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IL-1α和RANK-RANKL-OPG系统在儿童及成人中耳胆脂瘤中的表达 预览
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作者 汤苏苏 刘谦虚 《中国医学创新》 CAS 2019年第5期160-164,共5页
中耳胆脂瘤是由上皮下结缔组织中的角质化鳞状上皮和角质碎片在鼓室或乳突形成的团状物,伴或者不伴有周围炎症反应,这是中耳的囊性结构性疾病。随着生物科学技术发展,众多学者的研究结果显示胆脂瘤的发生发展由多种细胞因子参与,并通过... 中耳胆脂瘤是由上皮下结缔组织中的角质化鳞状上皮和角质碎片在鼓室或乳突形成的团状物,伴或者不伴有周围炎症反应,这是中耳的囊性结构性疾病。随着生物科学技术发展,众多学者的研究结果显示胆脂瘤的发生发展由多种细胞因子参与,并通过分子生物学研究揭示中耳胆脂瘤的形成,它可以为临床疾病治疗以及干预其病理形成过程提供理论基础。人类中耳胆脂瘤明显特征为骨质破坏,白细胞介素-1α(interleukin-1α,IL-1α)和核因子κB受体活化因子(receptor activator of nuclear factor-κB,RANK)、核因子κB受体活化因子配体(receptor activator nuclear factor-κB ligand,RANKL)、骨保护素(osteoprotegerin,OPG)在胆脂瘤对骨质的破坏中有着重要作用。本文总结了IL-1α和RANKRANKL-OPG系统在儿童和成人中耳胆脂瘤发生中的作用。 展开更多
关键词 中耳胆脂瘤 白细胞介素-1Α 骨保护素 因子ΚB受体活化因子 因子ΚB受体活化因子配体
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骨重建过程中降钙素基因相关肽与RANK/RANKL/OPG作用机制的研究进展
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作者 王诗尧 许少策 +3 位作者 师政伟 武建超 雷栓虎 汪玉良 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期511-515,共5页
目的总结骨重建过程中降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide, CGRP)与核因子κB受体活化因子(receptor activator of nuclear factor κB, RANK)/核因子κB受体活化因子配体(receptor activator ofnuclear factor κB liga... 目的总结骨重建过程中降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide, CGRP)与核因子κB受体活化因子(receptor activator of nuclear factor κB, RANK)/核因子κB受体活化因子配体(receptor activator ofnuclear factor κB ligand, RANKL)/骨保护蛋白(osteoprotegerin, OPG)信号系统作用机制的研究进展,为进一步研究骨相关疾病的预防及治疗提供理论依据。方法广泛查阅国内外近年来骨重建过程中CGRP与RANK/RANKL/OPG信号系统相关文献,并加以分析总结。结果骨重建过程中,CGRP与RANK/RANKL/OPG信号系统发挥着重要调控作用结论目前对于骨重建过程中CGRP与RANK/RANKL/OPG信号系统的作用机制研究仍不够深入,需进一步研究二者在骨重建过程中的具体作用方式、相互联系,明确作用机制,为临床上骨相关疾病的治疗带来新思路、新方法。 展开更多
关键词 骨重建 成骨细胞 破骨细胞 降钙素基因相关肽 因子ΚB受体活化因子 因子ΚB受体活化因子配体 骨保护蛋白
小眼畸形相关转录因子及其信号通路在破骨细胞分化中的作用 预览
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作者 季秋实 董明 +2 位作者 许诺 姜龙 牛卫东 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第36期5882-5888,共7页
背景:小眼畸形相关转录因子(microphthalmia-associatedtranscriptionfactor,MITF)被发现其是编码一个众所周知的转录因子家族的成员,但目前对它的分析可能仍然处于初级阶段。MITF对许多不同器官的生理学和病理学至关重要,包括眼睛、耳... 背景:小眼畸形相关转录因子(microphthalmia-associatedtranscriptionfactor,MITF)被发现其是编码一个众所周知的转录因子家族的成员,但目前对它的分析可能仍然处于初级阶段。MITF对许多不同器官的生理学和病理学至关重要,包括眼睛、耳朵、免疫系统、黑色素瘤,特别是骨骼和皮肤。目的:文章介绍MITF基因位点的发现与克隆,综述了MITF上调与破骨细胞活性相关的基因的表达和通过细胞融合调节破骨细胞的发育,敲除MITF后抑制破骨细胞的分化以及MITF及其信号通路在破骨细胞的分化中的作用。方法:作者以“MITF、骨破坏、破骨细胞、成骨细胞、小眼畸形相关转录因子、组织蛋白酶K、核因子κB、核因子κB配体”为关键词,检索2000年至2018年中国知网数据库和PubMed数据库中相关文献,并将这些文献进行筛选与总结。结果与结论:最终纳入文献43篇。①MITF对于多种细胞系的分化是必不可少的,并且通过与谱系特异性辅因子的相互作用以及其对特定信号级联的响应而获得其特异性;②MITF在破骨细胞的分化过程中发挥了重要的作用,其能够促进骨破坏;③研究MITF在骨破坏中的作用机制以及骨微环境的改变,可以成为治疗这一系列骨破坏疾病的关键靶点。 展开更多
