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止血胶对应激性溃疡的防护作用 预览
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作者 樊晴伶 高会军 +1 位作者 张静瑜 王景杰 《山西医科大学学报》 CAS 2019年第1期20-24,共5页
目的观察止血胶对应激性溃疡的治疗作用并探讨其作用机制。方法30只成年雄性SD大鼠随机分为5组:正常对照组、大平台组、应激组、止血胶组,铝镁加组,每组6只。连续使用小站台水环境法制备应激性溃疡模型。待造模及药物处理结束后,按照Gut... 目的观察止血胶对应激性溃疡的治疗作用并探讨其作用机制。方法30只成年雄性SD大鼠随机分为5组:正常对照组、大平台组、应激组、止血胶组,铝镁加组,每组6只。连续使用小站台水环境法制备应激性溃疡模型。待造模及药物处理结束后,按照Guth标准测定溃疡指数;HE染色法观察胃黏膜损伤;ELISA法检测血清EGF、IL-2、PAF水平;免疫荧光法检测胃黏膜VCL、FAK表达。结果与正常对照组及大平台组相比,单纯应激组大鼠的UI明显增加,EGF、IL-2升高,PAF表达降低,胃黏膜VCL、FAK蛋白表达显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与单纯应激组相比,止血胶组和铝镁加组UI明显降低,血清EGF及IL-2表达显著降低,PAF表达升高,胃黏膜VCL、FAK蛋白表达显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论止血胶对胃黏膜具有很好的保护作用,其机制可能与血清EGF、IL-2、PAF水平变化及稳定细胞连接相关蛋白VCL和FAK有关。 展开更多
关键词 应激性溃疡 黏着斑蛋白 黏着斑激酶
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Pyk2与肿瘤关系的研究进展 预览
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作者 王站 张玉石 《基础医学与临床》 CSCD 2019年第4期585-588,共4页
富含脯氨酸蛋白酪氨酸激酶(Pyk2)是黏着斑激酶家族中的一员。Pyk2参与包括乳腺癌、肝癌在内的多种肿瘤的发生、浸润及转移,并且与肿瘤的预后密切相关。明确Pyk2在肿瘤发生发展中的作用,能为新的抗癌靶向药物的研发提供理论基础。
关键词 富含脯氨酸蛋白酪氨酸激酶 黏着斑激酶 肿瘤
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丹参对高血压肥大心肌细胞中黏着斑激酶表达的影响 预览
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作者 林常青 吕小飞 +3 位作者 林俊红 赖锦斌 徐力堃 邹燕敦 《国际医药卫生导报》 2019年第7期1010-1014,共5页
目的分析丹参对高血压肥大心肌细胞中黏着斑激酶(FAK)表达的影响,探讨丹参抑制心肌肥大的可能机制.方法通过免疫荧光标记、共聚焦显微镜及Western blot等方法,检测WKY(WKY组)、自发性高血压大鼠(SHHR-A组)、丹参干预组(SHHR-B)和卡托普... 目的分析丹参对高血压肥大心肌细胞中黏着斑激酶(FAK)表达的影响,探讨丹参抑制心肌肥大的可能机制.方法通过免疫荧光标记、共聚焦显微镜及Western blot等方法,检测WKY(WKY组)、自发性高血压大鼠(SHHR-A组)、丹参干预组(SHHR-B)和卡托普利干预组(SHHR-C)心肌细胞中FAK的表达及其分布.结果与WKY大鼠相比,FAK在心肌细胞中总蛋白、细胞膜蛋白、细胞核蛋白表达明显增加(均P< 0.01),而细胞质蛋白变化无统计学意义(P>0.05).SHHR-B组与SHHR-A组相比,FAK在SHHR-B大鼠中总蛋白、细胞膜蛋白、细胞核蛋白的表达均减少(均P<0.01),而细胞质蛋白保持不变(P>0.05).共聚焦显微镜观察发现FAK在SHHR大鼠细胞膜聚集明显,而丹参能减少FAK在细胞膜和细胞核的分布.结论丹参能抑制FAK在心肌细胞中总蛋白、细胞膜蛋白、细胞核蛋白的表达,减少FAK在细胞膜、细胞核中聚集,抑制心肌肥厚. 展开更多
关键词 黏着斑激酶 高血压 心肌肥大 丹参
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Mansonone F对人宫颈癌细胞增殖、凋亡、侵袭及迁移的影响 预览
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作者 晁晶 齐翌婷 《山东医药》 CAS 2019年第5期33-36,共4页
目的观察Mansonone F对人宫颈癌Hela细胞体外增殖、凋亡、侵袭和迁移能力的影响,并探讨其作用机制。方法取对数生长期的Hela细胞,分别加入2.5、5、10μmol/L Mansonone F培养。采用MTT法测算细胞增殖抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡率,Tr... 目的观察Mansonone F对人宫颈癌Hela细胞体外增殖、凋亡、侵袭和迁移能力的影响,并探讨其作用机制。方法取对数生长期的Hela细胞,分别加入2.5、5、10μmol/L Mansonone F培养。采用MTT法测算细胞增殖抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡率,Transwell小室实验观察细胞侵袭能力和细胞迁移能力,RT-PCR法检测细胞黏着斑激酶(FAK)mRNA表达,Western blotting法检测FAK、磷酸化黏着斑激酶(p-FAK)蛋白表达。