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海藻糖酶在谷氨酸发酵过程中的应用 预览
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作者 王兰刚 韩隽 +3 位作者 李进 宋小东 王志平 张明 《发酵科技通讯》 CAS 2019年第3期154-158,共5页
谷氨酸发酵过程中会产生海藻糖,影响糖酸转化率。为了降低海藻糖质量分数,提高糖酸转化率,在发酵过程中添加海藻糖酶水解海藻糖,利用高效液相色谱法测定发酵液中海藻糖质量分数。最终确定发酵周期24 h时为最佳添加时间,加酶后发酵液中... 谷氨酸发酵过程中会产生海藻糖,影响糖酸转化率。为了降低海藻糖质量分数,提高糖酸转化率,在发酵过程中添加海藻糖酶水解海藻糖,利用高效液相色谱法测定发酵液中海藻糖质量分数。最终确定发酵周期24 h时为最佳添加时间,加酶后发酵液中海藻糖质量分数降低了74%,糖酸转化率提高0.5%~1.0%,对谷氨酸发酵产酸率无影响。利用四效蒸发器将发酵液先进行浓缩,再分离,分别分析浓缩发酵液及分离母液的残糖组分,发现海藻糖酶可以降低发酵液中的残糖质量分数,从而减小对下游谷氨酸提取的影响。 展开更多
关键词 海藻 海藻糖酶 残糖
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海藻糖酶基因TRE2-like和TRE2在异色瓢虫羽化过程中的表达与功能 预览
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作者 张道伟 李燕 +5 位作者 张萌 王莎莎 肖仲久 曾伯平 倪晓丽 唐斌 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期663-671,共9页
【目的】异色瓢虫Harmonia axyridis是一种重要的捕食性天敌昆虫,海藻糖在异色瓢虫的变态发育、羽化等整个生命过程都起着重要的作用。本研究以前期获得的类似膜结合型海藻糖酶(TRE2-like)与膜结合型海藻糖酶(TRE2)基因为基础,探讨在异... 【目的】异色瓢虫Harmonia axyridis是一种重要的捕食性天敌昆虫,海藻糖在异色瓢虫的变态发育、羽化等整个生命过程都起着重要的作用。本研究以前期获得的类似膜结合型海藻糖酶(TRE2-like)与膜结合型海藻糖酶(TRE2)基因为基础,探讨在异色瓢虫羽化阶段这两个海藻糖酶的潜在功能,为阐明异色瓢虫从蛹发育到成虫时海藻糖代谢机制提供参考。【方法】根据TRE2-like和TRE2基因序列设计双链RNA(dsRNA)区域片段并合成对应的dsRNA,通过RNAi将其注射到异色瓢虫2日龄蛹中。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测RNAi处理后羽化第1天的异色瓢虫成虫糖代谢相关基因的表达;同时采用蒽酮比色法、酶标法等分别测定RNAi处理后羽化第1天的异色瓢虫成虫主要糖类物质含量及TRE活性变化,并观察异色瓢虫羽化后的表型变化。【结果】结果表明,与对照组(dsGFP注射组)相比,异色瓢虫2日龄蛹被注射TRE2-like或TRE2 dsRNA后,其新羽化成虫体内TRE2-like和TRE2表达量均极显著下调,且少数个体出现了蜕皮与翅形成困难等畸形表型。可溶性海藻糖酶活性在注射dsTRE2-like后显著降低,膜结合型海藻糖酶活性在注射dsTRE2后显著降低;注射dsTRE2后糖原含量显著下降,注射dsTRE2-like后糖原和海藻糖含量显著下降,注射dsTRE2-like+dsTRE2后糖原和葡萄糖含量显著下降,且海藻糖含量极显著下降。注射dsTRE2-like, dsTRE2和dsTRE2-like+dsTRE2后可溶性海藻糖酶基因TRE1-1和TRE1-2表达下降或显著下降,而TRE1-5表达上升或显著上升,海藻糖合成酶(trealose-6-phosphate synthase, TPS)、糖原磷酸化酶(glycogen phosphorylase, GP)、糖原合成酶(glycogen synthase, GS)基因的表达均显著下调。【结论】TRE2-like和TRE2基因表达被抑制后,异色瓢虫海藻糖等代谢受到影响。研究结果为探究异色瓢虫体内膜结合型海藻糖酶的潜在功能和调控机制奠定了基础。 展开更多
关键词 异色瓢虫 海藻糖酶 TRE2-like TRE2 基因表达 酶活性 RNA干扰
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昆虫海藻糖代谢及其影响因素的研究进展
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作者 朱江燕 黄健华 +1 位作者 时敏 陈学新 《应用昆虫学报》 CSCD 北大核心 2018年第2期145-152,共8页
