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基于QIAxcel毛细管凝胶电泳分析系统的7种猪病毒检测方法的建立与初步应用 预览
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作者 邬旭龙 肖璐 +5 位作者 林华 杨泽晓 姚学萍 王印 张鹏飞 姜睿姣 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期824-829,共6页
为建立同时检测7种常见猪病毒的毛细管凝胶电泳方法,本研究针对猪伪狂犬病病毒、猪乙型脑炎病毒、猪瘟病毒、猪圆环病毒2型、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪细小病毒及非洲猪瘟病毒保守基因,设计7对特异引物,并在引物的5’端加入一段非同... 为建立同时检测7种常见猪病毒的毛细管凝胶电泳方法,本研究针对猪伪狂犬病病毒、猪乙型脑炎病毒、猪瘟病毒、猪圆环病毒2型、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪细小病毒及非洲猪瘟病毒保守基因,设计7对特异引物,并在引物的5’端加入一段非同源性标签序列,再设计一对可识别标签序列的通用引物。经反应条件优化,建立了一种基于QIAxcel毛细管凝胶电泳分析系统的7种猪常见病毒多重PCR检测方法。该方法与O型猪口蹄疫病毒(FMDV-O)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)等均无交叉反应,特异性强;所建立方法对7种病毒质粒标准品的检测下限分别为4.56×10^3拷贝/μL、6.35×10^3拷贝/μL、1.98×10^3拷贝/μL、1.32×10^4拷贝/μL、3.21×10^3拷贝/μL、4.51×10^3拷贝/μL、3.37×10^3拷贝/μL,敏感性较高;重复性试验结果显示各靶条带数值间的变异系数均小于1%,该方法稳定,重复性高。该方法对65份临床样本检测结果与国标或行标单一PCR检测方法相比,二者对单一病原和混合病原检测的一致性分别为94.3%(33/35)、77.7%(14/18)。本研究建立的方法为毛细管凝胶电泳技术在动物疾病病原检测中的应用提供一定的参考。 展开更多
关键词 多重PCR QIAxcel毛细管凝胶电泳(QIAxcel CGE) 伪狂犬病病毒 乙型脑炎病毒 病毒 圆环病毒2型 猪繁殖呼吸综合征病毒 细小病毒 非洲病毒
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猪繁殖与呼吸综合征疫苗免疫应注意的问题 预览
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作者 杜瑜 《中国动物保健》 2019年第10期41-42,共2页
猪繁殖与呼吸综合征自1987年第一次在美国暴发以来,一直是困扰全球各处养猪基地的一大问题。随着养猪行业的不断发展,该病也在不断扩散,病毒也不断变异,引发更多猪群患病。因此,需要对猪繁殖与呼吸综合征疫苗免疫应注意的问题进行讨论,... 猪繁殖与呼吸综合征自1987年第一次在美国暴发以来,一直是困扰全球各处养猪基地的一大问题。随着养猪行业的不断发展,该病也在不断扩散,病毒也不断变异,引发更多猪群患病。因此,需要对猪繁殖与呼吸综合征疫苗免疫应注意的问题进行讨论,以促进养猪行业的发展。 展开更多
关键词 猪繁殖呼吸综合征 猪繁殖呼吸综合征病毒 疫苗免疫 防治措施
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两株分离自疫苗免疫猪场的PRRSV毒株的遗传演化分析
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作者 姚睿玉 陈芳洲 +1 位作者 何启盖 杨汉春 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期847-854,共8页
猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是严重影响全球养猪业的传染病,疫苗免疫是防控该病的重要措施,但猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)容易发生变异从而降低了免疫预防的效果。本研究从免疫了高致病性PRRS疫苗的发病猪场,分离出2株PRRSV毒株,并测... 猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是严重影响全球养猪业的传染病,疫苗免疫是防控该病的重要措施,但猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)容易发生变异从而降低了免疫预防的效果。本研究从免疫了高致病性PRRS疫苗的发病猪场,分离出2株PRRSV毒株,并测定了其全基因组序列,分别命名为:PRRSV/pig/CHN/JTS/201606和PRRSV/pig/CHN/TG/201711。为了探讨临床中分离得到的这2株PRRSV毒株与该场所使用疫苗之间的关系,我们进行了全基因序列的遗传变异和重组分析,结果显示,这2个毒株都以PRRSV-pig-CHN-TJ-200-610(EU860248.1)疫苗毒株为骨架,其中PRRSV/pig/CHN/JTS/201606毒株在ORF1a蛋白的1429-1522 aa区域存在独特的94 aa的缺失,PRRSV/pig/CHN/TG/201711毒株在1013-1132aa区域存在120 aa的缺失。综上,本研究结果表明,PRRSV疫苗株基因组中核苷酸的突变和缺失产生的新毒株是造成猪场疫苗免疫失败的原因。 展开更多
关键词 猪繁殖呼吸综合征 猪繁殖呼吸综合征病毒 全基因组 遗传变异
EB和CVN抗病毒肽对PRRSV入侵细胞的抵抗作用
4
作者 段月琴 张枫惠 +4 位作者 李乃峰 冯旭红 赵鹏 秦健 杜荣 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第9期140-142,共3页
为了研究EB抗病毒肽和蓝藻抗病毒蛋白-N(CVN)抗病毒肽抵抗猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的入侵作用,对分别转染了不同载体(未转染组、pcDNA3.1空载体组、pcDNA3.1-MSTNpro组、pcDNA3.1-MSTNpro-EB组和pcDNA3.1-MSTNpro-CVN组)的猴肾细... 为了研究EB抗病毒肽和蓝藻抗病毒蛋白-N(CVN)抗病毒肽抵抗猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的入侵作用,对分别转染了不同载体(未转染组、pcDNA3.1空载体组、pcDNA3.1-MSTNpro组、pcDNA3.1-MSTNpro-EB组和pcDNA3.1-MSTNpro-CVN组)的猴肾细胞(Marc-145细胞)进行PRRSV处理,检测病毒核衣壳N蛋白与细胞波形蛋白的mRNA表达差异。结果表明:在PRRSV处理后,与pcDNA3.1-MSTNpro组相比,pcDNA3.1-MSTNpro-EB组和pcDNA3.1-MSTNpro-CVN组中病毒核衣壳N蛋白和细胞波形蛋白的mRNA相对表达量极显著或显著降低(P<0.01或P<0.05)。说明EB抗病毒肽和CVN抗病毒肽具有抗PRRSV入侵细胞的作用。 展开更多
关键词 EB抗病毒 蓝藻抗病毒蛋白-N抗病毒 猪繁殖呼吸综合征病毒 猴肾细胞 核衣壳N蛋白 波形蛋白
猪繁殖与呼吸综合征及其防控措施 预览
5
作者 钱慧 《养殖与饲料》 2019年第9期78-80,共3页
猪繁殖与呼吸综合征是一种传染性疾病,会造成仔猪死亡、母猪繁殖障碍、母猪流产、不发情、假发情、产出弱胎和木乃伊胎等情况。本文对猪繁殖与呼吸综合征的病原、流行病学、临床症状、病理变化等进行分析归纳,并提出具体的防控措施,主... 猪繁殖与呼吸综合征是一种传染性疾病,会造成仔猪死亡、母猪繁殖障碍、母猪流产、不发情、假发情、产出弱胎和木乃伊胎等情况。本文对猪繁殖与呼吸综合征的病原、流行病学、临床症状、病理变化等进行分析归纳,并提出具体的防控措施,主要包括4个方面的措施,即后备母猪的管理、猪场内部管理、猪群流动管理以及生物安全管理。 展开更多
关键词 蓝耳病 繁殖呼吸综合征 猪繁殖呼吸综合征病毒 防控 技术
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CSFV、PRV和PRRSV多重PCR检测方法的建立及其应用
6
作者 顾文源 范京惠 +3 位作者 邸晶美 罗尚星 刘宝京 左玉柱 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期193-197,共5页
