期刊文献+
共找到44篇文章
< 1 2 3 >
每页显示 20 50 100
L-天冬氨酸-α-脱羧酶基因5′端二级结构对重组表达的抑制机制及消除策略 预览
1
作者 令狐梅 韩来闯 +1 位作者 周哲敏 崔文璟 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2019年第16期1-10,共10页
探究赤拟谷盗Tribolium castaneum L-天冬氨酸-α-脱羧酶(PanD)与人工高效表达元件适配过程中翻译抑制产生的机制,并发展新的消除策略.首先在枯草芽孢杆菌中利用高效表达元件验证翻译抑制现象并分析了翻译抑制产生的机制,同时融合sfGFP... 探究赤拟谷盗Tribolium castaneum L-天冬氨酸-α-脱羧酶(PanD)与人工高效表达元件适配过程中翻译抑制产生的机制,并发展新的消除策略.首先在枯草芽孢杆菌中利用高效表达元件验证翻译抑制现象并分析了翻译抑制产生的机制,同时融合sfGFP考察其对翻译抑制的影响,筛选与PanD酶适配性强的精简融合肽.结果显示,强组成型启动子不能介导PanD高表达,呈翻译抑制.分析证实,panD转录后mRNA的5'编码区与5'UTR形成抑制性的二级结构,降低翻译起始效率.将两种报告基因和其N端部分序列作为绝缘肽分别与PanD的N端融合后均能够提升重组蛋白的表达水平,消除由mRNA分子内部的顺式作用导致的翻译抑制现象.这为深入探索利用通用型肽绝缘子元件稳定异源基因在底盘中的表达提供依据. 展开更多
关键词 L-天冬氨酸-α-脱羧酶 MRNA二级结构 N端截断 融合 枯草芽孢杆菌
在线阅读 免费下载
构成单元的多肽构象对融合肽功能的影响
2
作者 赵敏 毛靖 王丹 《临床口腔医学杂志》 2018年第8期464-467,共4页
目的:比较三种具有不同多肽构象的融合肽对金属钛表面的亲和性及其对轻力负载下细胞反应的双向生物学功能。方法:设计3种不同多肽构象的融合肽:TBP-RGD,TBP-cyclicRGD(含有环状结构RGD)和TBP-linerRGD(含有线性结构RGD);利用石... 目的:比较三种具有不同多肽构象的融合肽对金属钛表面的亲和性及其对轻力负载下细胞反应的双向生物学功能。方法:设计3种不同多肽构象的融合肽:TBP-RGD,TBP-cyclicRGD(含有环状结构RGD)和TBP-linerRGD(含有线性结构RGD);利用石英晶体微天平(QCM-D)比较3种融合肽在钛表面的结合能力;通过MC3T3-E1成骨细胞黏附、增殖实验比较了融合肽对离心力负载下细胞的生物反应。结果:QCM-D显示TBP-cyclicRGD与金属钛表面的亲和性最强,而TBP-linerRGD最弱;经过融合肽涂层修饰的钛表面,48 h时TBP-cyclicRGD促细胞增殖最强。结论:构成单元中不同多肽构象的融合肽对钛表面的结合力有差异,其中环状构象的TBP-cyclicRGD能显著提高融合肽对金属钛的识别和结合能力,并有助于提高成骨细胞在力学负载条件下的增殖活动。 展开更多
关键词 融合 成骨细胞 石英晶体微天平(QCM-D) 力加载
构成单元的连接方式对双靶向融合肽功能的影响
3
作者 赵敏 毛靖 王丹 《临床口腔医学杂志》 2018年第7期401-404,共4页
目的:探讨双靶向融合肽中构成单元的连接方式对融合肽修饰的钛表面成骨细胞在力负载下功能的影响。方法:设计将GGG片段插入到融合肽TBP-RGD中,用多肽对钛片进行涂层修饰后,检测其表面生长的成骨细胞在机械负载刺激下基因表达。结果:... 目的:探讨双靶向融合肽中构成单元的连接方式对融合肽修饰的钛表面成骨细胞在力负载下功能的影响。方法:设计将GGG片段插入到融合肽TBP-RGD中,用多肽对钛片进行涂层修饰后,检测其表面生长的成骨细胞在机械负载刺激下基因表达。结果:基因c-fos的表达量在30 g或90 g的离心力刺激下时,TBP-RGD组最高(P〈0.05);180 g力值时,TBP-GGG-RGD组最具有优势(P〈0.05)。Cbfα1的表达量在三种力值负载下,最高峰值均出现在TBP-RGD组(P〈0.05),TBP-GGG-RGD未能提高Cbfα1的表达。结论:双靶向融合肽TBP-RGD能促进其修饰钛片表面的成骨细胞在力学负载下的基因c-fos和Cbfα1表达;增加"linker"GGG结构并不能进一步加强融合肽功能单位的作用。 展开更多
