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脱细胞鱼皮口腔引导组织修复膜的制备和评价 预览
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作者 王园园 宋文山 +2 位作者 于德君 代元坤 李八方 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第10期1526-1532,共7页
背景:目前口腔修复膜大多价格昂贵且存在人畜共患病疾病风险,因此需要开发新型口腔修复膜材料。目的:制备鱼皮脱细胞真皮基质,检测其脱细胞有效性、生物力学及生物相容性等,探讨其作为口腔引导组织修复膜的可行性。方法:通过物理法、化... 背景:目前口腔修复膜大多价格昂贵且存在人畜共患病疾病风险,因此需要开发新型口腔修复膜材料。目的:制备鱼皮脱细胞真皮基质,检测其脱细胞有效性、生物力学及生物相容性等,探讨其作为口腔引导组织修复膜的可行性。方法:通过物理法、化学试剂法和生物制剂法相结合的方法对沙鳗鱼皮进行脱细胞处理,制得脱细胞真皮基质材料;利用扫描电子显微镜观察材料的微观形貌;通过苏木精-伊红染色、Masson染色和PAS染色观察材料的组织成分;使用试剂盒检测材料的DNA含量;通过细胞毒性实验和动物皮肤刺激实验检测材料的生物相容性。结果与结论:①制得的鱼皮脱细胞真皮基质材料色泽为白色或偏微黄,有一定强度和韧性;②材料由致密面和疏松面形成,具有双层结构;③细胞得到了很好的脱除,材料几乎全为胶原纤维,无PAS阳性物质;④材料DNA含量明显低于天然鱼皮和市售口腔修复膜;⑤材料细胞毒性极低,对动物无致敏性;⑥结果证实制得的鱼皮脱细胞真皮基质材料有望用于口腔引导组织修复膜的制备。 展开更多
关键词 口腔修复膜 细胞 真皮基质 鱼皮 引导组织修复 细胞毒性 生物相容性 力学性能 口腔材料 组织构建 胶原 生物相容性材料 组织工程
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肝素接枝对血管脱细胞支架材料结构及抗凝效果的影响 预览
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作者 黄淑佩 梁远锋 +4 位作者 郝俊海 刘尚敏 马文韬 李东风 林展翼 《广东医学》 CAS 2019年第10期1362-1366,共5页
目的评价肝素接枝对脱细胞血管支架材料结构的影响,及其作为动静脉造瘘移植物的短期抗凝效果。方法采用猪颈动脉作为血管材料来源,通过除垢剂脱细胞法制备脱细胞血管支架材料,对支架材料管腔内层进行层层自组装肝素接枝,并用HE、Masson... 目的评价肝素接枝对脱细胞血管支架材料结构的影响,及其作为动静脉造瘘移植物的短期抗凝效果。方法采用猪颈动脉作为血管材料来源,通过除垢剂脱细胞法制备脱细胞血管支架材料,对支架材料管腔内层进行层层自组装肝素接枝,并用HE、Masson、EVG、甲苯胺蓝等组织染色和扫描电镜等方法,对支架材料结构及肝素接枝效果进行分析。通过手术开放猪颈部动静脉血管,用半在体动静脉造瘘的实验方法连接血管支架材料,对是否有肝素接枝的不同材料进行3 h的抗凝性能评价。结果层层自组装肝素接枝方法可以在血管支架内层形成均匀的肝素层,对血管脱细胞支架材料的胶原纤维、弹性纤维等基本组织结构无明显影响;脱细胞血管移植物3 h的血栓形成程度,有肝素接枝的材料明显较没有肝素接枝的减轻。结论层层自组装技术肝素接枝后,可以提高脱细胞血管支架材料的短期抗凝效果。 展开更多
关键词 肝素接枝 细胞 血管支架材料 抗凝
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应用Gal抗原缺失小鼠评价可降解异种脱细胞真皮基质的免疫原性
3
作者 陈亮 邵安良 +3 位作者 魏利娜 刘启省 张东刚 徐丽明 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期1370-1378,共9页
