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FQ—PCR法联合检测血尿乳汁在小儿人巨细胞病毒感染中的临床研究 预览
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作者 王景 《临床医药实践》 2019年第4期292-294,共3页
目的:探讨用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)法进行血、尿、母乳联合检测小儿人巨细胞病毒(HCMV)的临床意义。方法:将45例疑似被人巨细胞病毒感染的婴儿作为研究对象,取患儿的血清和尿液标本,并取婴儿母亲乳汁标本。用荧光定量聚合酶链反... 目的:探讨用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)法进行血、尿、母乳联合检测小儿人巨细胞病毒(HCMV)的临床意义。方法:将45例疑似被人巨细胞病毒感染的婴儿作为研究对象,取患儿的血清和尿液标本,并取婴儿母亲乳汁标本。用荧光定量聚合酶链反应法检测患儿血清、尿液以及母乳中的HCMV-DNA,观察患儿的阳性检出情况。结果:45例婴儿中,经荧光定量聚合酶链反应联合检测,发现被人巨细胞病毒感染的患儿占73.33%,联合检测的阳性检出率明显高于血液、母乳以及尿液单独检测的阳性检出率,差异有统计学意义(P<0.05);且三种标本单独检测的阳性检出率比较差异无统计学意义(P>0.05)。此外,婴儿的巨细胞病毒感染-IgM抗体阳性检出率为68.89%。结论:在小儿人巨细胞病毒感染的临床诊断中,荧光定量聚合酶链反应法对患儿的血液、尿液及患儿母乳进行联合检测,可提升人巨细胞病毒感染的阳性检出率,从而为临床诊断及治疗提供可靠参考。 展开更多
关键词 小儿人巨细胞病毒感染 联合检测 荧光定量聚合酶链反应
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荧光定量PCR仪检测乙型肝炎病毒核酸的性能验证及评价 预览
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作者 周丹 何进才 +3 位作者 李惠贞 黄涛 罗胜华 张德明 《检验医学与临床》 CAS 2019年第1期80-84,共5页
目的荧光定量聚合酶链反应(PCR)仪检测乙型肝炎病毒核酸(HBVDNA)的性能验证及评价。方法参考ISOI5189《医学实验室质量和能力认可准则(2012年)》,以及美国临床和实验室标准化协会(CLSL)EP系列文件的相关要求对实验室HBVDNA荧光定量PCR... 目的荧光定量聚合酶链反应(PCR)仪检测乙型肝炎病毒核酸(HBVDNA)的性能验证及评价。方法参考ISOI5189《医学实验室质量和能力认可准则(2012年)》,以及美国临床和实验室标准化协会(CLSL)EP系列文件的相关要求对实验室HBVDNA荧光定量PCR检测系统的精密度、正确度、可报告范围、抗干扰能力进行验证及评价。结果精密度:HBVDNA定量检测高浓度(106IU/mL)和低浓度(103IU/mL)标本的对数值批内变异系数分别为0.67%和3.65%,批间变异系数分别为1.72%和4.52%;正确度:标准物质标本检测结果的对数值与厂商给定靶值浓度的对数值差值在±0.4个Log值内;可报告范围:试验试剂在(2.22×10)~(2.22×10^8)IU/mL范围内具有良好的线性,线性回归方程为Y=1.027X-0.408,R^2=0.995,≥0.95;抗干扰能力:说明书浓度的干扰物质(血红蛋白、三酰甘油、胆红素)标本结果与不含干扰物质标本比较,其浓度的对数值偏倚CV<7.5%,对数值差值在±0.4个Log值内。结论荧光定量PCR仪检测HBVDNA试剂的各项性能特征与厂家声明相符,满足预期用途,适用于临床常规检测。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 定量检测 性能验证 荧光定量聚合酶链反应
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男性不育患者精子鱼精蛋白表达的研究 预览
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作者 孙昌瑞 冯林 《国际检验医学杂志》 CAS 2019年第7期791-793,共3页
