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小分子RNA干扰磷脂酰肌醇3-激酶催化亚基α基因对人骨肉瘤Saos-2细胞增殖和侵袭能力的影响 预览
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作者 王勤志 徐立军 +1 位作者 李名武 周聪 《新乡医学院学报》 CAS 2019年第1期19-24,共6页
目的探讨小分子RNA干扰磷脂酰肌醇3-激酶催化亚基α(PIK3CA)基因对人骨肉瘤Saos-2细胞增殖和侵袭能力的影响。方法培养人骨肉瘤Saos-2细胞,将细胞随机分为siRNA-PIK3CA组、siRNA对照组和空白对照组,siRNA-PIK3CA组细胞转染siRNA-PIK3CA... 目的探讨小分子RNA干扰磷脂酰肌醇3-激酶催化亚基α(PIK3CA)基因对人骨肉瘤Saos-2细胞增殖和侵袭能力的影响。方法培养人骨肉瘤Saos-2细胞,将细胞随机分为siRNA-PIK3CA组、siRNA对照组和空白对照组,siRNA-PIK3CA组细胞转染siRNA-PIK3CA序列,siRNA对照组细胞转染siRNA对照序列,空白对照组细胞正常培养,不作任何干预。实时荧光定量聚合酶链反应检测各组细胞中PIK3CAmRNA表达,四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测各组细胞增殖情况,流式细胞术检测各组细胞凋亡情况,Transwell法检测各组细胞迁移和侵袭能力,Western blot法检测各组细胞中PIK3CA、磷酸肌醇3激酶(PI3K)、磷酸化-PI3K(p-PI3K)、蛋白激酶B(Akt)、磷酸化-Akt(p-Akt)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)和磷酸化-mTOR(p-mTOR)蛋白表达。结果siRNA-PIK3CA组细胞中PIK3CAmRNA和蛋白相对表达量均低于siRNA对照组和空白对照组(P<0.05);siRNA-PIK3CA组细胞转染后24、48、72、96h增殖能力均低于siRNA对照组和空白对照组(P<0.05);siRNA-PIK3CA组细胞凋亡率高于siRNA对照组和空白对照组(P<0.05);siRNA-PIK3CA组迁移细胞数和侵袭细胞数均少于siRNA对照组和空白对照组(P<0.05);siRNA-PIK3CA组细胞中PI3K、Akt、mTOR蛋白相对表达量均高于siRNA对照组和空白对照组(P<0.05),而p-PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白相对表达量均低于siRNA对照组和空白对照组(P<0.05)。siRNA对照组与空白对照组细胞中PIK3CAmRNA和蛋白相对表达量、细胞增殖能力、迁移细胞数和侵袭细胞数及PI3K、Akt、mTORp-PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白相对表达量比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论下调PIK3CA基因可减少人骨肉瘤细胞增殖,抑制细胞迁移及侵袭能力,增加细胞凋亡,其机制可能与抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路有关。 展开更多
关键词 骨肉瘤 小分子RNA干扰 磷脂酰肌醇3-激酶催化亚基α 细胞增殖 细胞侵袭
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姜黄素促卵巢癌耐药细胞株COC1/DDP凋亡机制探索 被引量:3
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作者 林琳 王平 赵晓兰 《四川大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期 335-339,共5页