结果Mansonone F作用Hela细胞24、48、72 h后,随着药物浓度的增加和作用时间的延长,细胞增殖抑制率均升高(P均<0.05)。随着药物浓度的增加,细胞早期凋亡率、晚期凋亡率均逐渐升高,10μmol/L浓度下的细胞凋亡率高于其他各浓度(P均<0.01)。随着药物浓度的增加,侵袭实验和迁移实验的穿膜细胞数目逐渐减少,10μmol/L浓度下的穿膜细胞数最少(P<0.01);以2.5、5、10μmol/L Mansonone F作用Hela细胞24 h后,随着药物浓度的升高,细胞FAK mRNA及蛋白、p-FAK蛋白表达均降低,10μmol/L作用下的细胞FAK mRNA及蛋白、p-FAK蛋白表达最低(P均<0.01)。结论Mansonone F可显著抑制Hela细胞的增殖、诱导细胞凋亡,抑制细胞侵袭和迁移,其机制可能与抑制FAK表达、下调FAK的磷酸化水平有关。 展开更多
关键词 宫颈癌 MansononeF HELA细胞 细胞增殖 细胞凋亡 细胞侵袭 细胞迁移 黏着斑激酶
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RNA干扰黏着斑激酶表达对宫颈癌细胞增殖、侵袭、迁移能力、细胞凋亡及Caspase-3相对表达量的影响 预览
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作者 刘宁宁 冯蓓 +1 位作者 段伟 李红霞 《广西医学》 CAS 2019年第10期1268-1271,1280共5页
目的 探讨RNA干扰黏着斑激酶(FAK)表达对宫颈癌细胞增殖、侵袭、迁移能力、细胞凋亡及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase-3)相对表达量的影响。方法 将宫颈癌HeLa细胞株分为观察组、阴性对照组和空白对照组,观察组和阴性对照组分别转染RN... 目的 探讨RNA干扰黏着斑激酶(FAK)表达对宫颈癌细胞增殖、侵袭、迁移能力、细胞凋亡及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase-3)相对表达量的影响。方法 将宫颈癌HeLa细胞株分为观察组、阴性对照组和空白对照组,观察组和阴性对照组分别转染RNA干扰FAK质粒和空白载体质粒,空白对照组不进行任何处理。比较3组的细胞增殖活性、凋亡指数、侵袭穿透指数和迁移指数,以及Caspase-3与FAK蛋白的相对表达量。结果 观察组的细胞增殖活性、侵袭穿透指数、细胞迁移指数均低于空白对照组和阴性对照组,细胞凋亡指数高于空白对照组和阴性对照组(均P<0.05),但空白对照组和阴性对照组的上述指标比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。观察组的Caspase-3相对表达量高于阴性对照组与空白对照组,FAK蛋白相对表达量低于阴性对照组与空白对照组。结论 RNA干扰FAK表达可抑制宫颈癌细胞增殖、侵袭及迁移能力,促进细胞凋亡和Caspase-3蛋白的表达。 展开更多
关键词 宫颈癌 RNA干扰 黏着斑激酶 细胞侵袭 细胞迁移 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3表达量
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β2GPⅠ/抗β2GPⅠ抗体复合物抑制oxLDL介导的THP-1巨噬细胞脂质蓄积和FAK活化 预览
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作者 何超 周红 +6 位作者 张贵婷 陈芋丹 张鹏 王韧 吴倩倩 姚雨叶 匡铭 《临床检验杂志》 CAS 2019年第6期401-406,共6页
目的探讨β2糖蛋白Ⅰ/抗β2糖蛋白Ⅰ抗体复合物(β2/aβ2)对氧化低密度脂蛋白(oxLDL)介导的THP-1巨噬细胞脂质蓄积和黏着斑激酶(FAK)活化的影响,以及Toll样受体4(TLR4)在该过程中的作用。[HTH]方法用PMA(100 ng/mL)将THP-1细胞诱导为TH... 目的探讨β2糖蛋白Ⅰ/抗β2糖蛋白Ⅰ抗体复合物(β2/aβ2)对氧化低密度脂蛋白(oxLDL)介导的THP-1巨噬细胞脂质蓄积和黏着斑激酶(FAK)活化的影响,以及Toll样受体4(TLR4)在该过程中的作用。[HTH]方法用PMA(100 ng/mL)将THP-1细胞诱导为THP-1巨噬细胞。用RPMI 1640培养液、oxLDL、oxLDL+β2/aβ2和oxLDL+脂多糖(LPS)处理THP-1巨噬细胞,利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测脂质转运相关分子 ACAT1、ABCA1和ABCG1 的mRNA水平;利用Trinder法检测THP-1巨噬细胞内总胆固醇(TC)、游离胆固醇(FC)含量,并计算胆固醇酯(CE)含量和其占TC的比例;利用免疫荧光和实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测FAK的蛋白质和mRNA表达并采用western blot检测其磷酸化;最后,利用TLR4阻断剂TAK-242( 1 μg/mL )预处理的方式,观察TLR4对上述过程的影响。结果β2/aβ2复合物能够抑制oxLDL引起的THP-1巨噬细胞脂质蓄积和FAK表达与磷酸化,阻断TLR4可以部分逆转这一现象。[HTH]结论β2/aβ2可以抑制oxLDL引起的巨噬细胞的脂质蓄积和FAK活化,该过程与TLR4有关。 展开更多
