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松果菊苷固体脂质纳米粒的表征及体外细胞摄取评价 预览
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作者 薛志峰 张兵 +5 位作者 陈静 吴玉梅 卢鹏 张永苗 祁东利 刘志东 《天津中医药大学学报》 CAS 2019年第3期290-295,共6页
[目的]对本实验室前期处方优化的松果菊苷固体脂质纳米粒(ECH-SLN)的物理性质和体外细胞摄取情况进行评价,为今后眼部制剂的改进奠定基础。[方法]根据本实验室前期优化的处方,采用乳化-固化法制备ECH-SLN,运用差示扫描量热法(DSC)及X射... [目的]对本实验室前期处方优化的松果菊苷固体脂质纳米粒(ECH-SLN)的物理性质和体外细胞摄取情况进行评价,为今后眼部制剂的改进奠定基础。[方法]根据本实验室前期优化的处方,采用乳化-固化法制备ECH-SLN,运用差示扫描量热法(DSC)及X射线衍射法(XRD)表征其物理性质,并选取人角膜上皮HCEpiC细胞与人晶状体上皮SRA01/04细胞,对罗丹明123固体脂质纳米粒(Rhodamine123-SLN,Rh123-SLN)进行体外细胞毒性评价及细胞摄取研究。[结果]DSC结果显示仅松果菊苷和物理混合物(空白SLN∶松果菊苷=5∶1)在150℃出现松果菊苷的熔化吸热特征峰,空白SLN、ECH-SLN和物理混合物在110℃和230℃均出现SLN的两个熔化吸热特征峰;XRD结果显示松果菊苷和物理混合物在20°时出现明显的松果菊苷特征峰,空白SLN,ECH-SLN和物理混合物在20°~25°范围均显示SLN的范围特征峰;结果均表明松果菊苷作为药物以分子分散状态被包裹在固体脂质纳米粒(SLN)中;细胞活力影响实验结果显示Rh123-SLN浓度为5.13μg/mL和10.25μg/mL时对两种细胞均无明显毒性,与对照组相比无显著性差异;细胞摄取实验结果表明Rh123溶液不能被细胞所摄取,而Rh123-SLN的细胞摄取量与药物浓度和孵育时间呈正相关。[结论]ECH-SLN能够将松果菊苷递送到眼细胞,这可能为氧化性白内障的治疗提供一种有效的药物递送系统。 展开更多
关键词 松果菊苷 固体脂质纳米粒 人角膜上皮HCEpiC细胞 人晶状体上皮SRA01/04细胞 细胞摄取
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阳离子型纳米载体在递送抗肿瘤药物过程中的细胞转运机制及影响因素的研究概况 预览
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作者 何丽雅 纪优 +3 位作者 周岳茜 卢诗佳 丁宝月 张洁 《中国药房》 CAS 北大核心 2019年第13期1859-1863,共5页
目的:综述阳离子型纳米载体在递送抗肿瘤药物过程中的细胞转运机制及影响因素,为阳离子型纳米载体介导的肿瘤靶向给药系统的设计提供参考。方法:以“阳离子载体”“细胞摄取”“胞内转运”“细胞外排”“Cationic carrier”“Cell uptak... 目的:综述阳离子型纳米载体在递送抗肿瘤药物过程中的细胞转运机制及影响因素,为阳离子型纳米载体介导的肿瘤靶向给药系统的设计提供参考。方法:以“阳离子载体”“细胞摄取”“胞内转运”“细胞外排”“Cationic carrier”“Cell uptake”“Intracellulartransportation”“Exocytosis”等为关键词,组合查询2000年1月-2018年9月收录在中国知网、万方数据、维普网、PubMed、Elsevier等数据库中的相关文献,对阳离子型纳米载体在递送抗肿瘤药物过程中的细胞转运机制及影响因素进行归纳总结。结果与结论:共检索到相关文献488篇,其中有效文献44篇。阳离子型纳米载体在递送抗肿瘤药物过程中的细胞转运过程包括细胞摄取、胞内转运、细胞外排3个过程。细胞摄取机制包括能量依赖的内吞作用和细胞膜打孔,其影响因素有阳离子型纳米载体及其给药系统的粒径、肿瘤细胞的种类;胞内转运机制即阳离子型纳米载体被摄取后部分转运至溶酶体,部分避开溶酶体转运至细胞浆或其他细胞器,其是否转运进入溶酶体主要由内吞途径决定;细胞外排机制即阳离子型纳米载体通过外泌体、溶酶体降解和内质网-高尔基体-细胞膜途径被排出肿瘤细胞,其影响因素有肿瘤细胞种类和阳离子型纳米载体的粒径、形状及其在细胞内的分布。细胞内部分细胞器具有带电荷的膜结构,阳离子型纳米载体可能会与细胞器膜发生静电作用,从而影响其靶向作用,但该作用机制仍需要进一步深入研究,以期为开发靶向性更强、抗肿瘤效果更好的肿瘤靶向给药系统提供参考。 展开更多
