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创伤弧菌快速检测法的建立 预览 被引量:1
1
作者 徐宸 王鑫 钟江 《安徽农业科学》 CAS 2018年第19期114-116,共3页
[目的]针对创伤弧菌(Vibrio vulnificus)采用杂交瘤技术制备单克隆抗体,基于单克隆斑点杂交技术进行改良,建立一种创伤弧菌快速检测方法。[方法]由水产品牡蛎中分离获得一株创伤弧菌FD-1,以其灭活全菌为抗原免疫小鼠,采用杂交瘤技术... [目的]针对创伤弧菌(Vibrio vulnificus)采用杂交瘤技术制备单克隆抗体,基于单克隆斑点杂交技术进行改良,建立一种创伤弧菌快速检测方法。[方法]由水产品牡蛎中分离获得一株创伤弧菌FD-1,以其灭活全菌为抗原免疫小鼠,采用杂交瘤技术制备单克隆抗体。在此基础上,对传统斑点杂交技术进行优化改进,以化学发光试剂ECL替代传统TMB底物,进一步提高其灵敏度、缩短检测时间和简化操作步骤。[结果]与传统斑点杂交法相比,改良斑点杂交法的检测时间可缩短至2 h,检测限可达1×10~5CFU/m L。[结论]改良斑点杂交法比传统TMB底物斑点杂交法(1×10~7CFU/m L)灵敏度提高了100倍,操作过程简单,在水产品检验和医疗诊断方面具有良好的开发应用前景。 展开更多
关键词 创伤弧菌 杂交瘤技术 单克隆抗体 斑点杂交 ECL
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小鼠Metrnl单克隆抗体的制备及鉴定 预览
2
作者 曲艺 李志勇 缪朝玉 《药学实践杂志》 CAS 2017年第2期126-129,192共5页
目的 制备抗小鼠Metrnl单克隆抗体,并进行初步筛选鉴定。方法 分别制备小鼠Metrnl多肽片段和全长蛋白作为免疫小鼠抗原,取免疫后小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,筛选阳性杂交瘤细胞,并亚克隆获得稳定细胞株,制备腹水。用ELISA方法检... 目的 制备抗小鼠Metrnl单克隆抗体,并进行初步筛选鉴定。方法 分别制备小鼠Metrnl多肽片段和全长蛋白作为免疫小鼠抗原,取免疫后小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,筛选阳性杂交瘤细胞,并亚克隆获得稳定细胞株,制备腹水。用ELISA方法检测腹水抗体效价;用Western blot方法鉴定抗体。结果 由14种多肽抗原制备的56株单克隆抗体中,未筛选出可用于Western blot识别Metrnl的抗体;由全长蛋白制备的25株抗体中,有12株可识别Metrnl蛋白。结论本实验成功制备了12株单抗,可用于识别检测小鼠Metrnl蛋白。 展开更多
关键词 Metrnl 杂交瘤技术 单克隆抗体
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杂交瘤技术制备单克隆抗体研究进展 预览 被引量:2
3
作者 张琳琳 《生物学教学》 北大核心 2016年第8期2-4,共3页
单克隆抗体广泛应用于生物医药和临床诊断等领域。本文综述杂交瘤技术制备单克隆抗体的研究进展,内容涉及实验动物和瘤细胞株的选择、免疫原和佐剂的使用,以及杂交瘤细胞的制备、筛选、克隆、培养和抗体的收集等方面的技术探索成果,旨... 单克隆抗体广泛应用于生物医药和临床诊断等领域。本文综述杂交瘤技术制备单克隆抗体的研究进展,内容涉及实验动物和瘤细胞株的选择、免疫原和佐剂的使用,以及杂交瘤细胞的制备、筛选、克隆、培养和抗体的收集等方面的技术探索成果,旨在提供用杂交瘤技术制备单克隆抗体的基本资料。 展开更多
关键词 杂交瘤技术 单克隆抗体 细胞融合 细胞培养
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猪传染性胃肠炎病毒M蛋白单克隆抗体的制备与鉴定
4
作者 胡景炎 王秋霞 +4 位作者 刘滔涛 陈欢利 涂宜强 金俊杰 白宇 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第7期177-179,281共4页
