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登革热疫苗研发的主要障碍
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作者 王伟善(综述) 申硕(审校) 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2019年第1期114-118,共5页
登革热(Dengue fever,DF)由登革病毒(Dengue virus,DENV)感染引起,主要经埃及伊蚊和白纹伊蚊传播,是目前世界流行最广且最严重的虫媒性疾病之一,主要流行于东南亚、西太平洋、中南美洲、加勒比海和非洲等地区。目前,全球约36亿人生活在D... 登革热(Dengue fever,DF)由登革病毒(Dengue virus,DENV)感染引起,主要经埃及伊蚊和白纹伊蚊传播,是目前世界流行最广且最严重的虫媒性疾病之一,主要流行于东南亚、西太平洋、中南美洲、加勒比海和非洲等地区。目前,全球约36亿人生活在DF流行区,每年造成约4亿人感染,1亿人出现临床症状,超过200万人发展为重症DF,2万多人死亡。接种疫苗是预防该疾病的有效措施,目前虽已有DF疫苗上市,但效果不够理想。本文对目前DF疫苗研发中的主要障碍作一综述。 展开更多
关键词 登革病毒 热疫苗
甲醇诱导条件对登革病毒四型联合重组包膜蛋白Ⅲ区表达的影响
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作者 席珏敏 陈俊英 +4 位作者 李多 邱丽娟 潘玥 王晓丹 孙强明 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2019年第2期144-146,151共4页
目的探讨甲醇诱导浓度和诱导时间对登革病毒(dengue virus,DENV)四型联合重组包膜蛋白Ⅲ区(envelope domainⅢ,EDⅢ)表达的影响,以期实现该蛋白在毕赤酵母中的高效表达。方法采用不同浓度甲醇(0. 05%、0. 1%、0. 25%、0. 5%、0. 75%、1%... 目的探讨甲醇诱导浓度和诱导时间对登革病毒(dengue virus,DENV)四型联合重组包膜蛋白Ⅲ区(envelope domainⅢ,EDⅢ)表达的影响,以期实现该蛋白在毕赤酵母中的高效表达。方法采用不同浓度甲醇(0. 05%、0. 1%、0. 25%、0. 5%、0. 75%、1%、1. 5%、2%、2. 5%、3%、5%、7. 5%)诱导表达带His标签的DENV四型联合重组EDⅢ蛋白,分别诱导18、24、30、48、72 h,样品经Western blot检测。最佳条件下诱导表达的蛋白液经Ni-Agarose His亲和层析纯化后,进行10%SDS-PAGE检测。结果最佳甲醇诱导浓度为2. 5%,最佳甲醇诱导时间为72 h。纯化产物经10%SDS-PAGE检测,于相对分子质量约41 000处可见单一目的蛋白条带,纯度为99%。结论当甲醇浓度为2. 5%,诱导时间为72 h时,可实现DENV四型联合重组EDⅢ蛋白在毕赤酵母中的高效表达。 展开更多
关键词 甲醇 登革病毒 包膜蛋白Ⅲ区 毕赤酵母
中山市2014-2016年6株Ⅱ型登革病毒E基因分子特征分析
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作者 谢颖 高赛珍 +3 位作者 陈子龙 王翠玲 吴衍恒 林金思 《实用预防医学》 CAS 2019年第3期367-370,共4页
