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基于QIAxcel毛细管凝胶电泳分析系统的7种猪病毒检测方法的建立与初步应用 预览
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作者 邬旭龙 肖璐 +5 位作者 林华 杨泽晓 姚学萍 王印 张鹏飞 姜睿姣 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期824-829,共6页
为建立同时检测7种常见猪病毒的毛细管凝胶电泳方法,本研究针对猪伪狂犬病病毒、猪乙型脑炎病毒、猪瘟病毒、猪圆环病毒2型、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪细小病毒及非洲猪瘟病毒保守基因,设计7对特异引物,并在引物的5’端加入一段非同... 为建立同时检测7种常见猪病毒的毛细管凝胶电泳方法,本研究针对猪伪狂犬病病毒、猪乙型脑炎病毒、猪瘟病毒、猪圆环病毒2型、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪细小病毒及非洲猪瘟病毒保守基因,设计7对特异引物,并在引物的5’端加入一段非同源性标签序列,再设计一对可识别标签序列的通用引物。经反应条件优化,建立了一种基于QIAxcel毛细管凝胶电泳分析系统的7种猪常见病毒多重PCR检测方法。该方法与O型猪口蹄疫病毒(FMDV-O)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)等均无交叉反应,特异性强;所建立方法对7种病毒质粒标准品的检测下限分别为4.56×10^3拷贝/μL、6.35×10^3拷贝/μL、1.98×10^3拷贝/μL、1.32×10^4拷贝/μL、3.21×10^3拷贝/μL、4.51×10^3拷贝/μL、3.37×10^3拷贝/μL,敏感性较高;重复性试验结果显示各靶条带数值间的变异系数均小于1%,该方法稳定,重复性高。该方法对65份临床样本检测结果与国标或行标单一PCR检测方法相比,二者对单一病原和混合病原检测的一致性分别为94.3%(33/35)、77.7%(14/18)。本研究建立的方法为毛细管凝胶电泳技术在动物疾病病原检测中的应用提供一定的参考。 展开更多
关键词 多重PCR QIAxcel毛细管凝胶电泳(QIAxcel CGE) 猪伪狂犬病病毒 猪乙型脑炎病毒 猪瘟病毒 猪圆环病毒2型 猪繁殖与呼吸综合征病毒 猪细小病毒 非洲猪瘟病毒
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仔猪猪瘟病毒和猪圆环病毒2型混合感染的诊断 预览
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作者 王月 李克鑫 +3 位作者 李克钦 牛绪东 张元瑞 刘建柱 《猪业科学》 2019年第5期74-76,共3页
猪瘟是由猪瘟病毒(ClassicalSwineFeverVirus,CSFV)引起猪的一种急性、热性、高度接触性传染性和致死性疾病[1]。猪圆环病毒病(PorcineCircovirusDiseases)是由猪圆环病毒2型(PorcineCircovirustype2,PCV2)感染引起的仔猪多种综合征[2]... 猪瘟是由猪瘟病毒(ClassicalSwineFeverVirus,CSFV)引起猪的一种急性、热性、高度接触性传染性和致死性疾病[1]。猪圆环病毒病(PorcineCircovirusDiseases)是由猪圆环病毒2型(PorcineCircovirustype2,PCV2)感染引起的仔猪多种综合征[2]。猪圆环病毒病是一种条件性疾病,该病病毒主要侵害猪的免疫系统,可造成机体免疫力下降,从而继发如猪伪狂犬病、猪瘟、猪肺炎支原体和猪细小病毒病等疾病,与之发生混合感染,加重疾病的发生和发展,严重危害着猪群的健康程度[3]。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 猪瘟病毒 混合感染 仔猪 条件性疾病 猪圆环病毒 诊断 猪细小病毒
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猪瘟疫苗的“前世今生” 预览
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作者 朱萌 《中国动物保健》 2019年第1期13-14,共2页