关键词 β2GPⅠ/抗β2GPⅠ抗体复合物 氧化低密度脂蛋白 Toll样受体4 脂质转运 黏着斑激酶 THP-1巨噬细胞
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体外受精-胚胎移植对早期胎盘黏着斑激酶信号通路的影响 预览
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作者 赵亮 孙丽芳 +7 位作者 郑秀丽 刘静芳 郑蓉 王颖 杨蕊 张蕾 于丽 张晗 《北京大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期151-158,共8页
目的:研究辅助生殖中体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization and embryo transfer,IVF-ET)技术对早期胎盘滋养层细胞黏着斑激酶(focal adhension kinase,FAK)信号通路基因表达的影响,探讨IVF-ET技术对早期胎盘发育和功能的影响。方... 目的:研究辅助生殖中体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization and embryo transfer,IVF-ET)技术对早期胎盘滋养层细胞黏着斑激酶(focal adhension kinase,FAK)信号通路基因表达的影响,探讨IVF-ET技术对早期胎盘发育和功能的影响。方法:收集IVF-ET来源的于7~8周经超声引导下减胎获得的胎盘绒毛组织作为研究组,对照组采用自然妊娠双胎7~8周人工流产术中获得的胎盘绒毛组织。利用美国Affymetrix HG-U133 Plus 2.0基因芯片对两组胎盘绒毛组织进行芯片杂交分析,实时定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,qRT-PCR)验证其中8个差异表达基因,选取差异表达基因进行无监督聚类分析和生物信息学分析。结果:获得4例IVF-ET减胎绒毛组织和4例自然妊娠人工流产绒毛组织进行基因芯片检测。与自然妊娠组相比,IVF-ET组FAK信号通路中有32个基因差异表达,差异表达倍数≥2,其中12个基因上调,20个基因下调。经qRT-PCR验证,IVF-ET与自然妊娠早期胎盘绒毛中的8个FAK信号通路基因表达确实存在差异,与基因芯片检测结果一致。FAK信号通路基因定位显示,IVF-ET来源胎盘绒毛组织FAK信号通路上游基因表达受到影响,胎盘滋养层细胞通过基因表达代偿维持FAK信号通路功能基本正常。结论:IVF-ET来源和自然妊娠来源的早期胎盘FAK信号通路存在基因表达差异,差异表达基因涉及多种FAK信号通路关键功能,影响IVF-ET胎盘绒毛早期发育和功能,同时胎盘滋养层细胞通过改变相关基因表达来代偿IVF-ET技术本身的干扰,以维持FAK信号通路正常功能,满足胎盘绒毛和胎儿发育需要。 展开更多
关键词 受精 体外 胚胎移植 滋养层 黏着斑激酶 基因表达
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桩蛋白表达对裸鼠肝癌细胞增殖的影响 预览
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作者 金雯 王波 +1 位作者 杨梅 曹立宇 《新乡医学院学报》 CAS 2019年第3期224-227,233共5页
目的探讨裸鼠体内桩蛋白(PXN)表达对肝癌细胞增殖的影响。方法将24只裸鼠随机分为对照组、短发夹RNA(shRNA) PXN阴性对照组和shRNA PXN组,每组8只。3组裸鼠背部分别植入正常SMMC-7721细胞、转染shRNA PXN空质粒的SMMC-7721细胞和转染shR... 目的探讨裸鼠体内桩蛋白(PXN)表达对肝癌细胞增殖的影响。方法将24只裸鼠随机分为对照组、短发夹RNA(shRNA) PXN阴性对照组和shRNA PXN组,每组8只。3组裸鼠背部分别植入正常SMMC-7721细胞、转染shRNA PXN空质粒的SMMC-7721细胞和转染shRNA PXN的SMMC-7721细胞,观察3组裸鼠体内肿瘤的生长状况;于7周末采血并处死裸鼠,切取肿瘤组织称质量,并用甲醛固定、石蜡包埋。采用免疫组织化学法检测3组裸鼠肿瘤组织中PXN、黏着斑激酶(FAK)蛋白表达,反转录聚合酶链反应检测3组裸鼠肿瘤组织中PXN、FAK mRNA表达,酶联免疫吸附试验法检测3组裸鼠血清PXN、FAK水平。结果 shRNA PXN组裸鼠肿瘤质量低于对照组和shRNAPXN阴性对照组(P <0. 05),对照组与shRNA PXN阴性对照组裸鼠肿瘤质量比较差异无统计学意义(P> 0. 05)。shRNA PXN组肿瘤组织中PXN和FAK蛋白表达显著低于对照组和shRNA PXN阴性对照组(P <0. 05),对照组与shRNA PXN阴性对照组肿瘤组织中PXN和FAK蛋白表达比较差异均无统计学意义(P> 0. 05)。shRNA PXN组裸鼠肿瘤组织中PXN和FAK mRNA表达显著低于对照组和shRNA PXN阴性对照组(P <0. 05),对照组与shRNA PXN阴性对照组裸鼠肿瘤组织中PXN和FAK mRNA表达比较差异均无统计学意义(P> 0. 05)。shRNA PXN组裸鼠血清PXN和FAK水平显著低于对照组和shRNA PXN阴性对照组(P <0. 05),对照组与shRNA PXN阴性对照组裸鼠血清PXN和FAK水平比较差异均无统计学意义(P> 0. 05)。结论下调PXN表达可以抑制裸鼠肝癌细胞的增长,FAK表达量随PXN的下调而减少,联合检测PXN和FAK的表达有望成为肝癌防控的新靶点。 展开更多