海藻糖广泛存在于细菌、真菌、动物和植物中。它不仅作为能量储备物质,在外界环境胁迫或内部代谢紊乱时,也可作为保护因子,保护其生命体度过逆境。昆虫海藻糖合成酶与海藻糖酶分别是海藻糖合成与分解的关键酶,合成的海藻糖在海藻糖... 海藻糖广泛存在于细菌、真菌、动物和植物中。它不仅作为能量储备物质,在外界环境胁迫或内部代谢紊乱时,也可作为保护因子,保护其生命体度过逆境。昆虫海藻糖合成酶与海藻糖酶分别是海藻糖合成与分解的关键酶,合成的海藻糖在海藻糖转运蛋白的帮助下由胞内进入胞外。胰岛素与脂动激素直接参与昆虫糖代谢,保幼激素与蜕皮激素通过和胰岛素与脂动激素通路偶联,间接参与调控昆虫海藻糖代谢。海藻糖代谢途径和昆虫生长发育密切相关,昆虫海藻糖代谢信号通路为开发害虫控制的新靶标提供理论依据。 展开更多
关键词 海藻 海藻糖酶 海藻糖合成酶 昆虫海藻糖代谢
柑橘大实蝇滞育和非滞育蛹体内海藻糖含量的调控 预览 被引量:1
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作者 王佳 樊欢 +1 位作者 熊克才 刘映红 《昆虫学报》 CSCD 北大核心 2018年第9期1010-1018,共9页
【目的】通过比较柑橘大实蝇Bactrocera minax蛹滞育期与滞育前和滞育后以及滞育蛹与非滞育蛹体内海藻糖和葡萄糖含量的变化、海藻糖合成代谢途径中关键酶的活力变化以及关键酶基因的表达量变化,明确蛹滞育期间海藻糖合成代谢途径中关... 【目的】通过比较柑橘大实蝇Bactrocera minax蛹滞育期与滞育前和滞育后以及滞育蛹与非滞育蛹体内海藻糖和葡萄糖含量的变化、海藻糖合成代谢途径中关键酶的活力变化以及关键酶基因的表达量变化,明确蛹滞育期间海藻糖合成代谢途径中关键酶对海藻糖含量的调控。【方法】利用分光光度法检测柑橘大实蝇滞育前(1日龄蛹)、滞育期(30,60和90日龄蛹)以及滞育后(120和150日龄蛹)蛹体内海藻糖与葡萄糖含量的变化,以及海藻糖合成代谢途径中的海藻糖-6-磷酸合成酶(TPS)、海藻糖-6-磷酸磷酸酯酶(TPP)和海藻糖酶(Tre)活力的变化;利用实时定量荧光PCR(qPCR)检测TPS,TPPB,TPPC-1,TPPC-2和Tre-1基因表达量的变化。向1日龄蛹体内注射20-羟基蜕皮酮(20E)作为处理(以注射10%乙醇为对照),分别于注射后1和30 d比较处理组与对照组蛹体内海藻糖与葡萄糖含量、关键酶活力以及上述基因表达量的差异。【结果】柑橘大实蝇蛹进入滞育后,海藻糖含量显著升高,葡萄糖含量无显著变化;TPS和TPP的酶活力以及TPS,TPPC-1和TPPC-2表达量在化蛹后逐渐升高,于滞育期达到最高水平,维持至羽化前显著下降;TPPB表达量在整个蛹期无显著差异;Tre酶活力以及Tre-1表达量在化蛹后逐渐升高,于滞育早期达到最高水平,随后显著下降,羽化前再次显著上升。注射20E后1 d,与对照组相比,处理组蛹体内海藻糖与葡萄糖含量、关键酶(TPS,TPP和Tre)活力以及TPS,TPPC-2和Tre-1表达量无显著变化,TPPB表达量显著下降,TPPC-1表达量显著上升;注射后30 d,与对照组滞育蛹相比,处理组非滞育蛹海藻糖含量显著上升,葡萄糖含量、TPS和Tre酶活力、TPS和Tre-1表达量显著下降,TPP酶活力以及TPPB和TPPC-2表达量无显著差异。【结论】柑橘大实蝇蛹体内海藻糖的含量在合成代谢途径中关键酶的调控下,随着滞育状� 展开更多
关键词 柑橘大实蝇 滞育 海藻 海藻糖-6-磷酸合成酶 海藻糖-6-磷酸磷酸酯酶 海藻糖酶 20-羟基蜕皮酮
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海藻糖代谢及其调控昆虫几丁质合成研究进展 预览 被引量:5
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作者 唐斌 张露 +2 位作者 熊旭萍 汪慧娟 王世贵 《中国农业科学》 CSCD 北大核心 2018年第4期697-707,共11页
海藻糖为一种非还原性糖,广泛存在于细菌、藻类、真菌、植物和无脊椎动物中。海藻糖被称为昆虫"血糖",源于该糖为昆虫血淋巴中的主要糖类物质,在昆虫生长、发育、蜕皮等正常生理活动中有着重要的作用。昆虫的海藻糖先由海藻... 海藻糖为一种非还原性糖,广泛存在于细菌、藻类、真菌、植物和无脊椎动物中。海藻糖被称为昆虫"血糖",源于该糖为昆虫血淋巴中的主要糖类物质,在昆虫生长、发育、蜕皮等正常生理活动中有着重要的作用。昆虫的海藻糖先由海藻糖合成酶(trehalose-6-phosphate synthase,TPS)生成海藻糖-6-磷酸,然后通过海藻糖磷酸脂酶(trehalose-6-phosphate phosphatase,TPP)最终合成海藻糖,在能量需求时通过海藻糖酶(trehalase,TRE)降解为葡萄糖,用于能量供给。几丁质为昆虫表皮、中肠围食膜和气管系统的主要组成成分,昆虫在发育过程中需要蜕掉旧表皮,形成新的表皮,该过程一直是害虫控制的重要靶标途径。海藻糖酶为昆虫几丁质合成途径的第一个酶,在几丁质合成通路中有着重要的功能。