关键词 MITF 骨破坏 破骨细胞 成骨细胞 小眼畸形相关转录因子 组织蛋白酶K 因子ΚB 因子ΚB受体活化因子配体
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破骨细胞形成过程中唑来膦酸的作用途径及机制 预览
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作者 黄晓林 廖健 +4 位作者 洪伟 李芳 程余婷 周倩 董强 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第17期2716-2721,共6页
背景:唑来膦酸可用来治疗骨吸收疾病,但其确切机制不明确。目的:探讨唑来膦酸对RANKL诱导的破骨细胞形成的影响和机制。方法:通过CCK8实验检测小鼠单核巨噬细胞系RAW264.7细胞的活力,分析最大半数抑制浓度(IC50)。体外用RANKL将RAW264.... 背景:唑来膦酸可用来治疗骨吸收疾病,但其确切机制不明确。目的:探讨唑来膦酸对RANKL诱导的破骨细胞形成的影响和机制。方法:通过CCK8实验检测小鼠单核巨噬细胞系RAW264.7细胞的活力,分析最大半数抑制浓度(IC50)。体外用RANKL将RAW264.7细胞诱导为破骨细胞,鬼笔环肽和DAPI染色进行鉴定,并经抗酒石酸酸性磷酸酶染色来评估唑来膦酸在破骨细胞分化不同阶段对破骨细胞形成的影响,骨吸收实验检测破骨细胞骨吸收活性,最后Western blot检测IκBα、P38、JNK及ERK蛋白的表达。结果与结论:①唑来膦酸作用48 h,对RAW264.7细胞的最大半数抑制浓度(IC50)为33.9μmol/L,相比对照组,低于该浓度的唑来膦酸抑制破骨细胞分化;②唑来膦酸处理后骨吸收陷窝数目和面积明显减少(P <0.05);③蛋白表达水平上,唑来膦酸抑制RANKL诱导的IκBα磷酸化,其他蛋白磷酸化未见明显改变;④结果表明,唑来膦酸在体外可能通过调节NF-κB信号通路来抑制破骨细胞形成。 展开更多
关键词 破骨细胞 唑来膦酸 破骨细胞骨吸收 破骨细胞分化 因子ΚB信号通路 因子ΚB受体活化因子配体 国家自然科学基金
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白杨素抑制核因子κB受体活化因子配体诱导的小鼠破骨细胞生成 预览
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作者 李翔翮 罗伟 +9 位作者 胡峻贤 杨静 韩欣赟 董世武 杨先腾 李森磊 鄢志辉 聂瑛洁 田晓宾 孙立 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第25期3978-3986,共9页
背景:白杨素存在于多种天然植物提取物的黄酮醇类化合物,具有广泛的治疗作用并且参与机体内的炎症反应,而炎症反应可增强破骨细胞生成从而导致骨侵蚀。目的:探究白杨素在炎症环境和非炎症环境下对破骨细胞分化的影响以及对骨侵蚀的保护... 背景:白杨素存在于多种天然植物提取物的黄酮醇类化合物,具有广泛的治疗作用并且参与机体内的炎症反应,而炎症反应可增强破骨细胞生成从而导致骨侵蚀。目的:探究白杨素在炎症环境和非炎症环境下对破骨细胞分化的影响以及对骨侵蚀的保护作用。方法:选择RAW264.7细胞为种子细胞,首先,通过核因子κB受体活化因子配体(50μg/L)、巨噬细胞集落刺激因子(25μg/L)将细胞诱导分化为破骨细胞后,以0,20,40,60μg/L白杨素干预。其次,通过脂多糖模拟炎症环境,并将RAW264.7细胞在脂多糖诱导的炎症环境下诱导分化为破骨细胞,观察0,20,40,60μg/L白杨素在炎症环境下对破骨细胞分化的影响。结果与结论:(1)白杨素有效抑制破骨细胞分化,在60μg/L时抑制效果达到最大;(2)白杨素显著抑制了破骨细胞的骨吸收功能,提示白杨素对破骨细胞造成的骨侵蚀具有保护作用;(3)白杨素通过核因子κB信号通路,抑制多种破骨细胞分化关键蛋白和基因表达;(4)白杨素对炎症有明显的抑制作用,并对炎症环境导致的破骨细胞分化有强烈的抑制作用。 展开更多
关键词 白杨素 破骨细胞生成 炎症性骨破坏 炎症反应 脂多糖 骨侵蚀 因子ΚB信号通路 因子ΚB受体活化因子配体
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低氧状态下骨细胞参与破骨细胞形成的作用机制研究 预览
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作者 朱杰 唐燚 +2 位作者 吴情 纪映辰 康非吾 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期463-468,共6页