关键词 桩蛋白 基因下调 肝细胞癌 黏着斑激酶
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华蟾酥毒基通过调控基质金属蛋白酶抑制食管癌细胞侵袭转移的作用
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作者 邓旭 盛杰霞 +2 位作者 王佳宝 代二庆 邓全军 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期133-136,共4页
目的研究华蟾酥毒基对食管癌细胞侵袭转移的影响。方法分别将食管癌EC-109和Kyse-150细胞分为4组:对照组和3个浓度实验组。对照组加入含有溶媒(0.1%DMSO)的培养基,低、中、高3个浓度实验组给予25,50,100 nmol·L^-1华蟾酥毒基,处理... 目的研究华蟾酥毒基对食管癌细胞侵袭转移的影响。方法分别将食管癌EC-109和Kyse-150细胞分为4组:对照组和3个浓度实验组。对照组加入含有溶媒(0.1%DMSO)的培养基,低、中、高3个浓度实验组给予25,50,100 nmol·L^-1华蟾酥毒基,处理1 d。用划痕实验和Transwell小室法检测各组细胞迁移水平和侵袭能力,用免疫印迹实验检测细胞中磷酸化黏着斑激酶Tyr397[p-FAK(Tyr397)]、P53、人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(PTEN)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)的蛋白表达情况,用实时荧光定量PCR检测各组细胞中上述指标mRNA的相对表达水平。结果EC-109细胞:以25~100 nmol·L^-1的华蟾酥毒基处理1 d后,实验组划痕愈合面积约为(9.96±1.17)%~(5.02±0.92)%,侵袭细胞数约为(162.33±12.01)~(42.33±12.50)个;与对照组的(23.80±1.32)%和(254.33±14.01)个相比,差异均有统计学意义(均P<0.01)。低、中、高3个浓度实验组的MMP-2蛋白表达水平分别为0.74±0.04,0.54±0.06和0.44±0.05。中、高2个浓度实验组的MMP-9蛋白表达分别为0.69±0.08,0.52±0.04;这2组的p-FAK(Tyr397)的表达水平分别为0.90±0.08,0.62±0.06;这2组的P53蛋白表达水平分别为1.20±0.06,2.86±0.05;这2组的PTEN蛋白表达水平分别为1.31±0.06,1.53±0.05,与对照组的(1.00±0.00)比较,差异均有统计学意义(均P<0.01);在同样的处理条件下,实验组上述指标的mRNA的表达变化与蛋白表达趋势相同。Kyse-150细胞:迁移和侵袭能力的改变以及各指标的表达变化与EC-109细胞趋势相同。结论华蟾酥毒基可能通过上调P53和PTEN表达,下调FAK的磷酸化及其下游分子MMP-2和MMP-9的表达,进而抑制食管癌细胞的迁移和侵袭。 展开更多
关键词 华蟾酥毒基 食管癌 侵袭 迁移 基质金属蛋白酶 黏着斑激酶
黏着斑激酶介导信号通路在瓣膜性心房颤动心房纤维化中的研究
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作者 张培德 李飞 +1 位作者 乔恩 王巍 《中国胸心血管外科临床杂志》 CAS CSCD 2019年第4期379-384,共6页
目的探索黏着斑激酶(FAK)在瓣膜性心房颤动(房颤)患者纤维化心房中的变化,并对其介导的下游信号通路进行探究。方法共有45例二尖瓣疾病患者纳入本次研究,根据有无房颤分为瓣膜房颤组(VAF,≥6个月,25例)和窦性心律组(SR,20例)。术中获取... 目的探索黏着斑激酶(FAK)在瓣膜性心房颤动(房颤)患者纤维化心房中的变化,并对其介导的下游信号通路进行探究。方法共有45例二尖瓣疾病患者纳入本次研究,根据有无房颤分为瓣膜房颤组(VAF,≥6个月,25例)和窦性心律组(SR,20例)。术中获取心耳组织,分别进行组织学病理检测和蛋白免疫印迹。观察心房纤维化程度、 FAK及其下游通路在纤维化心肌中的变化。结果本研究揭示了瓣膜性房颤心房纤维化程度较高,细胞排列紊乱。通过探究FAK及下游通路的变化,发现房颤组成纤维细胞分化标志蛋白α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达明显升高,FAK及下游AKT/S6K通路蛋白表达均发生上调,而另一条信号通路ERK1/2信号通路未见明显变化。结论瓣膜性房颤心房纤维化是心房结构重塑的一个重要标志,胶原纤维的过度产生使心房肌细胞的连续性受到破坏,导致传导异常,为房颤发生发展提供了基质环境。FAK及下游AKT/S6K信号通路在纤维化心肌中表达增加,可能参与心房纤维化进程之中,为其机制研究提供依据。 展开更多
关键词 瓣膜性房颤 心房纤维化 黏着斑激酶 信号通路
川芎嗪对人肝癌细胞钙激活中性蛋白酶-2、黏着斑激酶及迁移侵袭能力的影响 预览
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作者 王宁 刘振华 +2 位作者 王飞清 李克跃 潘娅 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2019年第8期1960-1963,共4页
