期刊文献+
共找到64篇文章
< 1 2 4 >
每页显示 20 50 100
斜带石斑鱼( Epinephelus coioides )病毒性神经坏死病毒的纯化分析及检测方法建立 预览
1
作者 葛辉 吴丽云 +8 位作者 周宸 黄种持 吴建绍 郑乐云 林琪 杨求华 吴水清 王艺磊 林克冰 《渔业研究》 2019年第2期96-105,共10页
根据GenBank中已有的鱼类病毒性神经坏死病毒(NNV)RNA2基因序列,设计引物,从福建厦门具有典型NNV发病症状的斜带石斑鱼中克隆了RNA2基因的全长序列,并将序列提交到GenBank获得登录号为MF510920,命名为XMNNV。系统进化树分析结果表明XMNN... 根据GenBank中已有的鱼类病毒性神经坏死病毒(NNV)RNA2基因序列,设计引物,从福建厦门具有典型NNV发病症状的斜带石斑鱼中克隆了RNA2基因的全长序列,并将序列提交到GenBank获得登录号为MF510920,命名为XMNNV。系统进化树分析结果表明XMNNV与RGNNV聚类在一起,与SJNNV、BFNNV和TPNNV等其他鱼类神经坏死病毒亲缘关系较远,说明本研究分离得到的XMNNV属于RGNNV基因型。通过超速离心方法对病毒进行提纯,得到了纯化的NNV病毒。电镜观察结果表明,病毒粒子直径20~25nm,结构为正二十面体,与已经报道的NNV结构一致。通过对XMNNV与其它RGNNVRNA2基因进行序列比对,在保守区设计引物,运用RT-PCR方法建立了RGNNV的PCR检测方法,该方法灵敏度高达67copies/μL。纯化的病毒对E11(条纹月鳢细胞系)和大黄鱼肌肉细胞进行感染,结果表明该病毒可以感染这两种鱼类细胞。E11细胞被感染病毒后,细胞出现空泡化,并最终导致细胞分解死亡;大黄鱼肌肉细胞感染后,细胞变圆,慢慢从培养皿壁脱落,最终解体死亡。另外,对感染后细胞进行PCR检测,结果显示为阳性,进一步确定了分离的NNV具有感染这两种细胞的能力。本研究通过电镜观察和PCR检测两种方法确定了患病石斑鱼携带NNV,通过对两种鱼类细胞的感染实验,确定了该病毒具有一定的感染能力。综上,本研究为石斑鱼NNV疾病的诊断提供了有效的方法,对石斑鱼NNV疾病的预防具有一定的指导意义。 展开更多
关键词 斜带石斑鱼 神经坏死病毒 分离纯化 E11细胞系 大黄鱼肌肉细胞
在线阅读 下载PDF
大头鳕TNFSF6基因的结构分析及其在发育早期和病毒暴发时的表达水平 预览
2
作者 刘瑞婷 蒋洁兰 +5 位作者 毛明光 姜志强 布尔特 矫志伟 陈明康 孙谦 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期523-531,共9页
为揭示大头鳕TNFSF6基因的基本结构与功能及其在大头鳕发育和神经坏死病毒(Pacific cod nervous necrosis virus, PCNNV)暴发时的响应机制,本研究通过基因克隆获得TNFSF6 cDNA开放阅读框序列,并对序列进行生物信息学分析,运用相对荧光定... 为揭示大头鳕TNFSF6基因的基本结构与功能及其在大头鳕发育和神经坏死病毒(Pacific cod nervous necrosis virus, PCNNV)暴发时的响应机制,本研究通过基因克隆获得TNFSF6 cDNA开放阅读框序列,并对序列进行生物信息学分析,运用相对荧光定量PCR(qRT-PCR)方法对TNFSF6在不同组织、孵化后不同日龄仔鱼和PCNNV感染前后仔稚鱼中的表达水平进行检测。结果显示,大头鳕TNFSF6 cDNA长1 388 bp,5′UTR占315bp,3′UTR占500 bp,ORF全长573 bp,编码190个氨基酸。qRT-PCR结果显示,TNFSF6在各组织均有表达,但在脾脏和鳃组织中的表达量较高;大头鳕孵化后15、20、37和40 dTNFSF6基因的转录水平分别是其在5 d转录水平的0.28、0.15、0.12和0.13倍。在24 d和46 d PCNNV暴发时,病鱼TNFSF6基因的转录水平高于对照组;在77 d PCNNV暴发时,病鱼TNFSF6转录水平则显著低于对照组。研究表明,TNFSF6基因在大头鳕发育早期和仔鱼暴发PCNNV时发挥了重要的作用。 展开更多