目的探究低氧状态下骨细胞对破骨细胞形成的作用及其机制。方法用去铁胺甲磺酸(DFO)刺激骨细胞系MLO-Y4建立体外低氧骨细胞培养体系。CCK-8实验检测DFO对MLO-Y4细胞增殖活性的影响;采用DFO处理后的MLO-Y4细胞培养液制备条件培养基诱导RA... 目的探究低氧状态下骨细胞对破骨细胞形成的作用及其机制。方法用去铁胺甲磺酸(DFO)刺激骨细胞系MLO-Y4建立体外低氧骨细胞培养体系。CCK-8实验检测DFO对MLO-Y4细胞增殖活性的影响;采用DFO处理后的MLO-Y4细胞培养液制备条件培养基诱导RAW264.7细胞分化,行抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色检测;利用实时荧光定量聚合酶链反应、细胞免疫荧光和蛋白质印迹(Western blot)检测DFO作用下MLO-Y4表达低氧诱导因子(HIF)-1α与核因子κB受体活化因子配体(RANKL)的情况;检测HIF-1α siRNA转染对MLO-Y4表达HIF-1α和RANKL的影响。结果 100 μmol·L^-1 DFO作用24 h时MLO-Y4增殖活性升高,之后随着时间延长细胞增殖活性下降(P<0.01)。加入可溶性RANKL后,低氧组可见破骨细胞形成明显增加(P<0.001)。100 μmol·L^-1 DFO作用下,HIF-1α mRNA表达稳定,RANKL mRNA的表达随时间明显变化,24 h时最高(P<0.01);HIF-1α、RANKL蛋白表达升高(P<0.01)。低氧状态下siHIF-1α转染可降低HIF-1α和RANKL的表达(P<0.01),破骨细胞减少(P<0.01)。结论低氧状态下MLO-Y4可通过上调HIF-1α的蛋白水平促进RANKL的生成,进而加速RAW264.7细胞向破骨细胞分化。 展开更多
关键词 去铁胺甲磺酸 低氧诱导因子-1α 因子ΚB受体活化因子配体
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辛伐他汀对大鼠胫骨骨折愈合的促进作用及其相关信号通路研究
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作者 周东明 金燕婷 +1 位作者 徐天波 侯振海 《中国现代应用药学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第18期2267-2270,共4页
目的探讨辛伐他汀对大鼠胫骨骨折愈合的促进作用及其相关信号通路。方法建立64只SD大鼠右侧胫骨骨折模型,随机分为短期用药组、渐撤量给药组、连续用药组和对照组。术后第1,2,3,4周,每组随机选择4只大鼠处死,分别从X线检查、骨组织HE染... 目的探讨辛伐他汀对大鼠胫骨骨折愈合的促进作用及其相关信号通路。方法建立64只SD大鼠右侧胫骨骨折模型,随机分为短期用药组、渐撤量给药组、连续用药组和对照组。术后第1,2,3,4周,每组随机选择4只大鼠处死,分别从X线检查、骨组织HE染色、血清RANKL、OPG水平分析差异。结果X线检查:术后4周,渐撤量给药组与连续用药组骨折线愈合良好,仅有少量骨痂残留;短期用药组仍可见明显骨痂及骨折线。骨组织HE染色:术后2周,用药组可见编制样骨开始形成,并可见造血细胞灶;术后4周,短期用药组有板层样骨形成,但骨排列方向紊乱,渐撤量给药组可见骨基质中大量骨细胞沉积。血清RANKL水平:术后2周,短期用药组血清RANKL水平明显低于对照组(P<0.05);连续用药组血清RANKL水平随时间逐渐下降的趋势最明显;术后第3周,短期用药组血清RANKL水平达到峰值,显著高于其他3组。血清OPG水平:术后第2周,各用药组血清OPG水平显著高于对照组(P<0.05),术后第4周,短期用药组血清OPG水平最高(P<0.05)。结论辛伐他汀对骨折愈合有一定的促进作用,但骤然停药对骨折愈合会造成明显的不良影响。 展开更多
关键词 胫骨骨折 辛伐他汀 因子ΚB受体活化因子配体
利塞膦酸钠抑制大鼠骨髓内脂肪细胞分化及脂肪细胞核因子κB受体活化因子配体蛋白的表达 预览
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作者 金健 金大地 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期987-992,共6页
目的研究利塞膦酸钠(RIS)对大鼠骨髓间充质干细胞成脂分化的影响及对骨髓内脂肪细胞来源的核因子κB受体活化因子配体(RANKL)的调节作用,为阐明RIS抗骨质疏松的机制提供新的理论依据。方法大鼠骨髓间充质干细胞成脂诱导及非成脂诱导14 d... 目的研究利塞膦酸钠(RIS)对大鼠骨髓间充质干细胞成脂分化的影响及对骨髓内脂肪细胞来源的核因子κB受体活化因子配体(RANKL)的调节作用,为阐明RIS抗骨质疏松的机制提供新的理论依据。方法大鼠骨髓间充质干细胞成脂诱导及非成脂诱导14 d,期间以浓度梯度0、1、5、10、25μmol/L的RIS进行药物干预,观察并计算成脂率,提取蛋白通过Western blot实验检测RANKL蛋白表达。将24周的SD大鼠随机分成假手术组及OVX组,12周后OVX大鼠再次随机分为RIS干预组(2.4μg/kg,皮下注射,3次/周)及对照组。8周后行骨密度检查,并取大鼠左股骨远端骨骼标本行病理检查,观察RIS对大鼠骨髓内脂肪含量的影响。结果体外实验发现RIS呈浓度依赖性抑制大鼠骨髓间充质干细胞向脂肪细胞分化,并且,随着RIS浓度的升高,骨髓内脂肪细胞RANKL蛋白的表达逐渐降低(P<0.05)。体内实验发现RIS药物干预后,OVX大鼠骨密度显著提升的同时,骨髓内脂肪的含量明显降低(P<0.05)。结论 RIS可有效抑制大鼠骨髓间充质干细胞的成脂分化,降低骨髓内的脂肪含量,并通过下调脂肪细胞RANKL的表达,抑制破骨细胞的生成和功能,这可能是RIS发挥抗骨质疏松作用的机制。 展开更多
关键词 利塞膦酸钠 双膦酸盐 脂肪细胞 因子ΚB受体活化因子配体 骨质疏松
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转录因子SOX5在类风湿关节炎患者中的表达及意义
9
作者 吴琴 石雨濛 +3 位作者 骆爱姝 严伟 王芳 谈文峰 《中华风湿病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期46-51,共6页