目的探讨川芎嗪(TMP)对人肝癌细胞钙激活中性蛋白酶(Calpain)-2、黏着斑激酶(FAK)及迁移侵袭能力的影响,以了解其抑制肝癌的机制。方法将人肝癌细胞(MHCC97-H)分为对照组和TMP组,TMP组予以TMP 1.0 mg/ml干预24 h,采用Western印迹检测两... 目的探讨川芎嗪(TMP)对人肝癌细胞钙激活中性蛋白酶(Calpain)-2、黏着斑激酶(FAK)及迁移侵袭能力的影响,以了解其抑制肝癌的机制。方法将人肝癌细胞(MHCC97-H)分为对照组和TMP组,TMP组予以TMP 1.0 mg/ml干预24 h,采用Western印迹检测两组Calpain-2、FAK蛋白表达情况,划痕实验、Transwell实验检测MHCC97-H迁移、侵袭能力。结果与对照组比较,TMP组Calpain-2、FAK蛋白表达均明显下调(P<0.05);其迁移率、穿膜细胞数及吸光度值均明显下降(P<0.05)。结论下调肝癌细胞系(MHCC97-H)的Calpain-2、FAK水平可能是TMP抗肝癌作用机制之一。 展开更多
关键词 川芎嗪 肝癌细胞 钙激活中性蛋白酶-2 黏着斑激酶
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β-咔啉类生物碱抑制SGC-7901细胞迁移和侵袭的机制研究
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作者 席涛 夏欢 +2 位作者 樊玉祥 曹永成 张洪亮 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期119-124,共6页
该研究主要探索β-咔啉类生物碱抑制SGC-7901细胞迁移和侵袭的机制与黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)基因表达的相关性。采用CCK-8法测定不同浓度条件下β-咔啉类生物碱对胃癌SGC-7901细胞的增殖抑制率;并通过Transwell小室测定... 该研究主要探索β-咔啉类生物碱抑制SGC-7901细胞迁移和侵袭的机制与黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)基因表达的相关性。采用CCK-8法测定不同浓度条件下β-咔啉类生物碱对胃癌SGC-7901细胞的增殖抑制率;并通过Transwell小室测定β-咔啉类生物碱对SGC-7901细胞迁移与侵袭能力的影响;qRT-PCR及Western blot技术检测FAK基因mRNA及蛋白的表达差异。然后将si-FAK-1051重组质粒转染到SGC-7901细胞中,再次采用qRT-PCR及Western blot技术鉴定FAK基因沉默效果,最后采用同样的方法检测FAK基因沉默对胃癌SGC-7901细胞增殖和迁移的影响。随着β-咔啉类生物碱浓度增加,人胃癌SGC-7901细胞增殖抑制率逐渐升高,IC50=13.364 mg·L-1;阳性对照组(5-FU,5 mg·L-1)和β-咔啉类生物碱组中Transwell小室内SGC-7901细胞均可见显著减少(P<0.01),且β-咔啉类生物碱组SGC-7901细胞数目较阳性对照组明显降低(P<0.01);阳性对照组、β-咔啉类生物碱实验组FAK基因mRNA及蛋白表达水平较空白对照组显著降低(P<0.05)。si-FAK-1051转染入胃癌SGC-7901细胞后,FAK基因的mRNA及蛋白表达被明显下调(P<0.05),细胞增殖和细胞迁移能力也显著降低(P<0.05)。β-咔啉类生物碱较5-FU具有更有效的抑制胃癌SGC-7901细胞迁移与侵袭能力,而该机制可能与β-咔啉类生物碱抑制FAK基因mRNA及蛋白表达水平有关。 展开更多
关键词 β-咔啉类生物碱 胃癌SGC-7901细胞 黏着斑激酶
黏着斑激酶抑制剂TAE226对人口腔鳞癌细胞增殖的影响 预览
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作者 廖鹏程 刘萍 +2 位作者 曾琴 邹湘渝 聂敏海 《重庆医学》 CAS 2019年第5期760-764,共5页
目的研究黏着斑激酶抑制剂TAE226对口腔鳞癌HSC-3细胞增殖能力的影响,为临床治疗提供参考。方法(1)采用CCK-8法检测不同浓度的TAE226(1、5、10、20μmol/L)作用细胞12、24、36、48、60、72h后的光密度(OD)值,计算不同浓度的TAE226在不... 目的研究黏着斑激酶抑制剂TAE226对口腔鳞癌HSC-3细胞增殖能力的影响,为临床治疗提供参考。方法(1)采用CCK-8法检测不同浓度的TAE226(1、5、10、20μmol/L)作用细胞12、24、36、48、60、72h后的光密度(OD)值,计算不同浓度的TAE226在不同时间对该细胞增殖的抑制率;(2)采用流式细胞术检测不同浓度的TAE226对口腔鳞癌细胞周期和凋亡的影响;(3)采用SPSS17.0软件对数据进行统计学分析。结果(1)CCK-8法增殖实验结果:与对照组相比,不同浓度的TAE226作用于人口腔鳞癌HSC-3细胞株后,均对细胞增殖有抑制作用(P<0.05)。当TAE226的浓度为1、5μmol/L时,在12h时细胞增殖抑制率与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),但是随着时间的延长,差异有统计学意义(P<0.05)。随着TAE226浓度的逐渐升高,其对口腔鳞癌HSC-3细胞增殖的抑制作用逐渐增强(P<0.05)。(2)流式细胞术结果:TAE226可以促进口腔鳞癌细胞的凋亡,且与细胞的浓度呈正相关。TAE226可以将HSC-3细胞周期阻滞于G2期。结论TAE226可以有效地抑制HSC-3细胞增殖,促进细胞的凋亡,阻滞细胞周期于G2期。 展开更多