关键词 大头鳕 肿瘤坏死因子 TNFSF6 发育 神经坏死病毒
在线阅读 下载PDF
NNV衣壳蛋白在大肠杆菌中的表达纯化及其应用 预览
3
作者 朱建蕊 翟伟锋 《南方农业》 2018年第6期112-114,共3页
为获得稳定表达及较好免疫效力的重组NNV衣壳蛋白,对已公布的石斑鱼神经坏死病毒衣壳蛋白基因序列进行优化,并构建表达载体pET32a-NNV,于大肠杆菌BL21(DE3)中诱导、表达,将包涵体纯化后碾磨成粉添加到黄粉虫饲料中,用虫体粉末喂食石斑鱼... 为获得稳定表达及较好免疫效力的重组NNV衣壳蛋白,对已公布的石斑鱼神经坏死病毒衣壳蛋白基因序列进行优化,并构建表达载体pET32a-NNV,于大肠杆菌BL21(DE3)中诱导、表达,将包涵体纯化后碾磨成粉添加到黄粉虫饲料中,用虫体粉末喂食石斑鱼,攻毒保护试验检测免疫效力。结果获得高表达的NNV衣壳蛋白包涵体,目的蛋白占总蛋白的比率达70%,纯化后纯度达95%;且喂食本技术制备的黄粉虫粉末后石斑鱼对NNV抵抗力显著提高,存活率由5%上升至83%。本研究提供一种重组NNV衣壳蛋白在大肠杆菌中高效表达和纯化方法,为石斑鱼神经坏死病毒疫苗的商品化推广奠定了基础。 展开更多
关键词 石斑鱼 神经坏死病毒 衣壳蛋白 疫苗
在线阅读 免费下载
石斑鱼神经坏死病毒的RT-LAMP检测方法的建立 预览
4
作者 翟伟锋 殷波 《南方农业》 2017年第32期67-69,共3页
利用反转录环介导等温扩增技术(RT-LAMP)建立一种方便、快捷的石斑鱼神经坏死病毒(NNV)检测方法.根据石斑鱼神经坏死病毒衣壳蛋白基因序列的保守区设计5组特异引物,提取斜带石斑鱼的总RNA,利用RT-LAMP技术比较5组引物的敏感性和特异... 利用反转录环介导等温扩增技术(RT-LAMP)建立一种方便、快捷的石斑鱼神经坏死病毒(NNV)检测方法.根据石斑鱼神经坏死病毒衣壳蛋白基因序列的保守区设计5组特异引物,提取斜带石斑鱼的总RNA,利用RT-LAMP技术比较5组引物的敏感性和特异性,同时对反应温度和反应时间进行优化,并对现场20尾鱼苗进行了检测.结果表明筛选出一组高特异性的引物,在61 ℃条件下恒温反应20 min可以完成检测;在反应试管中添加钙黄绿素,可利用荧光反应现象进行结果判定,且对9种常见鱼类病原微生物无交叉反应;对20尾鱼苗进行了现场检测,检测结果与RT-PCR结果一致.本研究成功建立起石斑鱼神经坏死病毒RT-LAMP检测方法,方法特异性强、反应时间短、操作简单,为进一步推广该技术在现场大规模的应用奠定了研究基础. 展开更多
关键词 石斑鱼 神经坏死病毒 RT-LAMP 检测方法
在线阅读 免费下载
闽南地区斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)神经坏死病毒的基因型与分子进化研究 预览 被引量:2
5
作者 朱志煌 林克冰 +4 位作者 周宸 吴建绍 葛辉 郑乐云 黄种持 《渔业研究》 2017年第6期429-436,共8页