目的:采用Gal抗原缺失小鼠评价脱细胞真皮基质及其降解过程中的残余免疫风险。方法:Gal抗原缺失小鼠经兔血预免后,随机分为对照组、T1组、T2组。T1组腿部肌肉间植入牛真皮基质(原材料),T2组肌肉间植入脱细胞真皮基质,对照组进行"... 目的:采用Gal抗原缺失小鼠评价脱细胞真皮基质及其降解过程中的残余免疫风险。方法:Gal抗原缺失小鼠经兔血预免后,随机分为对照组、T1组、T2组。T1组腿部肌肉间植入牛真皮基质(原材料),T2组肌肉间植入脱细胞真皮基质,对照组进行"假手术"操作。在植入后的4、12、52周分别取材,用ELISA方法检测小鼠血清总IgG、IgM含量和血清抗-Gal IgG、IgM水平;用流式细胞仪检测血清IL-4、IL-10、IL-12p40、IFN-γ等细胞因子含量,以及脾淋巴细胞亚型百分比等;进行脾体外淋巴细胞增殖试验,采用CCK-8试剂检测淋巴细胞增殖率;取胸腺、脾脏以及包裹植入物的局部肌肉样本,HE染色后进行组织病理学评价。通过与对照组的比较,进行牛真皮基质原材料和脱细胞真皮基质的免疫毒理学风险评价。结果:与对照组相比,小鼠植入牛真皮基质原材料的T1组小鼠血清抗-Gal IgG含量和体外脾脏淋巴细胞增殖率有统计学显著性差异。T1组小鼠在4周时,血清抗-Gal IgG平均含量是对照组的2倍;植入12周时,血清抗-Gal IgG平均含量继续升高,达到对照组的近7倍,统计学分析均有显著性差异,表明由降解引起的Gal抗原持续暴露或暴露增加,致使小鼠血清抗-Gal IgG含量升高;在植入52周时,血清抗-Gal IgG平均含量回复到对照组水平。植入12周时,T1组小鼠的脾淋巴细胞体外培养3、7d时,淋巴细胞增殖率分别是对照组的211%和243%。组织病理学分析显示T1组牛真皮基质植入后4周时局部反应为重度刺激,12周时为中度刺激,52周时为轻微刺激。植入脱细胞真皮基质的T2组在4、12、52周的不同时点,小鼠血清总IgG、IgM含量,抗-Gal IgG和IgM含量,血清细胞因子,脾淋巴细胞分型和淋巴细胞体外增殖等不同指标的检测结果与对照组相比均无统计学差异;组织病理学分析显示T2组脱细胞真皮基质植入后4周时局部反应为中度刺激,12周时为轻微刺� 展开更多
关键词 Gal抗原缺失小鼠 真皮基质 原材料 细胞 降解 抗-Gal抗体 免疫原性
脱细胞生物支架的研究进展 预览
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作者 范志强 刘雯恩 +3 位作者 周艳芳 李玉玲 杨家华 彭新生 《医学综述》 2019年第14期2788-2793,共6页
在使用脱细胞方法去除组织器官中的细胞成分后,通常仅保留细胞外基质,以此来获得脱细胞生物支架。脱细胞生物支架在组织工程领域有广泛研究,应用于多种组织与器官并取得了良好的效果。脱细胞方法多种多样,在单独使用其中一种方法难以得... 在使用脱细胞方法去除组织器官中的细胞成分后,通常仅保留细胞外基质,以此来获得脱细胞生物支架。脱细胞生物支架在组织工程领域有广泛研究,应用于多种组织与器官并取得了良好的效果。脱细胞方法多种多样,在单独使用其中一种方法难以得到好的脱细胞效果时,可将多种方法结合使用以得到较好的脱细胞效果,但也要注意根据不同组织的特点选择合适的脱细胞方法。获得脱细胞支架后可通过组织学染色等方法检测脱细胞效果及生物相容性等情况。 展开更多
关键词 细胞 细胞外基质 生物支架
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新方法可获得更佳的组织工程小直径血管细胞外基质支架 预览
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作者 蒲磊 潘兴纳 +3 位作者 张静 吴剑 李亚雄 杨应南 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第6期855-862,共8页
背景:获得适宜的支架材料是构建组织工程小直径血管的基础,前期研究发现,非离子型去垢剂的脱细胞效果差,联合应用离子型去垢剂能更有效去除细胞成分。目的:比较不同脱细胞方法制备猪颈动脉脱细胞支架的有效性,探索更适宜的细胞外基质支... 背景:获得适宜的支架材料是构建组织工程小直径血管的基础,前期研究发现,非离子型去垢剂的脱细胞效果差,联合应用离子型去垢剂能更有效去除细胞成分。目的:比较不同脱细胞方法制备猪颈动脉脱细胞支架的有效性,探索更适宜的细胞外基质支架制备方法。方法:取普通猪颈动脉30根,随机分为5组(n=6),其中A组不进行脱细胞处理;B组采用1%十二烷基硫酸钠+1%脱氧胆酸钠进行脱细胞处理;C组采用0.5%十二烷基硫酸钠+0.5%脱氧胆酸钠进行脱细胞处理;D组采用1%十二烷基硫酸钠+1%TritonX-100进行脱细胞处理;E组采用0.5%十二烷基硫酸钠+0.5%TritonX-100进行脱细胞处理。对各组样本分别行苏木精-伊红染色、五色套染、扫描电镜、免疫组织化学及生物机械力学检测。