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一株大麻脱胶菌株的分离鉴定及其产果胶酶发酵培养基的优化 预览
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作者 徐鹏 王大红 +4 位作者 陈亚欣 王泽轩 王子旭 魏来红 刘高 《中国麻业科学》 2019年第3期122-129,共8页
为了分离和鉴定对大麻有脱胶效果的碱性果胶酶生产菌株,优化其产果胶酶培养基组成,试验选用果胶作为唯一碳源进行菌株筛选,并采用单因素和正交试验筛选果胶酶发酵培养基组成。结果表明:从沤麻水体中分离到14株具有脱胶能力的细菌,其中X-... 为了分离和鉴定对大麻有脱胶效果的碱性果胶酶生产菌株,优化其产果胶酶培养基组成,试验选用果胶作为唯一碳源进行菌株筛选,并采用单因素和正交试验筛选果胶酶发酵培养基组成。结果表明:从沤麻水体中分离到14株具有脱胶能力的细菌,其中X-6菌果胶酶产量最高,该菌革兰氏阴性,大小为0.6~0.8μm×2~3μm,据其生理生化特征和16SrDNA鉴定,该菌株鉴定并被命名为产碱假单胞菌X-6(Pseudomonas alcaligenes X-6),该菌的最佳产果胶酶培养基组成为葡萄糖5g/L,马铃薯淀粉4g/L,酵母粉4g/L,玉米浆4g/L,氯化钙1.5g/L,氯化钠0.5g/L,经验证在该条件下果胶酶活力达到586U/mL,采用发酵后的粗酶液对大麻进行脱胶试验,残胶率由38.9%降低至17.2%,脱胶效果较好。试验分离和鉴定出一株对大麻脱胶效果较好的菌株,并获得其产果胶酶发酵培养基。 展开更多
关键词 大麻 脱胶 碱性果胶酶 分离 鉴定 优化
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组合策略促进碱性果胶酶在毕赤酵母中高效表达 预览
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作者 陈双全 刘松 +1 位作者 堵国成 陈坚 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期35-43,共9页
本研究组合了基因密码子优化及分子伴侣共表达策略提高碱性果胶酶(PGL)在毕赤酵母中的胞外产量。基于Pichia pastoris密码子偏好性,优化了来源于Bacillus sp.WSHB04-02 PGL高热稳定性突变体K314M基因,并克隆至pPIC9K的Eco R I-Not I得到... 本研究组合了基因密码子优化及分子伴侣共表达策略提高碱性果胶酶(PGL)在毕赤酵母中的胞外产量。基于Pichia pastoris密码子偏好性,优化了来源于Bacillus sp.WSHB04-02 PGL高热稳定性突变体K314M基因,并克隆至pPIC9K的Eco R I-Not I得到PGL表达载体p PIC9K-PGL。p PIC9K-PGL转化Pichia pastoris GS115(his-)得到重组菌GS115/PGL 14#,胞外PGL酶活达到301.32 U/mL,较优化前提高25.1%。在此基础上,分别及同时共表达分子伴侣内质网蛋白折叠氧化还原辅助因子(ERO1)和泛素共轭酶(UBC1)。结果显示,同时表达ERO1和UBC1(GS115/PGLl-ERO1-UBC1 2#)使重组菌胞外PGL较共表达前提高49.3%,达到450.12 U/mL。应用指数流加策略对重组菌株GS115/PGLl-ERO1-UBC1 2#进行3 L罐发酵,诱导发酵96h胞外PGL可达1 362.31 U/mL。研究结果对促进PGL产量的提升及其应用具有重要现实意义。 展开更多
关键词 碱性果胶酶 毕赤酵母 密码子优化 分子伴侣 指数流加
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产碱性果胶酶菌株的筛选和鉴定及其酶学性质
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作者 于平 王欣馨 +2 位作者 任倩 黄星星 易明花 《中国食品学报》 CSCD 北大核心 2018年第9期288-296,共9页