目的探讨转录因子SOX5在RA患者PBMCs及血清中的表达及其意义。方法招募南京医科大学第一附属医院风湿免疫科RA患者30例,OA患者27例和健康对照组(HC)30名。采用实时荧光定量(RT)-PCR检测SOX家族基因在RA患者PBMCs中相对表达量及3组PBMCs... 目的探讨转录因子SOX5在RA患者PBMCs及血清中的表达及其意义。方法招募南京医科大学第一附属医院风湿免疫科RA患者30例,OA患者27例和健康对照组(HC)30名。采用实时荧光定量(RT)-PCR检测SOX家族基因在RA患者PBMCs中相对表达量及3组PBMCs中SOX5表达,ELISA法检测3组血清中SOX5表达水平。运用RT-PCR检测分别使用IL-6、TNF-α、IL-1β及IL-17刺激PBMCs24h后,SOX5表达水平差异。免疫共沉淀实验(co-IP)法分析SOX5与核因子κB受体活化因子配体(RANKL)的相互作用。采用RNA干扰技术沉默小鼠破骨前体细胞系RAW264.7中SOX5表达,抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色观察其对RANKL诱导破骨细胞分化的影响。多组间比较采用单因素方差分析,运用Pearson检验进行相关性分析。结果在检测的SOX基因家族8个基因中,RA患者PBMCs中以D亚家族的SOX5优势表达为主。RA组、OA组和健康对照组PBMCs中SOX5相对表达量分别为(21±19)、(10±8)、(5±4),RA组与OA组、健康对照组差异有统计学意义(F=8.343,P<0.01);RA组、OA组和健康对照组血清中SOX5平均水平分别为(19132±12054)pg/ml、(9065±15172)pg/ml和(3242±1251)pg/ml,RA组与OA组、健康对照组差异有统计学意义(F=15.31,P<0.01)。IL-6、TNF-α、IL-1β及IL-17可促进PBMCs中SOX5基因的表达。co-IP显示IL-6、TNF-α及IL-1β可促进SOX5与RANKL结合。采用SOX5-siRNA转染RAW264.7沉默SOX5表达后,RANKL诱导破骨细胞分化数量显著减少。结论RA患者PBMCs及血清中转录因子SOX5表达显著上调,可能通过调控RANKL基因表达,影响破骨细胞分化,参与RA发病过程。靶向抑制SOX5表达,可能成为治疗RA的新方法。 展开更多
关键词 关节炎 类风湿 SOX5 因子ΚB受体活化因子配体
老年男性骨质疏松患者外周血T淋巴细胞表面RANKL表达水平的研究 预览
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作者 李冬祎 赵真 陈颖 《临床和实验医学杂志》 2019年第11期1182-1185,共4页
目的探讨T淋巴细胞来源的核因子κB受体活化因子配体(RANKL)是否在老年男性骨质疏松患者骨损伤的发病过程中发挥作用。方法采用前瞻性研究方法,选取2014年1月至2018年1月首都医科大学附属北京友谊医院收治的老年男性骨质疏松患者31例(... 目的探讨T淋巴细胞来源的核因子κB受体活化因子配体(RANKL)是否在老年男性骨质疏松患者骨损伤的发病过程中发挥作用。方法采用前瞻性研究方法,选取2014年1月至2018年1月首都医科大学附属北京友谊医院收治的老年男性骨质疏松患者31例(骨质疏松组),老年男性骨量减低患者35例(骨量减低组),骨密度正常老年男性志愿者36例(对照组),采用流式细胞学方法,检测三组研究对象外周血CD4~+T淋巴细胞及CD8~+T淋巴细胞表面RANKL的表达水平,并分析研究对象CD4~+T淋巴细胞及CD8~+T淋巴细胞表面RANKL的表达水平是否与骨密度水平存在相关性。结果①对照组、骨量减低组及骨质疏松组患者外周血CD4~+T淋巴细胞表面RANKL表达水平依次升高[分别为(1.58±0.95)%、(2.03±1.33)%、(2.34±1.24)%],差异具有统计学意义(P<0.05);对照组、骨量减低组及骨质疏松组患者外周血CD8~+T淋巴细胞表面RANKL表达水平依次升高[分别为(1.11±0.83)%、(1.53±1.11)%、(1.76±0.94)%],差异具有统计学意义(P<0.05)。②CD4~+T细胞表面RANKL表达水平与股骨颈骨密度T值之间呈负相关(P=0.026,r=-0.221);CD8~+T细胞表面RANKL表达水平与股骨颈骨密度T值之间呈负相关(P=0.027,r=-0.219)。结论T淋巴细胞表面RANKL表达的上调对老年男性骨质疏松患者骨密度的下降具有一定影响,可能是引起老年男性骨质疏松患者骨密度下降的机制之一。 展开更多
关键词 老年 骨质疏松 T淋巴细胞 因子ΚB受体活化因子配体
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地塞米松对小鼠骨细胞白细胞介素-6及核因子κB受体活化因子配体表达的影响 预览
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作者 郑韵 余科 李昶 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2019年第4期580-584,共5页