关键词 融合 机械负载 基因表达
CTP-OD1-HA和CTP-OD2-HA融合肽或联合imatinib对K562细胞增殖的影响 预览
4
作者 肖恒 任彦斌 +5 位作者 杨志明 周淑杰 尹蕾 秦志梅 许玲 李守霞 《国际检验医学杂志》 CAS 2017年第14期1876-1878,共3页
目的研究CTP-OD1-HA和CTP-OD2-HA融合肽及联用imatinib对K562细胞增殖的影响。方法将前期制备的CTP-OD1-HA和CTP-OD2-HA融合肽或连同imatinib作用于K562细胞后,应用细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒(MTT)、克隆形成试验方法检测和比较细... 目的研究CTP-OD1-HA和CTP-OD2-HA融合肽及联用imatinib对K562细胞增殖的影响。方法将前期制备的CTP-OD1-HA和CTP-OD2-HA融合肽或连同imatinib作用于K562细胞后,应用细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒(MTT)、克隆形成试验方法检测和比较细胞增殖情况。结果 MTT检测发现,CTP-OD1-HA和CTP-OD2-HA融合肽能够抑制K562细胞增殖,联用imatinib后,效果更加明显;克隆形成试验结果显示,CTP-OD1-HA和CTP-OD2-HA可抑制K562细胞株的克隆形成能力。结论 CTP-OD1-HA和CTP-OD2-HA融合肽可以特异性抑制K562细胞的增殖,并增加imatinib的敏感性。 展开更多
关键词 慢性粒细胞白血病 融合 细胞增殖 BCR-ABL
在线阅读 下载PDF
尼帕病毒进入抑制剂研究进展 被引量:1
5
作者 唐克 郭颖 《病毒学报》 CSCD 北大核心 2017年第5期798-807,共10页
尼帕病毒(Nipah virus)属副粘病毒科亨尼帕病毒属,是在南亚各国出现的一种人畜共患病高致死率病毒。自1999年以来至少造成387人死亡,属生物安全4级病原(BSL-4),迄今为止尚无针对该病毒的疫苗或药物批准上市。近年来,以尼帕病毒进入... 尼帕病毒(Nipah virus)属副粘病毒科亨尼帕病毒属,是在南亚各国出现的一种人畜共患病高致死率病毒。自1999年以来至少造成387人死亡,属生物安全4级病原(BSL-4),迄今为止尚无针对该病毒的疫苗或药物批准上市。近年来,以尼帕病毒进入宿主细胞为靶点的结合抑制剂和融合抑制剂是抗该病毒研究的重点,本文对此领域进行综述。 展开更多
关键词 尼帕病毒(NiV) 进入抑制剂 中和抗体 融合
pH敏感的肿瘤靶向聚合物胶束的体外性质 被引量:1
6
作者 刘妍曦 黄园 周洲 《华西药学杂志》 CAS CSCD 2017年第5期459-463,共5页