本研究以闽南地区具有典型神经坏死病症状的斜带石斑鱼为材料,采用RT-PCR法对其进行病毒检测,对检测到的阳性序列进行双向测序和构建系统发育树,对病毒颗粒进行分离纯化,并通过分子进化模型分析病毒衣壳蛋白基因所受的选择压力。结果显... 本研究以闽南地区具有典型神经坏死病症状的斜带石斑鱼为材料,采用RT-PCR法对其进行病毒检测,对检测到的阳性序列进行双向测序和构建系统发育树,对病毒颗粒进行分离纯化,并通过分子进化模型分析病毒衣壳蛋白基因所受的选择压力。结果显示,采集到的6个石斑鱼样品均呈NNV阳性,系统树分析发现6个样品的PCR扩增片段均为RGNNV基因型序列,表明闽南地区感染石斑鱼的神经坏死病毒主要为RGNNV基因型病毒;通过PEG法对病毒进行分离提纯,获得直径为25~28 nm、呈二十面立体对称结构的无囊膜病毒颗粒;分子进化分析显示NNV外壳蛋白基因经历了纯化选择,表明病毒在进化过程中没有出现遗传变异并以相对恒定保守的速率进化。 展开更多
关键词 斜带石斑鱼 基因型 神经坏死病毒 分子进化
在线阅读 下载PDF
七带石斑鱼神经坏死病毒的RT-LAMP检测方法 预览 被引量:2
6
作者 刘滨 刘新富 +2 位作者 曾霖 孟振 刘江春 《天津农业科学》 CAS 2016年第7期23-28,共6页
报道了一种可以快速、灵敏地检测七带石斑鱼神经坏死病毒(NNV)的逆转录环介导等温扩增方法(RT-LAMP)。该方法参考赤点石斑鱼NNV病毒的主衣壳蛋白(MCP)基因的保守序列,设计1对引物克隆出七带石斑鱼NNV的基因序列,利用Primer Explor... 报道了一种可以快速、灵敏地检测七带石斑鱼神经坏死病毒(NNV)的逆转录环介导等温扩增方法(RT-LAMP)。该方法参考赤点石斑鱼NNV病毒的主衣壳蛋白(MCP)基因的保守序列,设计1对引物克隆出七带石斑鱼NNV的基因序列,利用Primer Explorer V4软件设计了3对针对所克隆NNV基因序列的特异性引物,建立了RT-LAMP的反应体系,并分别对反应系统的引物浓度、反应温度和时间进行了优化,形成了七带石斑鱼NNV病毒RT-LAMP检测技术。实践应用结果表明,在63℃的最佳反应温度下,采用RT-LAMP检测技术经过45 min就能完成一次检测,准确率达到100%。本研究建立的RT-LAMP检测NNV技术设备要求简单,为七带石斑鱼等石斑鱼无NNV受精卵和仔稚鱼的生产现场检测和筛选提供了一种方便、灵敏的检测方法。 展开更多
关键词 七带石斑鱼 神经坏死病毒 检测 RT-LAMP
在线阅读 下载PDF
太平洋鳕神经坏死病毒衣壳蛋白(CP)的原核表达及条件优化 预览 被引量:5
7
作者 毛明光 温施慧 +4 位作者 姜志强 蒋洁兰 孙航 吕绘倩 李幸 《大连海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期117-123,共7页
为深入研究太平洋鳕Gadus macrocephalus神经坏死病毒(Pacific cod nervous necrosis virus,PCNNV)衣壳蛋白(capsidprotein,CP)的功能,将PCNNVcp基因连接到pET-32a原核表达载体中,构建原核表达重组载体pEVCP,将其转化至大肠杆... 为深入研究太平洋鳕Gadus macrocephalus神经坏死病毒(Pacific cod nervous necrosis virus,PCNNV)衣壳蛋白(capsidprotein,CP)的功能,将PCNNVcp基因连接到pET-32a原核表达载体中,构建原核表达重组载体pEVCP,将其转化至大肠杆菌E.coli B121(DE3)表达系统中进行融合表达,对诱导剂IPTG浓度、诱导时间和温度等诱导表达条件进行优化,采用SDS-PAGE及质谱技术鉴定表达产物。结果表明:本研究中成功构建了重组载体pEVCP,表达的目的蛋白相对分子质量约为55000;目的蛋白经质谱鉴定,有6个肽段的氨基酸序列与预期一致;对重组菌株pEVCP/BL21的最佳诱导条什为IPTG浓度0.1mmol/L、最佳诱导时间3h、温度30℃。本研究结果可为后续冷水鱼类病毒疫苗的研制及病毒快速检测试剂盒的研发奠定基础。 展开更多