由猪瘟病毒(CSFV)、伪狂犬病病毒(PRV)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的繁殖障碍性疫病在中国的不断暴发,增加了猪的发病率和死亡率。为了建立同时检测这3种病毒的多重PCR方法,本研究根据GenBank中这3种病毒的参考基因序列设计引... 由猪瘟病毒(CSFV)、伪狂犬病病毒(PRV)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的繁殖障碍性疫病在中国的不断暴发,增加了猪的发病率和死亡率。为了建立同时检测这3种病毒的多重PCR方法,本研究根据GenBank中这3种病毒的参考基因序列设计引物,并对反应中的影响因素进行优化,建立了同时检测CSFV、PRV和PRRSV的多重PCR方法。该方法扩增的基因片段大小分别为570(CSFV),232 (PRRSV)和173bp(PRV)。敏感性和特异性试验结果显示,该方法对3种病毒的核酸最低检出量分别为23.88(CSFV),13.10(PRRSV)和14.60pg(PRV),对大肠杆菌(Ec.oli)、沙门菌(Salmonella)、猪乙型脑炎病毒(JEV)及猪圆环病毒2型(PCV2)的检测结果均为阴性。对2015年5月至2016年1月收集的168份临床样本检测结果显示,CSFV阳性率为24.4%,PRRSV阳性率为21.4%,提示河北省该段时间内引起猪繁殖障碍性疫病的主要病原为CSFV和PRRSV。经多重PCR检测为PRRSV、PRV或CSFV阳性的临床样本,再次使用商品化的试剂盒进行检测,符合率为100.0%。这些结果表明,本试验建立的多重PCR方法省时、高效,可用于PRRSV、PRV和CSFV感染的临床诊断。 展开更多
关键词 病毒 伪狂犬病病毒 猪繁殖呼吸综合征病毒 多重PCR
2015-2017年山东地区CSFV、PRRSV和PRV的流行病学调查与分析
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作者 张树金 曾昊 +10 位作者 于江 陈智 张玉玉 王鑫 陈蕾 唐融志 郭立辉 任素芳 邱文彬 李玉保 吴家强 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1064-1069,共6页
为了解山东地区生猪主要病毒性疾病的发生情况,掌握疫病发生及变化规律。本试验对2015-2017年山东省各生猪养殖场送检的病料和血清进行猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)和猪瘟病毒(CSFV)3种病原抗原和抗体检测及遗... 为了解山东地区生猪主要病毒性疾病的发生情况,掌握疫病发生及变化规律。本试验对2015-2017年山东省各生猪养殖场送检的病料和血清进行猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)和猪瘟病毒(CSFV)3种病原抗原和抗体检测及遗传演化分析。结果显示:2015-2017年CSFV平均抗原阳性率为9.99%,抗体水平逐年提高,平均抗体阳性率为79.38%;样品序列测定结果显示,目前CSFV的主要流行毒株为2.1d亚型。PRRSV平均抗原阳性率为41.44%,平均抗体阳性率为83.28%,2015-2017年PRRSV抗原和抗体水平均趋于平稳趋势。2017年PRV平均抗原阳性率12.30%,gE平均抗体阳性率为30.95%,gB平均抗体阳性率为74.70%,2017年PRV野毒感染的风险有所提高。结果表明,虽然部分病毒性传染病的发生发展出现一些变化及风险,但仍处于可防可控的范围。该调查分析结果可为山东地区CSFV、PRRSV和PRV的流行和防控提供参考。 展开更多
关键词 流行病学调查 病毒 猪繁殖呼吸综合征病毒 伪狂犬病病毒
规模猪场主要三种病毒的抗体检测与分析 预览
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作者 蒋光明 彭兰丽 《湖南畜牧兽医》 2019年第1期23-24,共2页
为了给湖南省道县兴达规模养猪场提供疫病诊断防控依据,试验对该规模化猪场5头发病猪进行了临床诊断、病理解剖和实验室检测。采集24份血清采用ELISA 方法检测抗体。结果表明:猪群整体食欲下降,病猪的体温为39.8℃~41.5℃,部分病猪四肢... 为了给湖南省道县兴达规模养猪场提供疫病诊断防控依据,试验对该规模化猪场5头发病猪进行了临床诊断、病理解剖和实验室检测。采集24份血清采用ELISA 方法检测抗体。结果表明:猪群整体食欲下降,病猪的体温为39.8℃~41.5℃,部分病猪四肢末端呈蓝紫色,剖检可见猪内脏表面密布点状出血;PRRSV抗体平均阳性率为 95.8%,PCV2抗体平均阳性率为100%,CSFV抗体平均阳性率仅有25%。说明该猪场CSFV免疫抗体整齐度差,保护率低,应加强饲养管理,及时进行免疫,控制并发感染,保证猪群具有稳定的免疫状态,并对该猪场对于猪病的预防提供了建议。 展开更多