猪瘟病毒猪瘟病毒(CSFV)属于黄病毒科,是世界范围内最重要的猪病病毒。分子特性:单正股RNA,结构蛋白有衣壳蛋白(C)和3种囊膜糖蛋白(E0、E1、E2)。E0蛋白是唯一分泌到CSFV感染细胞血清中的糖蛋白,在机体内可诱导产生中和抗体;E2则是引起... 猪瘟病毒猪瘟病毒(CSFV)属于黄病毒科,是世界范围内最重要的猪病病毒。分子特性:单正股RNA,结构蛋白有衣壳蛋白(C)和3种囊膜糖蛋白(E0、E1、E2)。E0蛋白是唯一分泌到CSFV感染细胞血清中的糖蛋白,在机体内可诱导产生中和抗体;E2则是引起猪产生针对猪瘟保护性抗体的主要抗原,在猪瘟诊断和新型疫苗的研究上都起着重要的作用。 展开更多
关键词 猪瘟疫苗 囊膜糖蛋白 病毒 CSFV 猪瘟病毒 保护性抗体 分子特性 衣壳蛋白
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CSFV、PRV和PRRSV多重PCR检测方法的建立及其应用
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作者 顾文源 范京惠 +3 位作者 邸晶美 罗尚星 刘宝京 左玉柱 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期193-197,共5页
由猪瘟病毒(CSFV)、伪狂犬病病毒(PRV)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的繁殖障碍性疫病在中国的不断暴发,增加了猪的发病率和死亡率。为了建立同时检测这3种病毒的多重PCR方法,本研究根据GenBank中这3种病毒的参考基因序列设计引... 由猪瘟病毒(CSFV)、伪狂犬病病毒(PRV)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的繁殖障碍性疫病在中国的不断暴发,增加了猪的发病率和死亡率。为了建立同时检测这3种病毒的多重PCR方法,本研究根据GenBank中这3种病毒的参考基因序列设计引物,并对反应中的影响因素进行优化,建立了同时检测CSFV、PRV和PRRSV的多重PCR方法。该方法扩增的基因片段大小分别为570(CSFV),232 (PRRSV)和173bp(PRV)。敏感性和特异性试验结果显示,该方法对3种病毒的核酸最低检出量分别为23.88(CSFV),13.10(PRRSV)和14.60pg(PRV),对大肠杆菌(Ec.oli)、沙门菌(Salmonella)、猪乙型脑炎病毒(JEV)及猪圆环病毒2型(PCV2)的检测结果均为阴性。对2015年5月至2016年1月收集的168份临床样本检测结果显示,CSFV阳性率为24.4%,PRRSV阳性率为21.4%,提示河北省该段时间内引起猪繁殖障碍性疫病的主要病原为CSFV和PRRSV。经多重PCR检测为PRRSV、PRV或CSFV阳性的临床样本,再次使用商品化的试剂盒进行检测,符合率为100.0%。这些结果表明,本试验建立的多重PCR方法省时、高效,可用于PRRSV、PRV和CSFV感染的临床诊断。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 伪狂犬病病毒 猪繁殖与呼吸综合征病毒 多重PCR
2015-2017年山东地区CSFV、PRRSV和PRV的流行病学调查与分析
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作者 张树金 曾昊 +10 位作者 于江 陈智 张玉玉 王鑫 陈蕾 唐融志 郭立辉 任素芳 邱文彬 李玉保 吴家强 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1064-1069,共6页
为了解山东地区生猪主要病毒性疾病的发生情况,掌握疫病发生及变化规律。本试验对2015-2017年山东省各生猪养殖场送检的病料和血清进行猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)和猪瘟病毒(CSFV)3种病原抗原和抗体检测及遗... 为了解山东地区生猪主要病毒性疾病的发生情况,掌握疫病发生及变化规律。本试验对2015-2017年山东省各生猪养殖场送检的病料和血清进行猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)和猪瘟病毒(CSFV)3种病原抗原和抗体检测及遗传演化分析。结果显示:2015-2017年CSFV平均抗原阳性率为9.99%,抗体水平逐年提高,平均抗体阳性率为79.38%;样品序列测定结果显示,目前CSFV的主要流行毒株为2.1d亚型。PRRSV平均抗原阳性率为41.44%,平均抗体阳性率为83.28%,2015-2017年PRRSV抗原和抗体水平均趋于平稳趋势。2017年PRV平均抗原阳性率12.30%,gE平均抗体阳性率为30.95%,gB平均抗体阳性率为74.70%,2017年PRV野毒感染的风险有所提高。结果表明,虽然部分病毒性传染病的发生发展出现一些变化及风险,但仍处于可防可控的范围。该调查分析结果可为山东地区CSFV、PRRSV和PRV的流行和防控提供参考。 展开更多
