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四种芽孢杆菌生防功能初探 预览
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作者 常华瑜 黄淑芬 +4 位作者 宋旭 刘泽锟 顾李成 彭桂香 谭志远 《农业开发与装备》 2019年第7期98-101,共4页
以实验室分离保存的西姆芽孢杆菌H1401和地衣芽孢杆菌H2202、解淀粉芽孢杆菌H4112、贝莱斯芽孢杆菌H4309为例,探究生防应用中的差异特性.采用MSA-CAS检测培养基检测产铁载体功能,用平板对峙法检测其对两种致病菌尖孢镰刀菌古巴生理4号... 以实验室分离保存的西姆芽孢杆菌H1401和地衣芽孢杆菌H2202、解淀粉芽孢杆菌H4112、贝莱斯芽孢杆菌H4309为例,探究生防应用中的差异特性.采用MSA-CAS检测培养基检测产铁载体功能,用平板对峙法检测其对两种致病菌尖孢镰刀菌古巴生理4号小种和立枯丝核菌的抑制力,用PCR扩增技术检测抗病相关基因,用高效液相色谱法检测4株供试菌株发酵产物中目标抗病脂肽类化合物.结果显示,仅H1401菌株具有分泌铁载体功能;均有抑制两种致病菌的能力;均有抗病相关基因等.研究表明,H4309菌株和H1401菌株具有较好的拮抗植物致病菌的功能.菌株H1401和H4309可以作为潜在的工程菌株加以开发利用. 展开更多
关键词 芽孢杆菌 铁载体 抗病基因 化合物
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南极土壤芽孢杆菌的分离鉴定及其防治玉米细菌性褐腐病的研究 预览 被引量:2
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作者 朱碧春 顾丽 +4 位作者 李正 伍辉军 顾沁 吴黎明 高学文 《南京农业大学学报》 CSCD 北大核心 2017年第4期641-648,共8页
[目的]本研究旨在从南极土壤中筛选防治玉米细菌性褐腐病的芽孢杆菌菌株,为该病害的防治提供菌株资源。[方法]从南极长城站地震台附近的企鹅聚居地土壤中分离芽孢杆菌。结合16S rDNA及gyr B基因序列对分离到的芽孢杆菌进行鉴定。借助平... [目的]本研究旨在从南极土壤中筛选防治玉米细菌性褐腐病的芽孢杆菌菌株,为该病害的防治提供菌株资源。[方法]从南极长城站地震台附近的企鹅聚居地土壤中分离芽孢杆菌。结合16S rDNA及gyr B基因序列对分离到的芽孢杆菌进行鉴定。借助平板抑菌试验筛选对玉米细菌性褐腐病病原菌具有拮抗效果的生防芽孢杆菌。通过田间防治试验,筛选具有较好生防效果的芽孢杆菌。利用MALDI-TOF-MS对芽孢杆菌产生的抗菌物质脂肽化合物进行鉴定。[结果]通过16S rDNA及gyr B基因序列对分离自南极的23株芽孢杆菌进行鉴定,其中解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)9株,地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)14株。借助平板抑菌试验,筛选获得抑菌效果明显的2株B.amyloliquefaciens菌株EZ15-07、EZ15-09和2株B.licheniformis菌株EZ01-05、EZ15-08。田间试验结果表明,菌株EZ15-07和EZ01-05对玉米细菌性褐腐病的防治效果分别为59.3%和55.3%。对这2个菌株发酵液的MALDI-TOF-MS检测表明,菌株EZ15-07能产生Surfactin和Bacillomycin D 2种脂肽化合物,菌株EZ01-05能产生Bacillomycin D和Fengycin 2种脂肽化合物。[结论]由南极土壤分离获得的菌株EZ15-07和EZ01-05对玉米细菌性褐腐病防治效果显著,2个菌株均具有较好的田间应用潜力。 展开更多
关键词 南极 芽孢杆菌 gyrB基因 生防菌筛选 化合物
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盐生海芦笋抗菌内生细菌的筛选与鉴定 预览 被引量:4
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作者 冉火苗 孔望君 +2 位作者 蒋会芳 史雅凝 辛志宏 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期79-86,共8页