目的采用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测成都地区男性不育患者精子鱼精蛋白1(PRM1)和鱼精蛋白2(PRM2)的mRNA表达水平,探讨鱼精蛋白的表达对男性不育症的影响。方法以GAPDH为内对照,采用FQ-PCR检测30例体检健康组、83例少精子症组、6... 目的采用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测成都地区男性不育患者精子鱼精蛋白1(PRM1)和鱼精蛋白2(PRM2)的mRNA表达水平,探讨鱼精蛋白的表达对男性不育症的影响。方法以GAPDH为内对照,采用FQ-PCR检测30例体检健康组、83例少精子症组、61例畸形精子症组患者的精子PRM1和PRM2mRNA表达水平。结果少精子症组的PRM1和PRM2mRNA表达水平显著低于体检健康组和畸形精子症组,差异有统计学意义(P<0.05);畸形精子症组与体检健康组的PRM1和PRM2mRNA表达率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。联合检测PRM1和PRM2,可提高对少精子症诊断的灵敏度和阴性预测值。结论 FQ-PCR检测精子PRM1和PRM2的mRNA表达水平,具有操作简便、价格便宜、标本来源容易等优点,联合检测PRM1和PRM2,可提高对少精子症诊断的灵敏度和阴性预测值,成都地区少精子症PRM1和PRM2的mRNA表达量降低,提示与精子发生存在密切关系,有助于临床对男性不育患者进行基因检测、诊断和个体化治疗,以及进行较大规模的流行病学调查。 展开更多
关键词 鱼精蛋白 少精子症 男性不育 荧光定量聚合酶链反应
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血清胆红素水平对HBV DNA检测的影响及其去除胆红素影响的方法 预览
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作者 余清 滕凤猛 杨学文 《检验医学与临床》 CAS 2019年第7期909-911,共3页
目的探讨血清胆红素水平对乙肝病毒脱氧核糖核酸(HBV DNA)定量检测的影响及其去除胆红素影响的方法。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应检测含不同水平胆红素标本中HBV DNA病毒载量,再采用倍比稀释法比较用生理盐水和正常血清作为稀释... 目的探讨血清胆红素水平对乙肝病毒脱氧核糖核酸(HBV DNA)定量检测的影响及其去除胆红素影响的方法。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应检测含不同水平胆红素标本中HBV DNA病毒载量,再采用倍比稀释法比较用生理盐水和正常血清作为稀释介质对HBV DNA定量检测的影响。结果血清胆红素水平对HBV DNA定量检测结果有明显影响,但其影响与血清胆红素水平及HBV DNA载量有关。当HBV DNA载量≥1×106 U/mL时,血清胆红素对HBV DNA定量检测结果无影响;当HBV DNA载量<1×106U/mL时,其检测结果与胆红素水平相关。当胆红素水平≥250μmol/L时,对HBV DNA定量检测结果有影响;当胆红素水平<250μmol/L时,对HBV DNA检测结果无影响。采用倍比稀释法可去除胆红素对HBV DNA定量检测结果的影响,且生理盐水介质明显优于正常血清介质。结论血清胆红素对HBV DNA定量检测结果的影响与胆红素水平和HBV DNA载量相关,采用倍比稀释法可去除胆红素对HBV DNA定量检测结果的影响。 展开更多
关键词 胆红素 乙肝病毒脱氧核糖核酸 荧光定量聚合酶链反应 影响因素
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不同浓度葛根芩连水煎液对Caco-2细胞P-糖蛋白及多药耐药蛋白转运体表达的影响
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作者 李雪莲 王嘉馨 +3 位作者 王静 李森 董月柳 董玲 《中国中药杂志》 CSCD 北大核心 2018年第15期3135-3139,共5页
为了检测葛根芩连水煎液对人结肠腺癌上皮细胞Caco-2 P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)及多药耐药蛋白(multi-drug resistanceprotein,MRP)mRNA表达的影响,将不同浓度的葛根芩连水煎液作用于Caco-2细胞,采用Real-time PCR检测不同浓... 为了检测葛根芩连水煎液对人结肠腺癌上皮细胞Caco-2 P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)及多药耐药蛋白(multi-drug resistanceprotein,MRP)mRNA表达的影响,将不同浓度的葛根芩连水煎液作用于Caco-2细胞,采用Real-time PCR检测不同浓度葛根芩连水煎液对Caco-2细胞P-糖蛋白及多药耐药蛋白转运体MDR1及MRP1-6 mRNA的表达量。药液作用12 h后,当质量浓度为5.00 g·L^-1时,可显著下调MDR1和MRP1-6的表达;2.50 g·L^-1时,可显著下调MDR1,MRP1,MRP2,MRP4,MRP5和MRP6 mRNA的表达;1.00 g·L^-1时,仅对MRP2和MRP5 mRNA的表达有显著性影响。结果证明,葛根芩连水煎液可以显著下调Caco-2细胞MDR1及MRP1-6 mRNA表达,且有浓度依赖性。葛根芩连汤可能通过下调Caco-2细胞转运蛋白的mRNA的表达而降低药物外排,增加药物作用时间,从而增大化疗药物的生物利用度。 展开更多