关键词 流行病学调查 猪瘟病毒 猪繁殖与呼吸综合征病毒 伪狂犬病病毒
规模猪场主要三种病毒的抗体检测与分析 预览
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作者 蒋光明 彭兰丽 《湖南畜牧兽医》 2019年第1期23-24,共2页
为了给湖南省道县兴达规模养猪场提供疫病诊断防控依据,试验对该规模化猪场5头发病猪进行了临床诊断、病理解剖和实验室检测。采集24份血清采用ELISA 方法检测抗体。结果表明:猪群整体食欲下降,病猪的体温为39.8℃~41.5℃,部分病猪四肢... 为了给湖南省道县兴达规模养猪场提供疫病诊断防控依据,试验对该规模化猪场5头发病猪进行了临床诊断、病理解剖和实验室检测。采集24份血清采用ELISA 方法检测抗体。结果表明:猪群整体食欲下降,病猪的体温为39.8℃~41.5℃,部分病猪四肢末端呈蓝紫色,剖检可见猪内脏表面密布点状出血;PRRSV抗体平均阳性率为 95.8%,PCV2抗体平均阳性率为100%,CSFV抗体平均阳性率仅有25%。说明该猪场CSFV免疫抗体整齐度差,保护率低,应加强饲养管理,及时进行免疫,控制并发感染,保证猪群具有稳定的免疫状态,并对该猪场对于猪病的预防提供了建议。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 猪瘟病毒 猪圆环病毒2型 病理解剖 ELISA 饲养管理
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CSFV、PRRSV和PCV2多重PCR检测方法的建立及初步应用 预览
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作者 兰世捷 陈亮 +7 位作者 苗艳 冯万宇 王志强 朱庆贺 金振华 李阳 徐馨 李丹 《中国猪业》 2019年第6期22-25,30,共5页
为建立同时检測猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪圆环病毒2型的多重PCR,参照GenBank中发表的3种病毒的基因序列,针对猪瘥病毒的E2、猪繁殖与呼吸综合征病毒的0RF7和猪圆环病毒2型的0RF2等基因,分别设计出3对特异引物,通过优化反应... 为建立同时检測猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪圆环病毒2型的多重PCR,参照GenBank中发表的3种病毒的基因序列,针对猪瘥病毒的E2、猪繁殖与呼吸综合征病毒的0RF7和猪圆环病毒2型的0RF2等基因,分别设计出3对特异引物,通过优化反应条件,建立了同时检測3种病毒的多重PCR,该PCR可同时扩增出204 bp(猪瘰病毒)、314 bp(猪繁殖与呼吸综合征病毒)和485 bp(猪圆环病毒2型)的目的条带,猪伪狂犬病病毒、猪细小病毒和猪流行性腹泻病毒的扩增结果为阴性。选取96份疑似有繁殖障碍病的母猪,采集病猪血清样品进行检測,其中感染2种以上病毒的样品比例为34.3%(33/96)。结果表明,多重PCR与单一PCR的符合率为100%,该方法可用于猪瘥病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪圆环病毒2型等病毒的临床快速检測与流行病学调查。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 猪繁殖与呼吸综合征病毒 猪圆环病毒2型 多重PCR
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持续定时免疫猪瘟疫苗应用效果研究 预览
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作者 何东旭 周先建 +1 位作者 王勋 顾玉美 《中国畜牧业》 2019年第11期52-53,共2页