目的:从土壤样品中筛选能够产碱性果胶酶的菌株,并对菌株进行鉴定和果胶酶的酶学性质测定。方法:土壤样品经处理后,涂布于含果胶的平板上,37℃培养48 h后滴加CTAB溶液,挑取产生较大透明圈的菌株,结合菌株的形态特征、生理生化特征和16... 目的:从土壤样品中筛选能够产碱性果胶酶的菌株,并对菌株进行鉴定和果胶酶的酶学性质测定。方法:土壤样品经处理后,涂布于含果胶的平板上,37℃培养48 h后滴加CTAB溶液,挑取产生较大透明圈的菌株,结合菌株的形态特征、生理生化特征和16S r DNA分析鉴定该菌株,并对该菌株所产果胶酶的酶学性质进行研究。结果:筛选到104株产碱性果胶酶的菌株,其中ZGL14酶活力最高,该菌株被鉴定为枯草芽孢杆菌。ZGL14所产果胶酶的最适反应温度为50℃,最适反应p H 8.6,在40℃、p H 8~9的条件下保温100 min,仍有80%以上的酶活力,具有较好的耐热性和耐碱性。1 mmol/L Mg2+对该酶的活性有明显的促进作用,Cu2+、Mn2+、Co2+对该酶的活性有较强的抑制作用。结论:筛选到一株具有较好耐碱性和耐热性的产碱性果胶酶的菌株——枯草芽孢杆菌ZGL14。 展开更多
关键词 碱性果胶酶 筛选 鉴定 学性质
N-糖基化改造碱性果胶酶的热稳定性 预览
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作者 昂安娜 堵国成 +5 位作者 葛飞 朱龙宝 江志超 马琪森 朱龙龙 陶玉贵 《食品与发酵工业》 CSCD 北大核心 2018年第5期22-28,共7页
在软件模拟分析的基础上,运用半理性设计转换传统去除N-糖基化的方式,同时在反向转角区引入具有增强芳香族序列(enhanced aromatic sequence,EAS)特征的新N-糖基化,提高了碱性果胶酶(alkaline polygalacturonate lyase,PGL)的热稳定... 在软件模拟分析的基础上,运用半理性设计转换传统去除N-糖基化的方式,同时在反向转角区引入具有增强芳香族序列(enhanced aromatic sequence,EAS)特征的新N-糖基化,提高了碱性果胶酶(alkaline polygalacturonate lyase,PGL)的热稳定性,获得了高品质的PGL工程菌。将355位点的苏氨酸突变成突变能低的色氨酸来去除353位点的N-糖基化,酶的半衰期提高了176%,但与目标值仍相距甚远;再将127和137位点同时引入新N-糖基化,使酶的半衰期达到1.35 h,与目标值接近。在酶的反向转角区引入具有EAS特征的新N-糖基化,对提高酶的热稳定性具有显著促进作用。 展开更多
关键词 碱性果胶酶 N-糖基化 热稳定性 增强芳香族序列(enhanced AROMATIC sequence EAS)
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自组装双亲短肽氨基酸组成及连接肽对其融合酶表达量的影响 预览 被引量:1
5
作者 赵伟欣 刘松 +2 位作者 刘立明 陈坚 堵国成 《食品与发酵工业》 CSCD 北大核心 2017年第12期1-6,共6页
自组装双亲短肽(self-assembling amphipathic peptides,SAPs)是一类亲疏水氨基酸按一定规律分布,具有自聚合效应的氨基酸短肽,融合在酶蛋白N端时,具有促进表达和稳定化的功能。以自组装双亲短肽S1(AEAEAKAKAEAEAKAK)为出发序列,与... 自组装双亲短肽(self-assembling amphipathic peptides,SAPs)是一类亲疏水氨基酸按一定规律分布,具有自聚合效应的氨基酸短肽,融合在酶蛋白N端时,具有促进表达和稳定化的功能。以自组装双亲短肽S1(AEAEAKAKAEAEAKAK)为出发序列,与来源于Bacillus sp.WSHB04-02的碱性果胶酶(alkaline polygalacturonate lyase,PGL)组成的融合酶为模式蛋白,考察SAPs的氨基酸组成及SAPs融合蛋白内部连接肽(linker peptide)对PGL-SAP融合酶的表达量的影响。结果显示,含有较弱疏水性的甘氨酸和丙氨酸残基的PGL-S1突变体可使融合酶正常表达,其中,含有组氨酸的PGL-S1v1具有相对最高的胞外酶活,较野生型提高了9倍,较PGL-S1提高了1.5倍。连接肽方面,与刚性连接肽相比,含有柔性连接肽的融合酶具有更高的胞外酶活,含有(GGGGS)3的PGL-F-S1融合酶胞外酶活是野生型的14倍。上述结果表明,SAPs的氨基酸组成及融合蛋白之间的连接肽对PGL融合酶的表达具有重要影响。 展开更多
