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血管紧张素Ⅱ调控基质金属蛋白酶9的表达在蛛网膜下腔出血发病中的机制研究 认领
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作者 左右 赵庆锁 +1 位作者 罗史科 杜娟 《安徽医药》 CAS 2020年第3期473-477,共5页
目的探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)调控基质金属蛋白酶9(MMP?9)的表达在蛛网膜下腔出血(SAH)发病中的机制。方法人脑微血管内皮细胞(HBMEC)株分为AngⅡ组、AngⅡ+SB203580组和对照组。其中AngⅡ组以100μg/L浓度AngⅡ处理90 min、2 h、4 h、... 目的探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)调控基质金属蛋白酶9(MMP?9)的表达在蛛网膜下腔出血(SAH)发病中的机制。方法人脑微血管内皮细胞(HBMEC)株分为AngⅡ组、AngⅡ+SB203580组和对照组。其中AngⅡ组以100μg/L浓度AngⅡ处理90 min、2 h、4 h、6 h、12 h后取细胞上清液进行相关指标检测;AngⅡ+SB203580组以5μΜ的SB203580处理20 min后以100μg/L浓度AngⅡ处理90 min、2 h、4 h、6 h、12 h后取细胞上清液进行相关指标检测;对照组加入RPMI?1640培养液培养90 min、2 h、4 h、6 h、12 h后取细胞上清液进行相关指标检测。以酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组细胞上清液MMP?9水平,并以实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测各组细胞p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)的mRNA和蛋白表达水平。结果与对照组比较,AngⅡ组细胞上清液MMP?9[处理12 h:(4.21±1.36)μg/L比(5.81±1.72)μg/L,P<0.01]水平升高,AngⅡ+SB203580组细胞上清液MMP?9[处理12 h:(4.21±1.36)μg/L比(3.64±1.45)μg/L,P<0.01]水平降低(P<0.05)。与AngⅡ组比较,AngⅡ+SB203580组细胞上清液MMP?9水平降低(P<0.001)。与对照组比较,AngⅡ组细胞p38 MAPK的mRNA[处理12 h:(0.422±0.057)比(0.538±0.071),P<0.05)]和蛋白表达水平[(0.452±0.105)比(0.635±0.133),P<0.001]升高,AngⅡ+SB203580组细胞p38 MAPK的mRNA[处理12 h:(0.422±0.057)比(0.375±0.066),P<0.05]和蛋白表达水平[(0.452±0.105)比(0.276±0.081),P<0.001]降低(P<0.05)。与AngⅡ组比较,AngⅡ+SB203580组细胞p38 MAPK的mRNA和蛋白表达水平降低(P<0.001)。结论AngⅡ可能通过激活p38 MAPK信号通路上调MMP?9表达从而促进SAH发生发展。 展开更多
关键词 蛛网膜下腔出血/病因学 基因表达调控 血管紧张素Ⅱ 基质金属蛋白9 P38丝裂原活化蛋白激 免疫吸附测定 印迹法 蛋白质
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ELISA测定中HRP/TMB显色体系的优化及稳定性研究 认领
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作者 刘凤银 卢嘉辉 +4 位作者 巫嘉琦 黄燕璇 邹红丽 梁岳 穆洪涛 《广东第二师范学院学报》 2020年第3期75-82,共8页
为建立ELISA测定中HRP/TMB显色体系的优化方法,开发一种灵敏度高、性能稳定的HRP/TMB显色液,实验采用单因素试验,考察了pH、TMB质量浓度、过氧化脲质量浓度、DMSO体积分数、甘油体积分数和显色时间对显色效果的影响;采用L9(34)正交实验... 为建立ELISA测定中HRP/TMB显色体系的优化方法,开发一种灵敏度高、性能稳定的HRP/TMB显色液,实验采用单因素试验,考察了pH、TMB质量浓度、过氧化脲质量浓度、DMSO体积分数、甘油体积分数和显色时间对显色效果的影响;采用L9(34)正交实验,进行了工作条件优化;最后,对自制的显色液进行了贮藏稳定性研究,并与3种商品化同类产品进行了质量对比.结果显示:HRP/TMB显色体系的最佳工作条件为pH 5.0,TMB质量浓度0.4 g/L,过氧化脲质量浓度0.4 g/L,DMSO体积分数2%,甘油体积分数5%,显色时间10 min;4℃储藏90 d,稳定性良好;与商品化产品对比,自制显色液的灵敏度较高,显色时间较短,但稳定性较差.实验提供了一种HRP/TMB显色体系的优化方法及显色液配方,能满足大部分实验室ELISA研究需求,但其稳定性尚不能达到商品化产品需求,需进一步研究. 展开更多
关键词 四甲基苯胺 免疫吸附测定 显色液 辣根过氧化物
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Luminex液相芯片技术检测血清MBL在肾移植患者中的应用价值 认领
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作者 公志华 余丹 李海霞 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期147-152,共6页