结果与结论:①苏木精-伊红染色、五色套染显示,B、C组脱细胞完全,D、E组于局部可见细胞残留;②扫描电镜显示,脱细胞各组胶原纤维束和弹性蛋白保存完整,B组孔隙结构的形态、尺寸优于C、D、E组;③免疫组织化学评估显示,脱细胞各组均有异种抗原α-1,3-Gal表达,B组α-1,3-Gal抗原表达低于C、D、E组;④生物机械力学检测显示,脱细胞各组爆破压力、缝线保持力和缝合保留强度较A组显著下降(P<0.05),脱细胞各组间比较无差异;脱细胞各组顺应性、长轴断裂伸长率、横轴最大应力、横轴断裂伸长率、横轴杨氏模量与对照组比较无差异(P>0.05);脱细胞各组长轴最大应力和长轴杨氏模量较A组显著下降(P<0.05),其中B、C组长轴最大应力和长轴杨氏模量下降较D、E组明显(P<0.05);⑤结果表明,基于1%十二烷基硫酸钠+1%脱氧胆酸钠的方法可获得更佳的猪颈动脉细胞外基质支架,适用于构建组织工程小直径血管。 展开更多
关键词 细胞 细胞外基质 组织工程小直径血管 细胞外基质支架 人工血管 生物力学 组织工程
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复合支架修复兔关节软骨缺损的研究 预览
6
作者 崔小平 常保国 +4 位作者 张鹏 张宇明 荆志振 陈斌 余建平 《中国药物与临床》 CAS 2018年第10期1685-1687,共3页
关节软骨的解剖结构比较特殊,极易引起损伤。同时,组织修复能力较差。怎样对关节软骨缺损进行修复,这是骨科长期以来的研究热点之一。在修复领域,学者大多通过组织工程方法模拟某种损伤结构。本研究将探讨新型生物支架材料一包埋载生长... 关节软骨的解剖结构比较特殊,极易引起损伤。同时,组织修复能力较差。怎样对关节软骨缺损进行修复,这是骨科长期以来的研究热点之一。在修复领域,学者大多通过组织工程方法模拟某种损伤结构。本研究将探讨新型生物支架材料一包埋载生长因子纳米微球的医用聚氨酯/脱细胞软骨支架与骨髓间充质干细胞骨髓间充质干细胞(BMSCs)复合后修复关节软骨缺损的效果。 展开更多
关键词 BMSCS 软骨缺损 复合支架 细胞 软骨基质 骨髓间充质干细胞 聚氨酯 软骨组织
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肌外膜导管中细胞对周围神经再生影响的实验研究 被引量:1
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作者 冯蔚枫 陆海滨 +3 位作者 徐筑秋 陈露露 杨晓楠 祁佐良 《中国修复重建外科杂志》 CSCD 北大核心 2018年第5期617-624,共8页
目的探讨小鼠腹外斜肌外膜制备的肌外膜导管(epimysium conduit,EMC)中的细胞成分对坐骨神经再生影响。方法取8周龄雄性C57BL/6J增强绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)小鼠的腹外斜肌外膜,修剪成5 mm×3 ... 目的探讨小鼠腹外斜肌外膜制备的肌外膜导管(epimysium conduit,EMC)中的细胞成分对坐骨神经再生影响。方法取8周龄雄性C57BL/6J增强绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)小鼠的腹外斜肌外膜,修剪成5 mm×3 mm,制备成管状(即EMC)。取部分肌外膜采用不同照射剂量(0、15、20、25、30、35 Gy)进行细胞迁移抑制处理,并计数迁移细胞,选择迁移细胞数最少的肌外膜制备EMC;另取部分肌外膜行脱细胞处理,常规HE和Masson染色鉴定脱细胞效果后制备EMC。取24只C57BL/6J野生型小鼠制备右后肢3 mm长坐骨神经缺损模型后,随机分为3组(n=8),分别采用EMC(A组)、经细胞迁移抑制处理后的EMC(B组)、脱细胞处理后的EMC(C组)修复缺损。术后16周取再生神经中段行大体、甲苯胺蓝染色、免疫荧光染色以及透射电镜观察。结果肌外膜细胞迁移抑制观察示,15 d时随照射剂量增大,细胞迁移数逐渐减少;除30 Gy组与35 Gy组间比较差异无统计学意义(P〉0.05)外,其余各组间比较,差异均有统计学意义(P〈0.05)。结论 EMC中的细胞成分参与并促进了小鼠坐骨神经的再生。 展开更多
关键词 肌外膜导管 神经再生 细胞迁移抑制 细胞
激光微孔化脱细胞骨软骨支架的制备及表征 预览