关键词 自组装双亲短肽 融合蛋白 连接肽 氨基酸极性 表达量 碱性果胶酶
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碱性果胶酶高产菌株的构建和高密度发酵 被引量:1
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作者 望潇文 向腊 +2 位作者 徐婷 卢争辉 张桂敏 《生物工程学报》 CSCD 北大核心 2017年第12期2017-2027,共11页
碱性果胶酶可用于苎麻脱胶和棉织物前处理的精练工艺,与传统的高温碱煮相比,具有保护纤维、降低能耗和化学污染的优势,因此获得高表达的碱性果胶酶基因工程菌,低成本生产碱性果胶酶对于纺织工业节能减排具有重要的意义。前期研究工作已... 碱性果胶酶可用于苎麻脱胶和棉织物前处理的精练工艺,与传统的高温碱煮相比,具有保护纤维、降低能耗和化学污染的优势,因此获得高表达的碱性果胶酶基因工程菌,低成本生产碱性果胶酶对于纺织工业节能减排具有重要的意义。前期研究工作已经将来源于枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis 168的碱性果胶酶基因pel经过密码子优化后在毕赤酵母Pichia pastoris GS115中成功表达。本研究为了提高其表达量,首先利用启动子和信号肽都优化的载体pHBM905BDM进行表达,摇瓶酶活从68 U/mL增加到100 U/mL,qPCR检测转录水平提高了27%。再利用果胶底物平板筛选水解圈大的转化子进行摇瓶发酵获得菌株GS115-pHBM905BDM-pels4,摇瓶酶活为536 U/mL。随后构建重组质粒pPIC9K-pels,电转化菌株GS115-pHBM905BDM-pels4,利用抗生素G418平板进行筛选,在含4 mg/mL的G418抗性平板上得到菌株GS115-pHBM905BDM-pPIC9K-pels1,摇瓶酶活为770 U/mL,qPCR测定含7个拷贝目的基因。最后将该菌株在5 L的发酵罐中进行高密度发酵,果胶酶酶活提高至2 271 U/mL。该碱性果胶酶酶活已达到目前酵母表达的最高水平,说明其具有很好的应用于纺织工业的潜力。 展开更多
关键词 碱性果胶酶 毕赤酵母 G418抗性标记 组氨醇脱氢基因(HIS4)选择标记 高密度发酵
融合短肽促进碱性果胶酶的高效表达 预览 被引量:2
7
作者 汪明星 刘松 +2 位作者 刘龙 堵国成 陈坚 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期504-509,共6页
碱性果胶酶(PGL)是一种重要的工业酶,广泛应用于食品、纺织和造纸等行业。作者将6种双亲短肽(SAP)融合至PGL N端,以期提高PGL在大肠杆菌中的分泌表达效率。得到一株高产菌株PGL-S1,胞外酶活由129.65 U/m L提高到535.47 U/m L,其他5... 碱性果胶酶(PGL)是一种重要的工业酶,广泛应用于食品、纺织和造纸等行业。作者将6种双亲短肽(SAP)融合至PGL N端,以期提高PGL在大肠杆菌中的分泌表达效率。得到一株高产菌株PGL-S1,胞外酶活由129.65 U/m L提高到535.47 U/m L,其他5种短肽则酶活降低。通过SDS-PAGE检测发现,PGL-S1的表达量并没有多大变化,推测可能是催化效率提高引起酶活提高。分析双亲短肽的疏水性指数发现,SAP1的疏水性不同于其他短肽,疏水性是蛋白质发生聚集的主要作用力,能够固定N、C末端,加强与底物的相互作用。推测PGL-S1融合蛋白的表面疏水性提高,促进了对底物的催化效率,具有巨大的工业应用潜力。 展开更多
关键词 碱性果胶酶 双亲短肽 高效表达 疏水性指数 催化效率
