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四倍体野菊与露地菊‘紫秋裳’种间杂交 F1代3个株系倍性鉴定 预览
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作者 何敬峰 李春峰 +2 位作者 丁美娟 刘筱玮 张睿 《东北林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期1-3,共3页
采用传统根尖压片技术对母本四倍体野菊(Dendrathema indicum)与父本露地菊‘紫秋裳’(Dendrathema×gandiflorum‘ziqiushang’)种间杂交F1代3个株系(‘S05’、‘S09’、‘S10’)进行染色体计数观察,并运用流式细胞仪测定样品的荧... 采用传统根尖压片技术对母本四倍体野菊(Dendrathema indicum)与父本露地菊‘紫秋裳’(Dendrathema×gandiflorum‘ziqiushang’)种间杂交F1代3个株系(‘S05’、‘S09’、‘S10’)进行染色体计数观察,并运用流式细胞仪测定样品的荧光强度值进而鉴定其倍性。结果表明:母本四倍体野菊、父本露地菊‘紫秋裳’、‘S05’、‘S09’、‘S10’的染色体数目分别为36条、52~54条、36条、35~38条、36~38条,该试验的染色体计数结果不同于理论上由遗传规律得到的结果;利用流式细胞仪检测荧光强度峰值分别为344.98、401.36、327.64、371.75、309.41,但检测结果受外界影响,准确性有待进一步探讨。 展开更多
关键词 野菊 露地菊'紫秋裳’ 染色体 倍性 流式细胞仪
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印丽萍:科技为盾守国门 预览
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作者 邱伟科 张宁 周瑶 《中国口岸科学技术》 2019年第9期45-47,共3页
我对祖国说从事植物检疫工作已有31年,我亲眼目睹了口岸植检事业由小变大、由弱变强的巨大变化。这些年来,植物检疫技术工作由传统的形态学鉴定法,发展为形态、细胞、光谱、分子、AI辅助鉴定等综合检测体系;由只有几台显微镜的简陋工作... 我对祖国说从事植物检疫工作已有31年,我亲眼目睹了口岸植检事业由小变大、由弱变强的巨大变化。这些年来,植物检疫技术工作由传统的形态学鉴定法,发展为形态、细胞、光谱、分子、AI辅助鉴定等综合检测体系;由只有几台显微镜的简陋工作室,发展为拥有实时荧光PCR仪、流式细胞仪、第三代测序仪等高精尖检测设备的现代化实验大楼;由跟着外国技术专家走,发展为在假高粱鉴定等检疫领域的领跑者……作为新时代新海关的技术一线工作者,我和团队成员将继续奋战在国门“隐形战线”上,守护绿水青山。 展开更多
关键词 植物检疫工作 流式细胞仪 科技 检疫技术 现代化实验 鉴定法 综合检测 检测设备
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骨髓间充质干细胞及其来源的微泡在慢性肾衰竭中的修复机制 预览 被引量:1
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作者 秦军建 邢艳芳 +2 位作者 莫江彬 刘筱萍 侯铁奇 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期398-403,408共7页
目的:探讨骨髓间充质干细胞及其来源的微泡制备方法及在慢性肾衰竭中的修复机制,为慢性肾衰竭治疗提供方法。方法:①骨髓间充质干细胞制备。选择2只SD大鼠,取大鼠胫骨、股骨髓,利用密度梯度离心法完成单一核细胞分离,采用贴壁方法完成... 目的:探讨骨髓间充质干细胞及其来源的微泡制备方法及在慢性肾衰竭中的修复机制,为慢性肾衰竭治疗提供方法。方法:①骨髓间充质干细胞制备。选择2只SD大鼠,取大鼠胫骨、股骨髓,利用密度梯度离心法完成单一核细胞分离,采用贴壁方法完成细胞的培养,采用流式细胞仪制备细胞表面特异性抗原,完成细胞的鉴定。②慢性肾衰竭模型制备及处理方法。选择2015年5月~2016年3月医院实验室进行试验的SD大鼠40只,取10只大鼠设为空白对照组,30只大鼠采用肾切除六分之五合并高盐饮食三个月方法建立大鼠慢性肾衰竭模型,随机数字法分为阳性对照组(n=10)、干细胞组(n=10)及微泡干预组(n=10)。阳性对照组建模成功后不采取任何措施处理,干细胞组建模成功后采用移植制备的骨髓间充质干细胞进行治疗,微泡干预组移植骨髓间充质干细胞后采用超声微泡辐照,比较不同组大鼠慢性肾衰竭修复效果。