猪瘟(Classical swine fever,CSF)是由猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)引起的严重危害养猪业的重大传染病。目前发现的CSFV毒株可分为3个基因型和11个基因亚型,但CSFV抗原性比较保守,只有一个血清型,不同基因型间有很好的... 猪瘟(Classical swine fever,CSF)是由猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)引起的严重危害养猪业的重大传染病。目前发现的CSFV毒株可分为3个基因型和11个基因亚型,但CSFV抗原性比较保守,只有一个血清型,不同基因型间有很好的抗原交叉,中和抗体水平可以直接反应疫苗免疫产生体液免疫力的高低。接种高效猪瘟细胞疫苗可以有效刺激机体产生体液免疫和细胞免疫,成为当前有效防控猪瘟的重要手段。 展开更多
关键词 体液免疫力 猪瘟疫苗 应用 定时 CSFV 重大传染病 基因型 猪瘟病毒
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生猪规模场猪瘟的净化策略 预览
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作者 张国安 范奉 刘勇 《四川畜牧兽医》 2019年第5期47-48,共2页
猪瘟是由猪瘟病毒引起猪的一种高度接触性、出血性和致死性传染病。它和2018年传入我国的非洲猪瘟相似,发病率和死亡率高,国际动物卫生组织(OIE)将其定为A类传染病(16种法定报告传染病),我国列为一类动物疫病。猪瘟没有特效药物治疗,只... 猪瘟是由猪瘟病毒引起猪的一种高度接触性、出血性和致死性传染病。它和2018年传入我国的非洲猪瘟相似,发病率和死亡率高,国际动物卫生组织(OIE)将其定为A类传染病(16种法定报告传染病),我国列为一类动物疫病。猪瘟没有特效药物治疗,只能靠疫苗预防控制。根据农业农村部要求,到2020年底全国所有种猪场和部分区域(以县为单元申报)应达到猪瘟净化标准,生猪规模场(主要是自繁自养的场)也应对标种猪场,搞好猪瘟疫病的综合防控,逐步实现净化目标。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 净化标准 模场 生猪 国际动物卫生组织 动物疫病 传染病 非洲猪瘟
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猪瘟的临床症状和防控措施 预览
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作者 郭立军 《吉林畜牧兽医》 2019年第6期20-20,22共2页
猪瘟是由猪瘟病毒引起的一种高度接触性传染病,需要了解其流行特点、临床症状、采取切实可行的防控措施。1猪瘟病症概述猪瘟在我国存在已经有七十余年的病毒,如今已经被列为四大A类动物疫病之一。猪瘟病毒又被称为“烂肠瘟”,这种病毒... 猪瘟是由猪瘟病毒引起的一种高度接触性传染病,需要了解其流行特点、临床症状、采取切实可行的防控措施。1猪瘟病症概述猪瘟在我国存在已经有七十余年的病毒,如今已经被列为四大A类动物疫病之一。猪瘟病毒又被称为“烂肠瘟”,这种病毒存在两类毒株,一种是可以产生非典型猪瘟症状的B型弱性毒株;另一种是可以产生典型猪瘟症状的H型强性毒株。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 临床症状 防控 非典型猪瘟 接触性传染病 流行特点 动物疫病 烂肠瘟
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猪瘟的临床诊断与防治 预览
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作者 王明明 徐芳吉 《养殖与饲料》 2019年第10期71-72,共2页
猪瘟又称烂肠瘟,是猪的一种高度传染性疾病。猪瘟特征为急性经过,高热稽留,死亡率很高,对养猪业造成巨大的经济损失。本文介绍了猪瘟的流行病学、临床诊断,提出了防控猪瘟的措施。
关键词 猪瘟 猪瘟病毒 临床症状 诊断防治
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CSFV与PRRSV双重RT-PCR检测方法的建立及应用
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作者 杨伟 单春兰 +11 位作者 李林 高洪 严玉霖 赵汝 敖平星 高利波 刘超英 富国文 高斌 景麟稀 茶金龙 王浩 《畜牧与兽医》 北大核心 2019年第10期71-75,共5页