目的探讨地塞米松对体外培养的小鼠MLO-Y4骨细胞及脂多糖(LPS)刺激下小鼠骨细胞表达白细胞介素-6(IL-6)和核因子κB受体活化因子配体(RANKL)的影响。方法以10^-6、10^-7 mol/L地塞米松作用MLO-Y4细胞,于24、48、72 h后检测细胞增殖;以... 目的探讨地塞米松对体外培养的小鼠MLO-Y4骨细胞及脂多糖(LPS)刺激下小鼠骨细胞表达白细胞介素-6(IL-6)和核因子κB受体活化因子配体(RANKL)的影响。方法以10^-6、10^-7 mol/L地塞米松作用MLO-Y4细胞,于24、48、72 h后检测细胞增殖;以不同浓度地塞米松刺激骨细胞4 h,采用实时荧光定量PCR检测细胞IL-6和RANKL的表达,用ELISA检测细胞IL-6的分泌。以10^-7 mol/L地塞米松于不同时间点作用于MLO-Y4细胞,采用实时荧光定量PCR检测细胞IL-6和RANKL的表达,采用ELISA检测细胞IL-6的分泌。以10^-7 mol/L地塞米松与100μg/L的LPS于不同时间点共同作用于MLO-Y4细胞,采用Real-time PCR检测细胞IL-6和RANKL的表达,采用ELISA检测细胞IL-6的分泌。结果10^-6 mol/L地塞米松抑制MLO-Y4细胞增殖,而10^-7 mol/L地塞米松对细胞增殖无明显影响。除10^-9 mol/L外,10^-8、10^-7、10^-6 mol/L地塞米松均下调MLO-Y4细胞IL-6的表达。10^-7 mol/L地塞米松能抑制LPS对MLO-Y4细胞IL-6表达的上调作用,且在8 h时最为明显。不同浓度及不同时间点地塞米松对MLO-Y4细胞RANKL的表达无明显影响。结论低浓度地塞米松可下调骨细胞及LPS刺激下的骨细胞IL-6的表达,而对RANKL表达无明显影响。 展开更多
关键词 地塞米松 骨细胞 白细胞介素-6 因子ΚB受体活化因子配体 脂多糖
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苗药八角枫水提液对CIA模型大鼠血清IL-1β、TNF-α水平及滑膜OPG/RANKL/RANK系统的影响 预览
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作者 江勇 梁子聪 +3 位作者 陈其宽 覃建锋 张庆忠 王恒 《中国药房》 北大核心 2018年第24期3401-3406,共6页
目的:研究八角枫水提液对Ⅱ型胶原诱发关节炎(CIA)模型大鼠血清白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平以及滑膜骨保护素(OPG)/核因子κB受体活化因子配体(RANKL)/核因子κB受体活化因子(RANK)系统的影响,探讨其抗类风湿关... 目的:研究八角枫水提液对Ⅱ型胶原诱发关节炎(CIA)模型大鼠血清白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平以及滑膜骨保护素(OPG)/核因子κB受体活化因子配体(RANKL)/核因子κB受体活化因子(RANK)系统的影响,探讨其抗类风湿关节炎(RA)的可能机制。方法:将60只雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、阳性组(雷公藤多苷片,10 mg/kg)和八角枫水提液低、中、高剂量组(5、10、20 g/kg,按生药量计),每组10只。除空白组外,其余各组大鼠均于尾根部注射经弗氏完全佐剂乳化的牛Ⅱ型胶原蛋白以复制CIA模型。造模后第10天,各给药组大鼠均灌胃相应药物,空白组和模型组大鼠均灌胃等体积生理盐水,每天1次,连续2周。记录各组大鼠的一般情况、关节炎指数(AI)和足跖肿胀度;采用酶联免疫吸附测定法检测大鼠血清中IL-1β、TNF-α水平;采用逆转录聚合酶链反应法检测大鼠滑膜组织中OPG、RANKL、RANK mRNA的表达量;采用苏木精-伊红染色法观察大鼠踝关节组织病变情况。结果:八角枫水提液高剂量组有3只大鼠死亡,阳性组和八角枫水提液中剂量组各有1只大鼠造模失败。造模后,除空白组外的其余组大鼠均出现不同程度的足底及踝关节肿胀等症状。与空白组比较,其余组大鼠AI,足跖肿胀度,血清中IL-1β、TNF-α水平,滑膜组织中RANKL、RANK mRNA的表达量均显著升高或增加,OPG mRNA的表达量均显著下降(P<0.01)。与模型组比较,各给药组大鼠AI(造模后第28天),足跖肿胀度(造模后第21、28天),血清中IL-1β、TNF-α水平,滑膜组织中RANKL、RANK mRNA的表达量均显著下降,OPG mRNA的表达量均显著升高(P<0.05),且八角枫水提液高剂量组的AI、IL-1β水平、RANKL mRNA的表达量以及八角枫水提液中、高剂量组RANK mRNA的表达量均显著低于阳性组,阳性组和八角枫水提液高剂量组的TNF-α水平均显著低于八角枫水提液低、中剂量 展开更多
关键词 八角枫 水提液 类风湿关节炎 Ⅱ型胶原诱发关节炎 炎症因子 骨保护素 因子ΚB受体活化因子配体 因子ΚB受体活化因子 血清 滑膜组织 大鼠
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阴极弧沉积掺硅二氧化锆膜对MG63细胞相关因子的影响 预览
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作者 章筛林 成翔宇 +4 位作者 石继祥 周强 石文俊 刘孚瑛 纪斌 《中国组织工程研究》 北大核心 2018年第14期2227-2232,共6页
背景:采用各种表面改性方法提高医用钛及钛合金植入物的骨整合,是目前人工关节假体领域研究的重点之一。目的:在纯钛表面制备掺硅二氧化锆膜,研究其对成骨样MG63细胞相关因子的影响。方法:采用磁过滤真空阴极弧沉积技术在纯钛表面分... 背景:采用各种表面改性方法提高医用钛及钛合金植入物的骨整合,是目前人工关节假体领域研究的重点之一。目的:在纯钛表面制备掺硅二氧化锆膜,研究其对成骨样MG63细胞相关因子的影响。方法:采用磁过滤真空阴极弧沉积技术在纯钛表面分别制备掺硅二氧化锆膜与二氧化锆膜。将成骨样MG63细胞分别接种于掺硅二氧化锆膜、二氧化锆膜及纯钛片表面,接种后第1,4,7,10天,以定量RT-PCR法检测细胞骨保护素和核因子κB受体活化因子配体基因表达情况,ELISA检测细胞分泌骨保护素和核因子κB受体活化因子配体蛋白量。结果与结论:(1)接种第1天,3组骨保护素基因及蛋白表达无差异;接种第4天,掺硅二氧化锆膜组、二氧化锆膜组骨保护素基因及蛋白表达高于纯钛组(P〈0.05),掺硅二氧化锆膜组、二氧化锆膜组骨保护素基因及蛋白表达无差异;接种第7,10天,掺硅二氧化锆膜组骨保护素基因及蛋白表达高于二氧化锆膜组、纯钛组(P〈0.05);(2)接种第1天,3组核因子κB受体活化因子配体基因及蛋白表达无差异;接种第4,7天,掺硅二氧化锆膜组核因子κB受体活化因子配体基因及蛋白表达低于二氧化锆膜组、纯钛组(P〈0.05);接种第10天,掺硅二氧化锆膜组、二氧化锆膜组基因及蛋白表达低于纯钛组(P〈0.05),掺硅二氧化锆膜组、二氧化锆膜组骨保护素基因及蛋白表达无差异;(3)结果表明,在纯钛表面阴极弧沉积掺硅二氧化锆膜,能够上调成骨样MG63细胞内骨保护素表达水平,同时下调核因子κB受体活化因子配体表达水平。 展开更多