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作者 刘雪剑 刘士臣 +11 位作者 孙百川 张凯红 孟昊业 王玉 黄绍代 鲁长风 王冲 余文 荆晓光 赵跃 杨建华 彭江 《中国组织工程研究》 北大核心 2018年第18期2836-2842,共7页
背景:如何制备出既具有软骨源性成分又具有良好初始力学强度的支架,是组织工程软骨研究的方向.目的:制备微孔化脱细胞骨软骨支架,评价其力学性能及细胞相容性.方法:取猪膝关节骨软骨,采用激光微孔化技术制作微孔化骨软骨支架,随后利... 背景:如何制备出既具有软骨源性成分又具有良好初始力学强度的支架,是组织工程软骨研究的方向.目的:制备微孔化脱细胞骨软骨支架,评价其力学性能及细胞相容性.方法:取猪膝关节骨软骨,采用激光微孔化技术制作微孔化骨软骨支架,随后利用化学方法制作微孔化脱细胞骨软骨支架,扫描电镜观察支架结构,检测支架的压缩模量.分别采用微孔化脱细胞骨软骨支架浸提液(实验组)、含体积分数10%胎牛血清的L-DMEM(对照组)培养骨髓间充质干细胞,培养5 d内CCK-8法检测细胞增殖.将骨髓间充质干细胞接种于微孔化脱细胞骨软骨支架上,共培养28 d内进行苏木精-伊红染色与甲苯胺蓝染色,观察细胞生长情况.结果与结论:①扫描电镜:微孔化脱细胞骨软骨支架表面平整,孔与孔之间分布均匀,纵切面孔深达软骨下骨;②力学性能:微孔化脱细胞骨软骨支架的平均压缩模量为0.77 MPa,接近于正常骨软骨压缩模量(1.15 MPa);③CCK-8实验:实验组培养1,2,3,4,5 d的细胞增殖与对照组无差异;④共培养实验:苏木精-伊红染色和甲苯胺蓝染色显示,培养1 d后,大量骨髓干细胞在微孔化脱细胞骨软骨支架孔隙中生长,培养7 d后有少量细胞贴孔壁生长,孔隙中有少量细胞生长;培养21 d后,孔壁上有少量细胞贴壁生长,孔隙中有少量细胞生长;培养28 d后,孔壁上有少量细胞贴壁增殖,孔隙中有大量细胞成团增殖;⑤结果表明:微孔化脱细胞骨软骨支架具有良好的力学性能及细胞相容性. 展开更多
关键词 软骨组织工程 细胞 骨软骨支架 共培养 骨髓间充质干细胞 激光微孔化 α-Gal抗原检测 生物相容性 生物材料
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牙周组织工程新技术的研究进展
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作者 杨雪婷 杨波 田卫东 《中华口腔医学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第7期490-494,共5页
由牙周炎等疾病导致的牙周支持组织丧失将引起牙齿逐渐松动脱落,进而影响发音和进食,甚至导致一系列生理和心理问题。组织工程作为可实现组织器官重塑及功能重建的技术,已在牙周组织再生中取得可喜成绩,但传统的构建方法在实现功能... 由牙周炎等疾病导致的牙周支持组织丧失将引起牙齿逐渐松动脱落,进而影响发音和进食,甚至导致一系列生理和心理问题。组织工程作为可实现组织器官重塑及功能重建的技术,已在牙周组织再生中取得可喜成绩,但传统的构建方法在实现功能性牙周再生方面仍存在诸多不足。随着组织工程技术的进步,近年来涌现了一系列新技术、新方法,如细胞膜片技术、脱细胞技术、静电纺丝技术、三维打印技术等,为牙周组织再生带来新的希望。本文对近年来牙周组织工程领域取得的新进展及应用的新技术进行简要阐述,以期探讨未来牙周再生的发展方向。 展开更多
关键词 组织工程 再生 细胞膜片 细胞 静电纺丝 三维打印
支架材料在软骨组织工程中的应用进展
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作者 张飞 党源 于萍 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第4期477-479,共3页
关节软骨属于透明软骨,为终末分化组织,缺乏神经和血管滋养,一旦损伤很难修复,常诱发骨关节炎等退行性疾病。组织工程是目前修复软骨损伤最具潜力的方法,其中支架技术的本质是在体外构建软骨细胞外基质替代物,为种子细胞提供与天然细胞... 关节软骨属于透明软骨,为终末分化组织,缺乏神经和血管滋养,一旦损伤很难修复,常诱发骨关节炎等退行性疾病。组织工程是目前修复软骨损伤最具潜力的方法,其中支架技术的本质是在体外构建软骨细胞外基质替代物,为种子细胞提供与天然细胞外基质相似的微环境。 展开更多