以抗菌活性为指标,从野生海芦笋中筛选与鉴定具有抗菌活性的内生细菌。采用平板分离与斜面纯化的方法,从海芦笋中分离到13株内生细菌,经过对8株病原菌抗菌活性测试,菌株HLS-7和HLS-8对大肠杆菌(Escherichia coli)、金色葡萄球菌(Stap... 以抗菌活性为指标,从野生海芦笋中筛选与鉴定具有抗菌活性的内生细菌。采用平板分离与斜面纯化的方法,从海芦笋中分离到13株内生细菌,经过对8株病原菌抗菌活性测试,菌株HLS-7和HLS-8对大肠杆菌(Escherichia coli)、金色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis)和白假丝酵母(Candida albicans)均显示了较强的抑制活性,其抑菌圈直径均〉10 mm;对枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、产气肠杆菌(Enterobacter aerogenes)、单增李斯特菌(Listeria monocytogenes)和肺炎克雷伯菌(Klebsiella penumoniae)均显示了中等抗菌活性,表现出广谱的抑菌活性。PCR扩增这2株菌的16S r DNA区域,单克隆后测序进行同源性分析,构建系统发育树,结合形态学观察和生理生化实验,将菌株HLS-7和HLS-8分别鉴定庆生芽孢杆菌(Bacillus qingshengii)和甲基营养型芽孢杆菌(Bacillus methylotrophicus)。通过电喷雾质谱分析这2株菌的发酵产物,结果显示,菌株HLS-7可产生脂肽类化合物Fenycin和Iturin,菌株HLS-8可产生脂肽类化合物Iturin,提示这2株菌的抗菌活性可能源于脂肽化合物。 展开更多
关键词 海芦笋 内生细菌 抑菌活性 筛选鉴定 化合物
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degQ和sfp提高芽孢杆菌泛革素产量及其机理研究 预览 被引量:3
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作者 李响 伍辉军 +2 位作者 张阳 鲁晴辉 高学文 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2015年第2期221-228,共8页
非核糖体合成途径产生的脂肽化合物泛革素(fengycin)在芽孢杆菌防治真菌病害中起着重要作用。本研究克隆了来自解淀粉芽孢杆菌模式菌株FZB42的sfp和来自枯草芽孢杆菌模式菌株168的多效调控因子deg Q,构建了p P43-deg Q、p MK3-sfp和p ... 非核糖体合成途径产生的脂肽化合物泛革素(fengycin)在芽孢杆菌防治真菌病害中起着重要作用。本研究克隆了来自解淀粉芽孢杆菌模式菌株FZB42的sfp和来自枯草芽孢杆菌模式菌株168的多效调控因子deg Q,构建了p P43-deg Q、p MK3-sfp和p P43-deg Q-sfp 3个表达载体,分别转入不能产生泛革素的168菌株中,得到3株工程菌株。抑菌试验表明,168-deg Q-sfp活菌及其脂肽化合物提取物均能显著抑制油菜菌核病菌的生长,而168、168-deg Q和168-sfp不具备该活性。质谱检测表明,只有168-deg Q-sfp能产生泛革素。进一步的荧光定量反转录PCR检测结果表明,菌株168-deg Q-sfp的泛革素合成酶基因簇pps ABCDE的表达量是其他菌株的6-16倍,而菌株168-deg Q和168-sfp与菌株168无明显差异。该研究表明deg Q和sfp 2个功能基因共同存在时能提高泛革素合成酶基因簇的表达量,进而提高泛革素的产量。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 化合物 泛革素 degQ SFP
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HS6101不同时间给药对环磷酰胺所致小鼠造血功能损伤的恢复作用 预览 被引量:3
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作者 邢爽 申星 +5 位作者 熊国林 柳晓兰 杨萌 代常亮 刘晓宇 余祖胤 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期303-308,共6页
目的探讨HS6101(6101)不同时间给药对环磷酰胺(CTX)致小鼠造血功能损伤的恢复作用。方法 103只5~6周龄雄性ICR小鼠,分为CTX对照组、6101预防组、6101治疗组、6101预防+治疗组共4组。CTX损伤小鼠建模方法为腹腔注射CTX100mg/kg,1次... 目的探讨HS6101(6101)不同时间给药对环磷酰胺(CTX)致小鼠造血功能损伤的恢复作用。方法 103只5~6周龄雄性ICR小鼠,分为CTX对照组、6101预防组、6101治疗组、6101预防+治疗组共4组。CTX损伤小鼠建模方法为腹腔注射CTX100mg/kg,1次/d,连续注射3d。6101给药剂量为27μg/只,单次皮下注射0.2ml。6101预防组给药时间为CTX首次注射前1h,6101治疗组给药时间为CTX末次注射后1h,6101预防+治疗组给药时间为CTX首次注射前1h+CTX末次注射后1h,CTX对照组注射生理盐水0.2ml/只。