关键词 成骨细胞 骨保护素 因子ΚB受体活化因子 组织工程 真空阴极弧沉积 二氧化锆 生物材料 因子ΚB受体活化因子配体 国家自然科学基金
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诱导C57BL/6小鼠骨髓单核细胞向破骨细胞分化的条件 预览
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作者 曾立 耿欢 +2 位作者 刘水涛 姜川 邢更彦 《中国医学前沿杂志(电子版)》 2018年第1期32-36,共5页
目的研究诱导C57BL/6小鼠骨髓单核细胞(bone marrow-derived macrophages,BMMs)向破骨细胞分化的条件,提高诱导破骨细胞的效率。方法采用流式细胞仪鉴定BMMs表面标记物,巨噬细胞集落刺激因子(macrophage colonystimulating factor,M-CSF... 目的研究诱导C57BL/6小鼠骨髓单核细胞(bone marrow-derived macrophages,BMMs)向破骨细胞分化的条件,提高诱导破骨细胞的效率。方法采用流式细胞仪鉴定BMMs表面标记物,巨噬细胞集落刺激因子(macrophage colonystimulating factor,M-CSF)与核因子κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factorκB ligand,RANKL)共同诱导BMMs,4天后形成破骨细胞,通过抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP)与鬼笔环肽染色鉴定诱导出的破骨细胞,通过骨板吸收实验鉴定破骨细胞的骨吸收活性。结果流式细胞仪检测BMMs的CD11b阳性率为98.4%。经过4天诱导,BMMs激活、融合产生了大量的破骨细胞,呈TRAP阳性,鬼笔环肽染色可见纤维肌动蛋白环形成,骨板上形成大量不规则的骨吸收瘢痕。结论RANKL诱导BMMs 4天可产生骨吸收活性较高的破骨细胞。 展开更多
关键词 C57BL/6小鼠骨髓单细胞 破骨细胞 巨噬细胞集落刺激因子 因子ΚB受体活化因子配体
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核因子κB受体活化因子配体对血管紧张素Ⅱ诱导人肾小球足细胞分泌血管内皮细胞生长因子的影响 预览
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作者 齐悦 朱涛 覃志成 《中国当代医药》 2018年第14期13-16,20共5页
目的观察核因子κB受体活化因子配体(RANKL)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的人肾足细胞分泌血管内皮细胞生长因子(VEGF)的影响,探究AngⅡ是否通过RANK/RANKL信号通路影响足细胞表达VEGF。方法以分化为树枝状的人肾足细胞为研究对象,... 目的观察核因子κB受体活化因子配体(RANKL)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的人肾足细胞分泌血管内皮细胞生长因子(VEGF)的影响,探究AngⅡ是否通过RANK/RANKL信号通路影响足细胞表达VEGF。方法以分化为树枝状的人肾足细胞为研究对象,以不同浓度(0、1、10、100 nmol/L)的AngⅡ处理,分别于不同时间(0、6、12、24 h)通过实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测基因VEGF、RANK和RANKL的m RNA表达变化。然后以不同剂量的RANKL与100 nmol/L AngⅡ共同刺激足细胞24 h后,通过RT-PCR检测VEGF的m RNA表达变化,流式细胞术检测足细胞凋亡率变化。结果 AngⅡ呈剂量和时间依赖性地诱导足细胞表达VEGF、RANK和RANKL(P〈0.05),而过量RANKL表现出剂量依赖性地阻断VEGF表达增高(P〈0.05);与对照组比较,AngⅡ可以显著诱导足细胞凋亡(P〈0.05),而RANKL可以抑制由AngⅡ诱导的足细胞凋亡(P〈0.05)。结论 AngⅡ可能通过RANK/RANKL信号通路影响足细胞表达VEGF,RANKL通过反馈调节下调VEGF基因表达来抑制AngⅡ引起的足细胞凋亡,保护肾脏。 展开更多
关键词 足细胞 血管紧张素Ⅱ 因子ΚB受体活化因子配体 血管内皮细胞生长因子
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CaMKⅡδ慢病毒过表达载体构建及其对破骨细胞分化的影响 预览 被引量:1
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作者 张艳波 戚孟春 +4 位作者 董伟 张广峰 冯晓洁 温黎明 孙红 《实用医学杂志》 北大核心 2018年第13期2123-2127,共5页