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高温耐碱性果胶酶菌株的筛选及其产酶的分离纯化研究 预览
8
作者 谭秀华 《生物学杂志》 CAS CSCD 2016年第4期25-28,共4页
从环境土壤中筛选到一株酶活较高、高温耐碱性的果胶酶菌株AP-1并对其产酶性质和分离纯化做了初步研究。酶活性质研究结果表明:该酶最适温度为70℃,最适p H 7.5。稳定性实验表明:该酶具有较好的耐碱性,同等条件下Mg(2+)对该酶具有... 从环境土壤中筛选到一株酶活较高、高温耐碱性的果胶酶菌株AP-1并对其产酶性质和分离纯化做了初步研究。酶活性质研究结果表明:该酶最适温度为70℃,最适p H 7.5。稳定性实验表明:该酶具有较好的耐碱性,同等条件下Mg(2+)对该酶具有显著的激活作用。分离纯化实验表明:硫酸铵盐析法中80%饱和度的硫酸铵溶液的纯化倍数最高达到了2.20倍;有机溶剂沉淀法中乙醇(2∶1)的纯化效果最好达到了5.20倍。 展开更多
关键词 碱性果胶酶 学性质 分离纯化
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超声波辅助碱性果胶酶提取条斑紫菜多糖的工艺研究 预览 被引量:2
9
作者 马波 蒋红菊 +1 位作者 宋加妹 孙丽丽 《佛山科学技术学院学报:自然科学版》 CAS 2016年第3期47-50,共4页
通过单因素试验和正交试验对超声波辅助碱性果胶酶提取条斑紫菜中多糖的工艺进行了优化,确定了最佳工艺条件为:酶的最适温度45℃、酶加量0.4%、p H为10.0、酶解时间为80 min;对多糖酶解液超声处理,优化条件为料液比1:10,超声温度70℃... 通过单因素试验和正交试验对超声波辅助碱性果胶酶提取条斑紫菜中多糖的工艺进行了优化,确定了最佳工艺条件为:酶的最适温度45℃、酶加量0.4%、p H为10.0、酶解时间为80 min;对多糖酶解液超声处理,优化条件为料液比1:10,超声温度70℃,超声时间80 min,功率800 W。在此条件下,多糖的得率为13.8%。 展开更多
关键词 条斑紫菜 多糖 碱性果胶酶 超声
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酸性与碱性果胶酶固态亚麻纤维脱胶比较研究 被引量:2
10
作者 田英华 刘晓兰 +2 位作者 郑喜群 王路 秦松颖 《上海纺织科技》 北大核心 2015年第12期42-43,89共3页
以亚麻纤维残胶率和Fried评分为指标,比较研究了酸性与碱性果胶酶的固态亚麻脱胶效果,及添加EDTA对脱胶的影响。结果表明,在酶活力相同的条件下,碱性果胶酶能够在较短的脱胶时间内使亚麻纤维达到良好的分散程度,纤维残胶率较酸性果胶酶... 以亚麻纤维残胶率和Fried评分为指标,比较研究了酸性与碱性果胶酶的固态亚麻脱胶效果,及添加EDTA对脱胶的影响。结果表明,在酶活力相同的条件下,碱性果胶酶能够在较短的脱胶时间内使亚麻纤维达到良好的分散程度,纤维残胶率较酸性果胶酶脱胶更低。添加EDTA对脱胶有促进作用,碱性条件下EDTA与果胶酶的协同作用更强,EDTA-酶的处理方法可在24 h使纤维分离程度达到良好(Fried为3分),残胶率为27.36%。 展开更多
关键词 亚麻纤维 固态脱胶 酸性果胶酶 碱性果胶酶
融合自组装双亲短肽提高碱性果胶酶热稳定性 预览 被引量:2
11
作者 刘松 汪明星 +1 位作者 堵国成 陈坚 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期1-6,共6页