关键词 CACO-2细胞 葛根芩连汤 荧光定量聚合酶链反应 P-糖蛋白 多药耐药蛋白
一种国产HIV-1病毒载量试剂与进口试剂的比较研究
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作者 李剑军 方宁烨 +7 位作者 邓月琴 沈智勇 蓝光华 周崇兴 庞贤武 唐凯玲 臧丹艳 梁淑家 《中国艾滋病性病》 CSCD 北大核心 2018年第2期199-201,共3页
血浆病毒载量检测是艾滋病防治工作中一项重要的实验室检测指标,与疾病的发生、发展及预后有密切关系,主要用于评估艾滋病病毒(HIV)感染进程、抗病毒治疗效果监测及HIV感染的辅助诊断~([1])。目前国内主要使用3种进口试剂进行病毒... 血浆病毒载量检测是艾滋病防治工作中一项重要的实验室检测指标,与疾病的发生、发展及预后有密切关系,主要用于评估艾滋病病毒(HIV)感染进程、抗病毒治疗效果监测及HIV感染的辅助诊断~([1])。目前国内主要使用3种进口试剂进行病毒载量(VL)检测,进口试剂的敏感性及特异性均较好,但价格昂贵~([2-4])。随着治疗就是预防艾滋病策略被广泛地接受~([5-6]), 展开更多
关键词 艾滋病病毒 荧光定量聚合酶链反应 病毒载量
荧光定量PCR在产前诊断染色体非整倍体中的应用
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作者 秦胜芳 汪雪雁 +9 位作者 陈希敏 叶梦玲 陈春 魏萍 曾兰 邓艺 李运星 席娜 宋筱 孙玲玲 《中华医学遗传学杂志》 CSCD 2018年第2期228-231,共4页
【摘要】目的探讨荧光定量-PCR(quantitative fluorescencePCR,QF-PCR)对羊水细胞染色体非整倍体检测的准确性及在产前诊断中的价值。方法应用QF-PCR与染色体核型分析技术对6034例孕妇的6066份羊水标本进行检测。结果QF-PCR与核型分... 【摘要】目的探讨荧光定量-PCR(quantitative fluorescencePCR,QF-PCR)对羊水细胞染色体非整倍体检测的准确性及在产前诊断中的价值。方法应用QF-PCR与染色体核型分析技术对6034例孕妇的6066份羊水标本进行检测。结果QF-PCR与核型分析均检出了135例21、18、13号和X、Y染色体的数目异常,一致率为100%。对67例羊水细胞培养失败的样本成功进行了QF-PCR检测;鉴定出7例母血细胞或母体细胞污染的羊水标本;对32对双绒毛膜双羊膜囊双胎的STR位点的一致性进行了鉴定,22对的STR位点不一致;检出12例胎儿的STR位点荧光峰面积比值处于临界值或部分为异常值,提示可能有染色体数目异常,经核型证实均为染色体数目异常的嵌合体。结论QF-PCR是产前诊断中染色体核型分析技术的必要补充,在快速产前诊断中具有重要临床价值。 展开更多
关键词 荧光定量聚合酶链反应 染色体非整倍体 产前诊断 染色体核型分析
ELISA法对丙型肝炎的诊断价值 预览
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作者 黄燕 《河南医学研究》 CAS 2018年第9期1617-1618,共2页
目的 研究酶联免疫吸附实验(ELISA)法对丙型肝炎的诊断价值。方法 选取2016年2月至2017年10月确山县人民医院疑似丙型肝炎患者146例作为研究对象,均采用荧光定量聚合酶链反应(RTFQ-PCR)法测定丙型肝炎病毒核糖核酸(HCV-RNA)载量,... 目的 研究酶联免疫吸附实验(ELISA)法对丙型肝炎的诊断价值。方法 选取2016年2月至2017年10月确山县人民医院疑似丙型肝炎患者146例作为研究对象,均采用荧光定量聚合酶链反应(RTFQ-PCR)法测定丙型肝炎病毒核糖核酸(HCV-RNA)载量,采用ELISA法测定血清抗-HCV抗体滴度(S/CO),分析ELISA法、RTFQ-PCR法检测结果,统计ELISA法诊断丙型肝炎灵敏度、特异度、准确度,对比两种方法阳性、阴性检出率。结果 146例患者经RTFQ-PCR法检出阳性107例,阴性39例。经ELISA法检出阳性102例,阴性44例,ELISA诊断丙型肝炎灵敏度为85.98%(92/107)、特异度为74.36%(29/39)、准确度为82.88%(121/416)。结论 ELISA诊断丙型肝炎具有较高灵敏度、特异度及准确度,可为临床提供有效筛查手段,值得推广。 展开更多
关键词 联免疫吸附实验 丙型肝炎 荧光定量聚合酶链反应
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5种乳腺癌相关基因临床应用价值的探讨 预览