关键词 阳离子型纳米载体 细胞摄取 胞内转运 细胞外排 内吞作用 细胞膜打孔 影响因素
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隐丹参酮PEG-PE纳米胶束的制备、细胞摄取及诱导乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡的研究
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作者 彭金丽 喻娟 +1 位作者 段晓鹏 尹桃 《中南药学》 CAS 2019年第6期842-847,共6页
目的制备隐丹参酮PEG-PE纳米胶束,并进行体外评价、细胞摄取及诱导乳腺癌细胞凋亡研究。方法采用薄膜水化法制备隐丹参酮PEG-PE纳米胶束,从体外释药、细胞摄取和细胞凋亡等方面对该药物载体进行系统评价。结果隐丹参酮PEG-PE纳米胶束粒... 目的制备隐丹参酮PEG-PE纳米胶束,并进行体外评价、细胞摄取及诱导乳腺癌细胞凋亡研究。方法采用薄膜水化法制备隐丹参酮PEG-PE纳米胶束,从体外释药、细胞摄取和细胞凋亡等方面对该药物载体进行系统评价。结果隐丹参酮PEG-PE纳米胶束粒径为(16.5±1.1)nm,Zeta电势为-(21.6±0.8)mV,包封率为(85.4±4.9)%,载药量为(5.4±0.3)%。TEM电镜可直观显示隐丹参酮PEG-PE纳米胶束呈形态规则的圆球形结构;采用芘测定法表明PEG-PE纳米胶束的临界胶束浓度(CMC)约为6.1μg·mL^-1;细胞摄取试验结果表明,PEG-PE纳米胶束可以增强药物细胞摄取量,细胞外残留量减少;MTT肿瘤细胞毒性试验结果显示,隐丹参酮PEG-PE纳米胶束对乳腺癌MDAMB-231细胞的增殖抑制率明显优于隐丹参酮。隐丹参酮PEG-PE纳米胶束可以明显促进肿瘤细胞凋亡,提高促凋亡Caspase 3活性和促凋亡蛋白Bax的表达,减少抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,这些结果与游离隐丹参酮的结果比较,差异具有统计学意义。结论隐丹参酮PEG-PE纳米胶束粒径小,释药缓慢,可很大程度地提高隐丹参酮在肿瘤细胞内的摄取量,增强药物的诱导乳腺癌细胞凋亡作用。 展开更多
关键词 PEG-PE纳米胶束 隐丹参酮 细胞摄取 细胞凋亡
雷公藤红素长循环脂质体的制备和体外性质初步研究
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作者 陈欣妍 李歆 +2 位作者 王皓南 胡俊杰 郑国华 《中国新药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期485-491,共7页
目的:制备雷公藤红素长循环脂质体,筛选合适的冻干保护剂,并对其体外性质进行初步研究。方法:采用薄膜分散法制备雷公藤红素长循环脂质体,以粒径和包封率为考察指标,优化制备处方并筛选合适的冻干保护剂;采用透析法考察体外释放行为;HPL... 目的:制备雷公藤红素长循环脂质体,筛选合适的冻干保护剂,并对其体外性质进行初步研究。方法:采用薄膜分散法制备雷公藤红素长循环脂质体,以粒径和包封率为考察指标,优化制备处方并筛选合适的冻干保护剂;采用透析法考察体外释放行为;HPLC法测定HepG2细胞的雷公藤红素细胞摄取量;MTT法评价细胞毒性。结果:最优处方为超声强度15%(10 min);磷脂与胆固醇质量比10∶1;药物与脂质质量比1∶30;DSPE-PEG摩尔百分比5. 4%。制得雷公藤红素长循环脂质体粒径为(143. 2±2. 4) nm,包封率为(97. 3±1. 4)%,形态较均一且在4℃可稳定放置20 d。蔗糖相比于海藻糖和甘露醇具有更好的冻干保护作用,其与总脂质量比为1∶1时,冻干复溶后雷公藤红素的包封率在90%以上。在37℃、pH 7. 4的释放介质中,雷公藤红素长循环脂质体36 h的累积释放率只有30%左右,约为游离雷公藤红素组的一半;与Hep G2细胞孵育4 h后,雷公藤红素长循环脂质体组的细胞摄取量为34. 5 ng·μg-1,是游离组的5. 3倍;与HepG2细胞孵育24 h后,测得雷公藤红素长循环脂质体IC50值为0. 83μg·mL-1,降低到游离组的1/3。结论:本研究成功制备了一种稳定、形态均一、分散较好、包封率高的长循环雷公藤红素脂质体,该脂质体在体外可以延缓药物释放,提高细胞摄取量,增强细胞毒性。 展开更多
关键词 雷公藤红素 长循环脂质体 薄膜分散法 体外释放 细胞摄取 细胞毒性
附子毒性生物碱的肝脏摄取机制 预览
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作者 从娇娇 张雷 +2 位作者 覃晓慧 张峻颖 吴春勇 《医药导报》 CAS 北大核心 2019年第6期711-717,共7页