目的分离鉴定中山市2014-2016年Ⅱ型登革病毒,从分子水平进行分析其地域来源和系统进化情况。方法选取中山市2014-2016年核酸阳性血清6份,用C6/36细胞培养分离登革病毒,RT-PCR扩增毒株E基因并进行序列测定,分析其与不同区域流行株和国... 目的分离鉴定中山市2014-2016年Ⅱ型登革病毒,从分子水平进行分析其地域来源和系统进化情况。方法选取中山市2014-2016年核酸阳性血清6份,用C6/36细胞培养分离登革病毒,RT-PCR扩增毒株E基因并进行序列测定,分析其与不同区域流行株和国际标准株的同源性和系统进化情况。结果成功分离培养出2株2014年登革Ⅱ病毒、2株2015年登革Ⅱ病毒、2株2016年登革Ⅱ病毒。ZS2014-02、ZS2014-03与2014年广州分离株D14115在进化关系上最近,2014年的3株病毒氨基酸和核苷酸同源性均达到91. 3%以上;2015年ZS2015-01与广州分离株D14115在进化关系上最近,2015年2株病毒氨基酸和核苷酸同源性分别为98. 8%和92. 8%;2016年ZS2016-01与2010年巴布新几内亚分离株JN568270. 1进化关系较近,2016年2株病毒氨基酸和核苷酸同源性分别为91. 4%和88. 8%。结论 6株毒株与国际标准株New Guinea C登革Ⅱ型比较均存在氨基酸位点的差异。2014年2株毒株为广州输入病例,2015年的2株毒株ZS2015-01为广州输入,ZS2015-02为中山市本地二代病例,2016年的ZS2016-01为巴布新几内亚输入,而ZS2016-02为菲律宾输入病例。 展开更多
关键词 登革病毒 E基因 序列同源性 系统进化
登革病毒E蛋白Ⅲ区:需要重新重视的结构域
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作者 郎欣月 陈佩 +2 位作者 戴程谷秋 谢茜 赵卫 《新发传染病电子杂志》 2018年第2期80-83,共4页
登革病毒(dengue virus,DENV)属于黄病毒科(flaviviridae)黄病毒属(flavivirus),有四种血清型(DENV1-4)。其导致的登革热是一种在热带及亚热带地区最常见的蚊媒传播疾病。临床表现从无症状感染到危及生命的重症登革热,主要特征为血管通... 登革病毒(dengue virus,DENV)属于黄病毒科(flaviviridae)黄病毒属(flavivirus),有四种血清型(DENV1-4)。其导致的登革热是一种在热带及亚热带地区最常见的蚊媒传播疾病。临床表现从无症状感染到危及生命的重症登革热,主要特征为血管通透性增加、血小板减少、出血性症状和休克^[1]。据估计,每年约有3.9亿DENV感染病例,其中9600万例有显著临床症状^[2]。 展开更多
关键词 登革病毒 结构域 E蛋白 亚热带地区 无症状感染 血管通透性 血小板减少 病毒
试用计算机软件预测 NS2B-NS3 蛋白酶 A125C 变体蛋白三维结构 预览
5
作者 黄更生 《信息周刊》 2018年第5期86-88,共3页
用软件对登革病毒 NS2B-NS3 蛋白酶 A125C 变体蛋白进行进行预测分析,获得基于 SWISS-MODEL 数据库的三级结构预测计算结果,并和X射线衍射分析所得三级结构进行比对分析,对建模质量进行评估,将获得的三级结构与 X 射线衍射分析法所... 用软件对登革病毒 NS2B-NS3 蛋白酶 A125C 变体蛋白进行进行预测分析,获得基于 SWISS-MODEL 数据库的三级结构预测计算结果,并和X射线衍射分析所得三级结构进行比对分析,对建模质量进行评估,将获得的三级结构与 X 射线衍射分析法所得三级结构对比,预测得的模 型 QMEAN4 得分达 0.92,模拟获得的预测结果比较可信,对该蛋白的研究工作有较好的指导作用。 展开更多
关键词 蛋白质 登革病毒 三级结构预测
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Ⅱ型登革病毒DNA疫苗在小鼠体内免疫保护作用与性别相关性的研究
6
作者 王然 高娜 安静 《新发传染病电子杂志》 2018年第2期98-101,共4页
目的探讨Ⅱ型登革病毒DNA疫苗pVAX1-D2ME对不同性别小鼠的免疫保护效果的差异。方法利用pVAX1-D2ME质粒分别免疫雄性和雌性小鼠,每次免疫前及末次免疫后取其血清,检测体液免疫应答的各项指标;并于末次免疫后两周攻毒,观察小鼠的生存率... 目的探讨Ⅱ型登革病毒DNA疫苗pVAX1-D2ME对不同性别小鼠的免疫保护效果的差异。方法利用pVAX1-D2ME质粒分别免疫雄性和雌性小鼠,每次免疫前及末次免疫后取其血清,检测体液免疫应答的各项指标;并于末次免疫后两周攻毒,观察小鼠的生存率。结果不同性别小鼠对该疫苗均产生良好的免疫应答,免疫应答具有Th1趋向性;且免疫后不同性别小鼠均可抵抗致死量病毒的攻击,生存率为100%。结论小鼠性别对免疫应答和免疫保护无明显影响,pVAX1-D2ME免疫小鼠能够诱导产生良好的免疫应答和免疫保护作用。 展开更多