为了制备猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)M蛋白的单克隆抗体(MAb),试验利用原核表达融合蛋白His-M免疫7周龄雌性Balb/c小鼠,以PK-15细胞培养病毒液作为检测筛选抗原,并采用淋巴细胞杂交瘤技术制备单克隆抗体。结果表明:获得2株稳定分泌... 为了制备猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)M蛋白的单克隆抗体(MAb),试验利用原核表达融合蛋白His-M免疫7周龄雌性Balb/c小鼠,以PK-15细胞培养病毒液作为检测筛选抗原,并采用淋巴细胞杂交瘤技术制备单克隆抗体。结果表明:获得2株稳定分泌抗体的阳性杂交瘤细胞株(2G1、2G2),经检测其细胞培养上清液和诱导的小鼠腹水抗体效价分别可达到1∶3200和1∶1×105;连续培养15代及液氮冻存后复苏,抗体效价稳定;单克隆抗体亚型鉴定均为IgG1,轻链均为k链;MAb能够特异性识别TGEV。 展开更多
关键词 猪传染性胃肠炎病毒(TGEV) M蛋白 杂交瘤技术 间接ELISA法 免疫荧光测定 单克隆抗体(MAb) 高稳定性 高效价 强特异性
具有抗凝活性抗人组织因子单克隆抗体的制备与鉴定 被引量:1
5
作者 陈尧 王兴华 +5 位作者 何永吉 潘薇薇 曹鹏程 赵峰梅 张全爱 赵邑 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期544-548,共5页
目的制备并鉴定具有抗凝血活性的抗人组织因子(h TF)单克隆抗体(m Ab)。方法以截短型重组h TF243蛋白免疫BALB/c小鼠,细胞融合后,采用间接ELISA联合血浆凝血酶原时间(PT)测定方法,筛选具有抗凝血活性的抗h TF m Ab的杂交瘤细胞株... 目的制备并鉴定具有抗凝血活性的抗人组织因子(h TF)单克隆抗体(m Ab)。方法以截短型重组h TF243蛋白免疫BALB/c小鼠,细胞融合后,采用间接ELISA联合血浆凝血酶原时间(PT)测定方法,筛选具有抗凝血活性的抗h TF m Ab的杂交瘤细胞株,并进行效价测定和特异性鉴定。结果成功建立1株可稳定分泌具有抗凝血活性的抗h TF m Ab的杂交瘤细胞株,该m Ab属于Ig G1亚型。间接ELISA测定腹水效价为1∶200 000,Western blot、PT测定结果表明,该m Ab可特异性结合重组h TF243,同时与SW620结肠癌细胞表面天然TF作用,显著延长血浆凝血酶原时间,具有良好的抗凝血活性。结论成功制备了具有抗凝血活性的抗h TF m Ab。 展开更多
关键词 人组织因子 单克隆抗体 抗凝血活性 杂交瘤技术
双抗夹心酶联免疫吸附快速检测冷鲜肉中的6种血清型沙门氏菌 预览 被引量:10
6
作者 张帅 齐颖颖 +3 位作者 张红星 王怡雯 谢远红 刘慧 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第16期211-215,共5页
为快速检测冷鲜肉中的沙门氏菌,筛选出1株产抗6种沙门氏菌单克隆抗体的细胞株,运用产生的抗体建立酶联免疫吸附检测方法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)。实验采用6种血清型致病沙门氏菌制备出混合抗原,对BALB/c小鼠及新... 为快速检测冷鲜肉中的沙门氏菌,筛选出1株产抗6种沙门氏菌单克隆抗体的细胞株,运用产生的抗体建立酶联免疫吸附检测方法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)。实验采用6种血清型致病沙门氏菌制备出混合抗原,对BALB/c小鼠及新西兰大白兔进行免疫,运用杂交瘤技术进行细胞融合,制备出抗沙门氏菌单克隆抗体以及多克隆抗体,并建立双抗夹心ELISA体系检测冷鲜肉中沙门氏菌。结果表明,成功筛选出1株能稳定分泌抗沙门氏菌的单克隆抗体杂交瘤细胞株6E7,保藏编号为CGMCC 10313以及多克隆抗体,效价分别为1∶1.28×10^6和1∶8.0×10^5;将多抗作为包被抗体吸附于96孔酶标板上,并用辣根过氧化物酶标记单抗,建立双抗夹心ELISA体系;检测模拟污染肉样中沙门氏菌,其检测限为800 CFU/g;并与其他血清型沙门氏菌、志贺氏菌、阪崎肠杆菌、大肠杆菌O157:H7、金黄色葡萄球菌及单增李斯特菌均无交叉反应,特异性良好。 展开更多
关键词 沙门氏菌 杂交瘤技术 单克隆抗体 双抗夹心ELISA
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序言
7