目的 探讨附子主要毒性生物碱成分乌头碱、新乌头碱和次乌头碱的肝脏摄取转运机制。方法 以HepG2细胞为体外模型,进行细胞摄取研究,并用液相色谱-质谱串联(LC-MS/MS)法测定细胞内的药物浓度。结果 HepG2细胞对乌头碱、新乌头碱和次乌头... 目的 探讨附子主要毒性生物碱成分乌头碱、新乌头碱和次乌头碱的肝脏摄取转运机制。方法 以HepG2细胞为体外模型,进行细胞摄取研究,并用液相色谱-质谱串联(LC-MS/MS)法测定细胞内的药物浓度。结果 HepG2细胞对乌头碱、新乌头碱和次乌头碱的摄取具有温度、浓度和pH依赖性,化学解耦联剂FCCP和能量抑制剂叠氮化钠可显著抑制乌头碱、新乌头碱和次乌头碱的细胞摄取。有机阳离子药物如奎尼丁、维拉帕米、吡拉明、苯海拉明及金刚烷胺可显著抑制3种生物碱的摄取,但有机阳离子转运蛋白(OCTs)、有机阳离子/肉毒碱转运蛋白(OCTNs)、多药及毒素外排转运蛋白(MATEs)和质膜单胺转运蛋白(PMAT)的典型底物或抑制剂对附子生物碱的细胞摄取没有抑制作用。结论 附子毒性生物碱进入肝细胞以主动转运为主,新型有机阳离子/质子逆向转运蛋白可能是其进入肝脏的分子基础。 展开更多
关键词 附子 生物碱 毒性 细胞摄取 有机阳离子/质子逆向转运蛋白 HEPG2细胞
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沙蚕蛋白酶的荧光标记及细胞摄取机制研究
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作者 杲亚许 丁国芳 +5 位作者 杨最素 余方苗 黄芳芳 唐云平 陈艳 陈锐 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2019年第2期243-255,共13页
该文利用FITC对沙蚕蛋白酶(NAP)进行荧光标记,并通过薄层色谱法、红外光谱法、紫外光谱法及荧光光谱法对标记物进行表征,紫外分光光度法计算标记度。通过测定NAP与FITCNAP的酶促反应动力学参数来比较NAP在标记前后的活性,同时应用MTT法... 该文利用FITC对沙蚕蛋白酶(NAP)进行荧光标记,并通过薄层色谱法、红外光谱法、紫外光谱法及荧光光谱法对标记物进行表征,紫外分光光度法计算标记度。通过测定NAP与FITCNAP的酶促反应动力学参数来比较NAP在标记前后的活性,同时应用MTT法考察NAP标记前后对NCI-H1299细胞毒性的影响。流式细胞术研究NCI-H1299细胞摄取FITC-NAP的机制,荧光显微镜定性观察NCI-H1299细胞对FITC-NAP的摄取。结果表明,每分子标记物约含1.78分子FITC,其最佳荧光激发波长为490 nm、发射波长为515 nm;荧光标记后NAP的活性未受到显著影响;NCI-H1299细胞对FITC-NAP的摄取与药物浓度、作用时间呈正相关;氧化苯砷组的荧光强度低于FITC-NAP组且有极显著差异(P<0.01),因此NAP的摄取机制为内吞。进一步研究发现, NCI-H1299细胞摄取NAP受到网格蛋白依赖性内吞和小窝/脂筏蛋白介导的内吞共同作用。荧光显微镜观察发现,随着时间的增加,更多的细胞摄入FITC-NAP,且主要分布在细胞膜及细胞质中,细胞核中未见分布。 展开更多
关键词 沙蚕蛋白酶 FITC 荧光标记 细胞摄取 药物动力学
聚乙烯亚胺作为核酸疫苗佐剂的研究进展 预览
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作者 宋丽 熊丹 +1 位作者 焦新安 潘志明 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期660-666,671共8页
疫苗是防控病原感染的最有效方式之一,通常需要添加佐剂才能确保其高效的免疫应答。聚乙烯亚胺(polyethyleneimine,PEI)是一种被广泛研究的阳离子聚合物,其传统用途是作为核酸转染试剂或DNA疫苗运载工具。近年来越来越多的研究表明PEI... 疫苗是防控病原感染的最有效方式之一,通常需要添加佐剂才能确保其高效的免疫应答。聚乙烯亚胺(polyethyleneimine,PEI)是一种被广泛研究的阳离子聚合物,其传统用途是作为核酸转染试剂或DNA疫苗运载工具。近年来越来越多的研究表明PEI也能作为一种佐剂。本文回顾了PEI的理化性质及其在不同领域的应用,阐述了PEI具有免疫活化功能的细胞和分子机制。另外,本文总结了PEI作为疫苗佐剂在体内和临床试验中的应用,并讨论了其在未来应用中的前景和挑战。 展开更多
关键词 聚乙烯亚胺 疫苗佐剂 细胞摄取 抗原递呈 免疫激活
