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致病性嗜水气单胞菌单克隆抗体的制备及特性鉴定 预览
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作者 胡谦 翟绪昭 +9 位作者 谢曼曼 曾海娟 马兰 丁承超 王淑娟 孙静娟 李杰 王艳 董庆利 刘箐 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2019年第1期84-90,共7页
嗜水气单胞菌是一种人-兽-鱼共患的条件致病菌,本研究旨在利用单克隆抗体技术,制备抗致病性嗜水气单胞菌抗体。以嗜水气单胞菌CCTCC M2014157野生型菌株免疫BALB/c小鼠,利用间接酶联免疫吸附测定技术筛选,获得能够稳定分泌抗嗜水气单胞... 嗜水气单胞菌是一种人-兽-鱼共患的条件致病菌,本研究旨在利用单克隆抗体技术,制备抗致病性嗜水气单胞菌抗体。以嗜水气单胞菌CCTCC M2014157野生型菌株免疫BALB/c小鼠,利用间接酶联免疫吸附测定技术筛选,获得能够稳定分泌抗嗜水气单胞菌单克隆抗体的杂交瘤细胞株。制备的腹水依次采用饱和硫酸铵沉淀和Protein-G柱亲和层析纯化,采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析抗体纯度。制备的腹水抗体效价达16 000,纯化后(4 mg/mL)效价达8 000,亚型鉴定为IgG2a。特异性分析显示,纯化后抗体能与嗜水气单胞菌结合,与11株常见的致病菌均无交叉反应。本研究为快速检测致病性嗜水气单胞菌提供参考。 展开更多
关键词 致病性 嗜水气单胞菌 单克隆抗体 免疫吸附测定 特性鉴定
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基于噬菌体展示纳米抗体的绿色免疫PCR检测脱氧雪腐镰刀菌烯醇 预览
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作者 江东健 罗秀儿 何庆华 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第8期256-261,共6页
目的:在获得脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)抗独特型纳米抗体的前期基础上,将纳米抗体作为酶标抗原的替代物,应用于荧光定量免疫聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)体系,实现DON的高灵敏、绿色免疫分析。方法:将... 目的:在获得脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)抗独特型纳米抗体的前期基础上,将纳米抗体作为酶标抗原的替代物,应用于荧光定量免疫聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)体系,实现DON的高灵敏、绿色免疫分析。方法:将特异性结合DON抗体的噬菌体展示纳米抗体(P-28)作为竞争抗原,以编码P-28纳米抗体的DNA为靶标,设计特异性PCR扩增引物,优化荧光定量免疫PCR退火温度、抗DON抗体浓度、P-28投入量等参数,建立基于间接竞争模式的荧光定量免疫PCR检测DON的方法。结果:本研究建立的荧光定量免疫PCR方法线性检测范围为0.1~1000ng/mL,IC50值为(3.96±2.21)ng/mL,最低检出限为0.048ng/mL,并与其他真菌毒素无交叉反应。结论:该方法直接使用噬菌体展示纳米抗体作为竞争抗原的替代物,应用于免疫PCR体系,避免了使用传统的化学合成酶标抗原所带来的环境污染、操作毒性等缺陷,并具有良好的特异性及灵敏度。 展开更多
关键词 脱氧雪腐镰刀菌烯醇 抗独特性抗体 噬菌体展示纳米抗体 免疫吸附测定 免疫PCR
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外周血miR-15a、miR-16检测在献血者早期乙型肝炎病毒感染筛查中意义 预览
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作者 韩金玉 《国际检验医学杂志》 CAS 2019年第7期839-842,846共5页
目的探讨微小RNA(miRNA)miR-15a、miR-16在献血者乙型肝炎病毒(HBV)早期感染筛查中的意义。方法选择2017年2月至2018年1月该中心血站的无偿献血血液样本156份,其中有49份血液样本常规酶联免疫吸附测定(ELISA)双试剂筛查HBsAg呈阳性,而核... 目的探讨微小RNA(miRNA)miR-15a、miR-16在献血者乙型肝炎病毒(HBV)早期感染筛查中的意义。方法选择2017年2月至2018年1月该中心血站的无偿献血血液样本156份,其中有49份血液样本常规酶联免疫吸附测定(ELISA)双试剂筛查HBsAg呈阳性,而核酸HBV检测呈阴性,作为E单阳组;54份血液样本经ELISA筛查和核酸检测(NAT)均为阳性,作为EN双阳组;其余63份血液样本经ELISA筛查和NAT均为阴性,作为正常组。采用实时荧光定量PCR检测3组献血者miR-15a、miR-16的表达情况。结果相较于正常组样本,E单阳组和EN双阳组血液样本miR-15a和miR-16表达均明显下调(P<0.05);且EN双阳组血液样本miR-15a和miR-16表达下调较E单阳组更为明显(P<0.05)。经Pearson相关性分析,miR-15a和miR-16与EN双阳组患者HBV DNA拷贝数呈负相关(r=-0.725、-0.866,P<0.05)。结论 miRNA-15a、miRNA-16表达下调与HBV早期感染和复制活动密切相关,在HBV感染的早期筛查中具有潜在的应用价值。 展开更多