《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期F0002-F0002,I0001共2页
1953年Watson和Crick报道的DNA双螺旋模型把生命科学推向了分子生物学时代,上世纪70年代涌现的重组DNA技术和杂交瘤技术引领了生物技术进入了以基因工程、细胞工程、酶工程和发酵工程为四大技术平台的现代生物技术时代,使生物技术发... 1953年Watson和Crick报道的DNA双螺旋模型把生命科学推向了分子生物学时代,上世纪70年代涌现的重组DNA技术和杂交瘤技术引领了生物技术进入了以基因工程、细胞工程、酶工程和发酵工程为四大技术平台的现代生物技术时代,使生物技术发生了革命性的变革,开拓了生物技术产业的新领域。我国在改革开放的推动下,生物技术的研发和产业也紧跟国际潮流快速发展。 展开更多
关键词 现代生物技术 DNA双螺旋模型 生物技术产业 重组DNA技术 序言 杂交瘤技术 分子生物 生命科学
Development of a Fast ELISA for the Specific Detection of both Leucomalachite Green and Malachite Green 预览
8
作者 JIANG Yousheng CHEN Li +3 位作者 HU Kun YU Wenjuan YANG Xianle LU Liqun 《中国海洋大学学报:英文版》 SCIE CAS 2015年第2期340-344,共5页
Malachite green(MG), a dye, is an antifungal agent that has been used to treat and prevent fish diseases. It is metabolized into reduced leucomalachite green forms(LMG) that may reside in fish muscles for a long perio... Malachite green(MG), a dye, is an antifungal agent that has been used to treat and prevent fish diseases. It is metabolized into reduced leucomalachite green forms(LMG) that may reside in fish muscles for a long period, thus being harmful to human health. The aim of this study was to develop a competitive and direct enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA) to detect MG and LMG specifically. The monoclonal antibody(m Ab) to LMG was generated using a hybridoma technique. The obtained m Ab showed good cross-reactivity(CR) to malachite green(MG), but not to crystal violet(CV) and Brilliant Green(BG). The m Ab was used to develop a fast detecting ELISA of MG and LMG in fish. By introducing the conjugation LMG-HRP, the detection capability was 0.37 ng m L-1 for MG and LMG. The mean recovery from spiked grass carp tissues ranged from 76.2% to 82.9% and the coefficients of variation varied between 1.8% and 7.5%. The stable and efficient monoclonal cell line obtained is a sustainable source of sensitive and specific antibody to MG and LMG. 展开更多