那么海藻糖代谢又是如何调控几丁质合成途径来控制昆虫的蜕皮及几丁质代谢的呢?随着国内外海藻糖代谢相关基因功能研究的深入开展,研究结果表明昆虫海藻糖供给在几丁质合成中具有重要的作用,海藻糖酶分为可溶性和膜结合型两类,可溶性TRE和TPS在不同昆虫种类中具有多个同源基因,表明昆虫海藻糖代谢进化途径多样化。其次,海藻糖代谢直接调控几丁质合成途径,不论是海藻糖合成酶还是海藻糖酶基因的低表达,均能控制海藻糖使其供给不平衡,从而导致几丁质合成途径受阻,特别是几丁质合成酶基因表达降低而造成几丁质含量下降,该调控作用可进一步引起昆虫蜕皮困难、翅发育畸形等,甚至大量死亡。再次,海藻糖酶抑制剂能够抑制可溶性和膜结合型两类海藻糖酶活性、引起几丁质合成通路相关基因及几丁质酶基因表达的显著下降,导致几丁质含量显著降低,产生高比例的昆虫个体死亡。这些结果充分表明,一旦昆虫海藻糖代谢的供给平衡被打破,会直接影响到昆虫的几丁质合成乃至昆虫 展开更多
关键词 海藻糖代谢 海藻糖合成酶 海藻糖酶 几丁质合成 RNA干扰
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柞蚕蛹滞育和滞育解除过程中海藻糖酶基因表达模式及酶活力分析 预览
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作者 王德意 汝玉涛 +5 位作者 王勇 马月月 那爽 孙良振 姜义仁 秦利 《昆虫学报》 CSCD 北大核心 2018年第7期784-794,共11页
【目的】克隆柞蚕Antheraea pernyi海藻糖酶(trehalase,Treh)基因,探讨该基因在柞蚕蛹滞育和滞育解除过程中的表达模式与海藻糖酶活力变化,为阐明柞蚕蛹滞育期间糖代谢机制提供参考。【方法】利用RT-PCR技术从柞蚕蛹中克隆获得海藻糖酶... 【目的】克隆柞蚕Antheraea pernyi海藻糖酶(trehalase,Treh)基因,探讨该基因在柞蚕蛹滞育和滞育解除过程中的表达模式与海藻糖酶活力变化,为阐明柞蚕蛹滞育期间糖代谢机制提供参考。【方法】利用RT-PCR技术从柞蚕蛹中克隆获得海藻糖酶基因,并对其进行生物信息学分析。采用半定量RT-PCR检测长光照(17L∶7D)处理后的滞育解除柞蚕蛹与对照滞育蛹不同组织中该基因的表达谱;采用实时定量PCR(qPCR)分析其在长光照下滞育解除过程中柞蚕蛹脂肪体中的相对表达量变化。利用3,5-二硝基水杨酸法检测脂肪体中海藻糖酶活力的变化,同时采用蒽酮比色法测定其血淋巴中海藻糖含量。【结果】克隆获得柞蚕3个海藻糖酶基因,分别命名为ApTreh1A,ApTreh1B和ApTreh 2(GenBank登录号分别为:KU977455,KU977456和KU977457),开放阅读框(ORF)全长分别为1 797,1 635和1 932 bp,分别编码598,544和643个氨基酸。同源序列比对与系统进化树分析表明,ApTreh1A和ApTreh1B为可溶型海藻糖酶(TrehS),ApTreh2为膜结合型海藻糖酶(TrehM)。半定量RT-PCR检测发现,各组织中ApTreh 2比ApTreh 1的分布更广且表达量更高。qPCR检测发现,ApTreh1A和ApTreh1B在长光照处理后的柞蚕蛹脂肪体中,21 d时表达量都表现出快速升高[分别是对照组(12L∶12D)的2倍和4.7倍],28 d与35 d时下降,42 d时表达量再次升高;ApTreh 2随着滞育的解除表达量逐渐升高,28 d时达到最高(约为对照组的2.7倍),42 d时又出现一个小高峰(约2.3倍),后期逐渐下降。长光照下脂肪体中海藻糖酶活力逐渐升高,21 d时达到最高(约18.5 U),35 d时降到最低(约11.2 U),42 d时其酶活力再次略微升高,之后呈下降趋势,与基因表达变化趋势一致。蛹血淋巴中海藻糖含量在长光照条件下呈现出升高趋势,21 d时达到最高,在整个发育时期的含量比对照组要高。【结论】本研究结果表明柞蚕蛹滞育解除过程中海藻糖� 展开更多
关键词 柞蚕 滞育 海藻糖酶 海藻 基因表达 酶活力
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中华按蚊雌成蚊体内海藻糖及海藻糖酶含量变化的研究
7
作者 刘丽娟 胡颖新 +3 位作者 李亚平 程鹏 郭秀霞 公茂庆 《中国媒介生物学及控制杂志》 CAS 2018年第1期50-52,共3页
目的了解中华按蚊雌成蚊体内海藻糖及海藻糖酶含量的变化规律。方法利用ELISA测定羽化不同时间的中华按蚊雌成蚊体内的海藻糖及海藻糖酶含量,利用单因素方差和Tukey多重比较方法进行统计学分析。结果中华按蚊体内海藻糖及海藻糖酶含量... 目的了解中华按蚊雌成蚊体内海藻糖及海藻糖酶含量的变化规律。方法利用ELISA测定羽化不同时间的中华按蚊雌成蚊体内的海藻糖及海藻糖酶含量,利用单因素方差和Tukey多重比较方法进行统计学分析。结果中华按蚊体内海藻糖及海藻糖酶含量随羽化时间的延长先增加后减少,成蚊产卵后,体内海藻糖及海藻糖酶含量低于吸血前。海藻糖含量在羽化第2天达最大值[(2.658 5±0.116 5)mg/g],不同羽化时间海藻糖含量差异有统计学意义(F=21.383,df=100,P〈0.05);海藻糖酶在羽化第3天达最大值[(0.111 6±0.002 5)μmol/g]。结论中华按蚊雌成蚊体内海藻糖及海藻糖酶含量在羽化后均呈规律性变化,可能与蚊虫能量的积累和消耗有关。 展开更多