结果:①细胞换液一次细胞纯化呈梭状、纺锤状,以旋涡方式生长,细胞贴壁后生长迅速,细胞传代一次需要3d,经过三代培养后细胞数量相对较多;②流式细胞仪测定结果表明:对照组细胞表面CD29几乎不表达,而MSC细胞表面CD29阳性率为91.54%,符合骨髓间充质细胞表面特征;③Westernblot法结果表明:HGF蛋白在4组相对分子量为82000部位存在特异性条带,而EGF蛋白则在4组相对分子量为5500部位存在特异性条带;④微泡干预组TNF-α水平低于干细胞组与阳性对照组(P<0.05),微泡干预组细胞黏附分子1水平高于干细胞组与阳性对照组(P<0.05);⑤阳性对照组建模后未经任何处理,肾脏损伤明显,存在大量炎性细胞;空白对照组未参与建模,肾脏组织完整,未见肾脏组织损伤,干细胞组修复30d后肾脏损伤缓解,仍存在少许炎性细胞,微泡干预组修复后30d肾脏组织损伤改善,未见炎性细胞。结论:采用全骨髓法能分离 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 慢性肾衰竭 脉冲超声辐照 贴壁方法 密度梯度离心法 流式细胞仪 高盐饮食
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皱皮木瓜多倍体诱导技术及鉴定
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作者 刁松锋 姜景民 +4 位作者 邵文豪 罗颖 刘金凤 岳华峰 孙晓薇 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2019年第17期5754-5762,共9页
为了探索皱皮木瓜(2n=2x=34)多倍体高效诱导体系及再生植株的快速鉴定技术。以皱皮木瓜成熟的胚、当年生实生幼苗、5a生单株的当年生新稍及其腋芽为材料,以不同浓度的秋水仙碱进行不同时间的诱导,基于流式细胞技术对诱导后的再生植株进... 为了探索皱皮木瓜(2n=2x=34)多倍体高效诱导体系及再生植株的快速鉴定技术。以皱皮木瓜成熟的胚、当年生实生幼苗、5a生单株的当年生新稍及其腋芽为材料,以不同浓度的秋水仙碱进行不同时间的诱导,基于流式细胞技术对诱导后的再生植株进行倍性鉴定。结果表明:皱皮木瓜四种材料在秋水仙碱诱导下均能产生多倍体,但诱导效率和再生植株的变异率差别显著,其中以5a单株的基部粗度为1.0 cm的新稍为材料,用1.2%秋水仙碱+4.0 mg/L TDZ+2.0 mg/L AgNO3的混合药液处理3 d的诱导体系最佳,其再生植株变异率可达9.09%。经流式细胞仪检测,4 862个再生植株中存在二倍体、三倍体、四倍体和2x/4x嵌合体,其中91个发生变异,变异率为1.87%;三倍体与嵌合体约占变异个数的5.5%。本研究建立一套皱皮木瓜多倍体的高效诱导体系,开创了流式细胞术在木瓜属植株中的应用先河,为皱皮木瓜的种质创新和新品种培育提供科学依据。 展开更多
关键词 皱皮木瓜 秋水仙碱 多倍体 流式细胞仪
射频消融治疗对肝癌患者细胞免疫功能的影响
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作者 宋士军 白力允 +4 位作者 申家辉 赵红丹 郭康 李俊鹏 王侠 《临床心身疾病杂志》 CAS 2019年第3期29-31,共3页
目的探讨射频消融治疗对肝癌患者细胞免疫功能的影响。方法对60例肝癌患者应用射频消融术治疗,于治疗前24h、治疗1周及4周末采用流式细胞仪检测患者外周血T淋巴细胞亚群及CD4^+CD25^+调节性T细胞的比例变化,治疗4周末依据临床症状缓解... 目的探讨射频消融治疗对肝癌患者细胞免疫功能的影响。方法对60例肝癌患者应用射频消融术治疗,于治疗前24h、治疗1周及4周末采用流式细胞仪检测患者外周血T淋巴细胞亚群及CD4^+CD25^+调节性T细胞的比例变化,治疗4周末依据临床症状缓解情况评定临床疗效。结果治疗4周末,本组患者治疗总有效率为50%。射频消融治疗1周、4周末患者外周血中CD3^+、CD4^+及CD4^+/CD8^+水平均较治疗前升高,CD4^+CD25^+调节性T细胞较治疗前降低,差异有统计学意义(P<0.05);CD8^+水平略升高,差异无统计学意义(P>0.05)。与治疗1周末比较,治疗4周末CD3^+、CD4^+及CD4^+/CD8^+比例略有升高,CD4^+CD25^+调节性T细胞比例略升高,差异无统计学意义(P>0.05)。结论原发性肝癌患者存在细胞免疫抑制,射频消融治疗能明显提高患者的细胞免疫功能。 展开更多
关键词 肝癌 射频消融术 T淋巴细胞亚群 CD4^+CD25^+调节性T细胞 流式细胞仪 免疫功能
胃癌患者T细胞亚群变化及临床意义 预览
6
作者 解朝莉 《山西医药杂志》 CAS 2019年第2期234-236,共3页