关键词 支架材料 软骨基质 软骨组织 聚乳酸支架 纳米羟基磷灰石 羟基乙酸 细胞 种子细胞
脱细胞支架在肿瘤组织工程中的应用 预览
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作者 吉中蛟 郭益冰 陆玉华 《中国组织工程研究》 北大核心 2018年第34期5571-5576,共6页
背景:脱细胞技术的日益发展为肿瘤组织工程提供了新的培养平台,它充分模拟肿瘤在体内生长的微环境,可以为肿瘤研究领域提供新的手段。目的:综述肿瘤组织工程中脱细胞支架的应用。方法:以“tumor engineering;biomaterials;scaffold;3D c... 背景:脱细胞技术的日益发展为肿瘤组织工程提供了新的培养平台,它充分模拟肿瘤在体内生长的微环境,可以为肿瘤研究领域提供新的手段。目的:综述肿瘤组织工程中脱细胞支架的应用。方法:以“tumor engineering;biomaterials;scaffold;3D culture;decellularized;tumor microenvironment;ECM”为关键词,检索PubMed数据库1995至2017年相关文献。结果与结论:利用脱细胞技术保留的细胞外基质支架是一个无论在生理生化、几何空间结构方面都很理想的研究细胞培养的平台,它不仅含有基本的细胞外基质结构成分――蛋白质和多糖,以及特定的生长因子和细胞因子,还保留了完整而特定的脉管结构,这使得它可以通过灌注装置等生物反应器来模拟体内营养交换的机制,这为肿瘤研究提供一个非常接近体内真实情况的研究平台。近年来,随着组织工程的发展,这种三维立体培养逐渐成为肿瘤生物学领域研究的热点,在体外建立细胞间以及细胞与细胞外基质之间的相互联系,模拟真实肿瘤微环境,再造体外肿瘤模型中得到了极大的应用。随着脱细胞技术的广泛应用和不断完善,将成为研究肿瘤生物学行为、药物筛选及靶向治疗等方面研究的有效工具。 展开更多
关键词 肿瘤组织工程 细胞 细胞外基质 三维培养 细胞 微环境 组织工程 生物材料 支架 肿瘤微环境 组织工程
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提高关节软骨脱细胞支架孔隙率及细胞渗透性方法的研究进展 预览
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作者 赵忠琪 王晓坤 +3 位作者 彭慧敏 梁家迪 王小晋 刘畅 《中国生物医学工程学报》 CSCD 北大核心 2018年第1期112-118,共7页
关节软骨损伤后的再生与修复一直是临床上的难题。由于外科治疗手段具有较大的局限性,近年来,软骨组织工程领域不断发展并备受关注。在软骨组织工程中,具有软骨诱导特性的软骨基质,是一种很有前景的生物材料。这种天然的生物材料能够作... 关节软骨损伤后的再生与修复一直是临床上的难题。由于外科治疗手段具有较大的局限性,近年来,软骨组织工程领域不断发展并备受关注。在软骨组织工程中,具有软骨诱导特性的软骨基质,是一种很有前景的生物材料。这种天然的生物材料能够作为支架,为软骨组织再生提供结构框架和生物信号分子。脱细胞处理能够有效去除软骨组织中的细胞成分,获得天然的细胞外基质支架。然而,由于软骨组织具有缺乏血管、结构致密、细胞成分较少的特性,因此,经脱细胞的软骨组织能否获得足够的孔隙率,为再植的软骨细胞或干细胞提供有效的渗透途径,逐渐成为研究者关注的焦点。重点关注关于提高细胞渗透性的实验研究,总结提高支架孔隙率以及促进细胞迁移的实验方法,主要包括脱细胞处理、浓度调控、取向性冻干技术、人为制备孔道,以及激光刻蚀等。通过文献检索,对不同方法技术的原理与优势进行总结、分析,进一步强调孔隙结构在支架性能中的重要性,并阐明支架性能与调控方法之间的关系。 展开更多
关键词 细胞 细胞外基质 支架 组织工程
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基于SHG/TPEF检测小鼠肝脏弹性纤维方法的建立 预览
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作者 陈巍 严旭禛 +3 位作者 杨爱婷 黄涛 赵文姗 尤红 《临床和实验医学杂志》 2018年第14期1457-1460,共4页