关键词 免疫吸附测定 核酸检测技术 乙型肝炎病毒 微小RNA
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检测黑猩猩腺病毒68型抗原的双抗体夹心ELISA的建立
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作者 王宁 吴冠军 +4 位作者 李小唤 徐灿 康丽 李洪艳 石慧颖 《国际生物制品学杂志》 CAS 2019年第1期15-19,共5页
目的 建立定量黑猩猩腺病毒68型(chimpanzee adenovirus type 68,AdC68)含量的双抗体夹心ELISA,并验证其可行性.方法 用表达绿色荧光蛋白(green fluorescence protein,GFP)的非复制型AdC68(AdC68GFP)感染HEK293细胞,收获病变细胞并进行... 目的 建立定量黑猩猩腺病毒68型(chimpanzee adenovirus type 68,AdC68)含量的双抗体夹心ELISA,并验证其可行性.方法 用表达绿色荧光蛋白(green fluorescence protein,GFP)的非复制型AdC68(AdC68GFP)感染HEK293细胞,收获病变细胞并进行超速离心纯化AdC68GFP.用纯化AdC68GFP免疫家兔制备抗AdC68GFP抗体.以抗AdC68GFP抗体为包被抗体,辣根过氧化物酶标记的抗腺病毒HEXON IgG为酶标抗体,建立双抗体夹心ELISA,确定该法的线性范围,并验证该法的准确度、精密度、专属性和适用性.结果 纯化AdC68GFP的蛋白浓度为38.8 μg/ml,其中HEK293细胞蛋白浓度低于0.3 μg/ml.双抗体夹心ELISA的最适包被抗体和酶标抗体浓度分别为1∶50和1∶500.该法的线性范围为0.06~3.88 μg/ml,线性相关系数为0.999 6.高、低浓度AdC68GFP样品的回收率分别为93.17%和94.33%,变异系数分别为6.72%和3.44%.该法可特异性检测AdC68GFP抗原,未发现与HEK293细胞蛋白发生交叉反应.应用该法检测AdC68GFP纯化过程中的样品可反映病毒的纯化效果.结论 建立的双抗体夹心ELISA具有良好的准确度、精密度和专属性,可用于AdC68纯化工艺过程中对病毒蛋白含量的快速检测. 展开更多
关键词 免疫吸附测定 哺乳动物腺病毒属 病毒体 定量分析
PD-L1检测方法在非小细胞肺癌的研究进展
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作者 郭雪晶 曹赫 +1 位作者 周建娅 周建英 《中国肺癌杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期40-44,共5页
PD-1/PD-L1抑制剂在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)一线和二线治疗中均占重要地位,为NSCLC治疗提供了新的策略。已有的临床试验表明有效检测PD-L1的表达是免疫抑制剂治疗的关键环节。然而,目前尚缺乏PD-L1检测的金标... PD-1/PD-L1抑制剂在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)一线和二线治疗中均占重要地位,为NSCLC治疗提供了新的策略。已有的临床试验表明有效检测PD-L1的表达是免疫抑制剂治疗的关键环节。然而,目前尚缺乏PD-L1检测的金标准。近几年国内外免疫组织化学技术(immunohistochemistry, IHC)和酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)不断创新,因而在PD-L1检测中有良好的应用前景。文章就PD-L1检测方法在NSCLC中的研究进展进行了总结和展望。 展开更多
关键词 PD-L1 非小细胞肺癌 免疫组织化学技术 免疫吸附测定
石家庄地区无偿献血者HIV感染趋势变化分析 预览
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作者 王素玲 王切 马海民 《河北医科大学学报》 CAS 2019年第2期203-207,共5页
目的分析2011—2017年不同献血人群人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)感染率的变化趋势,为有针对性地进行献血宣传和制定献血招募政策提供数据依据。方法收集河北省血液中心2011—2017年酶联免疫吸附测定(enzyme-link... 目的分析2011—2017年不同献血人群人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)感染率的变化趋势,为有针对性地进行献血宣传和制定献血招募政策提供数据依据。方法收集河北省血液中心2011—2017年酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)初筛HIV抗原抗体联合检测呈反应性并经免疫印迹确认试验呈HIV阳性的献血者,以及ELISA检测呈非反应性但核酸检测HIV-RNA呈反应性并经追溯确认呈HIV阳性的献血者。