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葛根素PEG-PLGA纳米胶束的体外评价、细胞摄取及抗急性心肌缺血的研究
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作者 刘新义 蒋中标 +2 位作者 罗洁 李健和 胡雄彬 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期2244-2250,共7页
PUE@PEG-PLGA纳米胶束具有粒径小,载药量高,释药缓慢等优良特点。TEM电镜结果表明PUE@PEG-PLGA纳米胶束呈核壳状圆球型结构;采用芘测定法测定PEG-PLGA纳米胶束的临界胶束浓度(CMC)大约为4.8 mg·L-1;激光共聚焦试验表明,PEG-PLGA纳... PUE@PEG-PLGA纳米胶束具有粒径小,载药量高,释药缓慢等优良特点。TEM电镜结果表明PUE@PEG-PLGA纳米胶束呈核壳状圆球型结构;采用芘测定法测定PEG-PLGA纳米胶束的临界胶束浓度(CMC)大约为4.8 mg·L-1;激光共聚焦试验表明,PEG-PLGA纳米胶束可以增强香豆素-6细胞摄取量,且可聚集在线粒体周围,细胞外药物残留量定量结果也可间接证实,PEG-PLGA纳米胶束可以促进药物的细胞摄取。采用结扎冠状动脉制备急性心肌缺血模型大鼠,再随机分为假手术组,模型组,PUE组和PUE@PEG-PLGA高、中、低剂量组,在结扎后5 min各给药组尾iv给药。监测心电图ST段变化,测定血清肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、天冬氨酸转氨酶(AST)和丙二醛(MDA)水平,并测量心肌梗死面积。PUE和PUE@PEG-PLGA纳米胶束均能降低升高的ST段,降低血清中CK,LDH,AST,MDA水平,减少心肌梗死面积;其中PUE@PEG-PLGA中、高剂量组的药效明显强于PUE组,低剂量组基本与PUE组等效。PUE@PEG-PLGA纳米胶束很大程度上提高PUE心肌细胞摄取量,增强药物抗急性心肌缺血作用,减少给药剂量。 展开更多
关键词 PEG-PLGA纳米胶束 葛根素 线粒体 细胞摄取 抗急性心肌缺血
叶酸偶联表阿霉素脂质体的构建及其增强侵袭性乳腺癌细胞摄取和核定位效应的研究
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作者 卜英子 沐黎敏 +1 位作者 刘磊 吕万良 《中国药学:英文版》 CAS CSCD 2018年第4期229-240,共12页
侵袭性乳腺癌对蒽环类药物表现出较强的抗药性,其原因与药物在癌细胞摄取减少、难以定位到细胞核相关。本研究旨在构建一种叶酸偶联表阿霉素脂质体,将新合成的叶酸-脂质衍生物修饰到脂质体上,以增强侵袭性乳腺癌细胞的药物摄取和细... 侵袭性乳腺癌对蒽环类药物表现出较强的抗药性,其原因与药物在癌细胞摄取减少、难以定位到细胞核相关。本研究旨在构建一种叶酸偶联表阿霉素脂质体,将新合成的叶酸-脂质衍生物修饰到脂质体上,以增强侵袭性乳腺癌细胞的药物摄取和细胞核共定位,从而达到清除癌细胞的效果。研究以侵袭性乳腺癌细胞MDA-MB-435S细胞为模型展开。本研究合成了新型叶酸-PEG2000-DSPE共聚物,并构建了叶酸偶联表阿霉素脂质体,载药脂质体的平均粒径约为100nm;体外试验表明,同对照组相比,叶酸偶联表阿霉素脂质体表现出最强的癌细胞摄取效应和癌细胞核定位效应;并且,构建的载药脂质体表现最强的杀伤侵袭性乳腺癌细胞效应、抑制侵袭性乳腺癌细胞损伤修复效应和对体外乳腺癌肿瘤球最强的穿透效应。因此,构建的叶酸偶联表阿霉素脂质体可通过增加侵袭性乳腺癌细胞摄取及细胞核共定位效应,达到杀伤侵袭性乳腺癌细胞的效果。通过后续开发,叶酸偶联表阿霉素脂质体可望成为一种治疗侵袭性乳腺癌的新型制剂,该研究也为侵袭性乳腺癌治疗提供了潜在的新策略。 展开更多
关键词 叶酸偶联脂质体 表阿霉素 细胞摄取 细胞核共定位 侵袭性乳腺癌
三伏贴中芥子碱及细辛挥发油促进HaCaT细胞摄取延胡索乙素的作用及其机制研究 被引量:2
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作者 覃梦瑶 阮文懿 +5 位作者 翟苑好 曹思思 于恺悦 王茵萍 吴传斌 徐月红 《中草药》 CSCD 北大核心 2018年第2期400-405,共6页