目前,胃癌已成为我国最常见的消化系统性恶性肿瘤,在所有危害人们健康的癌症中,胃癌的发病率已位居第二位,仅次于肺癌。现阶段,我国胃癌的发病率与病死率已超过全球平均水平,严重威胁着人们的生命健康,亦会对社会造成严重的经济负担[1,2... 目前,胃癌已成为我国最常见的消化系统性恶性肿瘤,在所有危害人们健康的癌症中,胃癌的发病率已位居第二位,仅次于肺癌。现阶段,我国胃癌的发病率与病死率已超过全球平均水平,严重威胁着人们的生命健康,亦会对社会造成严重的经济负担[1,2]。细胞免疫作为机体抵抗肿瘤的重要防御机制,与胃癌的发生发展以及预后有着密切的关系。而细胞免疫的完成主要依靠体内的T细胞。T细胞主要来源于骨髓中的多能干细胞,骨髓中的淋巴干细胞在胸腺中分化、发育成熟后,再经过全身的淋巴组织以及血液循环分布到全身的免疫器官以及组织中,进而发挥具体的免疫功能[3,4]。为探讨细胞免疫在胃癌患者发病过程中的作用,本研究通过流式细胞仪分析外周T淋巴细胞亚群水平的变化情况,以期为疾病的早期诊断与治疗提供临床依据,现报道如下。 展开更多
关键词 T细胞亚群变化 胃癌患者 临床意义 T淋巴细胞亚群 多能干细胞 细胞免疫 淋巴组织 流式细胞仪
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北京地区老年人外周血淋巴细胞亚群正常参考范围的建立及比较 预览
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作者 李恺 李青霖 +1 位作者 吴亮亮 王小丹 《临床和实验医学杂志》 2019年第7期763-766,共4页
目的建立及比较北京地区不同年龄段老年人外周血淋巴细胞亚群正常参考范围。方法将参与2018年度解放军总医院健康体检的524例北京地区健康成人按10岁为1年龄段共分为4组,采用美国Beckman流式细胞仪结合血液分析仪分别检测他们的外周血CD... 目的建立及比较北京地区不同年龄段老年人外周血淋巴细胞亚群正常参考范围。方法将参与2018年度解放军总医院健康体检的524例北京地区健康成人按10岁为1年龄段共分为4组,采用美国Beckman流式细胞仪结合血液分析仪分别检测他们的外周血CD4^+、CD3^+及CD8^+等T淋巴亚群及CD19+及NK细胞,采用SPSS17.0软件来分别比较各组间各项指标的统计学差异,并采用受检人群中年龄≥60岁的老年人的检测结果来获得适用于北京地区老年人的淋巴细胞亚群正常参考范围。结果淋巴细胞百分比随年龄的增长有所降低;CD3^+、CD3^+CD8^+及CD4^+45RO^+占淋巴细胞百分比随着年龄的增长而增高;自然杀伤细胞(NK)占淋巴细胞百分比随着年龄的增长而降低。北京地区老年人外周血淋巴细胞亚群正常参考范围(以95%CI表示)如下:淋巴细胞:759~2783cell/μl(12.9~47.3);CD3^+:929~1610cell/μl(53.08~91.92);CD3^+CD8^+:202~775cell/μl(11.53~44.25);CD3^+CD4^+:250~1248cell/μl(14.30~71.30);CD4^+45RA^+:33~662cell/μl(1.9~37.80);CD4+45RO+:199~807cell/μl(11.34~46.07);CD19:7~403cell/μl(0.40~22.99);NK:32~501cell/μl(1.80~28.61)。结论年龄因素可影响人外周血淋巴细胞亚群CD3^+、CD3^+CD8^+、CD4^+45RO^+及NK占淋巴细胞百分比,有必要建立适当的、适用于北京地区老年人的上述常见淋巴细胞亚群正常参考范围。 展开更多
关键词 老年人 淋巴细胞亚群 正常参考范围 流式细胞仪
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鲤春病毒血症病毒糖蛋白酵母表面展示系统的建立 预览
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作者 林婧楠 赵景壮 +3 位作者 刘淼 任广明 卢彤岩 徐黎明 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期977-982,共6页
糖蛋白(Glycoprotein,G)作为鲤春病毒血症病毒(Spring Virernia of Carp Virus,SVCV)主要的抗原蛋白,已成为现阶段SVCV病毒检测、抗体制备以及疫苗研制的热点。为了对其进行酵母表面展示,研究以SVCVshlj1分离株基因组为模板,通过RT-PCR... 糖蛋白(Glycoprotein,G)作为鲤春病毒血症病毒(Spring Virernia of Carp Virus,SVCV)主要的抗原蛋白,已成为现阶段SVCV病毒检测、抗体制备以及疫苗研制的热点。为了对其进行酵母表面展示,研究以SVCVshlj1分离株基因组为模板,通过RT-PCR技术,体外扩增获得SVCV表面糖蛋白的基因开放阅读框(1530 bp)片段,将其克隆至酵母表面展示载体pYD1,构建重组质粒pYD1-G。利用电转化方法将重组质粒pYD1-G导入酿酒酵母EBY100感受态细胞,经YNB选择培养基筛选和菌液PCR的鉴定,挑选出阳性转化子(命名为EBY100-pYD1-G),对其进行2%半乳糖诱导。利用细胞免疫荧光和流式细胞仪检测G蛋白的酵母表面展示情况。细胞免疫荧光结果显示,诱导后的酵母细胞EBY100-pYD1-G能产生特异性红色荧光,且随着诱导时间的增加,红色荧光的酵母细胞所占比例不断增加,各组之间差异显著(P<0.05)。流式细胞仪检测结果显示,酵母细胞的荧光强度与诱导时间呈正比,其中诱导48h与72h的酵母细胞荧光强度不存在显著差异,基本趋于稳定不变的状态。因此,选取诱导48h为酵母表面展示的最佳诱导时间。上述研究结果表明SVCV的G蛋白已经成功展示于酿酒酵母细胞表面,研究为鲤春病毒血症酵母口服疫苗的研发奠定了前期基础。 展开更多