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作者 余修中 欧华 +1 位作者 刘怀莉 邓君 《国际检验医学杂志》 CAS 2018年第20期2514-2517,2520共5页
目的 探讨荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)法检测外周血mRNA中B细胞淋巴瘤/白血病-2基因(BCL-2)、细胞周期蛋白D1(CCND1)、黏蛋白1(MUC1)、原癌基因人类表皮生长因子受体2(HER-2)和人乳腺珠蛋白(hMAM)5种乳腺癌相关基因在乳... 目的 探讨荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)法检测外周血mRNA中B细胞淋巴瘤/白血病-2基因(BCL-2)、细胞周期蛋白D1(CCND1)、黏蛋白1(MUC1)、原癌基因人类表皮生长因子受体2(HER-2)和人乳腺珠蛋白(hMAM)5种乳腺癌相关基因在乳腺癌诊断中的应用。方法 FQ-PCR法测定50例健康女性体检者(健康对照组)、92例良性乳腺疾病患者(良性乳腺疾病组)和196例乳腺癌患者(乳腺癌组)外周血mRNA中CCND1、BCL-2、MUC1、HER-2和hMAM mRNA的表达量。结果CCND1、BCL-2、MUC1、HER-2和hMAM mRNA表达水平在乳腺癌组显著高于健康对照组和良性乳腺疾病组,差异有统计学意义(P〈0.05),其在健康对照组和良性乳腺疾病组间差异无统计学意义(P〉0.05);5种基因mRNA在健康对照组和良性乳腺疾病组及乳腺癌组的Ⅰ期的阳性表达率差异无统计学意义(P〉0.05),而乳腺癌组的Ⅱ期和Ⅲ+Ⅳ期则显著高于健康对照组、良性乳腺疾病组和乳腺癌组的Ⅰ期组的阳性表达率,差异有统计学意义(P〈0.01)。结论采用FQ-PCR技术检测乳腺癌mRNA时,应考虑到质量控制、mRNA水平和异质性、肿瘤不同阶段等各个方面的因素,才能有效正确地将乳腺癌相关基因用于乳腺癌的诊断、治疗和预后。 展开更多
关键词 荧光定量聚合酶链反应 BCL-2 CCND1 MUC1 HER-2 HMAM 乳腺癌
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血清微小核糖核酸-374b与2型糖尿病的相关性研究 预览
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作者 孙爱文 《临床内科杂志》 CAS 2018年第1期59-60,共2页
2型糖尿病(T2DM)是一种严重危害人类健康的疾病,其确切发病机制目前尚未完全明确。微小核糖核酸(miRNAs)是一类长约22个核苷酸、具有调控功能的非编码单链小核糖核酸分子,在转录水平之后调控靶基因的表达。有研究发现,人血清中... 2型糖尿病(T2DM)是一种严重危害人类健康的疾病,其确切发病机制目前尚未完全明确。微小核糖核酸(miRNAs)是一类长约22个核苷酸、具有调控功能的非编码单链小核糖核酸分子,在转录水平之后调控靶基因的表达。有研究发现,人血清中有比较稳定表达的多种miRNAs,且在T2DM患者血清中发现了许多明显差异表达的miRNAs。循环血miRNAs具有含量丰富、稳定性强、易检测、疾病特异性等多种特点,其中miR-374b在糖尿病的发生发展中起重要作用,但miR-374b在T2DM中的表达情况及其对T2DM发生发展过程中潜在的分子机制尚不明确。 展开更多
关键词 2型糖尿病 微小核糖核酸-374b 胰岛13细胞 荧光定量聚合酶链反应
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胃组织活检幽门螺旋杆菌检测方法比较 预览
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作者 陈小岩 俞训彬 +2 位作者 陈晓琼 陈泳 梁玮 《世界华人消化杂志》 CAS 2018年第25期1499-1504,共6页
目的分析比较四种胃活检幽门螺旋杆菌(Helicobacter pylon;H.pylori)检测方法,旨在找出一种敏感性,特异性高且操作便捷的检测方法.方法选取490例胃黏膜活检组织标本,采用快速尿激酶法(rapid urease test,RUT)、荧光定量聚合... 目的分析比较四种胃活检幽门螺旋杆菌(Helicobacter pylon;H.pylori)检测方法,旨在找出一种敏感性,特异性高且操作便捷的检测方法.方法选取490例胃黏膜活检组织标本,采用快速尿激酶法(rapid urease test,RUT)、荧光定量聚合酶链反应(fluorescence quantitative polymerase chain reaction,qPCR)、硼酸亚甲蓝法和免疫组织化学法(immunohistochemistry,IHC)进行检测,观察丘pylori的显示情况,对阳性率进行x^2检验.结果RUT、qPCR、硼酸亚甲蓝法和IHC在490例标本中的Hpylori阳性检出率分别为18.98%、63.88%、32.04%和38.16%,差异具有统计学意义(P〈0.005).结论IHC检测H.pylori阳性组织.镜检为H.pylori黄褐色而周围胃黏膜组织细胞核呈蓝色。对比强烈,更为直观,有助于实验者获取具有潜在临床应用价值的形态学信息,且实验操作对仪器、实验人员无特殊要求.故建议将IHC检测胃活检H.pylori作为指导临床诊断H.pylori感染、实行H.pylori除菌治疗和疗效判断的依据之一. 展开更多