观察HIV阳性献血者的性别、年龄、职业分布特征,分析不同性别、年龄、职业无偿献血者HIV感染率的变化趋势。结果2011—2017年共检测血液标本1178295例,其中免疫印迹确认HIV阳性标本149例,核酸检测且追溯确认HIV阳性标本2例,献血者HIV感染率呈逐渐上升趋势(P<0.05);HIV阳性献血者以男性(96.03%)为主,其HIV感染率呈增高趋势(P<0.05);HIV阳性献血者以18~25岁(33.11%)和26~35岁(28.48%)为主,18~25岁献血者的HIV感染率呈增高趋势(P<0.05),26~35岁献血者的HIV感染率未见明显变化(P>0.05);HIV阳性献血者以自由职业者(33.11%)和职员(25.83%)为主,职员HIV感染率呈逐渐升高趋势(P<0.05),而自由职业者HIV感染率未见明显变化(P>0.05)。结论石家庄地区无偿献血者HIV感染率具有性别、年龄、职业的分布特征,且主要献血人群HIV感染率呈逐渐升高趋势。采供血机构应有针对性地加强献血者HIV防治知识的宣传教育,降低HIV感染率,提高血液安全。 展开更多
关键词 HIV 供血者 免疫吸附测定
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宫颈癌伴淋巴结转移患者血清HGF、VEGF检测的临床意义 预览
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作者 陈静 袁晓剑 《现代医药卫生》 2019年第8期1164-1166,共3页
目的研究血清细胞生长因子——肝细胞生长因子(HGF)、血管内皮生长因子(VEGF)在晚期宫颈癌伴淋巴结转移的变化规律及其各自在诊断、判断预后方面的价值。方法选取2008年3月至2010年3月重庆市九龙坡区人民医院收治或随访的及九龙坡区西... 目的研究血清细胞生长因子——肝细胞生长因子(HGF)、血管内皮生长因子(VEGF)在晚期宫颈癌伴淋巴结转移的变化规律及其各自在诊断、判断预后方面的价值。方法选取2008年3月至2010年3月重庆市九龙坡区人民医院收治或随访的及九龙坡区西彭镇卫生院随访的初治晚期宫颈鳞癌伴淋巴结转移患者40例,采用酶联免疫吸附测定法测定患者血清HGF、VEGF水平,并以同期住院的35例妇科良性肿瘤患者、17例宫颈炎患者及20例健康女性作为对照,分析各组研究对象HGF、VEGF水平的差异。结果宫颈癌伴淋巴结转移患者血清HGF、VEGF水平升高明显,VEGF水平升高较HGF更明显,差异均有统计学意义(P<0.05)。妇科良性肿瘤、宫颈炎患者及健康女性血清HGF、VEGF水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。HGF、VEGF诊断晚期宫颈癌伴淋巴结转移的灵敏度分别为75.0%、82.5%,特异性分别为95.0%、90.0%;诊断妇科良性肿瘤及宫颈炎的假阳性率分别为5.7%、11.8%,8.5%、11.8%。结论检测血清HGF、VEGF诊断晚期宫颈癌伴淋巴结转移的灵敏度较高,尤其是VEGF,进行血清HGF、VEGF的联合测定对鉴别宫颈炎与癌症、综合评估转移和患者预后具有较好的临床意义。 展开更多
关键词 宫颈肿瘤 淋巴转移 血清 肝细胞生长因子 血管内皮生长因子类 免疫吸附测定
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基于热分离法制备的人表皮侧抗原的Western印迹实验对大疱性类天疱疮的诊断价值评估
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作者 李锁 程险峰 +5 位作者 李新宇 李志量 荆可 向睿宇 张寒梅 冯素英 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期6-10,共5页
目的通过热分离方法制备人表皮侧蛋白,评价表皮侧蛋白Western印迹在大疱性类天疱疮(BP)诊断中的价值。方法热分离健康人皮肤制备人表皮侧抗原,以此为底物,对2015年1月至2017年8月在中国医学科学院皮肤病医院住院的22例BP患者及25例非BP... 目的通过热分离方法制备人表皮侧蛋白,评价表皮侧蛋白Western印迹在大疱性类天疱疮(BP)诊断中的价值。方法热分离健康人皮肤制备人表皮侧抗原,以此为底物,对2015年1月至2017年8月在中国医学科学院皮肤病医院住院的22例BP患者及25例非BP对照血清行Western印迹检测,同时对所有受试者血清行BP180 NC16A ELISA检测。应用统计软件SPSS22.0进行统计学分析。计数资料采用χ2检验及Fisher精确检验法分析。结果表皮侧蛋白Western印迹、BP180 NC16A ELISA诊断BP的敏感性分别为86.36%(95% CI为64.03%~96.41%)、95.45%(95% CI为75.11%~99.76%)(P=0.294),特异性分别为100%(95% CI为83.42%~100%)、92%(95% CI为75.11%~99.76%)(P=0.149)。BP患者表皮侧Western印迹条带分析显示,4例见相对分子质量(RMM)为230 000的蛋白条带,18例见180 000的蛋白条带,1例见120 000和1例见97 000蛋白条带,且为180 000蛋白条带的BP患者BP180 NC16A ELISA结果均大于50 U/ml。结论对BP患者行表皮侧蛋白Western印迹检测,主要阳性条带RMM为180 000;表皮侧蛋白Western印迹诊断BP的敏感性低于BP180NC16A ELISA,当患者自身抗体滴度较低时表皮侧蛋白Western印迹结果往往为阴性。 展开更多