目的评价Luminex液相芯片磁珠免疫法检测血清甘露糖结合凝集素(MBL)的性能指标,进一步阐明血清MBL检测在肾移植患者中的应用价值。方法回顾性分析2012年2月至2016年5月北京大学第一医院行肾移植手术的患者110例,同时选择同期体检的表观... 目的评价Luminex液相芯片磁珠免疫法检测血清甘露糖结合凝集素(MBL)的性能指标,进一步阐明血清MBL检测在肾移植患者中的应用价值。方法回顾性分析2012年2月至2016年5月北京大学第一医院行肾移植手术的患者110例,同时选择同期体检的表观健康人群50名作为正常对照。与传统的ELISA方法比较,评价Luminex磁珠免疫法进行血清MBL检测的精密度、线性范围,同时比较两种方法的相关性。基于Luminex磁珠免疫法检测110例肾移植患者移植前血清MBL,评估不同水平MBL分组肾移植患者移植后发生感染和临床排异事件的频率,采用SPSS 19.0和MedCalc12.7.0进行统计学分析。结果Luminex液相芯片磁珠免疫测定法检测血清MBL重复性精密度≤7.15%,日间精密度≤8.44%,线性范围为0.05~11233.00μg/L;ELISA方法检测血清MBL的线性范围为3.20~4202.70μg/L。Luminex液相芯片磁珠免疫法检测MBL线性范围较宽。相关性分析显示两种方法检测血清MBL具有较好的相关性,回归方程为Y=1.2486X+231.81,相关系数r=0.978(P<0.01);采用Bland-Altman差异分析法显示Luminex方法的测定值高于ELISA方法,平均偏差百分比为37.4%(95%CI 33.7%~41.1%)。检测110例肾移植患者移植前血清MBL中位数(四分位数)为4164.0(2124.0,7064.5)μg/L,将肾移植患者以血清MBL<4164.0μg/L为中/低水平组,以血清MBL≥4164.0μg/L为高水平分组进行比较,血清MBL中/低水平组移植后感染的发生率为47.4%(27/57),高水平组移植后感染的发生率为28.3%(15/53),两组间差异具有统计学意义,χ^2=4.230,P<0.05;血清MBL中/低水平组移植后排异事件的发生率为43.9%(25/57),高水平组移植后排异事件的发生率为20.8%(11/53),两组间差异具有统计学意义,χ^2=6.659,P<0.05。结论Luminex液相芯片磁珠免疫法检测血清MBL线性范围宽,方法学性能优于ELISA方法。肾移植患者在移植前检测血清MBL水平,对于移植后感染和排异事件的预测具� 展开更多
关键词 肾移植 甘露糖结合凝集素 免疫测定 免疫吸附测定
两种γ-干扰素释放试验的一致性比较 认领
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作者 王杉 王学晶 +4 位作者 崔彦超 高宏进文 张树琛 李东 时琰丽 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期718-724,共7页
目的:比较两种γ-干扰素释放试验结果的一致性,从而为实验室选择检测方法提供参考意见。方法:同时收集北京大学民航总医院2018年7月至2019年12月住院的96例结核疑诊患者的双份全血标本,分别采用QIAGEN(凯杰)试剂盒和安图试剂盒内提供的... 目的:比较两种γ-干扰素释放试验结果的一致性,从而为实验室选择检测方法提供参考意见。方法:同时收集北京大学民航总医院2018年7月至2019年12月住院的96例结核疑诊患者的双份全血标本,分别采用QIAGEN(凯杰)试剂盒和安图试剂盒内提供的样本管进行结核特异性抗原刺激试验,开展酶联免疫吸附试验(ELISA)法(凯杰)和免疫化学发光法(安图)检测γ-干扰素,并根据各自试剂盒内的说明书进行结果判定。以临床或细菌学证据诊断结核病为标准,比较两种试剂盒判定结果的一致性,并对结核病的诊断效能作出评价。同时选取60份经凯杰试剂盒内结核特异性抗原刺激后的血浆,分别进行ELISA法和化学发光法检测γ-干扰素,比较两种γ-干扰素检测系统之间的一致性。判定结果的一致性分析采用Kappa检验,γ-干扰素组间数据的差异采用简单线性回归分析和Bland-Altman图显示。结果:96份样本中,凯杰诊断结核的敏感度为81.82%(18/22),特异度为74.32%(55/74);安图诊断结核的敏感度为72.73%(16/22),特异度为70.27%(52/74)。两个系统γ-干扰素释放试验判定结果的一致性较好(Kappa值为0.847,P<0.05)。其中凯杰诊断结核病的受试者工作特征(ROC)曲线下面积为0.807(95%可信区间:0.702~0.911);安图为0.765(95%可信区间:0.640~0.889),两者差异无统计学意义(Z=0.958,P>0.05)。比较两个系统检测同一份血浆γ干扰素的结果,相关回归分析显示一致性良好(R^2=0.97,P<0.05);但比较同一份患者样本在不同试剂盒刺激后的γ干扰素水平,结果相关性较差(R^2=0.41,P<0.05)。结论:安图系统与凯杰系统的γ干扰素释放试验判定结果的符合性较好,两系统检测γ-干扰素的结果一致性良好。抗原包被量、效价以及试验体系不同可能是导致γ-干扰素释放量不同的原因。 展开更多
关键词 干扰素γ释放试验 免疫吸附测定 发光测定 结果可重复性 结核
中重度子宫内膜异位症患者血清中抗核抗体、抗心磷脂抗体和抗β2糖蛋白1抗体的检测价值 认领
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作者 张园 蒋春艳 +5 位作者 吴畏 马翔 黄洁 冒韵东 刘嘉茵 舒黎 《国际生殖健康/计划生育杂志》 CAS 2020年第2期97-100,共4页