关键词 隐性孔雀石绿 特异性检测 酶联免疫吸附试验 开发 单克隆抗体 酶联免疫吸附测定 ELISA 杂交瘤技术
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结核分枝杆菌分泌蛋白MPB64小鼠单克隆抗体制备、纯化及鉴定 预览
9
作者 马荣 陈振 +3 位作者 黑龙 赵志军 徐广贤 戈朝晖 《宁夏医科大学学报》 2015年第9期1013-1016,共4页
目的应用细胞融合技术制备和鉴定抗MPB64单克隆抗体。方法采用重组目的蛋白p ET32aMPB64(680bp)为免疫原,免疫Balb/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤Sp2/0细胞融合。间接ELISA法筛选分泌抗体的杂交瘤细胞,采用有限稀释方法对所有筛... 目的应用细胞融合技术制备和鉴定抗MPB64单克隆抗体。方法采用重组目的蛋白p ET32aMPB64(680bp)为免疫原,免疫Balb/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤Sp2/0细胞融合。间接ELISA法筛选分泌抗体的杂交瘤细胞,采用有限稀释方法对所有筛选确认的阳性细胞株进行亚克隆,杂交瘤细胞诱导小鼠产生腹水,再用蛋白G亲和层析法纯化抗体,通过间接ELISA、Western Blot鉴定该单克隆抗体。结果通过杂交瘤技术获得10株可稳定分泌抗MPB64单克隆抗体的细胞株。以命名的'1A3'单抗细胞株进行腹水制备,经鉴定腹水效价>1∶720000,经纯化抗体效价约为1∶720000,抗体浓度2.15mg·m L-1。结论成功制备和获得了抗MPB64单克隆抗体的细胞株,为MPB64单克隆抗体制备和鉴定奠定了基础。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 MPB64 单克隆抗体 杂交瘤技术
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单克隆抗体技术的研究进展 预览
10
作者 于秋丽 郑洪 《河南畜牧兽医:综合版》 2014年第7期7-8,共2页
1975年有关专家首次报道,用仙苔病毒使小鼠骨髓瘤细胞和羊红细胞免疫的小鼠脾细胞融合产生的杂交瘤细胞既保存了分泌抗羊红细胞抗体的能力,而且又具有永生的特性,这一研究开启了利用B淋巴细胞杂交瘤技术制备单克隆抗体的历史最新篇章.... 1975年有关专家首次报道,用仙苔病毒使小鼠骨髓瘤细胞和羊红细胞免疫的小鼠脾细胞融合产生的杂交瘤细胞既保存了分泌抗羊红细胞抗体的能力,而且又具有永生的特性,这一研究开启了利用B淋巴细胞杂交瘤技术制备单克隆抗体的历史最新篇章.在随后10年中B细胞杂交瘤技术发展迅速,被广泛地应用于针对各种抗原的单克隆抗体.由于单克隆抗体在生物学、医学等领域应用中的实用性及可操作性,使B细胞杂交瘤技术在现代生物技术中得到更加广泛的应用[1]. 展开更多
关键词 单克隆抗体技术 杂交瘤技术 红细胞免疫 现代生物技术 杂交瘤细胞 骨髓细胞 B淋巴细胞 细胞融合
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地西泮单克隆抗体的制备及其酶联免疫吸附检测方法的建立 被引量:1
11
作者 李桂敏 宁保安 +3 位作者 白家磊 赵丽 赵翠娇 高志贤 《食品安全质量检测学报》 2014年第3期共8页
目的:制备地西泮(diazepam, DZP)单克隆抗体,并且对制备的抗体进行一系列性质鉴定。方法利用1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐[1-ethyl-3-(3-dimethyllaminopropyl) carbodi imide hydrochloride, EDC·HCl]法合成免疫原... 目的:制备地西泮(diazepam, DZP)单克隆抗体,并且对制备的抗体进行一系列性质鉴定。方法利用1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐[1-ethyl-3-(3-dimethyllaminopropyl) carbodi imide hydrochloride, EDC·HCl]法合成免疫原和包被原,用免疫原免疫Balb/C小鼠,当效价到1:16000以后取小鼠脾脏与SP2/0进行细胞融合。