目的研究钙离子/钙调蛋白依赖性激酶IIδ(CaMKIIδ)过表达对破骨细胞分化的影响。方法筛选破骨细胞分化中CaMKIIδ高表达转录本,构建过表达载体。RAW264.7细胞分成对照组、空载体组和过表达组,检测CaMKIIδ表达情况;并在分化诱导5 d后... 目的研究钙离子/钙调蛋白依赖性激酶IIδ(CaMKIIδ)过表达对破骨细胞分化的影响。方法筛选破骨细胞分化中CaMKIIδ高表达转录本,构建过表达载体。RAW264.7细胞分成对照组、空载体组和过表达组,检测CaMKIIδ表达情况;并在分化诱导5 d后检测破骨细胞生成及骨吸收情况。结果CaMKIIδ转录本2和3在破骨细胞分化中高表达;用转录本2构建了过表达载体,建立了稳定转染株。过表达组CaMKIIδmRNA水平较对照组、空载体组分别上升107.8%和85.7%(P<0.05),蛋白水平分别上升37.2%和37.1%(P<0.05),证实重组CaMKIIδ在细胞中得到有效表达。CaMKIIδ过表达组破骨细胞数目、牙本质吸收陷窝数和面积与对照组和空载体组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论CaMKIIδ过表达对破骨细胞分化和骨吸收无明显影响。 展开更多
关键词 钙离子/钙调蛋白依赖性激酶IIδ 基因重组 破骨细胞 慢病毒 因子ΚB受体活化因子配体
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重组人骨保护素联合替硝唑治疗牙周炎小鼠的疗效及与血清RANKL、MCP-1水平的相关性研究 预览 被引量:1
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作者 陈一 莫安春 +1 位作者 谢永林 邵艳玲 《海南医学院学报》 CAS 2018年第22期1943-1946,共4页
目的 探究重组人骨保护素联合替硝唑治疗牙周炎小鼠的疗效及对血清RANKL、MCP-1水平的影响. 方法: 80只SPF 级清洁的小鼠随机分为4组,各20只,模型组、替硝唑组和重组人骨保护素组使用Kimura等报道的方法建模,替硝唑组小鼠接受替硝唑灌... 目的 探究重组人骨保护素联合替硝唑治疗牙周炎小鼠的疗效及对血清RANKL、MCP-1水平的影响. 方法: 80只SPF 级清洁的小鼠随机分为4组,各20只,模型组、替硝唑组和重组人骨保护素组使用Kimura等报道的方法建模,替硝唑组小鼠接受替硝唑灌胃,重组人骨保护素组在替硝唑组的基础上在牙周袋间隙注入重组人骨保护素治疗.观察并记录四组小鼠牙周变化情况,并进行牙龈评级.苏木精-伊红(HE)染色法显观察上皮组织形态.使用酶联免疫吸附法检测血清中IL-4、IL-6、RANKL和MCP-1水平. 结果: 干预后模型组出现严重炎症反应,包括红肿、出血以及深牙周袋,牙齿明显松动,替硝唑组和重组人骨保护素组小鼠基本恢复,并且重组人骨保护素组小鼠牙龈评级优于替硝唑组和模型组( P 〈0.05).HE染色结果显示干预后模型组组织出现水肿、血管扩张以及大量的炎性浸润,替硝唑组和重组人骨保护素组小鼠的上皮结构完整且排列较为紧密、有序.干预后替硝唑组和重组人骨保护素组的IL-4显著高于模型组而IL-6显著低于模型组( P 〈0.05),并且干预后重组人骨保护素组IL-4显著高于替硝唑组而IL-6显著低于替硝唑组( P 〈0.05).干预后替硝唑组和重组人骨保护素组均显著降低,重组人骨保护素组RAKNL和MCP-1显著低于模型组( P 〉0.05). 结论: 重组人骨保护素联合替硝唑对牙周炎小鼠的牙龈和牙齿具有更好的治疗效果,并且可以降低血清中RAKNL和MCP-1水平,抑制骨吸收,保护牙齿. 展开更多
关键词 牙周炎 替硝唑 重组人骨保护素 因子ΚB受体活化因子配体 细胞趋化蛋白-1
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RAW264.7细胞与骨髓源巨噬细胞向破骨细胞分化特性的比较 预览
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作者 曾立 耿欢 邢更彦 《中华灾害救援医学》 2018年第1期30-34,共5页
目的比较RAW264.7细胞与骨髓源巨噬细胞(bonemarrow-derivedmacrophages,BMMs)向破骨细胞分化的特性。方法骨髓原始细胞经巨噬细胞集落刺激因子(macrophagecolony-stimulatingfactor,M-CSF)刺激3d,免疫荧光鉴定是否为BMMs;RAW26... 目的比较RAW264.7细胞与骨髓源巨噬细胞(bonemarrow-derivedmacrophages,BMMs)向破骨细胞分化的特性。方法骨髓原始细胞经巨噬细胞集落刺激因子(macrophagecolony-stimulatingfactor,M-CSF)刺激3d,免疫荧光鉴定是否为BMMs;RAW264.7细胞与BMMs经核因子κB受体活化因子配体(receptoractivatorofnuclearfactorκBligand,RANKL)诱导4d后,通过抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistantacidphosphatase,TRAP)染色和纤维肌动蛋白环染色鉴定破骨细胞,并比较两者诱导破骨细胞的效率,同时通过骨板吸收实验检测破骨细胞的骨吸收活性。结果骨髓原始细胞经M-CSF刺激3d后可得BMMs;RAW264.7细胞与BMMs经RANKL诱导4d后均可出现大量TRAP阳性多核破骨细胞且形成纤维肌动蛋白环,二者诱导破骨细胞的效率差异无统计学意义;骨板吸收实验显示RAW264.7细胞与BMMs骨板上均形成较多的骨吸收瘢痕,且二者的骨吸收活性差异无统计学意义。结论RAW264.7细胞与BMMs向破骨细胞分化的特性无明显差异。 展开更多