关键词 登革病毒 DNA疫苗 性别 体液免疫反应 免疫保护
登革热流行趋势研究进展 被引量:1
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作者 张萌 何剑峰 《新发传染病电子杂志》 2018年第2期72-74,共3页
登革热(dengue fever,DF)是因感染登革病毒(dengue virus,DENV)引起的一种蚊媒传染病,主要传播媒介是白纹伊蚊和埃及伊蚊,人群普遍易感。DENV属RNA病毒,主要有四种血清型(DENV1-4),2007年在马来西亚有研究报道可能存在第五种^[1]。DF的... 登革热(dengue fever,DF)是因感染登革病毒(dengue virus,DENV)引起的一种蚊媒传染病,主要传播媒介是白纹伊蚊和埃及伊蚊,人群普遍易感。DENV属RNA病毒,主要有四种血清型(DENV1-4),2007年在马来西亚有研究报道可能存在第五种^[1]。DF的临床表现主要有发热、肌肉或关节疼痛、皮疹等,严重的可导致登革出血热、登革休克综合征等^[2,3]。影响DF流行的因素主要有温度、湿度、蚊媒控制措施的有效性以及人员的流动性等。 展开更多
关键词 流行趋势 休克综合征 蚊媒传染病 RNA病毒 出血热 登革病毒 埃及伊蚊
登革病毒病原学研究进展
8
作者 郎欣月 何晓恩 +4 位作者 刘旭玲 谢茜 陈佩 戴程谷秋 赵卫 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第11期1292-1295,1299共5页
登革热是引起全球广泛关注的重大公共卫生问题,研究登革病毒的病原学特征对登革热的预防控制至关重要。本文对登革病毒的起源、生物学特性、动物模型、致病机理、以及感染控制等方面的研究进展进行了综述,旨在为登革热防控提供参考。
关键词 登革病毒 病原学 综述
浙江东南沿海一起登革热暴发疫情调查处置效果分析 预览
9
作者 林春萍 孔超 +4 位作者 贺嫦悠 周静晓 林海江 沈伟伟 李江麟 《浙江医学》 CAS 2018年第9期993-995,1003共4页
目的 评价2016年黄岩区一起登革热暴发疫情调查处置效果,并分析流行病学特征及发生原因。方法 根据病例定义开展回顾性病例搜索,检测患者血清免疫球蛋白M(IgM)抗体、免疫球蛋白G(IgG)抗体、非结构蛋白的糖蛋白(NS1)抗原及登革病... 目的 评价2016年黄岩区一起登革热暴发疫情调查处置效果,并分析流行病学特征及发生原因。方法 根据病例定义开展回顾性病例搜索,检测患者血清免疫球蛋白M(IgM)抗体、免疫球蛋白G(IgG)抗体、非结构蛋白的糖蛋白(NS1)抗原及登革病毒核酸,应用布雷图指数(BI)法监测蚊媒幼虫密度。结果 自9月1日指示病例发病至11月11日末例病例发病,黄岩区累计发现登革热病例88例,无重症和死亡病例。临床表现以发热(93.18%)、乏力(60.23%)、皮疹(46.59%)、头痛(31.82%)、肌肉关节痛(31.82%)为主。本起登革热疫情有2个流行高峰期,即10月上旬和10月中下旬。病例分布于6个乡镇16个村居,其中男41例,女47例,男女比1:1.14;各年龄段均有发病,以30~〈70岁年龄组为主。呈家庭(单位)聚集性。11例病例登革病毒核酸阳性,基因分型为登革病毒1型。自发现疫情到结束应急响应,黄岩区各乡镇的村居环境均得到明显改善,重点街道的BI降至5以下。结论 这是一起输入性病例引起的本地暴发疫情,传染源是隐性感染者和轻型患者,防控重点是蚊媒孳生环境的清理和成蚊的快速杀灭。 展开更多
关键词 暴发 登革病毒 疫情处置
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白纹伊蚊DENV 2载量随饲养时长的变化趋势研究
10