然后采用竞争结合双阳性两步筛选法,筛选出能分泌特异性抗体的杂交瘤细胞,并且利用有限稀释亚克隆方法得到单株细胞,采用体内诱生法制备腹水型单克隆抗体。利用辛酸-饱和硫酸铵法对腹水型抗体进行纯化,利用酶联免疫吸附法、表面等离子共振仪(surface plasmon resonance, SPR)等方法对纯化后的抗体进行性质鉴定。结果成功合成了地西泮免疫原和包被原,免疫Balb/C小鼠7次后效价达到1:16000,最终制备出单克隆抗体,抗体解离常数(dissociation constants, KDs)为4.0985×10-7 mol/L,且与大部分结构类似物没有明显的交叉反应。应用此抗体建立间接竞争ELISA法,抗体的IC50=10.8 ng/mL,检测范围为0.45~862.00 ng/mL。结论本研究制备出了地西泮单克隆抗体,为地西泮的免疫学检测提供了有力的支持。 展开更多
关键词 地西泮 杂交瘤技术 单克隆抗体 酶联免疫吸附法
杂交瘤技术与单克隆抗体 预览 被引量:1
12
作者 任娟 《新疆畜牧业》 2014年第4期26-27,共2页
本文从杂交瘤技术原理、单克隆抗体制备流程及应用现状3个方面,介绍了单克隆抗体技术的研究现状,为实验室工作者研究疾病诊断方法提供参考资料。
关键词 杂交瘤技术 单克隆抗体
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不同载体蛋白偶联制备促红细胞生成素二聚体单克隆抗体的选择优化 预览
13
作者 邱贞琴 邰秀珍 《中国生化药物杂志》 CAS 北大核心 2014年第8期88-91,共4页
目的将EPO dimer分别连接牛血清蛋白(bovine serum alumin,BSA)、匙孔血蓝蛋白(keyhole limpet hemocyanin,KLH)、卵清白蛋白(ovalbumin,OVA)几个不同的载体蛋白构成抗原,免疫BALB/c小鼠,并结合特定的ELISA检测系统,来优化选择抗EPO di... 目的将EPO dimer分别连接牛血清蛋白(bovine serum alumin,BSA)、匙孔血蓝蛋白(keyhole limpet hemocyanin,KLH)、卵清白蛋白(ovalbumin,OVA)几个不同的载体蛋白构成抗原,免疫BALB/c小鼠,并结合特定的ELISA检测系统,来优化选择抗EPO dimer单克隆抗体。方法采用单克隆抗体制备技术筛选获得杂交瘤细胞;ELISA法鉴定杂交瘤细胞的特性;分析比较不同载体蛋白构建单克隆抗体的差异与效果。结果共筛选获得了5株杂交瘤细胞,5株杂交瘤细胞均能分泌EPO dimer抗体。经过进一步的特异性鉴定、亚型鉴定以及效价鉴定后,有4株杂交瘤细胞被挑选进行大量抗体制备,为后期临床基础实验提供材料。4株杂交瘤分别为克隆S-18-2,其亚型为Ig G2b,κ;克隆S-369-7,其亚型为Ig G1,κ;克隆S-410-3,其亚型为Ig G1,κ;克隆S-514-7,其亚型为Ig G2b,κ;其中克隆S-18-2、S-514-7分泌抗体EPO dimer的能力稳定,其抗体对载体蛋白OVA、KLH、BSA均无效价,且它们抗原抗体反应只针对EPO dimer;克隆S-369-7、S-410-3分泌抗体EPO dimer的能力也很稳定,对载体蛋白OVA、KLH、BSA也均无效价,尤其其抗原抗体反应可以同时针对EPO dimer以及EPO dimer-PEG,即本实验获得的这2株杂交瘤细胞分泌的抗体既可检测EPO dimer又可检测EPO dimer-PEG。比较连接BSA、OVA、KLH这几个不同载体蛋白构建单克隆抗体的差异与效果,发现以EPO dimer连接载体蛋白OVA获得的单克隆抗体效果最佳。结论本实验用偶联载体的方法增强了小分子EPO dimer的免疫原性,得到了稳定分泌EPO dimer抗体的杂交瘤细胞。 展开更多
关键词 促红细胞生成素 单克隆抗体 酶联免疫吸附测定 杂交瘤技术
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抗3α-HSD单克隆抗体制备方法的初步研究 预览 被引量:1
14
作者 王雅文 陈华林 +3 位作者 王维 马帅 王一东 冀伟 《长春理工大学学报:自然科学版》 2013年第5期157-160,共4页