关键词 鲤春病毒血症病毒 糖蛋白 酵母表面展示系统 流式细胞仪
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利用流式细胞仪鉴定鸭茅倍性 预览
9
作者 许蕾 陈佩琳 +4 位作者 冯光燕 钟旻依 景婷婷 黄琳凯 张新全 《草业学报》 CSCD 北大核心 2019年第3期74-84,共11页
鸭茅为世界重要禾本科牧草之一,多为四倍体或二倍体。快速鉴定其倍性可为鸭茅遗传背景研究及多倍体材料的创制提供技术支撑,加快育种进度。采用流式细胞术,筛选4种细胞核DNA解离液,对比2种流式细胞仪检测方法,最终建立鸭茅倍性鉴定高效... 鸭茅为世界重要禾本科牧草之一,多为四倍体或二倍体。快速鉴定其倍性可为鸭茅遗传背景研究及多倍体材料的创制提供技术支撑,加快育种进度。采用流式细胞术,筛选4种细胞核DNA解离液,对比2种流式细胞仪检测方法,最终建立鸭茅倍性鉴定高效技术体系。结果表明,不同解离液处理后的细胞核DNA含量存在一定差异。利用Otto制备鸭茅细胞核悬浮液效果较理想,峰型完整,碎片峰较少且样本峰信号清晰,其荧光变异系数为5%左右。内外标法检测各有优势,外标法检测更快速更简便,而内标法准确性更高。在以外标检测为主的基础上,共在46份鸭茅材料中鉴定出二倍体鸭茅22份,四倍体鸭茅24份,为鸭茅遗传育种提供材料。 展开更多
关键词 流式细胞仪 鸭茅 倍性 外标法 内标法
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啤酒生产用酵母菌株保藏方法探讨
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作者 熊丹 《中外酒业》 2019年第11期13-18,共6页
酵母是啤酒的灵魂。在啤酒生产中,所用的菌株性能是否优良,直接关系到啤酒成晶质量好坏。菌株保藏有较多方法,本文拟通过试验探索出最佳的菌种保存工艺。
关键词 菌种保藏 发酵性能 固定化保藏 流式细胞仪
一种制备新生隐球菌单细胞的方法
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作者 周利艳 付钰 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期326-333,共8页
【目的】建立流式细胞仪分选新生隐球菌单细胞的方法,确定新生隐球菌单细胞恢复生长的条件和能力。【方法】利用Moflo XDP流式细胞分析分选仪,体外测定不同条件下新生隐球菌恢复生长的比率。【结果】建立了流式细胞仪新生隐球菌单细胞... 【目的】建立流式细胞仪分选新生隐球菌单细胞的方法,确定新生隐球菌单细胞恢复生长的条件和能力。【方法】利用Moflo XDP流式细胞分析分选仪,体外测定不同条件下新生隐球菌恢复生长的比率。【结果】建立了流式细胞仪新生隐球菌单细胞分选流程。确定流式细胞仪分选得到的新生隐球菌单细胞具有恢复生长的能力,恢复生长的能力受营养条件和菌株差异的影响。在营养丰富的条件下,新生隐球菌JEC21和H99单细胞恢复生长比率分别为74%和89%。在寡营养条件下,JEC21和H99单细胞恢复生长比率分别为37%和80%。JEC21生长比率随细胞数的增加而升高,细胞数为100个时,生长比率为55%;细胞数为1000个时,生长比率为97%。【结论】流式细胞仪分选得到新生隐球菌单细胞具有恢复生长的能力,生长能力受营养条件、菌株差异的影响。 展开更多
关键词 细胞分选技术 流式细胞仪 新生隐球菌
208个葡萄品种染色体倍性的流式细胞分析 预览
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作者 裴丹 葛孟清 +3 位作者 董天宇 魏新科 刘崇怀 房经贵 《中外葡萄与葡萄酒》 2019年第5期21-28,共8页
染色体倍性鉴定是种质资源评价的重要内容,对品种资源的科学利用具有重要意义。流式细胞仪能够快速、准确地对细胞核DNA含量进行测定,从而反映染色体倍性。本文从3种解离缓冲液中筛选出WPB解离液,建立了葡萄染色体倍性流式分析体系,并对... 染色体倍性鉴定是种质资源评价的重要内容,对品种资源的科学利用具有重要意义。流式细胞仪能够快速、准确地对细胞核DNA含量进行测定,从而反映染色体倍性。本文从3种解离缓冲液中筛选出WPB解离液,建立了葡萄染色体倍性流式分析体系,并对208个葡萄品种细胞核DNA的相对含量进行测定,其中二倍体葡萄品种138个,三倍体品种11个,四倍体品种59个。为葡萄倍性鉴定及多倍体育种提供理论依据。 展开更多
