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灰毡毛忍冬不同发育期花蕾中3种成分含量的变化研究
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作者 丁辉 邱国玉 +2 位作者 朱仁愿 张彩霞 丁爱华 《中国现代应用药学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期205-208,共4页
目的比较灰毡毛忍冬不同发育期花蕾中绿原酸、灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙的含量。方法色谱柱:CAPCELL PAK C18 MG(250 mm×4.60 mm,5μm);流动相:乙腈(A)-0.4%醋酸溶液(B),梯度洗脱;流速:1.0 mL·min-1;紫外检测波长:330 ... 目的比较灰毡毛忍冬不同发育期花蕾中绿原酸、灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙的含量。方法色谱柱:CAPCELL PAK C18 MG(250 mm×4.60 mm,5μm);流动相:乙腈(A)-0.4%醋酸溶液(B),梯度洗脱;流速:1.0 mL·min-1;紫外检测波长:330 nm;蒸发光散射检测器条件:漂移管温度110℃,气体流速3.0 L·min-1,撞击器关;柱温:30℃。收集不同发育期(幼蕾期、三青期、大白期、银花期、金花期、凋花期)花蕾样品,采用HPLC-UV-ELSD串联技术,以外标两点法计算绿原酸的含量,以外标两点法对数方程计算灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙的含量。结果灰毡毛忍冬中绿原酸和川续断皂苷乙含量以三青期最高,分别为6.934%,1.800%;灰毡毛忍冬皂苷乙以幼蕾期最高,为9.351%,较三青期高0.227%。结论通过对灰毡毛忍冬花蕾不同发育期的含量比较可见,最佳采收期为三青期,此时绿原酸、灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙含量高。 展开更多
关键词 毡毛忍冬 花蕾 绿原酸 毡毛忍冬皂苷乙 川续断皂苷乙 高效液相色谱-紫外吸收检测-蒸发光散射检测法 采收
不同品种灰毡毛忍冬ACS3基因克隆、表达及生物信息学分析
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作者 刘畅宇 陈勋 +4 位作者 陈娅 龙雨青 童巧珍 刘湘丹 周日宝 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期2154-2164,共11页
目的分别克隆灰毡毛忍冬野生型与湘蕾型ACS3基因,并进行生物信息学和表达模式分析。方法筛选灰毡毛忍冬转录组数据库中与ACS蛋白同源性较高的Unigene序列,设计引物,利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)及RACE技术对该Unigene进行全长克隆;用... 目的分别克隆灰毡毛忍冬野生型与湘蕾型ACS3基因,并进行生物信息学和表达模式分析。方法筛选灰毡毛忍冬转录组数据库中与ACS蛋白同源性较高的Unigene序列,设计引物,利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)及RACE技术对该Unigene进行全长克隆;用生物信息学软件分析蛋白的理化性质、结构域和同源性等特性;借助qRT-PCR检测1-氨基环丙烷-1-羧酸合酶(ACS3)基因在不同品种、不同花期灰毡毛忍冬中表达模式。结果从灰毡毛忍冬野生品种及湘蕾品种中分别克隆得Lm-ACS3(GenBank:MH724196)及Lm-XL-ACS3(GenBank:MH724197),开放阅读框长度均为1452bp,编码483个氨基酸,包含保守的Aminotran12结构域,与其他植物的ACC合酶具较高相似度;qRT-PCR结果显示,野生型ACS3基因不同花期间表达差异显著,从花期3开始呈整体明显上升趋势,湘蕾型中花期间表达差异相对较小。结论分别克隆得到灰毡毛忍冬野生型和湘蕾型ACS3基因,该基因在2品种中具不同表达模式;推测ACS3基因或为导致灰毡毛忍冬不同品种间差异表型的可能功能基因之一,为进一步验证该基因在调控蕾期长短及花表型的生物学功能提供实验基础。 展开更多
关键词 毡毛忍冬 乙烯生物合成 1-氨基环丙烷-1-羧酸合酶 基因克隆 生物信息学 实时荧光定量PCR
金银花和灰毡毛忍冬多成分定性的指纹图谱比较