关键词 胃幽门螺旋杆菌 免疫组织化学法 特殊染色 快速尿激 荧光定量聚合酶链反应 胃癌
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FQ-PCR法与细菌培养法检测妊娠晚期B族链球菌感染的效能比较及细菌耐药性分析 预览 被引量:1
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作者 杨洁 陈海迎 +3 位作者 郑建琼 陈晶晶 黄志琼 朱雪琼 《浙江医学》 CAS 2018年第7期735-738,共4页
目的探讨荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)法与细菌培养法在妊娠晚期B族链球菌(GBS)感染检测中的应用价值,并分析妊娠晚期GBS的耐药情况。方法选取961例孕妇,于孕35-37周时采集孕妇阴道下段1/3处及肛周分泌物,同时行FQ-PCR法与细菌培... 目的探讨荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)法与细菌培养法在妊娠晚期B族链球菌(GBS)感染检测中的应用价值,并分析妊娠晚期GBS的耐药情况。方法选取961例孕妇,于孕35-37周时采集孕妇阴道下段1/3处及肛周分泌物,同时行FQ-PCR法与细菌培养法检测GBS,比较2种方法的检验效能,并根据细菌培养的药敏结果对GBS的耐药情况进行分析。结果 2种检测方法总体GBS检出率为10.7%(103/961),其中FQ-PCR法检出率显著高于细菌培养法(P〈0.05)。以FQ-PCR法联合细菌培养法为金标准,FQ-PCR法检测的灵敏度优于细菌培养法(P〈0.05)。33株GBS菌株对青霉素G、替加环素、利奈唑胺、氨苄西林、万古霉素、喹奴普汀-达福普汀、克林霉素、呋喃妥因、环丙沙星、莫西沙星、左旋氧氟沙星、氯洁霉素及四环素等13种抗菌药物的耐药率分别为0.0%、0.0%、0.0%、0.0%、0.0%、0.0%、24.3%、12.1%、30.3%、33.3%、39.4%、54.5%、63.7%。结论 FQ-PCR检测方法快速、准确、敏感,可用于GBS的产前筛查,妊娠晚期孕妇感染GBS对青霉素G、替加环素、利奈唑胺敏感率高。 展开更多
关键词 B族球菌 荧光定量聚合酶链反应 细菌培养 药敏试验
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荧光定量PCR检测HCVRNA不同核酸提取法的应用对比 预览
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作者 高洁 严敏 +1 位作者 付婷 邵中军 《中国继续医学教育》 2018年第6期30-32,共3页
目的 使用荧光定量PCR的检测方法比较使用氯仿-异丙醇以及核酸分离柱法提取HCV RNA的临床价值差异.方法 选择2016年9月-2017年9月乙肝防治示范区医院门诊诊断的患有丙型肝炎的110例患者的血清样本,依照随机化的原则分成两组,采用氯仿-... 目的 使用荧光定量PCR的检测方法比较使用氯仿-异丙醇以及核酸分离柱法提取HCV RNA的临床价值差异.方法 选择2016年9月-2017年9月乙肝防治示范区医院门诊诊断的患有丙型肝炎的110例患者的血清样本,依照随机化的原则分成两组,采用氯仿-异丙醇提取法的一组样本作为对照组,采用核酸分离柱的方法进行RNA提取的一组样本设定为实验组.RNA提取完成后,选择荧光定量PCR的方法比较不同方法提取RNA的效率以及重复性,分析两种方法临床价值的差异.结果 实验组提取方法能更有效地对HCV的RNA进行提取,提取效率更高,P 〈0.05;重复性比较,实验组提取方法优于对照组.结论 两种提取方法都有-定的价值,但是核酸分离柱的提取方法提取效率与重复性更高,表现更优异. 展开更多
关键词 肝炎病毒 丙型 核酸提取 荧光定量聚合酶链反应
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5490例性病门诊患者HPV检测结果分析 预览
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作者 于功奇 王真真 +4 位作者 付希安 王川 王娜 刘红 张福仁 《中国麻风皮肤病杂志》 2018年第7期396-398,共3页