作者 徐铁龙 庞兴亚 +2 位作者 郑彬 张仪 周晓农 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第6期605-608,共4页
目的探讨白纹伊蚊感染DENV 2后,体内病毒载量随饲养时长变化趋势,为相关研究提供参考依据。方法305只白纹伊蚊100%人工感染后,分别于第2、4、6、8、10d随机取蚊,共3个重复,每个重复至少20只蚊虫,应用实时荧光定量PCR检测蚊体内DENV 2载... 目的探讨白纹伊蚊感染DENV 2后,体内病毒载量随饲养时长变化趋势,为相关研究提供参考依据。方法305只白纹伊蚊100%人工感染后,分别于第2、4、6、8、10d随机取蚊,共3个重复,每个重复至少20只蚊虫,应用实时荧光定量PCR检测蚊体内DENV 2载量,记录CT值。计算并比较各组蚊虫病毒载量、阳性率等。结果白纹伊蚊感染DENV 2后第2、4、6、8、10d病毒载量中位数为2.24×10^3-1.99×10^6 copies/ml,差异具有统计学意义(χ^2=51.08,P〈0.01);阳性率为81.67%-100%,差异具有统计学意义(Fisher确切概率P〈0.01)。其中,白纹伊蚊体内病毒载量变化特点为:以第2d时病毒载量为基线值,第4d显著降低,第6d回升至第2d水平,第8、10d逐步升高;白纹伊蚊DENV 2阳性率变化特点:感染后第2d阳性率100%,第4d时降至81.67%,且随后保持稳定。结论白纹伊蚊感染DENV 2载量随饲养时长变化先降低后升高,阳性率先升高后降低,因此中应根据A科研需要合理选择饲养时长。 展开更多
关键词 白纹伊蚊 登革病毒 病毒载量 变化趋势
IL-17与登革病毒感染致病关系的研究进展 预览
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作者 郑媛菲 刘凤辉 +4 位作者 陈伟峰 巫慧文 张韵秦 周冰璇 郑碧英 《中国医药导报》 CAS 2018年第21期31-34,共4页
登革病毒由伊蚊传播,引起登革热、登革出血热和登革休克综合征,其致病机制尚未明了。早期研究发现登革病毒感染引起细胞因子过度分泌,从而形成细胞因子风暴。不同的细胞因子在登革病毒感染中作用不同,加剧或抑制病变的进展,影响疾病的... 登革病毒由伊蚊传播,引起登革热、登革出血热和登革休克综合征,其致病机制尚未明了。早期研究发现登革病毒感染引起细胞因子过度分泌,从而形成细胞因子风暴。不同的细胞因子在登革病毒感染中作用不同,加剧或抑制病变的进展,影响疾病的转归。白细胞介素-17(IL-17)作为一种重要的促炎细胞因子,由Th17细胞分泌,能诱导中性粒细胞的聚集和增殖,从而有效地介导了组织的炎性反应,与多种病毒感染致病有关。本文综述了登革病毒感染与细胞因子风暴,IL-17的免疫机制,以及IL-17与登革病毒感染之间的关系。 展开更多
关键词 登革病毒 细胞因子 白细胞介素-17
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阿兹夫定体外抗登革病毒活性研究
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作者 张春涛 罗荣华 +4 位作者 陈欢 刘光明 常俊标 杨柳萌 郑永唐 《药学学报》 CSCD 北大核心 2018年第6期944-949,共6页
本文通过检测化合物对登革Ⅱ型重组病毒(DENV-ⅡLuc+)表达海肾荧光素酶活性的影响,进行化合物筛选,发现阿兹夫定(azvudine,FNC)、盐酸阿兹夫定(hydrochloride salt of azvudine,FNC-HCl)和三磷酸酯阿兹夫定(triphosphate azvudi... 本文通过检测化合物对登革Ⅱ型重组病毒(DENV-ⅡLuc+)表达海肾荧光素酶活性的影响,进行化合物筛选,发现阿兹夫定(azvudine,FNC)、盐酸阿兹夫定(hydrochloride salt of azvudine,FNC-HCl)和三磷酸酯阿兹夫定(triphosphate azvudine,FNC-TP)能够抑制DENV-ⅡLuc+的复制,并研究其体外抗登革病毒(dengue virus,DENV)活性。