为了利用杂交瘤技术制备抗3α-HSD单克隆抗体,用表达纯化的3α-HSD作为抗原免疫Balb/c小鼠,获得针对该抗原致敏的B淋巴细胞,并用获得的B淋巴细胞与SP2/0进行细胞融合,得到杂交瘤细胞株,在ELISA间接法筛选出阳性孔的基础上,进行亚... 为了利用杂交瘤技术制备抗3α-HSD单克隆抗体,用表达纯化的3α-HSD作为抗原免疫Balb/c小鼠,获得针对该抗原致敏的B淋巴细胞,并用获得的B淋巴细胞与SP2/0进行细胞融合,得到杂交瘤细胞株,在ELISA间接法筛选出阳性孔的基础上,进行亚克隆,筛选出能稳定分泌抗3α-HSD单克隆抗体的杂交瘤细胞株。结果得到能分泌抗3α-HSD单克隆抗体的杂交瘤细胞株。制备过程中发现很多特殊的现象,如杂交瘤细胞上清与单抗腹水效价过低,但多抗血清效价较高等。文章对在单抗的制备过程中遇到的问题做了初步分析,为之后制备抗3α-HSD单克隆抗体的研究提供技术支持。 展开更多
关键词 3α-HSD 杂交瘤技术 单克隆抗体
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绵羊肺腺瘤病毒衣壳蛋白杂交瘤细胞系的建立 预览
15
作者 斯日古楞 么宏强 马学恩 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第1期28-32,共5页
为了制备特异性的抗绵羊肺腺瘤病毒(jaagsiekte sheep retrovirus,JSRV)内蒙株衣壳蛋白(CA)的单克隆抗体(McAb)杂交瘤细胞系,以原核表达CA蛋白为抗原,免疫BALB/c小鼠,经4次免疫后,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞经杂交瘤技术进行融合... 为了制备特异性的抗绵羊肺腺瘤病毒(jaagsiekte sheep retrovirus,JSRV)内蒙株衣壳蛋白(CA)的单克隆抗体(McAb)杂交瘤细胞系,以原核表达CA蛋白为抗原,免疫BALB/c小鼠,经4次免疫后,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞经杂交瘤技术进行融合,同时以表达蛋白作为包被抗原进行特异性ELISA检测,共筛选到6株阳性杂交瘤细胞株。经过3次亚克隆后,最终得到了5株能稳定分泌抗体的单细胞克隆株;再利用CA真核表达蛋白以间接免疫荧光法,对此5株杂交瘤细胞进行进一步的特异性鉴定。结果显示,有3株具有特异性强荧光反应,也能检测到目的基因的表达产物。本试验获得了3株稳定分泌抗JSRV-NM株CA蛋白McAb的杂交瘤细胞系,为建立检测病原的特异性诊断方法、分析JSRV-NM株CA蛋白的功能及鉴定B细胞抗原表位等奠定基础。 展开更多
关键词 绵羊肺腺病毒 衣壳蛋白 杂交瘤技术 酶联免疫吸附试验 间接免疫荧光方法
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抗恩诺沙星单克隆抗体的制备与鉴定 预览 被引量:2
16
作者 张家禾 周作红 +5 位作者 洪伟鸣 刘莉 孟婷 王永娟 管远红 左伟勇 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期1070-1073,共4页
制备抗恩诺沙星的单克隆抗体并对其生物学特性进行鉴定.采用活化酯法合成恩诺沙星-牛血清白蛋白作为免疫原免疫小鼠,利用杂交瘤细胞技术建立杂交瘤细胞株,利用体内诱生法制备单克隆抗体,然后对制备的单抗的效价、敏感性、特异性、亲和... 制备抗恩诺沙星的单克隆抗体并对其生物学特性进行鉴定.采用活化酯法合成恩诺沙星-牛血清白蛋白作为免疫原免疫小鼠,利用杂交瘤细胞技术建立杂交瘤细胞株,利用体内诱生法制备单克隆抗体,然后对制备的单抗的效价、敏感性、特异性、亲和力和亚型等免疫学特性进行鉴定.获得细胞株7C5,对单抗亚型鉴定结果均为IgG1,诱生腹水中抗体的效价在1.035 ×10-6以上,最低检出限为0.56 ng/mL,IC50值为14.21 ng/mL,检测范围为2.05~98.38 ng/mL,与其他同类药物无交叉反应.试验所获得抗体效价高、特异性强,可以为ELISA试剂盒和胶体金试纸条研发提供良好的抗体材料. 展开更多
关键词 恩诺沙星 杂交瘤技术 单克隆抗体 交叉反应
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Serological Detection of Tomato Pepino mosaic virus in Morocco 预览
17