目的建立二次谐波与双光子激发荧光(SHG/TPEF)显微成像技术检测小鼠肝脏弹性纤维的方法。方法将8周龄雄性Col1α1-GFP转基因小鼠随机分为两组,每组5只,分别腹腔注射CCl4和橄榄油12周建立肝纤维化及对照小鼠模型。小鼠处死后获得肝组... 目的建立二次谐波与双光子激发荧光(SHG/TPEF)显微成像技术检测小鼠肝脏弹性纤维的方法。方法将8周龄雄性Col1α1-GFP转基因小鼠随机分为两组,每组5只,分别腹腔注射CCl4和橄榄油12周建立肝纤维化及对照小鼠模型。小鼠处死后获得肝组织并进行肝脏脱细胞处理,基于SHG/TPEF识别肝细胞外基质骨架结构中的胶原纤维和弹性纤维荧光信号。结果肝组织块脱细胞后骨架结构清晰可见,形态改变较小,弹性纤维伴随胶原纤维沉积,定位于汇管区和纤维间隔中;CCl4腹腔注射12周后,与对照组相比,肝组织胶原纤维面积百分比(12.4%vs.4.2%,P〈0.001)和弹性纤维面积百分比(2.8%vs.1.7%,P〈0.01)均显著升高。结论 SHG/TPEF可用于脱细胞后肝组织弹性纤维成像,较传统方法具有一定优势。 展开更多
关键词 小鼠 肝脏 二次谐波与双光子激发荧光 细胞 细胞外基质骨架 弹性纤维
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脱细胞猪小肠黏膜下层的组织相容性 预览
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作者 王付燕 杜立群 《解剖学杂志》 CSCD 2018年第6期636-639,753共5页
目的:制备脱细胞猪小肠黏膜下层(SIS),研究其用作组织工程支架材料的组织相容性。方法:0.1%十二烷基磺酸钠(SDS)处理新鲜猪SIS 30 min制备脱细胞SIS,H-E、4,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)及天狼星红染色观察脱细胞前后SIS的生物学特性,将... 目的:制备脱细胞猪小肠黏膜下层(SIS),研究其用作组织工程支架材料的组织相容性。方法:0.1%十二烷基磺酸钠(SDS)处理新鲜猪SIS 30 min制备脱细胞SIS,H-E、4,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)及天狼星红染色观察脱细胞前后SIS的生物学特性,将其植入SD大鼠背部皮下,检测其组织相容性,对照组SD大鼠植入未脱细胞的正常SIS作为阳性对照。结果:脱细胞SIS呈白色、半透明的膜状物,具有良好的弹性及柔韧性;H-E、DAPI及天狼星红染色光学显微镜观察结果显示脱细胞SIS无细胞及DNA残留,组织结构保留完整,胶原纤维间孔隙率增加;皮下埋植术后全部动物存活,各时间段脱细胞SIS植入组大鼠创口周围皮肤愈合良好,无红肿、渗出等炎症反应。组织学观察脱细胞SIS植入早期结构完整;随着植入时间的延长,脱细胞SIS逐渐降解,结构松散。脱细胞SIS植片周围炎症细胞数明显少于正常SIS植入组。结论:脱细胞猪SIS植入SD大鼠体内具有良好的组织相容性,未引起明显的炎症反应,是一种理想的组织工程支架材料。 展开更多
关键词 细胞 小肠黏膜下层 组织相容性 组织工程 支架材料
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犬半月板脱细胞基质支架的制备及其特性的研究
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作者 张毅 邹彤 +8 位作者 崔豪 赵雯 张文馨 张鑫 戴鹏秀 张欣珂 吕阳欧 阮晨梅 张翊华 《中国兽医科学》 CSCD 北大核心 2018年第11期1441-1447,共7页
半月板是膝关节中的基础纤维软骨组织。损伤半月板会损害正常膝关节功能和易患骨关节炎。人和其他动物半月板的脱细胞处理均有文献报道,但犬半月板的脱细胞支架制备鲜有文献报道。本研究采用高低渗反复冻融和1%十二烷基硫酸钠溶液(SDS... 半月板是膝关节中的基础纤维软骨组织。损伤半月板会损害正常膝关节功能和易患骨关节炎。人和其他动物半月板的脱细胞处理均有文献报道,但犬半月板的脱细胞支架制备鲜有文献报道。本研究采用高低渗反复冻融和1%十二烷基硫酸钠溶液(SDS)脱细胞处理,制备犬半月板脱细胞基质支架。通过HE染色、天狼猩红染色、阿尔新蓝染色和DNA含量测定检测细胞脱除成度。组织学观察和扫描电镜结果显示犬半月板的胶原纤维主要呈线性沿圆周方向排列,鲜有径向排列,细胞陷窝沿纤维束排列。力学性能检测显示,脱细胞基质与天然半月板相比压缩模量有所降低,这与阿尔新蓝染色显示的脱细胞后蛋白多糖丧失具有一定的关系。体外细胞毒性测定结果表明半月板脱细胞支架对犬骨髓间充质干细胞(BMSCs)没有毒性。细胞增殖、扫描电镜观察和活/死细胞染色试验表明犬BMSCs可粘附于支架并且不断增殖。这说明犬半月板脱细胞基质支架可作为构建组织工程半月板的支架。 展开更多