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作者 路俊仙 吕凌 张才波 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期3215-3219,共5页
目的:建立同一条件下的金银花和灰毡毛忍冬HPLC指纹图谱,比较二者异同。方法:采用HPLC指纹图谱对金银花和灰毡毛忍冬中化学成分的组成和含量进行表征,利用对照品对绿原酸、咖啡酸、獐牙菜苷、木犀草苷等11种成分峰进行定性,评价、分析... 目的:建立同一条件下的金银花和灰毡毛忍冬HPLC指纹图谱,比较二者异同。方法:采用HPLC指纹图谱对金银花和灰毡毛忍冬中化学成分的组成和含量进行表征,利用对照品对绿原酸、咖啡酸、獐牙菜苷、木犀草苷等11种成分峰进行定性,评价、分析图谱相似度。结果:10批金银花指纹图谱相似度高于97%,获得了25个共有峰;10批灰毡毛忍冬指纹图谱相似度高于98%,获得了10个共有峰;金银花与灰毡毛忍冬对照图谱的相似度为84%。结论:金银花指纹图谱的共用峰数量明显多于灰毡毛忍冬,峰面积差异较大,利用该条件建立的两种药材的指纹图谱差异明显,能明确区分二者。另外一种未定性成分和咖啡酸在金银花中含量较高,而灰毡毛忍冬中含量低,有望成为鉴别二者的标志性成分。 展开更多
关键词 金银花 毡毛忍冬 HPLC指纹图谱 多成分定性 相似度 共有峰 咖啡酸
灰毡毛忍冬LmPAL1基因的克隆及表达分析
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作者 陈勋 刘畅宇 +4 位作者 陈娅 龙雨青 童巧珍 刘湘丹 周日宝 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期178-187,共10页
目的克隆灰毡毛忍冬苯丙氨酸解氨酶(LmPAL1)基因全长序列,并进行生物信息学和表达模式分析。方法提取灰毡毛忍冬花总RNA,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和RACE技术克隆LmPAL1基因的全长cDNA序列;运用相关软件对该基因序列进行生物信息学... 目的克隆灰毡毛忍冬苯丙氨酸解氨酶(LmPAL1)基因全长序列,并进行生物信息学和表达模式分析。方法提取灰毡毛忍冬花总RNA,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和RACE技术克隆LmPAL1基因的全长cDNA序列;运用相关软件对该基因序列进行生物信息学分析;利用qRT-PCR测定灰毡毛忍冬茎、叶和不同花期花中该基因的相对表达量。结果克隆的LmPAL1基因开放阅读框(ORF)长度为2 145 bp,编码714个氨基酸,生物信息学分析预测为亲水性蛋白,定位于叶绿体中,包含PAL shielding结构域(527~641 aa),并且含有PAL/HAL活性中心序列GTITASGDLVPLSYIAG(196~212aa),与其他LmPAL1具有较高的相似度;LmPAL1基因q RT-PCR结果显示,7个花期材料以金黄色开花期相对表达量较高;与茎、叶比,白色花蕾期花的相对表达量最高,叶的最低。结论成功克隆了LmPAL1基因,为进一步研究该基因的功能以及遗传改良灰毡毛忍冬品质奠定基础,同时为探究灰毡毛忍冬绿原酸生物合成和调节机制提供了依据。 展开更多
关键词 毡毛忍冬 苯丙氨酸解氨酶(PAL) 基因克隆 生物信息学 表达分析
灰毡毛忍冬花蕾中三萜皂苷类化学成分研究
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作者 董俊丽 黄传奇 +3 位作者 王富乾 黄伟 林世和 张耕 《中草药》 CSCD 北大核心 2018年第19期4484-4490,共7页
目的研究灰毡毛忍冬Lonicera macranthoides花蕾中的化学成分。方法采用正相硅胶、ODS、Sephadex LH-20、半制备高效液相色谱等方法对灰毡毛忍冬花蕾的水提取物进行分离纯化,采用NMR、MS等波谱方法进行鉴定结构,采用MTT法研究化合物的... 目的研究灰毡毛忍冬Lonicera macranthoides花蕾中的化学成分。方法采用正相硅胶、ODS、Sephadex LH-20、半制备高效液相色谱等方法对灰毡毛忍冬花蕾的水提取物进行分离纯化,采用NMR、MS等波谱方法进行鉴定结构,采用MTT法研究化合物的细胞毒活性。