分别于CTX首次注射前1d和注射后3、5、7、9、11、13、15、17d取尾静脉血10μl检测血常规,比较6101各给药组与CTX对照组间的差异。另取30只雄性ICR小鼠,在上述分组基础上增加正常对照组,6只/组,建模与给药方法同上,各组分别于CTX首次注射后4、9d处死3只小鼠,取左侧股骨分离单个核细胞进行骨髓造血祖细胞集落培养,取右侧股骨做常规病理组织学观察。结果腹腔注射CTX后小鼠外周白细胞、中性粒细胞、淋巴细胞、红细胞和血小板数均迅速减少。6101预防组小鼠外周血白细胞、中性粒细胞和淋巴细胞数最低值明显高于CTX对照组,且其第3天的检测值高于6101治疗组及6101预防+治疗组;6101预防组外周血红细胞在第3、5、7天均明显高于CTX对照组,第3天高于6101治疗组和6101预防+治疗组;6101预防组血小板数第3天时明显高于其他3组,而6101治疗组与6101预防+治疗组则明显低于CTX对照组,血小板开始恢复后6101预防给药促恢复作用更明显。第4天和第9天的骨髓造血细胞集落培养结果显示,6101预防组、治疗组和预防+治疗组的粒巨噬系、巨核系、爆式红系和红系细胞集落数均高于CTX组;第4天骨髓病理组织学观察结果也表明6101各给药组小鼠骨髓组织结构优于CTX对照组。实验中6101治疗组和预防+治疗组小鼠出现死亡(分别为3/18� 展开更多
关键词 HS6101 化合物 环磷酰胺 小鼠 造血系统
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油菜菌核病生防芽孢杆菌的分离鉴定及其脂肽化合物分析 被引量:26
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作者 薛鹏琦 刘芳 +3 位作者 乔俊卿 伍辉军 冯致科 高学文 《植物保护学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期127-132,共6页
采用平板拮抗筛选,分别从西藏日喀则地区和拉萨地区杂草根围土壤中筛选到2个对油菜菌核病菌有显著拮抗活性的芽孢杆菌菌株RJGP16和YBWC43。通过生理生化鉴定、16S rDNA序列分析和BOX-PCR指纹图谱分析,鉴定菌株RJGP16为萎缩芽孢杆菌Bacil... 采用平板拮抗筛选,分别从西藏日喀则地区和拉萨地区杂草根围土壤中筛选到2个对油菜菌核病菌有显著拮抗活性的芽孢杆菌菌株RJGP16和YBWC43。通过生理生化鉴定、16S rDNA序列分析和BOX-PCR指纹图谱分析,鉴定菌株RJGP16为萎缩芽孢杆菌Bacillus atrophaeus,菌株YBWC43为解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens。离体叶片试验结果显示,菌株RJGP16和YBWC43对油菜菌核病菌防治效果分别为50.24%和100.00%。脂肽化合物种类分析显示,菌株RJGP16产生脂肽化合物表面活性素和芬枯草菌素,菌株YBWC43产生杆菌霉素D和芬枯草菌素。表明菌株RJGP16和YBWC43对油菜菌核病的防治效果与其产生的脂肽化合物有关。 展开更多
关键词 油菜菌核病 芽孢杆菌 16S RDNA BOX-PCR指纹图谱 化合物
可可西里低温适生拮抗芽孢杆菌的筛选鉴定及脂肽化合物分析 被引量:10
7
作者 谢永丽 高学文 《应用生态学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期149-155,共7页
极端环境特殊微生物资源研究和开发具有广阔的应用前景和研究意义.对分离筛选自青海可可西里境内植被根围的8株在4和10℃条件下生长良好的低温适生芽孢杆菌进行鉴定分析.结果表明:通过生理生化特征分析、rep-PCR指纹图谱分析、16SrDNA... 极端环境特殊微生物资源研究和开发具有广阔的应用前景和研究意义.对分离筛选自青海可可西里境内植被根围的8株在4和10℃条件下生长良好的低温适生芽孢杆菌进行鉴定分析.结果表明:通过生理生化特征分析、rep-PCR指纹图谱分析、16SrDNA及gyrB基因序列分析鉴定,8株供试菌株分别为莫哈韦芽孢杆菌(Bacillus mojavensis)3株,解淀粉芽孢杆菌(B.amyloliquefaciens)1株和简单芽孢杆菌(B.simplex)4株.采用平板对峙试验从中筛选到4株对油菜菌核病原真菌(Sclerotinia sclerotiorum)及水稻白叶枯病原细菌(Xanthomonas oryzaepv.oryzae)均具有显著拮抗活性的生防菌株;采用MALDI-TOF-MS质谱分析生防菌株的拮抗活性物质,结果显示菌株KKD1(B.mojavensis)产生脂肽类化合物泛革素和表面活性素,菌株KKD2(B.amyloliquefaciens)产生脂肽类化合物伊枯草菌素A、泛革素和表面活性素,推断生防菌株的拮抗活性可能与脂肽化合物的合成及分泌有关.该研究为低温适生性芽孢杆菌生物肥料和生物农药的研发提供了菌株资源. 展开更多