关键词 类天疱疮 大疱性 印迹法 蛋白质 表皮 自身抗原 免疫吸附测定 热分离法 人表皮侧抗原
血清S-100B与C反应蛋白水平在脑外伤患者病情严重程度及预后评估中的临床价值
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作者 朱顺利 《中国基层医药》 CAS 2019年第1期101-103,共3页
目的 探讨血清S-100B与C反应蛋白( CRP)在脑外伤患者病情严重程度及预后评估中的临床价值.方法 选取开封市中医院2015年10月至2017年6月收治的脑外伤患者108例(脑外伤组)以及同期健康体检者30例(对照组)为研究对象,采用格拉斯哥昏迷评分... 目的 探讨血清S-100B与C反应蛋白( CRP)在脑外伤患者病情严重程度及预后评估中的临床价值.方法 选取开封市中医院2015年10月至2017年6月收治的脑外伤患者108例(脑外伤组)以及同期健康体检者30例(对照组)为研究对象,采用格拉斯哥昏迷评分( GCS)将脑外伤患者分为重度损伤者(重度组,26例),中度损伤者(中度组,58例),轻度损伤者(轻度组,24例);采用酶联免疫吸附试验( ELISA)检测所有对象血清S-100B,免疫比浊法测定CRP水平,比较不同组别血清S-100B和CRP水平,分析血清S-100B、CRP在脑外伤患者病情严重程度及预后评估中的临床价值.结果 对照组血清 S-100B 水平为(0. 36 ± 0. 12)μg/L,CRP水平为(1. 35 ± 0. 43)mg/L,与脑外伤组中三组的入院24 h血清S-100B、CRP差异均有统计学意义(F=175. 45、475. 42,均P<0. 01);脑外伤组中重度组、中度组、轻度组24 h、3 d、7 d、14 d血清S-100B水平、CRP水平差异均有统计学意义( F=89. 62、62. 45、42. 55、43. 22、183. 36、71. 12、70. 07、28. 99,均 P<0. 01);脑外伤患者预后良好的有92 例,预后较差的有16 例,预后良好组血清 S-100B、CRP 水平分别为(0.42 ±0.13)μg/L、(39.42 ±6.18)mg/L,均低于预后较差组的(1.73 ±0.46)μg/L、(68.42 ±7.54)mg/L,差异均有统计学意义(t=22. 93、16. 75,均P<0. 01).结论 通过检测血清S-100B、CRP水平能评估脑外伤患者的病情严重程度,判定患者的预后. 展开更多
关键词 颅脑外伤 昏迷 脑损伤后 免疫吸附测定 S-100B蛋白 散射测浊法和比浊法 C反应蛋白质 格拉斯昏迷量表 预后
慢性肾脏病病人胃蛋白酶原Ⅰ、Ⅱ检测的意义 预览
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作者 周萍 焦瑞宝 +1 位作者 章文 潘恺 《安徽医药》 CAS 2019年第1期66-68,共3页
目的探讨慢性肾脏病(CKD)病人蛋白酶原Ⅰ、Ⅱ检测结果对肾功能减退程度评估的价值。方法2015年10月至2016年3月铜陵市人民医院收治的117例慢性肾脏病病人,根据肾功能减退程度分四组;对照组选取84例健康者。以酶联免疫方法检测各组样本... 目的探讨慢性肾脏病(CKD)病人蛋白酶原Ⅰ、Ⅱ检测结果对肾功能减退程度评估的价值。方法2015年10月至2016年3月铜陵市人民医院收治的117例慢性肾脏病病人,根据肾功能减退程度分四组;对照组选取84例健康者。以酶联免疫方法检测各组样本的胃蛋白酶原Ⅰ(PGⅠ)、胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ)水平,肌氨酸氧化酶法检测血肌酐(SCr)水平,做对比分析。结果慢性肾脏病各组病人的PGⅠ水平(μg/L)(251.62±96.36、308.58±101.89、379.54±117.09、401.59±115.42)、PGⅡ水平(μg/L)(25.85±16.17、25.81±15.79、23.52±15.04、31.31±21.57)均明显高于对照组(P<0.05);随着肾功能减退程度的增加,PGⅠ的水平逐渐增高,PGⅠ与SCr呈明显正相关性(r=0.6180,P<0.05);CKD各组之间PGⅡ水平的差异无统计学意义(P>0.05),PGⅡ与SCr呈正相关性(r=0.2051,P>0.05)。结论胃功能指标PGⅠ、PGⅡ的检测结果有助于慢性肾脏病肾功能损伤程度的监测和评价,特别是在肾功能损伤的早期阶段。 展开更多
关键词 肾功能不全 慢性 胃蛋白原类 肌酸酐 免疫吸附测定
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ELISA法与TRUST法在梅毒检测中的应用价值比较
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作者 汪磊 张瑞生 《国际免疫学杂志》 CAS 2019年第2期157-161,共5页