目的制备肿瘤微环境敏感、具有肿瘤细胞靶向能力和穿膜能力的融合肽FQSIYPp IKRRRRRRRRHHHHC(FRH)修饰的聚合物胶束,并对其体外性质进行初步考察。方法采用FRH修饰N-(2-羟丙基)-甲基丙烯酰胺(HPMA)聚合物-β-谷甾醇(β-SITO),形... 目的制备肿瘤微环境敏感、具有肿瘤细胞靶向能力和穿膜能力的融合肽FQSIYPp IKRRRRRRRRHHHHC(FRH)修饰的聚合物胶束,并对其体外性质进行初步考察。方法采用FRH修饰N-(2-羟丙基)-甲基丙烯酰胺(HPMA)聚合物-β-谷甾醇(β-SITO),形成HPMA聚合物胶束(FRH-M),考察其理化性质、肿瘤细胞的摄取和抑制肿瘤细胞生长的效果。结果透射电镜显示:胶束为均匀的类球形。FRH-M胶束粒径约为55 nm,阿霉素载药量8.3%。该胶束在p H7.4条件下,Zeta电位为-3.01±0.05 m V,在p H6.4条件下,电荷翻转为5.27±0.32 m V。FRH-M的药物释放速度随释放介质的p H降低而加快。FRH-M的细胞摄取较未经修饰胶束的P-M提升了1.9倍;且在p H6.4条件下的细胞摄取明显高于p H7.4的,FRH-M的IC50值为1.40±0.41μg·m L~(-1),明显低于未经配体修饰的胶束(5.08±0.33μg·m L~(-1))。结论经FRH多肽修饰的聚合物胶束具有良好的肿瘤微环境响应能力,且有更好的细胞摄取能力和体外抗肿瘤活性,极具发展前景。 展开更多
关键词 FQS多 整合素ΑVΒ3 融合 肿瘤微环境 肿瘤细胞靶向 聚合物胶束 HPMA聚合物 阿霉素
户尘螨Ⅱ类变应原Derp2T细胞表位融合基因的克隆和原核表达 预览 被引量:2
7
作者 段彬彬 宋红玉 李朝品 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期264-268,共5页
目的 原核表达、纯化户尘螨(Dermatophagoides pteronyssinus)主要变应原Der p2的T细胞表位融合肽。 方法 将已报道的户尘螨Der p2中编码4个T细胞表位(T1-T4)的核苷酸序列以T1-T2-T3-T4的方式连接,人工合成为嵌合基因,命名为De... 目的 原核表达、纯化户尘螨(Dermatophagoides pteronyssinus)主要变应原Der p2的T细胞表位融合肽。 方法 将已报道的户尘螨Der p2中编码4个T细胞表位(T1-T4)的核苷酸序列以T1-T2-T3-T4的方式连接,人工合成为嵌合基因,命名为Der p2 T。PCR扩增目的基因Der p2 T,将纯化的扩增片段克隆至pET-28a(+)载体,构建原核重组表达质粒pET-28a(+)-Der p2 T,并进行双酶切验证。大量诱导表达含pET-28a(+)-Der p2 T的E. coli BL-21菌株,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,经Ni-NTA亲和层析获得纯化重组蛋白,并进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹(Western blotting)分析。ELISA法检测重组Der p2 T细胞表位融合肽对户尘螨过敏患者血清IgE抗体的结合能力。 结果 双酶切结果表明,构建了原核重组表达质粒pET-28a(+)-Der p2 T。SDS-PAGE分析结果显示,获得相对分子质量(Mr)为10 000的重组Der p2 T细胞表位融合肽。Western blotting分析结果显示,纯化了Der p2的T细胞表位融合肽。Der p2 T细胞表位融合肽对粉尘螨哮喘患者的血清IgE结合能力[(37.70±9.89)μg/ml]较Der p2显著降低[(85.89±9.63)μg/ml](P<0.01)。 结论 制备Der p2 T细胞表位融合肽。与Der p2相比,重组Der p2 T细胞表位融合肽对户尘螨过敏患者血清IgE抗体的结合能力明显降低。 展开更多
关键词 户尘螨 Ⅱ类变应原 T细胞表位 融合 蛋白质印迹
在线阅读 下载PDF
分泌表达肾癌抑制融合肽的重组腺伴随病毒对肾癌移植瘤的疗效
8
作者 张斌 陈杰 +6 位作者 刘雁 张士宝 刘双庆 刘波 王全颖 杨广笑 刘庆勇 《山东大学学报:医学版》 CAS 北大核心 2013年第5期33-36,共4页