目的:了解山东地区人乳头瘤病毒(HPV)感染情况,为HPV的防治提供依据。方法:采用实时荧光定量PCR方法(FQ-PCR)对2012年8月至2016年8月就诊于山东省皮肤病医院性病门诊的5490例患者进行LR-HPV(6,11型)和HR-HPV(16、18、31、33、4... 目的:了解山东地区人乳头瘤病毒(HPV)感染情况,为HPV的防治提供依据。方法:采用实时荧光定量PCR方法(FQ-PCR)对2012年8月至2016年8月就诊于山东省皮肤病医院性病门诊的5490例患者进行LR-HPV(6,11型)和HR-HPV(16、18、31、33、45、52、56、58型)检测。结果:HPV(6,11型)阳性2016例(36.72%),其中女753例(32.81%),男1263例(39.53%),男女阳性率差异有统计学意义(P〈0.01);HR-HPV阳性1715例(31.24%),其中女925例(40.31%),男790例(24.73%),男女阳性率差异有统计学意义(P〈0.01);HPV(6,11型)合并HR-HPV阳性768例(13.99%),其中女358例(15.6%),男410例(12.83%),男女阳性率差异无统计学意义(P〉0.05)。女性HPV(6,11型)及HR-HPV感染率高峰出现在20岁以下及50岁以上,不同年龄段女性HPV感染率均有显著差异(P〈0.05),而不同年龄段男性HPV感染率均无显著差异。结论:山东地区男性LRHPV(6,11型)感染率明显高于女性,而女性HR-HPV的感染率高于男性;山东地区女性HPV感染率随着年龄的变化成"U"型分布,男性HPV感染率与年龄无关。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒 荧光定量聚合酶链反应 尖锐湿疣
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大鼠脊髓钝挫伤后早期糖原合成酶激酶3β的表达及意义 预览
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作者 侯嘉兴 胡析 +8 位作者 刘世恒 孟颖桢 李盈洁 牛英杰 殷其勇 董梦影 郭海玲 张晓 冉黎 《四川医学》 CAS 2018年第1期16-20,共5页
目的研究大鼠脊髓钝挫损伤早期,脊髓损伤区域糖原合成酶激酶3-β(GSK3-β)的表达变化及细胞定位情况。探讨其在脊髓损伤(SCC)早期的生物学功能。方法将40只成年Sprague—Dawley(SD)大鼠随机分成假手术(Sham)组与SCC-12h、1d、3... 目的研究大鼠脊髓钝挫损伤早期,脊髓损伤区域糖原合成酶激酶3-β(GSK3-β)的表达变化及细胞定位情况。探讨其在脊髓损伤(SCC)早期的生物学功能。方法将40只成年Sprague—Dawley(SD)大鼠随机分成假手术(Sham)组与SCC-12h、1d、3d和7d组,每组各8只。除Sham组大鼠外均采用改良Allen’s法建立大鼠T10节段脊髓钝挫伤模型,用BBB评分评价各组大鼠的运动功能;采用荧光定量PCR(Q-PCR)及免疫组织化学法检测各组大鼠脊髓GSK3-β的表达情况,观察并统计不同时间点SCC组大鼠GSK3-β免疫组化阳性细胞的分布及数量变化。结果与Sham组相比,各SCC组大鼠BBB评分显著下降,术后第7d比第3d有所升高,差异有统计学意义(P〈0.01)。GSK3-βmRNA相对表达量于术后12h明显降低,至术后第3d再次降低。免疫组织化学检测各SCC组GSK3-β阳性细胞均比Sham组少,差异有统计学意义(P〈0.01),以SCC-3d组最少;脊髓灰质的GSK3-β阳性细胞主要在前角表达,其数量在SCC一12h组明显降低,术后第3d达到最低值,术后第7d明显升高,但仍然低于Sham组,差异有统计学意义(P〈0.05);脊髓后角GSK3-β阳性细胞表达较少,各组间比较差异无统计学意义(P〉0.05)。结论在维护脊髓正常功能中发挥重要作用;脊髓损伤后,机体通过调节GSK3-β的表达减轻炎症反应和促进损伤脊髓运动功能的恢复。 展开更多
关键词 糖原合成3 脊髓损伤 荧光定量聚合酶链反应 免疫组织化学 Basso-Beattie—Bresnahan评分
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定量分析结直肠癌患者血浆循环游离DNA的临床价值
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作者 郑照正 闵丽姗 +6 位作者 钱福初 张贵阳 陈莹蓉 钟婧 马志红 戴利成 蒋微琴 《中华实验外科杂志》 CSCD 北大核心 2018年第3期529-532,共4页