关键词 人口腔鳞状细胞癌 黏着斑激酶 TAE226 增殖 凋亡 细胞周期
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小分子干扰RNA沉默黏着斑激酶基因对人宫颈癌Hela细胞生物学特征的影响 预览 被引量:4
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作者 余俊 刘彤鸥 李晓兰 《新乡医学院学报》 CAS 2018年第4期266-271,共6页
目的 探讨小分子干扰RNA(siRNA)沉默黏着斑激酶(FAK)基因对人宫颈癌Hela细胞生物学特征的影响。方法 培养人宫颈癌Hela细胞,根据转染物的不同分为siRNA-FAK组、siRNA-阴性对照组和空白对照组,实时荧光定量聚合酶链反应技术检测细胞中FA... 目的 探讨小分子干扰RNA(siRNA)沉默黏着斑激酶(FAK)基因对人宫颈癌Hela细胞生物学特征的影响。方法 培养人宫颈癌Hela细胞,根据转染物的不同分为siRNA-FAK组、siRNA-阴性对照组和空白对照组,实时荧光定量聚合酶链反应技术检测细胞中FAK基因表达,噻唑蓝法检测细胞增殖能力,Transwell法检测细胞迁移和侵袭能力,Western blot法检测各组细胞中FAK、RAF原癌基因丝氨酸/苏氨酸激酶-1(Raf-1)、磷酸化-Raf-1(p-Raf-1)、丝裂原活化蛋白激酶1/2(MEK1/2)、磷酸化-MEF1/2(p-MEK1/2)、细胞外信号调节激酶(ERK)和磷酸化-ERK(p-ERK)蛋白表达。结果 空白对照组、siRNA-阴性对照组、siRNA-FAK组细胞中FAK mRNA相对表达量、细胞凋亡率、细胞迁移细胞数、侵袭细胞数、FAK、Raf-1、p-Raf-1、MEK1/2、p-MEK1/2、ERK和p-ERK蛋白相对表达量及细胞增殖能力比较差异均有统计学意义(P<0.05)。空白对照组与siRNA-阴性对照组细胞中FAK mRNA的相对表达量、细胞增殖能力、细胞凋亡率、迁移细胞数、侵袭细胞数以及FAK、Raf-1、p-Raf-1、MEK1/2、p-MEK1/2、ERK和p-ERK蛋白表达比较差异均无统计学意义(P>0.05);siRNA-FAK组细胞中FAK mRNA相对表达量、细胞增殖能力、迁移细胞数、侵袭细胞数以及FAK、p-Raf-1、p-MEK1/2、p-ERK蛋白相对表达量均显著低于空白对照组和siRNA-阴性对照组(P<0.05),细胞凋亡率及Raf-1、MEK1/2和ERK蛋白相对表达量均显著高于空白对照组和siRNA-阴性对照组(P<0.05)。结论 特异性抑制人宫颈癌Hela细胞中FAK基因可减少细胞增殖,促进细胞凋亡,抑制细胞迁移和侵袭,其机制可能与抑制Raf/MEK/ERK信号通路有关。 展开更多
关键词 宫颈癌 黏着斑激酶 小分子干扰RNA 丝氨酸/苏氨酸激酶/丝裂原活化蛋白激酶/细胞外信号调节激酶 信号通路
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0.4mT工频磁场对人羊膜成纤维细胞迁移的影响 预览
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作者 杨帆 刘合 +3 位作者 齐红新 张杰 夏若虹 王向晖 《辐射研究与辐射工艺学报》 CAS CSCD 2018年第3期8-19,共12页
探讨了0.4 m T工频磁场(Power frequency magnetic field,PFMF)暴露影响人羊膜成纤维(Human amniotic epithelial,FL)细胞迁移的分子机制。利用免疫荧光染色和western blotting方法检测了磁场暴露对FL细胞内黏着斑调控蛋白黏着斑激... 探讨了0.4 m T工频磁场(Power frequency magnetic field,PFMF)暴露影响人羊膜成纤维(Human amniotic epithelial,FL)细胞迁移的分子机制。利用免疫荧光染色和western blotting方法检测了磁场暴露对FL细胞内黏着斑调控蛋白黏着斑激酶(Focal adhesion kinase,FAK)、桩蛋白(Paxillin)的分布、含量和部分关键活性蛋白的影响;通过细胞划痕实验,验证了磁场通过激活FAK从而激活细胞的迁移反应。结果表明:相较于对照组,PFMF暴露导致黏着斑总数量上升,并诱导信号蛋白FAK与桩蛋白更集中地分布在细胞边缘处,导致桩蛋白的总含量增加;FAK蛋白总含量无显著性变化,但其Y397磷酸化水平明显上调;用PD153035(PD)抑制表皮生长因子受体(Epidermal growth factor receptor,EGFR)的活性,或用FAK Inhibitor 14(FI)抑制Y397-FAK磷酸化,PFMF或表皮生长因子(Epidermal growth factor,EGF)引起的上述现象均消失;细胞划痕实验结果显示,PFMF促进了细胞的迁移,但当Y397-FAK被FI抑制后,PFMF对细胞迁移的促进效果几乎全部消失;PFMF引发的这些变化均与EGFR的配体EGF对细胞迁移产生的效果类似。0.4 m T工频磁场通过激活EGFR而激活黏着斑信号通路中的FAK、桩蛋白,调控黏着斑的形成与分布,在细胞前端协助片状伪足的延展,从而诱发细胞迁移。 展开更多
关键词 工频磁场 黏着斑 细胞迁移 表皮生长因子受体 黏着斑激酶 桩蛋白
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针刀对膝骨关节炎兔软骨细胞磷酸化黏着斑激酶、磷酯酰肌醇-3激酶、聚集蛋白聚糖基因及蛋白表达的影响
