250g/t和300g/t酶制剂,每处理设5个重复,每重复16只鸭,试验全期为25d。结果表明:①日粮不同普鲁兰酶添加水平对3~28日龄临武鸭生长性能各指标均无显著影响(P〉O.05)。添加100g/t和150g/t普鲁兰酶的2个试验处理试鸭平均日增重较对照处理Ⅰ分别高出2.15%和0.87%。另外,处理Ⅱ、Ⅳ和Ⅵ试鸭的料重比均低于对照处理I。②日粮添加不同水平普鲁兰酶对临武鸭干物质、粗蛋白质、粗脂肪、粗纤维、中性洗涤纤维及酸性洗涤纤维的表观利用率均无显著性影响(P〉0.05),处理Ⅱ试鸭的表观代谢能最高,分别较对照处理Ⅰ和处理Ⅲ、Ⅳ、V、Ⅵ提高了0.24%、8.09%、17.59%(P〈0.05)、6.45%、26.62%(P〈0.05)。③日粮添加不同水平普鲁兰酶对28日龄临武鸭的脾脏、法氏囊、胰腺、肝脏、心脏、腺胃、肠道指数及肠道长度指数均无显著影响(P〉0.05),而处理Ⅳ试鸭的肌胃指数最高,且显著高于处理Ⅴ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅴ(P〈0.05)。综合表明,以生长性能、养分表观利用率和器官指数作为评价指标,本试验条件下,3—28日龄临武鸭日粮普鲁兰酶添加水平在100-200g/t为宜。 展开更多
关键词 临武鸭 普鲁兰 生长性能 养分表观利用率 器官指数
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普鲁兰酶N端结构域CBM68对酶学性质的影响
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作者 曾艳 郑宏臣 +3 位作者 付晓平 徐健勇 宋诙 刘方 《南开大学学报:自然科学版》 CSCD 北大核心 2018年第4期93-99,共7页
碳水化合物结合模块(Carbohydrate Binding Modules,CBMs)在普鲁兰酶结构中普遍存在,对酶的催化性质起重要作用.本文将酸性普鲁兰酶Pul B的N端结构域CBM41-X45替换成耐热普鲁兰酶Pul A的N端结构域CBM68,得到重组酶Pul-11,同时将Pul-1... 碳水化合物结合模块(Carbohydrate Binding Modules,CBMs)在普鲁兰酶结构中普遍存在,对酶的催化性质起重要作用.本文将酸性普鲁兰酶Pul B的N端结构域CBM41-X45替换成耐热普鲁兰酶Pul A的N端结构域CBM68,得到重组酶Pul-11,同时将Pul-11的催化结构域替换成Pul A的催化结构域,得到重组酶Pul-12.结果显示,重组酶Pul-11和Pul-12的最适温度均较Pul B提高了10℃,最适pH分别提高了0.5和1;60℃下热稳定性分别提高了41.4%和44.0%;同时,重组酶Pul-11和Pul-12的底物亲和力和催化效率较Pul B也均有一定程度提高.可见,来源于耐热普鲁兰酶的新型底物结构域CBM68对普鲁兰酶的最适作用温度、最适作用pH及催化效率具有重要影响. 展开更多
关键词 碳水化合物结合模块 CBM68 普鲁兰 最适作用温度 最适作用pH 催化效率
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