关键词 低温适生芽孢杆菌 rep-PCR指纹图谱分析 16S RDNA序列分析 gyrB序列分析化合物
海洋枯草芽孢杆菌HS-A38产直链脂肽活性物质的初步检测 预览 被引量:5
8
作者 张欢 丛丽娜 +3 位作者 侯英敏 李爱民 谢三群 王丹 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期37-42,共6页
从海参肠道中分离得到了一株海洋枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)HS—A38,将其发酵上清液经盐酸沉淀、有机溶剂萃取得到具有广谱抗菌活性的代谢物质。采用薄层层析和茚三酮显色检测到4种物质,分别命名为化合物1、2、3和4;应用层析... 从海参肠道中分离得到了一株海洋枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)HS—A38,将其发酵上清液经盐酸沉淀、有机溶剂萃取得到具有广谱抗菌活性的代谢物质。采用薄层层析和茚三酮显色检测到4种物质,分别命名为化合物1、2、3和4;应用层析板覆盖指示菌的生物自显影技术对其抗菌活性成分进行追踪、检测,结果发现化合物1和2具有显著抑制弧菌的作用。进一步检测分析表明,化合物1、2和4具有很强的热稳定性,初步推断它们属于直链的脂肽类化合物,并且这4种物质出现在不同的发酵代谢时期,这将为研究群体效应提供基础检测依据。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆(Bacillus subtilis) 抗菌活性 自显影 直链化合物
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产抗大肠杆菌脂肽化合物枯草芽孢杆菌筛选及脂肽化合物的分离纯化
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作者 庄国宏 宋涛 +4 位作者 陆金荣 王效禹 张琪 江国托 秦爱建 《中国家禽》 北大核心 2019年第13期20-25,共6页
采用致病性大肠杆菌作为主要指示菌,运用杯碟法对不同分离株的枯草芽孢杆菌代谢产物进行抑菌效果筛选。在确定GD株作为抗菌物质研究的基础上,采用GD株发酵液,经大孔吸附树脂XD吸附、洗脱,将获取的抗菌产物样品与表面活性素标准品进行薄... 采用致病性大肠杆菌作为主要指示菌,运用杯碟法对不同分离株的枯草芽孢杆菌代谢产物进行抑菌效果筛选。在确定GD株作为抗菌物质研究的基础上,采用GD株发酵液,经大孔吸附树脂XD吸附、洗脱,将获取的抗菌产物样品与表面活性素标准品进行薄层色谱(TLC)层析、分析、比较。运用液质联用(LC-MS)分析技术对代谢产物样品中各组分的含量、分子量及结构进行分析。结果显示:GD株在发酵过程中产生的抗菌物质是以表面活性素A、B和C等同系物为主组成的脂肽混合物。表面活性剂含量达77.39%,分子量主要分布在1 036.6933~994.6449之间。 展开更多
关键词 致病性大肠杆菌 枯草芽孢杆菌 抗菌 化合物 表面活性素
地衣素及其生理活性功能 预览
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作者 张吉鹃 《中国饲料添加剂》 2019年第1期4-8,共5页
本文在介绍芽孢杆菌在其代谢中所产生的地衣素的理化性质、化学结构的基础上,综述了地衣素的生理活性功能,并与枯草素、伊枯草素、丰原素进行了比较。指出地衣素比枯草素等具有更强的表面活性、抑菌活性、抗病毒活性和溶血活性,但由于... 本文在介绍芽孢杆菌在其代谢中所产生的地衣素的理化性质、化学结构的基础上,综述了地衣素的生理活性功能,并与枯草素、伊枯草素、丰原素进行了比较。指出地衣素比枯草素等具有更强的表面活性、抑菌活性、抗病毒活性和溶血活性,但由于其得率低、生产成本高,限制了其应用。最后从菌种改造、发酵原料及优化工艺三个方面提出了地衣素的增产策略。 展开更多
关键词 地衣素 枯草素 化合物 表面活性 抑菌活性
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解淀粉芽孢杆菌G9R-3脂肽类化合物抑制香蕉枯萎病菌机理及防效评价 预览
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作者 周维 田丹丹 +5 位作者 杨扬 韦弟 李朝生 覃柳燕 刘挺燕 黄素梅 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2019年第8期1810-1816,共7页