关键词 葡萄 流式细胞仪 染色体倍性水平
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纳米细菌对人关节软骨细胞生物学形态的影响
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作者 彭伟秋 张祥洪 +3 位作者 韦钊岚 丘立标 张湘生 刘傥 《中华实用诊断与治疗杂志》 2019年第1期11-13,共3页
目的观察纳米细菌损伤人膝关节软骨细胞的方式和特点。方法正常人膝关节软骨细胞分为高浓度组、中浓度组、低浓度组和对照组,分别加入吸光度值为0.280、0.035、0.002、0的纳米细菌液进行攻击,加入纳米细菌液24、48h时光镜下观察4组膝关... 目的观察纳米细菌损伤人膝关节软骨细胞的方式和特点。方法正常人膝关节软骨细胞分为高浓度组、中浓度组、低浓度组和对照组,分别加入吸光度值为0.280、0.035、0.002、0的纳米细菌液进行攻击,加入纳米细菌液24、48h时光镜下观察4组膝关节软骨细胞形态学变化及存活率,免疫荧光染色法观察中浓度组加入纳米细菌液0、1、2、4、8h时纳米细菌与软骨细胞的位置关系,流式细胞仪检测加入纳米细菌液24h时4组软骨细胞凋亡率。结果高浓度组加入纳米细菌液24h、中浓度组加入纳米细菌液48h,光镜下大部分软骨细胞坏死甚至未见完整细胞形态;加入纳米细菌液24、48h时,高浓度组软骨细胞存活率吸光度值(0.413±0.046、0.345±0.125)低于中浓度组(0.496±0.039、0.708±0.043)、低浓度组(0.539±0.047、1.018±0.048)和对照组(0.577±0.045、1.133±0.127)(P<0.05),中浓度组低于低浓度组和对照组(P<0.05),低浓度组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);纳米细菌可在较短时间内侵入至软骨细胞中,且随时间延长软骨细胞内纳米细菌荧光颗粒数目增多;加入纳米细菌液24h,高、中、低浓度组和对照组软骨细胞凋亡率[(1.541±0.046)%、(1.546±0.039)%、(1.539±0.047)%、(1.527±0.045)%]比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论纳米细菌可损伤人关节软骨细胞,短时间内(24h)被攻击的软骨细胞未发现明显凋亡,高浓度纳米细菌可造成人关节软骨细胞更严重损伤。 展开更多
关键词 纳米细菌 人关节软骨细胞 凋亡 流式细胞仪
流式细胞仪淋巴亚群在肿瘤化学治疗后患者中的应用效果 预览
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作者 张丽柯 杨卫 +1 位作者 史芳瑜 徐全晓 《实用医技杂志》 2019年第4期445-447,共3页
目的探究流式细胞仪淋巴亚群在肿瘤化学治疗后患者中的应用效果。方法选取2015年1月到2018年1月我院收治的恶性肿瘤患者80例,患者均进行化学治疗治疗,其中41例患者化学治疗后完全缓解,39例患者化学治疗后无缓解,并选取同期健康体检者80... 目的探究流式细胞仪淋巴亚群在肿瘤化学治疗后患者中的应用效果。方法选取2015年1月到2018年1月我院收治的恶性肿瘤患者80例,患者均进行化学治疗治疗,其中41例患者化学治疗后完全缓解,39例患者化学治疗后无缓解,并选取同期健康体检者80名作为对照组,对比患者的淋巴亚群变化情况。结果 2组患者的淋巴亚群变化情况对比,试验组患者化学治疗前、化学治疗后与对照组CD4~+细胞、CD19~+细胞、CD3~+细胞、CD8~+细胞、NK(CD3~-CD16~+CD56~+)相比明显较低,差异存在统计学意义(P<0.05);对比化学治疗后无缓解与化学治疗前患者的CD4~+细胞、CD19~+细胞、CD3~+细胞、CD8~+细胞、NK(CD3-CD16~+CD56~+)变化情况,差异无统计学意义(P>0.05);试验组患者化学治疗后完全缓解与化学治疗前、化学治疗后无缓解对比,CD4~+细胞、CD19~+细胞、CD3~+细胞、CD8~+细胞、NK(CD3~-CD16~+CD56~+)差异有统计学意义(P<0.05)。结论恶性肿瘤患者的免疫功能会逐渐下降,患者经过有效的化学治疗后,能够使患者的免疫功能得到恢复,进而能够为患者的下一步治疗奠定基础,该种检验方式应在临床中广泛应用。 展开更多
关键词 化学治疗 亚群变化 试验组 流式细胞仪 应用效果
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应用流式细胞仪检测聚合物纳米胶束表面抗体偶联效率