为建立能同时检测猪瘟病毒(CSFV)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的RT-PCR方法,根据CSFV和PRRSV的保守区域各设计1对特异性引物,预期扩增片段大小分别为356和546 bp,通过对反应条件的优化及特异性、灵敏性和重复性试验,建立了CSFV和PR... 为建立能同时检测猪瘟病毒(CSFV)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的RT-PCR方法,根据CSFV和PRRSV的保守区域各设计1对特异性引物,预期扩增片段大小分别为356和546 bp,通过对反应条件的优化及特异性、灵敏性和重复性试验,建立了CSFV和PRRSV的双重RT-PCR方法。结果显示:该方法能特异检测CSFV和PRRSV的cDNA最低量分别为0.96、1.48 ng,而对猪伪狂犬病毒(PRV)和猪圆环病毒(PCV)检测结果均为阴性;利用建立的双重RT-PCR对云南省部分地区送检的174份疑似CSFV及PRRSV感染的病料进行检测显示,CSFV感染率为24.14%,PRRSV感染率为47.70%,CSFV与PRRSV的混合感染率为16.67%,检测结果与单一RT-PCR结果相一致,且具有良好的可重复性;利用免疫组织化学方法对部分检测结果加以验证,验证结果与检测结果均一致。本研究成功建立了CSFV和PRRSV双重RT-PCR检测方法,为二者的快速检测和分子流行病学调查提供了一种有效手段。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 猪繁殖与呼吸综合征病毒 双重RT-PCR 检测方法
猪流行性腹泻导致仔猪急性死亡案例的诊治报告 预览
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作者 李相钊 马小明 +1 位作者 吴美芹 吕翠 《北方牧业》 2019年第13期26-27,共2页
河南省平顶山某猪场,基础母猪存栏400头,一点式四周批设计,24头母猪一个产房小单元,其中一个小单元有3窝38头哺乳仔猪,出生后1~2天内,仔猪表现正常,从第3日龄开始(2019年3月26日),相继发生呕吐、水样腹泻,2019年3月27日又出现4窝52头哺... 河南省平顶山某猪场,基础母猪存栏400头,一点式四周批设计,24头母猪一个产房小单元,其中一个小单元有3窝38头哺乳仔猪,出生后1~2天内,仔猪表现正常,从第3日龄开始(2019年3月26日),相继发生呕吐、水样腹泻,2019年3月27日又出现4窝52头哺乳仔猪发生腹泻,2019年3月28日有6仔猪脱水死亡。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻 猪瘟病毒 活疫苗 经典毒株 冠状病毒 变异毒株 死亡案例
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猪瘟和猪繁殖与呼吸综合征病毒混合感染的PCR诊断 预览
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作者 苏述色日 《中国动物保健》 2019年第5期64-65,共2页
对一例临床中疑似猪瘟病毒(CSFV)或猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染病例进行了实验室PCR诊断,确诊为CSFV和PRRSV混合感染。
关键词 猪瘟病毒 猪繁殖与呼吸综合征病毒 PCR诊断
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猪瘟病毒、伪狂犬病毒与链球菌混合感染的诊治 预览 被引量:1
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作者 闫永海 《养殖与饲料》 2019年第1期79-81,共3页
在规模化养猪场中,混合感染性疾病危害很大。本文以某县养猪场发生猪瘟病毒、伪狂犬病毒与链球菌混合感染为例,总结了其发病情况、临床症状、剖检变化、实验室检验,并提出了封锁疫点、彻底消毒,及早确诊、免疫接种,全场检测、杜绝蔓延,... 在规模化养猪场中,混合感染性疾病危害很大。本文以某县养猪场发生猪瘟病毒、伪狂犬病毒与链球菌混合感染为例,总结了其发病情况、临床症状、剖检变化、实验室检验,并提出了封锁疫点、彻底消毒,及早确诊、免疫接种,全场检测、杜绝蔓延,药物治疗等措施,保障养殖业持续健康发展。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 伪狂犬病毒 链球菌 混合感染