[目的]G9R-3是从抗病香蕉品种“桂蕉9号”健康植株根部中分离得到的一株具有较强抑制香蕉枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.cubense race 4,Foc4)活性的内生解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。开展其脂肽类化合物抑制香蕉... [目的]G9R-3是从抗病香蕉品种“桂蕉9号”健康植株根部中分离得到的一株具有较强抑制香蕉枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.cubense race 4,Foc4)活性的内生解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。开展其脂肽类化合物抑制香蕉枯萎病菌活性机理及防效评价研究,为利用该菌株大田防控香蕉枯萎病提供参考。[方法]结合基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)和液相色谱-质谱联用(LC-MS)分析脂肽类化合物类型,采用Landy培养基发酵并使用大孔树脂抽提法提取菌株脂肽类物质,结合室内平板、台盼蓝染色、盆栽灌根接种进行活性检测与防效评价。[结果]该菌株产生的脂肽类化合物种类包括表面活性素Surfactin、泛革素Fengycin和伊枯草菌素iturins 3个种类。活性检测表明,当粗提物浓度为300μg/mL时对香蕉枯萎病菌Foc4菌丝生长抑制率达58.91%,孢子萌发抑制率达69.80%。室内盆栽防效评价试验表明,浓度为1 mg·mL-1 G9R-3脂肽类粗提物香蕉枯萎病防效可达76.53%。[结论]G9R-3产生的脂肽类化合物具有防控香蕉枯萎病的潜力,其生防基质为破坏Foc4细胞膜并引起菌丝肿大和畸形,并抑制其孢子萌发。 展开更多
关键词 内生解淀粉芽孢杆菌G9R-3 化合物 抑菌机理 防效评价
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枯草芽胞杆菌8-32对病原真菌的拮抗效应及对植物促生长机制
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作者 王欢 贾田惠 +3 位作者 杨可欣 时向哲 高同国 朱宝成 《农业生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期908-918,共11页
植物真菌病害是造成各国农业损失的主要原因之一,受该病害影响,全球粮食及其他农作物减产高达20%。前期工作中,本实验室筛选到1株对引起大豆根腐病的尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)有较强拮抗作用的枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis) 8-... 植物真菌病害是造成各国农业损失的主要原因之一,受该病害影响,全球粮食及其他农作物减产高达20%。前期工作中,本实验室筛选到1株对引起大豆根腐病的尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)有较强拮抗作用的枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis) 8-32,生防、促生效果显著。为解析枯草芽胞杆菌8-32的拮抗和促生机制,并进一步开发应用该菌种,本实验验证了该菌株对植物病原菌孢子萌发、芽管及菌丝生长的抑制作用;根据已报道基因,采用PCR方法扩增其拮抗基因,高效液相色谱-质谱(high performance liquid chromatography-mass spectrometry, HPLC-MS)法鉴定其产生的拮抗物质,并检测该菌株产生的促生物质。结果表明,菌株8-32可抑制多种病原菌孢子的萌发和芽管的伸长,最大抑制率分别为100%和95.40%,还可以导致病原菌菌丝断裂;PCR扩增得到与拮抗相关的基因4个,分别为枯草杆菌素A合成酶基因(subtilosin A gene, sboA)、枯草杆菌蛋白酶基因(subtilisin gene, qk)、丰原素合成酶基因(fengycin gene, FenB)和假定蛋白合成基因(hypothetical protein yndj gene, yndj);HPLC-MS结果表明,菌株8-32主要通过伊枯草菌素(iturin)家族发挥抑菌效果,并且其具有较高的吲哚乙酸(indolo acetic acid, IAA)产生能力,发酵72 h后上清液中IAA含量为45.29 mg/L。本研究为进一步在分子水平上研究枯草芽胞杆菌的生物防治提供了科学基础,为菌株8-32的应用提供理论支持。 展开更多
关键词 枯草芽胞杆菌 拮抗机理 孢子萌发 芽管生长 化合物
地衣素及其在养猪上的应用潜力 预览
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作者 张吉鹍 《猪业科学》 2019年第1期88-90,共3页