结果从灰毡毛忍冬花蕾中分离得到了7个三萜类化合物,分别鉴定为3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-α-L-吡喃阿拉伯糖基常春藤皂苷元28-O-β-D-吡喃葡萄糖酯苷(1)、3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖基齐墩果酸28-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→4)-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖基酯苷(2)、3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖基常春藤皂苷元28-O-β-D-吡喃葡萄糖酯苷(3)、3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖基常春藤皂苷元28-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→4)-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖基酯苷(4)、3-O-α-L-吡喃阿拉伯糖基常春藤皂苷元28-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖基酯苷(5)、3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-α-L-吡喃阿拉伯糖基常春藤皂苷元28-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖基酯苷(6)、3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→3)-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-α-L-吡喃阿拉伯糖基常春藤皂苷元28-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→4)-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖基酯苷(7)。结论化合物1为新化合物,命名为灰毡毛忍冬皂苷丙;化合物2~7为首次从该植物中分离得到。细胞毒活性结果显示,化合物1、4和5对人宫颈癌He La细胞均有一定的抑制作用,其IC50值分别为54.3、43.9、61.2μmol/L。 展开更多
关键词 毡毛忍冬 三萜皂苷 常春藤皂苷元 毡毛忍冬皂苷丙 细胞毒活性
山银花化学成分与其生物活性的研究进展 预览
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作者 汤嫣然 曾婷 +8 位作者 Salman zafar 袁汉文 李斌 彭彩云 王思成 翦雨青 覃艳 Muhammad Iqbal Choudhary 王炜 《数字中医药(英文)》 2018年第2期173-188,共16页
山银花作为中国传统中药,在中国有数千年历史。目前,山银花在湖南省有广泛栽培,主要作为清热药和消毒药应用。山银花主要包括咖啡酸衍生物、挥发油、黄酮类化合物、环烯醚萜苷和萜类化合物,主要有抗炎、抗肿瘤、抗氧化、抗过敏、免疫调... 山银花作为中国传统中药,在中国有数千年历史。目前,山银花在湖南省有广泛栽培,主要作为清热药和消毒药应用。山银花主要包括咖啡酸衍生物、挥发油、黄酮类化合物、环烯醚萜苷和萜类化合物,主要有抗炎、抗肿瘤、抗氧化、抗过敏、免疫调节及抗菌活性等。本文通过查阅相关文献,对山银花的化学成分及其生物活性进行了全面的系统总结。 展开更多
关键词 忍冬 山银花 化学成分 生物活性 毡毛忍冬 华南忍冬
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多指标综合评价法优选黔产灰毡毛忍冬最佳初加工方法 被引量:1
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作者 罗文敏 张珍明 +4 位作者 王芳 刘盈盈 刘燕 段如雁 洪江 《中草药》 CSCD 北大核心 2018年第4期826-834,共9页