关键词 破骨分化 骨髓源巨噬细胞 RAW264.7细胞 抗酒石酸酸性磷酸酶 因子ΚB受体活化因子配体
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左归丸联合温和灸调节骨质疏松症模型大鼠OPG/RANKL轴的作用研究 被引量:2
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作者 钱康 范永升 《中华中医药杂志》 CSCD 北大核心 2018年第3期881-885,共5页
目的:观察左归丸联合温和灸对骨质疏松症模型大鼠OPG/RANKL轴的影响。方法:雌性SD大鼠48只,随机分为对照组、模型组、左归丸组、左归丸+温和灸组,每组12只。除对照组外,其余大鼠采用手术完整摘除双侧卵巢法进行造模,对照组仅开腹后缝... 目的:观察左归丸联合温和灸对骨质疏松症模型大鼠OPG/RANKL轴的影响。方法:雌性SD大鼠48只,随机分为对照组、模型组、左归丸组、左归丸+温和灸组,每组12只。除对照组外,其余大鼠采用手术完整摘除双侧卵巢法进行造模,对照组仅开腹后缝合,饲养3个月后每组大鼠随机取1只作病理组织学观察判断造模成功。左归丸组予左归丸灌胃,左归丸+温和灸组予左归丸灌胃+"长强穴"艾灸治疗,对照组和模型组予0.9%氯化钠溶液灌胃。治疗90d后,骨密度测定观察大鼠股骨近端及第2腰椎骨密度变化,RT-PCR检测大鼠骨组织VPAC2、OPG和RANKL mRNA的表达水平。结果:(1)与对照组比较,各组大鼠平均股骨近端密度、第2腰椎骨密度均显著减少(P〈0.05,P〈0.01)。与模型组比较,左归丸组、左归丸+温和灸组大鼠平均股骨近端密度、第2腰椎骨密度均显著增加(P〈0.05,P〈0.01);与左归丸组比较,左归丸+温和灸组大鼠平均股骨近端密度、第2腰椎骨密度均增加(P〈0.05)。(2)与对照组比较,模型组大鼠骨组织VPAC2 mRNA、RANKL mRNA表达显著上调,OPG mRNA表达显著下调,OPG/RANKL比值显著降低(P〈0.05,P〈0.01);与模型组比较,左归丸组、左归丸+温和灸组VPAC2 mRNA、RANKL mRNA显著下调,OPG mRNA表达显著上调,OPG/RANKL比值显著升高(P〈0.05,P〈0.01);与左归丸组比较,左归丸+温和灸组大鼠骨组织OPG mRNA表达显著上调,RANKL mRNA表达显著下调,OPG/RANKL比值显著升高(P〈0.05)。结论:左归丸联合温和灸对骨质疏松症模型大鼠的骨密度下降具有一定的改善作用,能通过上调OPG mRNA,下调大鼠骨组织VPAC2、RANKL mRNA的表达,达到治疗骨质疏松症的目标。 展开更多
关键词 左归丸 温和灸 VPAC2 骨保护素 因子ΚB受体活化因子配体
吡咯烷二硫氨基甲酸干预脂多糖刺激下牙周膜干细胞RANKL和OPG的表达 预览 被引量:1
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作者 王娉婷 周盼 +1 位作者 郑国莹 刘大勇 《中国组织工程研究》 北大核心 2018年第21期3365-3370,共6页
背景:研究表明,调控破骨细胞、成骨细胞形成与分化的多种细胞因子,如RANKL和OPG主要是由成骨细胞和骨髓基质细胞分泌的,而与骨髓基质细胞同源的牙周膜干细胞在炎症免疫调控过程中也发挥着显著作用,因此极有可能在毒力因子刺激下也... 背景:研究表明,调控破骨细胞、成骨细胞形成与分化的多种细胞因子,如RANKL和OPG主要是由成骨细胞和骨髓基质细胞分泌的,而与骨髓基质细胞同源的牙周膜干细胞在炎症免疫调控过程中也发挥着显著作用,因此极有可能在毒力因子刺激下也参与RANKL和OPG的表达调控,从而介导牙槽骨吸收。目的:探讨采用吡咯烷二硫氨基甲酸(pyrrolidine dithiocarbamate,PDTC)抑制核因子κB活性能否缓解炎症状态下牙周膜干细胞中RSNKL/RANK/OPG系统的失衡状态。方法:将第4代牙周膜干细胞分为4组:①对照组:含体积分数为10%胎牛血清的DMEM培养基;②脂多糖组:培养基中加入10 mg/L脂多糖;③10 μmol/L PDTC组:用10 μmol/L的PDTC处理细胞30 min,弃去培养基,再加入含10 mg/L脂多糖的培养基;④100 μmol/L PDTC组:用100 μmol/L的PDTC处理细胞30 min,弃去培养基,再加入含10 mg/L脂多糖的培养基。后两组在PDTC处理30 min后倒置显微镜下观察细胞形态,培养24 h后,收集细胞采用RT-PCR检测各组细胞OPG、RANKL mRNA表达量及RANKL/OPG比值变化。结果与结论:①PDTC预处理浓度达100 μmol/L即可引起细胞形态学改变:细胞贴壁部分回缩,变圆,胞体缩小;②与对照组比较,脂多糖组RANKL表达显著升高(P 〈 0.05),10 μmol/L PDTC组RANKL表达较脂多糖组无显著性变化(P 〉 0.05),100 μmol/L PDTC组RANKL表达较脂多糖组显著降低(P 〈 0.05);③与对照组比较,脂多糖组OPG表达略低(P 〉 0.05),10 μmol/L PDTC组OPG表达较脂多糖组显著升高(P 〈 0.05),100 μmol/L PDTC组OPG表达与脂多糖组比较差异无显著性意义(P 〉 0.05);④与对照组比较,其余各组RANKL/OPG比值均有显著升高(P 〈 0.05),脂多糖组升高最明显,随着PDTC浓度升高,RANKL/OPG比值逐渐降低(P 〈 0.05);⑤结果表明,牙周膜干细胞可能在炎症状态� 展开更多
关键词 牙周膜干细胞 骨保护蛋白 因子ΚB受体活化因子配体 脂多糖 吡咯烷二硫氨基甲酸 干细胞 牙周膜 骨保护素 RANK配体 吡咯烷类 组织工程
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