目的探讨梅毒检测中酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法与甲苯胺红不加热血清试验(toluidine red unheated serum test,TRUST)法的应用价值.方法从南京市第一医院2017年1月至12月行梅毒血清学检测的患者中随... 目的探讨梅毒检测中酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法与甲苯胺红不加热血清试验(toluidine red unheated serum test,TRUST)法的应用价值.方法从南京市第一医院2017年1月至12月行梅毒血清学检测的患者中随机选取120份血清标本作为研究对象,每份血清标本被分为三份,分别应用ELISA试验、TRUST试验和梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)试验对标本进行梅毒检测,其中TPPA试验为确诊实验,对比ELISA法与TRUST法对梅毒检出结果、假阳性率、假阴性率、特异性和灵敏度.结果 TRUST法检出结果为真阳性率[53.84%(28/52)]、真阴性率[90.00%(63/70)]显著低于TPPA法[100%(68/68)],差异有统计学意义(P<0.05),ELISA法检出结果真阳性率[94.23%(49/52)]、真阴性率[97.06%(66/68)]相较于TPPA法[100%(68/68)],差异无统计学意义(P>0.05);ELISA法检测结果真阳性率显著优于TRUST法(P=0.000),ELISA法检测结果真阴性率较TRUST法无显著差异(P>0.05);ELISA法较TRUST法假阳性率无显著性差异(P=0.244),而ELISA法假阴性率[5.77%(3/52)]与TRUST法假阴性率[42.71%(24/57)]差异显著(P=0.000),TRUST法较ELISA法特异性无显著差异(P=0.069),而TRUST法灵敏度[56.00%(28/50)]显著低于ELISA法[94.23%(49/52)](P=0.000).结论 ELISA法在检出率、特异性和灵敏度等方面均高于TRUST法,与"金标准(TPPA)"符合率高,且操作简单,可标准化判断结果,价格合理,值得大规模推广应用. 展开更多
关键词 梅毒检测 甲苯胺红不加热血清试验 免疫吸附测定
脊髓损伤患者血清热休克蛋白70、糖分解烯醇酶和肿瘤坏死因子受体相关蛋白6的动态变化及临床诊断意义 预览
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作者 陈峰 邓小柱 +1 位作者 王鹏涛 王德智 《中国临床医生杂志》 2018年第3期322-324,共3页
目的 研究脊髓损伤患者血清热休克蛋白70(HSP70)、糖分解烯醇酶(NSE)和肿瘤坏死因子受体相关蛋白6(TRAF6)含量的动态变化以及临床诊断意义。方法 选取急性外伤性脊髓损伤81例患者为研究对象,按照ASIA分级标准分为完全性损伤组(4... 目的 研究脊髓损伤患者血清热休克蛋白70(HSP70)、糖分解烯醇酶(NSE)和肿瘤坏死因子受体相关蛋白6(TRAF6)含量的动态变化以及临床诊断意义。方法 选取急性外伤性脊髓损伤81例患者为研究对象,按照ASIA分级标准分为完全性损伤组(42例)、不完全损伤组(23例)、脊髓震荡组(16例)。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测81例不同程度脊髓损伤患者伤后不同时间血清中的HSP70、NSE和TRAF6含量及动态变化。结果 完全损伤组患者伤后12小时血清中HSP70、NSE和TRAF6含量显著增高,血清中HSP70、NSE含量在伤后36小时达到峰值,而血清中TRAF6含量却在伤后3天达到峰值,随后均出现下降趋势;不完全损伤组患者伤后12小时HSP70、NSE含量也显著增高,血清中HSP70、NSE含量伤后36小时达到峰值,而血清中TRAF6含量在伤后3天达到峰值,但各时间点增幅小于完全性损伤组,随后均出现下降趋势。对照组和脊髓振荡组血清中HSP70、NSE和TRAF6含量差异无显著性。结论 检测患者血清中HSP70、NSE和TRAF6的含量在脊髓损伤程度的早期诊断中具有临床参考意义。 展开更多
关键词 脊髓损伤 热休克蛋白70 糖分解烯醇 肿瘤坏死因子受体相关蛋白6 免疫吸附测定 诊断
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登革热初筛方法的应用比较 预览
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作者 曾庆洋 何思杰 +3 位作者 黄翠芳 冼洁能 和仕进 曾令恒 《广东医学》 2018年第S2期53-55,共3页
目的比较2种不同初筛方法对登革热的诊断价值,并探讨各种方法的应用范围及应用价值。方法采用回顾性研究。收集2015年1月至2017年12月门诊及住院共7 555例疑似登革热病毒感染者的血清标本,采用胶体金法检测登革热病毒NS1抗原,取41份阳... 目的比较2种不同初筛方法对登革热的诊断价值,并探讨各种方法的应用范围及应用价值。方法采用回顾性研究。收集2015年1月至2017年12月门诊及住院共7 555例疑似登革热病毒感染者的血清标本,采用胶体金法检测登革热病毒NS1抗原,取41份阳性标本采用ELISA法检测登革热病毒IgM抗体和登革热病毒IgG抗体,并采用χ~2检验比较这2种方法对登革热的初筛价值。结果 2015年2 943例疑似登革热病毒感染者的血清标本中被确诊为登革热的有215例(7.31%),2016年2 690例中确诊的有226例(8.40%),2017年1 922例中确诊的有11例(0.57%)。发热初期检测登革热病毒NS1抗原优于检测登革热病毒IgM抗体和登革热病毒IgG抗体。结论 NS1抗原检测在疾病发生早期敏感度和特异度良好,可作为登革热早期筛查的重要方法,在判断初次感染还是再次感染可采用联合检测登革热病毒IgM抗体和登革热病毒IgG抗体。 展开更多