考察了N-端融合自组装双亲短肽(SAP)对PGL热稳定性的影响.将6种具有不同疏水性和柔性的SAP融合至Bacillus sp.WSHB04-02 PGL N-端,得到融合酶PGL-S1、PGL-S2、PGL-S3、PGL-S4、PGL-S5和PGL-S6.与PGL相比,融合酶的55℃半衰期(t1/2)提... 考察了N-端融合自组装双亲短肽(SAP)对PGL热稳定性的影响.将6种具有不同疏水性和柔性的SAP融合至Bacillus sp.WSHB04-02 PGL N-端,得到融合酶PGL-S1、PGL-S2、PGL-S3、PGL-S4、PGL-S5和PGL-S6.与PGL相比,融合酶的55℃半衰期(t1/2)提高9.69 ~ 72.03倍;PGL-S1比酶活提高1.5倍达到458.52 U/mL,其他融合酶比酶活下降38.27% ~93.94%.此外,6种融合酶Km均较PGL显著下降;S1-PGL的kcat/Km提高3.52倍,其他融合酶kcat/Km则下降38%以上.所有SAP-PGL融合酶最适反应pH均在pH 9.4~10.6,符合其工业应用环境要求.上述结果表明,N-端融合SAP能有效提高PGL热稳定性和催化活性,获得的融合酶S1-PGL具有理想的应用前景. 展开更多
关键词 碱性果胶酶 自组装双亲短肽 融合 热稳定性比
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定点突变提高碱性果胶酶热稳定性 预览 被引量:1
12
作者 刘松 汪明星 +1 位作者 堵国成 陈坚 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1-6,共6页
碱性果胶酶(PGL,E.C.4.2.2.2)是一种重要的工业酶,在碱性条件下催化聚半乳糖醛酸的α-1,4糖苷键裂解,广泛应用于食品、纺织和造纸等行业。为提高酶热稳定性,将Bacillus sp.WSHB04-02 PGL与3种耐热酶进行氨基酸序列比对,确... 碱性果胶酶(PGL,E.C.4.2.2.2)是一种重要的工业酶,在碱性条件下催化聚半乳糖醛酸的α-1,4糖苷键裂解,广泛应用于食品、纺织和造纸等行业。为提高酶热稳定性,将Bacillus sp.WSHB04-02 PGL与3种耐热酶进行氨基酸序列比对,确定7个在耐热酶中保守但在PGL中不保守的位点(I58、N189、G191、S229、K314、S315和1325)作为改造的目标位点,单独突变为耐热酶中的保守氨基酸。酶学性质分析显示,PGL突变体热稳定性均有提高。与野生酶相比,N189E、S229K和1325F的55℃半衰期分别提高2.32倍、2.11倍和1.89倍;158V和K314M 55℃半衰期分别提高19.4%和38.9%,比酶活分别提高65%和91%。结构分析显示,除S315G外的PGL突变体的分子内的多种作用力数量均发生改变。上述结果表明,定点突变能有效提高PGL热稳定性,分子间作用力的变化可能是酶学性质变化的重要原因之一。 展开更多
关键词 碱性果胶酶 氨基酸序列比对 定点突变 热稳定性 作用力
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海藻酸钠-壳聚糖钠固定碱性果胶酶的研究 预览 被引量:1
13
作者 吴健 郭世良 +1 位作者 周律 王雪燕 《染整技术》 CAS 2014年第4期17-22,共6页
采用海藻酸钠-壳聚糖固定化碱性果胶酶,通过对固定化酶活力回收率影响条件的讨论,确定碱性果胶酶固定化的最优条件为:海藻酸钠3%,碳酸钙1.5%,游离酶1500 U/g,乳化时间50 min,乳化剂MOA-3用量0.4 mL/L,转速500 r/min,壳聚糖1.5... 采用海藻酸钠-壳聚糖固定化碱性果胶酶,通过对固定化酶活力回收率影响条件的讨论,确定碱性果胶酶固定化的最优条件为:海藻酸钠3%,碳酸钙1.5%,游离酶1500 U/g,乳化时间50 min,乳化剂MOA-3用量0.4 mL/L,转速500 r/min,壳聚糖1.5%。结果表明:固定化酶活力回收率达到69.23%。制备的固定化酶最适pH为9,最适温度为60℃,这种固定化酶比游离酶的耐热性和耐碱性有明显提高,而且固定化操作稳定性较好,重复利用5次后,酶活力仍可保持原来的60%。 展开更多
关键词 海藻酸钠 碱性果胶酶 固定化
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枯草芽孢杆菌固体发酵产碱性果胶酶条件研究 被引量:1
14
作者 田英华 刘晓兰 +3 位作者 郑喜群 杜国军 姜彩霞 刘丽 《食品工业》 北大核心 2014年第12期148-150,共3页