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浙江省高致病性猪蓝耳病和猪瘟强制免疫需求调查 预览
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作者 刘爱军 周彩琴 +2 位作者 孙冰冰 黄晓兵 赵灵燕 《浙江畜牧兽医》 2019年第4期16-18,共3页
高致病性猪蓝耳病(以下简称“高蓝”)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株引起的一种急性高致死性传染病,仔猪发病率达100%、死亡率可达50%以上,母猪流产率可达30%以上,育肥猪也可发病死亡,是危害全省生猪生产的重要疫病之一,猪瘟是由猪... 高致病性猪蓝耳病(以下简称“高蓝”)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株引起的一种急性高致死性传染病,仔猪发病率达100%、死亡率可达50%以上,母猪流产率可达30%以上,育肥猪也可发病死亡,是危害全省生猪生产的重要疫病之一,猪瘟是由猪瘟病毒引起的一种高度接触性、出血性和致死性传染病;上述两种动物疫病均被世界动物卫生组织(OIE)将其列为必须报告的动物疫病,我国将其列为一类动物疫病。2007年,我国将高蓝和猪瘟列入了强制免疫计划。这对遏制全省高蓝和猪瘟疫情产生了显著的成效,近年来未发生区域性暴发流行,有效地保障了全省生猪养殖业的健康持续生态发展。 展开更多
关键词 高致病性猪蓝耳病 猪瘟病毒 强制免疫 猪繁殖与呼吸综合征病毒 世界动物卫生组织 动物疫病 浙江 生猪养殖业
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1例仔猪猪瘟病毒与伪狂犬病毒混合感染的诊治 预览
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作者 姜梅 《养殖与饲料》 2019年第8期68-69,共2页
在养猪生产中,由2种或者2种以上的病原体共同诱发的疾病很多。这类疾病的危害极其严重,同时控制蔓延的难度也相当大。本文介绍了某猪场仔猪发生伪狂犬病毒与猪瘟病毒混合感染后的诊断与治疗过程,旨在提醒广大畜牧工作者,在临床实践中,... 在养猪生产中,由2种或者2种以上的病原体共同诱发的疾病很多。这类疾病的危害极其严重,同时控制蔓延的难度也相当大。本文介绍了某猪场仔猪发生伪狂犬病毒与猪瘟病毒混合感染后的诊断与治疗过程,旨在提醒广大畜牧工作者,在临床实践中,猪群发生多病原混合感染时,必须先搞清病因,采取一系列综合性防治措施,才能获得较好的诊疗效果。 展开更多
关键词 仔猪 猪瘟病毒 伪狂犬病毒 混合感染
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猪瘟病毒E^rns蛋白在杆状病毒系统中的表达及纯化 预览
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作者 牛康 徐璐 +6 位作者 张乾义 夏应菊 朱元源 邹兴启 李翠 赵启祖 王琴 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2019年第2期31-35,38,I0004共7页
采用杆状病毒表达系统表达并纯化猪瘟病毒E^rns蛋白,并对其反应原性进行鉴定。将猪瘟病毒的E^rns 基因克隆至pFastbac-HT-A 载体上,构建了pFA-E^rns重组质粒;经转座、转染后构建重组杆状病毒rBac-E^rns;通过优化接毒时间和接毒量等参数... 采用杆状病毒表达系统表达并纯化猪瘟病毒E^rns蛋白,并对其反应原性进行鉴定。将猪瘟病毒的E^rns 基因克隆至pFastbac-HT-A 载体上,构建了pFA-E^rns重组质粒;经转座、转染后构建重组杆状病毒rBac-E^rns;通过优化接毒时间和接毒量等参数,最终确定表达条件。将表达产物采用亲和层析法纯化后,采用Western Blotting 鉴定E^rns 蛋白的反应性,并采用间接ELISA 方法对其应用进行了初步探索。结果显示,获得了重组杆状病毒rBac-E^rns,经Western Blotting 和间接免疫荧光(IFA)鉴定,该重组病毒能够与猪瘟阳性血清和E^rns 单抗发生特异性反应。纯化后的E^rns 蛋白纯度较好,浓度为0. 2 mg/ mL,经Western Blotting 方法鉴定证明,纯化后的蛋白与E^rns单抗和猪瘟阳性血清能够发生特异性反应;初步建立了间接ELISA 方法检测猪瘟抗体,证明表达的蛋白可以区分猪瘟阳性血清和阴性血清。表明本研究利用杆状病毒表达系统成功表达并纯化了猪瘟病毒E^rns蛋白,纯化后的E^rns蛋白具有良好的反应性,可以作为开发鉴别诊断试剂的备选蛋白以及用于E^rns 蛋白的结构和生物学功能研究。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 E^rns蛋白 杆状病毒系统 间接ELISA