关键词 登革热 登革热病毒 免疫吸附测定 抗原 病毒
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口服脊髓灰质炎减毒活疫苗中庆大霉素残留量检测方法的验证
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作者 李占辉 王为 +4 位作者 高静 武京红 杨冰 栗妍 李丽 《国际生物制品学杂志》 2018年第3期110-112,122共4页
目的验证口服脊髓灰质炎减毒活疫苗(人二倍体细胞)中庆大霉素残留量的检测方法。方法应用庆大霉素ELISA试剂盒建立庆大霉素残留量的检测方法。对该方法标准曲线的线性,线性范围内的准确度、精密度、专属性、耐用性、检测限及定量限... 目的验证口服脊髓灰质炎减毒活疫苗(人二倍体细胞)中庆大霉素残留量的检测方法。方法应用庆大霉素ELISA试剂盒建立庆大霉素残留量的检测方法。对该方法标准曲线的线性,线性范围内的准确度、精密度、专属性、耐用性、检测限及定量限进行验证。结果验证的标准曲线线性良好,相关系数〉0.98。该法检测高、中、低浓度的庆大霉素标准品的回收率为92.7%~123.6%;检测同一批次供试品的相对标准偏差为8oA;不同实验人员检测同一批次供试品和不同批次试剂盒检测同一批次供试品,相对标准偏差均〈15%;庆大霉素加样回收率为95.9%~121.3%;该法在(37±1)℃温度范围内耐用性良好;该法测定庆大霉素的检测限为0.040ng/ml,定量限为0.135ng/ml。结论用于检测口服脊髓灰质炎减毒活疫苗(人二倍体细胞)中庆大霉素残留量的方法是有效的。 展开更多
关键词 脊髓灰质炎病毒疫苗 口服 庆大霉素类 药物残留物 免疫吸附测定 验证
Sabin株脊髓灰质炎病毒Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型D抗原定量检测ELISA方法的建立及应用
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作者 鲁卫卫 郭会杰 +6 位作者 张中洋 张越 刘善茹 赵中翔 宋冬梅 马淑花 李秀玲 《国际生物制品学杂志》 2018年第3期113-117,共5页
目的建立Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗(Sabin strain inactivated poliovirus vaccine,sIPV)D抗原定量检测的双抗体夹心ELISA方法,用于sIPV的体外效力评价。方法以纯化D抗原分别免疫西门塔尔牛和BALB/c小鼠,获得牛免疫血清和小鼠单... 目的建立Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗(Sabin strain inactivated poliovirus vaccine,sIPV)D抗原定量检测的双抗体夹心ELISA方法,用于sIPV的体外效力评价。方法以纯化D抗原分别免疫西门塔尔牛和BALB/c小鼠,获得牛免疫血清和小鼠单克隆抗体(单抗)杂交瘤细胞株,以杂交瘤细胞株免疫小鼠制备单抗腹水。牛血清和小鼠腹水分别经沉淀和亲和层析后得到纯化牛多克隆抗体(多抗)和小鼠单抗。以多抗为包被抗体、单抗为检测抗体进行配对筛选,建立D抗原定量检测的双抗体夹心ELISA。对方法的线性、范围、特异性、准确度、精密度以及在sIPV制备过程中样品检测的适用性进行验证。结果纯化多抗和单抗均具有中和抗体活性,纯度分别达到80%和90%以上。经抗体配对筛选,确定3H10、901、1H10作为检测抗体,分别用于Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型D抗原定量检测ELISA的建立。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型包被抗体的使用浓度分别为1:8000、1:8000、1:10000,3H10、901、1H10检测抗体的使用浓度分别为1:10000、1:20000、1:10000。建立的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型D抗原检测方法的检测范围分别为0.4~13.0、0.4~12.0和0.4~20.0DU/ml,线性回归决定系数≥0.99。该法能特异性检出D抗原,与C抗原、不同型别D抗原以及生产过程中的其他物质无交叉反应。用该法对高、中、低浓度样品进行测定,I、Ⅱ、Ⅲ型测定值/理论值(×100%)分别为97%~111%、91%~104%和95%~102%、相对标准偏差分N〈7%、≤9%和≤10%;采用该法检测sIPV生产过程中的样品,显示出抗原纯化趋势。结论建立了脊髓灰质炎病毒工、Ⅱ、Ⅲ型D抗原定量检测ELISA方法,可有效用于sIPV的体外效力评价。 展开更多
关键词 脊髓灰质炎病毒疫苗 灭活 免疫吸附测定 D抗原 C抗原
灼烧技术治疗慢性扁桃体炎对患者免疫功能的影响 预览 被引量:1
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作者 孙永东 贺晓芳 +3 位作者 杨朝纲 刘雷 童兴科 向小红 《重庆医学》 2018年第14期1941-1943,共3页