目的 研究三伏贴中芥子碱硫氰酸盐(SPT)及细辛挥发油(AEO)促进角质形成细胞HaCaT摄取延胡索乙素(THP)的作用及其机制。方法 采用MTT法检测SPT、AEO和THP对HaCaT细胞活力的影响;根据方中THP自发荧光的特点,采用激光共聚焦扫描显微... 目的 研究三伏贴中芥子碱硫氰酸盐(SPT)及细辛挥发油(AEO)促进角质形成细胞HaCaT摄取延胡索乙素(THP)的作用及其机制。方法 采用MTT法检测SPT、AEO和THP对HaCaT细胞活力的影响;根据方中THP自发荧光的特点,采用激光共聚焦扫描显微镜可视化观察SPT及AEO促进HaCaT细胞摄取THP的作用,并用HPLC法测定HaCaT细胞中THP的量;以1,6-二苯基-1,3,5-己三烯(DPH)为荧光探针,利用荧光偏振技术研究SPT、AEO及THP对HaCaT细胞的细胞膜流动性的影响。结果 SPT及AEO均能显著促进THP被HaCaT细胞摄取,且AEO的促进作用优于SPT。SPT、THP、AEO分别作用于DPH标记的HaCaT细胞后,AEO组HaCaT细胞的荧光偏振度和细胞膜微黏度均显著降低,细胞流动性增加,证明AEO是通过提高细胞膜流动性从而促进HaCaT细胞摄取THP,而THP、SPT均不能增加细胞膜流动性。结论 三伏贴中SPT及AEO均可促进HaCaT细胞摄取THP,AEO促进机制与其提高细胞膜流动性相关,而SPT的促进作用不是通过增加细胞膜流动性实现,其具体机制有待进一步探明。 展开更多
关键词 三伏贴 芥子碱 细辛挥发油 延胡索乙素 细胞摄取 细胞膜流动性
氨基葡萄糖功能化量子点的制备与表征
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作者 王月静 周许 +2 位作者 龚涛 张志荣 符垚 《华西药学杂志》 CAS CSCD 2018年第4期343-345,共3页
目的制备氨基葡萄糖修饰的量子点(QDs—GlcN),并初步考察其体外性质。方法利用氨基葡萄糖的氨基与量子点表面的羧基酰化反应制备QDs—GlcN,考察其电位、粒径、荧光发射和紫外吸收光谱、细胞的毒性及细胞摄取情况。结果QDs和QDs—Glc... 目的制备氨基葡萄糖修饰的量子点(QDs—GlcN),并初步考察其体外性质。方法利用氨基葡萄糖的氨基与量子点表面的羧基酰化反应制备QDs—GlcN,考察其电位、粒径、荧光发射和紫外吸收光谱、细胞的毒性及细胞摄取情况。结果QDs和QDs—GlcN的Zeta电位分别为-30.4、-26.2mV;QDs和QDs—GlcN呈类球形,粒径的分布均一,平均粒径约10nm;QDs和QDs—GlcN的紫外吸收光谱和荧光发射光谱无显著性差异;0~4nmol·L^-1。的QDs和QDs—GlcN对大鼠肾小管上皮细胞NRK52E未见明显毒性,且QDs—GlcN在NRK52E细胞的摄取效率显著高于QDs。结论QDs—GlcN细胞的相容性良好,氨基葡萄糖的修饰可显著提高靶细胞对量子点的摄取效率,可为。肾病的靶向诊断及治疗提供参考。 展开更多
关键词 氨基葡萄糖 量子点 葡萄糖转运蛋白2 肾小管上皮细胞 合成 表征 紫外吸收光谱 细胞摄取
外排体载体给药系统的制备和体外性质的初步研究
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作者 柯欢 龚涛 +1 位作者 张志荣 孙逊 《华西药学杂志》 CAS CSCD 2018年第2期143-145,共3页
目的 从小鼠树突状细胞(DC2.4)中提取外排体并载入盐酸阿霉素,研究外排体的细胞摄取能力与肿瘤细胞杀伤效率。方法 使用超速离心的方法从DC2.4细胞的培养基上清液中提取外排体,并通过透射电子显微镜验证提取结果;通过电穿孔法载入盐... 目的 从小鼠树突状细胞(DC2.4)中提取外排体并载入盐酸阿霉素,研究外排体的细胞摄取能力与肿瘤细胞杀伤效率。方法 使用超速离心的方法从DC2.4细胞的培养基上清液中提取外排体,并通过透射电子显微镜验证提取结果;通过电穿孔法载入盐酸阿霉素并测定其粒径和Zeta电位;用超速离心法进行纯化,测定其载药量及包封率;选用小鼠乳腺癌细胞(4T1)为细胞模型,考察制剂的摄取能力和杀伤力。结果 成功制备了以内源性物质外排体为载体的给药系统,相比于传统给药系统脂质体,在4T1细胞中的入胞能力以及杀伤力都有显著性增加。结论 以外排体为载体的新型给药系统在未来的抗肿瘤治疗领域具有巨大的潜力。 展开更多
关键词 外排体 载药系统 超速离心法 盐酸阿霉素 电穿孔法 细胞摄取 乳腺癌细胞 抗肿瘤
蟾毒灵纳米混悬液对HepG2细胞增殖及细胞摄取研究
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作者 朱立俏 盛华刚 +3 位作者 韩真真 牛余珍 张元元 王绍花 《山东中医杂志》 2018年第6期517-520,共4页