文章通过介绍芽孢杆菌在其代谢中所产生的地衣素的理化性质、化学结构的基础上,综述了地衣素的生理活性功能,并与枯草素、伊枯草素、丰原素进行了比较。指出地衣素比枯草素等具有更强的表面活性、抑菌活性、抗病毒活性和溶血活性,是替... 文章通过介绍芽孢杆菌在其代谢中所产生的地衣素的理化性质、化学结构的基础上,综述了地衣素的生理活性功能,并与枯草素、伊枯草素、丰原素进行了比较。指出地衣素比枯草素等具有更强的表面活性、抑菌活性、抗病毒活性和溶血活性,是替代抗生素最具潜力的产品之一。但由于其得率低、生产成本高,限制了其应用。最后文章从菌种改造、发酵原料及优化工艺3个方面提出了地衣素的增产措施。 展开更多
关键词 地衣素 枯草素 化合物 表面活性 抑菌活性
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内生解淀粉芽孢杆菌BEB17脂肽类和聚酮类化合物的抑菌活性分析 被引量:1
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作者 桑建伟 杨扬 +3 位作者 陈奕鹏 蔡吉苗 陆翠梅 黄贵修 《植物病理学报》 CSCD 北大核心 2018年第3期402-412,共11页
BEB17是本实验室从健康香蕉植株根部中分离得到的一株具有较强抑制真菌活性的内生解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。在本研究中,我们通过PCR检测多个脂肽类和聚酮类化合物的合成相关基因,并结合基质协助激光解吸附离子化... BEB17是本实验室从健康香蕉植株根部中分离得到的一株具有较强抑制真菌活性的内生解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。在本研究中,我们通过PCR检测多个脂肽类和聚酮类化合物的合成相关基因,并结合基质协助激光解吸附离子化-飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)和液相色谱-质谱联用(LC-MS)分析,发现该菌株能产生表面活性素Surfactin、泛革素Fengycin和伊枯草菌素Iturin三类脂肽类化合物以及Bacillibactin、Difficidin和Bacillaene三类聚酮类化合物。通过比较两种发酵培养基(M9和Landy培养基)和两种提取方法(酸沉淀法和大孔树脂抽提法),结果发现酸沉淀法提取较为高效,Landy培养基更易于BEB17脂肽类和聚酮类化合物的发酵。活性检测表明,两种提取方法提取的粗提物对香蕉枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.cubense race 4,Foc4)都具有较好的抑制作用,其中大孔树脂抽提法提取的物质抑制效果最好,当其浓度为300μg·m L^-1时抑制率可达80.75%,说明该方法制备的粗提物的活性物质含量相对较高。进一步研究表明,该提取物能引起Foc4菌丝膨大和畸形,并抑制其孢子萌发。分析表明,该提取物对Foc4细胞膜具有破坏作用。 展开更多
关键词 内生解淀粉芽孢杆菌 化合物 聚酮类化合物 抑菌活性
福建海参内源微生物多样性分析及益生菌抑菌机理初探 预览
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作者 李智 黄晓山 +1 位作者 郑宝东 邓凯波 《食品工业科技》 CSCD 北大核心 2018年第12期137-141,170共6页
为探明福建吊笼养殖海参内源微生物群落结构及抑菌作用机理,采用16S r DNA序列同源性比对手段对分离自海参肠道中的优势菌株进行多样性分析,测定其中益生菌及其代谢产物脂肽类化合物的抑菌能力,并采用薄层色谱(TLC)初步确定其抑菌成... 为探明福建吊笼养殖海参内源微生物群落结构及抑菌作用机理,采用16S r DNA序列同源性比对手段对分离自海参肠道中的优势菌株进行多样性分析,测定其中益生菌及其代谢产物脂肽类化合物的抑菌能力,并采用薄层色谱(TLC)初步确定其抑菌成分。结果表明,福建吊笼养殖海参肠道中共分离出95株优势菌株,包括31株潜在益生菌、37株潜在致病菌及27株普通肠道菌。微生物群落结构分析发现,高丰度假交替单胞菌属和不动杆菌属以及低丰度芽孢杆菌属是福建海参体表产生病灶的可能原因之一。以其中8株典型致病菌为指示菌,筛选出两株抑菌谱广且抑菌能力较强的益生菌菌株—解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)YD1及枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)YK5,其脂肽类代谢产物的抑菌作用明显,初步确定其中的抑菌成分均为含有亲水性成分的环脂肽类化合物。本研究为开发新型微生态制剂和功能性益生菌提供了重要的理论支持。 展开更多