关键词 半月板 细胞 支架 增殖
CHAPS联合十二烷基硫酸钠的除垢剂动脉脱细胞支架材料制备 预览 被引量:1
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作者 梁远锋 文章 +4 位作者 刘尚敏 黄淑佩 郝俊海 李东风 林展翼 《岭南心血管病杂志》 2018年第4期450-455,共6页
目的采用3-[(3-胆酰胺基丙基)二甲基铵基]-1-丙磺酸盐(CHAPS)和十二烷基硫酸钠(sodium do?decyl sulfate,SDS)的联合除垢剂方案对脐动脉进行脱细胞,评价脱细胞的有效性和支架材料的力学性能改变情况。方法分离新鲜脐带获取人脐动脉,通... 目的采用3-[(3-胆酰胺基丙基)二甲基铵基]-1-丙磺酸盐(CHAPS)和十二烷基硫酸钠(sodium do?decyl sulfate,SDS)的联合除垢剂方案对脐动脉进行脱细胞,评价脱细胞的有效性和支架材料的力学性能改变情况。方法分离新鲜脐带获取人脐动脉,通过对脐动脉进行CHAPS联合SDS脱细胞处理,获得脱细胞血管支架,对其进行苏木素-伊红、Masson、Verhoeff′s Van Gieson(EVG)等组织染色和扫描电镜分析,并进行DNA及胶原定量分析;于支架上接种成纤维细胞,通过细胞相容性的程度评估除垢剂残留情况;对血管支架材料进行爆破压力及应力应变曲线分析,评价支架材料力学性能改变。结果组织染色结果显示脱细胞支架材料血管壁细胞消失,与未脱细胞的脐动脉相比较,其胶原纤维和弹力纤维结构无明显差别,电镜下可见血管细胞消失,支架材料成多孔隙结构;DNA定量显示DNA浓度极低,胶原蛋白浓度无明显改变;人成纤维细胞可以很好附着于支架材料上并生长;脱细胞支架材料抗爆破压力及应力应变曲线与脐动脉比较无明显变化。结论CHAPS联合SDS的脱细胞方法能彻底去除脐动脉血管壁细胞成分,且较为完整地保留了血管的组织结构。脱细胞后的血管支架材料具有良好的生物相容性和力学性能。 展开更多
关键词 除垢剂 细胞 脐动脉 血管支架
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肺脱细胞支架制备方法及应用的研究进展
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作者 刘芬 董明清 +2 位作者 张艰 赵峰 汤顺清(审校) 《生物医学工程与临床》 CAS 2018年第4期477-481,共5页
组织或器官脱细胞生物支架已成功应用于组织器官工程和再生医学,基于脱细胞器官支架构建的人工器官未来可能为器官功能衰竭终末期患者提供器官移植供体。理想的脱细胞方法应该在充分去除细胞成分基础上.保存器官细胞外基质支架的完整... 组织或器官脱细胞生物支架已成功应用于组织器官工程和再生医学,基于脱细胞器官支架构建的人工器官未来可能为器官功能衰竭终末期患者提供器官移植供体。理想的脱细胞方法应该在充分去除细胞成分基础上.保存器官细胞外基质支架的完整性及生物活性。肺脏具有结构疏松、拥有气道和血管两套管路系统等特点,采用何种脱细胞方法才能获得理想的效果,一直是肺脏器官工程的重要研究课题。文章阐述了肺脱细胞支架制备方法(物理方法、化学方法等),并且阐述了肺脱细胞后的无菌化处理及保存方法和评价方法:同时.介绍了肺脱细胞支架的应用及其发展前景.以期为相关领域的研究者提供参考。 展开更多
关键词 细胞 支架 生物材料 再生医学
义眼台Ⅱ期植入术中脱细胞牛心包补片的应用
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作者 刘懿 刘德成 +1 位作者 杨红伟 王彦 《中华眼外伤职业眼病杂志》 2017年第4期304-306,共3页
目的 评价脱细胞牛心包补片在Ⅱ期羟基磷灰石义眼台植入术中的临床效果及安全性.方法 应用脱细胞牛心包补片覆盖于羟基磷灰石义眼台表面,行Ⅱ期眶内植入46例(46眼),随访观察6-24个月,分析评价其效果.结果 46例中的43例(93.48%)Ⅰ期... 目的 评价脱细胞牛心包补片在Ⅱ期羟基磷灰石义眼台植入术中的临床效果及安全性.方法 应用脱细胞牛心包补片覆盖于羟基磷灰石义眼台表面,行Ⅱ期眶内植入46例(46眼),随访观察6-24个月,分析评价其效果.结果 46例中的43例(93.48%)Ⅰ期愈合,3例术后球结膜和眼球筋膜局部愈合不良,经保守治疗后均愈合.随访期末无义眼台暴露、脱位或感染等现象发生.结论 脱细胞牛心包补片是包裹羟基磷灰石义眼台眶内植入的自体或异体组织的最佳替代物. 展开更多