关键词 猪繁殖呼吸综合征病毒 病毒 圆环病毒2型 病理解剖 ELISA 饲养管理
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CSFV、PRRSV和PCV2多重PCR检测方法的建立及初步应用 预览
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作者 兰世捷 陈亮 +7 位作者 苗艳 冯万宇 王志强 朱庆贺 金振华 李阳 徐馨 李丹 《中国猪业》 2019年第6期22-25,30,共5页
为建立同时检測猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪圆环病毒2型的多重PCR,参照GenBank中发表的3种病毒的基因序列,针对猪瘥病毒的E2、猪繁殖与呼吸综合征病毒的0RF7和猪圆环病毒2型的0RF2等基因,分别设计出3对特异引物,通过优化反应... 为建立同时检測猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪圆环病毒2型的多重PCR,参照GenBank中发表的3种病毒的基因序列,针对猪瘥病毒的E2、猪繁殖与呼吸综合征病毒的0RF7和猪圆环病毒2型的0RF2等基因,分别设计出3对特异引物,通过优化反应条件,建立了同时检測3种病毒的多重PCR,该PCR可同时扩增出204 bp(猪瘰病毒)、314 bp(猪繁殖与呼吸综合征病毒)和485 bp(猪圆环病毒2型)的目的条带,猪伪狂犬病病毒、猪细小病毒和猪流行性腹泻病毒的扩增结果为阴性。选取96份疑似有繁殖障碍病的母猪,采集病猪血清样品进行检測,其中感染2种以上病毒的样品比例为34.3%(33/96)。结果表明,多重PCR与单一PCR的符合率为100%,该方法可用于猪瘥病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪圆环病毒2型等病毒的临床快速检測与流行病学调查。 展开更多
关键词 病毒 猪繁殖呼吸综合征病毒 圆环病毒2型 多重PCR
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新型猪蓝耳病基因工程活疫苗(PC株)的研究及应用 预览
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作者 李文生 孙志勇 +1 位作者 范娟 宋庆庆 《猪业科学》 2019年第4期94-97,共4页
猪繁殖与呼吸综合征(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome,PRRS),又称猪蓝耳病,是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus,PRRSV)引起的一种高度传染性疾病,其主要临床特征表现为母... 猪繁殖与呼吸综合征(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome,PRRS),又称猪蓝耳病,是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus,PRRSV)引起的一种高度传染性疾病,其主要临床特征表现为母猪繁殖障碍和仔猪、育肥猪的呼吸困难。自1987年在美国发现以来,该病已在全世界范围内流行。在美国,每年因PRRS造成的损失高达5.6亿~6.6亿美元[1-2]。我国自1996年证实了PRRS的存在以来,特别是发生于2006年春的“无名高热”(即高致病性猪蓝耳病),给我国养猪业造成了巨大的经济损失。 展开更多
关键词 高致病性蓝耳病 猪繁殖呼吸综合征病毒 基因工程 活疫苗 PRRSV 应用 C株 猪繁殖障碍
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新疆某猪场母猪繁殖障碍病病原学检测和毒株鉴定 预览
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作者 范士龙 刘丹丹 +2 位作者 韦丽婷 巴音查汗 张伟 《中国动物检疫》 CAS 2019年第9期83-87,共5页