目的:评估中重度子宫内膜异位症(EMs)患者在体外受精/胞浆内单精子注射(IVF/ICSI)前检测血清抗核抗体(ANA)、抗心磷脂抗体(aCL)和抗β2糖蛋白1抗体(aβ2GP1)的临床价值。方法:收集2018年1月-2019年4月在南京医科大学第一附属医院生殖医... 目的:评估中重度子宫内膜异位症(EMs)患者在体外受精/胞浆内单精子注射(IVF/ICSI)前检测血清抗核抗体(ANA)、抗心磷脂抗体(aCL)和抗β2糖蛋白1抗体(aβ2GP1)的临床价值。方法:收集2018年1月-2019年4月在南京医科大学第一附属医院生殖医学科接受IVF/ICSI助孕的中重度EMs患者(EMs组,86例)和因男方因素拟行IVF/ICSI助孕的女性患者(对照组,82例)为研究对象,收集血清,采用免疫荧光法检测ANA,酶联免疫吸附法检测aCL和aβ2GP1。结果:EMs组3项抗体中至少1项抗体阳性的阳性率为31.40%(27/86),而对照组的阳性率为12.19%(10/82),2组比较差异有统计学意义(P<0.05);ANA组aCL总阳性率为5.81%(5/86),稍高于对照组[1.22%(1/82)],2组比较差异无统计学意义(P>0.05);EMs组aCL总阳性率为13.95%(12/86),稍高于对照组[6.10%(5/82)],2组比较差异无统计学意义(P>0.05);EMs组aβ2GP1阳性率为16.28%(14/86),高于对照组[6.10%(5/82)],差异有统计学意义(P<0.05)。结论:对中重度EMs患者推荐在IVF/ICSI助孕前进行血清ANA、a CL和aβ2GP1联合筛查,中重度EMs患者aβ2GP1阳性率较高,值得临床关注。 展开更多
关键词 抗体 抗核 抗心磷脂抗体 抗体 抗心脂 抗体 抗磷脂 抗Β2糖蛋白1抗体 子宫内膜异位症 免疫吸附测定 荧光免疫测定
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文章速递急性脑梗死患者循环基质金属蛋白酶9及微小RNA-126表达水平及其临床意义 认领
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作者 范翥元 刘丹 +2 位作者 张广炜 刘丽红 王晗 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 北大核心 2020年第9期958-961,共4页
目的探讨急性脑梗死患者循环基质金属蛋白酶9(MMP-9)及微小RNA-126(miR-126)表达水平及其临床意义。方法随机选择2018年8月~2019年10月包头医学院第一附属医院神经内科三病区住院的急性脑梗死患者45例为脑梗死组,选择同期就诊的非脑梗... 目的探讨急性脑梗死患者循环基质金属蛋白酶9(MMP-9)及微小RNA-126(miR-126)表达水平及其临床意义。方法随机选择2018年8月~2019年10月包头医学院第一附属医院神经内科三病区住院的急性脑梗死患者45例为脑梗死组,选择同期就诊的非脑梗死患者55例为对照组。采集2组外周静脉血,采用酶联免疫吸附法检测MMP-9水平,实时荧光定量PCR检测miR-126表达。结果脑梗死组MMP-9水平明显高于对照组,miR-126水平明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。相关性分析显示,急性脑梗死与性别、吸烟、收缩压、舒张压和MMP-9呈正相关(P<0.05,P<0.01),与miR-126呈负相关(P<0.01)。MMP-9与miR-126不相关(r=-0.225,P=0.136)。校正其他危险因素后,二元logistic回归分析显示,性别、吸烟、收缩压、舒张压、MMP-9是急性脑梗死发病的危险因素(OR=3.067,95%CI:1.315~7.152,P=0.009;OR=3.090,95%CI:1.316~7.256,P=0.010;OR=1.022,95%CI=1.003~1.042,P=0.021;OR=1.044,95%CI:1.007~1.083,P=0.021;OR=87.940,95%CI:15.895~486.547,P=0.000),而miR-126是急性脑梗死发病的保护因素(OR=0.118,95%CI:0.047~0.295,P=0.000)。结论血清MMP-9及miR-126与急性脑梗死的发生密切相关。miR-126有可能成为脑梗死预测的潜在新靶点,为临床诊疗提供新的思路。 展开更多
关键词 脑梗死 基质金属蛋白9 微RNAs 聚合链反应 免疫吸附测定
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IL-23与TGF-β在子宫内膜癌患者癌组织及外周血中的表达及其意义 认领
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作者 秦廷芹 袁芳 +2 位作者 王蓁 黄利英 李秋平 《精准医学杂志》 2020年第3期230-233,236共5页