关键词 中华按蚊 海藻 海藻糖酶 蚊媒传染病
淡色库蚊越冬蚊体内海藻糖和海藻糖酶含量的变化
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作者 张本光 臧爱梅 +4 位作者 王利磊 程鹏 郭秀霞 王海防 刘丽娟 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第12期1335-1337,1343共4页
目的研究淡色库蚊越冬蚊体内海藻糖和海藻糖酶含量的动态变化。方法利用ELISA法测定不同越冬时期淡色库蚊雌成蚊体内海藻糖和海藻糖酶的含量。结果越冬期淡色库蚊滞育蚊所占百分比先增加后减少,越冬中期淡色库蚊全部为滞育蚊。淡色库蚊... 目的研究淡色库蚊越冬蚊体内海藻糖和海藻糖酶含量的动态变化。方法利用ELISA法测定不同越冬时期淡色库蚊雌成蚊体内海藻糖和海藻糖酶的含量。结果越冬期淡色库蚊滞育蚊所占百分比先增加后减少,越冬中期淡色库蚊全部为滞育蚊。淡色库蚊体内海藻糖含量先增加后降低,到1月份时达最大值,为(225.77±7.461)ng/ml,3月份降至最小值(132.41±2.37)ng/ml。不同越冬时期越冬蚊体内海藻糖含量差异有统计学意义(F=53.59,df=150,P<0.05);海藻糖酶含量先降低后增加,至1月份达最大值,为(9.32±0.23)ng/ml,到越冬末期含量持续减少。不同越冬期淡色库蚊体内海藻糖酶含量差异有统计学意义(F=84.21,df=150,P<0.05)。结论越冬淡色库蚊体内海藻糖和海藻糖酶含量变化较大,在气温最低的1月份含量达最大值,由此推断,海藻糖和海藻糖酶在淡色库蚊越冬过程中起重要作用。 展开更多
关键词 淡色库蚊 海藻 海藻糖酶 蚊媒传染病
海藻糖酶应用于谷氨酸发酵的研究 预览
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作者 丛泽峰 彭超 +3 位作者 张宇 王林 丛琦林 陈美君 《中国调味品》 北大核心 2018年第11期85-88,共4页
在温敏型谷氨酸发酵生产过程中,需要消耗大量的葡萄糖供菌体生长利用,代谢过程中逐步积累的海藻糖不能被菌体消耗利用,造成发酵成本浪费。为了进一步提高谷氨酸发酵的收率及降低生产成本,通过进行发酵工艺优化,在发酵后期27~28h加入海... 在温敏型谷氨酸发酵生产过程中,需要消耗大量的葡萄糖供菌体生长利用,代谢过程中逐步积累的海藻糖不能被菌体消耗利用,造成发酵成本浪费。为了进一步提高谷氨酸发酵的收率及降低生产成本,通过进行发酵工艺优化,在发酵后期27~28h加入海藻糖酶将海藻糖转化成葡萄糖,供谷氨酸菌体二次利用。经过工艺优化,发酵后期添加海藻糖酶后,发酵产酸17.6g/L,产酸提高了0.6%左右,发酵糖酸转化率提高0.9%左右,温敏型谷氨酸发酵的综合水平有所提高。 展开更多
关键词 温敏型谷氨酸发酵 海藻 海藻糖酶 工艺优化 产酸率 转化率
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高渗透压胁迫下水稻干尖线虫Ab-tre基因表达 预览
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作者 陈俏丽 王峰 +2 位作者 李丹蕾 零雅茗 张瑞芝 《中国农学通报》 2018年第24期141-146,共6页
水稻干尖线虫可通过海藻糖酶水解海藻糖提供能量以适应高渗透压胁迫,本研究旨在探究水稻干尖线虫海藻糖酶基因(Ab-tre)在高渗透压胁迫下的表达。在转录组测序结果基础上,克隆到水稻干尖线虫海藻糖酶基因,以30%甘油溶液为高渗透压胁迫... 水稻干尖线虫可通过海藻糖酶水解海藻糖提供能量以适应高渗透压胁迫,本研究旨在探究水稻干尖线虫海藻糖酶基因(Ab-tre)在高渗透压胁迫下的表达。在转录组测序结果基础上,克隆到水稻干尖线虫海藻糖酶基因,以30%甘油溶液为高渗透压胁迫剂,通过荧光定量Q-PCR及原位杂交探究该基因在高渗透压胁迫下的表达。荧光定量Q-PCR表明,高渗透压胁迫3-7 min,及高渗透压胁迫140 min后在蒸馏水中恢复90 min时,Ab-tre表达量均有显著上调。原位杂交表明,Ab-tre主要在水稻干尖线虫体中部有杂交信号。本研究表明Ab-tre与水稻干尖线虫抗高渗透压胁迫过程相关,对Ab-tre功能进行研究,可为防治该线虫奠定理论基础。 展开更多
关键词 水稻干尖线虫 海藻糖酶 高渗透压胁迫 原位杂交 荧光定量Q-PCR
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尿海藻糖酶评估失血性休克患者肾功能损害的价值 预览