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作者 刘乃刚 于佳妮 +2 位作者 胡波 郭妍 郭长青 《针刺研究》 CSCD 北大核心 2018年第4期221-225,共5页
目的:观察针刀对膝骨关节炎(KOA)兔关节软骨磷酸化黏着斑激酶(p-FAK)、磷酸化磷酯酰肌醇-3激酶(p-PI 3K)、聚集蛋白聚糖(Aggrecan)基因和蛋白表达的影响,探讨针刀干预促进软骨细胞修复的可能力学转导通路。方法:新西兰大白兔... 目的:观察针刀对膝骨关节炎(KOA)兔关节软骨磷酸化黏着斑激酶(p-FAK)、磷酸化磷酯酰肌醇-3激酶(p-PI 3K)、聚集蛋白聚糖(Aggrecan)基因和蛋白表达的影响,探讨针刀干预促进软骨细胞修复的可能力学转导通路。方法:新西兰大白兔随机分为正常组、模型组、模型抑制剂组、针刀组、针刀抑制剂组、电针组、电针抑制剂组,每组7只。采用改良Videman左后肢伸直位固定制动法复制KOA模型。电针组、电针抑制剂组电针左侧"梁门""血海""内膝眼""外膝眼",每周3次,治疗4周。针刀组、针刀抑制剂组分别采用针刀治疗,每周2次,治疗4周。采用Real-time PCR法和Western blot法检测各组家兔膝关节软骨p-FAK、p-PI 3K、Aggrecan基因和蛋白表达水平。结果:与正常组相比,模型组p-FAK、p-PI 3K mRNA和蛋白表达水平明显升高(P〈0.05,P〈0.01),Aggrecan mRNA和蛋白表达水平明显下降(P〈0.01)。与模型组比较,电针组p-FAK、p-PI 3K、Aggrecan蛋白表达水平明显升高(P〈0.05,P〈0.01),针刀组p-FAK、p-PI 3K、Aggrecan mRNA和蛋白表达水平均明显升高(P〈0.05,P〈0.01)。与电针组相比,针刀组p-FAK蛋白及p-PI 3K、Aggrecan mRNA和蛋白表达水平均明显升高(P〈0.05,P〈0.01)。与相同干预方法组相比,模型抑制剂组(除p-PI 3KmRNA外)、电针抑制剂组、针刀抑制剂组p-FAK、p-PI 3K、Aggrecan mRNA和蛋白表达水平均明显下降(P〈0.05,P〈0.01)。结论:FAK-PI 3K信号通路在针刀干预后关节软骨的修复过程中起到了重要的介导作用。 展开更多
关键词 膝骨关节炎 针刀 电针 黏着斑激酶 磷酯酰肌醇-3激酶 聚集蛋白聚糖
健脾补土组方对体外神经元缺氧损伤后的凋亡情况及INT、ILK、FAK表达的影响
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作者 李花 陈昱文 +6 位作者 刘旺华 周小青 郑彩杏 金梦 范元硕 李诚均 颜艳艳 《中华中医药学刊》 北大核心 2018年第3期538-542,I0004-I0006共8页
目的:观察健脾补土组方对新生SD鼠神经元体外培养缺氧造模后的凋亡情况以及INT、ILK、FAK表达的影响,探讨其减少神经元凋亡的作用机制。方法:原代分离培养新生SD鼠神经元,接种于六孔板中,并分为正常血清对照组、正常血清+低氧组、低... 目的:观察健脾补土组方对新生SD鼠神经元体外培养缺氧造模后的凋亡情况以及INT、ILK、FAK表达的影响,探讨其减少神经元凋亡的作用机制。方法:原代分离培养新生SD鼠神经元,接种于六孔板中,并分为正常血清对照组、正常血清+低氧组、低氧+正常血清+神经生长因子组、低氧+健脾补土组方含药血清组、低氧+健脾补土组方含药血清+整合素抗体组。将标本放入37℃三气培养箱中,诱导24 h后,恢复正常条件培养4h。用流式细胞术检测检测神经元凋亡,RT-qPCR法检测INT、ILK、FAK mRNA的表达,用免疫细胞化学法和Western blot法检测INT、ILK、FAK蛋白的表达。结果:与正常对照组比较,其余各组神经元凋亡率均显著增加(P〈0.01),INT、ILK、FAK mRNA及蛋白表达显著减少(P〈0.01);与低氧模型组比较,健脾补土组INT、ILK、FAK mRNA及蛋白表达显著增强(P〈0.01)。结论:健脾补土组方能够减少缺氧损伤后神经元细胞凋亡,其作用机制可能与其通过上调INT、ILK、FAK表达有关。 展开更多
关键词 健脾补土 神经元 凋亡 整合素 整合素连接激酶 黏着斑激酶
压力过负荷大鼠心肌肥厚组织中PTEN/FAK的表达
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作者 周菲 张敬文 《中国热带医学》 CAS 2018年第5期434-437,共4页
目的观察磷酸酶-张力蛋白同源物(phosphase and tension homology deleted on chromosome 10,PTEN)及黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)在腹主动脉缩窄大鼠左心室肌中的表达,以探讨PTEN及FAK在压力过负荷性心肌肥厚发生发展过... 目的观察磷酸酶-张力蛋白同源物(phosphase and tension homology deleted on chromosome 10,PTEN)及黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)在腹主动脉缩窄大鼠左心室肌中的表达,以探讨PTEN及FAK在压力过负荷性心肌肥厚发生发展过程中的作用。