目的探讨子宫内膜癌患者外周血及癌组织中白细胞介素-23(IL-23)与转化生长因子-β(TGF-β)的表达及其相关性。方法选择2017年10月—2019年3月于我院妇科住院经手术治疗的子宫内膜癌患者(内膜癌组)60例和子宫肌瘤行全子宫切除术的患者(... 目的探讨子宫内膜癌患者外周血及癌组织中白细胞介素-23(IL-23)与转化生长因子-β(TGF-β)的表达及其相关性。方法选择2017年10月—2019年3月于我院妇科住院经手术治疗的子宫内膜癌患者(内膜癌组)60例和子宫肌瘤行全子宫切除术的患者(对照组)30例。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测两组患者外周血中IL-23与TGF-β的表达水平,采用免疫组化法检测两组患者组织中IL-23与TGF-β的表达情况;并分析内膜癌组患者外周血中IL-23与TGF-β表达与子宫内膜癌临床病理参数(手术-病理分期、组织分级、肌层浸润深度、有无淋巴转移)的关系,以及内膜癌组患者外周血中IL-23与TGF-β表达的相关性。结果内膜癌组患者外周血中IL-23与TGF-β的表达水平显著高于对照组(t=-7.124、-6.792,P<0.05);内膜癌组患者外周血中IL-23与TGF-β的表达水平与子宫内膜癌手术-病理分期、肌层浸润深度、淋巴结转移均具有显著相关性(F=10.808~29.737、t=-2.554~-2.491,P<0.05);IL-23的表达水平与组织分化程度无关(P>0.05),TGF-β的表达水平与组织分化程度有关(F=4.294,P<0.05)。内膜癌组患者癌组织中IL-23与TGF-β的阳性表达率显著高于对照组(χ^2=4.444、5.378,P<0.05)。IL-23与TGF-β在内膜癌组患者外周血中的表达呈正相关(r=0.39,P<0.05)。结论子宫内膜癌患者外周血及癌组织中IL-23与TGF-β均呈高表达,两者可能参与了子宫内膜癌的发生发展及浸润转移的过程,有望作为子宫内膜癌恶性程度及进展程度的评价指标,并有助于为子宫内膜癌的临床免疫治疗提供参考价值。 展开更多
关键词 子宫内膜肿瘤 白细胞介素23 转化生长因子β 免疫吸附测定 免疫组织化学 体征和症状
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住院患者80 478例梅毒抗体检测分析 认领
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作者 苏洪洪 龚辰 +3 位作者 王金湖 曹季军 李勇 张悦梅 《中国基层医药》 CAS 2020年第7期773-775,共3页
目的:分析住院患者梅毒抗体感染及分布情况,为梅毒预防和控制提供参考依据。方法:采用梅毒螺旋体抗体酶联免疫吸附试验(TP-ELISA)对太仓市第一人民医院2015年1月至2017年11月住院患者80 478例进行梅毒抗体初筛,初筛阳性者用梅毒螺旋体... 目的:分析住院患者梅毒抗体感染及分布情况,为梅毒预防和控制提供参考依据。方法:采用梅毒螺旋体抗体酶联免疫吸附试验(TP-ELISA)对太仓市第一人民医院2015年1月至2017年11月住院患者80 478例进行梅毒抗体初筛,初筛阳性者用梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)确认,用梅毒甲苯胺红不加热血清反应素试验(TRUST)确定滴度,对检测结果进行分析。结果:80 478例住院患者TP-ELISA法初筛阳性1 326例(TPPA确认阳性1 223例,弱阳性101例,阴性2例)。2015年、2016年、2017年TP-ELISA阳性率分别为1.62%(445/27 394)、1.72%(490/28 412)、1.58%(389/24 672),差异无统计学意义( P>0.05)。男、女患者阳性率分别为2.02%(689/33 985)、1.37%(635/46 479),差异有统计学意义(χ 2=52.91, P=0.00)。≤18岁、>18~59岁、>59~79岁、>79岁年龄段阳性率分别为0.32%(7/2 161)、1.44%(765/53 001)、2.31%(488/21 163)、1.50%(62/4 153),>59~79岁阳性率最高,与其他三组差异均有统计学意义(χ 2=37.08、67.05、10.80,均 P<0.01)。TP-ELISA阳性患者中,TRUST效价阴性患者占54.90%(728/1 326),效价≤1∶8占36.50%(484/1 326),其他占8.44%(112/1 326)。 结论:住院患者梅毒检测男性阳性率高于女性,>59~79岁阳性率最高,老年病例增加较快,应重视梅毒的防治工作,有效阻止梅毒的传播。 展开更多
关键词 住院病人 梅毒 抗体 梅毒血清诊断 免疫吸附测定 凝集试验 假阳性反应 实验室技术和方法
狂犬病病毒糖蛋白抗原含量双抗体夹心ELISA检测方法的建立及验证 认领
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作者 郭笑语 潘东 +9 位作者 陈晓旭 韩丹丹 高一峰 沈艳杰 韩尚成 赵天罡 丁楠 张洁琼 袁若森 姜春来 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2020年第4期434-437,444共5页
目的建立可快速检测狂犬病病毒(rabies virus,RabV)糖蛋白抗原含量的双抗体夹心ELISA方法,并进行验证及初步应用。方法用抗RabV糖蛋白基因工程抗体建立双抗体夹心ELISA法,检测RabV糖蛋白抗原含量。对建立的方法进行特异性、线性、准确... 目的建立可快速检测狂犬病病毒(rabies virus,RabV)糖蛋白抗原含量的双抗体夹心ELISA方法,并进行验证及初步应用。方法用抗RabV糖蛋白基因工程抗体建立双抗体夹心ELISA法,检测RabV糖蛋白抗原含量。对建立的方法进行特异性、线性、准确性、板内与板间精密性、灵敏度验证,对不同厂家(毒株分别为aG、PV、CTN、PM)生产的狂犬病疫苗与不同工艺阶段的狂犬病疫苗样品进行适用性检测。结果捕获抗体与酶标抗体最佳稀释度分别为1∶2 000和1∶4 000,最佳封闭剂为1. 5%BSA。该方法与其他人用疫苗和辅料成分无交叉反应;线性范围在0. 003 2~0. 103 1 IU/mL之间,R2> 0. 98;准确性验证的回收率在97. 0%~110. 1%之间;精密性验证的板内变异系数<8. 6%,板间变异系数<13. 9%;检测不同厂家的狂犬病疫苗和不同工艺阶段的疫苗样品呈良好的剂量依赖效应。结论建立了适用于人用狂犬病疫苗糖蛋白抗原含量检测的双抗体夹心ELISA方法,符合定量检测的需求,可用于aG、PV、CTN、PM等不同毒株生产的狂犬病疫苗检测;也可用于病毒收获液、浓缩液、灭活液及原液等不同工艺阶段样品检测。 展开更多