目的 探讨不同产地初加工方法对黔产灰毡毛忍冬外观性状、品质成分和加工效率多方面的影响,为灰毡毛忍冬产地加工方法的优选提供依据。方法 采用传统加工方法组(晒干、蒸后晒干、阴干、蒸后阴干)、恒温烘干组(50、60、70、80℃)、... 目的 探讨不同产地初加工方法对黔产灰毡毛忍冬外观性状、品质成分和加工效率多方面的影响,为灰毡毛忍冬产地加工方法的优选提供依据。方法 采用传统加工方法组(晒干、蒸后晒干、阴干、蒸后阴干)、恒温烘干组(50、60、70、80℃)、变温烘干组(50→60℃、50→70℃、50→80℃)共11种方法加工灰毡毛忍冬,对加工品从颜色和香气等外观指标,水分、总灰分、酸不溶性灰分、绿原酸、总皂苷等成分指标,加工时间和折干率等效率指标分别进行测定。结果 综合外观性状、品质成分和加工效率多方面的因素,11种加工方法中,50℃恒温和变温方法的综合关联度值在0.94~0.96,远高于其他方法,其中50→60℃方法的综合关联度值最高,达到了0.9598。结论 综合来看,变温干燥是灰毡毛忍冬较好的产地初加工方法,该方法可作为基地规模化加工灰毡毛忍冬的重要技术手段。 展开更多
关键词 毡毛忍冬 产地初加工 变温烘干 多指标综合评价 外观性状 加工效率 水分 酸不溶性 绿原酸 总皂苷 加工时间 折干率
高效液相色谱法同时测定灰毡毛忍冬中7种有机酸的含量
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作者 罗艳 杨柳 +1 位作者 涂晓琴 孟庆玉 《中南药学》 CAS 2018年第9期1283-1286,共4页
目的采用HPLC法同时测定灰毡毛忍冬中7种有机酸的含量。方法采用Acclaim 120 C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.4%磷酸溶液,梯度洗脱,流速1.0 m L·min-1,检测波长327 nm,柱温25℃。结果 7种有机酸在一定浓度... 目的采用HPLC法同时测定灰毡毛忍冬中7种有机酸的含量。方法采用Acclaim 120 C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.4%磷酸溶液,梯度洗脱,流速1.0 m L·min-1,检测波长327 nm,柱温25℃。结果 7种有机酸在一定浓度范围与峰面积线性关系良好(r为0.9998-1.000),回收率为95.0%-102.4%,RSD在1.4%-3.0%(n=6)。结论本法简便、可靠、准确,可用于灰毡毛忍冬的质量控制。 展开更多
关键词 高效液相色谱法 毡毛忍冬 有机酸 含量测定
灰毡毛忍冬Lm-XL-AP1基因克隆、生物信息学和时空表达分析 被引量:2
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作者 彭美晨 刘湘丹 +4 位作者 徐玉琴 王珊 刘畅宇 陈勋 周日宝 《中草药》 CSCD 北大核心 2018年第7期1652-1660,共9页
目的克隆灰毡毛忍冬突变型品种AP1基因(Lm-XL-AP1),并对其进行生物信息学和时空表达分析。方法通过RACE技术克隆Lm-XL-AP1基因全长,运用生物信息学的方法进行基因同源性和相似性比较分析,预测其编码蛋白,并对其进行各种理化性质分析... 目的克隆灰毡毛忍冬突变型品种AP1基因(Lm-XL-AP1),并对其进行生物信息学和时空表达分析。方法通过RACE技术克隆Lm-XL-AP1基因全长,运用生物信息学的方法进行基因同源性和相似性比较分析,预测其编码蛋白,并对其进行各种理化性质分析。运用荧光定量PCR(q RT-PCR)检测该基因在灰毡毛忍冬突变型植株不同花期和不同器官的相对表达量。结果获得AP1基因,开放阅读框(ORF)长729 bp,编码242个氨基酸,与甘菊中MADS-box基因家族AP1基因相似性达80%,且包含MADS和K-box的保守序列。AP1蛋白无跨膜区域,定位于细胞核中;在灰毡毛忍冬突变型植株第6花期相对表达量最高,同时茎、叶中也有表达。结论成功从灰毡毛忍冬突变型植株总RNA中克隆到可能参与控制花器官表达的AP1基因。 展开更多
关键词 毡毛忍冬 Lm-XL-AP1基因 生物信息学 荧光定量 克隆
HPLC-UV-ELSD串联用于灰毡毛忍冬中绿原酸成分检测的比较研究 预览
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作者 刘光瑞 朱仁愿 +1 位作者 丁辉 邱国玉 《甘肃科技》 2018年第12期42-44,共3页
比较高效液相色谱-紫外检测法(HPLC-UV)与高效液相色谱-蒸发光散射检测法(HPLC-ELSD)对灰毡毛忍冬中绿原酸成分检测的优劣,为质量控制提供参考。采用HPLC-UV-ELSD串联检测技术同时检测绿原酸含量,进行比较。绿原酸对两种检测器均有... 比较高效液相色谱-紫外检测法(HPLC-UV)与高效液相色谱-蒸发光散射检测法(HPLC-ELSD)对灰毡毛忍冬中绿原酸成分检测的优劣,为质量控制提供参考。采用HPLC-UV-ELSD串联检测技术同时检测绿原酸含量,进行比较。绿原酸对两种检测器均有响应,出峰时间基本一致,HPLC-ELSD法检测所得含量高于HPLC-UV法。紫外检测器灵敏度较好;蒸发光散射检测器适用范围更广。 展开更多