首先通过噬斑法检测FNC、FNC-HCl和FNC-TP对DENV的抑制活性;并通过蛋白印迹实验检测3种化合物对DENV-Ⅱ囊膜蛋白E(envelope protein E)表达的影响,最后通过实时定量PCR检测化合物对DENV-Ⅱ病毒RNA的抑制作用。结果显示,FNC、FNC-HCl和FNC-TP抑制DENV复制的半数有效浓度(EC50)在0.54~25.42μmol·L~(-1)之间,阳性药物利巴韦林抑制DENV-Ⅱ的EC50为40.78±1.02μmol·L~(-1)。蛋白印迹实验及定量结果显示,3种化合物均能抑制DENV-Ⅱ囊膜蛋白E的表达,并且显著地抑制DENV-Ⅱ病毒RNA的复制。通过MTT法检测发现FNC、FNC-HCl和FNC-TP的细胞毒性很小,半数细胞毒性浓度(CC50)均大于3 000.00μmol·L~(-1)。本研究表明FNC、FNC-HCl和FNC-TP在细胞水平、蛋白水平及RNA水平均能抑制DENV的复制,且抑制作用优于利巴韦林,有望成为抗登革病毒的候选药物。 展开更多
关键词 阿兹夫定 登革病毒 病毒活性 体外
DENV-2诱导HUVECs自噬和影响细胞活力的研究 预览
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作者 毛佳璇 左丽 +6 位作者 孔维莹 张妮 王克 袁静 陈俊豪 来涛 罗玉 《中国免疫学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第8期1131-1136,共6页
目的:通过利用登革Ⅱ型病毒(DENV-2)感染原代人脐静脉内皮细胞(HUVECs)后,研究病毒诱导HUVECs产生自噬和对细胞活力的影响。方法:利用DENV-2 NGC株感染HUVECs,Real-time PCR检测HUVECs中DENV-2 NS1基因部分系列的表达,给予自噬诱... 目的:通过利用登革Ⅱ型病毒(DENV-2)感染原代人脐静脉内皮细胞(HUVECs)后,研究病毒诱导HUVECs产生自噬和对细胞活力的影响。方法:利用DENV-2 NGC株感染HUVECs,Real-time PCR检测HUVECs中DENV-2 NS1基因部分系列的表达,给予自噬诱导剂雷帕霉素(RAPA)和自噬抑制剂氯喹(CQ)预处理观察细胞自噬通量变化,激光共聚焦显微镜观察自噬体形成;CCK-8检测细胞活力;Western blot检测自噬通量标志性蛋白LC3、P62的蛋白表达量。结果:DENV-2感染HUVECs组病毒NS1基因在各时间点均有表达;被感染的HUVECs在24 h时细胞活力下降不明显,36、48 h细胞活力分别下降至未处理组82.46%和78.47%,差异具有显著统计学意义(P〈0.05);HUVECs被DENV-2感染后,LC3-Ⅱ蛋白量表达明显增高,自噬底物P62表达明显降低,36、48 h时间点相较未处理组具有统计学意义(P〈0.05),与RAPA处理组结果相似(P〉0.05)。CQ处理组LC3-Ⅱ及P62蛋白量表达均明显升高,36、48 h时间点相较未处理组具有显著性差异(P〈0.05)。HUVECs被DENV-2感染36 h,激光共聚焦显微镜观察到LC3-Ⅱ表达明显高于未处理组,自噬诱导剂RAPA处理HUVECs后,LC3-Ⅱ表达明显增加,自噬强度更加明显。DENV-2与CQ联合处理组相较DENV单独处理组,36 h细胞活力下降了13.61%,差异具有显著统计学意义(P〈0.05)。结论:DENV-2感染可抑制HUVECs的生长;而DENV-2诱导HUVECs产生的自噬却有利于HUVECs的存活。 展开更多
关键词 登革病毒 人脐静脉内皮细胞 自噬 细胞活力
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广州市2014-2017年登革病毒Ⅰ型流行株E基因演化研究
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作者 苏文哲 陈宗遒 +5 位作者 蒋力云 李意兰 曹毅敏 刘文辉 胡玉山 杨智聪 《热带医学杂志》 CAS 2018年第9期1218-1222,共5页