关键词 狂犬病病毒 糖蛋白 抗原 定量检测 免疫吸附测定
贝伐珠单抗胸腔灌注治疗肺腺癌伴恶性胸腔积液疗效与血清VEGF水平的关系 认领
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作者 杨婉玲 顾岩 付秀华 《实用肿瘤杂志》 CAS 2020年第1期62-64,共3页
目的探讨贝伐珠单抗胸腔灌注治疗肺腺癌伴恶性胸腔积液(malignant pleural effusion,MPE)患者疗效与血清血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)水平的关系。方法30例肺腺癌伴恶性胸腔积液的初治患者行贝伐珠单抗... 目的探讨贝伐珠单抗胸腔灌注治疗肺腺癌伴恶性胸腔积液(malignant pleural effusion,MPE)患者疗效与血清血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)水平的关系。方法30例肺腺癌伴恶性胸腔积液的初治患者行贝伐珠单抗胸腔灌注治疗,采用ELISA法测量治疗前及治疗后1周血清标本中VEGF含量,分析其与疗效的关系。结果贝伐珠单抗胸腔灌注治疗降低患者血清VEGF水平(P<0.01)。治疗有效组与无效组血清VEGF水平比较,差异无统计学意义(P=0.375)。完全缓解、部分缓解和治疗无效患者治疗前、后血清VEGF水平变化比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论贝伐珠单抗胸腔灌注治疗的机制可能与拮抗VEGF有关。血清VEGF水平与贝伐珠单抗胸腔灌注治疗疗效无关。 展开更多
关键词 肺肿瘤/药物疗法 腺癌/药物疗法 胸腔积液 恶性/药物疗法 抗体 单克隆 血管内皮生长因子A/血液 免疫吸附测定 化学疗法 肿瘤 局部灌注 治疗结果
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围产期孕妇抑郁与血清雌激素和脱氢表雄酮水平的相关性 认领
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作者 郭洵溢 赵丹青 +1 位作者 贾春平 邹涛 《贵州医科大学学报》 CAS 2020年第6期700-704,共5页
目的:研究围产期抑郁(PND)的发病与血清雌二醇(E2)和脱氢表雄酮(DHEA)含量的关系。方法:选取孕34~36周孕妇47名作为研究对象,采用爱丁堡产后抑郁量表(EPDS)测评孕妇抑郁发生情况;抽取孕妇清晨空腹肘静脉血5 m L,采用生物素双抗体夹心酶... 目的:研究围产期抑郁(PND)的发病与血清雌二醇(E2)和脱氢表雄酮(DHEA)含量的关系。方法:选取孕34~36周孕妇47名作为研究对象,采用爱丁堡产后抑郁量表(EPDS)测评孕妇抑郁发生情况;抽取孕妇清晨空腹肘静脉血5 m L,采用生物素双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清中雌二醇(E2)和脱氢表雄酮(DHEA)含量,并计算2者比值。结果:围产期孕妇中检出PND(即抑郁组) 16例、正常者(即对照组) 31例,PND检出率34. 04%;抑郁组孕妇血清E2水平高于对照组,DHEA/E2的比值则低于对照组(P <0. 05);孕34周孕妇血清DHEA水平和DHEA/E2比率分别低于孕35周和孕36周孕妇(P <0. 05),且孕36周孕妇DHEA/E2比率低于孕35周孕妇(P <0. 05);孕妇血清E2水平与EDPS得分为正相关关系(r=0. 300,P=0. 041),DHEA/E2比率与EDPS得分为负相关关系(r=-0. 332,P=0. 023);孕妇血清E2水平预测围产期抑郁曲线下面积(AUC)为0. 700(P <0. 05),最佳临界值为174,灵敏度为0. 688,特异度为0. 645。结论:围产期孕妇血清中DHEA/E2的低比率与围产期抑郁的发生相关,孕期血清高水平E2可作为预测PND的相关生理指标。 展开更多
关键词 雌二醇 硫酸脱氢表雄酮 免疫吸附测定 抑郁 围产期 怀孕期间
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“中风1号”灌胃对脑出血大鼠脑组织中PI3K/AKT信号通路表达的影响 认领
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作者 梁群 杨洋 +1 位作者 孙德阳 朱永志 《辽宁中医杂志》 CAS 2020年第1期175-178,共4页
目的研究"中风1号"对PI3K/AKT信号转导通路表达的影响,来研究其对脑出血急性期治疗的可行性,并进一步探讨其作用机理。方法将实验用鼠随机分为假手术组、模型组、"中风1号"组、甘露醇组和空白组。造模后24 h,"... 目的研究"中风1号"对PI3K/AKT信号转导通路表达的影响,来研究其对脑出血急性期治疗的可行性,并进一步探讨其作用机理。方法将实验用鼠随机分为假手术组、模型组、"中风1号"组、甘露醇组和空白组。造模后24 h,"中风1号"组灌胃给中药,甘露醇组、假手术组、模型组予等量生理盐水灌胃。甘露醇组尾部静脉注射给药。"中风1号"组、假手术组、模型组予同等剂量生理盐水尾静脉注射,空白组不作任何操作。持续给药7天后取血肿脑组织,通过酶联免疫吸附测定方法检测PI3K、AKT蛋白表达来证明"中风1号"对大鼠脑出血急性期的细胞修复、生长、血管、神经再生及脑保护的影响。结果中风1号组的PI3K表达水平比空白组、假手术组、模型组和甘露醇组显著升高(P<0.05)。中风1号组的AKT表达水平比假手术组、模型组和甘露醇组显著升高(P<0.05),且空白组与中风1号组差异明显(P<0.05)。结论"中风1号"可以激活PI3 K/AKT信号转导通路,从而促进其蛋白的基因表达以实现脑保护。 展开更多