目的定量分析结直肠癌患者血浆游离DNA(cfDNA)水平在结直肠癌诊断及预后判断中的临床价值。方法收集本院接受手术的结直肠癌患者手术当天血浆标本178份和正常人血浆56份。利用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测血浆cfDNA水... 目的定量分析结直肠癌患者血浆游离DNA(cfDNA)水平在结直肠癌诊断及预后判断中的临床价值。方法收集本院接受手术的结直肠癌患者手术当天血浆标本178份和正常人血浆56份。利用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测血浆cfDNA水平。利用ROC曲线评价cfDNA水平在结直肠癌各分期亚组的诊断价值。对Ⅳ期患者进行随访,分析cfDNA与患者生存期之间的相关性。结果结直肠癌组cfDNA浓度显著高于健康体检组,差异有统计学意义[(63.07±65.38) ng/ml比(22.85±8.88) ng/ml,P=0.000)]。Ⅲ~Ⅳ期结直肠癌组与健康体检组比较差异有统计学意义[血浆cfDNA浓度分别为(39.59±31.56)、(107.32±102.85) ng/ml比(22.85±8.88) ng/ml,均P=0.000)]。血浆cfDNA水平在高、中、低分化肿瘤中分别为(29.42±18.29)、(54.69±75.05)、(9.67±103.18) ng/ml,差异有统计学意义(P=0.000)。血浆cfDNA水平TNM分期密切相关。生存分析结果显示血浆cfDNA浓度与肿瘤患者总生存期(OS)明显相关。结论血浆cfDNA水平对结直肠癌早期诊断价值有限,初次治疗时血浆cfDNA浓度是有效的预后指标。 展开更多
关键词 结直肠癌 循环游离DNA 荧光定量聚合酶链反应
荧光定量聚合酶链反应检测支气管肺泡灌洗液中结核分枝杆菌脱氧核糖核酸诊断肺结核的价值 预览
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作者 吴淑红 荣福 欧阳雁弟 《中国实用医药》 2018年第10期16-18,共3页
目的探讨荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测支气管肺泡灌洗液(BALF)结核分枝杆菌脱氧核糖核酸(TbDNA)诊断肺结核的临床价值。方法选取51例肺结核患者作为肺结核组,另选60例非肺结核患者作为对照组。所有患者均完善BALF TbDNA检测及... 目的探讨荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测支气管肺泡灌洗液(BALF)结核分枝杆菌脱氧核糖核酸(TbDNA)诊断肺结核的临床价值。方法选取51例肺结核患者作为肺结核组,另选60例非肺结核患者作为对照组。所有患者均完善BALF TbDNA检测及毛刷涂片抗酸染色镜检、痰涂片抗酸染色镜检。以评价BALF中TbDNA检测对诊断肺结核的敏感性、特异性、阳性预测值(PPV)、阴性预测值(NPV)。结果荧光定量PCR检测BALF中的TbDNA,其阳性对肺结核诊断的敏感性、特异性、PPV、NPV分别为74.51%、96.67%、95.00%、81.69%,肺结核组毛刷涂片抗酸染色镜检的敏感性为13.73%,痰涂片抗酸染色镜检敏感性为15.69%。对照组中,荧光定量PCR检测BALF中的TbDNA的特异性为96.67%,毛刷涂片抗酸染色镜检及痰涂片抗酸染色镜检的特异性均为100.00%。肺结核组荧光定量PCR检测BALF中的TbDNA与痰涂片抗酸染色镜检及毛刷涂片抗酸染色镜检敏感性比较差异有统计学意义(P〈0.05)。对照组荧光定量PCR检测BALF中的TbDNA与毛刷涂片抗酸染色镜检及痰涂片抗酸染色镜检的特异性比较差异无统计学意义(P〉0.05)。结论荧光定量PCR检测BALF中的TbDNA有良好的特异性和敏感性,有望辅助传统的检查来早期诊断肺结核。 展开更多
关键词 荧光定量聚合酶链反应 支气管肺泡灌洗液 结核分枝杆菌脱氧核糖核酸 肺结核
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酶切法去除荧光定量聚合酶链反应体系中内源性核酸污染
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作者 刘健刚 汪求精 +2 位作者 刘明刚 宋昭 陈乾 《华西医学》 CAS 2018年第6期744-747,共4页
目的建立去除荧光定量聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)体系中内源性核酸污染的方法,用于降低或排除颅内术后易感染细菌的荧光定量PCR检测出假阳性的概率。方法首先去除荧光定量PCR反应体系中的内源性核酸污染;随后利用多... 目的建立去除荧光定量聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)体系中内源性核酸污染的方法,用于降低或排除颅内术后易感染细菌的荧光定量PCR检测出假阳性的概率。方法首先去除荧光定量PCR反应体系中的内源性核酸污染;随后利用多重PCR技术,以混合菌DNA作为模板进行革兰菌特异性鉴定;并研究去除污染后的多重PCR技术检测混合细菌DNA的检测限和灵敏度。结果建立的方法能够快速有效地去除荧光定量PCR体系内的内源性核酸污染,并对PCR体系中Taq酶的活性以及扩增效率均无影响,最低检测限为102 CFU/m L(金黄色葡萄球菌和绿脓假单胞菌),与培养法相同。酶切法对PCR体系中酶的活性及扩增效率均无明显影响,且对PCR反应体系及引物特异性没有影响(循环数Ct=32,荧光强度ΔRn=200)。过滤法却使PCR扩增效率显著下降(循环数Ct=32,荧光强度ΔRn=150)。结论酶切法去除内源性核酸污染对荧光定量PCR检测限及灵敏度均无影响,操作简便快速,降低了PCR检测的假阳性概率,能及时准确地诊断颅内细菌感染。 展开更多