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作者 田九博 张丽娜 +6 位作者 王萱 马培元 穆秀丽 孟涛涛 孟凡秀 弓韬 于保锋 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2019年第9期1020-1024,共5页
目的探索应用流式细胞仪(flow cytometer,FCM)检测纳米级聚合物胶束(polymeric micelles,PMs)表面偶联抗体效率的方法。方法将DMPE-PEG-Maleimide、DPPE-PEG-Maleimide、DSPE-PEG-Maleimide、DOPE-PEG-Malei-mide、DLPE-PEG-Maleimide... 目的探索应用流式细胞仪(flow cytometer,FCM)检测纳米级聚合物胶束(polymeric micelles,PMs)表面偶联抗体效率的方法。方法将DMPE-PEG-Maleimide、DPPE-PEG-Maleimide、DSPE-PEG-Maleimide、DOPE-PEG-Malei-mide、DLPE-PEG-Maleimide聚合物纳米胶束分别与Anti-GOLPH2抗体共同孵育,使其彼此偶联;再与SNU-423细胞共同孵育,采用FCM检测SNU-423细胞膜表面GOLPH2抗原的阳性表达率,并比较各类聚合物纳米胶束与AntiGOLPH2抗体的相对偶联效率。结果 SNU-423细胞表面GOLPH2抗原的阳性表达率为1.23%;在各类聚合物纳米胶束中,DLPE-PEG-Maleimide与Anti-GOLPH2抗体的相对偶联效率最高,且与抗体浓度呈正相关。结论应用FCM检测聚合物纳米胶束表面抗体偶联效率的方法,能在一定程度上反映抗体与聚合物纳米胶束的抗体偶联情况,其检测结果具有一定的参考价值。 展开更多
关键词 流式细胞仪 聚合物纳米胶束 GOLPH2抗原 Anti-GOLPH2抗体 抗体偶联比
康莱特注射液在晚期非小细胞肺癌患者中的疗效观察及对T淋巴细胞水平的影响研究 预览
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作者 袁帅 金春晖 +1 位作者 袁可淼 袁晓航(指导) 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期1126-1130,共5页
目的:探讨康莱特注射液在晚期非小细胞肺癌患者中的疗效观察及对T淋巴细胞水平的影响。方法:选择2011年7月~2015年3月以晚期非小细胞肺癌收治的患者120例作为研究对象,根据治疗方案分为对照组(n=60)和观察组(n=60)。对照组采用单纯化疗... 目的:探讨康莱特注射液在晚期非小细胞肺癌患者中的疗效观察及对T淋巴细胞水平的影响。方法:选择2011年7月~2015年3月以晚期非小细胞肺癌收治的患者120例作为研究对象,根据治疗方案分为对照组(n=60)和观察组(n=60)。对照组采用单纯化疗治疗,观察组在对照组基础上联合康莱特注射液治疗,两组均治疗4个疗程,治疗完毕后对患者效果进行评估。根据世界卫生组织(WHO)疗效评定标准从完全缓解(CR)、部分缓解(PR)、稳定(SD)及进展(PD)对患者疗效率进行评估;采用流式细胞仪测定两组治疗前、治疗4疗程后CD3^+、CD4^+、CD8^+及CD4^+/CD8^+水平;记录并统计两组治疗后气促乏力、胸痛、咳嗽、发热、咯血及吞咽困难发生率;两组治疗后均进行3年随访,记录并统计患者治疗后生存期,比较两组治疗效果及对T淋巴细胞水平的影响。结果:观察组采用康莱特注射液4个疗程的近期疗效率为53.33%,高于对照组38.33%(P<0.05);观察组治疗4个疗程后CD3^+、CD4^+、CD8^+及CD4^+/CD8^+水平均高于对照组(P<0.05)。观察组与对照组治疗后气促乏力、胸痛、咳嗽、发热、咯血及吞咽困难发生率差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后对患者进行3年随访,观察组中位生存期为(18.35±3.21)个月长于对照组(13.29±2.95)个月(P<0.05);观察组3年生存率为41.67%(25/60)高于对照组25.00%(15/60)(P<0.05)。结论:将康莱特注射液用于晚期非小细胞肺癌患者中能获得较高疗效,能提高机体免疫水平,药物安全性较高,能延长患者生存期,值得推广应用。 展开更多
关键词 康莱特注射液 晚期非小细胞肺癌 免疫水平 安全性 生存期 流式细胞仪
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人血免疫球蛋白在自身免疫性脑炎患者中的应用效果及对其免疫水平、死亡率的影响 预览
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作者 杨超 郭小兵 贾祥东 《中国当代医药》 2019年第15期13-17,共5页