关键词 毡毛忍冬 绿原酸 HPLC-UV法 HPLC-ELSD法
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不同发育阶段的灰毡毛忍冬花部挥发油成分变化研究
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作者 丁刚 张应 +2 位作者 徐进 李隆云 崔广林 《时珍国医国药》 CSCD 北大核心 2017年第11期2756-2759,共4页
目的 研究不同发育阶段灰毡毛忍冬花部的挥发油含量和品质。方法 采用水蒸气蒸馏法提取不同发育阶段开花型和闭蕾型灰毡毛忍冬花部的挥发油,使用GC-MS联用仪对挥发油进行成分分析鉴定,并用面积归一法测定挥发油各成分的百分含量。结果 ... 目的 研究不同发育阶段灰毡毛忍冬花部的挥发油含量和品质。方法 采用水蒸气蒸馏法提取不同发育阶段开花型和闭蕾型灰毡毛忍冬花部的挥发油,使用GC-MS联用仪对挥发油进行成分分析鉴定,并用面积归一法测定挥发油各成分的百分含量。结果 开花型和闭蕾型灰毡毛忍冬花部不同发育阶段挥发油的含量和成分存在明显差别。开花型在大白期挥发油含量最高,挥发油化学成分种类最多。闭蕾型在黄白期挥发油含量最高。结论 根据挥发油含量及其成分变化,确定灰毡毛忍冬花部适宜采收期,开花型为大白期,闭蕾型为黄白期。 展开更多
关键词 毡毛忍冬 花部 挥发油 采收期 气相色谱-质谱联用
HPLC-MS/MS法同时测定山银花中7个有机酸的含量 被引量:6
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作者 王亚丹 何轶 +1 位作者 戴忠 马双成 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期998-1005,共8页
目的:建立HPLC-MS/MS法同时测定山银花中7个有机酸(新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、3,4-二-O-咖啡酰奎宁酸、3,5-二-O-咖啡酰奎宁酸和4,5-二-O-咖啡酰奎宁酸)的含量,并对其在3种不同植物来源的药材中的含量进行比较。方法:采... 目的:建立HPLC-MS/MS法同时测定山银花中7个有机酸(新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、3,4-二-O-咖啡酰奎宁酸、3,5-二-O-咖啡酰奎宁酸和4,5-二-O-咖啡酰奎宁酸)的含量,并对其在3种不同植物来源的药材中的含量进行比较。方法:采用Shiseido Capcell Pak-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动相,梯度洗脱,流速为1 mL·min^-1,加柱后分流器,使约30%洗脱液进入质谱仪,柱温30℃,进样量5μL;质谱采用ESI-多反应监测(MRM)模式扫描,以水杨酸为内标,脱溶剂温度350℃,脱溶剂气流(N_2)600 L·h^-1,雾化器压力0.2 MPa,毛细管电压4 kV。结果:新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、3,4-二-O-咖啡酰奎宁酸、3,5-二-O-咖啡酰奎宁酸和4,5-二-O-咖啡酰奎宁酸质量浓度分别在0.032-32.224μg·mL^-1(R^2=0.999 5)、0.168-16.800μg·mL^-1(R^2=0.999 4)、0.038-15.104μg·mL^-1(R^2=0.999 8)、0.010-4.064μg·mL^-1(R^2=0.999 2)、0.013-5.372μg·mL^-1(R^2=0.999 5)、0.079-39.840μg·mL-(-1)(R^2=0.999 5)和0.041-16.208μg·mL^-1(R^2=0.999 3)范围内线性关系良好;定量限(LOQ)为10.0-19.9 ng·mL^-1,平均回收率在94.01%和105.0%之间。样品测定结果显示,山银花中绿原酸和3,5-二-O-咖啡酰奎宁酸含量较高,分别为1.262%-7.408%和0.636%-4.803%;咖啡酸含量较低,为0.003%-0.022%。通过比较不同植物来源的样品,发现其在有机酸的含量和比例方面存在较大差异。结论:本实验建立的方法灵敏、准确,可用于山银花药材中有机酸的含量测定,测定结果可为该药材质量标准的完善提供依据。 展开更多