目的 对2014-2017年广州市登革热流行数据和登革病毒分离株E基因进行分析,寻找广州市登革热的流行规律并进行生物学溯源。方法 通过传染病监测网络收集广州市登革热流行数据,对急性期登革热患者血清进行病毒分离培养并对分离到的DENV-... 目的 对2014-2017年广州市登革热流行数据和登革病毒分离株E基因进行分析,寻找广州市登革热的流行规律并进行生物学溯源。方法 通过传染病监测网络收集广州市登革热流行数据,对急性期登革热患者血清进行病毒分离培养并对分离到的DENV-Ⅰ型毒株进行E基因测序和系统发生树构建。结果 2014-2017年间,广州市登革热的流行季节均始于5-6月,并在9-10月达到流行的最高峰,从11月开始发病数开始出现断崖式下降,于12月终止;2014年的疫情规模最大,全年总计病例数达到37 340例;广州市登革病毒在演化上有2个主要的来源,分别属于Ⅰ型登革病毒的基因Ⅰ型和基因Ⅴ型。结论 2014-2017年广州市流行的登革病毒Ⅰ型存在2个不同分支,其中南亚来源的基因Ⅴ型分支是2014年大暴发的源头;而东南亚来源的基因Ⅰ型分支一直在本地循环流行,是历年散发流行的主要来源。 展开更多
关键词 登革病毒 E基因
2017年河南省登革热疑似病例的实验室诊断与分子溯源
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作者 杜燕华 李懿 +4 位作者 王若琳 王海峰 苏佳 许汴利 黄学勇 《中华预防医学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第11期1164-1167,共4页
目的对2017年河南省报告的登革热疑似病例进行实验室确诊,从分子水平追踪其来源。方法血液标本(3-5m1)来源于2017年河南省传染病监测网络直报系统中上报的8例登革热疑似病例,按照《全国登革热监测方案》对病例进行个案调查。血液样... 目的对2017年河南省报告的登革热疑似病例进行实验室确诊,从分子水平追踪其来源。方法血液标本(3-5m1)来源于2017年河南省传染病监测网络直报系统中上报的8例登革热疑似病例,按照《全国登革热监测方案》对病例进行个案调查。血液样本分离血清后,通过检测血清中登革病毒非结构蛋白1抗原(NSl)、IgM和IgG抗体以及病毒RNA进行实验室确诊;对于登革病毒RNA检测阳性的样本进行荧光PCR分型诊断和E基因序列扩增,阳性扩增产物测序后进行同源性比对。结果8个登革热疑似病例中6例确诊为登革热实验室诊断病例,均为境外输入;其中5例病例登革病毒RNA检测阳性,经分型检测发现,登革病毒1型为1例,2型和3型各2例;对1例登革病毒2型和1例3型病例成功进行了分子溯源,其中由巴基斯坦输入的登革病毒2型病例核酸序列属于cosmopolitan基因型,与巴基斯坦2013年登革病毒2型KJ010186一致性最高,为99.0%;由马来西亚输入的登革病毒3型病例核酸序列属于I型基因型,与2014年新加坡登革病毒3型KX224276一致性最高,为99.0%。结论2017年河南省登革热病例经实验室诊断和分子溯源证实均为输入性病例,未引起本地流行。 展开更多
关键词 登革病毒 基因型 诊断 分子溯源 系统进化分析
登革病毒诱导人单核细胞miR-146a表达的机制研究
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作者 吴思宇 梁湘辉 《实用预防医学》 CAS 2018年第7期788-791,共4页
目的 探究登革病毒感染引起miR-146a高表达所依赖的天然免疫信号通路。方法 通过RNAi技术沉默登革病毒感染后激活的信号通路的上游蛋白,或采用信号分子抑制剂阻断登革病毒感染后激活的信号通路的下游因子,然后通过real-time PCR检测miR-... 目的 探究登革病毒感染引起miR-146a高表达所依赖的天然免疫信号通路。方法 通过RNAi技术沉默登革病毒感染后激活的信号通路的上游蛋白,或采用信号分子抑制剂阻断登革病毒感染后激活的信号通路的下游因子,然后通过real-time PCR检测miR-146a的表达变化。结果 DENV2感染引起的miR-146a的表达沉默IPS-1后减少了60%,而TLR3的沉默对miR-146a的表达无影响;采用特异性的抑制剂抑制NF-κB、IKK、p38和JNK后均可下调miR-146a的表达,而ERK的抑制对miR-146a的表达无明显影响。结论 登革病毒感染诱导miR-146a的表达依赖于上游RIG-I/MDA5-IPS-1以及下游的p38、IKK/JNK和NF-κB,而不依赖于上游的TLR3和下游的ERK。miR-146a可能成为预防和治疗登革病毒感染的一个新靶标,最终为临床治疗和预防登革出血热提供一个新的视野。 展开更多