2018年4月,新疆某规模化繁育猪场出现大量母猪流产,产死胎、木乃伊胎等繁育障碍症状。为确诊病因,采集胎儿组织和母猪流产分泌物,通过普通PCR、RT-PCR、real-timePCR技术,对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、伪狂犬病病毒(PRV)、猪细小病... 2018年4月,新疆某规模化繁育猪场出现大量母猪流产,产死胎、木乃伊胎等繁育障碍症状。为确诊病因,采集胎儿组织和母猪流产分泌物,通过普通PCR、RT-PCR、real-timePCR技术,对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、伪狂犬病病毒(PRV)、猪细小病毒(PPV)、弓形虫4种病原进行检测。结果显示,PRRSV检测呈阳性,PRV、PPV和弓形虫检测呈阴性。通过PRRSV特异性引物NSP2进行PRRSV毒株鉴定,确定该猪场存在PRRSV类NADC30毒株。结果表明,类NADC30毒株是导致该猪场出现母猪繁殖障碍的重要病原,说明该新型毒株已经蔓延到新疆地区,并开始对该地生猪养殖业造成危害。本试验为新疆地区猪场母猪繁殖障碍的病因调查提供了依据。 展开更多
关键词 猪繁殖障碍 病原学检测 PCR 毒株鉴定 猪繁殖呼吸综合征病毒
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猪繁殖与呼吸综合征病毒、圆环病毒2 型和衣原体混合感染引起母猪流产的诊断与防治 预览
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作者 康新华 张辉 +3 位作者 张维新 滚双宝 郭慧琳 韩庆彦 《中国动物检疫》 CAS 2019年第6期68-72,共5页
2018年10月,甘肃省某规模猪场存栏900头不同胎次母猪,在产仔高峰期内突然出现大量流产现象,临产母猪主要表现为产死胎、木乃伊胎、弱仔、畸形胎,平均产生率为26.92%(365/1356),乳猪平均死淘率高达16.55%(164/991)。为确定病因,采集5头... 2018年10月,甘肃省某规模猪场存栏900头不同胎次母猪,在产仔高峰期内突然出现大量流产现象,临产母猪主要表现为产死胎、木乃伊胎、弱仔、畸形胎,平均产生率为26.92%(365/1356),乳猪平均死淘率高达16.55%(164/991)。为确定病因,采集5头猪病料,包括木乃伊胎1头、死胎1头、流产胎儿2头、7日龄自然死亡弱仔1头,进行猪常见疫病病原学检测。检测结果显示:5头猪的猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪圆环病毒2型核酸检测均为阳性,4头的衣原体核酸检测为阳性,猪瘟病毒、细小病毒、乙型脑炎病毒、伪狂犬病毒核酸检测均为阴性。结果表明,猪繁殖与呼吸综合征病毒、圆环病毒2型和猪衣原体混合感染是导致该规模场母猪流产的主要原因,因此需要加强混合感染的控制。 展开更多
关键词 猪繁殖呼吸综合征病毒 圆环病毒2型 衣原体 混合感染 诊断防治
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浙江省高致病性猪蓝耳病和猪瘟强制免疫需求调查 预览
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作者 刘爱军 周彩琴 +2 位作者 孙冰冰 黄晓兵 赵灵燕 《浙江畜牧兽医》 2019年第4期16-18,共3页
高致病性猪蓝耳病(以下简称“高蓝”)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株引起的一种急性高致死性传染病,仔猪发病率达100%、死亡率可达50%以上,母猪流产率可达30%以上,育肥猪也可发病死亡,是危害全省生猪生产的重要疫病之一,猪瘟是由猪... 高致病性猪蓝耳病(以下简称“高蓝”)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株引起的一种急性高致死性传染病,仔猪发病率达100%、死亡率可达50%以上,母猪流产率可达30%以上,育肥猪也可发病死亡,是危害全省生猪生产的重要疫病之一,猪瘟是由猪瘟病毒引起的一种高度接触性、出血性和致死性传染病;上述两种动物疫病均被世界动物卫生组织(OIE)将其列为必须报告的动物疫病,我国将其列为一类动物疫病。2007年,我国将高蓝和猪瘟列入了强制免疫计划。这对遏制全省高蓝和猪瘟疫情产生了显著的成效,近年来未发生区域性暴发流行,有效地保障了全省生猪养殖业的健康持续生态发展。 展开更多