关键词 山银花 毡毛忍冬 红腺忍冬 黄褐毛忍冬 有机酸 新绿原酸 绿原酸 隐绿原酸 咖啡酸 二-O-咖啡酰奎宁酸 中药多组分分析 HPLC-MS/MS
灰毡毛忍冬花蕾正丁醇部位化学成分的研究 预览
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作者 肖世基 甘佳玉 张茂生 《遵义医学院学报》 2016年第4期350-352,357共4页
目的研究灰毡毛忍冬花蕾正丁醇部位化学成分。方法采用硅胶柱色谱及制备液相色谱等分离方法进行分离纯化,经核磁共振等波谱技术进行化合物结构鉴定。结果从灰毡毛忍冬花蕾正丁醇部位中分离得到6个化合物,分别鉴定为原儿茶醛(1)、咖啡... 目的研究灰毡毛忍冬花蕾正丁醇部位化学成分。方法采用硅胶柱色谱及制备液相色谱等分离方法进行分离纯化,经核磁共振等波谱技术进行化合物结构鉴定。结果从灰毡毛忍冬花蕾正丁醇部位中分离得到6个化合物,分别鉴定为原儿茶醛(1)、咖啡酸丁酯(2)、3-O-咖啡酰奎尼酸丁酯(3)、3,5-O-双咖啡酰基奎尼酸甲酯(4)、3,4-O-双咖啡酰基奎尼酸甲酯(5)、β-谷甾醇(6)。结论化合物1和2为首次从灰毡毛忍冬中分离得到。 展开更多
关键词 毡毛忍冬 忍冬 酚酸 化学成分
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灰毡毛忍冬MADS-box基因家族AGL15基因的克隆、生物信息学和表达分析 被引量:2
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作者 易刚强 蔡嘉洛 +7 位作者 朱贻霖 陈林 樊悦 刘峰 张亚丽 欧阳琳 刘湘丹 童巧珍 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期640-647,共8页
目的基于前期对灰毡毛忍冬Lonicera macranthoides转录组测序结果,从灰毡毛忍冬RNA中克隆灰毡毛忍冬MADS-box基因家族蕾期延长相关基因AGL15,并对其进行生物信息学及表达分析。方法对灰毡毛忍冬总RNA进行反转录酶链式反应(reverse tran... 目的基于前期对灰毡毛忍冬Lonicera macranthoides转录组测序结果,从灰毡毛忍冬RNA中克隆灰毡毛忍冬MADS-box基因家族蕾期延长相关基因AGL15,并对其进行生物信息学及表达分析。方法对灰毡毛忍冬总RNA进行反转录酶链式反应(reverse transcription-PCR,RT-PCR)和c DNA末端快速扩增反应(rapid amplification of c DNA ends,RACE),获得完整的开放阅读框(ORF)。运用生物信息学的方法对该序列进行同源性分析和相似性比较,预测编码蛋白,并对其进行各种理化性质分析。运用半定量PCR测得该基因在灰毡毛忍冬不同部位的表达情况。结果获得AGL15基因,ORF长795 bp,编码264个氨基酸,与葡萄Vitis vinifera中MADS-box基因家族AGL15基因相似性最高,且包含MADS和K-box的保守序列。AGL15蛋白无跨膜区域,定位于细胞质中,在灰毡毛忍冬各部位均有表达。结论首次从灰毡毛忍冬中克隆得到可能控制蕾期延长的基因,分析了其在灰毡毛忍冬不同部位表达差异性,为灰毡毛忍冬蕾期延长研究提供参考。 展开更多
关键词 毡毛忍冬 蕾期延长 基因克隆 生物信息学分析 基因表达
不同加工方法不同采收期对湖南灰毡毛忍冬药材质量的影响 被引量:1
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作者 何春萍 何庭 +2 位作者 张莉 田天顺 佘朝文 《中药材》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期1817-1819,共3页
目的:以绿原酸和木犀草苷为指标,研究不同加工方法、不同采收期对湖南灰毡毛忍冬药材质量的影响。方法:采用HPLC法测定湖南溆浦、隆回、中方产灰毡毛忍冬的绿原酸与木犀草苷含量。结果:不同加工方法对药材的绿原酸含量影响明显,表现... 目的:以绿原酸和木犀草苷为指标,研究不同加工方法、不同采收期对湖南灰毡毛忍冬药材质量的影响。方法:采用HPLC法测定湖南溆浦、隆回、中方产灰毡毛忍冬的绿原酸与木犀草苷含量。结果:不同加工方法对药材的绿原酸含量影响明显,表现为烘干〉晾干〉晒干,但对药材的木犀草苷含量的影响较小且无明显规律性。不同采收期的绿原酸含量表现为绿蕾〉白蕾〉银花〉金花,木犀草苷含量表现为白蕾〉绿蕾〉银花〉金花。其中,中方产灰毡毛忍冬绿原酸含量最高,且高于对照"密银花"的绿原酸含量;隆回和中方产灰毡毛忍冬的白蕾的木犀草苷含量较高,但低于对照"密银花"的木犀草苷含量。结论:花蕾期(绿蕾和白蕾)是灰毡毛忍冬的适宜采收期,加工方法以烘干为宜;三地的样品中,中方县的最优。 展开更多