关键词 义眼台 羟基磷灰石 牛心包补片 细胞 摘除术 眼球
纳米APS外膜肝素化内膜小口径组织工程血管的实验研究 预览 被引量:1
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作者 刘俊 张晓膺 《上海交通大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期337-343,共7页
目的·制备具有良好抗张强度及组织相容性的复合型组织工程血管(HTEV)。方法·制备大鼠脱细胞主动脉血管支架,采用静电纺丝(ES)技术在脱细胞血管支架外覆以纳米氨基醇聚癸二酸甘油酯(APS),使用肝素修饰血管支架内膜,制成H... 目的·制备具有良好抗张强度及组织相容性的复合型组织工程血管(HTEV)。方法·制备大鼠脱细胞主动脉血管支架,采用静电纺丝(ES)技术在脱细胞血管支架外覆以纳米氨基醇聚癸二酸甘油酯(APS),使用肝素修饰血管支架内膜,制成HTEV。行HTEV体内植入和功能评价,建立同种异体的大鼠腹主动脉移植模型。移植后6周行血管超声和CT血管造影检查。结果·大鼠主动脉经脱细胞处理后,细胞成分几乎被完全去除,脱细胞组的总DNA含量[(115.4±10.9)ng/mg]相较未脱细胞组[(398.6±14.6)ng/mg]显著下降(P=0.000),但脱细胞对于胶原纤维以及弹力纤维造成损伤。ES-APS包覆后增强了HTEV支架的机械性能,支架壁厚(187±11)μm、缝合强度为(0.51±0.06)N、爆破压力为(2 103±232)mm Hg,均较脱细胞血管显著提高(均P〈0.01)。HTEV内膜经肝素修饰后具有较强的抗血小板黏附作用。大鼠异体血管移植后6周检查发现,HTEV通畅性良好,包覆ES-APS能防止扩张和动脉瘤形成。结论·通过在大鼠脱细胞主动脉血管支架外覆以ES-APS,内膜以肝素修饰,成功制备了HTEV,大大提高了抗张强度及组织相容性。 展开更多
关键词 组织工程血管 细胞 静电纺丝 氨基醇聚癸二酸甘油酯 肝素涂层
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构建韧带组织工程脱细胞支架的可行性研究 预览
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作者 王倩 王帅 +2 位作者 徐仲阳 李咸周 邢宝华 《中华骨与关节外科杂志》 2017年第4期347-350,共4页
背景:十二烷基磺酸钠脱细胞在脱细胞的同时对支架结构存在一定的损伤,降低了支架的生物学性能;胰酶等脱细胞方法较为温和,虽最大程度保留支架结构与生物学性能,但脱细胞效果并不彻底.目的:制备并分析脱细胞牛肌腱作为组织工程韧带支... 背景:十二烷基磺酸钠脱细胞在脱细胞的同时对支架结构存在一定的损伤,降低了支架的生物学性能;胰酶等脱细胞方法较为温和,虽最大程度保留支架结构与生物学性能,但脱细胞效果并不彻底.目的:制备并分析脱细胞牛肌腱作为组织工程韧带支架的可行性.方法:取新鲜小牛跟腱,通过物理法去除肌腱表面腱膜、滑膜及软组织,制备50个跟腱,随机分为两组,均行冻干处理.实验组以Triton X-1 00行脱细胞处理,对照组不予脱细胞处理.两组均以PBS冲洗后室温干燥备用.行组织学、DNA含量、细胞增殖、生物力学(最大应力、弹性模量以及刚度)检测,比较两组的差异.结果:对照组和实验组的DNA残留量分别为(0.34±0.15)μg/mg和(0.7±0.03)μg/mg,实验组显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).实验组与对照组支架DNA含量对比显示,支架脱细胞效果彻底,无显著的免疫原性.两组在组织形态结构上无明显差异.细胞增殖显示脱细胞支架对细胞增殖无明显影响.实验组的最大应力小于对照组,弹性模量无统计学差异,刚度试验显示两组无明显差异.结论:脱细胞支架在保留天然支架生物学性能的基础上可作为组织工程支架的选择. 展开更多
关键词 组织工程韧带 免疫原性 组织相容性 细胞 肌腱
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