关键词 海参 群落结构 化合物 抑菌机理
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Bacillomycin D发酵与纯化工艺优化及其抑菌活性初步研究 被引量:2
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作者 顾康博 张道敬 +1 位作者 罗远婵 李元广 《农药学学报》 CSCD 北大核心 2017年第4期465-473,共9页
为建立高纯度bacillomycin D(杆菌霉素D)脂肽的可放大制备工艺,促进其在农用抗生素领域应用价值的开发,经分离纯化及分子结构鉴定,确定了海洋源解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens TYg 3-2所产活性化合物为bacillomycin D脂肽... 为建立高纯度bacillomycin D(杆菌霉素D)脂肽的可放大制备工艺,促进其在农用抗生素领域应用价值的开发,经分离纯化及分子结构鉴定,确定了海洋源解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens TYg 3-2所产活性化合物为bacillomycin D脂肽类抗生素;选择精制过的天然培养基(酵母提取物和蛋白胨),与组分明确的速效碳源、氮源(葡萄糖和硫酸铵)组成复合培养基,结合响应面优化调整培养基配方,建立了bacillomycin D发酵水平高达990 mg/L的5 L罐发酵工艺,其20.62 mg/(L·h)的比生产速率远高于文献报道的10.23 mg/(L·h);在高品质原料基础上,发酵液经菌液分离、酸化沉淀、甲醇浸提、乙醚沉淀、大孔树脂吸附及硅胶柱层析工艺,可高效制备纯度达94.72%的样品。针对所制备的高纯度bacillomycin D样品进行了抑菌活性初步研究,证实其可离体拮抗德氏霉菌、玉米弯孢霉、稻绿核菌和长柄链格孢,并通过盆栽试验证实了bacillomycin D能提升同源芽孢杆菌TYg 3-2的防效,500 mg/L的bacillomycin D与4×10~6 CFU/mL的TYg 3-2菌体混合施用,对黄瓜炭疽病的防效可达95.3%,优于单独施用bacillomycin D(78.4%)和菌体(0)的防治效果。研究初步探索了bacillomycin D在农用抗生素领域的开发价值,同时其高纯度脂肽可放大制备工艺的建立至关重要,不仅能在保全生产菌(其芽孢为生防菌剂原料)的同时从其发酵液中分离和纯化目标脂肽,以促成对农用抗生素价值的深入研究,也能够满足中国农药登记相关毒理学试验对样品的要求(纯度〉85%的克量级样品),其结果可为芽孢杆菌源脂肽类抗生素的研究与开发提供参考。 展开更多
关键词 杆菌霉素D 化合物 解淀粉芽孢杆菌 发酵工艺优化 可放大纯化工艺 抑菌活性
23株芽胞杆菌及其脂肽类化合物抑菌活性比较 预览 被引量:2
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作者 刘邮洲 陈夕军 +3 位作者 尹小乐 梁雪杰 乔俊卿 刘永锋 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2017年第3期533-542,共10页
为了比较9个种23株芽胞杆菌及其脂肽类化合物抑菌活性差异,本研究以选择性培养基检测各菌株胞外酶分泌物,采用酸沉淀法提取各菌株脂肽类化合物,用对峙生长法分别测定芽胞杆菌及其脂肽类化合物的抑菌活性,高效液相色谱串联质谱(LC-MS)... 为了比较9个种23株芽胞杆菌及其脂肽类化合物抑菌活性差异,本研究以选择性培养基检测各菌株胞外酶分泌物,采用酸沉淀法提取各菌株脂肽类化合物,用对峙生长法分别测定芽胞杆菌及其脂肽类化合物的抑菌活性,高效液相色谱串联质谱(LC-MS)进行脂肽类化合物种类分析。结果表明:23株芽胞杆菌均能产生蛋白酶,枯草芽胞杆菌PTS-394等9个菌株抑菌能力显著,对尖孢镰刀菌、立枯丝核菌、胶孢炭疽病菌和油菜菌核病菌的抑菌带宽分别为33.4~42.0 mm、34.6~58.2 mm、34.6~40.0 mm和30.1~39.2 mm。枯草芽胞杆菌JND等6个菌株的脂肽类粗提物抑菌作用显著,对尖孢镰刀菌和立枯丝核菌的抑菌带宽分别为26.2~39.4 mm和30.5~34.2 mm。LC-MS检测到有抑菌作用的15株芽胞杆菌的脂肽类化合物种类包括表面活性素家簇、伊枯草素家簇和泛革素家簇。 展开更多
关键词 芽胞杆菌 胞外酶 化合物 抑菌活性
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传统白酒中生物活性物质脂肽类化合物及其产生机制 预览 被引量:2
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作者 郅岩 吴群 徐岩 《酿酒科技》 2017年第10期17-23,共7页