以麸皮为培养基主要原料,采用单因子和正交试验对枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)YM6固体发酵生产亚麻脱胶用复合酶的培养基以及培养条件进行了优化,结果表明最适培养基组成为,麸皮10 g,碳酸钠0.9%,磷酸二氢钾0.2%,硫酸铵0.5%,加水量... 以麸皮为培养基主要原料,采用单因子和正交试验对枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)YM6固体发酵生产亚麻脱胶用复合酶的培养基以及培养条件进行了优化,结果表明最适培养基组成为,麸皮10 g,碳酸钠0.9%,磷酸二氢钾0.2%,硫酸铵0.5%,加水量25 m L,初始pH 7.2。最适发酵条件为250 mL三角瓶装料10 g,接种量5 mL/100 g培养温度35℃,培养时间为72 h。工艺优化后碱性果胶酶活力可达214.80 U/g干曲。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 碱性果胶酶 固体发酵
Paenibacillus pabuli WZ008的自絮凝及其种子培养基优化对碱性果胶酶发酵的影响 预览 被引量:1
15
作者 魏春 刘洋 +2 位作者 周俊利 谢丽萍 俞国伟 《发酵科技通讯》 CAS 2013年第1期共4页
碱性果胶酶生产菌Paenibacillus pabuli WZ008在种子培养基中生长具有自絮凝特性.研究了种子液菌体形态及其对碱性果胶酶生产的影响,结果表明絮状种子有利于产酶.种子培养基的优化结果表明,添加可溶性淀粉和β-环糊精有利于维持自絮凝形... 碱性果胶酶生产菌Paenibacillus pabuli WZ008在种子培养基中生长具有自絮凝特性.研究了种子液菌体形态及其对碱性果胶酶生产的影响,结果表明絮状种子有利于产酶.种子培养基的优化结果表明,添加可溶性淀粉和β-环糊精有利于维持自絮凝形态,同时生物量和发酵产酶水平得到提高;种子培养基初始pH偏碱性对自絮凝形态及产酶水平有显著影响,添加pH缓冲盐K2HPO4进一步稳定了自絮凝形态.种子培养基优化后,在5L罐上碱性果胶酶产量达90 U/ml. 展开更多
关键词 自絮凝 种子培养 碱性果胶酶 发酵 类芽孢杆菌
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碱性果胶酶生产菌株的产酶条件优化 预览
16
作者 殷智超 金俊成 +1 位作者 王修坤 张珍林 《皖西学院学报》 2013年第2期5-7,共3页
对自行筛选的碱性果胶酶生产菌培养条件进行了优化。考查了碳源、氮源浓度和接种量对发酵产酶的影响。经单因素实验和正交试验研究,该菌株最佳产酶条件组合为:果胶添加量0.3%、NaNO。添加量0.6%、接种量6%。在此条件下,碱陛果... 对自行筛选的碱性果胶酶生产菌培养条件进行了优化。考查了碳源、氮源浓度和接种量对发酵产酶的影响。经单因素实验和正交试验研究,该菌株最佳产酶条件组合为:果胶添加量0.3%、NaNO。添加量0.6%、接种量6%。在此条件下,碱陛果胶酶酶活力达到6079U/mL。 展开更多
关键词 碱性果胶酶 正交试验 条件
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棉针织物气流前处理用生物酶的复配与应用 预览 被引量:1
17
作者 傅健剑 郑今欢 郭燕 《丝绸》 CAS 北大核心 2013年第4期16-22,共7页
选用碱性果胶酶和中性纤维素酶用于棉针织物精练前处理,通过单一酶在棉针织物前处理中的作用、两种酶的复配效果及应用性能研究,开发了适用于棉针织物气流前处理的酶精练工艺。结果表明:复合酶处理棉针织物的应用效果优于单一酶,且采... 选用碱性果胶酶和中性纤维素酶用于棉针织物精练前处理,通过单一酶在棉针织物前处理中的作用、两种酶的复配效果及应用性能研究,开发了适用于棉针织物气流前处理的酶精练工艺。结果表明:复合酶处理棉针织物的应用效果优于单一酶,且采用该复合酶精练工艺处理时,果胶去除率、棉针织物的毛效和顶破强力均接近常规煮练工艺时的水平。研究确立的应用复合酶进行棉针织物气流前处理的最佳生产工艺为:碱性果胶酶质量浓度0.25 g/L,中性纤维素酶质量浓度0.1 g/L,温度55℃,pH 6.5~7.5,JFC质量浓度0.2 g/L,浴比1︰10,处理时间50 min,在循环气雾条件下进行。 展开更多