目的研究姜黄素对耐药卵巢癌细胞的促凋亡作用及其可能的机理。方法用MTT法检测不同浓度姜黄素、化疗药物〔顺铂(DDP),紫杉醇〕及姜黄素联合化疗药物(姜黄素+顺铂,姜黄素+紫杉醇)作用于卵巢癌耐药细胞株COC1/DDP细胞48h后各组的... 目的研究姜黄素对耐药卵巢癌细胞的促凋亡作用及其可能的机理。方法用MTT法检测不同浓度姜黄素、化疗药物〔顺铂(DDP),紫杉醇〕及姜黄素联合化疗药物(姜黄素+顺铂,姜黄素+紫杉醇)作用于卵巢癌耐药细胞株COC1/DDP细胞48h后各组的细胞抑制率,并用流式细胞仪检测上述各组细胞的凋亡率。RT-PCR技术检测姜黄素、顺铂、姜黄素+顺铂作用于COC1/DDP细胞48h后各组的磷脂酰肌醇3-激酶催化亚基(PI3KCA)mRNA的表达。结果不同浓度姜黄素作用COC1/DDP 48h后,细胞的抑制率和凋亡率随着姜黄素浓度的升高相应增高,姜黄素联合化疗药物作用组比单用化疗药物组的细胞抑制率及细胞凋亡率高(P〈0.05)。顺铂与姜黄素联合用药与顺铂单独作用相比PI3 KCA mRNA的表达降低(P〈0.05)。结论姜黄素能够促进卵巢癌耐药细胞株COC1/DDP的凋亡,这一作用可能与姜黄素和化疗药物协同诱导该细胞系的凋亡有关,其机制可能为降低PI3 KCA基因的表达。 展开更多
关键词 卵巢癌 COC1/DDP 姜黄素 顺铂 细胞凋亡 磷脂酰肌醇3-激酶催化亚基
磷脂酰肌醇3-激酶催化亚基δ基因的研究进展 被引量:1
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作者 董世濠 陈劲松 《中华实验外科杂志》 CSCD 北大核心 2018年第1期193-196,共4页
磷脂酰肌醇3-激酶催化亚基δ(PIK3CD)基因编码催化亚基p110δ,其在经典通路磷酸肌醇3激酶(PI3K)-蛋白激酶B(Akt)-哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)中具有重要的作用,日益受到人们的关注和有关学者的重视。但是目前国内对PIK3CD... 磷脂酰肌醇3-激酶催化亚基δ(PIK3CD)基因编码催化亚基p110δ,其在经典通路磷酸肌醇3激酶(PI3K)-蛋白激酶B(Akt)-哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)中具有重要的作用,日益受到人们的关注和有关学者的重视。但是目前国内对PIK3CD基因的研究不多,因此本文就近年来PIK3CD基因的研究进展进行综述,旨在加深人们对PIK3CD基因的认识和理解。 展开更多
关键词 磷脂酰肌醇3-激酶催化亚基δ基因 磷酸肌醇3激酶-蛋白激酶β-哺乳动物雷帕霉素靶蛋白通路 研究进展
鼻咽癌患者肿瘤组织中VEGF、COX-2与PIK3CA表达量的相关性分析 预览
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作者 李俊 《实用癌症杂志》 2019年第3期385-388,共4页
目的探讨鼻咽癌患者肿瘤组织中血管内皮生长因子(VEGF)、环氧合酶-2(COX-2)与磷脂酰肌醇-3-激酶催化亚基α(PIK3CA)表达量的相关性。方法选取鼻咽癌患者34例作为研究对象,所有患者治疗后均随访3年,采集所有研究对象肿瘤组织标本并检测其... 目的探讨鼻咽癌患者肿瘤组织中血管内皮生长因子(VEGF)、环氧合酶-2(COX-2)与磷脂酰肌醇-3-激酶催化亚基α(PIK3CA)表达量的相关性。方法选取鼻咽癌患者34例作为研究对象,所有患者治疗后均随访3年,采集所有研究对象肿瘤组织标本并检测其VEGF、COX-2与PIK3CA表达情况,分析三者间相互关系,并结合患者临床资料探究上述指标对鼻咽癌发生发展的影响及临床意义。结果鼻咽癌患者肿瘤组织中VEGF、COX-2与PIK3CA表达阳性率与患者性别、年龄均无显著相关。COX-2表达阳性率与患者是否发生淋巴转移有关(P <0. 05),与患者肿瘤临床分期无关(P> 0. 05);VEGF、PIK3CA表达阳性率与肿瘤临床分期及淋巴结转移均有关系(P <0. 05)。通过Pearson相关性分析鼻咽癌组织中的VEGF蛋白、COX-2蛋白表达量与PIK3CA蛋白表达量,发现前二者与后者明显存在正相关关系(γ=0. 808、γ=0. 643,P均<0. 05)。治疗后3年,鼻咽癌组织中VEGF、COX-2与PIK3CA表达为阳性患者的生存率明显低于阴性表达患者(P <0. 05)。结论 VEGF、COX-2与PIK3CA表达情况与鼻咽癌的发生发展密切相关,三者间或存在一定的联系,可用于临床预测患者术后较长时间内的生存情况。 展开更多