关键词 颅内感染 荧光定量聚合酶链反应 内源核酸污染
细菌革兰双重16S rRNA基因荧光定量PCR快速诊断妇产科菌血症 预览
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作者 任明保 李扬 +2 位作者 赵金辉 刘晶 王建华 《中日友好医院学报》 2017年第4期218-221,共4页
目的:用已知细菌革兰阴性、阳性菌双重16S r RNA基因荧光定量PCR方法(q-PCR)应用于妇产科患者菌血症的诊断,探讨该方法检测妇产专科患者菌血症的临床应用价值。方法:2013年1月~2014年12月对100例疑为全身感染处于菌血症状态的住院... 目的:用已知细菌革兰阴性、阳性菌双重16S r RNA基因荧光定量PCR方法(q-PCR)应用于妇产科患者菌血症的诊断,探讨该方法检测妇产专科患者菌血症的临床应用价值。方法:2013年1月~2014年12月对100例疑为全身感染处于菌血症状态的住院分娩孕产妇进行常规血液培养,同时用细菌革兰阴性、阳性菌双重16S r RNA基因q-PCR方法检测,分析2种方法诊断菌血症的阳性率、敏感性和特异性。结果 :通过q-PCR方法检测菌血症阳性率44%,血液培养阳性率16%,两者差异有统计学意义(P〈0.01);菌血症临床诊断阳性率为37%,与q-PCR法阳性率存在显著性差异(P〈0.01)。以血液培养阳性和(或)临床诊断菌血症的标准作为对照,q-PCR方法诊断敏感性为89.2%,特异性82.5%。结论:细菌革兰阴性、阳性菌双重16S r RNA基因q-PCR方法检测妇产科菌血症的阳性率高于血液培养,可快速为孕产妇患者感染提供早期、敏感的病原学诊断依据。 展开更多
关键词 孕产妇 菌血症 荧光定量聚合酶链反应
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早期皮损组织液的定量PCR检测在梅毒诊断中的价值分析 预览 被引量:2
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作者 吴丽婷 欧武英 马乙云 《国际检验医学杂志》 CAS 2017年第14期1942-1944,共3页
目的探讨早期皮损组织液的荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测在梅毒诊断中的价值。方法选择2014年9月至2016年9月该院收治的40例疑似梅毒患者,患者在判断为疑似病例后,于次日清晨抽取5mL静脉血送至免疫实验室,进行甲苯胺红不加热血清... 目的探讨早期皮损组织液的荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测在梅毒诊断中的价值。方法选择2014年9月至2016年9月该院收治的40例疑似梅毒患者,患者在判断为疑似病例后,于次日清晨抽取5mL静脉血送至免疫实验室,进行甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)、梅毒螺旋体抗体ELISA检测;并收集皮损组织液,进行FQ-PCR检测;均采用苄星青霉素治疗3、6个月后再次检测,记录转阴率。结果 ELISA、FQ-PCR总检出率比较,差异无统计学意义[97.50%(39/40)与95.00%(38/40),P〉0.05];ELISA、FQ-PCR总检出率均明显比TRUST总检出率高,差异有统计学意义[97.50%(39/40)与67.50%(27/40),95.00%(38/40)与67.50%(27/40),P〈0.05];在治疗后3个月、6个月时,ELISA、FQ-PCR转阴率均明显高于TRUST,差异有统计学意义(P〈0.05),FQ-PCR转阴率和ELISA比较,差异无统计学意义(P〉0.05);在FQ-PCR检测结果中,治疗后TP-DNA定量平均值均得到明显降低,Ⅰ期、Ⅱ期和治疗前比较,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论采用早期皮损组织液FQ-PCR可有效测定梅毒螺旋体DNA,有利于梅毒诊断,临床应用价值高。 展开更多
关键词 梅毒 组织液 荧光定量聚合酶链反应 梅毒螺旋体
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