关键词 太平洋鳕 神经坏死病毒 衣壳蛋白 原核表达
在线阅读 下载PDF
Development of Co-agglutination Method for Viral Nervous Necrosis from Grouper (Epinephelus sp,) in Batam 预览
8
作者 Surya Amanu Achmad Bahtiar Rifai +1 位作者 Ashari Syarief Miftahul Fikar 《农业科学与技术:B》 2015年第7期502-505,共4页
关键词 协同凝集试验 神经坏死病毒 石斑鱼 特异性抗体 SP 诊断测试 磷酸盐缓冲液 技术检测
在线阅读 下载PDF
鱼类神经坏死病毒纳米探针的制备与特征分析 预览
9
作者 粟子丹 史成银 +1 位作者 刘江春 王胜强 《中国动物检疫》 CAS 2015年第6期75-78,共4页
为了快速检测鱼类神经坏死病毒,本研究设计了病毒特异性的发夹型探针,经硫醇修饰后与纳米银溶胶结合,制备了鱼类神经坏死病毒纳米探针(Ag-NNV),并使用透射电镜、多功能酶标仪、表面增强拉曼光谱仪等对纳米探针Ag-NNV的表征及发夹... 为了快速检测鱼类神经坏死病毒,本研究设计了病毒特异性的发夹型探针,经硫醇修饰后与纳米银溶胶结合,制备了鱼类神经坏死病毒纳米探针(Ag-NNV),并使用透射电镜、多功能酶标仪、表面增强拉曼光谱仪等对纳米探针Ag-NNV的表征及发夹型探针在纳米银粒子表面的覆盖率进行了测定和分析。结果表明,裸露的纳米银粒子为球形,平均直径50 nm;制备的纳米探针颗粒为球形,平均直径90 nm。纳米银粒子和纳米探针在溶液中均具有良好的分散性。平均每个纳米银粒子表面结合发夹型探针约100条,单位表面积的探针覆盖量为0.56 pmol/cm2。该纳米探针制备简便,适合用于表面增强拉曼散射法对鱼类神经坏死病毒进行快速检测。 展开更多
关键词 纳米探针 神经坏死病毒 表面增强拉曼散射
在线阅读 下载PDF
神经坏死病毒在赤点石斑鱼组织中的分布 预览 被引量:3
10
作者 刘晓丹 胡先勤 +12 位作者 黄剑南 翁少萍 王文文 陈文捷 秦真东 董星星 周洋 刘小玲 姬伟 张学振 郭志勋 何建国 林蠡 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期876-882,共7页
研究采用地高辛原位杂交和免疫荧光检测技术分别检测病毒RNA2和衣壳蛋白在患病赤点石斑鱼Epinephelus akaara稚鱼中分布。地高辛检测结果表明病毒RNA2主要分布在脑、脊髓、视网膜和鳃上;免疫荧光检测结果和地高辛检测结果一致,表明病毒... 研究采用地高辛原位杂交和免疫荧光检测技术分别检测病毒RNA2和衣壳蛋白在患病赤点石斑鱼Epinephelus akaara稚鱼中分布。地高辛检测结果表明病毒RNA2主要分布在脑、脊髓、视网膜和鳃上;免疫荧光检测结果和地高辛检测结果一致,表明病毒靶器官主要也是脑、脊髓、视网膜和鳃。肠道中几乎检测不到阳性信号,可能不是病毒的靶器官。因此可以推测神经坏死病毒感染赤点石斑鱼的主要途径是鳃,而不是肠道。 展开更多
关键词 神经坏死病毒 赤点石斑鱼 地高辛原位杂交 免疫荧光 组织分布
在线阅读 下载PDF
Evaluation of the Pathogenicity and Immune Response of Nervous Necrosis Virus Isolated in Vietnam 预览