关键词 鼻咽癌 血管内皮生长因子 环氧合酶-2 磷脂肌醇-3-激酶催化亚基α
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MFAP3L在胃癌中的表达及与PI3K/AKT信号转导通路的关系 预览 被引量:5
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作者 张庆英 成文翔 +1 位作者 周太梅 易德青 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期806-809,837共5页
目的了解微纤维关联样蛋白-3(MFAP3L)基因在胃癌组织中的表达情况并分析其与PI3K/AKT信号转导通路相关基因间的关系。方法采用半定量RT-PCR和组织微阵列免疫组化的方法分别检测MFAP3L、磷脂酰肌醇-3-激酶催化亚基α(PIK3CA)、蛋白激... 目的了解微纤维关联样蛋白-3(MFAP3L)基因在胃癌组织中的表达情况并分析其与PI3K/AKT信号转导通路相关基因间的关系。方法采用半定量RT-PCR和组织微阵列免疫组化的方法分别检测MFAP3L、磷脂酰肌醇-3-激酶催化亚基α(PIK3CA)、蛋白激酶B-β(AKT2)及β-半乳糖凝集素-3(Glaectin-3)基因在胃癌组织中mRNA及蛋白表达情况,并通过生物信息学方法预测分析MFAP3L蛋白结构特点。结果 (1)在同一组胃癌组织中,MFAP3L、Glaectin-3及PIK3CA蛋白均表达上调(17/24,70.8%,P=0.022;16/25,64.0%,P=0.017及14/25,56.0%,P=0.045);PIK3CA与AKT2基因mRNA均表达上调(19/29,65.5%,P=0.001与14/25,56%,P=0.001)。并且MFAP3L与Glaectin-3及PIK3CA间存在共表达。(2)MFAP3L蛋白含有多个磷酸化位点,且在胞内区聚集成簇,并具有1个与PI3K的SH3调节区高度同源的蛋白模序。结论 MFAP3L基因在胃癌组织中的表达变化可能与胃癌的发生有密切关系,并可能通过参与PI3K/AKT通路来参与肿瘤侵袭和转移。 展开更多
关键词 微纤维关联样蛋白-3 磷脂肌醇-3-激酶催化亚基α 蛋白激酶B-β β-半乳糖凝集素-3 胃癌
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微小RNA-152对乳腺癌细胞增殖及阿霉素敏感性影响的实验研究 预览
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作者 杨秀丽 沈玲 《临床肿瘤学杂志》 CAS 北大核心 2018年第5期391-396,共6页
目的探讨微小RNA-152(miR-152)对乳腺癌细胞阿霉素敏感性的影响及其作用机制。方法采用实时定量PCR(QPCR)检测人乳腺上皮细胞株HBL-100、人乳腺癌MCF-7细胞及阿霉素耐药株MCF-7/ADR细胞中的miR-152水平,分别向MCF-7细胞和MCF-7/ADR... 目的探讨微小RNA-152(miR-152)对乳腺癌细胞阿霉素敏感性的影响及其作用机制。方法采用实时定量PCR(QPCR)检测人乳腺上皮细胞株HBL-100、人乳腺癌MCF-7细胞及阿霉素耐药株MCF-7/ADR细胞中的miR-152水平,分别向MCF-7细胞和MCF-7/ADR细胞转染miR-152模拟物mimics(过表达组)和阴性对照NC(阴性对照组),以未行转染为空白对照组。