目的:制备蟾毒灵纳米混悬液(BU-NS)并研究其制剂学特点,以及该制剂对人肝癌HepG2细胞增殖及细胞摄取的影响。方法:采用反溶剂沉淀法制备BU-NS。用粒度仪测定其粒径,用透射电镜(TEM)进行形态学考察。采用MTT法检测蟾毒灵原药(BU)... 目的:制备蟾毒灵纳米混悬液(BU-NS)并研究其制剂学特点,以及该制剂对人肝癌HepG2细胞增殖及细胞摄取的影响。方法:采用反溶剂沉淀法制备BU-NS。用粒度仪测定其粒径,用透射电镜(TEM)进行形态学考察。采用MTT法检测蟾毒灵原药(BU)和BU-NS对HepG2细胞的增殖抑制作用,运用高效液相色谱法(HPLC)对药物细胞摄取进行定量研究。结果:BU-NS的平均粒径为(390.0±8.1)nm,多分散系数为0.22±0.04,Zeta电位为(-9.05±1.21)mV。TEM观察发现BU-NS呈不规则球形,粒径与粒度仪所测结果基本一致。短期物理稳定性研究表明,BU-NS在4℃下避光保存15 d后基本保持稳定。细胞增殖抑制作用实验表明,4 h内BU-NS对HepG2细胞增殖的抑制作用明显强于BU原药。细胞摄取研究发现BU-NS可增加HepG2细胞对BU的摄取。结论:BU-NS具有增强抑制HepG2细胞增殖与细胞摄取的作用,纳米混悬技术可为蟾毒灵的进一步开发提供新的思路。 展开更多
关键词 蟾毒灵 纳米混悬液 HEPG2细胞 细胞摄取
基于Si纳米粒子拉曼成像的HepG2细胞凋亡检测及其活性分析 被引量:1
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作者 林凡佳 吴冠毅 +3 位作者 吴莎 张珠峰 石清华 周骏 《光学与光电技术》 2018年第4期37-45,共9页
根据细胞的生物吞噬特性,通过研究人肝癌细胞(HepG2)内吞Si纳米粒子的拉曼成像特性,提出了一种新的细胞凋亡检测方法。首先,在Si纳米粒子与细胞共培养过程中,对HepG2细胞施加不同浓度的凋亡诱导剂——黄连素,然后对细胞内吞的Si纳米... 根据细胞的生物吞噬特性,通过研究人肝癌细胞(HepG2)内吞Si纳米粒子的拉曼成像特性,提出了一种新的细胞凋亡检测方法。首先,在Si纳米粒子与细胞共培养过程中,对HepG2细胞施加不同浓度的凋亡诱导剂——黄连素,然后对细胞内吞的Si纳米粒子在520cm^-1处的特征拉曼峰检测成像,通过分析细胞区域拉曼像图像素的平均信号强度,表征细胞内吞Si纳米粒子的能力,再对照流式细胞术的检测结果从而获得在不同浓度细胞凋亡诱导剂作用下的细胞凋亡率。结果表明,随着黄连素浓度的增加,细胞区域拉曼像图的平均信号强度逐渐减弱,说明在HepG2细胞凋亡过程中线粒体的活性不断减弱,能量代谢受阻,造成细胞对Si纳米粒子的内吞能力减弱。特别地,在高浓度(150μM)黄连素作用下,细胞区域内520cm^-1的特征拉曼峰十分微弱,说明此时HepG2细胞基本丧失内吞Si纳米粒子的能力。因此,基于细胞内吞Si纳米粒子拉曼成像方法,可以对不同环境下的体外细胞进行凋亡检测,将在细胞毒理研究和药效评价方面具有潜在应用。 展开更多
关键词 Si纳米粒子 特征拉曼峰 拉曼成像 细胞凋亡 细胞摄取
普朗尼克对多西他赛耐药的人乳腺癌细胞毒性及摄取的影响
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作者 邓成程 李倩 +1 位作者 唐军 尹东锋 《中国药师》 CAS 2018年第8期1325-1330,共6页
目的:考察不同型号的普朗尼克(pluronic)对人乳腺癌细胞(MCF-7)及对多西他赛耐药的人乳腺癌细胞(MCF-7/DTX)毒性及摄取的影响,筛选出最优型号,以供后续制备普朗尼克载多西他赛胶束。方法:选取L61、P85、P105、P123、F68、F127共... 目的:考察不同型号的普朗尼克(pluronic)对人乳腺癌细胞(MCF-7)及对多西他赛耐药的人乳腺癌细胞(MCF-7/DTX)毒性及摄取的影响,筛选出最优型号,以供后续制备普朗尼克载多西他赛胶束。方法:选取L61、P85、P105、P123、F68、F127共6种型号普朗尼克,采用CCK-8法测定其对MCF-7及MCF-7/DTX的细胞毒性,高效液相色谱(HPLC)法测定两种细胞对多西他赛的摄取量。结果:F68、F127对MCF-7及MCF-7/DTX的毒性较弱,F127的肿瘤细胞毒性最弱;而L61、P85、P105、P123对两种细胞的毒性相对较强,且L61的肿瘤细胞毒性最强。在浓度为50~1 000μg·ml-1的范围内,普朗尼克的肿瘤细胞毒性与其浓度成正相关,浓度越高,毒性越强。在24~72 h内,同一浓度的普朗尼克,作用时间越长,毒性越强,细胞毒性与作用时间也成正相关。6种型号普朗尼克均可促进MCF-7对多西他赛的摄取,仅有P85、P105、P123可促进MCF-7/DTX的摄取,而L61、F68、F127对耐药细胞摄取量基本无促进作用,其中P123促进两种肿瘤细胞摄取多西他赛的能力最强。结论:HLB值小的普朗尼克,肿瘤细胞毒性更强。随着浓度升高,作用时间增长,其毒性增强。P85、P105、P123可促进耐药细胞对多西他赛的摄取。 展开更多