目的观察分泌表达NT4-TAT-6×His-VHLβ肾癌抑制融合肽的重组腺伴随病毒作用于肾癌鸡胚移植瘤的疗效。方法将人肾癌细胞系RLC-310接种到鸡胚绒毛尿囊膜上。选取成瘤较好鸡胚,分别用rAAV/NT4-TAT-6×His-VHLβ(A组)、空病毒(... 目的观察分泌表达NT4-TAT-6×His-VHLβ肾癌抑制融合肽的重组腺伴随病毒作用于肾癌鸡胚移植瘤的疗效。方法将人肾癌细胞系RLC-310接种到鸡胚绒毛尿囊膜上。选取成瘤较好鸡胚,分别用rAAV/NT4-TAT-6×His-VHLβ(A组)、空病毒(B组)、PBS缓冲液(C组)进行干预,观察移植瘤生长及各组移植瘤的大小,采用HE染色及免疫荧光法比较各组的作用效果。结果 A组移植瘤生长速度明显慢于其他两组;A组移植瘤体积与B、C两组比较差异有统计学意义(P〈0.05);HE染色结果显示,A组鸡胚移植瘤生长受到抑制;荧光显微镜可观察到A组荧光明亮(++),对照组未观察到荧光(-)。结论 rAAV/NT4-TAT-6×His-VHLβ对肾癌鸡胚移植瘤有抗肿瘤效应,为肾癌的基因治疗研究提供了一种新的途径。 展开更多
关键词 肾肿瘤 鸡胚绒毛尿囊膜 融合 基因治疗 动物模型
融合肽 CTP-OD1 和 CTP-OD2 对 K562 和K562G01 细胞凋亡作用及分子机制研究 预览
9
作者 王海霞 肖恒 +5 位作者 曹唯希 陶崑 刘鑫 李会 黄世峰 冯文莉 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期848-851,共4页
目的探讨融合肽CTP-ODl和CTP—0132对伊马替尼(imatinib)敏感和耐药的慢性粒细胞白血病细胞株(K562、K562G01)的促凋亡生物学效应及其分子机制。方法将CTP—ODl、CTP—OD2融合肽分别处理K562和K562G01细胞,用瑞氏染色和DAPI染色检... 目的探讨融合肽CTP-ODl和CTP—0132对伊马替尼(imatinib)敏感和耐药的慢性粒细胞白血病细胞株(K562、K562G01)的促凋亡生物学效应及其分子机制。方法将CTP—ODl、CTP—OD2融合肽分别处理K562和K562G01细胞,用瑞氏染色和DAPI染色检测两种细胞的凋亡形态学变化;westernblot检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax及pBcr—Abl、pStat5、pCrkL变化。结果CTP—ODl和CTP.OD2处理K562和K562G01细胞后,胞浆出现空泡,细胞核碎裂,染色质浓缩、边缘化;westernblot结果表明,与阴性对照组相比,融合肽处理组Bax蛋白表达上调(P〈0.05),Bcl-2、pBcr-Abl、pStat5、pCrkL蛋白均表达减少(P均〈0.05)。结论CTP.ODI和CTP—OD2通过抑制Bcr.Abl激酶活性促进imatinib敏感株K562和耐药株K562G01细胞凋亡。 展开更多
关键词 Bcr—Abl癌蛋白 伊马替尼 融合 细胞凋亡
在线阅读 下载PDF
p53N15融合肽转染肺腺癌细胞系H1299的抗肿瘤作用
10
作者 王宏涛 杜绪仓 +5 位作者 李曙东 豆亚伟 曹燕飞 田伟 王全颖 杨广笑 《中华胸心血管外科杂志》 CSCD 北大核心 2011年第4期232-235,共4页
目的探讨p53N15融合肽转染对肺腺癌细胞H1299体外生长的抑制作用。方法通过腺体相关病毒(adeno—associated virusAAV)载体把p53N15融合肽高效导入p53缺失肺腺癌H1299细胞系,应用相差倒置显微镜观察、MTf细胞活性试验及流式细胞仪技... 目的探讨p53N15融合肽转染对肺腺癌细胞H1299体外生长的抑制作用。方法通过腺体相关病毒(adeno—associated virusAAV)载体把p53N15融合肽高效导入p53缺失肺腺癌H1299细胞系,应用相差倒置显微镜观察、MTf细胞活性试验及流式细胞仪技术分析p53N15对肺癌细胞的抑制作用。结果p53N15融合肽在H1299细胞中得到了高效表达并发挥明显效应,表现为显微镜下,重组病毒转染72h可见大片细胞死亡。MTF试验分析,重组病毒转染组细胞活性明显降低。流式细胞仪技术显示,重组病毒转染组可见大量死亡细胞。结论p53N15融合肽转染可明显抑制肺腺癌细胞H1299的体外生长。 展开更多