关键词 高致病性蓝耳病 病毒 强制免疫 猪繁殖呼吸综合征病毒 世界动物卫生组织 动物疫病 浙江 养殖业
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猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪圆环病毒2型双重荧光PCR检测方法的建立
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作者 修晓娜 李天芝 +1 位作者 于新友 唐娜 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期954-960,共7页
为建立快速简便检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和猪圆环病毒2型(PCV2)的方法,本研究根据GenBank中已登录的PRRSVORF7基因序列和PCV2 ORF1基因序列,设计了2对特异性引物和2条TaqMan探针,通过优化反应条件,建立了检测PRRSV和PCV2的双... 为建立快速简便检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和猪圆环病毒2型(PCV2)的方法,本研究根据GenBank中已登录的PRRSVORF7基因序列和PCV2 ORF1基因序列,设计了2对特异性引物和2条TaqMan探针,通过优化反应条件,建立了检测PRRSV和PCV2的双重荧光PCR方法。结果显示,该方法特异性好,不与其他常见猪病病原体发生交叉反应,检测PRRSV和PCV2的灵敏度分别可达1.05 TCID50/100L和6.30 TCID50/100μL,表明,本试验建立的双重TaqMan荧光定量PCR检测方法可对PRRSV和PCV2进行快速诊断,适合现场检测,为这两种疫病的诊断和防控奠定了基础。 展开更多
关键词 猪繁殖呼吸综合征病毒 圆环病毒2型 荧光PCR TAQMAN探针
猪瘟和猪繁殖与呼吸综合征病毒混合感染的PCR诊断 预览
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作者 苏述色日 《中国动物保健》 2019年第5期64-65,共2页
对一例临床中疑似猪瘟病毒(CSFV)或猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染病例进行了实验室PCR诊断,确诊为CSFV和PRRSV混合感染。
关键词 病毒 猪繁殖呼吸综合征病毒 PCR诊断
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CSFV与PRRSV双重RT-PCR检测方法的建立及应用
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作者 杨伟 单春兰 +11 位作者 李林 高洪 严玉霖 赵汝 敖平星 高利波 刘超英 富国文 高斌 景麟稀 茶金龙 王浩 《畜牧与兽医》 北大核心 2019年第10期71-75,共5页
为建立能同时检测猪瘟病毒(CSFV)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的RT-PCR方法,根据CSFV和PRRSV的保守区域各设计1对特异性引物,预期扩增片段大小分别为356和546 bp,通过对反应条件的优化及特异性、灵敏性和重复性试验,建立了CSFV和PR... 为建立能同时检测猪瘟病毒(CSFV)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的RT-PCR方法,根据CSFV和PRRSV的保守区域各设计1对特异性引物,预期扩增片段大小分别为356和546 bp,通过对反应条件的优化及特异性、灵敏性和重复性试验,建立了CSFV和PRRSV的双重RT-PCR方法。结果显示:该方法能特异检测CSFV和PRRSV的cDNA最低量分别为0.96、1.48 ng,而对猪伪狂犬病毒(PRV)和猪圆环病毒(PCV)检测结果均为阴性;利用建立的双重RT-PCR对云南省部分地区送检的174份疑似CSFV及PRRSV感染的病料进行检测显示,CSFV感染率为24.14%,PRRSV感染率为47.70%,CSFV与PRRSV的混合感染率为16.67%,检测结果与单一RT-PCR结果相一致,且具有良好的可重复性;利用免疫组织化学方法对部分检测结果加以验证,验证结果与检测结果均一致。本研究成功建立了CSFV和PRRSV双重RT-PCR检测方法,为二者的快速检测和分子流行病学调查提供了一种有效手段。 展开更多