关键词 普朗尼克 多西他赛 细胞毒性 细胞摄取
荧光标记的米糠多糖及其细胞摄入研究 预览
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作者 潘显虎 虞鸿玉 +1 位作者 吴淑恒 刘梁 《食品研究与开发》 北大核心 2018年第10期1-6,66共7页
多糖是一类具有良好生物活性的天然大分子物质,但其结构中缺少易于检测的发光基团,给其研究带来诸多不便。为解决这一问题,试验尝试制备荧光探针标记的米糠多糖,并进一步探究其细胞摄入和安全性。利用米糠多糖还原性末端与罗丹明B活泼... 多糖是一类具有良好生物活性的天然大分子物质,但其结构中缺少易于检测的发光基团,给其研究带来诸多不便。为解决这一问题,试验尝试制备荧光探针标记的米糠多糖,并进一步探究其细胞摄入和安全性。利用米糠多糖还原性末端与罗丹明B活泼的氨基反应制备米糠多糖-罗丹明B化合物(Rice Bran Polysaccharide-Rhodamine B,RBP-Rh B);利用米糠多糖还原性末端与酪胺上的氨基共价偶联,通过氨基与异硫氰酸荧光素(Fluorescein isothiocyanate,FITC)发生亲核反应,得到米糠多糖-FITC化合物(Rice Bran Polysaccharide-Fluorescein isothiocyanate,RBP-FITC)。对两种样品分别进行红外光谱、紫外光谱和荧光光谱表征,结果表明米糠多糖成功标记上荧光探针;对RBP-Rh B和RBP-FITC的荧光取代度的测定中,紫外分光光度法测定的荧光取代度分别为0.7%和0.2%,荧光分光光度法测定的荧光取代度分别为1.0%和0.3%;同时试验通过荧光显微镜和MTT法分别研究了荧光标记多糖的细胞摄入和细胞毒性,结果表明标记后的多糖可被细胞有效摄入且细胞毒性低。 展开更多
关键词 米糠多糖 荧光标记 细胞摄取
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卵清蛋白纳米结构脂质载体的制备及理化性质的研究
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作者 喻姣 孙逊 《华西药学杂志》 CAS CSCD 2018年第1期20-23,共4页
目的 制备并优化卵清蛋白纳米结构脂质载体(Ova-NLC)的处方,并考察其理化性质和在体外细胞上的摄取能力。方法 采用复乳法制备Ova-NLC,以粒径、多分散指数(PDI)和Zeta电位为考察指标,采用单因素实验优化处方;用超滤法测定制剂的包... 目的 制备并优化卵清蛋白纳米结构脂质载体(Ova-NLC)的处方,并考察其理化性质和在体外细胞上的摄取能力。方法 采用复乳法制备Ova-NLC,以粒径、多分散指数(PDI)和Zeta电位为考察指标,采用单因素实验优化处方;用超滤法测定制剂的包封率和载药量;并考察Ova-NLC的体外释放和在DC2.4细胞上的摄取能力。结果 Ova-NLC的平均粒径为181.77±5.13 nm,PDI为0.15±0.03,Zeta电位为-22.3±0.62 mV。超滤法测得的包封率为86.54%±2.13%,载药量为18.03%±1.65%。体外释放72 h药物的累积释放量为85.77%±3.43%,在DC2.4细胞上无血无抗摄取1 h的摄取率为90.80%±4.72%。结论 复乳法制备Ova-NLC的方法可行,体外具有一定的缓释作用且有较高的细胞摄取能力。 展开更多
关键词 卵清蛋白 纳米结构脂质载体 复乳法 体外释放 细胞摄取 单因素实验 超滤法 理化性质
植物来源的磷脂酰胆碱可介导抗肺纤维化小RNA(HJT-sRNA-m7)进入哺乳动物细胞 被引量:1
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作者 杜涧超 梁竹 +14 位作者 许剑涛 赵妍 李晓芸 张艳丽 赵丹丹 陈茹萱 刘洋 Trupti Joshi 常佳慧 王志清 张延旭 朱锦东 刘强 许东 蒋澄宇 《中国科学:生命科学》 CSCD 北大核心 2018年第4期469-481,共13页