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表达猪瘟病毒E0-E2基因重组腺病毒疫苗在小鼠体内的存留时间分析 预览
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作者 熊贝嘉 张会 +3 位作者 孙永科 范根成 张恒 杨玉艾 《动物医学进展》 北大核心 2019年第3期49-53,共5页
研究E0-E2基因和表达蛋白及抗体水平在小鼠体内的最长存留时间,以确定表达猪瘟病毒E0-E2基因重组腺病毒疫苗(rAd-E0-E2)在小鼠体内的存留规律。本试验选用30只SPF级别的健康小鼠,随机分为A、B组,各免疫组以1×106 IFU/只剂量接种rAd... 研究E0-E2基因和表达蛋白及抗体水平在小鼠体内的最长存留时间,以确定表达猪瘟病毒E0-E2基因重组腺病毒疫苗(rAd-E0-E2)在小鼠体内的存留规律。本试验选用30只SPF级别的健康小鼠,随机分为A、B组,各免疫组以1×106 IFU/只剂量接种rAd-E0-E2,对照组注射生理盐水。A组20只于接种后不同特定时间(2只/次)采集血液和组织进行PCR和IFA检测E0-E2基因及表达蛋白残留情况;B组10只于接种后1、3、5、7、10、14、21、28d采集血清检测猪瘟抗体水平。PCR和IFA检测显示,在接种12、24、36h后肝、脾、肾组织和血清中E0-E2基因和蛋白检出率为100%,接种48h后小鼠肝、脾组织检出率为50%,肾组织和血清检出率为100%。接种72h以后,小鼠血液和组织检测均为阴性。接种后7d试验组体内抗体阳性率为40%,接种后10d小鼠体内抗体阳性率为100%,抗体阻断率在43%~51.2%,接种后28d,猪瘟抗体阳性率为100%,抗体阻断率在75.6%~87.5%。表明rAd-E0-E2在小鼠体内的存留时间最长72h,接种时间与E2抗体水平呈正相关。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 E0-E2基因 重组腺病毒疫苗 存留规律
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猪瘟病例的综合诊断及感染毒株遗传进化分析 预览
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作者 王宏宇 李超 +7 位作者 孟凡亮 刘照虎 马梓承 焦秋林 李焱 曹龙 肖一红 刘思当 《中国动物检疫》 CAS 2019年第1期65-69,79共6页
2018年5月,山东省菏泽市某育肥猪场新进仔猪突然出现急性发病死亡,死亡率高达30%以上。为确诊病原,分析病原的遗传演化规律,对病死猪进行了病理组织学诊断和病毒分离鉴定,并对分离株的E2基因进行了序列测定及遗传变异分析。结果显示,组... 2018年5月,山东省菏泽市某育肥猪场新进仔猪突然出现急性发病死亡,死亡率高达30%以上。为确诊病原,分析病原的遗传演化规律,对病死猪进行了病理组织学诊断和病毒分离鉴定,并对分离株的E2基因进行了序列测定及遗传变异分析。结果显示,组织学病变符合猪瘟的病变特征,与参考毒株核苷酸和氨基酸的同源性分别为83.4%~97.9%和88.7%~98.7%,与本实验室从山东分离的流行毒株的核苷酸和氨基酸同源性均高于其他参考毒株。E2基因遗传进化分析表明,该分离株与本实验室分离的流行毒株遗传距离较近,同属于猪瘟病毒2.1d亚型分支。E2基因推导氨基酸突变位点分析表明,分离株的糖基化位点(T806A)与所有参考株均不相同,其具体生物学意义有待研究。上述结果表明,该猪场仔猪的急性发病死亡是由猪瘟病毒感染所致,致病毒株属于猪瘟病毒2.1d亚型。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 E2基因 遗传进化分析 病理组织学诊断 病毒分离鉴定
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