目的探讨人血免疫球蛋白在自身免疫性脑炎患者中的应用及对患者免疫水平、死亡率的影响.方法选取2015年5月~2017年5月北京南苑医院、解放军总医院附属第一医院收治的42例自身免疫性脑炎患者作为研究对象,采用随机数字公式将其分为对照组... 目的探讨人血免疫球蛋白在自身免疫性脑炎患者中的应用及对患者免疫水平、死亡率的影响.方法选取2015年5月~2017年5月北京南苑医院、解放军总医院附属第一医院收治的42例自身免疫性脑炎患者作为研究对象,采用随机数字公式将其分为对照组(21例)和观察组(21例).对照组患者采用甲泼尼龙(甲强龙)治疗3周,观察组患者在对照组的基础上联合人血免疫球蛋白治疗3周.治疗完毕后,采用简易智能精神状态检查量表(MMSE)评估患者的认知水平;采用流式细胞仪测定两组患者治疗前、治疗后3周的CD3^+、CD4^+、CD8^+及CD4^+/CD8^+细胞水平;采用酶联免疫吸附试验测定两组患者治疗前、治疗后3周的降钙素原(PCT)、干扰素-γ(INF-γ)、白细胞介素-6(IL-6)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;随访12个月并统计两组患者治疗后的死亡率.结果两组患者治疗后1、2、3周的MMSE评分均显著高于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05);观察组患者治疗后1、2、3周的MMSE评分均显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).两组患者治疗后3周的CD3^+、CD4^+、CD4^+/CD8^+细胞水平均显著高于治疗前,CD8^+细胞水平显著低于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05);观察组患者治疗后3周的CD3^+、CD4^+、CD4^+/CD8^+细胞水平均显著高于对照组,CD8^+细胞水平显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).两组患者治疗后3周的PCT、INF-γ、IL-6及TNF-α水平均明显低于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05);观察组患者治疗后3周的PCT、INF-γ、IL-6及TNF-α水平均明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).观察组患者治疗后4、8及12个月的死亡率均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论人血免疫球蛋白治疗自身免疫性脑炎,有助于提高机体免疫功能,改善患者的认知功能,降低炎症因子水平及死亡率. 展开更多
关键词 人血免疫球蛋白 自身免疫性脑炎 免疫水平 炎症因子 死亡率 流式细胞仪 酶联免疫吸附试验
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CD200在大肠癌干细胞中的表达及其与患者细胞免疫水平的相关性研究 预览
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作者 彭伯坚 周永健 +4 位作者 张园 张险峰 张拥军 曹天生 李瑜元 《现代消化及介入诊疗》 2019年第9期989-992,共4页
目的探讨CD200在大肠癌干细胞中的表达及其对患者细胞免疫水平的相关性。方法选取2015年4月至2017年5月广东省广州市花都区人民医院收治的大肠癌患者58例作为对象,所有患者均行手术治疗,取大肠癌病灶组织,采用差速离心法完成大肠癌干细... 目的探讨CD200在大肠癌干细胞中的表达及其对患者细胞免疫水平的相关性。方法选取2015年4月至2017年5月广东省广州市花都区人民医院收治的大肠癌患者58例作为对象,所有患者均行手术治疗,取大肠癌病灶组织,采用差速离心法完成大肠癌干细胞分离、培养。根据手术效果将患者分为完全缓解组(42例,病灶切除,近6个月未见复发)和未缓解组(16例,病灶切除但出现复发或病灶未能全部切除,病情持续发展)。采用流式细胞仪测定两组样本中CD200阳性细胞数;采用酶联免疫吸附试验测定两组白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-10(IL-10)和转化生长因子β1(TGF-β1);采用SPSS Pearson?相关性分析软件对CD200在大肠癌中与肿瘤细胞免疫水平相关性进行分析。结果倒置显微镜下结肠癌干细胞接种在胎牛血清10.0%培养基中,第3天仍可见干细胞球,多数细胞悬浮生长,部分细胞从细胞求中逸出呈梭形;第7天多数干细胞贴壁生长,呈梭形;第9天干细胞全部转化为梭状大肠癌干细胞,且贴壁生长,流式细胞仪测定结果表明:结肠癌干细胞表面标志物CD200细胞群含量达到80.3%;大肠癌患者中完全缓解组CD200表达水平低于未缓解组(P<0.01);完全缓解组IL-17、INF-γ、IL-10及TGF-β1水平,均高于未缓解组(P<0.01);完全缓解组IL-4水平,低于未缓解组(P<0.01)。大肠癌干细胞CD200表达水平与FoxP3+/CD4+、IL-4呈正相关(P<0.05);大肠癌干细胞CD200表达水平与IL-17、INF-r、IL-10及TGF-β1水平呈负相关(P<0.05)。结论CD200在大肠癌干细胞中呈高表达,且与肿瘤患者细胞免疫水平具有一定的相关性,加强CD200表达水平测定能评估、预测疾病严重程度,指导临床治疗,值得推广应用。 展开更多