关键词 碱性果胶酶 中性纤维素 果胶去除率 棉针织物
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类芽胞杆菌碱性果胶裂解酶的纯化与酶学性质表征 预览
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作者 熊斌 应向贤 +3 位作者 陈丽娜 谢丽萍 魏春 汪钊 《生物加工过程》 CAS CSCD 2013年第6期42-46,共5页
从类芽胞杆菌Paenibacillus sp.WZ008的发酵上清液中纯化得到一个高活力碱性果胶裂解酶,经SDS-PAGE电泳估算其亚基相对分子质量为4.5×104。通过对该酶进行酶学性质研究发现:该酶能催化裂解果胶酸、低酯果胶和高酯果胶;酶催化反应... 从类芽胞杆菌Paenibacillus sp.WZ008的发酵上清液中纯化得到一个高活力碱性果胶裂解酶,经SDS-PAGE电泳估算其亚基相对分子质量为4.5×104。通过对该酶进行酶学性质研究发现:该酶能催化裂解果胶酸、低酯果胶和高酯果胶;酶催化反应最适温度范围为55~60℃,最适pH为9.6,在最适条件下以低酯果胶为底物酶的比酶活达3 021.6 U/mg;Ca2+能增强该酶的活力,而Mn2+,Ba2+和EDTA强烈抑制该酶活力;当没有Ca2+存在时,高度酯化的果胶是该酶的最适底物,在4 mmol/L Ca2+存在时,该酶以果胶酸为底物比酶活最高(25 467 U/mg)。该酶N端序列比对分析发现与类芽胞杆菌Paenibacillus amylolyticus strain 27c64果胶裂解酶高度同源。 展开更多
关键词 学性质 酯化果胶 碱性果胶酶 纯化
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Bio-reduction of Sulphur Dyes with Alkaline Pectinase 预览
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作者 Priyadarshi Jaruhar Jadu Nandan Chakraborty 《化学与化工:英文版》 2013年第10期930-941,共12页
关键词 碱性果胶酶 硫化染料 生物还原 硫化钠 牢度性能 水不溶性 染色技术 亲和力
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碱性果胶酶基因在毕赤酵母中的非诱导表达 预览
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作者 张爱平 蔡少丽 +3 位作者 杨鹤 郑海英 柯崇榕 黄建忠 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2012年第6期33-36,共4页
为了使碱性果胶酶基因能在毕赤酵母中获得非诱导表达,利用聚合酶链式反应(PCR)技术,以实验室保藏菌株毕赤酵母EIM-60基因组为模板,设计引物扩增出编码碱性果胶酯裂解酶的基因PGL,大小约为1206bp。酶切后连接到毕赤酵母组成型表达... 为了使碱性果胶酶基因能在毕赤酵母中获得非诱导表达,利用聚合酶链式反应(PCR)技术,以实验室保藏菌株毕赤酵母EIM-60基因组为模板,设计引物扩增出编码碱性果胶酯裂解酶的基因PGL,大小约为1206bp。酶切后连接到毕赤酵母组成型表达载体pGAPZaA的多克隆位点上,成功构建了重组载体pGAPZotA-PGL,将其电转化入毕赤酵母GS115进行异源表达。SDS-PAGE银染结果表明,该重组质粒在毕赤酵母中获得了异源表达,分子量为44.3ku。通过考马斯亮蓝法蛋白浓度试剂盒测定其蛋白含量为0.430g/L,通过BandScan软件分析目的蛋白占总蛋白的41.4%。即0.178g/L。 展开更多
关键词 碱性果胶酶 pGAPZαA 毕赤酵母 异源表达
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