关键词 肺肿瘤 基因疗法 基因 p53 融合
minTBP-PRGDN双靶向融合肽与金属钛表面作用稳定性的研究 被引量:1
11
作者 龚士强 张静涛 +2 位作者 刘燕 毛靖 周彬 《临床口腔医学杂志》 2010年第3期133-135,共3页
目的:研究minTBP-PRGDN双靶向融合肽与金属钛表面结合的稳定性及其影响因素。方法:采用FITC标记三种多肽(minTBP-PRGDN、minTBP和PRGDN),在不同离子强度、孵育温度及pH值条件下将多肽溶液分别与钛片孵育过夜,利用荧光显微镜比较分... 目的:研究minTBP-PRGDN双靶向融合肽与金属钛表面结合的稳定性及其影响因素。方法:采用FITC标记三种多肽(minTBP-PRGDN、minTBP和PRGDN),在不同离子强度、孵育温度及pH值条件下将多肽溶液分别与钛片孵育过夜,利用荧光显微镜比较分析三种多肽在不同条件下与钛片的结合强度。结果:三种多肽与钛表面均存在结合力,其结合力受离子强度、孵育温度和pH的影响。合适的离子强度有助于多肽在钛表面的结合,在一定范围内,多肽的钛结合能力随着温度的递增而存在一个递减的过程,pH=7.0是多肽与钛表面结合的最适宜pH。结论:minTBP-RGD融合肽不影响minTBP与钛表面的结合能力,4℃、pH=7.0是多肽与钛表面结合适宜环境条件。 展开更多
关键词 融合 稳定性 结合力
minTBP-1-PRGDN双靶向融合肽对成骨细胞增殖影响的研究
12
作者 王丹 龚士强 +4 位作者 谢晖 廖小福 毛靖 刘燕 周彬 《临床口腔医学杂志》 2010年第9期536-538,共3页
目的:探讨融合肽minTBP-1-PRGDN作为钛种植体表面涂层,对钛片表面成骨细胞增殖的影响。方法:MTT法检测MC3T3-E1成骨细胞在不同涂层的钛片表面粘附24h、48h、72h后增殖数量的差异;金相显微镜观察各组细胞的生长形态及密度;Real-timePC... 目的:探讨融合肽minTBP-1-PRGDN作为钛种植体表面涂层,对钛片表面成骨细胞增殖的影响。方法:MTT法检测MC3T3-E1成骨细胞在不同涂层的钛片表面粘附24h、48h、72h后增殖数量的差异;金相显微镜观察各组细胞的生长形态及密度;Real-timePCR定量比较细胞增殖相关基因cyclin D1的表达差异。结果:各组中成骨细胞均随着时间延长而出现增殖,24h时minTBP-PRGDN组细胞增殖数量明显高于空白对照组(P〈0.05);72h时,minTBP-PRGDN组的cyclin D1表达水平最高。结论:融合肽minTBP-PRGDN能有效促进钛表面成骨细胞的增殖。 展开更多
关键词 融合 成骨细胞 细胞增殖
靶向抗肿瘤肽的构建及其生物学活性研究 预览 被引量:2
13
作者 马丽 蔡在龙 +1 位作者 王庆蓉 雷呈祥 《中国生化药物杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期 19-22,共4页
