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比较三种免疫分析法检测微囊藻毒素-LR 预览 被引量:1
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作者 张艺 黄飚 +2 位作者 赵春城 钮伟民 金坚 《环境卫生学杂志》 2015年第5期479-482,共4页
目的评估微囊藻毒素-LR(MC-LR)的时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)、纳米均相时间分辨荧光免疫分析(NH-TRFIA)和酶联免疫分析(ELISA)三种免疫检测方法。方法通过比较包被板、反应步骤、信号系统和试剂用量,分析反应条件的差异;通过... 目的评估微囊藻毒素-LR(MC-LR)的时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)、纳米均相时间分辨荧光免疫分析(NH-TRFIA)和酶联免疫分析(ELISA)三种免疫检测方法。方法通过比较包被板、反应步骤、信号系统和试剂用量,分析反应条件的差异;通过分析灵敏度、精密度和准确性,比较上述方法的性能指标;通过检测实际样品,评估方法的可靠性。结果 NH-TRFIA反应时间最短,试剂消耗量最少,灵敏度最高,量程宽;TRFIA信号最强,稳定性佳;三种方法精密度高,相对标准差均小于15%。三种方法检测实际样品与高效液相色谱法的分析结果差异无统计学意义,认为可靠。结论 TRFIA和NH-TRFIA,技术优势明显,应用前景广阔。 展开更多
关键词 微囊藻毒素-LR 时间分辨荧光免疫分析 纳米时间分辨荧光免疫分析 酶联免疫
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基于ELISA、TRFIA及AlphaScreen技术的血管内皮生长因子受体3拮抗剂筛选模型的构建及比较 被引量:2
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作者 王柯 杨润林 +3 位作者 徐娟 周彬 朱岚 黄飚 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期238-243,共6页
血管内皮生长因子受体3(VEGFR-3)为淋巴管特异标记物,与肿瘤淋巴管生成和转移具有明显的相关性,VEGFR-3胞内域的酪氨酸激酶(TK)直接参与了胞内信号转导途径,因此VEGFR-3 TK抑制剂可能成为抑制肿瘤淋巴道转移的有效药物。采用大肠杆... 血管内皮生长因子受体3(VEGFR-3)为淋巴管特异标记物,与肿瘤淋巴管生成和转移具有明显的相关性,VEGFR-3胞内域的酪氨酸激酶(TK)直接参与了胞内信号转导途径,因此VEGFR-3 TK抑制剂可能成为抑制肿瘤淋巴道转移的有效药物。采用大肠杆菌成功表达人源VEGFR-3酪氨酸激酶(VEGFR-3 TK),并以其为靶点,分别构建了基于ELISA,TR-FIA及AlphaScreen技术的高通量药物筛选模型,并从反应条件、方法学参数及相关性等方面对这三种模型进行了评估及比较。AlphaScreen采用均相反应系统,反应速度最快。TRFIA和AlphaScreen由于采用了稀土离子作为标记物,其灵敏度和检测范围大大高于ELISA,且自动化程度高。样品检测结果表明,三种方法的相关性较好,其中TRFIA和AlphaS-creen技术适用于大规模药物筛选,具有很好的应用前景。 展开更多
关键词 血管内皮生长因子受体3 酪氨酸激酶 酶联吸附分析 时间分辨荧光免疫分析 纳米时间分辨荧光免疫分析
小鼠肿瘤坏死因子ELISA、TRFIA及ALPHAScreen检测方法的建立及评估 被引量:3
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作者 王柯 张艺 +4 位作者 张珏 周彬 马智鸿 朱岚 黄飚 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期152-155,166共5页
目的分别建立ELISA、TRFIA及ALPHAScreen检测小鼠肿瘤坏死因子(mTNF-α)的方法,对3种检测技术进行评估。方法采用两株针对mTNF-α不同表位的单克隆抗体,分别构建双抗体夹心法mTNF-α-ELISA、mTNF-α-TRFIA、mT—NF-α-ALPHAScreen... 目的分别建立ELISA、TRFIA及ALPHAScreen检测小鼠肿瘤坏死因子(mTNF-α)的方法,对3种检测技术进行评估。方法采用两株针对mTNF-α不同表位的单克隆抗体,分别构建双抗体夹心法mTNF-α-ELISA、mTNF-α-TRFIA、mT—NF-α-ALPHAScreen,对以上3种检测方法进行反应动力学,方法学参数和相关性的比较。结果ALPHAScreen采用均相反应系统,反应速度最快。TRFIA和ALPHAScreen由于采用了稀土离子作为标记物,其灵敏度和检测范围大大高于ELISA。样品检测结果表明,3种方法的相关性较好。结论本文建立的mTNF-α-TRFIA和mTNF-α-ALPHAScreen具有很好的应用前景。 展开更多
关键词 酶联吸附分析 时间分辨荧光免疫分析 纳米时间分辨荧光免疫分析 肿瘤坏死因子
微囊藻毒素-LR的纳米均相时间分辨荧光免疫分析法 被引量:2
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作者 钮伟民 何恩奇 +1 位作者 张艺 黄飚 《环境与健康杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期714-716,共3页
目的建立了微囊藻毒素-LR(MC—LR)的纳米均相时间分辨荧光免疫分析(nano—homogeneous time-resolved fluoroimmunoassay,NHTRFIA)法。方法制备MC—LR抗原包被发光微粒[力口入1mg发光微粒、偶联MC—LR的牛血清白蛋白(MC—LR—BSA... 目的建立了微囊藻毒素-LR(MC—LR)的纳米均相时间分辨荧光免疫分析(nano—homogeneous time-resolved fluoroimmunoassay,NHTRFIA)法。方法制备MC—LR抗原包被发光微粒[力口入1mg发光微粒、偶联MC—LR的牛血清白蛋白(MC—LR—BSA)、人工抗原0.05mg、0.4mol/L氰基硼氢化钠溶液10μl,于37℃避光振荡反应48h;加入0.3mol/L的羧甲氧基胺半盐酸盐溶液(pH=5.0)10μl,以封闭未结合位点,于37℃避光孵育1h后离心];在微孔中加入上述发光微粒、MC—LR标准品或样品、生物素化抗MC—LR单克隆抗体各25μl,于37℃孵育30min,然后加入175μl包被链亲和素的感光微粒于37℃孵育10min,采用纳米均相时间分辨荧光检测仪进行检测。结果该方法所得回归方程为y=-181x^2-6075x+12424(R^2=0.9976),检出限为0.02ng/mL,批内RSD为5.8%~7.2%,批间RSD为9.5%~9.9%,平均回收率为85.0%~120.0%。结论该方法具有特异性强、灵敏度高、稳定性好、操作简便、耗时短、测定范围宽、试剂寿命长的优点,尤其适合于生活饮用水中微量MC—LR的分析。 展开更多
关键词 纳米时间分辨荧光免疫分析 微囊藻毒素-LR 单克隆抗体
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