关键词 CD200 大肠癌干细胞 肿瘤免疫细胞 临床治疗 酶联免疫吸附试验 流式细胞仪
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动物性控精液的分离及纯度评价方法的研究进展 预览
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作者 侯胜奎 陶晨雨 +3 位作者 胡慧艳 刘津 张婧 贾青 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2019年第4期12-16,24共6页
性控技术可以加速优良种畜的繁育速度,有效发挥母畜的繁殖潜力,为乳用动物提供母畜,为肉用动物提供公畜。将雄性动物精液分离不但可以提高后代质量,而且可提高繁殖效率。动物性控精液的分离作为动物遗传育种的重要组成部分,为畜牧业发... 性控技术可以加速优良种畜的繁育速度,有效发挥母畜的繁殖潜力,为乳用动物提供母畜,为肉用动物提供公畜。将雄性动物精液分离不但可以提高后代质量,而且可提高繁殖效率。动物性控精液的分离作为动物遗传育种的重要组成部分,为畜牧业发展起到了重要作用。本文综述了流式细胞仪分离精液的研究进展及精液纯度评价方法,以期为新方法的探索提供参考。 展开更多
关键词 流式细胞仪 性别控制 精子分离 纯度 评价方法
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乳腺癌干细胞富集与鉴定的初步研究 预览
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作者 张颖 代引海 +3 位作者 邱春丽 王茂 马海龙 毛宁 《现代肿瘤医学》 CAS 2019年第6期929-934,共6页
目的:通过从MCF-7、ZR-75-1、MDA-MB-231乳腺癌细胞系中培养富集及鉴定乳腺癌干细胞(breast cancer stem cell,BCSC),寻找培养与富集乳腺癌干细胞的方法。方法:贴壁培养MCF-7、ZR-75-1、MDA-MB-231细胞系,倒置显微镜观察各细胞形态;流... 目的:通过从MCF-7、ZR-75-1、MDA-MB-231乳腺癌细胞系中培养富集及鉴定乳腺癌干细胞(breast cancer stem cell,BCSC),寻找培养与富集乳腺癌干细胞的方法。方法:贴壁培养MCF-7、ZR-75-1、MDA-MB-231细胞系,倒置显微镜观察各细胞形态;流式细胞仪分别分选收集CD44^-CD24^-、CD44^-CD24^+、CD44^+CD24^-及 CD44^+CD24^+细胞,其中CD44^+CD24^-为乳腺癌干细胞,其余三类为对照组;MTT法计数细胞,绘制MCF-7、ZR-75-1、MDA-MB-231细胞系生长曲线;MCF-7细胞系进行无血清悬浮培养1个周期,流式细胞仪检测分子表面标记物CD44^+CD24^-含量,贴壁培养的CD44^+CD24^-乳腺癌干细胞为对照组;将分选的MCF-7(CD44^+CD24^-)和分选的其余MCF-7细胞(非CD44^+CD24^-)进行干性成球实验,鉴定CD44^+CD24^-干性表达。结果:MCF-7、MDA-MB-231细胞系富含表面标志物CD44 -CD24^-的乳腺癌细胞;ZR-75-1细胞系富含分子表面标志物CD44^+CD24^+的乳腺癌细胞;生长曲线显示MCF-7、ZR-75-1、MDA-MB-231均呈持续增长,MDA-MB-231细胞生长较MCF-7、ZR-75-1细胞快;通过无血清悬浮培养CD44^+CD24^-乳腺癌干细胞由19.4%富集到88.9%;成球实验中CD44^+CD24^-表型细胞成球数量较分选的其余MCF-7细胞(非CD44^+CD24^-表型)明显增多,成球率分别为(36.5±1.7)%,(1.1±0.5)%。结论:流式细胞仪可成功分选出分子表面标志物为CD44^+CD24^-的乳腺癌干细胞;CD44^+CD24^-可能不是乳腺癌干细胞唯一的表面标志物;MDA-MB-231细胞系较MCF-7、ZR-75-1细胞系生长快;无血清悬浮培养法可简便、高效地富集乳腺癌干细胞;CD44^+CD24^-乳腺癌干细胞干性表达较强。 展开更多
关键词 乳腺癌干细胞 流式细胞仪 悬浮培养 富集 鉴定
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