中国传统白酒是独特的天然固态发酵与蒸馏的产物。首次在国际上检测并鉴定了传统白酒中的非挥发性脂肽类化合物。脂肽化合物能够与白酒中的小分子风味物质发生分子间相互作用,影响风味物质的挥发和白酒的风味特征。脂肽化合物的抗菌生... 中国传统白酒是独特的天然固态发酵与蒸馏的产物。首次在国际上检测并鉴定了传统白酒中的非挥发性脂肽类化合物。脂肽化合物能够与白酒中的小分子风味物质发生分子间相互作用,影响风味物质的挥发和白酒的风味特征。脂肽化合物的抗菌生物活性能够天然防治传统白酒发酵过程中的不良微生物污染,对稳定白酒发酵微生物群落结构与功能有重作用。综述了中国传统白酒中脂肽化合物的发现、产生机制和生物活性。 展开更多
关键词 传统白酒 董酒 化合物 白酒风味 活性
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一株萎缩芽胞杆菌YL3的鉴定及其脂肽类化合物分析 预览 被引量:2
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作者 刘邮洲 陈夕军 +3 位作者 梁雪杰 钱亚明 乔俊卿 刘永锋 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2017年第1期142-150,共9页
本研究通过生理生化特征、16S rDNA基因和gyrB基因序列分析对菌株YL3进行种属鉴定,采用室内平板对峙生长法测定其抑菌活性,对草莓枯萎病的田间防效。以选择性培养基检测其分泌的多种胞外酶,以结晶紫染色法检测生物膜的形成,采用酸沉淀... 本研究通过生理生化特征、16S rDNA基因和gyrB基因序列分析对菌株YL3进行种属鉴定,采用室内平板对峙生长法测定其抑菌活性,对草莓枯萎病的田间防效。以选择性培养基检测其分泌的多种胞外酶,以结晶紫染色法检测生物膜的形成,采用酸沉淀法提取菌株YL3脂肽类化合物并进行高效液相色谱串联质谱分析(LC-MS)。研究表明,菌株YL3被鉴定为萎缩芽胞杆菌Bacillus atrophaeus,其对多种植物病原真菌菌丝生长和细菌都具有明显的抑制作用,稀释10和100倍的发酵液对"宁玉"草莓枯萎病的防效分别为82.86%和67.62%。菌株YL3能产生蛋白酶、几丁质酶和嗜铁素,培养3 d后形成大量生物膜。菌株YL3发酵液中脂肽类粗提物对草莓枯萎病菌菌丝生长有抑制作用,随着剂量加大,抑制效果显著。LC-MS检测到菌株YL3脂肽类粗提物中含有表面活性素和泛革素。因此,菌株YL3是一株具有较好生防应用潜力的拮抗菌株。 展开更多
关键词 萎缩芽胞杆菌 草莓枯萎病 化合物
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香草兰生防细菌的筛选、分子鉴定及其抑菌机制的初步研究 预览 被引量:4
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作者 高圣风 刘爱勤 +2 位作者 桑利伟 孙世伟 苟亚峰 《热带农业科学》 2016年第1期41-46,共6页
通过平板对峙法从香草兰根际微生物中筛选出对香草兰根(茎)腐病菌(Fusarium oxysporum)、香草兰疫病菌(Phytophthora nicotianae)和香草兰细菌性软腐病菌(Erwinia carotovora)均有良好抑制效果的生防菌10株。通过16S r DNA序列... 通过平板对峙法从香草兰根际微生物中筛选出对香草兰根(茎)腐病菌(Fusarium oxysporum)、香草兰疫病菌(Phytophthora nicotianae)和香草兰细菌性软腐病菌(Erwinia carotovora)均有良好抑制效果的生防菌10株。通过16S r DNA序列比对及系统发育树分析,其中7株为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus.amyloliquefaciens),2株为枯草芽孢杆菌(B.subtils),1株为甲基营养型芽孢杆菌(B.methylotrophicus)。提取脂肽类化合物进行抑菌分析,发现10株生防菌脂肽类提取物对香草兰根(茎)腐病菌和香草兰疫病菌均有良好的抑制效果,有4株的脂肽类粗提物对香草兰细菌性软腐病菌有强烈的抑制活性。对其中2个菌株脂肽类粗提物进行MALDI-TOF/TOF-MS检测,发现菌株VX2R11产生表面活性素(Surfactin)和伊枯草素A(Iturin A)2种脂肽类化合物,菌株VX2S02仅产生伊枯草素A,推测产生伊枯草素A是菌株VX2R11和VX2S02拮抗香草兰根(茎)腐病菌和疫病菌重要机制;产生表面活性素是菌株VX2R11拮抗香草兰细菌性软腐病菌的重要机制。 展开更多
关键词 香草兰 芽孢杆菌 16S rDNA鉴定 化合物
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