11
作者 Pham Thi Tam Pham Cong Hoat +1 位作者 Bui Thi Hai Hoa Nguyen Thi Thu Hien 《农业科学与技术:A》 2014年第4期315-322,共8页
关键词 神经坏死病毒 免疫反应 致病性 越南 细胞病变效应 接种疫苗 灭活病毒 评价
在线阅读 下载PDF
鱼类神经坏死病毒研究进展与发展趋势 预览 被引量:3
12
作者 陈文捷 刘晓丹 +6 位作者 胡先勤 王文文 秦真东 王瑶 周洋 刘小玲 林蠡 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期1666-1672,共7页
神经坏死病毒(nervous necrosis virus,NNV)是一种世界范围内流行、严重危害多种海水和淡水鱼类的传染性病原。NNV为单一正链、2节段RNA病毒,基因组由RNA1(3.1 kb)和RNA2(1.4 kb)组成。在病毒复制过程中,会合成亚基因组RNA3。RNA... 神经坏死病毒(nervous necrosis virus,NNV)是一种世界范围内流行、严重危害多种海水和淡水鱼类的传染性病原。NNV为单一正链、2节段RNA病毒,基因组由RNA1(3.1 kb)和RNA2(1.4 kb)组成。在病毒复制过程中,会合成亚基因组RNA3。RNA1编码RNA聚合酶。RNA2编码衣壳蛋白,为病毒的唯一结构蛋白。RNA3编码B1和B2两种非结构蛋白。根据病毒衣壳蛋白的基因序列,神经坏死病毒可以分成4种基因型,分别为拟鲹、红鳍东方鲀、条斑星鲽和赤点石斑神经坏死病毒基因型。但是,目前只发现A、B、C三种病毒血清型,A对应拟鲹神经坏死病毒基因型,B对应红鳍东方鲀神经坏死病毒基因型、C对应条斑星鲽神经坏死病毒和赤点石斑神经坏死病毒基因型。病毒存在垂直和水平两种传播途径,而且广泛分布于养殖和野生鱼类中。阻断病毒在野生与养殖鱼类之间的传播和开展新型鱼类疫苗研发是将来研究趋势。 展开更多
关键词 神经坏死病毒 病毒基因组 病毒蛋白 基因型 血清型 疾病防控
在线阅读 下载PDF
军曹鱼重要病害及其防治技术
13
《中国科技成果》 2014年第9期79-80,共2页
利用常规细菌分离培养的方法获得军曹鱼病原菌3株,确定了副溶血弧菌、哈维弧菌、普通变形杆菌对军曹鱼的致病力,同时通过人工感染试验确定了神经坏死病毒对军曹鱼的致病力。用甲醛灭活全菌作为疫苗,分析了葡聚糖、酵母多糖、LPS和弗... 利用常规细菌分离培养的方法获得军曹鱼病原菌3株,确定了副溶血弧菌、哈维弧菌、普通变形杆菌对军曹鱼的致病力,同时通过人工感染试验确定了神经坏死病毒对军曹鱼的致病力。用甲醛灭活全菌作为疫苗,分析了葡聚糖、酵母多糖、LPS和弗氏佐剂对疫苗免疫效果的影响,发现LPS是良好的佐剂。将重组的神经坏死病毒的MCP基因表达的融合蛋白制备成疫苗,注射接种鱼体,可提高鱼体的免疫保护力和生长率。通过免疫因子测定,感染试验以及生长和营养等因子,研发了1种中草药混合剂和半乳糖作为军曹鱼的免疫增强剂。另外通过对军曹鱼免疫血清抗菌因子、生化指标、酶等测定,以及组织化学等方法,进行了军曹鱼免疫机理方面的研究,包括军曹鱼免疫系统的发生发育学,盐度等理化因子对军曹鱼幼鱼免疫系统及免疫应激能力的影响等。 展开更多
关键词 军曹鱼 防治技术 神经坏死病毒 人工感染试验 副溶血弧菌 病害 细菌分离培养 普通变形杆菌
杨惠郎:台湾石斑鱼育苗经验分享 预览
14
《当代水产》 2013年第1期67-68,共2页
《当代水产》:据您介绍,目前石斑鱼的病害主要是神经坏死病毒、虹彩病毒、弧菌、发光杆菌及寄生虫,能否介绍一下这几种病毒发生的情况及鱼生病之原因?