关键词 病毒 猪繁殖呼吸综合征病毒 双重RT-PCR 检测方法
猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪圆环病毒2型与沙门菌混合感染的病理学诊断
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作者 卢婷 王雪 +7 位作者 喻红艳 周诗其 王政 刘晓丽 谷长勤 胡薛英 程国富 张万坡 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期644-650,共7页
2017年1~6月,某猪场约有10%的仔猪在断奶后发生慢性消瘦和腹泻,病死率高达80%。为确诊该猪场疾病,采用病理剖检、PCR/RT-PCR检测、细菌分离鉴定、免疫组化检测、组织病理学分析等方法对病猪进行了诊断。病理剖检发现,肺小叶间质增宽,肝... 2017年1~6月,某猪场约有10%的仔猪在断奶后发生慢性消瘦和腹泻,病死率高达80%。为确诊该猪场疾病,采用病理剖检、PCR/RT-PCR检测、细菌分离鉴定、免疫组化检测、组织病理学分析等方法对病猪进行了诊断。病理剖检发现,肺小叶间质增宽,肝易碎呈棕黄色,肠系膜水肿、肠黏膜面有纤维素性坏死物附着。组织病理学表现为化脓性肺炎、桥接型肝小叶中心坏死、间质性肾炎、坏死性肠炎。从病原学方面检测出猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV2)与沙门菌(Salm onella)这3种病原。综合病理学和病原学检测结果,认为沙门菌继发于PRRSV和PCV2感染,是造成该场猪群严重死亡的主要原因。 展开更多
关键词 沙门菌 猪繁殖呼吸综合征病毒 圆环病毒2型 混合感染 病理学诊断
6种中药体外抗猪繁殖与呼吸综合征病毒的作用 预览
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作者 刘云 朱善元 +4 位作者 龚祝南 秦枫 夏文龙 吴双 吴晓洁 《河南农业科学》 北大核心 2019年第10期147-154,共8页
为研究荆芥、委陵菜、啤酒花、翻白草、百部和虎杖6种中药体外抗猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的作用,建立了Marc-145细胞模型,在研究其对Marc-145细胞最大安全质量浓度的基础上,结合细胞形态观察和MTT法,对PRRSV进行阻断、抑制、灭活... 为研究荆芥、委陵菜、啤酒花、翻白草、百部和虎杖6种中药体外抗猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的作用,建立了Marc-145细胞模型,在研究其对Marc-145细胞最大安全质量浓度的基础上,结合细胞形态观察和MTT法,对PRRSV进行阻断、抑制、灭活3种作用方式的测定。结果显示,荆芥、委陵菜、啤酒花、翻白草、百部和虎杖对Marc-145细胞的最大安全质量浓度分别为0.25 mg/mL、1.25 mg/mL、0.63 mg/mL、0.31 mg/mL、1.56 mg/mL和0.47 mg/mL。在体外抗PRRSV作用的试验中,从细胞形态观察发现,委陵菜和虎杖药物组均未出现明显的细胞病变,其余4种药物组都出现了不同程度的细胞病变;从对PRRSV的抑制率来看,荆芥对PRRSV的阻断、抑制和直接灭活作用的最高抑制率分别为80.6%、52.2%和56.5%,委陵菜3种作用方式对PRRSV的最高抑制率分别为115.8%、93.0%和125.4%,啤酒花3种作用方式对PRRSV的最高抑制率分别为61.5%、32.0%和82.4%,翻白草3种作用方式对PRRSV的最高抑制率分别为15.6%、129.4%和57.7%,百部3种作用方式对PRRSV的最高抑制率分别为120.2%、61.8%和71.9%,虎杖3种作用方式对PRRSV的最高抑制率分别为110.4%、94.3%和130.8%。综合细胞形态观察和抑制率结果,委陵菜和虎杖抗PRRSV的效果最好,其次是荆芥和百部。 展开更多
关键词 猪繁殖呼吸综合征病毒 中药 病毒 体外 细胞病变 抑制率
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检测猪繁殖与呼吸综合征病毒高致病性和经典毒株可视化RT-LAMP方法的建立