目的构建重组靶向抗肿瘤肽(Citrostatin),研究其生物学活性。方法构建Citrostatin重组基因,经原核生物表达和纯化获得Citrostatin融合蛋白,通过内皮细胞杀伤实验、细胞毒活性实验、体外管状机构生成抑制实验等分析Citrostatin的生... 目的构建重组靶向抗肿瘤肽(Citrostatin),研究其生物学活性。方法构建Citrostatin重组基因,经原核生物表达和纯化获得Citrostatin融合蛋白,通过内皮细胞杀伤实验、细胞毒活性实验、体外管状机构生成抑制实验等分析Citrostatin的生物学活性。结果Citrostatin融合蛋白经表达、酶切纯化后,目的蛋白纯度达90%以上。Citrostatin能明显抑制内皮细胞ECV304的增殖(IC50=2.28μmol/L),有效杀伤肿瘤细胞1990及NCI—H640(IC50分别为9.24,2.74μmol/L),并明显抑制体外管状结构的生成。结论成功构建了重组靶向抗肿瘤肽Citrostatin,细胞和血管水平研究表明该融合肽同时具有抑制肿瘤新生血管的形成和直接杀伤肿瘤的双重活性。 展开更多
关键词 Citrostatin 融合 抗肿瘤药 血管生成抑制
在线阅读 下载PDF
MinTBP-1-PRGDN双靶向融合肽对成骨细胞粘附影响的比较研究
14
作者 王丹 廖小福 +3 位作者 龚士强 刘燕 毛靖 周彬 《临床口腔医学杂志》 2010年第10期584-586,共3页
目的:以胎牛血清(Fetal bovine serum,FBS)涂层为标准对照,研究minTBP-1-PRGDN双靶向融合肽对成骨细胞粘附的影响。方法:对商用纯钛进行minTBP-1-PRGDN双靶向融合多肽涂层,以无涂层的钛表面及胎牛血清涂层的钛表面分别作为空白对照... 目的:以胎牛血清(Fetal bovine serum,FBS)涂层为标准对照,研究minTBP-1-PRGDN双靶向融合肽对成骨细胞粘附的影响。方法:对商用纯钛进行minTBP-1-PRGDN双靶向融合多肽涂层,以无涂层的钛表面及胎牛血清涂层的钛表面分别作为空白对照和阳性对照,比较不同涂层处理对成骨细胞附着及伸展的影响。结果:成骨细胞粘附1h后,minTBP-1-PRGDN融合肽涂层的钛片上的细胞附着数量最多,FBS涂层表面次之,无涂层的钛片表面细胞数量最少、且与minTBP-1-PRGDN组比较有统计学差异(P〈0.05);经形态计量学分析:FBS组细胞伸展面积最大,minTBP-1-PRGDN组次之,无涂层组细胞伸展最小。结论:minTBP-1-PRGDN融合肽涂层能提高成骨细胞在钛表面的附着和伸展能力。 展开更多
关键词 融合 成骨细胞 形态计量学 细胞粘附
NT4-TAT-6×His-VHLβ结构域肾癌抑制融合肽cDNA克隆的构建 被引量:1
15
作者 陈杰 刘庆勇 +5 位作者 阮喜云 张士宝 张建军 李宗武 杨广笑 王全颖 《山东大学学报:医学版》 CAS 北大核心 2009年第7期共5页
目的构建VHL蛋白(von Hippel-Lindau protein,pVHL)β结构域肾癌抑制融合肽cDNA,并将其应用于肾癌的微基因治疗。方法分别设计合成pVHLβ结构域104-123短肽cDNA的正向和反向引物以及编码TAT-6×His cD-NA的正、反向引物,使用互为引... 目的构建VHL蛋白(von Hippel-Lindau protein,pVHL)β结构域肾癌抑制融合肽cDNA,并将其应用于肾癌的微基因治疗。方法分别设计合成pVHLβ结构域104-123短肽cDNA的正向和反向引物以及编码TAT-6×His cD-NA的正、反向引物,使用互为引物模板PCR方法,扩增获得具有NaeI/Eco72I酶识别位点的TAT-6×His cDNA片段和具有Eco72I/BamH I酶识别位点的VHLβ抑制肽cDNA片段,将两个片段分别克隆到pGEM-T easy中,使用双脱氧终止法测序,通过DNASIS软件分析同数据库资料一致性和编码的氨基酸序列。用NaeI和BamH I双酶切获取的TAT-6×His-VHLβcDNA片段插入到具有NT4信号肽的pBV220载体中,构建了pBV220-NT4-TAT-6×His-VHLβ质粒。结果经DNA测序证实,获得了编码TAT-6×His cDNA片段和编码VHLβ抑制肽的cDNA片段,分析证实核酸序列和推导的氨基酸同数据库资料一致。重组质粒pBV220-NT4-TAT-6×His-VHLβ酶切图谱证实已将NT4-TAT-6×His-VHLβ融合... 展开更多