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作者 严林 刘新锋 +2 位作者 罗杰龙 修风民 李德亮 《海南医学》 CAS 2018年第19期2711-2713,共3页
目的探讨尿海藻糖酶评估失血性休克患者肾功能损害的临床价值。方法选取2016年6月至2017年11月入住东莞市塘厦医院外一区且符合纳入和排除标准的患者为研究对象,以20例失血性休克患者为观察组,20例健康人为对照组,采用酶联免疫吸附法检... 目的探讨尿海藻糖酶评估失血性休克患者肾功能损害的临床价值。方法选取2016年6月至2017年11月入住东莞市塘厦医院外一区且符合纳入和排除标准的患者为研究对象,以20例失血性休克患者为观察组,20例健康人为对照组,采用酶联免疫吸附法检测健康人以及失血性休克患者手术前、术后6 h、术后12 h、术后24 h血尿海藻糖酶的OD值,先画出标准曲线,再计算出各组的海藻糖酶含量,对比各组受检者的尿海藻糖酶含量,绘制受试者工作特征曲线(ROC曲线),记录术中所见腹腔内总出血量。结果对照组尿海藻糖酶的含量为(2.46±0.21)μmol/L,术前观察组患者尿海藻糖酶的含量为(3.70±0.44)μmol/L,术后6 h为(4.16±0.78)μmol/L,术后12 h为(3.48±0.51)μmol/L,观察组患者尿海藻糖酶的含量分别与对照组比较差异均有统计学意义(P〈0.05),而术后24 h观察组患者尿海藻糖酶的含量为(2.58±0.23)μmol/L,与对照组比较差异无统计学意义(P〉0.05);观察组患者每一时间点的血清海藻糖酶均高于尿海藻糖酶,差异均有统计学意义(P〈0.05);术后12 h时尿海藻糖酶的受试者工作特征曲线(ROC曲线)下面积为0.944,敏感度为80%,特异性为100%。结论尿海藻糖酶在失血性休克的早期开始升高,术后6到12 h达到高峰,能够较早地反映肾小管的损伤情况,具有较高的诊断敏感性和特异性,而且检测方便、无创,生理活性稳定,可作为肾功能早期损害的评测指标进一步研究。 展开更多
关键词 海藻糖酶 肾功能 失血性休克 ROC曲线 酶联免疫吸附法
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转CmTre1基因RNA干扰水稻的室内和田间抗虫性鉴定 预览
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作者 夏浪 杜娟 +1 位作者 李尚伟 赵凤 《山地农业生物学报》 2018年第3期74-78,共5页
稻纵卷叶螟是一种主要的水稻害虫,海藻糖酶是昆虫几丁质合成通路上的关键酶之一。该研究对转稻纵卷叶螟可溶性海藻糖酶基因(CmTre1)双链RNA(dsRNA)水稻进行了室内和田间抗虫性鉴定。叶片测定结果表明,取食转CmTre1基因dsRNA水稻株系... 稻纵卷叶螟是一种主要的水稻害虫,海藻糖酶是昆虫几丁质合成通路上的关键酶之一。该研究对转稻纵卷叶螟可溶性海藻糖酶基因(CmTre1)双链RNA(dsRNA)水稻进行了室内和田间抗虫性鉴定。叶片测定结果表明,取食转CmTre1基因dsRNA水稻株系608的稻纵卷叶螟死亡率为70.00%,校正死亡率为50.95%。定量PCR检测表明,幼虫取食608株系后其体内CmTre1基因的mRNA水平下降59.00%,该基因的表达被抑制。田间抗虫性检测结果表明,608株系的卷叶率为15.06%,白叶率为13.98%,与对照差异显著。转CmTre1基因RNA干扰(RNAi)水稻对稻纵卷叶螟具有抗性。该研究为利用RNAi技术对稻纵卷叶螟进行绿色防控奠定基础。 展开更多
关键词 稻纵卷叶螟 海藻糖酶 RNA干扰 抗虫性
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棉铃虫可溶型海藻糖酶的化学修饰 预览
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作者 艾东 林荣华 +2 位作者 王猛 梁晓贺 于彩虹 《昆虫学报》 CSCD 北大核心 2018年第7期801-807,共7页
【目的】本研究旨在通过分析化学修饰剂对棉铃虫Helicoverpa armigera可溶型海藻糖酶活性的影响,以明确海藻糖酶活性中心的结构特点和氨基酸构成。【方法】采用化学修饰方法,测定不同修饰剂处理后棉铃虫5龄幼虫海藻糖酶催化活性的变化,... 【目的】本研究旨在通过分析化学修饰剂对棉铃虫Helicoverpa armigera可溶型海藻糖酶活性的影响,以明确海藻糖酶活性中心的结构特点和氨基酸构成。【方法】采用化学修饰方法,测定不同修饰剂处理后棉铃虫5龄幼虫海藻糖酶催化活性的变化,进而通过化学修饰反应失活常数来推测酶活性中心的特定氨基酸残基数量。【结果】采用8 mmol/L水溶性碳二亚胺(carbodiimide,EDC)溶液和25 mmol/L苯甲酰甲醛(phenylglyoxal,PG)溶液分别对棉铃虫5龄幼虫海藻糖酶羧酸基团和精氨酸残基进行修饰后,其活性分别减少81.58%和54.14%,这表明对羧酸基团和精氨酸残基的修饰可有效抑制海藻糖酶活性。底物海藻糖可保护海藻糖酶不受修饰剂的影响。修饰动力学结果显示,海藻糖酶活性中心可能包含1个羧酸基团和2个精氨酸残基。【结论】结果表明,含有羧基的谷氨酸和天冬氨酸是海藻糖酶活性中心的催化残基,精氨酸是维持海藻糖酶活性的必要残基。本研究结果可为开发新型农药提供理论支持。 展开更多