关键词 中风1号 脑出血 免疫吸附测定 PI3K/AKT
登革病毒2型型特异性抗原片段的鉴定及其抗体ELISA检测方法的建立 认领
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作者 李硕 李以圣 +6 位作者 任瑞文 官文升 陈迪佳 李春缘 杨柳 陈月 李鹏 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2020年第5期563-567,573,共6页
目的筛选、鉴定登革病毒(Dengue virus,DENV)2型(DV2)型特异性抗原片段;建立优化检测DV2抗体的ELISA方法,并进行临床应用验证。方法采用生物信息学方法分析1~4型(DV1~DV4)及其相近虫媒病毒基因组序列,选择预测得分较高且在不同DV2流行... 目的筛选、鉴定登革病毒(Dengue virus,DENV)2型(DV2)型特异性抗原片段;建立优化检测DV2抗体的ELISA方法,并进行临床应用验证。方法采用生物信息学方法分析1~4型(DV1~DV4)及其相近虫媒病毒基因组序列,选择预测得分较高且在不同DV2流行株中高度保守的表位;利用pMal-c2x表达系统制备其原核表达抗原,Western blot法分析其免疫原性;建立优化检测DV2抗体的ELISA方法,并验证方法的特异性及灵敏性;应用优化的方法检测33份各型登革热(Dengue fever,DF)确诊患者及30份健康体检人群血清样本。结果经生物信息学分析,预测获得DV2特异性抗原表位12段,预测得分值较高的8段(E123~128、E131~135、E143~149、E223~229、E286~294、E340~347、E383~387及E391~398)重组表达载体经双向测序证实读码框架准确,经Western blot分析,包含抗原位点E143~149区域的融合表达片段D2Ag3仅与DV2多克隆抗体发生免疫反应。ELISA优化条件为抗原包被浓度2μg/mL,4℃包被24 h,37℃封闭2 h;经该方法分析,D2Ag3原核表达抗原与DV2多克隆抗体反应的A450≥1.37,与其他20种多克隆抗体反应的A450均≤0.04,DV2多克隆抗体在40~20480倍稀释范围内,均可获得阳性检测结果。63份临床阳性样本A450>0.32,阴性样本A450<0.12,检测样本/阴性对照比值(sample/negative,S/N)>2.1。结论成功筛选鉴定了DV2型特异性抗原片段,初步建立了DV2 IgG抗体的ELISA检测方法,该方法具有良好的特异性及灵敏性,为DF的鉴别诊断提供了技术手段。 展开更多
关键词 登革病毒2型 型特异性抗原 原核表达 生物信息学方法 免疫吸附测定
复发性口腔溃疡患者肠道菌群与粪便炎性因子的相关性 认领
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作者 陈小艳 朱宏伟 +3 位作者 侯瑞丽 李志辉 路军 金木兰 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期595-604,共10页
目的探讨肠道微生物变化与复发性口腔溃疡(ROU)的相关性,进而确定肠道微生物变化是否是导致ROU的致病因素之一。方法选取8名经常发作ROU作为实验组(HR);14名健康志愿者作为对照组(HN)。对粪便进行宏基因组测序,同时用ELISA检测粪便中炎... 目的探讨肠道微生物变化与复发性口腔溃疡(ROU)的相关性,进而确定肠道微生物变化是否是导致ROU的致病因素之一。方法选取8名经常发作ROU作为实验组(HR);14名健康志愿者作为对照组(HN)。对粪便进行宏基因组测序,同时用ELISA检测粪便中炎症因子白细胞介素(IL)-10和IL-22。结果在门水平上,HR中厚壁菌门的丰度高于HN(P<0.05)。在属水平上,HN中Escherichia/Shigella和双歧杆菌的丰度高于HR(P<0.05)。HR组肠球菌的丰度高于HN组(P<0.05)。粪便中IL-10水平在HN、HR组中相似,两组间差异无统计学意义(P>0.05)。HR组IL-22水平高于HN组,两组间差异有统计学意义(P<0.05)。单因素Logistic回归分析显示IL-22是ROU的危险因素。多因素Logistic回归分析显示,双歧杆菌丰度可能是ROU的保护因素,粪便中IL-22可能是危险因素。结论ROU患者粪便中IL-22与肠道菌群之间存在相互作用,双歧杆菌属丰度显著降低及IL-22水平的升高参与了ROU的发生,且IL-22在ROU发生过程中促炎作用强于它自身及IL-10的抗炎作用,但具体作用机制有待于进一步研究。 展开更多
关键词 复发性口腔溃疡 肠道菌群 白细胞介素-10 白细胞介素-22 高通量测序 免疫吸附测定 成人
BioPlex 2200全自动免疫分析仪检测血清中抗双链DNA抗体的临床应用 认领
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作者 刘惠源 张伟 +4 位作者 魏雅稚 张允奇 扶忠超 尹志华 叶志中 《国际检验医学杂志》 CAS 2020年第10期1167-1170,共4页