关键词 毡毛忍冬 加工方法 采收期 绿原酸 木犀草苷 高效液相色谱法
灰毡毛忍冬种子质量检验方法与分级标准研究 被引量:2
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作者 张应 徐进 +2 位作者 李隆云 崔广林 佘跃辉 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期1439-1445,共7页
参照《中国农作物种子检验规程》,研究扦样、净度、千粒重、真实性、水分、生活力、相对电导率、发芽等灰毡毛忍冬种子质量检验方法;对38份不同来源的种子做质量检验,采用K-均值聚类制定质量分级标准。结果表明:灰毡毛忍冬种子最少试... 参照《中国农作物种子检验规程》,研究扦样、净度、千粒重、真实性、水分、生活力、相对电导率、发芽等灰毡毛忍冬种子质量检验方法;对38份不同来源的种子做质量检验,采用K-均值聚类制定质量分级标准。结果表明:灰毡毛忍冬种子最少试验量为7.5 g,过20目筛进行净度分析,五百粒法测定千粒重,种子粉碎高恒温(130±2)℃烘干3 h测定水分含量,0.1%TTC溶液25℃避光染色5 h测定生活力,1.0 g种子在25℃超纯水中浸泡12 h测定相对电导率,4℃下沙藏层积80 d后置于15℃光照纸床进行发芽试验;不同来源种子按质量分为3个等级,初步制定了种子质量分级标准。生产上建议使用Ⅰ级和Ⅱ级种子。 展开更多
关键词 毡毛忍冬 种子 质量检验 分级标准
黔、川、湘灰毡毛忍冬药材及栽培土壤主要金属元素分析 预览
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作者 张丹丹 彭艺 +2 位作者 张涵 王安俊 杨建文 《遵义医学院学报》 2016年第5期487-490,共4页
目的探讨黔、川、湘3个不同产地灰毡毛忍冬药材中主要金属元素与土壤之间的关系,为当地灰毡毛忍冬的生产提供科学依据。方法应用微波消解-火焰原子吸收分光光谱法分别对三地灰毡毛忍冬药材及土壤样品中7个金属元素进行含量测定,采用SPSS... 目的探讨黔、川、湘3个不同产地灰毡毛忍冬药材中主要金属元素与土壤之间的关系,为当地灰毡毛忍冬的生产提供科学依据。方法应用微波消解-火焰原子吸收分光光谱法分别对三地灰毡毛忍冬药材及土壤样品中7个金属元素进行含量测定,采用SPSS 17.0软件对所得数据进行统计分析。结果四川省南江县、湖南省隆回县药材中金属元素含量整体比贵州省绥阳县高,土壤中金属元素的含量整体表现为贵州省最高,湖南省最低。土壤和药材中金属元素的含量均表现为:K、Ca、Na、Mg和Mn的含量比Zn和Cu高。Mn和Cu的含量在贵州灰毡毛忍冬药材与其生长的土壤之间表现出极显著正相关(P〈0.01),Ca的含量呈显著负相关(P〈0.05);Zn的含量在四川灰毡毛忍冬药材与其生长的土壤之间表现出显著正相关(P〈0.05),Mn呈显著负相关(P〈0.05);Cu的含量在湖南省灰毡毛忍冬药材与其生长的土壤之间呈极显著负相关(P〈0.01)。灰毡毛忍冬对K、Ca和Na富集作用较强。结论药材中金属元素含量因植物产地不同而存在差异。微波消解-火焰原子吸收分光光谱法可用于灰毡毛忍冬药材中金属元素的测定。 展开更多
关键词 毡毛忍冬 金属元素 微波消解 火焰原子吸收分光光谱仪
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灰毡毛忍冬内参基因筛选和Mads-box家族基因AGL15的时空表达分析 被引量:8
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作者 蔡嘉洛 朱贻霖 +7 位作者 谢舒平 陈林 欧阳琳 刘峰 张亚丽 刘湘丹 童巧珍 易刚强 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2016年第15期2727-2733,共7页