摘要肺纤维化是慢性进行性疾病,死亡率高,临床上除肺移植之外尚无其他明显有效治疗手段.本研究发现,来源于中药大花红景天(Rhodiolacrenu肠砌)的小RNA,HJT-sRNA-m7,可以显著降低纤维化因子的表达,在细胞和动物水平上均可改善... 摘要肺纤维化是慢性进行性疾病,死亡率高,临床上除肺移植之外尚无其他明显有效治疗手段.本研究发现,来源于中药大花红景天(Rhodiolacrenu肠砌)的小RNA,HJT-sRNA-m7,可以显著降低纤维化因子的表达,在细胞和动物水平上均可改善纤维化症状.此外,本研究组在红景天熬制的汤汁中提取鉴定了一百多种脂质,其中大部分脂质也同时存在于中药蒲公英(Taraxacum mongolicum)、穿心莲Andrographis paniculata)和金银花(10nicera,aponi-ca)中.选取其中两种磷脂酰胆碱PC(18:0/18:2)和PC(16:0/18:2),使之与植物小RNA形成脂质体,发现其可促进HJT-sRNA-m7等小RNA进入人肺和胃肠道细胞,降低纤维化靶基因的表达.实验结果揭示了植物来源小RNA通过脂质复合物进入人体的可能途径,为siRNA的临床应用提供了新的口服递送途径. 展开更多
关键词 磷脂 细胞摄取 抗纤维化 红景天小RNA
包载荧光探针香豆素-6的pH敏感型聚合物胶束的制备与评价
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作者 赵善科 尹美林 +2 位作者 郑岩 史淑丹 孙玉琦 《中国医药工业杂志》 CSCD 北大核心 2018年第11期1559-1566,共8页
制备了含腙键的p H敏感型嵌段共聚物聚乙二醇单甲醚-聚乳酸(mPEG-HZ-PLA),采用酸碱滴定法测定其p Ka值,并用芘荧光探针法测定该共聚物的临界胶束浓度(CMC)。用薄膜分散-超声法制备了负载香豆素-6(C6)的聚合物胶束,并对胶束的理化... 制备了含腙键的p H敏感型嵌段共聚物聚乙二醇单甲醚-聚乳酸(mPEG-HZ-PLA),采用酸碱滴定法测定其p Ka值,并用芘荧光探针法测定该共聚物的临界胶束浓度(CMC)。用薄膜分散-超声法制备了负载香豆素-6(C6)的聚合物胶束,并对胶束的理化性质进行表征,同时以不含腙键的聚乙二醇单甲醚-聚乳酸(mPEG-PLA)为对照,考察载C6的mPEGHZ-PLA胶束在不同pH条件下的释放行为。最后,考察了肿瘤细胞SMCC-7721对载C6的mPEG-HZ-PLA胶束的摄取情况。结果表明,mPEG-HZ-PLA的pKa值为6.25,CMC为0.78×10-3g/L;2种载药胶束呈球形且分布均匀,平均粒径均约为100 nm,包封率均大于85%。不同pH值介质对载药胶束的体外释放行为有显著影响。在pH 5.0介质中mPEGHZ-PLA胶束释放速率加快,24h的累积释放率达73.6%,说明mPEG-HZ-PLA聚合物载体材料具有较好的pH敏感释药行为。mPEG-HZ-PLA胶束的细胞摄取结果表明,随着时间的推移,肿瘤细胞对其的摄取逐渐增强,提示该胶束作为抗肿瘤药物的靶向传递系统具有较好的应用前景。 展开更多
关键词 PH敏感性 腙键 聚合物胶束 香豆素-6 细胞摄取
同时包载人参3种成分的透明质酸修饰的纳米脂质载体的制备及表征
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作者 孙爽 尚尔雨 +5 位作者 肖洪彬 鞠爱霞 郭玉岩 李永吉 于新 吕邵娃 《中草药》 CSCD 北大核心 2018年第16期3815-3820,共6页
目的制备包载人参3种成分的透明质酸(hyaluronic acid,HA)修饰的纳米脂质载体(HA-OUR-NLC),并对其进行表征。方法采用纳米脂质体(nanostructured lipid,NLC)包载人参中3种难溶性有效成分齐墩果酸(oleanolic acid,OA)、熊果酸(u... 目的制备包载人参3种成分的透明质酸(hyaluronic acid,HA)修饰的纳米脂质载体(HA-OUR-NLC),并对其进行表征。方法采用纳米脂质体(nanostructured lipid,NLC)包载人参中3种难溶性有效成分齐墩果酸(oleanolic acid,OA)、熊果酸(ursolic acid,UA)、人参皂苷Rg3(ginsenoside Rg3,Rg3)制备纳米脂质载体(OUR-NLC);然后采用HA作为靶向因子,经电荷吸附作用进行修饰。采用动态透析法进行释放度实验。通过流式细胞仪及MTT法考察HA-OUR-NLC对SMMC-7721细胞的细胞摄取及细胞毒性情况。结果采用溶剂超声分散法制备的OUR-NLC外观呈现淡蓝色乳光。并通过电荷吸附法成功制备了HA-OUR-NLC。其形态圆整,分布均匀。体外释放表明其具有一定的缓释作用。摄取实验表明HA-OUR-NLC能被SMMC-7721细胞所摄取。MTT实验结果表明,HA-OUR-NLC对SMMC-7721细胞增殖具有抑制作用。结论采用溶剂超声分散法制备的HA-OUR-NLC具有较好的理化性质和稳定性,且具备一定的缓释长效作用。 展开更多
关键词 人参 纳米脂质载体 制备工艺 体外释放 细胞摄取 齐墩果酸 熊果酸 人参皂苷RG3
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