方法采用腹主动脉缩窄术制备压力过负荷心肌肥厚动物模型,于术后4周测量左心室质量指数(LVMI),并用逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)检测心肌肥厚相关基因心房钠尿因子(ANF)的m RNA含量,应用免疫组化方法,观察和检测大鼠PTEN蛋白及FAK蛋白表达在左心室心肌细胞中的变化。结果模型组和假手术的LVMI、ANF m RNA相对含量和FAK蛋白表达分别为3.46±0.20和2.73±0.15、0.93±0.16和0.63±0.12、126.45±2.78和77.64±5.74,模型组均明显增高,差异有统计学意义(P〈0.05);模型组和假手术的PTEN蛋白表达分别为87.14±6.11和120.60±4.22,模型组低于假手术组,差异有统计学意义(P〈0.05);FAK蛋白的表达与LVMI呈正相关(r=0.877,P〈0.01),与PTEN蛋白的表达呈负相关(r=-0.952,P〈0.01);PTEN蛋白的表达与LVMI呈负相关(r=-0.825,P〈0.01)。结论PTEN/FAK通路在压力过负荷性心肌肥厚发生发展过程中发挥了重要调控作用。 展开更多
关键词 磷酸酶-张力蛋白同源物 黏着斑激酶 心肌肥厚
Capn4通过黏着斑激酶磷酸化激活核转录因子-κB信号调控人肾癌细胞增殖
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作者 庄乾锋 沈杰 +6 位作者 王恺 钱曦 范敏 王坤 陆皓 徐仁芳 何小舟 《中华实验外科杂志》 CSCD 北大核心 2018年第10期1905-1907,共3页
目的探讨钙蛋白酶小亚基1(Capn4)的表达对肾透明细胞癌(ccRCC)增殖、迁移、侵袭的影响及其分子作用机制。方法选取Capn4高表达ccRCC细胞株786-0和低表达的Caki-1细胞株,采用慢病毒转染技术构建Capn4稳定低表达的786-0细胞株(786-0... 目的探讨钙蛋白酶小亚基1(Capn4)的表达对肾透明细胞癌(ccRCC)增殖、迁移、侵袭的影响及其分子作用机制。方法选取Capn4高表达ccRCC细胞株786-0和低表达的Caki-1细胞株,采用慢病毒转染技术构建Capn4稳定低表达的786-0细胞株(786-0-shCapn4)和稳定过表达Capn4的Caki-1细胞株(Caki-1-Capn4),通过荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)验证Capn4在转染肾细胞癌(RCC)细胞株中的表达。通过细胞增殖实验、划痕实验及Transwell实验观察Capn4对肾癌细胞增殖、侵袭迁移能力的影响。通过Westernblot法验证黏着斑激酶(FAK)、磷酸化FAK、核转录因子-κB(NF-κB)和磷酸化NF-κB的表达。结果细胞计数试剂盒(CCK-8)结果显示,Capn4过表达后细胞增殖能力过表达组高于对照组(P=0.010),而转染Capn4短发卡RNA(shRNA)后细胞增殖能力下调组低于对照组(P=0.010);划痕实验结果表明,24hCakil-Capn4细胞的迁移距离过表达组高于对照组(P=0.001),786-O-shCapn4细胞的迁移距离下调组低于对照组(P=0.001);Transwell结果表明,24hCakil-Capn4细胞的侵袭细胞数量过表达组高于对照组(P=0.001),786-0-shCapn4细胞的迁移距离下调组低于对照组(P=0.001);Westernblot结果显示:Cakil-Capn4组FAK及NF-κB磷酸化水平较各自对照组上调(P=0.010),而786-0-shCapn4组FAK及NF-κB磷酸化水平较各自对照组下调(P=0.010);FAK特异性抑制剂(PF573228)或者NF-κB抑制剂QNZ均可抑制由Capn4过表达引起的癌细胞生长速度的增加。结论Capn4通过激活FAK和下游信号通路,从而激活NF-κB,进而促进RCC细胞生长。 展开更多
关键词 肾细胞癌 钙蛋白酶小亚基1 黏着斑激酶 核因子活化B细胞K轻链增强子
FAK调节胃癌、肝癌细胞恶性行为及相关基因表达的体外研究 预览
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作者 程思楠 马妮 +6 位作者 肖丽 何慧敏 杨倩 黎金媚 侯依凡 刘政 侯颖春 《陕西师范大学学报:自然科学版》 CSCD 北大核心 2018年第2期74-80,87共8页
以siRNA技术对人胃癌细胞(SGC7901)和肝癌细胞(SMMC7721)的FAK表达进行抑制以后,通过MTT、损伤修复、Transwell、流式细胞仪、激光共聚焦和电子显微镜等方法对这些细胞的细胞行为的变化进行了研究。同时,以RT—PCR、Westernblot... 以siRNA技术对人胃癌细胞(SGC7901)和肝癌细胞(SMMC7721)的FAK表达进行抑制以后,通过MTT、损伤修复、Transwell、流式细胞仪、激光共聚焦和电子显微镜等方法对这些细胞的细胞行为的变化进行了研究。同时,以RT—PCR、Westernblot、细胞免疫荧光法检测下调FAK表达对Src、Ras、Apexl、Rgnef的表达的影响。结果发现,FAK基因表达被抑制后两种癌细胞运动能力明显降低,细胞增殖力显著下降,Src、Ras、Apexl、Rgnef的mRNA表达水平以及蛋白质的表达水平也明显被抑制。结果表明,在癌细胞的转移、侵袭等过程中FAK有着非常重要的促进作用,而且FAK可以促进Src、Ras、Apexl、Rgnef的表达,这可能有助于基于复杂信号网络理解FAK在肿瘤发生、发展过程中作用。 展开更多
关键词 黏着斑激酶 胃癌 肝癌 细胞恶性行为 基因功能
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