目的 筛选灰毡毛忍冬Lonicera macranthoides基因表达分析的内参基因,研究其Mads-box基因家族AGL15基因(Lm AGL15)的时空表达特性。方法 克隆灰毡毛忍冬内参基因18 S r RNA、Ubiquilin、Actin和Efl-β的基因片段,评价了4个基因在不同... 目的 筛选灰毡毛忍冬Lonicera macranthoides基因表达分析的内参基因,研究其Mads-box基因家族AGL15基因(Lm AGL15)的时空表达特性。方法 克隆灰毡毛忍冬内参基因18 S r RNA、Ubiquilin、Actin和Efl-β的基因片段,评价了4个基因在不同部位叶、茎和花蕾,以及4个基因在灰毡毛忍冬生长不同时期的稳定性,筛选内参基因,分析Lm AGL15基因的时空表达特性。结果 18 S r RNA表达最稳定,适宜作为内参基因,叶片、茎的Lm AGL15基因相对表达量较低,花蕾相对表达量较高。花蕾不同发育时期,Lm AGL15的相对表达量呈现逐渐降低的变化,20 d后Lm AGL15的相对表达量最低,然后依次是花蕾初期(15 d)、青绿色花蕾期(10 d)、绿白色花蕾期(5 d)。结论 18 S r RNA是适宜的内参基因。叶片、茎和花蕾中,Lm AGL15的相对表达量差异明显。花蕾发育不同时期,Lm AGL15的相对表达量呈逐渐降低的变化,与花蕾开放变化规律相似。 展开更多
关键词 毡毛忍冬 内参基因 蕾期延长 时空表达特性 18 S r RNA UBIQUILIN ACTIN Efl-β AGL15
灰毡毛忍冬种子萌发与幼苗生长影响因子研究 被引量:3
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作者 徐进 张应 +2 位作者 崔广林 佘跃辉 李隆云 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期51-55,共5页
通过研究灰毡毛忍冬种子萌发与幼苗生长影响因子,旨在提高其种子繁殖效率,并为制定种子质量检验方法提供依据。观察灰毡毛忍冬果实和种子形态特征,测定种子吸水量,同时设不同湿沙层积时间、温度和发芽床处理,测定其发芽势、发芽率、发... 通过研究灰毡毛忍冬种子萌发与幼苗生长影响因子,旨在提高其种子繁殖效率,并为制定种子质量检验方法提供依据。观察灰毡毛忍冬果实和种子形态特征,测定种子吸水量,同时设不同湿沙层积时间、温度和发芽床处理,测定其发芽势、发芽率、发芽指数对种子萌发和幼苗生长的影响。结果表明灰毡毛忍冬种子吸水通透性无障碍,22 h后吸水量接近饱和;4℃湿沙层积处理80 d前,随着层积时间增加种子初始发芽时间缩短,发芽率和发芽势提高,层积100 d,发芽率降低;15℃下,种子发芽和幼苗生长各项指标最佳,其中光照条件下的幼苗子叶宽度显著大于黑暗条件下;种子在纸上、砂上的发芽势、发芽率和发芽指数显著高于其他发芽床,且霉变率低。灰毡毛忍冬的标准发芽试验规程为:种子于4℃湿沙层积80 d,纸上或砂上发芽床,15℃恒温光照培养,首次计数为置床后第4天,末次计数为第23天,统计发芽势的时间为置床后第13天。 展开更多
关键词 毡毛忍冬 种子 萌发 幼苗生长
日粮添加灰毡毛忍冬藤叶粉对肥育猪血清生化指标与脂肪代谢的影响 预览
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作者 王勤华 龙次民 +5 位作者 周锡红 谢春艳 李凤娜 范志勇 印遇龙 吴信 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期1810-1815,1837共7页
本试验旨在研究日粮中添加灰毡毛忍冬藤叶粉对肥育猪血清生化、肝脏中脂肪酸组成以及脂肪代谢相关基因表达的影响。选用同栏舍、同批次的二元杂交(长×大)健康阉公猪(55±1.03 kg)16栏,按照体重相近原则随机分成2个处理组,... 本试验旨在研究日粮中添加灰毡毛忍冬藤叶粉对肥育猪血清生化、肝脏中脂肪酸组成以及脂肪代谢相关基因表达的影响。选用同栏舍、同批次的二元杂交(长×大)健康阉公猪(55±1.03 kg)16栏,按照体重相近原则随机分成2个处理组,即基础日粮(对照组)、基础日粮+1%灰毡毛忍冬藤叶粉,每组8个重复,每个重复10头。试验期为60 d。结果表明:1)与对照组相比,日粮添加灰毡毛忍冬藤叶粉降低了血清中总胆固醇(TC)(P〈0.05),而显著提高C型反应蛋白(CRP)含量(P〈0.05);2)与对照组相比,日粮中添加灰毡毛忍冬藤叶粉使肝脏中饱和脂肪酸(SFA)中c13:0和单不饱和脂肪酸(MUFA)中的c14:1含量均显著降低(P〈0.05);3)与对照组相比,日粮中添加灰毡毛忍冬藤叶粉上调了肝脏中甘油三酯脂肪酶(ATGL)和肉碱棕榈酰基转移酶1(CPT1A)的基因表达量(P〈0.05);而下调了脂肪合成酶(FAS)的基因表达量(P〈0.10)。综上所述,日粮中添加灰毡毛忍冬藤叶粉能有效降低肥育猪血液中胆固醇和甘油三酯的含量,可能通过调控脂肪代谢基因ATGL、CPT1和FAS的表达,进而调控育肥猪肝脏的脂肪代谢。 展开更多
关键词 毡毛忍冬 生化指标 脂肪酸组成 脂肪代谢 肥育猪
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