目的探讨灼烧技术治疗慢性扁桃体炎(CT)对患者免疫功能的影响和作用机制。方法选择2013年6月至2016年12月于西南医科大学附属中医医院耳鼻咽喉科门诊就诊并临床诊断为CT的患者20例为观察组,同期西南医科大学在校学生及西南医科大学附... 目的探讨灼烧技术治疗慢性扁桃体炎(CT)对患者免疫功能的影响和作用机制。方法选择2013年6月至2016年12月于西南医科大学附属中医医院耳鼻咽喉科门诊就诊并临床诊断为CT的患者20例为观察组,同期西南医科大学在校学生及西南医科大学附属中医医院招募的健康志愿者6例为对照组,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测观察组治疗前后Toll样受体(TLR)-核因子-κB(NF-κB)信号通路中的TLR2、TLR4、NF-κB在外周血的水平,同时检测部分关键细胞因子白细胞介素(IL)-4、IL-5、IL-10及干扰素γ(INF-γ)、转化生长因子β(TGF-β)在外周血的水平。结果观察组CT患者灼烧治疗前血清中TLR2、TLR4、NF-κB、IL-4、IL-5、IL-10、INF-γ及TGF-β水平均明显高于对照组(P〈0.05);与治疗前比较,观察组患者治疗后上述指标均明显降低(P〈0.05)。观察组患者治疗前血清中TLR2、TLR4、IL-4、IL-5、IL-10、INF-γ及TGF-β表达水平与NF-κB无明显相关性(P〉0.05);灼烧治疗后血清中只有TLR2水平与NF-κB呈正相关(r=0.49,P=0.04),而其他检测指标与NF-κB无明显相关性(P〉0.05)。结论灼烧技术治疗CT后患者血清中免疫因子水平明显降低,其治疗CT的机制可能与TLR-NF-κB信号通路及该通路的关键细胞因子关系密切。 展开更多
关键词 慢性扁桃体炎 灼烧技术 TOLL样受体 核因子-ΚB 免疫吸附测定
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乳腺癌EGFL7及β-catenin蛋白检测的临床意义 预览
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作者 姜青明 周文文 肖觉 《临床与病理杂志》 2018年第3期472-479,共8页
目的:检测并探讨类表皮生长因子域-7(epidermal growth factor-like domain 7,EGFL7)和β-链蛋白(β-c aten i n)在乳腺癌患者病变组织及血清中的表达水平及其与乳腺癌转移之间的关系。方法:分别采用免疫组织化学En Vision二步法... 目的:检测并探讨类表皮生长因子域-7(epidermal growth factor-like domain 7,EGFL7)和β-链蛋白(β-c aten i n)在乳腺癌患者病变组织及血清中的表达水平及其与乳腺癌转移之间的关系。方法:分别采用免疫组织化学En Vision二步法检测EGFL7及β-catenin蛋白在93例乳腺癌组织(其中淋巴结转移病例62例,远处转移病例10例)与54例乳腺纤维腺瘤和腺病组织中的表达,ELISA双抗体夹心法检测患者血清中EGFL7蛋白水平。结果:EGFL7蛋白在乳腺癌组织中的表达高于乳腺纤维腺瘤和腺病组织(P〈0.05),EGFL7蛋白表达水平与乳腺癌淋巴结和远处转移呈正相关(P〈0.05)。与伴淋巴结转移的乳腺癌病例相比,伴远处转移的乳腺癌病例EGFL7蛋白表达水平差异无统计学意义(P〉0.05)。乳腺癌组织β-catenin蛋白表达水平高于乳腺良性病变组织(P〈0.05),伴有淋巴结和远处转移的乳腺癌组织β-catenin蛋白表达水平高于无淋巴结转移的乳腺癌组织(P〈0.05),而伴远处转移的乳腺癌病例的β-catenin蛋白表达水平与伴淋巴结转移的乳腺癌病例比较,差异无统计学意义(P〉0.05)。发生淋巴结和远处转移的乳腺癌患者血清中EGFL7蛋白水平高于无转移的乳腺癌及乳腺纤维腺瘤和腺病组织(P〈0.05),其中伴远处转移的乳腺癌病例血清EGFL7蛋白水平与只伴淋巴结转移的乳腺癌病例比较差异无统计学意义(P〉0.05)。结论:EGFL7及β-catenin蛋白检测对评估乳腺癌转移风险具有一定的临床参考价值。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 类表皮生长因子域-7 Β-链蛋白 免疫组织化学 免疫吸附测定
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口腔舌鳞状细胞癌患者血清多配体聚糖-1表达水平及临床意义
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作者 郝瑞 梁艳 《国际肿瘤学杂志》 CAS 2018年第4期193-196,共4页
目的 检测口腔舌鳞状细胞癌(OTSCC)患者血清多配体聚糖-1水平,探讨血清多配体聚糖-1在诊断OTSCC及评估疾病进展中的作用.方法 收集2015年3月至2017年6月西安市第四医院收治的OTSCC患者65例(OTSCC组)和健康者74例(对照组)血清.酶... 目的 检测口腔舌鳞状细胞癌(OTSCC)患者血清多配体聚糖-1水平,探讨血清多配体聚糖-1在诊断OTSCC及评估疾病进展中的作用.方法 收集2015年3月至2017年6月西安市第四医院收治的OTSCC患者65例(OTSCC组)和健康者74例(对照组)血清.酶联免疫吸附法检测血清多配体聚糖-1水平.受试者工作特征(ROC)曲线分析血清多配体聚糖-1对OTSCC及其疾病进展的诊断价值.结果 OTSCC组血清多配体聚糖-1水平显著低于对照组[(91.87±33.18) ng/ml:(162.32±51.16) ng/ml,t=1.977,P=0.002].OTSCC组不同TNM分期(F=3.536,P=0.025)、浸润深度(F=1.254,P=0.039)、淋巴结转移(t=2.420,P=0.018)患者血清多配体聚糖-1水平差异均具有统计学意义.ROC曲线分析显示,血清多配体聚糖-1对OTSCC的诊断最佳临界值为95.54 ng/ml[曲线下面积(AUC) =0.944,P<0.001,95% CI为0.915~0.974];对OTSCC患者是否有淋巴结转移的诊断最佳临界值为74.54 ng/ml(AUC=0.783,P<0.001,95% CI为0.697~0.867).结论 血清多配体聚糖-1表达水平在OTSCC患者中显著降低,可用于诊断OTSCC及其是否有淋巴结转移,值得临床推广应用. 展开更多