关键词 棉铃虫 海藻糖酶 化学修饰 活性中心 失活常数
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沙葱萤叶甲海藻糖酶基因GdTre1的克隆、分子特性和表达分析 预览
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作者 陈龙 谭瑶 +3 位作者 周晓榕 庞保平 格希格都仁 孙志鹏 《昆虫学报》 CSCD 北大核心 2018年第3期271-281,共11页
【目的】海藻糖酶(trehalase,Tre)作为昆虫体内海藻糖代谢的关键性酶,在昆虫能量调节和生长发育中具有重要作用。本研究旨在克隆获得沙葱萤叶甲Galeruca daurica海藻糖酶基因,并对其表达模式进行定量分析,以期探究海藻糖酶在沙葱萤叶... 【目的】海藻糖酶(trehalase,Tre)作为昆虫体内海藻糖代谢的关键性酶,在昆虫能量调节和生长发育中具有重要作用。本研究旨在克隆获得沙葱萤叶甲Galeruca daurica海藻糖酶基因,并对其表达模式进行定量分析,以期探究海藻糖酶在沙葱萤叶甲生长发育和成虫夏滞育中的作用。【方法】根据沙葱萤叶甲转录组数据,采用RACE技术,克隆得到Tre基因的c DNA全长,并进行生物信息学分析;应用实时荧光定量PCR(RT-q PCR)技术检测其在沙葱萤叶甲不同发育阶段[卵、1-3龄幼虫、预蛹、蛹、成虫(羽化后3,7,10,15,25,40,60,80和100 d)]、成虫不同组织(头、胸和腹)以及3日龄成虫在不同温度(15,20,25,30,35和40℃)胁迫下的表达水平;采用3,5-二硝基水杨酸法测定不同日龄成虫体内海藻糖酶活性。【结果】克隆获得了沙葱萤叶甲可溶性海藻糖酶基因,并命名为Gd Tre1(Gen Bank登录号:KY697913),该基因全长1 933 bp,开放阅读框1 704bp,编码567个氨基酸;蛋白预测分子量为66.56 k D,等电点为6.62;编码蛋白具有海藻糖酶超基因家族典型的功能结构域,包含1条信号肽,不具有跨膜结构。同源序列比对和系统发育分析表明,Gd Tre1与马铃薯甲虫Leptinotarsa decemlineata Tre1b的同源性最高,氨基酸序列一致性达70.25%。RT-q PCR检测结果表明,Gd Tre1在沙葱萤叶甲各发育阶段均有表达,其中在卵期和成虫滞育期间高表达,而在幼虫、预蛹、蛹及成虫滞育前低表达;在成虫不同组织中,通常在腹部中表达量最高,其次为胸部,最低为头部;Gd Tre1表达量随着温度升高而上升,30℃达最高值,而后随温度升高略有下降。沙葱萤叶甲不同日龄成虫体内Gd Tre1表达量及Tre活性存在显著差异,且Gd Tre1表达量与Tre活性变化趋势一致。【结论】海藻糖酶与沙葱萤叶甲生长发育和成虫夏滞育有密切的关系。该结果为进一步揭示该虫的夏滞育分子� 展开更多
关键词 沙葱萤叶甲 海藻糖酶 基因克隆 夏滞育 RT-QPCR
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高效氯氰菊酯对甘蓝夜蛾幼虫中肠消化酶活性的影响 预览
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作者 张丽 张建刚 张仙红 《山西农业大学学报:自然科学版》 CAS 2017年第12期861-865,共5页
[目的]了解高效氯氰菊酯对甘蓝夜蛾幼虫中肠海藻糖酶和蔗糖酶活性的影响。[方法]采用饲喂法,研究了不同浓度高效氯氰菊酯对甘蓝夜蛾4、5、6龄幼虫中肠海藻糖酶和蔗糖酶活性的影响。[结果]甘蓝夜蛾取食高效氯氰菊酯处理的甘蓝叶片后,中... [目的]了解高效氯氰菊酯对甘蓝夜蛾幼虫中肠海藻糖酶和蔗糖酶活性的影响。[方法]采用饲喂法,研究了不同浓度高效氯氰菊酯对甘蓝夜蛾4、5、6龄幼虫中肠海藻糖酶和蔗糖酶活性的影响。[结果]甘蓝夜蛾取食高效氯氰菊酯处理的甘蓝叶片后,中肠蔗糖酶、海藻糖酶的活力均随高效氯氰菊酯剂量的增加而提高,且2种酶活力均随处理时间的延长而明显降低,并随着龄期的增大影响程度逐渐减小。当甘蓝夜蛾幼虫4龄时,中肠海藻糖酶在不同处理时间及各浓度之间与对照差异显著。5龄时,2 500X与2 000X相比差异不显著,其它浓度不同处理时间与对照均差异显著。6龄时2 500X处理3h与对照差异不显著,2 000X、1 500X处理与对照均差异显著。[结论]高效氯氰菊酯对甘蓝夜蛾幼虫海藻糖酶和蔗糖酶活性影响显著,其影响程度随剂量的增高呈增大趋势,且随着龄期的增大影响程度逐渐减弱。 展开更多
关键词 甘蓝夜蛾 高效氯氰菊酯 海藻糖酶 糖酶