关键词 VHLβ结构域肾癌抑制 融合 微基因 肾肿瘤
汉坦病毒GM04—38株包膜糖蛋白上融合肽的初步确定 被引量:1
16
作者 曹海霞 陶泽新 +8 位作者 郑晓民 刘晓丽 王桂亭 许洪芝 温红玲 宋艳艳 赵丽 姚苹 王志玉 《山东大学学报:医学版》 CAS 北大核心 2009年第5期125-130,共6页
目的初步确定汉坦病毒GM04-38株包膜糖蛋白上潜在的融合肽区域。方法采用基因定点突变技术将潜在融合肽区域的十个关键氨基酸突变成性质相左的氨基酸,转柒VeroE6细胞后,间接免疫荧光(IFA)检测糖蛋白表达,采用Giemsa染色法观察细胞... 目的初步确定汉坦病毒GM04-38株包膜糖蛋白上潜在的融合肽区域。方法采用基因定点突变技术将潜在融合肽区域的十个关键氨基酸突变成性质相左的氨基酸,转柒VeroE6细胞后,间接免疫荧光(IFA)检测糖蛋白表达,采用Giemsa染色法观察细胞融合现象。结果在Vero E6细胞中成功表达出糖蛋白,IFA显示关键氨基酸突变前后细胞中均有荧光信号,呈胞浆分布,但细胞融合现象在突变后消失。结论潜在融合肽区域的十个氨基酸突变均对细胞融合产生明显的影响,提示该段区域很可能是病毒的融合肽。 展开更多
关键词 汉坦病毒 包膜糖蛋白 细胞融合 融合
NT4-SAC-HA2-TAT融合基因表达载体的构建及鉴定 被引量:1
17
作者 张士宝 刘庆勇 +5 位作者 阮喜云 陈杰 张建军 李宗武 杨广笑 王全颖 《山东大学学报:医学版》 CAS 北大核心 2009年第6期15-19,共5页
目的构建NT4-SAC-HA2-TAT融合肽cDNA克隆,探讨前列腺凋亡反应基因-4(Par-4)核心区凋亡肽(SAC)作为目的基因对前列腺癌的治疗作用。方法应用互为引物模板法合成两端具有NaeI和KpnI酶识别位点的SAC cDNA片段。将所得SAC和已有HA3-TA... 目的构建NT4-SAC-HA2-TAT融合肽cDNA克隆,探讨前列腺凋亡反应基因-4(Par-4)核心区凋亡肽(SAC)作为目的基因对前列腺癌的治疗作用。方法应用互为引物模板法合成两端具有NaeI和KpnI酶识别位点的SAC cDNA片段。将所得SAC和已有HA3-TAT片段克隆到具有相应酶切位点的pBV220-NT4质粒,得到pBV220-NT4-SAC—HA2—TAT重组质粒。PCR扩增NT4-SAC—HA2-TAT cDNA片段,并将其克隆到pGEM-Teasy中,转化细菌筛选阳性克隆,酶切鉴定,序列测定分析。结果经DNA测序、限制性内切酶酶切等证实,PCR获得了编码NaeI和KpnI酶切位点的SACeDNA片段,并将NT4、SAC、HA2-TAT亚克隆于pBV220内。结论成功构建了NT4-SAC-HA2-TAT融合基因的原核表达载体pBV220—NT4-SAC—HA2-TAT. 展开更多
关键词 前列腺凋亡反应基因-4 融合 前列腺肿瘤 基因疗法
两种促进烫伤小鼠愈合的融合肽 预览 被引量:1
18
作者 方晨 郭葆玉 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期 259-265,共7页