关键词 肿瘤 鳞状细胞 口腔肿瘤 舌肿瘤 免疫吸附测定 诊断 多配体聚糖-1
酶联免疫吸附测定中封闭液的作用与选择 预览
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作者 张继忠 《上海医药》 CAS 2018年第11期64-66,共3页
酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)的基础是抗原或抗体的固相化和抗原或抗体的酶标记。测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)需先与固相载体表面的抗原或抗体起反应,结合在固相载体表面(包被)。由于... 酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)的基础是抗原或抗体的固相化和抗原或抗体的酶标记。测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)需先与固相载体表面的抗原或抗体起反应,结合在固相载体表面(包被)。由于抗原或抗体包被时的浓度较低,故还需用大量不相关的蛋白充填固相载体表面空隙(封闭),使之避免在ELISA其后步骤中吸附干扰物质而影响测定。本文概要介绍ELISA中各种常用封闭液的作用与选择。 展开更多
关键词 免疫吸附测定 封闭液 包被物
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结核分枝杆菌三种蛋白在结核病血清学诊断中的评价研究 预览
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作者 刘毅 张旭霞 +1 位作者 张雨晴 李传友 《结核病与胸部肿瘤》 2018年第1期1-6,共6页
目的对结核分枝杆菌相对分子质量为38000(以下采用38kD表示)、线粒体通透性转换蛋白64 ( mitochondrial permeabilitytransition 64, MPT-64 )和肝素结合血凝素( heparin-binding haemagglutinin, HBHA )蛋白在外周血中抗体的表... 目的对结核分枝杆菌相对分子质量为38000(以下采用38kD表示)、线粒体通透性转换蛋白64 ( mitochondrial permeabilitytransition 64, MPT-64 )和肝素结合血凝素( heparin-binding haemagglutinin, HBHA )蛋白在外周血中抗体的表达水平进行检测和比较,并对它们在结核病血清学方面的诊断价值进行评估。方法选取2012年7月至2013年10月北京胸科医院收治的肺结核患者作为活动性肺结核(ATB)组,共78例;选取同期36例潜伏结核感染(LTBI)患者作为LTBI组;同期在北京胸科医院进行体检的31名健康人群(HC)作为HC组。将本实验室前期纯化的38kD、MPT64和HBHA作为抗原应用于免疫学的检测,采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测血清中三种蛋白抗体的表达水平,经过统计学处理后,分别比较ATB、LTBI和HC三组之间的差异,并结合受试者工作特征曲线计算各蛋白抗原的敏感度和特异度,评价三种蛋白血清抗体的临床诊断价值。结果ELISA检测ATB组38kD蛋白抗体的吸光度(A)450nm处的A值(0.343±0.120)高于LTBI组(0.221±0.102)和HC组(0.143±0.097),差异有统计学意义(t=3.07,P〈0.05);MPT64抗体的A450值(0.234±0.102)高于LTBI组(0.198±0.087)和HC组(0.123±0.075),差异有统计学意义(t=-3.79,P〈0.05);HBHA抗体的A450值(0.263±0.113)高于LTBI组(0.188±0.091)和HC组(0.148±0.078),差异有统计学意义(t=2.70,P〈0.05).以38kD、MPT64和HBHA蛋白抗体表达水平从LTBI组鉴别ATB组时的受试者工作特征(ROC)曲线下面积(AUC)分别为0.78、0.61和0.62,敏感度分别为71.79%、62.82%和52.56%,特异度为72.22%、58.33%和69.44%;从HC组鉴别ATB组时的AUC分别为0.91、0.81和0.79,敏感度分别为87.17%、69.23%和7308%,特异度为80.65%、74.19%和74.19%;从HC组鉴 展开更多
关键词 分枝杆菌 结核 细菌蛋白质类 免疫吸附测定 抗体 血清学试验 评价研究
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