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虫生广布拟盘多毛孢侵染对松突圆蚧海藻糖酶活性、海藻糖、葡萄糖和蛋白质含量的影响 预览
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作者 王莎莎 何锦华 +4 位作者 罗世念 彭锋 罗林 黄宝灵 吕成群 《南方农业学报》 CSCD 北大核心 2017年第5期820-824,共5页
【目的】探究虫生广布拟盘多毛孢对松突圆蚧营养物质代谢的影响,为深入研究广布拟盘多毛孢致死松突圆蚧机理及开发利用广布拟盘多毛孢防治松突圆蚧提供科学依据。【方法】以虫生广布拟盘多毛孢GXSTYJ03菌株制得浓度为1×107个孢子... 【目的】探究虫生广布拟盘多毛孢对松突圆蚧营养物质代谢的影响,为深入研究广布拟盘多毛孢致死松突圆蚧机理及开发利用广布拟盘多毛孢防治松突圆蚧提供科学依据。【方法】以虫生广布拟盘多毛孢GXSTYJ03菌株制得浓度为1×107个孢子/mL的孢子悬浮液感染松突圆蚧,以喷洒无菌吐温-80为对照,逐日测定松突圆蚧体内海藻糖、葡萄糖、蛋白质含量及海藻糖酶活性,连续测定8 d。【结果】处理组松突圆蚧海藻糖含量在各时间点均低于对照组,且随处理时间延长呈明显的下降趋势,在染菌3 d后显著低于对照组(P<0.05,下同);海藻糖酶活性在各时间点均高于对照组,在染菌后第3 d显著高于对照组,5 d后也一直显著高于对照组;葡萄糖含量在染菌后1~3 d迅速升高,第3 d时升至最大值(3.1479 mmol/L),随后逐渐降低,在第4~6 d时与对照组无显著差异(P>0.05),6 d后显著低于对照组;蛋白质含量在各时间点均低于对照组,且在染菌2 d后一直显著或极显著(P〈0.01)低于对照组。【结论】虫生广布拟盘多毛孢GXSTYJ03菌株侵染松突圆蚧过程中引起松突圆蚧体内海藻糖、葡萄糖和蛋白质含量一定程度降低,是致死松突圆蚧的原因之一。 展开更多
关键词 虫生广布拟盘多毛孢 松突圆蚧 海藻 葡萄糖 海藻糖酶 蛋白质
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真菌抗氧化酶的研究进展
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作者 区敏仪 李海涛 杨蓉娅 《国际皮肤性病学杂志》 2017年第1期50-53,共4页
真菌对抗宿主的氧化损伤作用是真菌能顺利入侵宿主的一个重要因素。抗氧化酶的调节是真菌发挥抗氧化作用的重要途径之一,也是目前研究的热点。其中,抗氧化酶包括过氧化氢酶、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽还原酶与谷胱甘肽过氧化物酶、硫... 真菌对抗宿主的氧化损伤作用是真菌能顺利入侵宿主的一个重要因素。抗氧化酶的调节是真菌发挥抗氧化作用的重要途径之一,也是目前研究的热点。其中,抗氧化酶包括过氧化氢酶、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽还原酶与谷胱甘肽过氧化物酶、硫氧还蛋白系统以及海藻糖酶系统。几种常见真菌的抗氧化酶及编码抗氧化酶的相关基因的研究取得了进展,包括编码过氧化氢酶的相关基因如CTT1、CATA;编码超氧化物歧化酶的SOD基因;谷胱甘肽系统相关的GRX、GST基因;编码硫氧还蛋白系统的TRX、TRR基因以及海藻糖系统相关的TPS、ATHl基因等。 展开更多
关键词 真菌 过氧化氢酶 超氧化物歧化酶 谷胱甘肽 硫氧还蛋白质类 海藻糖酶 抗氧化酶
Escherichia coli str.K-12 substr.MG1655海藻糖酶Tre F的重组表达及性质研究 预览
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作者 于林港 宿玲恰 吴敬 《生物技术通报》 CSCD 北大核心 2017年第4期177-184,共8页
海藻糖酶(Trehalase)是一种海藻糖水解酶,能够特异性的将海藻糖分解为两分子的葡萄糖。为了将Escherichia coli str.K-12 substr.MG1655的海藻糖酶基因Tre F在E.coli BL21(DE3)中重组表达和应用,该研究通过PCR扩增获得E.coli str.K-... 海藻糖酶(Trehalase)是一种海藻糖水解酶,能够特异性的将海藻糖分解为两分子的葡萄糖。为了将Escherichia coli str.K-12 substr.MG1655的海藻糖酶基因Tre F在E.coli BL21(DE3)中重组表达和应用,该研究通过PCR扩增获得E.coli str.K-12 substr.MG1655的海藻糖酶基因Tre F,构建了基因工程菌E.coli BL21(DE3)/p ET-24a(+)-Tre F。对重组菌进行摇瓶发酵,25℃,IPTG浓度为0.4 mmol/L时,摇瓶发酵诱导24 h时得到最高酶活为107 U/m L。进一步研究了海藻糖酶的酶学性质,发现该海藻糖酶的最适p H为7.0,最适温度为50℃;此外,将该酶应用于海藻糖的水解,起始海藻糖浓度为300 g/L,初始p H 7.0、反应温度30℃,加酶量为84 U/g,反应36 h,葡萄糖转化率可达98.4%。该研究是首次将E.coli str.K-12 substr.MG1655海藻糖酶基因Tre F在E.coli BL21(DE3)宿主中重组表达的报道。 展开更多