关键词 石斑鱼 神经坏死病毒 育苗 台湾地区 虹彩病毒 发光杆菌 寄生虫 病害
在线阅读 下载PDF
Diagnosis of nervous necrosis virus in orange-spotted grouper, Epinephelus coioides, by a rapid and convenient RT-PCR method 预览 被引量:1
15
作者 MU Yinnan LIN Kebing +1 位作者 CHEN Xinhua AO Jingqun 《海洋学报:英文版》 SCIE CAS CSCD 2013年第10期88-92,共5页
病毒的紧张的坏死(VNN ) 在海洋的鱼引起高死亡,特别在 grouper,全球并且在中国。因为没有有效疫苗或药处理 VNN,早察觉和预防是重要的堵住它的爆发。在这研究,反向的抄写聚合酶链反应(RT-PCR ) 为 VNN 病原体的快速、方便、敏感的... 病毒的紧张的坏死(VNN ) 在海洋的鱼引起高死亡,特别在 grouper,全球并且在中国。因为没有有效疫苗或药处理 VNN,早察觉和预防是重要的堵住它的爆发。在这研究,反向的抄写聚合酶链反应(RT-PCR ) 为 VNN 病原体的快速、方便、敏感的察觉被开发,紧张的坏死病毒(NNV ) ,在 grouper。整个过程从 RNA 抽取在 3.5 h 以内被完成到 PCR 产品可视化。这个方法的察觉限制是 NNV RNA 标准的 200 个拷贝,它对应于病毒粒子的 200 个拷贝。这个 RT-PCR 方法对 NNV 察觉没有特定对另外的鱼跨反应病毒的疾病病原体例如传染胰腺的坏死病毒( IPNV ),传染造血的坏死病毒( IHNV ),鲤鱼病毒( SVCV )的春天 viraemia ,流行于家畜的造血的坏死病毒( EHNV ),并且大黄 croaker iridovirus ( LYCIV )。与这个方法,看到橘子的 grouper (Epinephelus coioides ) 从育种站与或没有在福建省的 VNN 流行病的发生的油炸食品被检测。结果都显示出那或当从没有 VNN 的二个育种站的40%油炸食品或25%流行病也作为 NNV 被检测时,从有流行病的发生的二个育种站的93%油炸食品作为积极被诊断积极,显示这个 RT-PCR 方法能被用于快速, NNV 感染的敏感察觉并且在 VNN 流行警戒适用。 展开更多
关键词 RT-PCR法 神经坏死病毒 斜带石斑鱼 诊断方法 传染性造血器官坏死 传染性胰腺坏死 病毒检测 RNA提取
在线阅读 下载PDF
斜带石斑鱼神经坏死病毒CP基因shRNA干扰载体的构建及效果评价 预览 被引量:1
16
作者 黄桂菊 陈健光 +2 位作者 喻达辉 曾令兵 龙华 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期 343-349,共7页
利用Invitrogen公司的在线生物学软件分析斜带石斑鱼神经坏死病毒CP基因,设计针对CP基因不同位置的小发卡RNA(short hairpin RNA,shRNA)干扰序列[其结构特征为正链(19 nt)-环(4 nt)-负链(19 nt)]。化学合成这些序列,并退火连接... 利用Invitrogen公司的在线生物学软件分析斜带石斑鱼神经坏死病毒CP基因,设计针对CP基因不同位置的小发卡RNA(short hairpin RNA,shRNA)干扰序列[其结构特征为正链(19 nt)-环(4 nt)-负链(19 nt)]。