关键词 登革病毒 MIR-146A 单核细胞 天然免疫
台州市本地感染登革病毒分子分型及溯源分析
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作者 王东红 裘丹红 +6 位作者 翁坚 盛莹 林海江 林春萍 孔超 周静晓 沈伟伟 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 2018年第2期169-172,共4页
目的对2016年台州市本地暴发的登革热病例进行实验室检测与溯源分析。方法采集3例患者急性期血清进行抗原、抗体和核酸检测,并用C6/36细胞分离培养登革病毒。用RT-PCR方法扩增全长E基因,测定序列并绘制系统进化树。结果从患者血清中... 目的对2016年台州市本地暴发的登革热病例进行实验室检测与溯源分析。方法采集3例患者急性期血清进行抗原、抗体和核酸检测,并用C6/36细胞分离培养登革病毒。用RT-PCR方法扩增全长E基因,测定序列并绘制系统进化树。结果从患者血清中检测到登革I型病毒核酸、IgM抗体和NS1抗原。成功分离到3株I型登革病毒株,这3株病毒在同一进化分支上,属于I型登革病毒中的Genotype I亚型,核苷酸同源性均为99.87%,氨基酸同源性为99.6%~99.8%。结论浙江省台州市本次登革热本地暴发病例可能由广东或东南亚输入而来。 展开更多
关键词 登革病毒 E基因 序列分析
乙脑/登革2型嵌合病毒的构建及其作为疫苗候选株的初步检定
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作者 牟建超 范凤鸣 +6 位作者 陈智 冯劲松 何婷 杨欢 杨会强 曾献武 刘杰 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2018年第12期1300-1304,共5页
目的构建以乙脑疫苗株SA14-14-2为基因骨架的乙脑/登革2型嵌合病毒,并进行初步检定,分析其作为疫苗候选株的可行性。方法用登革病毒(dengue virus,DENV)减毒株PDK53 prME基因替换乙脑病毒疫苗株SA14-14-2的相应区域,构建乙脑/登革2型嵌... 目的构建以乙脑疫苗株SA14-14-2为基因骨架的乙脑/登革2型嵌合病毒,并进行初步检定,分析其作为疫苗候选株的可行性。方法用登革病毒(dengue virus,DENV)减毒株PDK53 prME基因替换乙脑病毒疫苗株SA14-14-2的相应区域,构建乙脑/登革2型嵌合病毒全长克隆质粒,通过体外转录、转染原代地鼠肾(PHK)细胞,拯救出乙脑/登革2型嵌合病毒,并分析该嵌合病毒的蚀斑特征、增殖特征、神经毒力和神经侵袭力、免疫原性及免疫攻击保护作用。结果构建的嵌合病毒比乙脑疫苗株SA14-14-2具有更小的蚀斑,在PHK细胞上具有更低的增殖能力;对成鼠无神经毒力和神经侵袭力;可诱导小鼠产生较高的中和抗体效价,且免疫8周后,中和抗体滴度无明显下降(P> 0. 05);能保护小鼠免受致死剂量DENV的脑内攻击。结论本实验制备的嵌合病毒具有良好的安全性、免疫原性及免疫保护作用,有望作为登革疫苗候选株。 展开更多
关键词 乙型脑炎病毒 登革病毒 嵌合疫苗 神经毒力 免疫原性 免疫保护
2017年Ⅱ型登革病毒汕头流行株的E基因序列分析
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作者 郭川 钟秀珠 +3 位作者 林洁敏 陈婉 张旭彬 张志华 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第6期629-632,636共5页