目的分析比较BioPlex 2200全自动免疫分析仪和酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清中抗双链DNA(dsDNA)抗体的灵敏度、特异度及其优缺点。方法采用BioPlex 2200和ELISA检测101例纳入研究者的血清抗dsDNA抗体。纳入研究者中49例为临床确诊的... 目的分析比较BioPlex 2200全自动免疫分析仪和酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清中抗双链DNA(dsDNA)抗体的灵敏度、特异度及其优缺点。方法采用BioPlex 2200和ELISA检测101例纳入研究者的血清抗dsDNA抗体。纳入研究者中49例为临床确诊的系统性红斑狼疮患者,52例作为对照(包括32例其他结缔组织病患者和20例体检健康者)。结果BioPlex 2200检测抗dsDNA抗体的灵敏度为57.14%,特异度为94.23%;ELISA检测抗dsDNA抗体的灵敏度为53.06%,特异度为96.15%。两种方法总体符合率为95.05%,χ2检验分析,差异无统计学意义(χ2=78.69,P>0.05),Kappa值评价一致性较好(Kappa=0.880)。BioPlex 2200检测抗dsDNA抗体,3组抗dsDNA抗体水平比较,差异有统计学意义(F=61.52,P<0.05)。结论BioPlex 2200和ELISA检测血清抗dsDNA抗体结果有较好的一致性,检测迅速,值得临床推广应用。 展开更多
关键词 系统性红斑狼疮 抗双链DNA抗体 BioPlex 2200全自动免疫分析仪 免疫吸附测定
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应用于酶联免疫吸附测定的玻璃表面改性研究 认领
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作者 宋亚婷 陈景东 《化工新型材料》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期208-210,215,共4页
酶联免疫吸附测定(ELISA)已被广泛用于临床检测、生物、食品检测和环境监测等许多领域,以玻璃为材料微流控ELISA芯片和二氧化硅包覆的磁珠均需要进行表面处理,以提高对待测分子的吸附能力。利用3-氨丙基三甲氧基硅烷和戊二醛作为交联剂... 酶联免疫吸附测定(ELISA)已被广泛用于临床检测、生物、食品检测和环境监测等许多领域,以玻璃为材料微流控ELISA芯片和二氧化硅包覆的磁珠均需要进行表面处理,以提高对待测分子的吸附能力。利用3-氨丙基三甲氧基硅烷和戊二醛作为交联剂对玻璃表面进行了改性处理。ELISA产物的颜色和紫外-可见分光光度计的结果均表明,改性后的玻璃对生物分子的吸附能力得到很大提升,并且解决了改性-恢复-再改性的问题。最后通过X射线光电子能谱分析了玻璃改性前后的表面化学元素的变化。 展开更多
关键词 玻璃 表面改性 共价交 免疫吸附测定
极速实时荧光聚合酶链反应与常规方法对新型布尼亚病毒检测的评价 认领
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作者 刘靓雯 孙晔 +3 位作者 王丽 耿大影 冯照雷 苑广盈 《中华传染病杂志》 CAS CSCD 2020年第2期99-104,共6页
目的探讨极速实时荧光聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)、实时荧光PCR、酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)和胶体金免疫层析法(gold immunochromatography assay,GICA)4种方法检测新型布尼亚病毒... 目的探讨极速实时荧光聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)、实时荧光PCR、酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)和胶体金免疫层析法(gold immunochromatography assay,GICA)4种方法检测新型布尼亚病毒的特异度和灵敏度,为发热伴血小板减少综合征的早期诊断提供依据。方法采集2017年6月1日至9月30日山东大学附属济南市传染病医院86例临床诊断为发热伴血小板减少综合征患者的血清样本,分别应用极速实时荧光PCR、实时荧光PCR、ELISA和GICA 4种方法进行检测。统计学分析采用χ^2检验。结果86份患者血清标本中,极速实时荧光PCR、实时荧光PCR、IgM-ELISA、IgG-ELISA、IgM-GICA、IgG-GICA的新型布尼亚病毒阳性分别为82份(95.34%)、79份(91.86%)、41份(47.67%)、8份(9.3%)、19份(22.09%)和3份(3.49%)。极速实时荧光PCR特异度为100%,灵敏度达到1×103拷贝/mL,3次重复扩增试验显示其Ct值变异系数均<2%。在发热伴血小板减少综合征进展的1期、2期、3期病程中,极速实时荧光PCR的阳性检出率为41份(97.62%)、34份(94.44%)、7份(87.50%),实时荧光PCR的阳性检出率为39份(92.86%)、33份(91.67%)、7份(87.50%),在1期和2期两个病程,极速实时荧光PCR阳性检出率略高;IgM-ELISA阳性检出率从1期(28.57%)到3期(87.50%)显著增高,2期、3期与1期相比,差异均有统计学意义(χ^2=8.347、7.561,均P<0.01);IgM-GICA的阳性检出率从1期(14.29%)到2期(33.33%)也有增高,差异有统计学意义(χ^2=3.962,P<0.05),但与其他方法相比,其检出率偏低。1期,实时荧光PCR阳性检出率显著高于ELISA(IgM和IgG)和GICA(IgM和IgG),差异均有统计学意义(χ^2=33.740、55.080、49.010、64.340,均P<0.01)。2期,实时荧光PCR的阳性检出率高于ELISA(IgM和IgG)和GICA(IgM和IgG),差异均有统计学意义(χ^2=7.700、46.720、23.700、50.630,均P<0.01)。3期,极速实时荧光PCR、实时荧光PCR和IgM-ELISA表现出同样高的阳性检出率,� 展开更多