化学合成这些序列,并退火连接为双链干扰片段,将双链干扰片段定向克隆到干扰载体pENTRTM/U6中,构建shRNA干扰载体pshRNA-124、pshRNA-896和pshRNA-NNV。然后,用脂质体转染法分别将3种shRNA干扰载体和pEGFP-CP基因共转染导入黑头呆鱼(FHM)肌肉细胞,荧光显微镜观察细胞荧光强度,分析荧光抑制效率,Real-time RT-PCR检测CP基因mRNA的表达水平变化。结果表明,在pEGFP-CP与shRNA干扰载体共转染组,pshRNA-124、pshRNA-896、pshRNA-NNV的荧光抑制效率分别为47%、68%、51%。3种shRNA干扰载体都有干扰效果,均能干扰绿色荧光蛋白的表达,其中pshRNA-896干扰效率最好。Real-time RT-PCR检测表明,干扰质粒pshRNA-124、pshRNA-896、pshRNA-NNV对pEGFP-CP基因的沉默效率分别约为60%、96%和55%,与对照组相比差异显著(P〈0.05)。研究表明,靶向斜带石斑鱼神经坏死病毒CP基因的shRNA干扰载体构建成功,为进一步运用RNA干扰技术进行CP基因的功能研究奠定了基础。 展开更多
关键词 斜带石斑鱼 神经坏死病毒 CP基因 shRNA干扰载体
在线阅读 下载PDF
卵形鲳鲹一例疑似神经性病毒病的初步分析 预览 被引量:4
17
作者 蔡小辉 文雪 +3 位作者 徐力文 贾友宏 梁志辉 王志成 《水产科学》 CAS 北大核心 2012年第10期597-601,共5页
对疑患病毒性神经坏死症、身体失去平衡、漂浮水面螺旋状游泳、体色发黑、大规模死亡的海水网箱养殖卵形鲳鲹幼鱼,采用组织病理切片观察和分子生物学技术对其病原进行初步分析和跟踪调查。组织病理学结果显示,病鱼脑和眼均呈现神经坏死... 对疑患病毒性神经坏死症、身体失去平衡、漂浮水面螺旋状游泳、体色发黑、大规模死亡的海水网箱养殖卵形鲳鲹幼鱼,采用组织病理切片观察和分子生物学技术对其病原进行初步分析和跟踪调查。组织病理学结果显示,病鱼脑和眼均呈现神经坏死病毒典型的空泡化现象;利用神经坏死病毒特异性引物nest-PCR检测发现,病鱼一扩阳性率100%,摄食游泳正常鱼一扩和二扩阳性率均为46.67%,显示港区苗种多自身携带病毒株;序列比对显示该病毒株属于赤点石斑神经坏死病毒基因型;对神经坏死病毒跟踪发现,成鱼一扩均为阴性,二扩阳性率则高达86.7%。初步认为,外界因子可能作为诱导因子,致使本身携带病毒鱼苗免疫降低致使此次流行病爆发,且神经坏死病毒潜伏于鱼体的时间较长。 展开更多
关键词 卵形鲳鲹 大规模死亡 神经坏死病毒
在线阅读 下载PDF
石斑鱼病害防治
18
作者 崔立勇 李国浩 郑安仓 《齐鲁渔业》 2011年第7期31-33,共3页
本文结合国内外资料介绍了近年来石斑鱼养殖过程中发现的主要疾病及其防治方法,供广大业者参考。 1石斑鱼苗培育过程常见病害 1.1病毒 石斑鱼苗培育过程,极易遭受病毒性病原的侵害,而简称为NNV的病毒性神经坏死症(Nervous Necro... 本文结合国内外资料介绍了近年来石斑鱼养殖过程中发现的主要疾病及其防治方法,供广大业者参考。 1石斑鱼苗培育过程常见病害 1.1病毒 石斑鱼苗培育过程,极易遭受病毒性病原的侵害,而简称为NNV的病毒性神经坏死症(Nervous Necrosis Virus),是造成石斑鱼苗培育中经常发生的主要病毒性疾病。神经坏死病毒(NNV)主要感染寸苗前期的多种类石斑鱼苗,感染后的鱼体出现异常泳姿, 展开更多