目的阐明2017年汕头市2型登革流行株的基因型别,为其传播途径的分子流行病学研究提供依据。方法采集2017年汕头市疑似登革热患者血清标本,进行登革热病毒检测,阳性者进行全长E基因PCR扩增,对扩增产物进行序列测定,采用生物信息学软件Seq... 目的阐明2017年汕头市2型登革流行株的基因型别,为其传播途径的分子流行病学研究提供依据。方法采集2017年汕头市疑似登革热患者血清标本,进行登革热病毒检测,阳性者进行全长E基因PCR扩增,对扩增产物进行序列测定,采用生物信息学软件Sequencher5.1、BioEdit和Mega6.0进行序列的比对分析并构建系统进化树。结果有4例血清标本检出登革热病毒2型核酸,其中2例的标本扩增出E基因全长序列(1 485bp),两者序列相似度100%,判定是由同一株病毒引起的感染。该流行株属于Cosmopolitan基因亚型,与东南亚毒株具有较高相关性。氨基酸序列分析显示该毒株E蛋白毒力位点的氨基酸为E126-E、E383-385-E-P-G、E71-A和E390-S。结论汕头市2017年登革病毒流行株可能为东南亚毒株并发生一定变异,其E蛋白毒力位点的氨基酸为E126-E、E383-385-E-P-G、E71-A和E390-S,属于弱毒株。 展开更多
关键词 汕头市 登革病毒 E基因 序列分析
白纹伊蚊抗溴氰菊酯品系的筛选及其对登革病毒的易感性 预览 被引量:1
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作者 贾志荣 刘转转 +5 位作者 王晓明 Tricia WILLIAMS 刘培文 李小聪 闫桂云 陈晓光 《昆虫学报》 CSCD 北大核心 2018年第1期11-17,共7页
【目的】建立白纹伊蚊Aedes albopictus抗溴氰菊酯的蚊虫品系,对比白纹伊蚊敏感株和抗性株对登革病毒的易感性差异。【方法】采用浸渍法测定溴氰菊酯对白纹伊蚊幼虫的半数致死浓度(LC50);再以LC50水平的溴氰菊酯对白纹伊蚊幼虫进行群... 【目的】建立白纹伊蚊Aedes albopictus抗溴氰菊酯的蚊虫品系,对比白纹伊蚊敏感株和抗性株对登革病毒的易感性差异。【方法】采用浸渍法测定溴氰菊酯对白纹伊蚊幼虫的半数致死浓度(LC50);再以LC50水平的溴氰菊酯对白纹伊蚊幼虫进行群体筛选至第11代,并通过接触筒法检测各代成蚊抗性。以白纹伊蚊敏感株和获得的抗性株(第9代)雌蚊吸食含2型登革病毒(DENV-2)的血餐,于感染后0,4,7和10 d解剖蚊虫,收集中肠、卵巢和唾液腺,通过RT-PCR和实时荧光定量PCR分别检测各组织的DENV-2病毒感染率和感染量。【结果】白纹伊蚊经溴氰菊酯筛选至第9代后抗性趋于稳定。第9代抗性株幼虫的LC50为0.053 mg/L,抗性倍数为10.58,成蚊生测的蚊虫死亡率为80%,已达到中度抗性。感染后0 d,所有蚊虫的中肠均可测得DENV-2,而且抗性株的平均病毒感染量高于敏感株;后续时间点敏感株与抗性株蚊虫中肠均保持92.75%~97.18%的病毒感染率,且二株之间无显著性差异(P〉0.05)。感染后4 d,两株蚊虫的卵巢中均可检测到DENV-2,感染后7 d和10 d的卵巢病毒感染率均显著高于4 d时(P〈0.05),但在7 d和10 d两个时间点,敏感株和抗性株之间均无统计学差异(P〉0.05),然而抗性株平均病毒感染量在每一个时间点都显著高于敏感株(P〈0.05)。蚊虫唾液腺于感染后7 d检测到DENV-2,10 d时唾液腺的病毒感染率无明显升高且两株蚊虫之间病毒感染率和感染量均无统计学差异(P〉0.05)。【结论】经溴氰菊酯的筛选使白纹伊蚊幼虫及成蚊抗性水平逐渐升高,建立了白纹伊蚊抗溴氰菊酯的实验室品系。DENV-2对白纹伊蚊抗性株和敏感株各个组织的感染率相近,但感染量有所不同,说明对溴氰菊酯有中度抗性的白蚊伊蚊对登革病毒的易感性在一定程度上发生了改变。 展开更多
关键词 白纹伊蚊 抗药性 溴氰菊酯 登革病毒 易感性
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