关键词 海藻糖酶 基因克隆 重组表达 酶学特性
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海藻糖酶在谷氨酸发酵中的应用 预览
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作者 韩隽 姬慧军 《广州化工》 CAS 2017年第7期73-74,124共3页
以谷氨酸温度敏感型菌株为供试菌株,首先考察了在不同的发酵时期加入海藻糖酶对谷氨酸摇瓶发酵的影响,研究发现,在发酵后期加入海藻糖酶对菌体生长影响最小,残糖最低,产酸最高,可达126 g/L。在小试和中试自控发酵罐进行发酵试验的结果... 以谷氨酸温度敏感型菌株为供试菌株,首先考察了在不同的发酵时期加入海藻糖酶对谷氨酸摇瓶发酵的影响,研究发现,在发酵后期加入海藻糖酶对菌体生长影响最小,残糖最低,产酸最高,可达126 g/L。在小试和中试自控发酵罐进行发酵试验的结果显示加入海藻糖酶后,发酵产酸提高了0.6%,糖酸转化率提高0.5%~1%。结果表明:在谷氨酸发酵过程后期加入海藻糖酶有利于提高发酵产酸和转化率,降低葡萄糖的消耗,优化了谷氨酸发酵工艺。 展开更多
关键词 谷氨酸 海藻糖酶 发酵
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褐飞虱海藻糖酶基因在表皮几丁质代谢中的调控作用 预览 被引量:9
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作者 张露 朱世城 +3 位作者 郑好 沈祺达 王世贵 唐斌 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期1047-1056,共10页
【目的】昆虫海藻糖酶能够调控几丁质代谢并控制蜕皮过程。本研究通过TRE表达被抑制后,检测褐飞虱(Nilaparvata lugens)蜕皮状况、几丁质含量及几丁质合成酶(chitin synthase,CHS)和几丁质酶(chitinase,Cht)基因表达情况,探究不... 【目的】昆虫海藻糖酶能够调控几丁质代谢并控制蜕皮过程。本研究通过TRE表达被抑制后,检测褐飞虱(Nilaparvata lugens)蜕皮状况、几丁质含量及几丁质合成酶(chitin synthase,CHS)和几丁质酶(chitinase,Cht)基因表达情况,探究不同的海藻糖酶(trehalase,TRE)在褐飞虱表皮中对几丁质代谢的调控作用。【方法】采用RNAi技术,以实验室饲养种群褐飞虱为材料,通过向其体内注射双链RNA(dsRNA)分别抑制单个海藻糖酶基因或同时抑制多个海藻糖酶基因,注射48 h后通过Trizol法提取褐飞虱总RNA,反转录试剂盒合成第一链DNA后采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测该基因的表达情况,确定RNAi效果。氢氧化钾法测定48 h褐飞虱整体几丁质含量变化并对蜕皮困难虫体进行拍照;最后采用qRT-PCR检测褐飞虱CHS和Cht在mRNA水平上的相对表达量变化,分析TRE在调控几丁质代谢中的作用。【结果】与注射dsGFP相比较,其余各注射组褐飞虱整体几丁质含量显著下降,其中dsTRE1混合注射组与Validamycin注射组呈极显著下降,同时褐飞虱出现蜕皮困难等现象。qRT-PCR检测结果显示单个TRE的dsRNA注射后该基因的表达被抑制,但是部分TRE的表达有互补性上升。其中TRE1-2和TRE2在各注射组处理下表达均下降,dsTRE1s对TRE2的表达也有抑制效果,整体上dsTRE1混合注射组和海藻糖酶抑制剂Validamycin抑制效果明显;dsTRE注射组抑制CHS表达效果不明显,Validamycin能够显著降低CHS1和CHS1a在表皮中的表达,且2种dsTRE1注射后CHS1表达在上升,dsTRE1-2注射后表皮中的CHS1a的表达上升;Cht1和Cht8在dsTRE各注射组及Validamycin处理中表达下降或显著下降,dsTRE1-1注射后Cht2和Cht5表达显著上升;dsTRE1-2注射后Cht1、Cht6和Cht8表达下降,Cht2和Cht4表达显著上升;dsTRE2处理组中Cht1、Cht8和Cht10表达下降而Cht9表达显著上升;dsTRE1s注射后,Cht1和Cht5表达显著下降,而 展开更多
关键词 褐飞虱 RNAI 海藻糖酶 表皮 几丁质代谢 实时荧光定量PCR
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