关键词 石斑鱼 病害防治 病毒神经坏死 病毒性病原 病毒性疾病 鱼苗培育 神经坏死病毒 防治方法
石斑鱼神经坏死病毒RNA干扰的转染条件优化与效果分析 预览 被引量:1
19
作者 黄桂菊 喻达辉 +4 位作者 柳明 潘俐玲 王晓宁 曾令兵 龙华 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期 93-98,共6页
克隆了石斑鱼神经坏死病毒(Nervous necrosis virus,NNV)的衣壳蛋白(Major capsid protein,MCP)基因序列并构建了绿色荧光蛋白(EGFP)基因与MCP基因的融合真核表达载体pEGFP-MCP,设计了3对针对MCP基因序列的小片段干扰性RNA(Small... 克隆了石斑鱼神经坏死病毒(Nervous necrosis virus,NNV)的衣壳蛋白(Major capsid protein,MCP)基因序列并构建了绿色荧光蛋白(EGFP)基因与MCP基因的融合真核表达载体pEGFP-MCP,设计了3对针对MCP基因序列的小片段干扰性RNA(Small interfering RNA,siRNA)序列(NNV-001、NNV-002、NNV-003),开展了转染方法、转染剂量与转染效果的研究,用脂质体转染法将pEGFP-MCP和不同剂量的siRNA共转染导入黑头呆鱼肌肉(FHM)细胞.结果表明,用无血清培养基转染、4-6 h后换液的转染方法,比不换液、只将转染混合物代替同体积培养基的转染方法效率高;当质粒的转染量为50、70、100和150 ng时,100 ng的转染量为最合适;在pEGFP-MCP与siRNA共转染组,3对siRNA序列都有干扰效果,均能干扰绿色荧光蛋白的表达,其中NNV-002效果最好.当siRNA终浓度为200 nmol/L时,显示出了较好的沉默效果. 展开更多
关键词 石斑鱼 神经坏死病毒 衣壳蛋白基因 RNA干扰
在线阅读 下载PDF
石斑鱼神经坏死病毒传播途径阻断的初步研究 预览 被引量:9
20
作者 林克冰 方琼珊 +4 位作者 吴建绍 周宸 何丽斌 林琪 王涵生 《福建水产》 2011年第5期 15-19,共5页
本文报告了斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)苗种培育中亲鱼、卵、饵料等几个关键环节的病毒携带检测以及几种药物对病毒的消除效果的试验。用RT—PCR法检测斜带石斑鱼亲鱼的粪便、卵、仔鱼、稚鱼,饵料轮虫、桡足类中都有检出神经... 本文报告了斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)苗种培育中亲鱼、卵、饵料等几个关键环节的病毒携带检测以及几种药物对病毒的消除效果的试验。用RT—PCR法检测斜带石斑鱼亲鱼的粪便、卵、仔鱼、稚鱼,饵料轮虫、桡足类中都有检出神经坏死病毒(nervous necrosis virus,NNV)。聚维酮碘5—10mg/L浸泡卵20min、浸泡轮虫和桡足类30min,盐酸吗啉胍3~5mg/L浸泡卵30min、浸泡轮虫和桡足类40min,聚维酮碘5mg/L+盐酸吗啉胍3mg/L浸泡卵20min、浸泡轮虫和桡足类30min可有效灭活所携带的神经坏死病毒活性。 展开更多
关键词 斜带石斑鱼 神经坏死病毒 传播途径 阻断
在线阅读 下载PDF
上一页 1 2 4 下一页 到第
使用帮助 返回顶部 意见反馈