作者 Amal Souiri Saaid Amzazi +2 位作者 Hayat Laatiris Moulay Mustapha Ennaji Mustapha Zemzami 《农业科学与技术:B》 2013年第12期847-852,共6页
关键词 番茄花叶病毒 摩洛哥 血清学检测 ELISA检测 DAS-ELISA 单克隆抗体 杂交瘤技术 马铃薯X病毒
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异常凝血酶DCP基因克隆表达、纯化及单克隆抗体制备与鉴定 预览
18
作者 沈鹏 司进 +4 位作者 李琦雯 渠利利 李璐蓉 严晓璐 季国忠 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2013年第35期3932-3939,共8页
目的:通过克隆、表达一种有前景的肝癌肿瘤标志物人去羟基凝血素(Des-γ-carboxyprothrombin,DCP),制备抗DCP单克隆抗体并初步鉴定其特性.方法:依据DCP基因序列,合成DCP全长基因,构建原核表达载体pColdⅡ—DCP,转化至Escheric... 目的:通过克隆、表达一种有前景的肝癌肿瘤标志物人去羟基凝血素(Des-γ-carboxyprothrombin,DCP),制备抗DCP单克隆抗体并初步鉴定其特性.方法:依据DCP基因序列,合成DCP全长基因,构建原核表达载体pColdⅡ—DCP,转化至Escherichia coli BL21(DE3),IPTG诱导表达,vZZNi^2+孙亲和层析柱纯化带有His标签的DCP蛋白.纯化的蛋白免疫Balb/c小鼠,制备抗DCP单克隆抗体,以ELISA法检测抗体效价与亚型;Westernblot和免疫组织化学染色鉴定抗体特异性.结果:成功表达并获得DCP蛋白,其相对分子量约为23000;获得1株稳定分泌抗人DCP单克隆抗体杂交瘤细胞株385;Western blot和免疫组织化学结果显示抗人DCP单克隆抗体能与DCP发生特异性结合,且ELISA检测抗体的效价为1:2.43×10^5,其亚类为IgG2a.结论:成功制备了抗人DCP单克隆抗体,为进一步将该抗体应用于肝癌的早期诊断提供了重要工具. 展开更多
关键词 异常凝血酶原 原核表达 杂交瘤技术 单克隆抗体 肝细胞肝癌 标志物
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抗体人源化及人源抗体研究技术 预览
19
作者 冯健男 《生物产业技术》 2012年第6期15-20,共6页
抗体研究已有百余年的历史,但直到20世纪70年代,随着杂交瘤技术的问世,抗体的制备和生产技术才实现革命性的突破。近年来,抗体以其高靶向性成为一大类新型诊断和治疗剂,在疾病的诊断和治疗中得到了广泛的应用。目前治疗性抗体药物... 抗体研究已有百余年的历史,但直到20世纪70年代,随着杂交瘤技术的问世,抗体的制备和生产技术才实现革命性的突破。近年来,抗体以其高靶向性成为一大类新型诊断和治疗剂,在疾病的诊断和治疗中得到了广泛的应用。目前治疗性抗体药物在全球生物技术药品的市场份额己位居第二。同时, 展开更多
关键词 人源抗体 杂交瘤技术 人源化 生物技术药品 生产技术 市场份额 抗体药物 治疗剂
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基因工程抗体亲和力成熟研究进展 预览 被引量:1
20
作者 于礼 梁米芳 《中国医药生物技术》 CSCD 2012年第4期286-289,共4页
自1975年,Kohler创建杂交瘤技术并成功制备单克隆抗体以来,人们己研制出数以千计的单克隆抗体。单克隆抗体因其高度的靶向特异性已经成为科学研究,疾病诊断,药物靶向治疗等不可或缺的工具。山于杂交瘤技术制备单克隆抗体为鼠源性,... 自1975年,Kohler创建杂交瘤技术并成功制备单克隆抗体以来,人们己研制出数以千计的单克隆抗体。单克隆抗体因其高度的靶向特异性已经成为科学研究,疾病诊断,药物靶向治疗等不可或缺的工具。山于杂交瘤技术制备单克隆抗体为鼠源性,在人体应用时易发生免疫排斥反应,难以有效激发人体免疫效应,而人源的基因工程抗体很好地解决了这一问题。借助DNA重组和蛋白质工程技术,人们可以获得人源单克隆抗体, 展开更多
关键词 基因工程抗体 亲和力成熟 人源单克隆抗体 蛋白质工程技术 杂交瘤技术 药物靶向治疗 免疫排斥反应 靶向特异性
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