目的:观察设计合成的两种融合肽对小鼠烫伤的疗效。方法:针对烫伤经历炎症反应、感染、而后细胞增殖修复的特点,选择相应的氨基酸序列人工合成两种融合肽M-Tα1和M-T508,将其应用于深Ⅱ度烫伤的小鼠模型上,观察愈合情况。同时,为了在... 目的:观察设计合成的两种融合肽对小鼠烫伤的疗效。方法:针对烫伤经历炎症反应、感染、而后细胞增殖修复的特点,选择相应的氨基酸序列人工合成两种融合肽M-Tα1和M-T508,将其应用于深Ⅱ度烫伤的小鼠模型上,观察愈合情况。同时,为了在微观领域证实愈合情况,选择了6个检测指标,包括:利用免疫组化方法检测烫伤皮肤组织中Ⅰ型胶原、血管内皮生长因子(VEGF)、增殖细胞核抗原(PCNA)和细胞角蛋白(CK)的表达;用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测烫伤小鼠血清中TNF-α的含量变化和伊文思蓝(Evans blue)染色检测烫伤皮肤组织中血管通透性的改变。结果:两组用药组比对照组创伤愈合时间提前1周左右;免疫组化结果显示两组用药组第10天Ⅰ型胶原、VEGF、PCNA和CK都呈阳性表达,而同时相的对照组各个指标则是阴性结果。烫伤组织TNF-α的ELISA检测和血管通透性的Evans blue检测则印证了我们所合成的融合肽有抗炎、抗渗作用。结论:设计合成的两种融合肽对烫伤小鼠均有明显加快愈合的作用。 展开更多
关键词 融合 电烧伤 伤口愈合 免疫组织化学
在线阅读 下载PDF
Citrostatin的构建与活性分析 预览 被引量:1
19
作者 马丽 杨生生 +2 位作者 杨志峰 陈欢 蔡在龙 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第11期 1249-1253,共5页
目的:本研究拟通过人工化学合成技术将2个不同机制发挥抗癌作用的小肽结合起来,产生一个融合肽Citrostatin,并研究其生物学活性,以期获得具有双重抗肿瘤功能的抗肿瘤肽。方法:化学合成Citrostatin并经HPLC分离纯化,通过内皮细胞... 目的:本研究拟通过人工化学合成技术将2个不同机制发挥抗癌作用的小肽结合起来,产生一个融合肽Citrostatin,并研究其生物学活性,以期获得具有双重抗肿瘤功能的抗肿瘤肽。方法:化学合成Citrostatin并经HPLC分离纯化,通过内皮细胞杀伤实验、细胞毒活性分析、体外管状结构生成抑制实验,以及鸡胚绒毛尿囊膜血管生成抑制实验分析Citrostatin的生物学活性。结果:Citrostatin可明显抑制内皮细胞ECV304的增殖(ED50为6.2μg/m1),有效杀伤肿瘤细胞1990及NCFH640细胞(ED50分别为50μg/ml、16μg/m1),并明显抑制体外管状结构生成及鸡胚绒毛尿囊膜血管的生成。结论:本研究成功构建并合成了抗肿瘤融合48肽Citrostatin,研究表明该融合肽同时具有抑制肿瘤组织新生血管形成和直接杀伤肿瘤的双重活性。 展开更多
关键词 Citrostatin 融合 抗肿瘤药 血管生成抑制
在线阅读 下载PDF
融合有酸性片段的抗菌肽串连重复基因的构建 预览
20
作者 王晓波 刘飞鹏 《生物技术》 CAS CSCD 2003年第2期 2-4,共3页
为提高抗菌肽的表达,设计在抗菌肽基因的N 端融合一段编码酸性肽的片段以减轻表达产物对宿主的毒性,通过含有酶切位点的接头将该融合肽基因以同向串连的方式连接成多拷贝基因,克隆至pUC19载体.为此,分段设计合成了编码天蚕素A-蜂毒素杂... 为提高抗菌肽的表达,设计在抗菌肽基因的N 端融合一段编码酸性肽的片段以减轻表达产物对宿主的毒性,通过含有酶切位点的接头将该融合肽基因以同向串连的方式连接成多拷贝基因,克隆至pUC19载体.为此,分段设计合成了编码天蚕素A-蜂毒素杂合肽和酸性肽的DNA片段.首先将其连接成融合肽全基因,然后分别与含相同粘性末端的前后接头连接.通过控制基因和接头加入的量及次序,可得到两侧有EcoRⅠ和SalⅠ酶切位点的同向串连的多拷贝基因.选取合适拷贝数的基因,将其克隆至pUC19载体,PCR扩增和DNA测序证明多拷贝基因构建成功且基因方向相同.结果表明,该方法能简捷高效地获得所需的多拷贝基因,为提高表达产物的量打下基础. 展开更多
关键词 抗菌 抗菌药物 酸性 同向串连 多拷贝基因 融合 天蚕素A 蜂毒素 基因表达
在线阅读 下载PDF
上一页 1 2 3 下一页 到第
使用帮助 返回顶部 意见反馈