采用QPCR检测转染后MCF-7细胞和MCF-7/ADR细胞中miR-152的表达情况,采用MTT法检测不同浓度阿霉素(10、50、100、200和500 ng/ml)处理后各组的增殖情况,流式细胞术检测转染后各组的凋亡率,Western blotting检测磷脂酰肌醇激酶-3催化亚基α基因(PIK3CA)的蛋白水平,双荧光素酶报告实验评价miR-152对PIK3CA的靶向调控作用。结果QPCR实验结果表明MCF-7细胞和MCF-7/ADR细胞中的miR-152水平均低于HBL-100细胞,且MCF-7/ADR细胞的miR-152水平均低于MCF-7细胞,差异有统计学意义(P〈0.05);过表达组转染后的miR-152水平均高于阴性对照组和空白对照组(P〈0.05)。与其余两组比较,过表达组的存活率降低而凋亡率升高,且PIK3CA蛋白水平也降低,差异有统计学意义(P〈0.05)。miR-152可抑制野生型PIK3CA 3'UTR报告基因载体的荧光素酶活性,而对突变型PIK3CA 3'UTR的荧光素酶活性无影响。结论 miR-152表达在乳腺癌细胞中降低,且与阿霉素耐药有关,参与乳腺癌细胞的增殖和凋亡过程,在逆转乳腺癌耐药中发挥重要作用,具有一定价值。 展开更多
关键词 乳腺癌 微小RNA-152 磷脂肌醇激酶-3催化亚基α基因(PIK3CA) 阿霉素
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PIK3CA基因突变及PTEN表达缺失在乳腺癌中的临床意义 预览 被引量:1
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作者 胡晓清 许践刚 +2 位作者 张宪波 周浩亮 赵挺 《温州医学院学报》 CAS 2012年第3期 246-249,共4页
目的 :通过研究磷脂酰肌醇激酶-3催化亚基α基因(PIK3CA)突变和类脂磷酸酶(PTEN)蛋白表达缺失与临床病理指标间的关系,进一步探讨其在乳腺癌发生、发展中的意义。方法:收集86例经病理确诊的乳腺癌石蜡标本,检测PIK3CA基因第9、20... 目的 :通过研究磷脂酰肌醇激酶-3催化亚基α基因(PIK3CA)突变和类脂磷酸酶(PTEN)蛋白表达缺失与临床病理指标间的关系,进一步探讨其在乳腺癌发生、发展中的意义。方法:收集86例经病理确诊的乳腺癌石蜡标本,检测PIK3CA基因第9、20外显子的突变以及PTEN的蛋白表达。分析上述两者之间的关系,以及与乳腺癌肿块大小、雌/孕激素受体(ER/PR)状态、表皮生长因子受体-2(Her-2)状态、淋巴结转移之间的关系。结果:PIK3CA基因突变为28例(占32.6%),突变与肿瘤大小无相关性(x2=0.104,P=0.747)。在ER/PR阳性、Her-2阳性、淋巴结转移阳性患者中PIK3CA突变发生率高,对比阴性者差异有统计学意义(x2=9.022,P=0.003;x2=5.752,P=0.016;x2=4.599,P=0.032)。在淋巴结阳性患者中,20号外显子的突变率为64.7%(11/17),与淋巴结阴性患者比差异有统计学意义(x2=4.809,P=0.028)。PTEN表达阴性者38例(占44.2%),而在PTEN阳性表达的48例中,ER/PR阳性患者明显高于ER/PR阴性患者(x2=17.667,P=0.000);有淋巴结转移者明显低于无淋巴结转移者(x2=12.884,P=0.000)。PTEN表达缺失与肿瘤大小、Her-2状态无关。结论:PIK3CA基因的突变及PTEN蛋白表达缺失是乳腺癌中常见的事件,PIK3CA突变多发生于激素受体阳性患者中,而PTEN表达缺失多发生于激素受体阴性患者。这些改变表明不同基因型肿瘤其发生发展的不同途径,同时提示不良的临床预后。 展开更多
关键词 基因突变 磷脂肌醇激酶-3催化亚基α基因 PTEN 乳腺肿瘤 表皮生长因子受体-2
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