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作者 王凯 杨飞 +7 位作者 罗丽华 王韦华 李鑫鑫 周宏超 范志新 田昊伦 冯全文 郭抗抗 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期1660-1666,1673共8页
猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)是目前影响养猪业的重要病毒之一,国内PRRSV是以美洲型为主,根据致病性的强弱又可分为高致病性(HP)和经典性PRRSV毒株,高致病性PRRSV是引起国内2006... 猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)是目前影响养猪业的重要病毒之一,国内PRRSV是以美洲型为主,根据致病性的强弱又可分为高致病性(HP)和经典性PRRSV毒株,高致病性PRRSV是引起国内2006年'猪高热病'的主要病原。PRRSV属于条件性致病病毒,对PRRSV感染猪和发病猪的准确、快速检测是采取有效措施的前提和依据。环介导等温扩增技术(LAMP)是一种敏感、快速、操作相对简便的核酸扩增技术,整个反应在单一温度下进行,反应结果可以通过肉眼观察,在动物病原检测方面应用较多。本试验通过GenBank获得了HP-PRRSV和经典PRRSV分离株序列,选择2种毒株共同的保守基因区段,设计了用于检测PRRSV的RT-LAMP引物。通过对反应体系、反应温度、特异性、敏感性等优化,建立了检测PRRSV的RT-LAMP方法。建立的方法总体系为25μL,外引物终浓度为0.20μmol/L、内引物终浓度为1.60μmol/L,63.0℃恒温作用1 h,给反应产物中加入1μL SYBR GreenⅠ,阳性结果呈绿色,紫外光下可见荧光,阴性结果呈橙色,紫外光下无荧光。方法对PRRSV RNA的最低检测质量浓度为9.44×10-5 mg/L。用建立的方法对临床送检的19份猪样品(血清和组织)进行检测,与国标(GB/T 27517-2011)的HP-PRRSV和PRRSV双重RT-PCR检测方法进行对比,双重RT-PCR方法检测出6份阳性,RT-LAMP方法检测出8份阳性。本试验建立了检测PRRSV经典毒株和高致病毒株的RT-LAMP方法,为PRRSV的检测提供了可选择的方法。 展开更多
关键词 猪繁殖呼吸综合征病毒 逆转录环介导等温核酸扩增 病毒检测
猪繁殖与呼吸综合征病毒与非典型瘟病毒双重RT-PCR检测方法的建立与应用 预览
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作者 冯宇 杨晓宇 +3 位作者 赵军 李雨濛 徐志文 朱玲 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期156-160,共5页
为建立同时快速简便地检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)与非典型瘟病毒(APPV)两种病毒的方法,本研究根据GenBank中登录的PRRSV、APPV的基因序列,选取PRRSV的ORF2基因和APPV的NS2基因分别设计特异性引物,通过优化反应条件,建立了能够... 为建立同时快速简便地检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)与非典型瘟病毒(APPV)两种病毒的方法,本研究根据GenBank中登录的PRRSV、APPV的基因序列,选取PRRSV的ORF2基因和APPV的NS2基因分别设计特异性引物,通过优化反应条件,建立了能够同时检测PRRSV与APPV的双重RT-PCR方法。利用该方法对PRRSV、APPV重组质粒、猪瘟病毒、乙型脑炎病毒、猪流行性腹泻病毒的cDNA和阴性对照进行检测,结果显示除PRRSV和APPV重组质粒扩增结果为阳性外,其余均为阴性,表明其特异性良好;该方法对APPV和PRRSV质粒标准品的最低检出量分别为2.17×10~4拷贝/μL、3.13×10~3拷贝/μL,敏感性较高;同时批间和批内重复性试验表明该方法重复性好。利用该方法对四川地区临床73份疑似仔猪颤抖病与猪繁殖与呼吸综合征病的病料样品进行检测,结果与单一RT-PCR的检测符合率为100%。本研究建立的双重RT-PCR方法具有良好的实用性,可用于临床样品的检测,对临床早期诊断具有重要意义。 展开更多
关键词 猪繁殖呼吸综合征病毒 非典型瘟病毒 双重RT-PCR
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