关键词 新型布尼亚病毒 免疫吸附测定 极速实时荧光聚合链反应 实时荧光聚合链反应 免疫胶体金
ELISA法检测血清中抗CNN2抗体的实验条件优化性探讨 认领
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作者 宋伟 刘玲珑 +2 位作者 王鹏飞 姚清媚 周素芳 《中国临床新医学》 2020年第5期462-466,共5页
目的探讨血清抗钙调节蛋白Calponin 2(CNN2)抗体的最适酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)实验条件。方法将BL21(DE3)p Lys S-pColdⅢ-C基因工程菌重组表达而分离纯化的CNN2包被至酶标板。采集肝细胞癌患者血... 目的探讨血清抗钙调节蛋白Calponin 2(CNN2)抗体的最适酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)实验条件。方法将BL21(DE3)p Lys S-pColdⅢ-C基因工程菌重组表达而分离纯化的CNN2包被至酶标板。采集肝细胞癌患者血清和正常人血清,探讨蛋白包被浓度、血清稀释液的选择、封闭方式及条件的选择、HRP标记亲和素稀释度的最适条件。结果CNN2蛋白浓度为10μg/ml时为最适蛋白包被浓度。0.5%胎牛血清蛋白(BSA)为最适封闭方式。使用PBST来稀释血清,成本低,效果好。亲和素的最适稀释比为1∶9000。最适实验条件的重复性良好。ROC曲线分析结果显示,最适实验条件下,该检测方法ROC曲线下面积(AUC)为0.978(95%CI:0.947~1.000,P=0.000);截断值为0.484,其对应的灵敏度为96.0%,特异度为93.0%。结论构建了检测血清抗CNN2抗体的最适ELISA实验条件。 展开更多
关键词 肝细胞癌 CALPONIN 2 免疫吸附测定
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支气管哮喘患儿25羟维生素D水平及其与总免疫球蛋白E的相关性研究 认领
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作者 沈广娥 花梅娟 《中国基层医药》 CAS 2020年第8期906-908,共3页
目的了解支气管哮喘患儿血清25羟维生素D水平,并分析其与总免疫球蛋白E(IgE)的关系。方法选取泰州第四人民医院儿科2013年10月至2014年9月门诊或住院治疗的支气管哮喘患儿48例为哮喘组,以同期在儿童保健门诊体检的健康儿童35例为对照组... 目的了解支气管哮喘患儿血清25羟维生素D水平,并分析其与总免疫球蛋白E(IgE)的关系。方法选取泰州第四人民医院儿科2013年10月至2014年9月门诊或住院治疗的支气管哮喘患儿48例为哮喘组,以同期在儿童保健门诊体检的健康儿童35例为对照组,比较两组血清25羟维生素D及总IgE水平,采用Pearson相关性分析分析25羟维生素D与总IgE的关系。结果哮喘组血清25羟维生素D为(35.86±14.31)nmol/L,明显低于对照组的(53.91±22.71)nmol/L,而IgE为(331.66±223.67)IU/mL,明显高于对照组的(99.33±86.50)IU/mL,差异均有统计学意义(t=4.32、2.36,均P<0.05);哮喘组患儿血清25羟维生素D与IgE呈负相关(r=-0.400,P<0.05)。结论支气管哮喘患儿25羟维生素D水平低于健康儿童,补充维生素D可能对预防和控制哮喘有一定的临床作用。 展开更多
关键词 哮喘 羟基胆骨化醇类 24 25-二羟维生素D3 免疫球蛋白E 质谱法 免疫吸附测定 儿童
安徽省淮南市无偿献血12295人梅毒感染状况分析 认领
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作者 周涛 胡晓玉 +3 位作者 吴学忠 王春阳 孙友岭 张慧 《中国基层医药》 CAS 2020年第14期1711-1715,共5页
目的了解安徽省淮南市12295人无偿献血者的梅毒感染现状,为公共卫生管理工作提供参考依据。方法收集淮南市中心血站2017年4月1日至2017年9月30日的无偿献血者12295人血标本,采用酶联免疫吸附测定法进行梅毒螺旋体(TP)抗体筛检,采用梅毒... 目的了解安徽省淮南市12295人无偿献血者的梅毒感染现状,为公共卫生管理工作提供参考依据。方法收集淮南市中心血站2017年4月1日至2017年9月30日的无偿献血者12295人血标本,采用酶联免疫吸附测定法进行梅毒螺旋体(TP)抗体筛检,采用梅毒螺旋体颗粒凝集试验(TPPA)对TP抗体筛检不合格献血者标本进行梅毒确认试验。结果淮南市12295人无偿献血者中TPPA阳性48人,TPPA阳性率为3.90‰(48/12295);男性献血者TPPA阳性率3.12‰(22/7048)、女性4.96‰(26/5247),差异无统计学意义(u=1.61,P>0.05);已婚献血者TPPA阳性率5.33‰(42/7884)、未婚2.01‰(6/2989),差异有统计学意义(u=2.33,P<0.05);不同文化程度献血者TPPA阳性率差异有统计学意义(χ^2=29.94,P<0.05),而不同血型献血者TPPA阳性率差异无统计学意义(χ^2=2.24,P>0.05)。结论安徽省淮南市无偿献血者中,不同婚姻状况、不同文化程度者TPPA阳性率存在明显差异。 展开更多
关键词 梅毒血清诊断 抗体 免疫吸附测定 血库 献血者 淮南
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